CN1230120A

CN1230120A - 一种抑制信号-传导蛋白和glgf(pdz/dhr)区域之间相互作用的化合物及其应用

Info

Publication number: CN1230120A
Application number: CN97197769A
Authority: CN
Inventors: 塔卡－阿克·萨托; 朱恩·柳-萨瓦
Original assignee: Columbia University in the City of New York
Current assignee: Columbia University in the City of New York
Priority date: 1996-07-22
Filing date: 1997-07-18
Publication date: 1999-09-29
Anticipated expiration: 2017-07-18
Also published as: CA2260742A1; KR20000029469A; EP0935467A4; AU4042497A; AU735287B2; US6911526B2; US20020058607A1; KR100565819B1; JP2001505540A; EP0935467A1; WO1998005347A1; CN1155402C; AU735287C

Abstract

本发明提供了一种组合物,它能够抑制信号传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合。本发明也提供了一种鉴定一种能够抑制信号传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合的化合物。本发明也提供了一种抑制癌细胞增殖的方法。本发明也提供了用一种化合物以可有效使细胞凋亡的量治疗癌症的方法。本发明也提供了一种抑制病毒感染的细胞繁殖的方法。本发明还提供了一种用一种化合物以可有效使细胞凋亡的量治疗病毒感染患者的方法。本发明也提供了药物组合物。

Description

一种抑制信号-传导蛋白和GLGF(PDZ/DHR) 区域之间相互作用的化合物及其应用

本发明是得到美国政府的支持，由美国卫生与人类事业局的国立卫生研究所(NIH)提供资助。基金号为：RO1GM55147-01。因此，美国政府在此发明中拥有特定权利。背景

在本申请全文中，各种出版物引证了其作者和年代，其全部引文是按字母顺序列于本申请专利说明书的结尾，紧靠在所列的序列和权利要求之前。这些文献的全部内容引入本申请，以便于更全面地叙述在本文所述的发明完成时普通技术人员已知的现有技术。

Fas(APO-1/CD95)和它的配体被认为是凋亡(apoptosis)中重要的信号中介体(Itoh，et al.1991)，Fas(Apo-1/CD95)的结构组织形式提示它是肿瘤坏死因子受体超家族中的一个成员，该超家族还包括p75神经生长因子受体(NGFR)(Johnson，et al.1986)，T-细胞-活性标记CD27(Camerini，et al..1991)，何杰金-淋巴瘤-相关抗原CD30(Smith，et al.1993)，人类B细胞抗原CD40(Stamenkovic，etal..1989)，T细胞抗原OX40(Mallett，et al.1990).Fas以及它的配体的遗传突变均与小鼠的淋巴组织增殖失调和自身免疫失调有关(Watanabe-Fukunaga，et al.1992；Takahashi，et al.1994)。而且，当T-细胞感染人类免疫缺陷病毒(HIV)时，Fas表达水平改变被认为是诱导凋亡(Westendorp，et al.1995)。用酵母双杂交和生化方法已鉴定出几种Fas-相互作用的信号传导分子，如Fas-结合的磷酸酶-1(FAP-1)(图1)(Sato，et al.1995)，FADD/MORT1/CAP-1/CAP-2(Chinnaiyan，et al.1995；Boldin，etal.1995；Kischkel，et al.1995) 和RIP(Stanger，et al.1995)。除了FAP-1以外，所有分子都与Fas功能性细胞死亡区域有关，当细胞转染了这些蛋白质时，还与FADD/MORT1或RIP过量表达诱导凋亡有关。相反，FAP-1是唯一的与Fas的负调控区(C-端15氨基酸)有关(Ito，et al.1993)，并且抑制Fas-诱导的凋亡的蛋白质。

FAP-1(PTPN13)有几种替换的剪接形式与PTP-BAS/hPTPlE/PTPL1一致(Maekawa，et al.1994；Banville，et al. 1994；Saras，etal.1994)。并含有一个膜结合区，它与在细胞骨架相关蛋白，ezrin(Gould et al.1989)，radixin(Funayama et al.1991)，moesin(Lankes，et al.1991)，II型神经纤维瘤基因产物(NFII)(Rouleau，et al.1993)，和4.1蛋白(Conboy，et al.1991)，以及在PTP酶PTPH1(Yang，et al.1991)，PTP-MEG(Gu，et al.1991)，和PTPD1(Vogel，et al.1993)中发现的相似。FAP-1包括了令人感兴趣6个GLGF(PDZ/DHR)重复，被认为在蛋白区域中介导分子内和分子间的相互作用。FAP-1的第三个GLGF重复首先被确认为与Fas受体的C-端具有特异的相互作用区域(Sato，et al.1995).提示了GLGF区在将这些蛋白定位于亚膜细胞骨架和/或调节生化活性上起着重要作用。GLGF重复最初是在鸟苷酸激酶和大鼠的后突触密度蛋白中(PSD-95)(Cho，et al.1992)发现的，与果蝇肿瘤抑制蛋白，Lethal-(1)-disc-large-1〔dlg-1〕同源，(Woods，et al.1991；Kitamura，etal.1994)。这些重复可以介导同源和异源二聚化，此二聚化能强烈地影响PTP酶的活性、影响与Fas结合、和/或FAP-1同其他信号传导蛋白的相互作用。最近，报道了这些蛋白的不同PDZ区域与离子通道和其他蛋白C-端的相互作用(图1)(表1)(Kornau，et al.1995；Kim，etal.1995；Matsumine，et al.1996)。

表1.与PDZ区域相互作用的蛋白蛋白 C-端序列相关蛋白参考文献Fas(APO-1/CD95) SLV FAP-1 2NMDA受体 SDV PSD95 3NR2亚单位Shaker-型K+通道 TDV PSD95&DLG 4APC TEV DLG 5发明概述

本发明提供了一个组合物，它能够抑制一种信号-传导蛋白和一种含有(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)(SEQ ID NO：1号)氨基酸序列的胞浆蛋白间特异结合。而且，该胞浆蛋白可认包括(K/R/Q)-Xn-(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列(SEQ ID NO：2号)，其中，“X”代表任何一种从一组包含20种天然存在的氨基酸中选择出来的氨基酸，“n”代表大于等于2小于等于4。在一个优选实施方案，该氨基酸序列是SLGI(SEQ ID NO：3号)。此外，本发明提供了该信号-传导蛋白的羧基端含有(S/T)-X-(V/I/L)(SEQ ID NO：4号)氨基酸序列的一种组合物，其中，每个“-”代表一个肽键，每个括号包含了可相互替换的氨基酸，括号内每个斜线分开的氨基酸是可以相互替换的，“X”代表任何一种从一组包含20种天然存在的氨基酸中选择出来的氨基酸。

本发明也提供一种鉴定化合物的方法，该化合物能够抑制信号-传导蛋白和含有(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列的胞浆蛋白间的特异结合。此外，本发明提供了一个鉴定化合物的方法，该化合物能够抑制羧基端含有(S/T)-X-(V/L/I)氨基酸序列的信号-传导蛋白和胞浆蛋白间的特异结合。

本发明也提供了一个抑制癌细胞增殖的方法，特别是，所述癌细胞来自包括：结肠、肝脏、乳腺、卵巢、睾丸、肺、胃、脾、肾、前列腺、子宫、皮肤、头部、胸腺和颈部的器官，或这些细胞来自T-细胞或B-细胞。

本发明提供了一种对患者以可有效使所述细胞发生凋亡的量的组合物治疗癌症的方法，特别是，癌细胞来源于以下器官，包括：胸腺、结肠、肝脏、乳腺、卵巢、睾丸、肺、胃、脾、肾、前列腺、子宫、皮肤、头部、和颈部，或来自T-细胞或B-细胞。

本发明提供了一种抑制病毒感染细胞增殖的方法，特别是，病毒性感染的细胞是被B型肝炎病毒、EB病毒、流感病毒、乳头瘤病毒、腺病毒、人类T-细胞亲淋巴性病毒、I型或HIV感染的。

本发明也提供一种药用性组合物，该组合物包含能抑制信号-传导蛋白和胞浆蛋白间的特异结合的组合物。

本发明也提供一种药用性组合物，包含被鉴定为能抑制信号-传导蛋白和胞浆蛋白间的特异结合的化合物。附图简要说明

图1.Fas-结合的磷酸蛋白酶-1的图，表明有6个GLGF(PDZ/DHR)区重复；与其他蛋白和含有GLGF(PDZ/DHR)重复的蛋白的膜结合位点进行相似性比较。

图2A，2B，2C和2D。Fas C端与FAP-1结合所需的最小区域图谱。右侧的数字代表每个单独的克隆(图2C和2D)。

2A 用酵母双杂交系统筛选随机肽基因文库的策略。

2B 人类(SEQ ID NO：5号)，大鼠(SEQ ID NO：6号)，和小鼠(SEQ ID NO：7号)Fas C端15个氨基酸的排列。

2C 筛选半随机肽基因文库的结果。顶上一排表示人类和大鼠固定同源的氨基酸。破折号线表示未改变的氨基酸。

2D 筛选随机肽文库的结果(分别为：

SEQ ID NO：8号， SEQ ID NO：9号， SEQ ID NO：10号，

SEQ ID NO：11号， SEQ ID NO：12号， SEQ ID NO：13号，

SEQ ID NO：14号， SEQ ID NO：15号， SEQ ID NO：16号，

SEQ ID NO：17号，)

3A，3B和3C.Fas/FAP-1体外结合的抑制试验

3A 使用Fas C端15个氨基酸对Fas/FAP-1结合的抑制试验。GST-Fas融合蛋白(191-355)用于体外结合试验(1，3-10泳道)。GST-Fas融合蛋白(191-320)(2泳道)和1mM人类PAMP(肾上腺髓质素原的N-端20个氨基酸，分子量2460.9)(3泳道)作为阴性对照。加入的C-端15个氨基酸浓度是1μM(4泳道)，3μM(5泳道)，10μM(6泳道)，30μM(7泳道)，100μM(8泳道)，300μM(9泳道)，1000μM(10泳道)。

3B 使用相应于Fas的C-末端15个氨基酸的肽进行的Fas/FAP-1结合抑制试验。在这个抑制试验中所有的合成肽都被乙酰化(分别为，SEQ ID NO：4号，SEQ ID NO：18号，SEQ ID NO：19号，SEQ ID NO：20号，SEQ ID NO：21号，SEQ ID NO：22号，SEQ ID NO：23号)。

3C 将三肽中的一种替换后，对Fas/FAP-1结合的抑制效应。

图4A，4B，4C和4D。

4A 在酵母中，Fas C-端3个氨基酸与FAP-1的相互作用。

4B 在体外，Fas C-端3个氨基酸与FAP-1的相互作用。

4C 天然的Fas和GST-FAP-1的免疫沉淀反应。

4D Fas/FAP-1与Ac-SLV或Ac-SLY结合的抑制作用。

图5A，5B，5C，5D，5E和5F。通过微注射将Ac-SLV导入DLD-1细胞系中。三角形表示是可被微注射Ac-SLV的细胞系并表现出可以鉴定的染色质凝集。另一方面，当微注射Ac-SLY后，这个视野内仅有一个细胞出现凋亡。

5A相差显微镜显示在500ng/ml CH11存在下微注射Ac-SLY的细胞的范例。

5B相差显微镜显示在500ng/ml CH11存在下微注射Ac-SLV的细胞的范例。

5C FITC染色显示在500ng/ml CH11存在下微注射Ac-SLY的细胞的范例。

5D FITC染色显示在500ng/ml CH11存在下微注射Ac-SLV的细胞的范例。

5E Hoechst 33342 DNA荧光染色显示在500ng/ml CH11存在下微注射Ac-SLV的细胞的范例。

5F Hoechst 33342 DNA荧光染色显示在500ng/ml CH11存在下微注射Ac-SLY的细胞的范例。

图6 在微注射DLD-1的细胞中，细胞凋亡的定量测定。

图7A，7B，7C，7D，7E，7F，7G，和7H。

7A 人类神经生长因子受体的氨基酸序列(序列I，D，24号)。

7B 人类CD4受体的氨基酸序列(序列I，D，25号)。

7C Fas-结合的磷酸蛋白酶-1和神经生长因子受体C-端(NGFR)(p75)的相互作用。

7D 人类结肠直肠突变癌蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO：26号)。

7E α型蛋白激酶C的氨基酸序列。

7F 5-羟色胺2A受体的氨基酸序列(SEQ ID NO：27号)。

7G 5-羟色胺2B受体的氨基酸序列(SEQ ID NO：28号)。

7H 腺上皮结肠息肉瘤蛋白的氨基酸序列(I.D.29号)。

图8 p75 NGFR(低-亲和性神经生长因子受体)的结构特征。

图9 Fas C-末端和p75 NGFR的比较。

图10 ³⁵S-标记的FAP-1与各种以GST融合蛋白形式表达的受体在体外的相互作用。该GST融合蛋白是固定在谷胱苷肽-琼脂糖凝胶珠上，与体外转录的，³⁵S-标记的FAP-1蛋白一起孵育。洗过珠以后，通过SDS-PAGE和放射自显影分析保留的FAP-1蛋白。

图11A和11B。³⁵S-标记的FAP-1与GST-p75缺失突变在体外的相互作用。

11A表明含有p75和p75缺失突变的胞浆区的GST融合蛋白图解。右侧所描绘的是FAP-1与具有各种p75缺失突变的GST融合蛋白的结合，根据(11B)的数据。

11B体外转录的³⁵S-标记FAP-1蛋白与固定在谷胱苷肽-琼脂糖凝胶珠上的各种GST融合蛋白的相互作用。洗过珠以后，用SDS-PAGE和放射自显影方法分析保留FAP-1蛋白。

图12 p75 NGFR的LexA-C-端胞浆区和VP16-FAP-1之间的结合。酵母株是通过转化构建的，并检测克隆的生长。+/-表示在His^-板上克隆生长的情况发明的详细说明

在本发明中，所用的氨基酸残基缩写如下：A，Ala；C，Cys；D，Asp；E，Glu；F，Phe；G，Gly；H，His；I，Ile；K，Lys；L，Leu；M，Met；N，Asn；P，Pro；Q，Gln；R，Arg；S，Ser；T，Thr；V，Val；W，Trp；和Y，Tyr.

