CN1211898A - 水面漂浮性微生物农药 - Google Patents

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Abstract

水漂浮性微生物农药,其特征为含有微生物,W/O型表面活性剂及具低散装比重的粉末;使用该农药的方法,其特征即在稻田中施用农药;以及制备该农药的方法,其特征为在水中悬浮微生物,在悬浮液中添加包含W/O型表面活性剂的油,然后混合,接下来再在其中添加低散装比重的粉末以获得微生物农药。

Description

水面漂浮性微生物农药
发明的技术领域
本发明涉及一种水漂浮微生物农药制备这种微生物农药的方法以及使用这种微生物农药的方法。
发明背景
为了控制杂草,人们主要利用化学农药。然而在过去数年中过量使用化学农药带来了包括环境污染在内的严重问题,因此需要发展不含化学物质的杂草控制剂及相应的使用方法。而利用杂草病原微生物的微生物农药尤其受到青睐。到目前为止已经登记注册了一些商业应用的微生物农药,包括美国生产的除绞杀藤(Stranglervine,萝藦料)的除草剂“DEVINE”,除北方合荚(Northemjointvetch,豆科)的除草剂“Collego”,加拿大生产的除圆叶锦葵(Round-leaved mallow,锦葵科)的除草剂“Biomal”。
“Collego”常常是成套出售的,它包括作为有效成份的含有孢子的粉末,以及用以悬浮粉末的含蔗糖的溶液,在使用之前这两种成份必须彼此混合而且溶于水中,这需要不少工作量。而且用这种配方易于使粉末散发到空气中去。另一方面,“DEVINE”以微生物细胞浓缩液的形式出售。这种农药也有一个缺点,那就是它不能保存较长时间[杂草科学(Weed Science)34(Suppl.1)(1986):15-16]。
近年来,美国和加拿大研究了一种W/O型的表面活化剂(乳化剂)的使用[杂草技术(Weed Technology)5,(1991):442-444],目的是使上述的微生物农药能应用于耕地,提高微生物农药对目标杂草的附着特性以及在杂草叶面存留水份的传送以使微生物农药更易于渗透到寄主杂草中去。W/O型的表面活化剂一向主要用于美容学和食品领域而且一般商业上就可得到。然而这些表面活性剂在农药上几乎没有应用。应用W/O型表面活性剂时,成品农药必须用一种特别设计的撒布器施用,而这种在实际应用中有不便。而且,当从植物油原液来的卵磷脂被用作W/O型表面活化剂时,每批产品之间卵磷脂含量的差异,原液的颜色差异以及卵磷脂产品的恶臭都会带来卵磷脂产品质量控制上的问题。因此,这种配方还未在实践中应用。
另一方面,近年来在日本人们也研究了以杂草病原微生物作微生物农药的问题。在抗稗(Echinochloa crusgalli)的微生物除草剂方面的发展尤其领先。例如,在能应用于稻田的微生物杀虫剂中,对Cochliobolus lunatus[WeedResearch(1987),27,43-47;日本专利申请公开号5-284963]有效的成份,对Ustilago trichophora有效的成份[WO 93/05656],对Drechsleramonoceras(别名尖角脐突孢(Exserohilum monoceras))有效的成份[日本专利申请公开号3-219883,4-226905,4-360678,4-370090,6-277042,6-329513,6-247822,7-31467,7-79784,8-175917]都是已知的。也有建议把含抗稗病原微生物的除草剂单独形成配方或者以那种配制传统化学除草剂相似的方法[日本专利申请公开号4-226905-4和4-360678]来把病原微生物和传统的化学除草剂基本成份联合形成配方。然而,这些配方和那些传统化学除草剂有相同的形式。例如,粒状形式倾向于沉积在漂浮于水中的稻子上,导致包含在粒状制剂中的病原微生物很少有机会附着到稗叶上,造成除草剂的低活性。可湿粉剂也被发现有些问题,例如在土壤中的扩散能力不均匀,在用水稀释以使用时会观察到粉状物能扩散到空气中,诸如此类。另外,这种可湿粉剂由于处置和管理上的不便还未用作稻田除草剂。液体配方包括漂浮液配方(floable formulation)也有像保存特性差这样的缺点。油状配方也曾发展过,它被设计来在水面上扩散其所包含的病原微生物[日本专利申请公开号6-179243]。但是,由于应作危险材料对待,该油状配方在储存中有问题。而且,在日本专利申请公开号6-179243所公开的这种油剂配方中,风会对这种液滴在稻田中的应用产生不良影响,因此当飞溅并附着到栽培水稻植株的叶片表面时就会伤害水稻植株。为了控制稻田杂草(例如稗)或昆虫类害虫(如稻象甲(Lissorphoptrus orvzophilue)),众所周知在水面攻击杂草或害虫是比较有效的。根据这种知识,人们发展了水悬浮化学农药[日本专利申请公开号5-78204],载体使用玻璃状矿物和浮石。然而,这种载体物质对微生物农药的配方就不再有用了,因为它们对微生物的附着性能比较差。
发明要解决的问题
如上所述,配制农药的传统方法不能给水面漂浮性微生物农药提供易于处置的特性和出色的保存特性。发明公开
在这些情况下,为了解决传统化学农药应用于稻田时包括环境污染在内的问题,本发明人作了广泛深刻的研究以开发应用于淹没状态下稻田里具有易于处置特性的微生物农药。最终本发明人发现了一种微生物农药,它能在水面上象油剂和漂浮剂(floable formulations)一样快速扩散,在水上漂浮,并发挥除虫剂和刹虫剂的效应,其以包含W/O型(油包水型)的表面活性剂包裹微生物然后以粉或粒状有低散装比重(bulk specific gravity)的粉剂包裹有油剂包被的微生物而制成。
因此,本发明涉及一种水浮游的微生物农药,包括一种微生物,一种W/O型表面活性剂,油,以及低散装比重(low bulk specific gravity)的粉末,一种制备微生物农药的方法以及一种使用微生物农药的方法。
与传统的粒状农药不同,本发明的微生物农药在水中不沉淀而能漂浮一长段时间,因此能有效地作用于杂草,如稗(Echinochloa crus-galli),以及昆虫类害虫,如稻象甲(Lissorphotrus Orvzophilue)。而且,与传统的悬浮性农药和油剂型农药不同,本发明的微生物农药在储存和处置方面没有问题。另外,由于本发明利用微生物作为有效成份,它对环境的影响极其轻微。
下面将对本发明作更加详细的描述。
本发明微生物农药的制备
本发明中的微生物农药可通过下述方式制备:把微生物悬浮于水中,把包含W/O型表面活性剂的油剂加到所形成的悬浮液中并混合,然后把有小比重的粉末加到混合物中。
本发明中所使用的微生物可以是任何一种微生物,只要它在微生物农药中能充当有效成份就行。这种微生物包括那些具有除草剂活性的,具有杀虫活性的以及那些具抗微生物活性的微生物。具有除草活性的微生物的具体例子包括支顶孢属、链格孢属、Bipolaris、头孢属、尾孢属、旋孢霉属(Cochlioborus)、毛盘孢属(刺盘孢属)、弯孢属、Drechslera、Epicoccosorus、Exserohirum、镰孢属、Nimbya、疫霉属、柄锈菌属(双孢锈菌属)、核盘菌属和黑粉菌属的真菌。在这些真菌中,优选的是尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)B026、尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)B232、尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)B263、尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)B267、尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)B276、所有这些菌都于1993年3月15日保存在工业科学技术局,国家生物科学和人类技术所(1-3,Higashi l-chome,Tsukuba-shi,Ibaraki-Ken,Japan)其入藏登记号分别是FERM BP-4215,FERM BP-4217,FERM BP-4218,FERM BP-4219及FERM BP-4220;尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-012、尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-013、尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-799、Exserhohilum monoceras JTB-803、尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808、所有这些菌都于1995年10月27日保存在工业科学技术局,国家生物科学和人类技术所(1-3,Higashil-Chome,Tsukuba-shi,Ibaraki-Ken,Japan),其入藏登记号分别是FERM BP-5271,FERM BP-5272,FERM BP-5273,FERM BP-5274,及FERM BP-5275;弯孢属(Curvularia)Sp.B-261、Curvularia Sp.B-236、Curvularia Sp.B-245、都于1992年3月4日保存在工业科学技术局,国家生物科学与人类技术所(1-3,Higashi 1-Chome,Tsukuba-shi,Ibaraki-Ken,Japan),其入藏登记号别是FERM BP-4249,FERMBP-4248及FERM BP-4247;Nimbya Scirpicola K-004于1990年6月2日保存在工业科学技术局,国家生物科学与人类技术所(1-3,Higashi1-chome,Tsukuba-shi,Ibaraki-Ken,Japan),入藏登记号是FERMBP-4448,Epicoccosorus nematosporus K-0351993年11月25日保存于工业科学技术局,国家生物科学与人类技术所(1-3,Higashi 1-chome,Tsukubashi,Ibaraki-Ken,Japan),其入藏登记号是FERM BP-4477。这些微生物的分生孢子具有疏水的表面。因此利用干燥状态下的孢子就可能具有一个缺点,那就是它们容易散发到空气中去。本发明的方法能够改善这种缺陷并且使得处理这种干燥的分生孢子变得容易和安全。这些微生物以无性孢子如分生孢子的形式来优选地利用,但也可以以有性孢子如菌丝体的形式来利用。在本项发明中,只要微生物能在成品农药中提供符合要求的农药特性,对它的数量就没有什么特别的限制而且可随所利用微生物种类的不用而有变化。例如,当利用尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)的分生孢子时,微生物农药配方中的优选的分生孢子终浓度是1×103-1×109个分生孢子/克,更优选地为1×105-1×108分生孢子/克;而使用弯孢属时,该浓度为1×105到1×1012个分生孢子/克,更加优选的浓度是1×107到1×1010个分子孢子/克。本发明的微生物农药中所利用的微生物孢子能够以任何一种传统的方法制备。比如来自Exserohilum属的微生物分生孢子就可以很方便地通过以下方法制备:在麦片蔗糖琼脂培养基或V8液琼脂培养基或其它培养基上接种微生物细胞,然后在25℃孵育20天。