为了便于了解以下的实验材料，常规的方法和/或专业术语，请参阅Sambrook，et al.1989。

本发明提供了一种组合物，它能够抑制一种信号-传导蛋白和含有(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列的胞浆蛋白间的特异结合，其中，每个″-″代表一个肽键，每个括号内包括可相互替换的氨基酸，括号内每个斜线分开的氨基酸是可以替换的。此外，该胞浆蛋白可以含(K/R/Q)-Xn-(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列，其中，″X″代表任何一种氨基酸，该氨基酸是从一组包含20种天然存在的氨基酸中选择出来的，″n″代表大于等于2小于等于4。特别是，在一优选实施方案中，该胞浆蛋白含SLGI的氨基酸序列。

(K/R/Q)-Xn-(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列在现有技术中也被称作“GLGF(PDZ/DHR)氨基酸区域”。如本申请中所用的“GLGF(PDZ/DHR)氨基酸区域”意思是指(K/R/Q)-Xn-(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列。

在一优选实施方案中，该信号-传导蛋白在羧基端有(S/T)-X-(V/I/L)氨基酸序列，其中，每个″-″代表一个肽键，每个括号内包括可相互替换的氨基酸，括号里的每一个斜线分开的氨基酸是可以相互替换的。其中，″X″代表任何一种氨基酸，该氨基酸是从一组包含20种天然存在的氨基酸中选择出来的。

本发明的组合物可以是，不仅限于，抗体，无机化合物，有机化合物，肽，模拟肽化合物，多肽或蛋白，共有一些或全部特性的片段或衍生物，如，融合蛋白。该组合物可以是天然存在的并通过纯化得到，或非天然存在通过合成得到的。

特别是，该组合物可以是含有(S/T)-X-(V/I/L)-COOH序列的肽，其中，每个″-″代表一个肽键，每个括号内包括可相互替换的氨基酸，括号里的每一个斜线分开的氨基酸是可以替换的。″X″代表任何一种氨基酸，该氨基酸是从一组包含20种天然存在的氨基酸中选择出来的。在一优选实施方案中，该肽包括下列序列之一：DSENSNFRNEIQSLV，RNEIQSLV，NEIQSLV，EIQSLV，IQSLV，QSLV，SLV，IPPDSEDGNEEQSLV，DSEMYNFRSQLASVV，IDLASEFLFLSNSFL，PPTCSQANSGRISTL，SDSNMNMNELSEV，QNFRTYIVSFV，RETIESTV，RGFISSLV，TIQSVI，ESLV。更优选的实施方案是一种有机化合物，它含有Ac-SLV-COOH序列，其中，Ac代表一个乙酰基，每个“-”代表一个肽键。

下文中提供了本发明的一个例子。乙酰化肽可以在改进的ChemTechACT357仪器上，按以前发表的程序以类推的方法自动合成。每个循环用Wang树脂，所有的氨基酸用N^α-Fmoc保护，然后是20％六氢吡啶/DMF，偶联是用DIC/HOBt，随后用HBTU/DIEA完成。最后的氨基酸偶联上后，在树脂上延伸的肽用Ac₂O/DMF乙酰化。用HPLC纯化乙酰化的肽，通过FAB-MS和¹H-NMR鉴定其特征。

而且，本领域普通技术人员通晓上述与非-乙酰基，例如，氨基，偶联的合成肽的构建方法。

本发明也提供了一种组合物，它能抑制羧基端带有(S/T)-X-(V/I/L)氨基酸序列的信号-传导蛋白和一种胞浆蛋白间特异结合，其中，每个″-″代表一个肽键，每个括号内包括可相互替换的氨基酸，括号内的每个斜线将可相互替代的氨基酸分开，″X″代表任何一种氨基酸，该氨基酸是从一组包含20种天然存在的氨基酸中选择出来的。

本发明的组合物包括抗体，无机化合物，有机化合物，肽，模拟肽化合物，多肽或蛋白，共有一些或全部特性的片段或衍生物，例如，融合蛋白。

本发明也提供一种鉴定一种化合物的方法，该化合物能抑制一种信号-传导蛋白和含有(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列的胞浆蛋白间的特异结合，其中，每个″-″代表一个肽键，每个括号内包括可相互替换的氨基酸，括号里的每个斜线分开的氨基酸是可以替换的。该方法包括：(a)在允许一种已知的化合物，该化合物曾经显示能替换结合了胞浆蛋白的信号-传导蛋白，和被结合胞浆蛋白形成复合物的条件下，将已结合了信号-传导蛋白的胞浆蛋白与各种化合物接触；和(b)检测步骤(a)中被替换的信号-传导蛋白或形成的复合物，其中，替换作用表示这种化合物能抑制信号-传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合。

抑制信号-传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合可以影响报告基因的转录活性。

此外，在步骤(b)中，通过比较在步骤(a)中连接化合物前后报告基因的转录活性来鉴定替换的胞浆蛋白或复合物。这种活性的改变表明信号-传导蛋白和胞浆蛋白间特异结合受抑制以及信号-传导蛋白被替换。

正如本文中所用的“报告基因的转录活性”表示当信号-传导蛋白和胞浆蛋白结合时，报告基因的表达可在观察到的水平上改变。人们也可以通过检测基于信号-传导蛋白和胞浆蛋白之间结合的其他生物功能来鉴定这种化合物。报告基因的例子很多而且技术上是众所周知，包括但不仅限于，组氨酸抗性基因，氨苄青霉素抗性基因，β-半乳糖苷酶基因。

另外，胞浆蛋白是可以结合在固相支持物上。这种化合物也可以结合在固相支持物上并包括一种抗体，一种无机化合物，一种有机化合物，一种肽，一种模拟肽化合物，一种多肽或蛋白。

下面提供一个方法的例子。人们可以用直接鉴定的方法去确认一种化合物，该化合物能抑制信号-传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合，如该胞浆蛋白与结合了一种可检测标记的化合物之间的免疫-沉淀。此外，可以使用非直接检测方法，该方法检测基因表达水平的提高或减少。正如下面所讨论的，人们能构建融合到LexA DNA结合区的合成肽。这些构建物被转化到L40-细胞株的带有报告基因的适当细胞系中。然后可以通过检测报告基因的表达水平检测抑制是否发生。为了检测报告基因的表达水平，技术上熟练的人能应用各种熟知的方法，例如，用酵母、哺乳类或其他细胞中的双杂交系统。

另外，步骤(a)中的接触可以在体外、体内，具体地说是在适当的细胞中，如，酵母细胞或哺乳动物细胞中进行。哺乳动物细胞包括，不仅限于，小鼠成纤维细胞NIH3T3，CHO细胞，HeLa细胞，Ltk^-细胞，Cos细胞等。

其他合适的细胞包括，但不仅限于，原核或真核细胞，如，细菌细胞(包括革兰氏阳性细胞)，真菌细胞，昆虫细胞，或其他动物细胞。

此外，信号-传导蛋白可以是一个细胞表面受体，信号传导蛋白，或肿瘤抑制蛋白。特别是，该细胞表面蛋白是Fas受体，可以在下列细胞中表达，该细胞来源于下列器官，但不仅限于，胸腺，肝脏，肾脏，结肠，卵巢，乳腺，睾丸，脾，肺，胃，前列腺，子宫，皮肤，头部和颈部，或在包含T-细胞和B-细胞的细胞中表达。在一优选实施方案中，T-细胞是Jurkat T-细胞。

另外，细胞表面受体可以是CD4受体，p75受体，5-羟色胺2A受体，或5-羟色胺2B受体。

此外，该信号传导蛋白可以是α-型蛋白激酶C。

另外，肿瘤抑制蛋白可以是腺上皮结肠息肉瘤抑制蛋白或结肠直肠突变癌蛋白。

此外，该胞浆蛋白包含SLGI氨基酸序列，特别是，Fas-结合的磷酸酶-1。

本发明也提供一种鉴定一种化合物的方法，该化合物能抑制羧基端带有(S/T)-X-(V/I/L)氨基酸序列的信号-传导蛋白和一种胞浆蛋白之间的特异结合，其中，每个″-″代表一个肽键，每个括号内包括可相互替换的氨基酸，括号里的每个斜线分开的氨基酸是可以替换的。″X″代表任何一种氨基酸，该氨基酸是从一组包含20种天然存在的氨基酸中选出来的。该方法包括(a)在允许一种已知的化合物，该化合物曾经显示能替换结合了信号-传导蛋白的胞浆蛋白和被结合的信号-传导蛋白形成复合物的条件下，将已结合了胞浆蛋白的信号-传导蛋白与各种化合物接触；和(b)鉴定步骤(a)中被替换的胞浆蛋白或形成的复合物。其中，替换表示这种化合物能抑制信号-传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合。

抑制信号-传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合可以影响报告基因的转录活性。此外，在步骤(b)中，通过比较在步骤(a)中接触化合物前后报告基因的转录活性来鉴定被替换的信号-传导蛋白或复合物，其中，活性的改变表明信号-传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合受抑制和胞浆蛋白被替换。

另外，在步骤(b)中，通过比较在步骤(a)中接触化合物前后报告基因的转录活性来鉴定被替换的胞浆蛋白或复合物，其中，活性的改变表示信号-传导蛋白和胞浆蛋白间特异结合受到抑制和信号-传导蛋白被替换。

正如本文中所用的“报告基因的转录活性”表示当信号-传导蛋白和胞浆蛋白结合时，报告基因的表达可在观察到的水平上改变。人们也可以通过检测基于信号-传导蛋白和胞浆蛋白的结合的其他生物功能来鉴定这种化合物。报告基因的例子很多而且技术上是众所周知，包括，但不仅限于，组氨酸抗性基因，氨苄青霉素抗性基因，β-半乳糖苷酶基因。

另外，胞浆蛋白是可以结合在固相支持物上，或这种化合物也可以结合在固相支持物上，包括一种抗体，一种无机化合物，一种有机化合物，一种肽，一种模拟肽化合物，一种多肽或蛋白。

下面提供一个方法的例子。人们可以用直接鉴定的方法去确认一种化合物，该化合物能抑制信号-传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合，如该胞浆蛋白和结合了一种可检测标记的该化合物的免疫-沉淀反应。此外，人们也可用非直接鉴定方法，该方法检测基因表达水平的增加或减少。正如下面所讨论的，人们能构建融合到LexA DNA结合区的合成肽。这些构建物被转化到L40-株的带有报告基因的适当细胞系。然后，人们通过检测报告基因的表达水平来鉴定是否发生抑制。在本技术中应用各种不同众所周知的方法，例如，用酵母双杂交系统检测报告基因的表达水平。

另外，步骤(a)中的接触可以在体外或体内进行，具体地说是在酵母细胞或哺乳动物细胞中进行。哺乳动物细胞包括，不仅限于，小鼠成纤维细胞NIH3T3，CHO细胞，HeLa细胞，Ltk^-细胞，Cos细胞等。

此外，信号传导蛋白可以是α-型蛋白激酶C。

此外胞浆蛋白包含SLGI氨基酸序列，特别是，Fas-结合的磷酸酶-1。

本发明也提供一种这些细胞的抑制癌细胞增殖的方法，特别是所述癌细胞来源于，但不限于，胸腺，肝脏，肾脏，结肠，卵巢，乳腺，睾丸，脾脏，胃，前列腺，子宫，皮肤，头部和颈部，或这种癌细胞来源于包含T-细胞和B-细胞的细胞。

本发明提供一种包含用上述方法鉴定的化合物的抑制癌细胞增殖的方法，其中，癌细胞来源于以下器官，但不仅限于此，胸腺，肝脏，肾脏，结肠，卵巢，乳腺，睾丸，脾脏，胃，前列腺，子宫，皮肤，头部和颈部，或癌细胞来源于包含T-细胞和B-细胞的细胞。

本发明也提供一种治疗癌症的方法，包括向患者的癌细胞中导入以上描述的，能有效引起细胞凋亡的组合物。其中，癌细胞来源于下列器官，但不仅限于此，胸腺，肝脏，肾脏，结肠，卵巢，乳腺，睾丸，脾脏，胃，前列腺，子宫，皮肤，头部和颈部，或癌细胞来源于包含T-细胞和B-细胞的细胞。

在本文中所用的，“凋亡”为细胞程序死亡。细胞程序死亡的机制和效应不同于细胞溶解。凋亡的一些可观察的效应是：DNA片段化和分解成称之谓凋亡小体的小的膜结合片段。

鉴定组合物是否能有效地诱导细胞凋亡的方法在技术上是众所周知的。一种方法是用相差或荧光显微镜判断染色质形态学变化。

本发明也提供一种抑制病毒感染细胞增殖的方法，包含上面描述的组合物或上述方法鉴定出的化合物，其中，所述病毒感染的细胞包括B型肝炎病毒，EB病毒，流感病毒，乳头瘤病毒，腺病毒，人类T-细胞亲淋巴性病毒，1型或HIV感染的细胞。

本发明也提供了一种治疗病毒-感染患者的方法。包含向患者被病毒感染的细胞中导入以上描述的，能有效诱导细胞凋亡的组合物或以上描述的权利要求27中的方法鉴定的化合物。其中，病毒感染细胞包含B型肝炎病毒，EB病毒，流感病毒，乳头瘤病毒，腺病毒，人类T-细胞亲淋巴性病毒，1型或HIV感染的细胞。

鉴定组合物是否有效抑制细胞凋亡的方法在技术上是众所周知的。一个方法是用相差或荧光显微镜来判断染色质的形态学的变化。

本发明提供了一种药物性组合物，包含有效剂量和在一个合适药物性载体的上述的组合物。

本发明也提供一种药物性组合物，包含有效剂量的上述方法鉴定出的化合物和一种药学可接受的载体。

本发明进一步提供一种组合物，它能特异结合羧基端含有(S/T)-X-(V/L/I)氨基酸序列的信号-传导蛋白，其中，每个″-″代表一个肽键，每一个括号内包括了可以相互替换的氨基酸，括号里的每一个斜线分开的氨基酸是可以替换的，″X″代表任何一种氨基酸，该氨基酸是从一组包含20种天然存在的氨基酸中选择出来的。这种组合物可以包括(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列，其中，每个″-″代表一个肽键，每个括号内包括可相互替换的氨基酸，括号里的每一个斜线分开的氨基酸是可以替换的。在一优选实施方案中，该组合物包括(K/R/Q)-Xn-(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列。其中，″X″代表任何一种氨基酸，该氨基酸是从一组包含20种天然存在的氨基酸中选择出来的。“n”代表大于等于2小于等于4。在另一优选实施方案中，该组合物包括SLGI氨基酸序列。

本发明进一步提供了一种鉴定化合物的方法，该化合物能结合羧基端含(S/T)-X-(V/L/I)氨基酸序列的信号-传导蛋白，其中，每个″-″代表一个肽键，每个括号内包括可相互替换的氨基酸，括号里的每一个斜线分开的氨基酸是可以替换的，″X″代表任何一种氨基酸，该氨基酸是从一组包含20种天然存在的氨基酸中选择出来的。该方法包含(a)，在允许与一种已知的化合物，该化合物曾显示能结合信号-传导蛋白并形成一个复合物，结合的条件下，将信号-传导蛋白与多种化合物接触；和(b)，检测步骤(a)中形成的复合物，以鉴别能与该信号-传导蛋白结合的化合物。特别是，被鉴定的化合物包括(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列。在又一优选实施方案中，被鉴定的化合物包括SLGI氨基酸序列。

此外，以上描述的方法中，该信号-传导蛋白可以结合在一个固相支持物上。该化合物也可以结合在一个固相支持物上，包含抗体，无机化合物，有机化合物，肽，模拟肽化合物，多肽或蛋白。

另外，该信号-传导蛋白可以是一个细胞-表面受体或信号传导体。特别是，该信号-传导蛋白可能是Fas受体，CD4受体，p75受体，5-羟色胺2A受体，5-羟色胺2B受体，或α-型蛋白激酶-C。

本发明也提供了一种恢复细胞中凋亡的负调节的方法，包含以上描述的组合物或被以上方法鉴定的化合物。

在本文中，“恢复凋亡的负调节”是指使细胞能够阻止细胞程序死亡的进行。

例如，具有功能性Fas受体和Fas-结合的磷酸酶-1的细胞由于通过磷酸酶引起Fas的负调节，而不能进入程序细胞死亡或凋亡。然而，如果Fas-结合的磷酸酶1不能结合到Fas受体的羧基端((S/T)-X-(V/L/I)区)，也就是，在(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列中，至少一个发生突变或缺失，细胞进入凋亡。通过导入能结合Fas受体的羧基端的化合物，人们能模拟一个功能性磷酸酶的效应，这样就恢复了凋亡的负调节。