本发明中微生物可以直接用油剂包被。但是,在以油剂包被微生物之前把微生物和矿物载体进行混合是优选的。对所用矿物载体的类型并没有特别的限制,但优选的是象硅藻土、沸石、白炭一类多孔类型的矿物。用矿物载体包被微生物可以通过矿物载体供给微生物生长所需的空气和水分,因而提高成品农药中微生物的持久性。本发明中更加优选的是在微生物和矿物油的混合物中结合上一种粘合剂以改善矿物载体对微生物的粘附特性。这种粘合剂的一些实例包括可溶性淀粉、阿拉伯树胶、黄原胶、角叉胶、木素磺酸盐、羟乙基纤维素(HEC)和羧甲基纤维素(CMC)等。
本发明中使用的油的实例包括植物油但不仅仅局限于此,这些植物油包括大豆油、菜子油、蓖麻油、棉花籽油、米糠油、棕榈油、橄榄油、红花油和西蒙得木油(jojoba oil);矿物油包括锭子油、重白油、轻白油、溶剂油(mineralspirit)、矿质松节油、环烷油、石蜡油及用于微生物农药的机器油;硅(氧烷)油及其它含硅的油;诸如此类。油的用量也并不特别限制。然而,成品微生物农药中油的优选用量是成品微生物农药重量的10%到70%,更优选的用量是10%到50%。
本项发明中,在把油与微生物混合之前,先把它与W/O型表面活性剂混合。表面活性剂的类型也没有什么特别限定,只要它具有低的HLB(亲水亲脂平衡)值就可以。但是,使用HLB值范围在3-7之间的表面活性剂是优选的。优选的表面活化剂是那些非离子型的表面活化剂,包括聚硬脂酸甘油酯型、聚油酸甘油酯型、单甘油酯型、硬脂酸脱水山梨糖酯型、油酸脱水山梨糖酯型、脱水山梨糖酯型、壬基酚型和脂肪酸甘油酯类型的表面活化剂。这些表面活性剂的实例包括:聚硬脂酸甘油酯类型的“HostacerinWOL”[聚2-倍半异硬脂酸甘油酯(Polyglycery-2-Sesquisisostearate)](Hoechst),聚油酸甘油酯类型的“Hostacerin DGO”[聚2-倍半异油酸甘酸酯(Polyglyceryl-2-Sesquiisooleate)](Hoechst);单甘油酯类型的“Kadenax GS-90”(Lion Corporation);硬脂酸脱水山梨糖酯类型的“Leodol SP-S10”[单硬脂酸脱水山梨糖酯](Kao Corporation),“Leodol AS-10”[单硬脂酸脱水山梨糖酯](Kao Corporation),“Emasol S-10”[单硬脂酸脱水山梨糖酯](Kao Corporation)以及“Emasol S-20”[二硬脂酸脱水山梨糖酯](Kao Corporation);油酸脱水山梨糖酯类型,“LeodolSP-010”[单油酸脱水山梨糖酯](Kao Corporation),“Leodol AO-10”[单油酸脱水山梨糖脂](Kao Corporation)“Emasol O-10”[单油酸脱水山梨糖酯](Kao Corporation)以及“Emasol O-15R”[倍半油酸脱水山梨糖酯](KaoCorporation),脱水山梨糖酯型,“Kadenax SO-80”(Lion Corporation)及“Kadenax SO-80C”(Lion Corporation);壬基酚型的“Liponox NC-10”(LionCorporation),“Liponox NC-20”(Lion Corporation);以及脂肪酸甘油酯。
表面活性剂的用量也并不限定。但是,表面活性剂的优选用量微生物农药总重量的0.1%到10%之间,更优选的用量是1%-5%。
另外,可以在油剂和W/O型表面活性剂的混合物间添加粘度改良剂以控制油的粘度。这类粘度改良剂的实例包括羊毛脂、凡士林、蜂蜡和甘油。粘度改良剂的用量也没有特别的限定。但是,粘度改良剂的优选用量是成品微生物农药总重量的0%-60%,更优选的用量是5-20%。
本发明的微生物农药中,可以添加基于邻苯二甲酸的化合物如邻苯二甲酸二异壬酯(DINP),邻苯二甲酸二异癸酯(DIDP)和邻苯二甲酸二辛酯(DOP)以改善成品微生物农药在水面上的释放特性。这类化合物的用量是没有限定的。但是,这类化合物的优选用量是成品微生物农药总重的0-20%,更优选的用量是5-15%。
本发明中,象铝或镁的硬脂酸盐或三脂酸甘油酯这样的乳液稳定剂也可以用来在微生物农药中稳定油剂的W/O型表面活化剂。这种乳液稳定剂的用量并不特别限定。但是其优选用量是成品微生物农药重量的0-5%。更优选的用量是0-2%。
除了上述提到的成份之外,本发明的微生物农药可含有按照要求的其它的添加剂。这种添加剂的实例包括氮源(例如,硝酸盐、氨、氨基酸等)以及对微生物生长有效应的碳源;能加速微生物孢子萌发的物质(例如,羧甲基纤维素的钠盐,萘基磺钠酸-甲醛缩合物,聚乙二醇等);湿润剂(如透明质酸一类的多糖、胶原蛋白、氨基酸、蛋白质、甘油、油和脂等);诸如此类。
本发明中使用的低散装比重的粉末,只要其比重不超过1,任何一种粉末都可以。然而这类优选的粉末是白炭(如“Carplex67”和“Carplex80”,它们是Shionogi&Co.,Ltd的产品;“Hisil233”,它是Sanyo Trading Co.,Ltd.的产品,等等)及活性炭。对粉末的用量没有特别的限制。但是优选用量是成品微生物农药总重量的10-80%,更优选的用量是30-60%。
上述成分经过混合、干燥然后研磨从而得到了本发明中的粉末或粒状形式的微生物农药。
本发明生产微生物农药的生产方法将通过参照图1在下文进行描述。
所用的微生物的孢子1一般散装比重大于1或更高并且它本身在水中并不漂浮(图1a)。在孢子1的悬浮液中加入粘合剂(如羧甲基纤维素)和矿物载体(如硅藻土)从而使得矿物载体的微粒2能够附着到孢子1的边缘上(图1.b)。接着,把内含W/O型表面活化剂的油剂(具体比重:约0.7)加到孢子1的悬浮液中并进行混合以形成包围孢子1的油层3(图1.c)。在这种产物中加入具有低散装比重的粉剂如白炭(具体比重:约0.25)并混合,从而使得粉末的微粒4附着到油层3的外层边缘上(图1.d)。通过以上方式就制备了能在水中浮游的包含微生物孢子的微生物农药。
使用所发明的微生物农药的方法
本发明中的微生物农药能在稻田中用作杂草除草剂,尤其是用来除稗。除了用作除草剂之外,上述配方也能够被用作杀虫剂,一种植物疾病控制剂或诸如此类,这取决于所使用的微生物的本质和特性。
当本发明的微生物农药被用作除草剂时,这种微生物农药可以在杂草的任何生长阶段施用。但是,由于微生物农药在水上的漂浮特性,在杂草处于其植株尚处于稻田中淹没状态下的早期生长阶段时施用微生物农药尤其有效。例如,为了控制稻田中水淹深度达3-10厘米的稗,在二叶期或更早施用微生物农药是有效的。本发明中包含上面提到的任何一种微生物的微生物农药对稻田里的有用作物-水稻的生长不产生影响。
当本发明的微生物农药在稻田中用以控制杂草时,只要杂草能被有效地控制,这种微生物杀虫剂可以以任何方式施用。但是,优选的施用方式是在稻田被淹没的情况下施用微生物农药。在这种情况下,在稻田中施用微生物农药的季节并不特别受到限定。然而,由于本发明的微生物农药对处于淹没状态下的幼苗尤其有效,因此在搅拌(paddling)后的稻田中施用是优选的,更优选的是在刚刚移栽秧苗后立刻施用。
另一方面,当本发明的微生物农药在被用于控制田间杂草时,其施用剂量依赖于所使用的微生物种类而变化。例如,当使用尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)时,以微生物分生孢子的群体计算的话,在已耕田中优选的微生物农药施用量是1×106到1×1015个分生孢子/10公亩,更优选的是1×107到1×1012个分生孢子/10公亩;然而当使用弯孢属真菌时,以微生物分子孢子群体计算的话,在田间优选的微生物农药施用剂量是1×107到1 ×1016个分生孢子/10公亩,更优选的施用剂量是1×108到1×1013个分生孢子/10公亩。