本发明提供了一种预防细胞凋亡的方法，包含上述描述的组合物或被以上描述方法鉴定的化合物。

本发明提供了一种控制由相关细胞凋亡引起的疾病，包含以上所描述的组合物或由以上描述的方法鉴定的化合物。

本发明在以下的具体实验部分中有详细说明。这些是为了有助于了解本发明，但并不意味着，也不应当被解释为，限制本发明的权利要求。第一部分实验实验的详细操作材料和方法1.筛选半随机和随机肽基因文库

为了在限制性的DNA序列中产生许多突变，根据文献(Hill等，1987)所叙述的程序，用简并寡核苷酸引起突变的PCR方法，基于人与大鼠之间的同源性，设计两种回文序列，用于构建半随机的基因文库。所用的两个引物是5’-CGGAATTCNNNNNNNNNAACAGCNNNNNNNNNAATGAANNNCAAAGTCTGNNNTGAGGATCCTCA-3’(Seq.I.D.No.：30)和5’-CGGAATTCGACTCAGAANNNNNNAACTTCAGANNNNNNATCNNNNNNNNNGTCTGAGGATCCTCA-3’(Seq.I.D.：31)简述如下，经过HPLC纯化的这两种引物(每种200pmol)在70℃退火，5分钟，于23℃冷却60分钟，然后在Klenow DNA聚合酶作用下(5u)，于23℃，60分钟，.用4种核苷酸混合物补平，(每种核苷酸最终浓度为1mM)。加入1μl 0.5M EDTA终止反应。乙醇沉淀来纯化DNA。将得到的双链DNA用EcoRI和BamHI酶切。然后在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中进一步纯化然后将双链寡核苷酸与pBTM116质粒在EcoRI-BamHI位点进行连接。将连接混合物电转移到E.Coli XLl-Blue MRF’(Stratagene)菌中以构建质粒基因文库。按以前报道的方法进行大批量转化。质粒基因文库转化到L40细胞中(MATa，trp1，leu2，his3，ade2，LYS2；(lexAop)⁴-HIS3，URA3：(LexAop)⁸-LacZ)。该细胞株携带有含有FAP-1cDNA的PVP16-31质粒(Sato等，1995)。将在组氨酸-缺陷的培养基中(His⁺)形成的克隆转移到含有40μg/ml x-gal的平板上，以测定在平板滤膜实验所产生的兰色反应产物(β-gal⁺)。对所筛选的His⁺和β-gal⁺克隆进行检测以用于进一步分析。有回文结构的寡核苷酸5’-CGGAATTC-(NNH)_4-15-TGAGGATCCTCA-3’(seq.I.D.No：32)用于构建随机的肽基因文库。2.肽的合成

肽的合成是在新型Chemtech ACT357自动合成仪按照以前发表的类似的操作程序自动合成(Schnorrenberg和Gerhardt，1989)。每次循环用Wang树脂(用量为0.2-0.3mmole)，所有氨基酸用N^α-Fmoc进行保护。再用20％六氢吡啶/DMF处理去除保护，用DIC/HOBt然后用HBTU/DIEA进行偶联。当最后一个氨基酸被偶联上之后，用Ac₂O/DMF对树脂上延长的肽进行乙酰化。最后用TFA处理共同去除所有的保护基团将该肽从树脂上分离下来。乙酰化的肽经过HPLC纯化后，通过FAB-MS和¹H-NMR鉴定其特征。3.利用Fas C端15个氨基酸对Fas/FAP-1结合进行抑制作用的检测

亚克隆到Bluescript pSK-II载体上的HFAP-10 cDNA的体外翻译是利用体外转录/翻译系统(Promega TNT lysate)和T7RNA聚合酶在³⁵S-L-甲硫氨酸存在下，从内部的甲硫氨酸密码子开始翻译，得到的³⁵S-标记蛋白与GST-Fas融合蛋白于4℃共同孵育16小时，该GST-Fas融合蛋白在含150mM NaCl，50mM Tris(pH8.0)，5mM DTT，2mM EDTA，0.1％NP-40，1mM PMSF，50μg/ml亮抑素，1mM联苯胺和7μg/ml抑肽素的缓冲液中，固定在GST-Sepharose 4B亲和层析珠上(Pharmacia)，用同样的缓冲液彻底洗4次，通过离心回收带有谷胱甘肽-Sepharose珠的结合蛋白，在煮沸的Laemmili缓冲液中洗脱下来，然后通过SDS-PAGE和荧光学的方法进行分析。4.Fas末端15个氨基酸的抑制作用的检测和利用各种三肽对Fas/FAP-1结合的抑制影响

体外翻译的[³⁵S]HFAP-1经过NAP-5柱的纯化后(pharmacia)，与3μM的GST-融合蛋白在4℃孵育16小时，用结合缓冲液洗4次，在b计数器测定参入的放射性活性。结合抑制的百分率按下式计算：抑制百分数％＝[使用GST-Fas(19-335)和肽参入的放射活性-使用GST-Fas(191-320)和肽参入的放射活性]/[使用GST-Fas(191-335)没有肽时参入的放射活性-使用GST-Fas(191-320)没有肽时参入的放射活性]。n＝3。5.结合FAP-1的Fas C端3个氨基酸在体外和在酵母中的相互作用。

构建诱饵质粒pBTM116(LexA)-SLV，-PLV，-SLY/，和SLA并转化到带有pVP16-FAP-1或ras的L40菌株中，从每种转化体中挑出6个单独的克隆，在组氨酸-缺陷的培养基中分析其生长情况。用GST-Sepharose4B亲和层析珠(Pharmacia)纯化GST-Fas，-SLV和PLV。体外结合的方法如上所述。6.天然的Fas与GST-FAP-1的免疫沉淀反应和Fas/FAP-1与Ac-SLV结合的抑制作用

有FAP-和没有FAP-1的GST-融合蛋白与表达Fas的Jurkat T细胞的细胞提取物共同孵育。利用抗-Fas单克隆抗体进行Western杂交分析以检测结合的Fas(F22120，Transduction Lab)。AC-SLV和AC-SLY三肽用于Fas/FAP-1结合抑制作用的检测。7.显微注射Ac-SLV到DLD-1细胞株。将DLD-1人肠癌细胞在含10％胎牛血清的RPMI1640培养基中培养。微注射时，在35m m的塑料培养皿上，以1×10⁵细胞/2ml的密度，将细胞接种在CELLoate(Eppendorf)上，生长一天。恰好在进行微注射之前，加入500 ng/ml的Fas单克隆抗体CH11(MBLinternational)。所有微注射实验均用自动微注射系统操作(Eppendorf transjector 5246 micro-manipalator5171 和Femtotips)(pantel，等，1995)。合成的三肽以100mM的浓度悬浮在0.1％(W/V)FITC-硫酸葡聚糖(Sigma)/K-PBS中。将样品微注射到DLD-1细胞浆内。注射16-20小时后，用PBS洗细胞，然后用PBS配制的10μg/ml Hoechst33342染细胞。37℃孵育30分钟后，对这些细胞进行照相，计数染色质浓缩的细胞作为凋亡的细胞8微注射的DLD-1细胞中凋亡的定量分析

每次实验，微注射 25-100个细胞。微注射后细胞的凋亡的检测是利用相差以及荧光显微镜对形态学改变进行评价(Wang等，1995)(McGahon，等1995)。数据分析是统计2-3次单独测定的平均值+/-标准误。讨论

为了签定FAP-1结合所必须的Fas受体C端区域的最小肽，我们利用一系列合成的肽和酵母双杂交系统肽的基因文库(图24)，在体外检测Fas/FAP-1结合的抑制作用。首先构建了15种氨基酸融合到LexA DNA结合区域的半随机基因文库(基于人与大鼠之间Fas的同源性)(图2B和2C)，然后与起初作为FAP-1分离的pVP16-31(Sato，等，1995)共同转化到L40酵母菌中。从5.0×10⁶转化体中(Johnson等1986)筛选出200His+克隆后，挑出100个β-半乳糖苷酶阳性的克隆用于进一步分析。编码C端15个氨基酸的文库质粒的序列分析揭示了所有的C端氨基酸或是缬氨酸，亮氨酸或是异亮氨酸残基。第二，构建了4-15个氨基酸与LexADNA结合区域相融合的随机基因文库，然后按图2D的策略进行筛选。令人惊奇的是所有C端的第三个氨基酸都是丝氨酸，而且C端氨基酸分析结果与半随机cDNA文库筛选的结果是一致的。在筛选这些基因文库过程中没有发现其他的有意义的氨基酸序列，提示最后3个氨基酸(ts-X-V/L/I)基序对于与FAP-1的第三PDZ区域的结合非常重要，并且在蛋白-蛋白之间相互作用以及调节由Fas诱导的凋亡过程中起至关重要的作用。为了进一步确定是否这最后的3个氨基酸对于Fas/FAP-1的结合是必需的，而且足以满足其结合，我们构建了LexA-SLV，-PLV，-PLY，-SLY和-SLA融合蛋白的质粒，然后与PVP16-FAP-1共转化到酵母中。结果表明只有LexA-SLV与FAP-1结合，而LexA-PLV，-PLY，-SLY和-SLA不能结合(图4A)。用各种GST-三肽融合体研究体外结合和在体外翻译的FAP-1所得的结果是一致的(图4B)。

除了酵母双杂交系统外，也利用了Fas/FAP-1结合的体外抑制作用检测。首先，检测C-端15个氨基酸的合成肽是否能在体外抑制Fas和FAP-1的结合(图3A)。体外翻译的FAP-1与GST-Fas的结合也显著地降低而且与合成的FAS的15个氨基酸的浓度有关。与这些结果相比，在同样的生物化学条件下，人的PAMP肽(Kitamuta，等1994)作为阴性对照对Fas/FAP-1的结合活性没有影响。第二，检测截短的Fas C-末端合成肽对Fas/FAP-1体外结合的效应。正如图3B所示，对于Fas/FAP-1的结合，在C-端只有3个氨基酸(Ac-SLV)就足以得到与合成的4-15肽所起的抑制影响。进一步利用三肽的替换肽，研究Fas/FAP-1的结合，以决定对抑制作用所必须的重要的氨基酸(图3C)。这些结果揭示了C端的第三个氨基酸和C-末端氨基酸分别为丝氨酸或苏氨酸；以及缬氨酸，亮氨酸，或异亮氨酸时具有最强的抑制效应。但是C端第二个氨基酸中对于它们的Fas/FAP-1结合抑制效应没有显著差异。这些结果与酵母双杂交系统所得结果(图2C，2D)是一致的。因此，结论是C端的三个氨基酸(SLV)对于Fas与FAP-1蛋白的第三个PDZ区域结合是决定性的。

为了进一步研究在更天然条件下PD Z区域与ts/T-X-V/L./I之间相互作用的重要意义，我们检测了GST融合的FAP-1蛋白与JurkatT细胞表达的Fas相互作用的能力。结果揭示了是Ac-SLV三肽，而不是Ac-SLY三肽取消了FAP-1与从Jurkat T细胞中提取的Fas蛋白以剂量依赖的方式相结合的活性(图4C和4D)。这些结果揭示了C-端氨基酸tSLV对于FAP-1是最小的结合位点。而且丝氨酸和颉氨酸对于这种物理性的结合是至关重要的。

为了进一步验证这一推论，即FasC端的3个氨基酸与FAP-1第三个PDZ区域之间的物理结合对于体内FAP-1作为由Fas介导的信号传导的负调控因子的功能是必需的，应用微注射的实验，将合成的三肽注射到大肠癌细胞株DLD-1，该细胞株能表达Fas和FAP-1，并抵抗由Fas诱导的凋亡。这些实验包括直接将合成的三肽注射到单个细胞的胞浆，检测体内由Fas-诱导的凋亡的生理性反映。结果显示，将Ac-SLV微注射到DLD-1细胞时有Fas-单克隆抗体存在的情况下(CH11，500ng/ml)，可以显著地诱导凋亡(图5A，5E，和图6)，但是微注射Ac-SLY和PBS/K则不能诱导凋亡(图5B，5F和图6)。这些结果有力地支持了这种推论，即FAP-1与FasC端物理性结合对于防止细胞被Fas-诱导引起凋亡是必需的。

总之，我们发现了FasC端的SLV对于结合到FAP-1第三个PDZ区域是唯一必须的，并能满足其需要。第二，提出了新的tS/T-X-V/L/I的共用基序，而不是tS/T-X-V，被用于与PDZ区域的结合。因此很可能除了FAP-1与Fas物理性相互作用外，FAP-1在信号传导途径的调节作用中也起很重要的作用。第三，证明了在大肠癌细胞中直接注射三肽Ac-SLV可以定向地诱导由Fas-介导的凋亡。进一步的研究包括确定FAP-1的底物和结构功能的分析，在癌细胞中利用Fas/FAP-1的相互作用用于治疗以及提供证据更好地了解FAP-1对由Fas介导的信号传导的抑制作用。第二部分实验

FAP-1原是鉴定为膜结合蛋白酪氨酸磷酸酶，它与Fas的C端相结合，有6个PDZ区域(也被称作DHR区域或GLGF重复)。最近研究表明PDZ区域是作为一种新的特异的蛋白-蛋白之间相互作用模件，而且看来在膜蛋白的装配，和在多蛋白的复合物中与信号分子连接的过程中起重要作用。

最近的综合研究结果发现FAP-1的第三个PDZ区域特异地识别一个序列基序t(S/T)-X-V，并与Fas的C-端3个氨基酸相互作用(图9)。为了研究FAP-1也与p75NGFR C端区域相互作用的可能性(图8)，利用体外结合实验以及通过用酵母的双杂交系统将一系列的p75NGFR缺失突变后进行分析。结果揭示p75NGFR C-端胞浆部分与FAP-1相互作用，该p75NGFR C-端胞浆部分在所有的种类中是高度保守的(图10)。而且，p75NCFR C-端的三个氨基酸SPV是必须的，且足以满足与FAP-1的第三个PDZ区域都相互作用(图11A，11B)。由于FAP-1在胎儿脑的表达最高，所以这些结果暗示FAP-1与p75NGFR之间的相互作用在神经细胞中通过p75NGFR的途径进行信号传递的过程中以及在p75NGFR启始信号转变复合物的形成中起重要作用。参考文献1. Banyille，D.，et al. J.Biol.Chem.269：22320-22327

(1994).2. Boldin，M.P.et al. J.Biol.Chem.270：7795-7798

(1995).3. Camerini，D.，et al. J.Immunol.147：3165-3169

(1991).4. Chao，M.V.and B.L.Hempstead TINS 18：321-326

(1995).5. Chinnaiyan，A.M.，et al. Cell 81：505-512(1995).6. Cho，K.-O.，et al. Neuron9：929-942(1992).7. Conboy，J.G.，et al. J.Biol.Chem.266：8273-8280

(1991).8. Doyle，D.A.，et al. Cell 85：1067-1076(1996).9. Funayama，N.，et al. J.Cell Biol.115：1039-1048

(1991).10. Gould，K.L.，et al. EMBO J.8：4133-4142(1989).11. Gu，M.X.，et ak. Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.88：

5867-5871(1991).12. Hill，D.E.，et al. Meth Enzymol.155，558-568

(1987).13. Ito，N.，and Nagata，S. J.Biol.Chem.268：

10932-10937(1993)14. 1Itoh，N.et al. Cell 66：233-243(1991).15. Johnson，D.et al. Cell 47：545-554(1986).16. Kim，E.，et al. Nature 378：85-88(1995).17. Kischkel，F.C.et al. EMBO J.14：5579-5588(1995).18. Kitamura，K.et al. FEBS Lett.351：35-37(1994).19. Kornau，H.-C.，et al. Science 269：1737-1740(1995).20. Lankes，W. T.，and Furthmayr，H. Proc.Natl.Acad.

Sci.U.S.A.88：8297-8301(1991).21. Maekawa，K.，et al. FEBS Letters 337：200-206

(1994).22. Mallett，S.，et al. EMBO J.9：1063-1068(1990).23. Matsumine，A.et al. Scince 272：1020-1023(1996).24. McGahon，A.J.et al. Meth.Cell Biol.46：153-185

(1995).25. Pantel，K.et al. J. Natl.Cancer Inst，87：

1162-1168(1995).26. Rouleau，G.et al. Nature 363：515-521(1993).27.28. Sambrook，J.，et al.(1989) Molecular Cloning：a

laboratory manual. Second Edition.Cold Spring

Harbor Laboratory Press.29. Sato，T.，et al. Science 268：411-415(1995).30. Schnorrenberg，G. and Gerhardt H. Tetrahedron 45：

7759-7764(1989).31. Saras，J.，et al. J. Biol.Chem. 269，24082-24089

(1994).32. Smith，C. A. et al. Cell 73：1349-1360(1993).33. Stamenkovic，I.，et al. EMBO J.8：14031410

(1989).34. Stanger，B.Z.，et al. Cell 81：513-523(1995).35. Takahashi，T.et al. Cell 76：969-976(1994).36. Vogel，W.，et al.(1993). Science 259：611-1614

(1993).37. Watanabe-Fukunaga，R.，et al. Nature 356：314-317

(1992).38. Wang，X. W.，et al. Cancer Res. 55：6012-6016

(1995).39. Westendorp，M.O.et al. Nature 375：497-500(1995).40. Woods，D.F. and Bryant，P.J. Cell 66：451-464

(1991).41. Yang，Q.，and Tonks，N.K. Proc. Natl.Acad.Sci.

U.S.A.88：5949-5953(1991).

序列表(1)总信息：

(i)申请人：纽约市哥伦比亚大学信托人

(ii)发明名称：一种抑制信号传导蛋白和

GLGF(PDZ/DHR)区域之间相

互作用的化合物及其应用

(iii)序列数目：33

(iv)通信地址：

(A)收信人：Cooper&Dunham LLP

(B)街道：1185 Avenue of the Americas

(C)城市：New York

(D)州：New York

(E)国家：U.S.A.

(F)邮编：10036

(v)计算机可读形式：

(A)介质类型：软盘

(B)计算机：IBM PC兼容

(C)操作系统：PC-DOS/MS DOS

(D)软件：PatentIn Release #1.0.Version#1.30

(vi)目前申请状态：

(A)申请号：

(B)申请日：1997年7月18日

(C)分类：

(viii)代理信息：

(A)姓名：White，John P

(B)登记号：28678

(C)案号：0575/48962-A PCT/JPW/JKM

(ix)通讯资料：

(A)电话：(212)278-0400

(B)传真：(212)391-0525(2)SEQ ID NO：1的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：4氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(iii)假设：否

(iv)反义：否

(xi)序列描述：SEQ ID NO：1：

Gly/Ser/Ala/Glu Leu Gly Phe/Ile/Leu

1(2)SEQ ID NO：2的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：6氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(iii)假设：否

(iv)反义：否

(xi)序列描述：SEQ ID NO：2

Lys/Arg/Gln Xaa(n)Gly/Ser/Ala/Glu Leu Gly Phe/Ile/Leu

1 5(2)SEQ ID NO：3的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：4氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(iii)假设：否

(iv)反义：否

(xi)序列描述：SEQ ID NO：3

Ser Leu Gly Ile

1(2)SEQ ID NO：4的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：6氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(iii)假设：否

(iv)反义：否

(xi)序列描述：SEQ ID NO：4

Ser/Thr Xaa Val/Ile/Leu

1(2)SEQ ID NO：5的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：15氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：5

Asp Ser Glu Asn Ser Asn Phe Arg Asn Glu Ile Gln Ser Leu Val

1 5 10 15(2)SEQ ID NO：6的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：15氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：6：

Ser Ile Ser Asn Ser Arg Asn Glu Asn Glu Gly Gln Ser Leu Glu

1 5 10 15(2)SEQ ID NO：7的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：15氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：7：

Ser Thr Pro Asp Thr Gly Asn Glu Asn Glu Gly Gln Cys Leu Glu

1 5 10 15(2)SEQ ID NO：8的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：4氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：8：

Glu Ser Leu Val

1(2)SEQ ID NO：9的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：6氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述SEQ ID NO：9：

Thr Ile GlnSer Val Ile

1 5(2)SEQ ID NO：10的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：8氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：10：

Arg Gly Phe Ile Ser Ser Leu Val

1 5(2)SEQ ID NO：11的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：8氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ I

Arg Glu Thr Ile Glu Ser Thr Val

1 5(2)SEQ ID NO：12的信息

(i)序列特征：

(A)长度：11氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：12：

Gln Asn Phe Arg Thr Tyr Ile Val Ser Phe Val

1 5 10(2)SEQ ID NO：13的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：13氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：13：

Ser Asp Ser Asn Met Asn Met Asn Glu Leu Ser Glu Val

1 5 10(2)SEQ ID NO：14的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：15氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：14：

Pro Pro Thr Cys Ser Gln Ala Asn Ser Gly Arg Ile Ser Thr Leu

1 5 10 15(2)SEQ ID NO：15的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：15氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：15：

Ile Asp Leu Ala Ser Glu Phe Leu Phe Leu Ser Asn Ser Phe Leu

1 5 10 15(2)SEQ ID NO：16的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：15氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：16：

Asp Ser Glu Met Tyr Asn Phe Arg Ser Gln Leu Ala Ser Val Val

1 5 10 15(2)SEQ ID NO：17的信息

(i)序列特征：

(A)长度：15氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：17：

Ile Pro Pro Asp Ser Glu Asp Gly Asn Glu Glu Gln Ser Leu Val

1 5 10 15(2)SEQ ID NO：18的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：4氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：18：

Gln Ser Leu Val

1(2)SEQ ID NO：19的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：5氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：19：

Ile Gln Ser Leu Val

1 5(2)SEQ ID NO：20的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：6氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：20

Glu Ile Gln Ser Leu Val

1 5(2)SEQ ID NO：21的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：7氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：21：

Asn Glu Ile Gln Ser Leu Val

1 5(2)SEQ ID NO：22的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：8氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：22：

Arg Asn Glu Ile Gln Ser Leu Val

1 5(2)SEQ ID NO：23的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：15氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：23

Asp Ser Glu Asn Ser Asn Phe Arg Asn Glu Ile Gln Ser Leu Val

1 5 10 15(2)SEQ ID NO：24的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：427氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：24：

Met Gly Ala Gly Ala Thr Gly Arg Ala Met Asp Gly Pro Arg Leu Leu

1 5 10 15

Leu Leu Leu Leu Leu Gly Val Ser Leu Gly Gly Ala Lys Glu Ala Cys

20 25 30

Pro Thr Gly Leu Tyr Thr His Ser Gly Glu Cys Cys Lys Ala Cys Asn

35 40 45

Leu Gly Glu Gly Val Ala Gln Pro Cys Gly Ala Asn Gln Thr Val Cys

50 55 60

Glu Pro Cys Leu Asp Ser Val Thr Phe Ser Asp Val Val Ser Ala Thr

65 70 75 80

Glu Pro Cys Lys Pro Cys Thr Glu Cys Val Gly Leu Gln Ser Met Ser

85 90 95

Ala Pro Cys Val Glu Ala Asp Asp Ala Val Cys Arg Cys Ala Tyr Gly

100 105 110

Tyr Tyr Gln Asp Glu Thr Thr Gly Arg Cys Glu Ala Cys Arg Val Cys

115 120 125

Glu Ala Gly Ser Gly Leu Val Phe Ser Cys Gln Asp Lys Gln Asn Thr

130 135 140

Val Cys Glu Glu Cys Pro Asp Gly Thr Tyr Ser Asp Glu Ala Asn His

145 150 155 160

Val Asp Pro Cys Leu Pro Cys Thr Val Cys Glu Asp Thr Glu Arg Gln

165 170 175

Leu Arg Glu Cys Thr Arg Trp Ala Asp Ala Glu Cys Glu Glu Ile Pro

180 185 190

Gly Arg Trp Ile Thr Arg Ser Thr Pro Pro Glu Gly Ser Asp Ser Thr

195 200 205

Ala Pro Ser Thr Gln Glu Pro Glu Ala Pro Pro Glu Gln Asp Leu Ile

210 215 220

Ala Ser Thr Val Ala Gly Val Val Thr Thr Val Met Gly Ser Ser Gln

225 230 235 240

Pro Val Val Thr Arg Gly Thr Thr Asp Asn Leu Ile Pro Val Tyr Cys

245 250 255

Ser Ile Leu Ala Ala Val Val Val Gly Leu Val Ala Tyr Ile Ala Phe

260 265 270

Lys Arg Trp Asn Ser Cys Lys Gln Asn Lys Gly Gly Ala Asn Ser Arg

275 280 285

Pro Val Asn Gln Thr Pro Pro Pro Glu Gly Glu Lys Ile His Ser Asp

290 295 300

Ser Gly Ile Ser Val Asp Ser Gln Ser Leu His Asp Gln Gln Pro His

305 310 315 320

Thr Gln Thr Ala Ser Gly Gln Ala Leu Lys Gly Asp Gly Gly Leu Tyr

325 330 335

Ser Ser Leu Pro Pro Ala Lys Arg Glu Glu Val Glu Lys Leu Leu Asn

340 345 350

Gly Ser Ala Gly Asp Thr Trp Arg His Leu Ala Gly Glu Leu Gly Tyr

355 360 365

Gln Pro Glu His Ile Asp Ser Phe Thr His Glu Ala Cys Pro Val Arg

370 375 380

Ala Leu Leu Ala Ser Trp Ala Thr Gln Asp Ser Ala Thr Leu Asp Ala

385 390 395 400

Leu Leu Ala Ala Leu Arg Arg Ile Gln Arg Ala Asp Leu Val Glu Ser

405 410 415

Leu Cys Ser Glu Ser Thr Ala Thr Ser Pro Val

420 425(2)SEQ ID NO：25的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：458氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：25：

Met Asn Arg Gly Val Pro Phe Arg His Leu Leu Leu Val Leu Gln Leu

1 5 10 15

Ala Leu Leu Pro Ala Ala Thr Gln Gly Lys Lys Val Val Leu Gly Lys

20 25 30

Lys Gly Asp Thr Val Glu Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gln Lys Lys Ser

35 40 45Ile Gln Phe His Trp Lys Asn Ser Asn Gln Ile Lys Ile Leu Gly Asn

50 55 60Gln Gly Ser Phe Leu Thr Lys Gly Pro Ser Lys Leu Asn Asp Arg Ala65 70 75 80Asp Ser Arg Arg Ser Leu Trp Asp Gln Gly Asn Phe Pro Leu Ile Ile

85 90 95Lys Asn Leu Lys Ile Glu Asp Ser Asp Thr Tyr Ile Cys Glu Val Glu

100 105 110Asp Gln Lys Glu Glu Val Gln Leu Leu Val Phe Gly Leu Thr Ala Asn

115 120 125Ser Asp Thr His Leu Leu Gln Gly Gln Ser Leu Thr Ile Thr Leu Glu

130 135 140Ser Pro Pro Gly Ser Ser Pro Ser Val Gln Cys Arg Ser Pro Arg Gly145 150 155 160Lys Asn Ile Gln Gly Gly Lys Thr Leu Ser Val Ser Gln Leu Glu Leu

165 170 175Gln Asp Ser Gly Thr Trp Thr Cys Thr Val Leu Gln Asn Gln Lys Lys

180 185 190Val Glu Phe Lys Ile Asp Ile Val Val Leu Ala Phe Gln Lys Ala Ser

195 200 205Ser Ile Val Tyr Lys Lys Glu Gly Glu Gln Val Glu Phe Ser Phe Pro

210 215 220Leu Ala Phe Thr Val Glu Lys Leu Thr Gly Ser Gly Glu Leu Trp Trp225 230 235 240Gln Ala Glu Arg Ala Ser Ser Ser Lys Ser Trp Ile Thr Phe Asp Leu

245 250 255Lys Asn Lys Glu Val Ser Val Lys Arg Val Thr Gln Asp Pro Lys Leu

260 265 270Gln Met Gly Lys Lys Leu Pro Leu His Leu Thr Leu Pro Gln Ala Leu

275 280 285Pro Gln Tyr Ala Gly Ser Gly Asn Leu Thr Leu Ala Leu Glu Ala Lys

290 295 300Thr Gly Lys Leu His Gln Glu Asn Val Leu Val Val Met Arg Ala Thr305 310 315 320Gln Leu Gln Lys Asn Leu Thr Cys Glu Val Trp Gly Pro Thr Ser Pro

325 330 335Lys Leu Met Leu Ser Leu Lys Leu Glu Asn Lys Glu Ala Lys Val Ser

340 345 350Lys Arg Glu Lys Ala Val Trp Val Leu Asn Pro Glu Ala Gly Met Trp

355 360 365Gln Cys Leu Leu Ser Asp Ser Gly Gln Val Leu Leu Glu Ser Asn Ile

370 375 380Lys Val Leu Pro Thr Trp Ser Thr Pro Val Gln Pro Met Ala Leu Ile385 390 395 400Va1 Leu Gly Gly Val Ala Gly Leu Leu Leu Phe Ile Gly Leu Gly Ile

405 410 415

Phe Phe Cys Val Arg Cys Arg His Arg Arg Arg Gln Ala Glu Arg Met

420 425 430

Ser Gln Ile Lys Arg Leu Leu Ser Glu Lys Lys Glu Cys Gln Cys Pro

435 440 445

His Arg Phe Gln Lys Thr Cys Ser Pro Ile

450 455(2)SEQ ID NO：26的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：828氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：26：