实施例:制备实施例1:(精细粒状制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,一种Hokushu Keisoudo的一种产品;5克)和羧甲基纤维素(Celogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.1g)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并彼此混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品;48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;24.2%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(40克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;48克)混合。得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例2:(精细粒状制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品,5g)和羧甲基纤维素(Celogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.1克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并混合。把HostaserinWOL(Hoechst的一种产品;10.0%),蓖麻油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;62.9%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.,12.7%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;6.4%),一种脂肪酸甘油酯(Wako PureChemical Industries,Ltd.;4%)和甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(40克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;48克)混合。得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例3:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;5克)和羧甲基纤维素(Celogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.1克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并混合。把HostaserinWOL(Hoechst的一种产品;9.7%),西蒙得木油(Sigma的一种产品;48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;24.2%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,9.7%),一种脂肪酸甘油酯(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)和甘油(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(40克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;48克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例4:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;5克)和羧甲基纤维素(Celogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.1克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并混合。把LiponoxNC-10(Lion Corporation的一种产品;10%),蓖麻油(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品,65%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;15%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,8%),硬脂酸铝(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;0.7%)和硬脂酸镁(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;1.3%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(40克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;48克)混合。得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例5:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;5克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.1克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并混合。把KadenaxGS90(Lion Corporation的一种产品;10%),蓖麻油(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品,65%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;1%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,8%),硬脂酸铝(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;0.7%)及硬脂酸镁(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;1.3%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(40克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;48克)混合。得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例6:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品,5克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.;0.1g)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras) JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把蓖麻油(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品;75%),羊毛脂(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;9.3%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4.3%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;9.3%),硬脂酸铝(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;0.7%)和硬脂酸镁(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,1.4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(40克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogo&Co.,Ltd.的一种产品;48克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例7:(精细颗粒制备)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;5克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.1克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoccras)JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把蓖麻油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,71%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,14.3%),石蜡(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品;7.7%),三硬脂酸甘油酯(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品;1.4%)。单硬脂酸脱水山梨醇酯(WakoPure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,2.8%)和POE(20)单硬脂酸脱水山梨醇酯(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,2.8%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(40克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品,48克)。