Met Asn Ser Gly Val Ala Met Lys Tyr Gly Asn Asp Ser Ser Ala Glu

1 5 10 15

Leu Ser Glu Leu His Ser Ala Ala Leu Ala Ser Leu Lys Gly Asp Ile

20 25 30

Val Glu Leu Asn Lys Arg Leu Gln Gln Thr Glu Arg Glu Asp Leu Leu

35 40 45

Glu Lys Lys Leu Ala Lys Ala Gln Cys Glu Gln Ser His Leu Met Arg

50 55 60

Glu His Glu Asp Val Gln Glu Arg Thr Thr Leu Arg Tyr Glu Glu Arg

65 70 75 80

Ile Thr Glu Leu His Ser Val Ile Ala Glu Leu Asn Lys Lys Ile Asp

85 90 95

Arg Leu Gln Gly Thr Thr Ile Arg Glu Glu Asp Glu Tyr Ser Glu Leu

100 105 110

Arg Ser Glu Leu Ser Gln Ser Gln His Glu Val Asn Glu Asp Ser Arg

115 120 125

Ser Met Asp Gln Asp Gln Thr Ser Val Ser Ile Pro Glu Asn Gln Ser

130 135 140

Thr Met Val Thr Ala Asp Met Asp Asn Cys Ser Asp Ile Asn Ser Glu

145 150 155 160

Leu Gln Arg Val Leu Thr Gly Leu Glu Asn Val Val Cys Gly Arg Lys

165 170 175

Lys Ser Ser Cys Ser Leu Ser Val Ala Glu Val Asp Arg His Ile Glu

180 185 190

Gln Leu Thr Thr Ala Ser Glu His Cys Asp Leu Ala Ile Lys Thr Val

195 200 205

Glu Glu Ile Glu Gly Val Leu Gly Arg Asp Leu Tyr Pro Asn Leu Ala

210 215 220

Glu Glu Arg Ser Arg Trp Glu Lys Glu Leu Ala Gly Leu Arg Glu Glu225 230 235 240Asn Glu Ser Leu Thr Ala Met Leu Cys Ser Lys Glu Glu Glu Leu Asn

245 250 255Arg Thr Lys Ala Thr Met Asn Ala Ile Arg Glu Glu Arg Asp Arg Leu

260 265 270Arg Arg Arg Val Arg Glu Leu Gln Thr Arg Leu Gln Ser Val Gln Ala

275 280 285Thr Gly Pro Ser Ser Pro Gly Arg Leu Thr Ser Thr Asn Arg Pro Ile

290 295 300Asn Pro Ser Thr Gly Glu Leu Ser Thr Ser Ser Ser Ser Asn Asp Ile305 310 315 320Pro Ile Ala Lys Ile Ala Glu Arg Val Lys Leu Ser Lys Thr Arg Ser

325 330 335Glu Ser Ser Ser Ser Asp Arg Pro Val Leu Gly Ser Glu Ile Ser Ser

340 345 350Ile Gly Val Ser Ser Ser Val Ala Glu His Leu Ala His Ser Leu Gln

355 360 365Asp Cys Ser Asn Ile Gln Glu Ile Phe Gln Thr Leu Tyr Ser His Gly

370 375 380Ser Ala Ile Ser Glu Ser Lys Ile Arg Glu Phe Glu Val Glu Thr Glu385 390 395 400Arg Leu Asn Ser Arg Ile Glu His Leu Lys Ser Gln Asn Asp Leu Leu

405 410 415Thr Ile Thr Leu Glu Glu Cys Lys Ser Asn Ala Glu Arg Met Ser Met

420 425 430Leu Val Gly Lys Tyr Glu Ser Asn Ala Thr Ala Leu Arg Leu Ala Leu

435 440 445Gln Tyr Ser Glu Gln Cys Ile Glu Ala Tyr Glu Leu Leu Leu Ala Leu

450 455 460Ala Glu Ser Glu Gln Ser Leu Ile Leu Gly Gln Phe Arg Ala Ala Gly465 470 475 480Val Gly Ser Ser Pro Gly Asp Gln Ser Gly Asp Glu Asn Ile Thr Gln

485 490 495Met Leu Lys Arg Ala His Asp Cys Arg Lys Thr Ala Glu Asn Ala Ala

500 505 510Lys Ala Leu Leu Met Lys Leu Asp Gly Ser Cys Gly Gly Ala Phe Ala

515 520 525Val Ala Gly Cys Ser Val Gln Pro Trp Glu Ser Leu Ser Ser Asn Ser

530 535 540His Thr Ser Thr Thr Ser Ser Thr Ala Ser Ser Cys Asp Thr Glu Phe545 550 555 560Thr Lys Glu Asp Glu Gln Arg Leu Lys Asp Tyr Ile Gln Gln Leu Lys

565 570 575Asn Asp Arg Ala Ala Val Lys Leu Thr Met Leu Glu Leu Glu Ser Ile

580 585 590His Ile Asp Pro Leu Ser Tyr Asp Val Lys Pro Arg Gly Asp Ser Gln

595 600 605Arg Leu Asp Leu Glu Asn Ala Val Leu Met Gln Glu Leu Met Ala Met

610 615 620Lys Glu Glu Met Ala Glu Leu Lys Ala Gln Leu Tyr Leu Leu Glu Lys625 630 635 640Glu Lys Lys Ala Leu Glu Leu Lys Leu Ser Thr Arg Glu Ala Gln Glu

645 650 655Gln Ala Tyr Leu Val His Ile Glu His Leu Lys Ser Glu Val Glu Glu

660 665 670Gln Lys Glu Gln Arg Met Arg Ser Leu Ser Ser Thr Ser Ser Gly Ser

675 680 685Lys Asp Lys Pro Gly Lys Glu Cys Ala Asp Ala Ala Ser Pro Ala Leu

690 695 700Ser Leu Ala Glu Leu Arg Thr Thr Cys Ser Glu Asn Glu Leu Ala Ala705 710 715 720Glu Phe Thr Asn Ala Ile Arg Arg Glu Lys Lys Leu Lys Ala Arg Val

725 730 735Gln Glu Leu Val Ser Ala Leu Glu Arg Leu Thr Lys Ser Ser Glu Ile

740 745 750Arg His Gln Gln Ser Ala Glu Phe Val Asn Asp Leu Lys Arg Ala Asn

755 760 765Ser Asn Leu Val Ala Ala Tyr Glu Lys Ala Lys Lys Lys His Gln Asn

770 775 780Lys Leu Lys Lys Leu Glu Ser Gln Met Met Ala Met Val Glu Arg His785 790 795 800Glu Thr Gln Val Arg Met Leu Lys Gln Arg Ile Ala Leu Leu Glu Glu

805 810 815Glu Asn Ser Arg Pro His Thr Asn Glu Thr Ser Leu

820 825(2)SEQ ID NO：27的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：672氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：27：

Met Ala Asp Val Phe Pro Gly Asn Asp Ser Thr Ala Ser Gln Asp Val

1 5 10 15

Ala Asn Arg Phe Ala Arg Lys Gly Ala Leu Arg Gln Lys Asn Val His

20 25 30

Glu Val Lys Asp His Lys Phe Ile Ala Arg Phe Phe Lys Gln Pro Thr

35 40 45Phe Cys Ser His Cys Thr Asp Phe Ile Trp Gly Phe Gly Lys Gly Gly

50 55 60Phe Gln Cys Gln Val Cys Cys Phe Val Val His Lys Arg Cys His Glu65 70 75 80Phe Val Thr Phe Ser Cys Pro Gly Ala Asp Lys Gly Pro Asp Thr Asp

85 90 95Asp Pro Arg Ser Lys His Lys Phe Lys Ile His Thr Tyr Gly Ser Pro

100 105 110Thr Phe Cys Asp His Cys Gly Ser Leu Leu Tyr Gly Leu Ile His Gln

115 120 125Gly Met Lys Cys Asp Thr Cys Asp Met Asn Val His Lys Gln Cys Val

130 135 140Ile Asn Val Pro Ser Leu Cys Gly Met Asp His Thr Glu Lys Arg Gly145 150 155 160Arg Ile Tyr Leu Lys Ala Glu Val Ala Asp Glu Lys Leu His Val Thr

165 170 175Val Arg Asp Ala Lys Asn Leu Ile Pro Met Asp Pro Asn Gly Leu Ser

180 185 190Asp Pro Tyr Val Lys Leu Lys Leu Ile Pro Asp Pro Lys Asn Glu Ser

195 200 205Lys Gln Lys Thr Lys Thr Ile Arg Ser Thr Leu Asn Pro Gln Trp Asn

210 215 220Glu Ser Phe Tnr Phe Lys Leu Lys Pro Ser Asp Lys Asp Arg Arg Leu225 230 235 240Ser Val Glu Ile Trp Asp Trp Asp Arg Thr Thr Arg Asn Asp Phe Met

245 250 255Gly Ser Leu Ser Phe Gly Val Ser Glu Leu Met Lys Met Pro Ala Ser

260 265 270Gly Trp Tyr Lys Leu Leu Asn Gln Glu Glu Gly Glu Tyr Tyr Asn Val

275 280 285Pro Ile Pro Glu Gly Asp Glu Glu Gly Asn Met Glu Leu Arg Gln Lys

290 295 300Phe Glu Lys Ala Lys Leu Gly Pro Ala Gly Asn Lys Val Ile Ser Pro305 310 315 320Ser Glu Asp Arg Lys Gln Pro Ser Asn Asn Leu Asp Arg Val Lys Leu

325 330 335Thr Asp Phe Asn Phe Leu Met Val Leu Gly Lys Gly Ser Phe Gly Lys

340 345 350Val Met Leu Ala Asp Arg Lys Gly Thr Glu Glu Leu Tyr Ala Ile Lys

355 360 365Ile Leu Lys Lys Asp Val Val Ile Gln Asp Asp Asp Val Glu Cys Thr

370 375 380Met Val Glu Lys Arg Val Leu Ala Leu Leu Asp Lys Pro Pro Phe Leu385 390 395 400Thr Gln Leu His Ser Cys Phe Gln Thr Val Asp Arg Leu Tyr Phe Val 405 410 415Met Glu Tyr Val Asn Gly Gly Asp Leu Met Tyr His Ile Gln Gln Val

420 425 430Gly Lys Phe Lys Glu Pro Gln Ala Val Phe Tyr Ala Ala Glu Ile Ser

435 440 445Ile Gly Leu Phe Phe Leu His Lys Arg Gly Ile Ile Tyr Arg Asp Leu

450 455 460Lys Leu Asp Asn Val Met Leu Asp Ser Glu Gly His Ile Lys Ile Ala465 470 475 480Asp Phe Gly Met Cys Lys Glu His Met Met Asp Gly Val Thr Thr Arg

485 490 495Thr Phe Cys Gly Thr Pro Asp Tyr Ile Ala Pro Glu Ile Ile Ala Tyr

500 505 510Gln Pro Tyr Gly Lys Ser Val Asp Trp Trp Ala Tyr Gly Val Leu Leu

515 520 525Tyr Glu Met Leu Ala Gly Gln Pro Pro Phe Asp Gly Glu Asp Glu Asp

530 535 540Glu Leu Phe Gln Ser Ile Met Glu His Asn Val Ser Tyr Pro Lys Ser545 550 555 560Leu Ser Lys Glu Ala Val Ser Ile Cys Lys Gly Leu Met Thr Lys His

565 570 575Pro Ala Lys Arg Leu Gly Cys Gly Pro Glu Gly Glu Arg Asp Val Arg

580 585 590Glu His Ala Phe Phe Arg Arg Ile Asp Trp Glu Lys Leu Glu Asn Arg

595 600 605Glu Ile Gln Pro Pro Phe Lys Pro Lys Val Cys Gly Lys Gly Ala Glu

610 615 620Asn Phe Asp Lys Phe Phe Thr Arg Gly Gln Pro Val Leu Thr Pro Pro625 630 635 640Asp Gln Leu Val Ile Ala Asn Ile Asp Gln Ser Asp Phe Glu Gly Phe

645 650 655Ser Tyr Val Asn Pro Gln Phe Val His Pro Ile Leu Gln Ser Ala Val

660 665 670(2)SEQ ID NO：28的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：471氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：28：

Met Asp Ile Leu Cys Glu Glu Asn Thr Ser Leu Ser Ser Thr Thr Asn

1 5 10 15Ser Leu Met Gln Leu Asn Asp Asp Thr Arg Leu Tyr Ser Asn Asp Phe

20 25 30Asn Ser Gly Glu Ala Asn Thr Ser Asp Ala Phe Asn Trp Thr Val Asp

35 40 45Ser Glu Asn Arg Thr Asn Leu Ser Cys Glu Gly Cys Leu Ser Pro Ser

50 55 60Cys Leu Ser Leu Leu His Leu GLn Glu Lys Asn Trp Ser Ala Leu Leu65 70 75 80Thr Ala Val Val Ile Ile Leu Thr Ile Ala Gly Asn Ile Leu Val Ile

85 90 95Met Ala Val Ser Leu Glu Lys Lys Leu Gln Asn Ala Thr Asn Tyr Phe

100 105 110Leu Met Ser Leu Ala Ile Ala Asp Met Leu Leu Gly Phe Leu Val Met

115 120 125Pro Val Ser Met Leu Thr Ile Leu Tyr Gly Tyr Arg Trp Pro Leu Pro

130 135 140Ser Lys Leu Cys Ala Val Trp Ile Tyr Leu Asp Val Leu Phe Ser Thr145 150 155 160Ala Ser Ile Met His Leu Cys Ala Ile Ser Leu Asp Arg Tyr Val Ala

165 170 175Ile Gln Asn Pro Ile His His Ser Arg Phe Asn Ser Arg Thr Lys Ala

1B0 185 190Phe Leu Lys Ile Ile Ala Val Trp Thr Ile Ser Val Gly Ile Ser Met

195 200 205Pro Ile Pro Val Phe Gly Leu Gln Asp Asp Ser Lys Val Phe Lys Glu

210 215 220Gly Ser Cys Leu Leu Ala Asp Asp Asn Phe Val Leu Ile Gly Ser Phe225 230 235 240Val Ser Phe Phe Ile Pro Leu Thr Ile Met Val Ile Thr Tyr Phe Leu

245 250 255Thr Ile Lys Ser Leu Gln Lys Glu Ala Thr Leu Cys Val Ser Asp Leu

260 265 270Gly Thr Arg Ala Lys Leu Ala Ser Phe Ser Phe Leu Pro Gln Ser Ser

275 280 285Leu Ser Ser Glu Lys Leu Phe Gln Arg Ser Ile His Arg Glu Pro Gly

290 295 300Ser Tyr Thr Gly Arg Arg Thr Met Gln Ser Ile Ser Asn Glu Gln Lys305 310 315 320Ala Cys Lys Val Leu Gly Ile Val Phe Phe Leu Phe Val Val Met Trp

325 330 335Cys Pro Phe Phe Ile Thr Asn Ile Met Ala Val Ile Cys Lys Glu Ser

340 345 350Cys Asn Glu Asp Val Ile Gly Ala Leu Leu Asn Val Phe Val Trp Ile

355 360 365Gly Tyr Leu Ser Ser Ala Val Asn Pro Leu Val Tyr Thr Leu Phe Asn

370 375 380

Lys Thr Tyr Arg Ser Ala Phe Ser Arg Tyr Ile Gln Cys Gln Tyr Lys

385 390 395 400

Glu Asn Lys Lys Pro Leu Gln Leu Ile Leu Val Asn Thr Ile Pro Ala

405 410 415

Leu Ala Tyr Lys Ser Ser Gln Leu Gln Met Gly Gln Lys Lys Asn Set

420 425 430

Lys Gln Asp Ala Lys Thr Thr Asp Asn Asp Cys Ser Met Val Ala Leu

435 440 445

Gly Lys Gln His Ser Glu Glu Ala Ser Lys Asp Asn Ser Asp Gly Val

450 455 460

Asn Glu Lys Val Ser Cys Val

465 470(2)SEQ ID NO 29的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：481氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：SEQ ID NO：29：

Met Ala Leu Ser Tyr Arg Val Ser Glu Leu Gln Ser Thr Ile Pro Glu

1 5 10 15

His Ile Leu Gln Ser Thr Phe Val His Val Ile Ser Ser Asn Trp Ser

20 25 30

Gly Leu Gln Thr Glu Ser Ile Pro Glu Glu Met Lys Gln Ile Val Glu

35 40 45

Glu Gln Gly Asn Lys Leu His Trp Ala Ala Leu Leu Ile Leu Met Val

50 55 60

Ile Ile Pro Thr Ile Gly Gly Asn Thr Leu Val Ile Leu Ala Val Ser

65 70 75 80

Leu Glu Lys Lys Leu Gln Tyr Ala Tnr Asn Tyr Phe Leu Met Ser Leu

85 90 95

Ala Val Ala Asp Leu Leu Val Gly Leu Phe Val Met Pro ILe Ala Leu

100 105 110

Leu Thr Ile Met Phe Glu Ala Met Trp Pro Leu Pro Leu Val Leu Cys

115 120 125

Pre Ala Trp Leu Phe Leu Asp Val Leu Phe Ser Thr Ala Ser Ile Met

130 135 140

His Leu Cys Ala Ile Ser Val Asp Arg Tyr Ile Ala Ile Lys Lys Pro

145 150 155 160

Ile Gln Ala Asn Gln Tyr Asn Ser Arg Ala Thr Ala Phe Ile Lys Ile

165 170 175

Thr Val Val Trp Leu Ile Ser Ile Gly Ile Ala Ile Pro Val Pro Ile

180 185 190Lys Gly Ile Glu Thr Asp Val Asp Asn Pro Asn Asn Ile Thr Cys Val

195 200 205Leu Thr Lys Glu Arg Phe Gly Asp Phe Met Leu Phe Gly Ser Leu Ala

210 215 220Ala Phe Phe Thr Pro Leu Ala Ile Met Ile Val Thr Tyr Phe Leu Thr225 230 235 240Ile His Ala Leu Gln Lys Lys Ala Tyr Leu Val Lys Asn Lys Pro Pro

245 250 255Gln Arg Leu Thr Trp Leu Thr Val Ser Thr Val Phe Gln Arg Asp Glu

260 265 270Thr Pro Cys Ser Ser Pro Glu Lys Val Ala Met Leu Asp Gly Ser Arg

275 280 285Lys Asp Lys Ala Leu Pro Asn Ser Gly Asp Glu Thr Leu Met Arg Arg

290 295 300Thr Ser Thr Ile Gly Lys Lys Ser Val Gln Thr Ile Ser Asn Glu Gln305 310 315 320Arg Ala Ser Lys Val Leu Gly Ile Val Phe Phe Leu Phe Leu Leu Met

325 330 335Trp Cys Pro Phe Phe Ile Thr Asn Ile Thr Leu Val Leu Cys Asp Ser

340 345 350Cys Asn Gln Thr Thr Leu Gln Met Leu Leu Glu Ile Phe Val Trp Ile

355 360 365Gly Tyr Val Ser Ser Gly Val Asn Pro Leu Val Tyr Thr Leu Phe Asn

370 375 380Lys Thr Phe Arg Asp Ala Phe Gly Arg Tyr Ile Thr Cys Asn Tyr Arg385 390 395 400Ala Thr Lys Ser Val Lys Thr Leu Arg Lys Arg Ser Ser Lys Ile Tyr

405 410 415Phe Arg Asn Pro Met Ala Glu Asn Ser Lys Phe Phe Lys Lys His Gly

420 425 430Ile Arg Asn Gly Ile Asn Pro Ala Met Tyr Gln Ser Pro Met Arg Leu

435 440 445Arg Ser Ser Thr Ile Gln Ser Ser Ser Ile Ile Leu Leu Asp Thr Leu

450 455 460Leu Leu Thr Glu Asn Glu Gly Asp Lys Thr Glu Glu Gln Val Ser Val465 470 475 480Val(2)SEQ ID NO：30的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：2843氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性(ii)分子类型：肽(xi)序列描述：SEQ ID NO：30：Met Ala Ala Ala Ser Tyr Asp Gln Leu Leu Lys Gln Val Glu Ala Leu1 5 10 15Lys Met Glu Asn Ser Asn Leu Arg Gln Glu Leu Glu Asp Asn Ser Asn

20 25 30His Leu Thr Lys Leu Glu Thr Glu Ala Ser Asn Met Lys Glu Val Leu

35 40 45Lys Gln Leu Gln Gly Ser Ile Glu Asp Glu Ala Met Ala Ser Ser Gly

50 55 60Gln Ile Asp Leu Leu Glu Arg Leu Lys Glu Leu Asn Leu Asp Ser Ser65 70 75 80Asn Phe Pro Gly Val Lys Leu Arg Ser Lys Met Ser Leu Arg Ser Tyr

85 90 95Gly Ser Arg Glu Gly Ser Val Ser Ser Arg Ser Gly Glu Cys Ser Pro

100 105 110Val Pro Met Gly Ser Phe Pro Arg Arg Gly Phe Val Asn Gly Ser Arg

115 120 125Glu Ser Thr Gly Tyr Leu Glu Glu Leu Glu Lys Glu Arg Ser Leu Leu

130 135 140Leu Ala Asp Leu Asp Lys Glu Glu Lys Glu Lys Asp Trp Tyr Tyr Ala145 150 155 160Gln Leu Gln Asn Leu Thr Lys Arg Ile Asp Ser Leu Pro Leu Thr Glu

165 170 175Asn Phe Ser Leu Gln Thr Asp Met Thr Arg Arg Gln Leu Glu Tyr Glu

180 185 190Ala Arg Gln Ile Arg Val Ala Met Glu Glu Gln Leu Gly Thr Cys Gln

195 200 205Asp Met Glu Lys Arg Ala Gln Arg Arg Ile Ala Arg Ile Gln Gln Ile

210 215 220Glu Lys Asp Ile Leu Arg Ile Arg Gln Leu Leu Gln Ser Gln Ala Thr225 230 235 240Glu Ala Glu Arg Ser Ser Gln Asn Lys His Glu Thr Gly Ser His Asp

245 250 255Ala Glu Arg Gln Asn Glu Gly Gln Gly Val Gly Glu Ile Asn Met Ala

260 265 270Thr Ser Gly Asn Gly Gln Gly Ser Thr Thr Arg Met Asp His Glu Thr

275 280 285Ala Ser Val Leu Ser Ser Ser Ser Thr His Ser Ala Pro Arg Arg Leu

290 295 300Thr Ser His Leu Gly Thr Lys Val Glu Met Val Tyr Ser Leu Leu Ser305 310 315 320Met Leu Gly Thr His Asp Lys Asp Asp Met Ser Arg Thr Leu Leu Ala

325 330 335Met Ser Ser Ser Gln Asp Ser Cys Ile Ser Met Arg Gln Ser Gly Cys

340 345 350Leu Pro Leu Leu Ile Gln Leu Leu His Gly Asn Asp Lys Asp Ser Val

355 360 365Leu Leu Gly Asn Ser Arg Gly Ser Lys Glu Ala Arg Ala Arg Ala Ser

370 375 380Ala Ala Leu His Asn Ile Ile His Ser Gln Pro Asp Asp Lys Arg Gly385 390 395 400Arg Arg Glu Ile Arg Val Leu His Leu Leu Glu Gln Ile Arg Ala Tyr

405 410 415Cys Ser Thr Cys Trp Glu Trp Gln Glu Ala His Glu Pro Gly Met Asp

420 425 430Gln Asp Lys Asn Pro Met Pro Ala Pro Val Glu His Gln Ile Cys Pro

435 440 445Ala Val Cys Val Leu Met Lys Leu Ser Phe Asp Glu Glu His Arg His

450 455 460Ala Met Asn Glu Leu Gly Gly Leu Gln Ala Ile Ala Glu Leu Leu Gln465 470 475 480Val Asp Cys Glu Met Tyr Gly Leu Thr Asn Asp His Tyr Ser Ile Thr

485 490 495Leu Arg Arg Tyr Ala Gly Met Ala Leu Thr Asn Leu Thr Phe Gly Asp

500 505 510Val Ala Asn Lys Ala Tnr Leu Cys Ser Met Lys Gly Cys Met Arg Ala

515 520 525Leu Val Ala Gln Leu Lys Ser Glu Ser Glu Asp Leu Gln Gln Val Ile

530 535 540Ala Ser Val Leu Arg Asn Leu Ser Trp Arg Ala Asp Val Asn Ser Lys545 550 555 560Lys Thr Leu Arg Glu Val Gly Ser Val Lys Ala Leu Met Glu Cys Ala

565 570 575Leu Glu Val Lys Lys Glu Ser Thr Leu Lys Ser Val Leu Ser Ala Leu

580 585 590Trp Asn Leu Ser Ala His Cys Thr Glu Asn Lys Ala Asp Ile Cys Ala

595 600 605Val Asp Gly Ala Leu Ala Phe Leu Val Gly Thr Leu Thr Tyr Arg Ser

610 6l5 620Gln Thr Asn Thr Leu Ala Ile Ile Glu Ser Gly Gly Gly Ile Leu Arg625 630 635 640Asn Val Ser Ser Leu Ile Ala Thr Asn Glu Asp His Arg Gln Ile Leu

645 650 655Arg Glu Asn Asn Cys Leu Gln Thr Leu Leu Gln His Leu Lys Ser His

660 665 670Ser Leu Thr Ile Val Ser Asn Ala Cys Gly Thr Leu Trp Asn Leu Ser

675 680 685Ala Arg Asn Pro Lys Asp Gln Glu Ala Leu Trp Asp Met Gly Ala Val

690 695 700Ser Met Leu Lys Asn Leu Ile His Ser Lys His Lys Met Ile Ala Met705 710 715 720Gly Ser Ala Ala Ala Leu Arg Asn Leu Met Ala Asn Arg Pro Ala Lys

725 730 735Tyr Lys Asp Ala Asn Ile Met Ser Pro Gly Ser Ser Leu Pro Ser Leu

740 745 750His Val Arg Lys Gln Lys Ala Leu Glu Ala Glu Leu Asp Ala Gln His

755 760 765Leu Ser Glu Thr Phe Asp Asn Ile Asp Asn Ile Ser Pro Lys Ala Ser

770 775 780His Arg Ser Lys Gln Arg His Lys Gln Ser Leu Tyr Gly Asp Tyr Val785 790 795 800Phe Asp Thr Asn Arg His Asp Asp Asn Arg Ser Asp Asn Phe Asn Thr

805 810 815Gly Asn Met Thr Val Leu Ser Pro Tyr Leu Asn Thr Thr Val Leu Pro

820 825 830Ser Ser Ser Ser Ser Arg Gly Ser Leu Asp Ser Ser Arg Ser Glu Lys

835 840 845Asp Arg Ser Leu Glu Arg Glu Arg Gly Ile Gly Leu Gly Asn Tyr His

850 855 860Pro Ala Thr Glu Asr Pro Gly Thr Ser Ser Lys Arg Gly Leu Gln Ile865 870 875 880Ser Thr Thr Ala Ala Gln Ile Ala Lys Val Met Glu Glu Val Ser Ala

885 890 895Ile His Thr Ser Gln Glu Asp Arg Ser Ser Gly Ser Thr Thr Glu Leu

900 905 910His Cys Val Thr Asp Glu Arg Asn Ala Leu Arg Arg Ser Ser Ala Ala

915 920 925His Thr His Ser Asn Thr Tyr Asn Phe Thr Lys Ser Glu Asn Ser Asn

930 935 940Arg Thr Cys Ser Met Pro Tyr Ala Lys Leu Glu Tyr Lys Arg Ser Ser945 950 955 960Asn Asp Ser Leu Asn Ser Val Ser Ser Ser Asp Gly Tyr Gly Lys Arg

965 970 975Gly Gln Met Lys Pro Ser Ile Glu Ser Tyr Ser Glu Asp Asp Glu Ser

980 985 990Lys Phe Cys Ser Tyr Gly Gln Tyr Pro Ala Asp Leu Ala His Lys Ile

995 1000 1005His Ser Ala Asn His Met Asp Asp Asn Asp Gly Glu Leu Asp Thr Pro

1010 1015 1020Ile Asn Tyr Ser Leu Lys Tyr Ser Asp Glu Gln Leu Asn Ser Gly Arg1025 1030 1035 1040Gln Ser Pro Ser Gln Asn Glu Arg Trp Ala Arg Pro Lys His Ile Ile

1045 1050 1055Glu Asp Glu Ile Lys Gln Ser Glu Gln Arg Gln Ser Arg Asn Gln Ser

1060 1065 1070Thr Thr Tyr Pro Val Tyr Thr Glu Ser Thr Asp Asp Lys His Leu Lys

1075 1080 1085Phe Gln Pro His Phe Gly Gln Gln Glu Cys Val Ser Pro Tyr Arg Ser

1090 1095 1100Arg Gly Ala Asn Gly Ser Glu Thr Asn Arg Val Gly Ser Asn His Gly1105 1110 1115 1120Ile Asn Gln Asn Val Ser Gln Ser Leu Cys Gln Glu Asp Asp Tyr Glu

1125 1130 1135Asp Asp Lys Pro Thr Asn Tyr ser Glu Arg Tyr Ser Glu Glu Glu Gln

1140 1145 1150His Glu Glu Glu Glu Arg Pro Thr Asn Tyr Ser Ile Lys Tyr Asn Glu

1155 1160 1165Glu Lys Arg His Val Asp Gln Pro Ile Asp Tyr Ser Ile Leu Lys Ala

1170 1175 1180Thr Asp Ile Pro Ser Ser Gln Lys Gln Ser Phe Ser Phe Ser Iys Ser1185 1190 1195 1200Ser Ser Gly Gln Ser Ser Lys Thr Glu His Met Ser Ser Ser Ser Glu

1205 1210 1215Asn Thr Ser Thr Pro Ser Ser Asn Ala Lys Arg Gln Asn Gln Leu His

1220 1225 1230Pro Ser Ser Ala Gln Ser Arg Ser Gly Gln Pro Gln Lys Ala Ala Thr

1235 1240 1245Cys Lys Val Ser Ser Ile Asn Gln Glu Thr Ile Gln Thr Tyr Cys Val

1250 1255 1260Glu Asp Thr Pro Ile Cys Phe Ser Arg Cys Ser Ser Leu Ser Ser Leu1265 1270 1275 1280Ser Ser Ala Glu Asp Glu Ile Gly Cys Asn Gln Thr Thr Gln Glu Ala

1285 1290 1295Asp Ser Ala Asn Thr Leu Gln Ile Ala Glu Ile Lys Glu Lys Ile Gly

1300 1305 1310Thr Arg Ser Ala Glu Asp Pro Val Ser Glu Val Pro Ala Val Ser Gln

1315 1320 1325His Pro Arg Thr Lys Ser Ser Arg Leu Gln Gly Ser Ser Leu Ser Ser

1330 1335 1340Glu Ser Ala Arg His Lys Ala Val Glu Phe Ser Ser Gly Ala Lys Ser1345 1350 1355 1360Pro Ser Lys Ser Gly Ala Gln Thr Pro Lys Ser Pro Pro Glu His Tyr