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例8:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品,5克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品,0.1克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Kadenax SO-80(Lion Corporation的一种产品;10.3%),菜籽油(51.5%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;19.3%),石蜡(WakoPure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;10.3%),一种脂肪酸甘油酯(WakoPure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4.3%)和甘油(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品;4.3%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(40克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品,48克)。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例9:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;5克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.1克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin DGO(Hoechst的一种产品,10%),蓖麻油(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;50%),DIDP(12.6%),羊毛脂(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品;12.6%),石蜡(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;6.4%),一种脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4.2%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4.2%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(40克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品; 48克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例10:(精细颗粒制剂)
先把尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808(108个分生孢子)的分生孢子混入40mL水中形成分生孢子悬液液。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%);轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(WakoPure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,24.2%),石蜡(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品,9.7%),一种脂肪酸甘油酯(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(0.75克)和前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi Co.,&Ltd.的一种产品;1.5克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例11:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;0.5克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd。的一种产品;0.01克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(108个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品,9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,24.2%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,9.7%),一种脂肪酸甘油酯(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)和甘油(WakoPure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(0.75克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品,1.5克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例12:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;0.5克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产物;0.01克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(108个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品,9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,24.2%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,9.7%),一种脂肪酸甘油酯(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(WakoPure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(1.0克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;1.5克)。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例13:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品,0.5克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.01克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(108个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(WakoPure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(1.25克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;1.5克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例14:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;1.0克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.01克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(108个分生孢子)的分生孢子悬浮液并混合二者。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品;48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industrie,Ltd.的一种产品,24.2%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure Chermical Industries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(1.5克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;3.0克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小范围在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例15:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;1.0克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.;0.01g)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808(108个分生孢子)的分生孢子悬浮液并混合二者。把HostaserinWOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品;48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品;9.7%),一种脂肪酸甘油酯(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)及甘油(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把这种油状混合物(2.0克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;3.0克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小范围在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例16:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;1.0克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.01克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(108个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(WakoPure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(2.5克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;3.0克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例17:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;2.0克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.02克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(WakoPure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(4.0克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;4.4克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例18:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;15.68克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.32克)的混合物中加入悬浮于50mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(WakoPure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(4.0克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;48克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为七种颗粒大小分别是>1700,1700-710,710-300,300-212,212-106,106-63和63>μm的精细颗粒。制备实施例19:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;3.36克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.06克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(10个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(WakoPure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(8克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;9.6克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例20:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;3.36克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.06克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(2×108个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(8克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;9.6克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例21:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;3.36克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.06克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(0.4×108个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako PureChemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(8克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;9.6克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例22:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品;55克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;1.1克)的混合物中加入悬浮于400mL水中的尖角脐突孢(Exserohilummonoceras)JTB-808(1010个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(WakoPure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(74.4克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;154克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒(470克)。制备实施例23:(精细颗粒制剂)
先制备悬浮于40mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808(108个分生孢子)的分生孢子悬浮液。把Emasol O-15R(Kao Corporation的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma;48.4%),羊毛脂(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;24.2%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(0.75克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;1.5克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例24:(精细颗粒制剂)
在沸石(人造沸石粉,Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;55克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;1.1克)的混合物中加入悬浮于400mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-799(1010个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(WakoPure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(74.4克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;154克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例25:(精细颗粒制剂)
在沸石(Zeolite 150G,Kumimine Kogyo Kabushiki-gaisha的一种产品;55克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;1.1克)的混合物中加入悬浮于400mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-012(1010个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(WakoPure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(74.4克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;154克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例26:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Radiorite 700,Showa Chemical Industry Co.,Ltd.的一种产品;55克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;1.1克)的混合物中加入悬浮于400mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-013(1010个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Liponox NC-10(Lion Corporation的一种产品,10%),蓖麻油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;65%),羊毛脂(WakoPure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;15%),石蜡(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;8%),硬脂酸铝(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;0.7%)和硬脂酸镁(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;1.3%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(74.4克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;154克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例27:(精细颗粒制剂)