1365 1370 1375Val Gln Glu Thr Pro Leu Met Phe Ser Arg Cys Thr Ser Val Ser Ser

1380 1385 1390Leu Asp Ser Phe Glu Ser Arg Ser Ile Ala Ser Ser Val Gln Ser Glu

1395 1400 1405Pro Cys Ser Gly Met Val Ser Gly Ile Ile Ser Pro Ser Asp Leu Pro

1410 1415 1420Asp Ser Pro Gly Gln Thr Met Pro Pro Ser Arg Ser Lys Thr Pro Pro1425 1430 1435 1440Pro Pro Pro Gln Thr Ala Gln Thr Lys Arg Glu Val Pro Lys Asn Lys

1445 1450 1455Ala Pro Thr Ala Glu Lys Arg Glu Ser Gly Pro Lys Gln Ala Ala Val

1460 1465 1470Asn Ala Ala Val Gln Arg Val Gln Val Leu Pro Asp Ala Asp Thr Leu

1475 1480 1485Leu His Phe Ala Thr Glu Ser Thr Pro Asp Gly Phe Ser Cys Ser Ser

1490 1495 1500Ser Leu Ser Ala Leu Ser Leu Asp Glu Pro Phe Ile Gln Lys Asp Val1505 1510 1515 1520Glu Leu Arg Ile Met Pro Pro Val Gln Glu Asn Asp Asn Gly Asn Glu

1525 1530 1535Thr Glu Ser Glu Gln Pro Lys Glu Ser Asn Glu Asn Gln Glu Lys Glu

1540 1545 1550Ala Glu Lys Thr Ile Asp Ser Glu Lys Asp Leu Leu Asp Asp Ser Asp

1555 1560 1565Asp Asp Asp Ile Glu Ile Leu Glu Glu Cys Ile Ile Ser Ala Met Pro

1570 1575 1580Thr Lys Ser Ser Arg Lys Ala Lys Lys Pro Ala Gln Thr Ala Ser Lys1585 1590 1595 1600Leu Pro Pro Pro Val Ala Arg Lys Pro Ser Gln Leu Pro Val Tyr Lys

1605 1610 1615Leu Leu Pro Ser Gln Asn Arg Leu Gln Pro Gln Lys His Val Ser Phe

1620 1625 1630Thr Pro Gly Asp Asp Met Pro Arg Val Tyr Cys Val Glu Gly Thr Pro

1635 1640 1645Ile Asn Phe Ser Thr Ala Thr Ser Leu Ser Asp Leu Thr Ile Glu Ser

1650 1655 1660Pro Pro Asn Glu Leu Ala Ala Gly Glu Gly Val Arg Gly Gly Ala Gln1665 1670 1675 1680Ser Gly Glu Phe Glu Lys Arg Asp Thr Ile Pro Thr Glu Gly Arg Ser

1685 1690 1695Thr Asp Glu Ala Gln Gly Gly Lys Thr Ser Ser Val Thr Ile Pro Glu

1700 1705 1710Leu Asp Asp Asn Lys Ala Glu Glu Gly Asp Ile Leu Ala Glu Cys Ile

1715 1720 1725Asn Ser Ala Met Pro Lys Gly Lys Ser His Lys Pro Phe Arg Val Lys

1730 1735 1740Lys Ile Met Asp Gln Val Gln Gln Ala Ser Ala Ser Ser Ser Ala Pro1745 1750 1755 1760Asn Lys Asn Gln Leu Asp Gly Lys Lys Lys Lys Pro Thr Ser Pro Val

1765 1770 1775Lys Pro Ile Pro Gln Asn Thr Glu Tyr Arg Thr Arg Val Arg Lys Asn

1780 1785 1790Ala Asp Ser Lys Asn Asn Leu Asn Ala Glu Arg Val Phe Ser Asp Asn

1795 1800 1805Lys Asp Ser Lys Lys Gln Asn Leu Lys Asn Asn Ser Lys Asp Phe Asn

1810 1815 1820Asp Lys Leu Pro Asn Asn Glu Asp Arg Val Arg Gly Ser Phe Ala Phe1825 1830 1835 1840Asp Ser Pro His His Tyr Thr Pro Ile Glu Gly Thr Pro Tyr Cys Phe

1845 1850 1855Ser Arg Asn Asp Ser Leu Ser Ser Leu Asp Phe Asp Asp Asp Asp Val

1860 1865 1870Asp Leu Ser Arg Glu Lys Ala Glu Leu Arg Lys Ala Lys Glu Asn Lys

1875 1880 1885Glu Ser Glu Ala Lys Val Thr Ser His Thr Glu Leu Thr Ser Asn Gln

1890 1895 1900Gln Ser Ala Asn Lys Thr Gln Ala Ile Ala Lys Gln Pro Ile Asn Arg1905 1910 1915 1920Gly Gln Pro Lys Pro Ile Leu Gln Lys Gln Ser Thr Phe Pro Gln Ser

1925 1930 1935Ser Lys Asp Ile Pro Asp Arg Gly Ala Ala Thr Asp Glu Lys Leu Gln

1940 1945 1950Asn Phe Ala Ile Glu Asn Thr Pro Val Cys Phe Ser His Asn Ser Ser

1955 1960 1965Leu Ser Ser Leu Ser Asp Ile Asp Gln Glu Asn Asn Asn Lys Glu Asn

1970 1975 1980Glu Pro Ile Lys Glu Thr Glu Pro Pro Asp Ser Gln Gly Glu Pro Ser1985 1990 1995 2000Lys Pro Gln Ala Ser Gly Tyr Ala Pro Lys Ser Phe His Val Glu Asp

2005 2010 2015Thr Pro Val Cys Phe Ser Arg Asn Ser Ser Leu Ser Ser Leu Ser Ile

2020 2025 2030Asp Ser Glu Asp Asp Leu Leu Gln Glu Cys Ile Ser Ser Ala Met Pro

2035 2040 2045Lys Lys Lys Lys Pro Ser Arg Leu Lys Gly Asp Asn Glu Lys His Ser

2050 2055 2060Pro Arg Asn Met Gly Gly Ile Leu Gly Glu Asp Leu Thr Leu Asp Leu2065 2070 2075 2080Lys Asp Ile Gln Arg Pro Asp Ser Glu His Gly Leu Ser Pro Asp Ser

2085 2090 2095Glu Asn Phe Asp Trp Lys Ala Ile Gln Glu Gly Ala Asn Ser Ile Val

2100 2105 2110Ser Ser Leu His Gln Ala Ala Ala Ala Ala Cys Leu Ser Arg Gln Ala

2115 2120 2125Ser Ser Asp Ser Asp Ser Ile Leu Ser Leu Lys Ser Gly Ile Ser Leu

2130 2135 2140Gly Ser Pro Phe His Leu Thr Pro Asp Gln Glu Glu Lys Pro Phe Thr2145 2150 2155 2160Ser Asn Lys Gly Pro Arg Ile Leu Lys Pro Gly Glu Lys Ser Thr Leu

2165 2170 2175Glu Thr Lys Lys Ile Glu Ser Glu Ser Lys Gly Ile Lys Gly Gly Lys

2180 2185 2190Lys Val Tyr Lys Ser Leu Ile Thr Gly Lys Val Arg Ser Asn Ser Glu

2195 2200 2205Ile Ser Gly Gln Met Lys Gln Pro Leu Gln Ala Asn Met Pro Ser Ile

2210 2215 2220Ser Arg Gly Arg Thr Met Ile His Ile Pro Gly Val Arg Asn Ser Ser2225 2230 2235 2240Ser Ser Thr Ser Pro Val Ser Lys Lys Gly Pro Pro Leu Lys Thr Pro

2245 2250 2255Ala Ser Lys Ser Pro Ser Glu Gly Gln Thr Ala Thr Thr Ser Pro Arg

2260 2265 2270Gly Ala Lys Pro Ser Val Lys Ser Glu Leu Ser Pro Val Ala Arg Gln

2275 2280 2285Thr Ser Gln Ile Gly Gly Ser Ser Lys Ala Pro Ser Arg Ser Gly Ser

2290 2295 2300Arg Asp Ser Thr Pro Ser Arg Pro Ala Gln Gln Pro Leu Ser Arg Pro2305 2310 2315 2320Ile Gln Ser Pro Gly Arg Asn Ser Ile Ser Pro Gly Arg Asn Gly Ile

2325 2330 2335Ser Pro Pro Asn Lys Ile Ser Gln Leu Pro Arg Thr Ser Ser Pro Ser

2340 2345 2350Thr Ala Ser Thr Lys Ser Ser Gly Ser Gly Lys Met Ser Tyr Thr Ser

2355 2360 2365Pro Gly Arg Gln Met Ser Gln Gln Asn Leu Thr Lys Gln Thr Gly Leu

2370 2375 2380Ser Lys Asn Ala Ser Ser Ile Pro Arg Ser Glu Ser Ala Ser Lys Gly2385 2390 2395 2400Leu Asn Gln Met Asn Asn Gly Asn Gly Ala Asn Lys Lys Val Glu Leu

2405 2410 2415Ser Arg Met Ser Ser Thr Lys Ser Ser Gly Ser Glu Ser Asp Arg Ser

2420 2425 2430Glu Arg Pro Val Leu Val Arg Gln Ser Thr Phe Ile Lys Glu Ala Pro

2435 2440 2445Ser Pro Thr Leu Arg Arg Lys Leu Glu Glu Ser Ala Ser Phe Glu Ser

2450 2455 2460Leu Ser Pro Ser Ser Arg Pro Ala Ser Pro Thr Arg Ser Gln Ala Gln2465 2470 2475 2480Thr Pro Val Leu Ser Pro Ser Leu Pro Asp Met Ser Leu Ser Thr His

2485 2490 2495Ser Ser Val Gln Ala Gly Gly Trp Arg Lys Leu Pro Pro Asn Leu Ser

2500 2505 2510Pro Thr Ile Glu Tyr Asn Asp Gly Arg Pro Ala Lys Arg His Asp Ile

2515 2520 2525Ala Arg Ser His Ser Glu Ser Pro Ser Arg Leu Pro Ile Asn Arg Ser

2530 2535 2540Gly Thr Trp Lys Arg Glu His Ser Lys His Ser Ser Ser Leu Pro Arg2545 2550 2555 2560Val Ser Thr Trp Arg Arg Thr Gly Ser Ser Ser Ser Ile Leu Ser Ala

2565 2570 2575Ser Ser Glu Ser Ser Glu Lys Ala Lys Ser Glu Asp Glu Lys His Val

2580 2585 2590Asn Ser Ile Ser Gly Thr Lys Gln Ser Lys Glu Asn Gln Val Ser Ala

2595 2600 2605Lys Gly Thr Trp Arg Lys Ile Lys Glu Asn Glu Phe Ser Pro Thr Asn

2610 2615 2620Ser Thr Ser Gln Thr Val Ser Ser Gly Ala Thr Asn Gly Ala Glu Ser2625 2630 2635 2640Lys Thr Leu Ile Tyr Gln Met Ala Pro Ala Val Ser Lys Thr Glu Asp

2645 2650 2655Val Trp Val Arg Ile Glu Asp Cys Pro Ile Asn Asn Pro Arg Ser Gly

2660 2665 2670Arg Ser Pro Thr Gly Asn Thr Pro Pro Val Ile Asp Ser Val Ser Glu

2675 2680 2685Lys Ala Asn Pro Asn Ile Lys Asp Ser Lys Asp Asn Gln Ala Lys Gln

2690 2695 2700Asn Val Gly Asn Gly Ser Val Pro Met Arg Thr Val Gly Leu Glu Asn2705 2710 2715 2720Arg Leu Asn Ser Phe Ile Gln Val Asp Ala Pro Asp Gln Lys Gly Thr

2725 2730 2735Glu Ile Lys Pro Gly Gln Asn Asn Pro Val Pro Val Ser Glu Thr Asn

2740 2745 2750Glu Ser Ser Ile Val Glu Arg Thr Pro Phe Ser Ser Ser Ser Ser Ser

2755 2760 2765Lys His Ser Ser Pro Ser Gly Thr Val Ala Ala Arg Val Thr Pro Phe

2770 2775 2780Asn Tyr Asn Pro Ser Pro Arg Lys Ser Ser Ala Asp Ser Thr Ser Ala2785 2790 2795 2800Arg Pro Ser Gln Ile Pro Thr Pro Val Asn Asn Asn Thr Lys Lys Arg

2805 2810 2815Asp Ser Lys Thr Asp Ser Thr Glu Ser Ser Gly Thr Gln Ser Pro Lys

2820 2825 2830Arg His Ser Gly Ser Tyr Leu Val Thr Ser Val

2835 2840(2)SEQ ID NO：31的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：65碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：其它核酸

(iii)假设：否

(iv)反义：否

(xi)序列描述：SEQ ID NO：31：CGGAATTCNN NNNNNNNAAC AGCNNNNNNN NNAATGAANN NCAAAGTCTG NNNTGAGGAT 60CCTCA 65(2)SEQ ID NO：32的信息：

(i)序列特征：

(A)长度：65碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：其它核酸

(iv)反义：否

(xi)序列描述：SEQ ID NO：32：CGGAATTCGA CTCAGAANNN NNNAACTTCA GANNNNNNAT GTCTGAGGAT 60CCTCA 65(2)SEQ ID NO：33的信息：

(1)序列特：

(A)长度：65碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单链

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：其它核酸

(iv)反义：否

(xi)序列描述：SEQ ID NO：33：CGGAATTCNN NNNNNNNNNN NNNNNNNNNN NNNNNNNNNN NNNNNNNNNN NNNTGAGGAT 60CCTCA 65

Claims

1.一种组合物，它能抑制一种信号传导蛋白和一种含有(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列的胞浆蛋白之间的特异结合，其中，每个“-”代表一个肽键，每个括号内包含可以相互替换的氨基酸，以及括号内斜线分开的可相互替换的氨基酸。

2.权利要求1的组合物，其中，该胞浆蛋白含有(K/R/Q)-X_n-(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列，“X”代表任何氨基酸，该氨基酸是从一组含有20种天然存在的氨基酸中选择出来的，“n”大于等于2，小于等于4。

3.权利要求1的组合物，在该组合物中胞浆蛋白含有SLGI氨基酸序列。

4.权利要求1的组合物，在该组合物中信号传导蛋白的羧基端具有(S/T)-X-(V/I/L)氨基酸序列，在该序列中每个“-”代表一个肽键，每个括号内包含可以相互替换的氨基酸，以及括号内斜线分开可相互替换的氨基酸，“X”代表任何氨基酸，该氨基酸是从一组含有20种天然存在的氨基酸中选择出来的。

5.权利要求1的组合物，其中，该组合物包括一种抗体，一种无机化合物，一种有机化合物，一种肽，一种模拟肽，一种多肽，或一种蛋白质。

6.权利要求5的组合物，其中，该肽包含(s/T)-X-(V/I/L)-COOH序列，在该序列中每个“-”代表一个肽键，每个括号包含可以相互替换的氨基酸，以及括号内斜线分开可相互替换的氨基酸，“X”代表任何氨基酸，该氨基酸是从一组含有20种天然存在的氨基酸中选择出来的。

7.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含DSENSNFRNEIQSLV氨基酸序列。

8.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含RNEIQSLV氨基酸序列。

9.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含NEIQSLV氨基酸序列。

10.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含EIQSLV氨基酸序列。

11.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含IQSLV氨基酸序列。

12.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含QSLV氨基酸序列。

13.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含SLV氨基酸序列。

14.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含IPPDSEDGNEEQSLV氨基酸序列。

15.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含DSEMYNFRSQLASVV氨基酸序列。

16.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含IDLASEFLFLSNSFL氨基酸序列。

17.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含PPTCSQANSGRISTL氨基酸序列。

18.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含SDSNMNMNELSEV氨基酸序列。

19.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含QNFRTYIVSFV氨基酸序列。

20.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含RETIESTV氨基酸序列。

21.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含RGFISSLV氨基酸序列。

22.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含TIQSVI氨基酸序列。

23.权利要求6的组合物，在该组合物中，这种肽含ESLV氨基酸序列。

24.权利要求6的组合物，在该组合物中，该有机化合物具有Ac-SLV-COOH序列，而Ac代表乙酰基，每个“-”代表一个肽键。

25.一种组合物，它能够抑制信号传导蛋白和一种胞浆蛋白之间的特异结合，该信号传导蛋白的羧基端具有氨基酸序列(S/T)-X-(V/I/L)，该序列中每个“-”代表一个肽键，每个括号内包含的氨基酸是可以相互替换的，每个括号内用“/”分开的氨基酸是可以相互替换的，“X”代表任何一种氨基酸，该氨基酸是从一组含有20种天然存在的氨基酸中选择出来的。

26.权利要求25的组合物，其中，该组合物包括一种抗体，一种无机化合物，一种有机化合物，一种肽，一种模拟肽化合物，一种多肽或蛋白质。

27.一种鉴定一种化合物的方法，该化合物能抑制信号传导蛋白和胞浆蛋白之间特异结合，该胞浆蛋白含有(G/S/A/E)-L-G-(F/I/L)氨基酸序列，在该序列中每个“-”代表一个肽键，每个括号内包含的氨基酸是可以相互替换的，每个括号内用“/”分开的氨基酸是可以相互替换的，该方法包括(a)，在允许一种已知的化合物和被结合的胞浆蛋白之间结合形成复合物的条件下，该化合物曾经显示能替换结合了胞浆蛋白信号-传导蛋白，将已结合了信号-传导蛋白的胞浆蛋白的与各种已知的化合物接触；和(b)鉴定步骤(a)中被替换的信号-传导蛋白或形成的复合物，其中，替换作用表示这种化合物能抑制信号-传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合。

28.权利要求27的方法，其中，该信号传导蛋白和该胞浆蛋白之间的特异结合的抑制影响报告基因的转录活性。

29.权利要求28的方法，在步骤(b)中被替换的信号传导蛋白或该复合物的检测是通过比较步骤(a)中与该化合物接触前后报告基因的转录活性来进行的，其中该活性的改变表明该信号传导蛋白和该胞浆蛋白之间的特异结合被抑制而该信号传导蛋白被替换。

30.权利要求27的方法，该方法中胞浆蛋白是结合到固相支持物上。

31.权利要求27的方法，该方法中化合物是结合到固相支持物上。

32.权利要求27的方法，其中该化合物包含一种抗体、一种无机化合物、一种有机化合物、一种肽、一种模拟肽化合物、一种多肽或蛋白质。

33.权利要求27的方法，该方法中步骤(a)中的接触是在体外进行的。

34.权利要求27的方法，该方法中步骤(a)中的接触是在体内进行的。

35.权利要求34的方法，该方法中步骤(a)中的接触是在酵母细胞中进行的。

36.权利要求34的方法，该方法中步骤(a)中的接触是在哺乳类细胞中进行的。

37.权利要求27的方法，其中，该信号传导蛋白是一种细胞表面蛋白。

38.权利要求27的方法，该方法中该信号传导蛋白是一种信号传导子蛋白。

39.权利要求27的方法，其中，该信号传导蛋白是一种肿瘤抑制蛋白。

40.权利要求37的方法，该方法中该细胞表面蛋白是Fas受体。

41.权利要求40的方法，该方法中该Fas受体是在来自包括胸腺、肝脏、肾脏、肠、卵巢、乳腺、睾丸、脾脏、胃、前列腺、子宫、皮肤、头、和颈器官的细胞中表达的。

42.权利要求40的方法，该方法中Fas受体是在包括T细胞和B细胞的细胞中表达的。

43.权利要求37的方法，该方法中细胞表面受体是CD4受体。

44.权利要求37的方法，该方法中细胞表面受体是p75受体。

45.权利要求37的方法，该方法中细胞表面受体是血小板素2A受体。

46.权利要求37的方法，该方法中细胞表面受体是血小板素2B受体。

47.权利要求38的方法，该方法中信号传导蛋白是蛋白激酶C-α型。

48.权利要求39的方法，该方法中肿瘤抑制蛋白是腺上皮息肉肠肿瘤抑制蛋白。

49.权利要求39的方法，该方法中肿瘤抑制蛋白的蛋白是结肠直肠突变癌蛋白。

50.权利要求27的方法，该方法中该胞浆蛋白含有SLGI氨基酸序列，在该序列中每个“-”代表一个肽键，每个括号内包含可以相互替换的氨基酸，每个括号内用“/”分开的氨基酸是可以相互替换的。

51.权利要求40的方法，该方法中该胞浆蛋白是Fas结合的磷酸酶-1。

52.一种鉴定一种化合物的方法，该化合物能够抑制在羧基端有(S/T)-X-(V/I/L)氨基酸序列的信号传导蛋白和一种胞浆蛋白之间的特异结合，在该氨基酸序列中每个“-”代表一个肽键，每个括号包含可相互替换的氨基酸，每个“/”分开的氨基酸是可以相互替换的，“X”代表任何氨基酸，该氨基酸是从一组含有20种天然存在的氨基酸中选择出来的，包括：

(a)在允许一种已知的化合物和被结合的信号传导蛋白之间形成复合物的条件下，该化合物曾经显示能替换结合于信号-传导蛋白的胞浆蛋白，将已结合了该胞浆蛋白的信号-传导蛋白与各种化合物接触；和(b)鉴定步骤(a)中被替换的胞浆蛋白或形成的复合物，其中，替换作用表示这种化合物能抑制信号-传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合。

53.权利要求52的方法，其中，信号传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合的抑制影响报告基因的转录活性。

54.权利要求53的方法，在步骤(b)中被替换的胞浆蛋白或复合物的检测是通过比较步骤(a)中与化合物接触前后，报告基因的转录活性来进行的，其中该活性的改变表明信号传导蛋白和胞浆蛋白之间的特异结合被抑制以及胞浆蛋白被替换。

55.权利要求52的方法，该方法中胞浆蛋白是结合到固相支持物上。

56.权利要求52的方法，该方法中化合物是结合到固相支持物上。

57.权利要求52的方法，该方法中该化合物包括一种抗体、一种无机化合物、一种有机化合物、一种肽、一种模拟肽化合物、一种多肽或蛋白质。

58.权利要求52的方法，该方法中步骤(a)中的接触是在体外进行的。

59.权利要求52的方法，该方法中步骤(a)中的接触是在体内进行的。

60.权利要求59的方法，该方法中步骤(a)中的接触是在酵母细胞中进行的。

61.权利要求59的方法，该方法中步骤(a)中的接触是在哺乳类细胞中进行的。

62.权利要求52的方法，其中，该信号传导蛋白是一种细胞表面受体。

63.权利要求52的方法，该方法中该信号传导蛋白是一种信号传导子蛋白。

64.权利要求52的方法，其中，该信号传导蛋白是一种肿瘤抑制蛋白。

65.权利要求62的方法，该方法中该细胞表面蛋白是Fas受体。

66.权利要求65的方法，该方法中Fas受体是在来自包括胸腺、肝脏、肾脏、肠、卵巢、乳腺、睾丸、脾脏、胃、前列腺、子宫、皮肤、头、和颈器官的细胞中表达的。

67.权利要求65的方法，该方法中该Fas受体是在含有T细胞和B细胞的细胞中表达的。

68.权利要求62的方法，该方法中细胞表面受体是CD4受体。

69.权利要求62的方法，该方法中细胞表面受体是p75受体。

70.权利要求62的方法，该方法中细胞表面受体是血小板素2A受体。

71.权利要求62的方法，该方法中细胞表面受体是血小板素2B受体。

72.权利要求63的方法，该方法中信号传导蛋白是蛋白激酶C-α型。

73.权利要求64的方法，该方法中肿瘤抑制蛋白是腺上皮息肉肠肿瘤抑制蛋白。

74.权利要求64的方法，该方法中肿瘤抑制蛋白是结肠直肠突变癌蛋白。

75.权利要求52的方法，该方法中该胞浆蛋白含有SLGI氨基酸序列，在该序列中每个“-”代表一个肽键，每个括号包含可以相互替换的氨基酸，每个括号内用“/”分开的氨基酸是可以相互替换的。

76.权利要求52的方法，该方法中该胞浆蛋白是Fas结合的磷酸酶-1。

77.一种包含权利要求1组合物的抑制癌细胞增殖的方法。

78.权利要求77的方法，该方法中癌细胞来自包括胸腺、肝脏、肾脏、肠、卵巢、乳腺、睾丸、脾脏、胃、前列腺、子宫、皮肤、头、和颈的器官。

79.权利要求77的方法，该方法中癌细胞来自包括T细胞和B细胞的细胞。

80.一种包含权利要求25组合物的抑制癌细胞增殖的方法。

81.权利要求80的方法，该方法中癌细胞来自包括胸腺、肝脏、肾脏、肠、卵巢、乳腺、睾丸、脾脏、胃、前列腺、子宫、皮肤、头、和颈的器官。

82.权利要求80的方法，该方法中癌细胞来自包括T细胞和B细胞的细胞。

83.一种包含了通过权利要求27的方法所鉴定的化合物的抑制癌细胞增殖的方法。

84.权利要求83的方法，该方法中癌细胞来自包括胸腺、肝脏、肾脏、肠、卵巢、乳腺、睾丸、脾脏、胃、前列腺、子宫、皮肤、头、和颈的器官。

85.权利要求83的方法，该方法中癌细胞来自包括T细胞和B细胞的细胞。

86.一种包含了通过权利要求52的方法所鉴定的化合物的抑制癌细胞增殖的方法。

87.权利要求86的方法，该方法中癌细胞来自包括胸腺、肝脏、肾脏、肠、卵巢、乳腺、睾丸、脾脏、胃、前列腺、子宫、皮肤、头、和颈的器官。

88.权利要求86的方法，该方法中癌细胞来自包括T细胞和B细胞的细胞。

89.一种对患者治疗肿瘤的方法，包括向患者的癌细胞中导入可有效使该细胞凋亡的量的权利要求1的组合物。

90.权利要求89的方法，该方法中癌细胞来自包括胸腺、肝脏、肾脏、肠、卵巢、乳腺、睾丸、脾脏、胃、前列腺、子宫、皮肤、头、和颈的器官。

91.权利要求89的方法，该方法中癌细胞来自包括T细胞和B细胞的细胞。

92.一种对患者治疗肿瘤的方法，包括向患者的癌细胞中导入可有效使该细胞凋亡的量的权利要求25的组合物。

93.权利要求92的方法，该方法中癌细胞来自包括胸腺、肝脏、肾脏、肠、卵巢、乳腺、睾丸、脾脏、胃、前列腺、子宫、皮肤、头、和颈的器官。

94.权利要求92的方法，该方法中癌细胞来自包括T细胞和B细胞的细胞。

95.一种对患者治疗肿瘤的方法，包括向患者的癌细胞中导入可有效使该细胞凋亡的量的权利要求27的方法鉴定出的化合物。

96.权利要求95的方法，该方法中癌细胞来自包括胸腺、肝脏、肾脏、肠、卵巢、乳腺、睾丸、脾脏、胃、前列腺、子宫、皮肤、头、和颈的器官。

97.权利要求95的方法，该方法中癌细胞来自包括T细胞和B细胞的细胞。

98.一种对患者治疗肿瘤的方法，包括向患者的癌细胞中导入可有效使该细胞凋亡的量的权利要求52的方法签定的化合物。

99.权利要求98的方法，该方法中癌细胞来自包括胸腺、肝脏、肾脏、肠、卵巢、乳腺、睾丸、脾脏、胃、前列腺、子宫、皮肤、头、和颈器的器官。

100.权利要求98的方法，该方法中癌细胞来自包括T细胞和B细胞的细胞。

101.一种包含权利要求1的组合物的抑制病毒感染细胞增殖的方法。

102.一种包含权利要求25的组合物的抑制病毒感染细胞增殖的方法。

103.一种包含通过权利要求27的方法鉴定的化合物的抑制病毒感染细胞增殖的方法。

104.一种包含通过权利要求52的方法鉴定的化合物的抑制病毒感染细胞增殖的方法。

105.权利要求101的方法，该方法中病毒感染细胞包括B型肝炎病毒、EB病毒、流感病毒、乳头瘤病毒、腺病毒、人T细胞亲淋巴病毒1型或HIV。

106.权利要求102的方法，该方法中病毒感染细胞包括B型肝炎病毒、EB病毒、流感病毒、乳头瘤病毒、腺病毒、人T细胞亲淋巴病毒1型或HIV。

107.权利要求103的方法，该方法中病毒感染细胞包括B型肝炎病毒、EB病毒、流感病毒、乳头瘤病毒、腺病毒、人T细胞亲淋巴病毒1型或HIV。

108.权利要求104的方法，该方法中病毒感染细胞包括B型肝炎病毒、EB病毒、流感病毒、乳头瘤病毒、腺病毒、人T细胞亲淋巴病毒1型或HIV。

109.一种治疗病毒感染患者的方法，包括向患者的病毒感染的细胞中导入可有效使该细胞凋亡的量的权利要求1的组合物。

110.一种治疗病毒感染方法，包括向患者的病毒感染的细胞中导入可有效使该细胞凋亡的量的权利要求25的组合物。

111.一种治疗病毒感染方法，包括向患者的病毒感染的细胞中导入可有效使该细胞凋亡的量的权利要求27的方法鉴定出的化合物。

112.一种治疗病毒感染方法，包括向患者的病毒感染的细胞中导入可有效使该细胞凋亡的量的权利要求52的方法鉴定出的化合物。

113.权利要求109的方法，该方法中病毒感染细胞包括B型肝炎病毒、EB病毒、流感病毒、乳头瘤病毒、腺病毒、人T细胞亲淋巴病毒1型或HIV。

114.权利要求110的方法，该方法中病毒感染细胞包括B型肝炎病毒、EB病毒、流感病毒、乳头瘤病毒、腺病毒、人T细胞亲淋巴病毒1型或HIV。

115.权利要求111的方法，该方法中病毒感染细胞包括B型肝炎病毒、EB病毒、流感病毒、乳头瘤病毒、腺病毒、人T细胞亲淋巴病毒1型或HIV。

116.权利要求112的方法，该方法中病毒感染细胞包括B型肝炎病毒、EB病毒、流感病毒、乳头瘤病毒、腺病毒、人T细胞亲淋巴病毒1型或HIV。

117.一种药物组合物，包含有效量的权利要求1的组合物和一种药用可接受的载体。

118.一种药物组合物，包含有效量的权利要求25的组合物和一种药用可接受的载体。

119.一种药物组合物，包含有效量的权利要求27的方法鉴定出的化合物和一种药用可接受的载体。

120.一种药物组合物，包含有效量的权利要求52的方法鉴定出的化合物和一种药用可接受的载体。