在白炭(Carplex 67,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品,55克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;1.1克)的混合物中加入悬浮于400mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)B026(1010个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Emasol O-15R(Kao Corporation的一种产品,9.7%),轻白油(Sigrna的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(Wako PureChemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(74.4克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;154克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例28:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品,55克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;1.1克)的混合物中加入悬浮于400mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)B232(1010个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Leodol SP-010(Kao Coraporation的一种产品;9.7%),轻白油(Signa的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(Wako PureChemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(74.4克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;154克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例29:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品,55克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;1.1克)的混合物中加入悬浮于400mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)B263(1010个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Emasol O-10(Kao Corporation的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(Wako PureChemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(74.4克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;154克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例30:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品,55克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;1.1克)的混合物中加入悬浮于400mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)B276(1010个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把HostaserinWOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(Wako PureChemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(74.4克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;154克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例31:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品,5克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Di-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.1克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的Curvalaria Sp.B236(106个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Kadenax SO-80(Lion Corporation的一种产品;10.3%),蓖麻油(51.1%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;19.3%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;10.3%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4.3%)及甘油(WakoPure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4.3%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(40克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;48克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例32:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品,5克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;0.1克)的混合物中加入悬浮于40mL水中的Altemaria helianthi IFO-9089(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Kadenax SO-80(Lion Corporation的一种产品;10.3%),蓖麻油(51.5%),羊毛脂(WakoPure Chemical Industries,Ltd.;19.3%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;10.3%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4.3%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4.3%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(40克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;48克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。制备实施例33:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Oplite P-1200,Hokushu Keisoudo的一种产品,55克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;1.1克)的混合物中加入悬浮于400mL水中的Nimbya Scirpicola K-004(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(WakoPure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(74.4克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;154克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒(470克)。制备实施例34:(精细颗粒制剂)
在硅藻土(Radiorite 700,Showa Chemical Industry,Co.,Ltd.的一种产品,55克)和羧甲基纤维素(Serogen 7A,Dai-ichi Kogyo Seiyaku Co.,Ltd.的一种产品;1.1克)的混合物中加入悬浮于400mL水中的Epiciccosorusnematosporus K-035(1011个分生孢子)的分生孢子悬浮液并把二者混合。把Hostaserin WOL(Hoechst的一种产品;9.7%),轻白油(Sigma的一种产品,48.4%),羊毛脂(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.;24.2%),石蜡(WakoPure Chemical Industries,Ltd.;9.7%),脂肪酸甘油酯(Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.的一种产品;4%)及甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品,4%)在80℃下混合以得到一种均一的油状混合物。待冷却到室温后,把此油状混合物(74.4克)与前面准备好的分生孢子悬浮液混合然后进一步与白炭(Carplex 80,Shionogi&Co.,Ltd.的一种产品;154克)混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨后成为颗粒大小在105-300μm之间的精细颗粒。
下面所叙述的对照配方是按照日本专利申请公开号4-226905,4-360678和6-329513说明书公开的步骤来制备的。对照制备实施例1:(颗粒配方)
把沸石(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;96%),木素磺酸钠(SunEkis,Nippon Paper Industries Co.,Ltd.的一种产品;2%)和Neopelex(Kao Corporation的一种产品;2%)充分混合以得到一种粉状混合物(总共100%)。把粉末混合物(13.6%)和尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808(109个分生孢子;46.4%)分生孢子的水(40mL;40%)悬浮液混合。最后得到的混合物在空气中干燥,干燥物经研磨成为颗粒大小范围在0.3-3mm之间的颗粒。对照制备实施例2:可湿粉剂
把Neopelex(Kao Corporation的一种产品;2%[把非活性成分的总量视成100%]),Triton X-100(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;2%),白炭(Carplex 80,Shionogi&Col,Ltd.的一种产品,5%)和悬浮于80mL水中的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808(109个分生孢子)的分生孢子悬浮液混合。最后得到的混合物在空气中干燥,然后再与硅藻土混合(91%)。终产物经充分研磨以得到可湿粉剂。对照制备实施例3:漂浮剂(Floable formulation)
在10%的烷基苯磺酸钠溶液(SunEkis P252,Nippon Paper Industries Co.,Ltd.的一种产品;80mL)中漂浮尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808的分生孢子以使分生孢子在最后的悬浮剂(Floable formulation)中的群体密度(population density)达到109个分生孢子/mL。在所得到的分子孢子悬浮液中溶入4%黄原胶溶液(Keruzan S,Keruko的一个产品)(9.6mL)以得到漂浮剂。对照制备实施例4:胶囊剂
把尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808(108个分生孢子)的分生孢子悬浮于包括藻酸钠(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;0.7%),高岭土(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;5%)和甘油(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.的一种产品;15%)在水中的混合溶液中(79.3%)。把所得到的悬浮液滴流到0.2M的乙酸钙(Wako pure chemicalIndustries,Ltd的产品)溶液中以制备胶囊产物。这些胶囊产物被切割成一个一个的胶囊,过滤然后在空气中干燥以得到胶囊剂。实施例1:长期贮存测试。
通过上述各种方法制备的药剂和对照溶液(分生孢子悬浮液)都被保存在4℃,并且以一定的时间间隔取样。把大约0.1克各种药剂分别悬浮于0.02%Tween20溶液中并在预先灭菌的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(DIFCO的产品)上培养。避光25℃培养15个小时之后,鉴定培养基上孢子的萌发百分比。孢子萌发百分比是通过显微镜检查时随机选取的100个孢子中萌发孢子的群体数来计数的。计数的过程重复五次然后平均所得数以确定每种制剂的长期贮存特性。结果见表1。
                        表1
                    长期稳定性
制剂     孢子的萌发百分比(%)
4个月后 8个月后 17个月后
制备实施例1(4℃保存)制备实施例2(4℃保存)对照制备实施例3(4℃保存)分生孢子悬浮液(4℃保存)     9999200     96850--     82770--
如表1所示,所发明的微生物农药在长期贮存稳定性方面被证明是出色的。实施例2:水漂浮特性测试
测试上述制剂及对照制剂的水漂浮特性。
把脱盐水(300mL)注(Pored)入500mL的大烧杯中。取上述各种制剂0.1克滴入大烧杯水的中央水面上,置于室温下,确定各种制剂沉淀所需的时间。本测试中,经过长达24小时仍不沉淀的制剂样即判定为是具水漂浮性果见表2。
                     表2
                   水漂浮特性
制剂 沉淀所需时间 水漂浮特性
制备实施例1制备实施例2制备实施例3制备实施例4制备实施例5制备实施例6制备实施例7制备实施例8制备实施例9制备实施例10制备实施例11制备实施例12制备实施例13制备实施例14制备实施例15制备实施例16制备实施例17制备实施例18所有粒径分布的样品]制备实施例19制备实施例20制备实施例21制备实施例22制备实施例23制备实施例24制备实施例25制备实施例26制备实施例27制备实施例28制备实施例29制备实施例30制备实施例31制备实施例32制备实施例33制备实施例34对照制备实施例1对照制备实施例2(可湿粉剂)对照制备实施例3对照制备实施例4     >24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时>24小时10秒10秒>24小时10秒     漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮漂浮无无漂浮无
实施例3:制剂所针对的杂草控制效应
让35株稗苗在含有稻田土的1/1000公亩大小的器皿里长到约1叶期左右,选择20株长到同样水平的幼苗留到器皿中。在器皿中灌水以使幼苗淹没。用制备实施1-9,23-31及对照制备实施例1-3配制的每一制剂处理器皿。作为对照测试溶液,用每一不含分生孢子(无处理)的Triton X-100溶液及含分生孢子悬浮液的Triton X-100溶液来处理器皿。处理条件如下。无处理:
把1mL 0.02%Triton X-100的水溶液一滴一滴地施加到器皿中(相当于10L/公亩)。以分生孢子悬浮液处理:
制备1×105个尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808(相当于1×109个分生孢子/公亩)分生孢子1mL 0.02% Triton X-100水溶液(相当于10L/公亩)的悬浮液并一滴一滴地施到器皿中。以制剂处理:
上述各种制剂都施加到器皿中使微生物分生孢子的群体数达到1×105个分生孢子/皿(相当于1×109个分生孢子/公亩)。
施加上述每一种配方后,让器皿中的幼苗生长四周并观察它们在皿中的生长。除草剂活性按下面方法确定:如果处理皿和无处理皿中的幼苗之间的生长无差异,则除草剂活性定为“0%”,但如果处理皿中所有幼苗均死亡的话,除草剂活性定为“100%”。结果见表3。
                         表3制剂的除草剂效应
    制剂     除草剂活性(%)
    制备实施例1制备实施例2制备实施例3制备实施例4制备实施例5制备实施例6制备实施例7制备实施例8制备实施例9制备实施例23制备实施例24制备实施例25制备实施例26制备实施例27制备实施例28制备实施例29制备实施例30制备实施例31对照制备实施例1对照制备实施例2对照制备实施例3对照制备实施例4分生孢子悬浮液无处理     10010010010010010010010010010010010010010010010010010030305020980
实施例4:制剂粒径大小对针对稗的除草剂活性的影响
让35株稗苗在含有稻田土的1/10000公亩大小的器皿里长到1叶期左右,选择20株长到同样水平的幼苗留在器皿中。在器皿中灌水以使幼苗淹没。用制备实施例18中的每种配方处理器皿。作为对照测试溶液,用每一不含分生孢子(无处理)的Triton X-100溶液及含有分生孢子悬浮液的TritonX-100溶液来处理器皿。处理条件如下。无处理:
把1mL 0.02%的Triton X-100水溶液一滴一滴地施加到器皿中(相当于10L/公亩)。以分生孢子悬浮液处理:
制备1×105个尖角脐突孢(Exserohilun monoceras)JTB-808(相当于1×109个分生孢子/公亩)成分生孢子的1mL 0.02% Triton X-100水溶液(相当于10L/公亩)的悬浮液并一滴一滴地施加到器皿中。以制剂处理:
上述各种制剂都施加到器皿中使微生物分生孢子的群体数达到1×105个分生孢子/皿(相当于1×109个分生孢子/公亩)。
施加上述每种配方后,让器皿中的幼苗生长四周并观察它们在皿中的生长。除草剂活性按下面方法确定:如果处理皿和无处理皿中的幼苗之间的生长无差异,则除草剂活性定为“0%”,但如果处理皿中所有幼苗均死亡的话,除草剂活性定为“100%”。结果见表4。
                           表4
                   制剂粒径大小对除草剂活性的影响
制剂     粒径分布(μm)     除草剂活性(%)
大颗粒制剂颗粒制剂小颗粒制剂精细颗粒制剂精细颗粒制剂精细颗粒制剂F粉剂制剂分生孢子悬浮液无处理     1700<710-1700300-710212-300106-21263-10663>     58707795939694850
如表4所示,虽然所有制剂都浮于水上而且都表现出对稗的除草剂活性,但是具有更小颗粒大小分布的配方表现出更佳的分生孢子分散入水的能力因而显出更高的除草剂活性。从这些结果中发现具有不大于300μm的颗粒大小分布的制剂是优选的。实施例5:制剂中分生孢子含量对针对稗的除草剂活性的影响
让35株稗苗在含有稻田土的1/10000公亩大小的器皿里长到1叶期左右,选择20株长到同样水平的幼苗留在器皿中。在器皿中灌水以使幼苗淹没。用制备实施例19-21的每种配方处理器皿。作对照测试溶液,用不含分生孢子(无处理)的Triton X-100溶液及含有分生孢子悬浮液的Triton X-100溶液来处理器皿。处理条件如下。无处理:
把1mL 0.02%的Triton X-100水溶液一滴一滴地施加到器皿中(相当于10L/公亩)。以分生孢子悬浮液处理:
制备尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808的1×104个分生孢子的1mL 0.02% Triton X-100水溶液(相当于10L/公亩)的悬浮液(相当于1×108个分生孢子/公亩)悬浮液并一滴一滴施加到器皿中。以制剂处理:
上述各种制剂都施加到器皿中使微生物分生孢子的群体数达到1×104个分生孢子/皿(相当于1×109个分生孢子/公亩)。
施加上述每种配方后,让器皿中的幼苗生长四周并观察它们在皿中的生长。除草剂活性按下面方法确定:如果处理皿和无处理皿中的幼苗之间生长无差异,则除草剂活性定为“0%”,但如果处理皿中所有幼苗均死亡的话,除草剂活性定为“100%”。结果见表5。
                      表5
            制剂中分生孢子含量的除草剂活性的影响
制剂 分生孢子含量     除草活性(%)
粉剂制剂制备实施例19制备实施例20制备实施例21分生孢子悬浮液无处理 1.77×104/克1.68×104/克3.99×103/克1.20×103/克1×104/毫升     33407060330
实施例6:制剂中油含量对针对稗的除草剂活性的影响
让35株稗苗在含有稻田土的1/10000公亩大小的器皿里长到1叶期左右,选择20株长到同样水平的幼苗留在器皿中。在器皿中灌水以使幼苗淹没。用制备实施例10-17中的每种配方处理器皿。作为对照测试溶液,用每一不含分生孢子(无处理)的Triton X-100溶液及含有分生孢子悬浮液的Triton X-100溶液来处理器皿。处理条件如下。无处理:
把1mL 0.02% Triton X-100水溶液一滴一滴地施加到器皿中(相当于10L/公亩)。以分生孢子悬浮液处理:
制备1×105个尖角脐突孢(Exserohilun monoceras)JTB-808(相当于1×109个分生孢子/公亩)分生孢子的1mL 0.02% Triton X-100水溶液(相当于10L/公亩)的悬浮液并一滴一滴地施加到容器中。以制剂处理:
上述各种制剂都施加到器皿中使微生物分生孢子的群体数达到1×105个分生孢子/皿(相当于1×109个分生孢子/公亩)。
施加上述每种配方后,让器皿中的幼苗生长四周并观察它们在皿中的生长。除草剂活性按下面方法确定:如果处理皿和无处理皿中的幼苗之间的生长无差异,则除草剂活性定为“0%”,但如果处理皿中所有幼苗均死亡的话,除草剂活性定为“100%”。结果见表6。
                    表6
           制剂中油含量对除草剂活性的影响
制剂     除草剂活性(%)
制备实施例10制备实施例11制备实施例12制备实施例13制备实施例14制备实施例15制备实施例16制备实施例17分生孢子悬浮液无处理     6288889165919482970
如表6所示,具不同油含量的制剂其除草剂活性并未观察到有显著性的差异。实施例7:制剂对不同作物的影响
本实验中,用作被测试植物的有水稻、小麦、茄子、大豆、甘兰、黄瓜和稗。让这些植物的幼苗都长到2至5叶期并作为被测试植物。
本发明的微生物农药利用事先在燕麦蔗糖琼脂培养基上培养的尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB808菌株的分生孢子按照上述制备实施例1中的程序制备。所得的微生物农药在0.02%的Tween-20溶液中制备成浓度为106个分生孢子/mL的悬浮液,所得悬浮液以气喷法接种到每种植物的幼苗上。接种后即刻把幼苗放于已保温在25℃的保湿室中然后转移到已保温25℃的温室中。三周后鉴定每种植物的幼苗感病比率及防治比率。结果见表7。对稗而言,幼苗感病比率是100%。
                        表7
                 对不同作物的影响
    植物     致病性
    水稻小麦茄子大豆甘兰黄瓜稗     ------+
+:死亡或抑制生长-:无效应
如表7所示,本发明的微生物农药对水稻、小麦、茄子、大豆、甘兰和黄瓜没有除草效应。实施例8:制备对稗的除草效应(田间测试)
把田块用波状塑料帐篷划分成1/100公亩大小的区域。在每一块区域中移栽上水稻植株并在其中播上萌发的稗种籽。当稗长到约1叶期时,在各区域中灌水以使稗浸于水面以下7cm,然后以制备实施例22中制备的制备用不同用量处理。作为对照的测试解决方案,以每一不含分生孢子(无处理)的Triton 100-X溶液和包含分生孢子悬浮液的Triton X-100溶液来处理器皿。处理条件如下。无处理:
把100mL 0.02%的Triton X-100的水溶液一滴一滴地施加到小区域中(相当于10L/公亩)。施加分生孢子悬浮液:
在100mL 0.02% Triton X-100的水溶液中制备两种尖角脐突孢(Exserohilum monoceras)JTB-808的分生孢子悬浮液,分别包含3×107和1×108个分生孢子。分别把每种悬浮液一滴一滴地施加到小区域中(分别相当于3×109个分生孢子/公亩和1×109个分生孢子/公亩)。施加制剂:
在田间施加制备实施例22中制备的制剂,所用量为每块小区域中施加的分生孢子浓度分别为3×107个分生孢子或1×108个分生孢子/小块(分别相当于3×109个分生孢子/公亩和1×1010个分生孢子/公亩)。
在施加上述每种施用溶液之后,让小区域中的幼苗生长四周,观察其生长,并计数小区域中存留的幼苗群体数以确定防治比率。接下来,按照下面的方法评价其综合的防治比率:当处理小区域和无处理小区域中的幼苗生长无差异时,此测试小区的综合防治比率被确定为“0%”,但当一个小区域中所有的幼苗都死亡的话,其综合防治比率被确定为“100%”。结果见表8。
                    表8
           制剂对稗的除草剂效应
制剂 处理量          除草剂活性(%)
基于植株群体数的防治比率* 综合防治比率**
制备实施例22制备实施例22分生孢子悬浮液分生孢子悬浮液无处理 2公斤(30×1010/10公亩)6公斤(1×1011/10公亩)(3×1010/10公亩)(1×1011/10公亩)     96100991000     961001001000
*基于植株群体数的防治比率=(1~处理小区域中稗群体的存留数/无处理小区域中稗群体的存留数)×100;及**综合防治比率:稗的总体降低比率
如表8所示,本发明的微生物农药对稗表现出极佳的防治效果但对水稻植株却没有影响。
如上所述,按照本发明,能够提供一种具有易处置性及出色的保存特性的新型的水漂浮性微生物农药。
附图的简短说明
图1是制备本发明的微生物农药的过程的概要简图。

Claims (11)

1.一种水漂浮性微生物农药,它包括一种微生物,一种油包水型的表面活性剂,油,及一种具有低散装比重的粉末。
2.如权利要求1的包含微生物的水漂浮游性微生物农药,其中的微生物具有除草活性。
3.如权利要求2的水漂浮性微生物农药,其中的微生物属于脐突孢属。
4.如权利要求3中的水漂浮性微生物农药,其中所述的属于脐突孢属的微生物是尖角脐突孢。
5.如权利要求1到4中任一所述的水浮漂性微生物农药,其中的油包水型表面活性剂的HLB值范围在3到7之间。
6.如权利要求5的水漂浮性微生物农药,其中的油包水型表面活性剂是一种非离子型的表面活性剂,这种表面活性剂可从包括聚硬脂酸甘油酯型、硬脂酸脱水山梨醇酯型、聚油酸甘油酯型、油酸脱水山梨醇酯型、单甘油酯型、脱水山梨醇酯型、脂肪酸甘油酯型和壬基酚型中选择。
7.如权利要求1到6任一的水漂浮性微生物农药,其中具有低散装比重的粉末是白炭。
8.一种制备水漂浮性微生物农药的方法,包括在水中悬浮一种微生物,在所得到的悬浮液中添加包含油包水型表面活性剂的油并彼此混合二者,以及在所得混合物中添加具散装积比重的粉末以获得微生物农药。
9.如权利要求8的方法,其中的悬浮液还包括悬浮于其中的一种矿物质载体。
10.一种使用权利要求1到7的任何一种水漂浮性微生物农药的方法,包括向稻田中施用水漂浮性微生物农药。
11.如权利要求10的方法,用来防治属于稗属的植物。
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