CN1187069C - 用于治疗肝炎类的牡丹皮总苷的提取方法 - Google Patents

用于治疗肝炎类的牡丹皮总苷的提取方法 Download PDF

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用于治疗肝炎类的牡丹皮总苷的提取方法，属生化药物制备技术领域。其所要解决的技术问题是：提供一种既能够基本保留原材料中的所有成分，又能够全面挖掘和开发利用其医药价值的用于治疗肝炎类的牡丹皮总苷的提取方法。其技术要点是：将干燥的牡丹皮打成粗粉，用乙醇浸泡渗漉；取渗漉液用减压蒸馏法回收乙醇后，加入乙酸乙酯-乙醇混合液萃取，取上清液后用减压蒸馏法回收乙酸乙酯-乙醇，并浓缩至稠膏；稠膏经真空干燥得牡丹皮总苷膏。经本办法提取的牡丹皮总苷膏粉基本保留了牡丹皮中的所有成分，且总苷含量超过50%以上。经本办法提取的牡丹皮总苷具有明显的保肝降酶、防治慢性肝炎纤维化、改善肝细胞病理变化、抗氧化和免疫调节作用。

Description

用于治疗肝炎类的牡丹皮总苷的提取方法
技术领域：本发明涉及一种生化药物制备技术，特别是一种用于治疗肝炎的牡丹皮总苷的提取方法。
背景技术：牡丹皮，别名丹皮、粉丹皮、木芍药、条丹皮、洛阳花。系毛莨科芍药尾植物牡丹的根皮。味辛、苦，性寒。入心、肝、肾三经。具有清热凉血、活血化瘀的功能，是一常用的中草药。现代医药研究表明：牡丹皮含芍药苷、丹皮酚葡萄糖阿拉伯糖苷，并含丹皮盼；此外，还含有苯甲酸、挥发油、糖类及甾醇等多种成份。但是，目前采用物理方法提取的丹皮酚仅仅是牡丹皮中的一种成份。由于提取的成份单一，既造成了原药材中的其他成份的浪费，又影响了原药材医药价值全面挖掘和开发利用。
发明内容：本发明所要解决的技术问题是：提供一种既能够基本保留原药材中的基本成份，又能够全面挖掘和开发利用其医药价值的用于治疗肝炎类的牡丹皮总苷的提取方法。其技术方案是：一种用于治疗肝炎类的牡丹皮总苷的提取方法，其特征在于其方法步骤：
A、将干燥的牡丹皮打成粗粉，用3-5倍的乙醇进行浸泡渗漉；
B、将得到的渗漉液用减压蒸馏法回收乙醇，得牡丹皮漫膏；
C、取牡丹皮浸膏，按1∶1比例加入乙酸乙酯-乙醇混合液进行萃取，在溶液分层后取上层的溶液；
D、将取出的上层溶液用减压蒸馏法回收乙酸乙酯-乙醇试剂，并浓缩至稠膏；
E、在740mmHG下，温度为50-60℃时进行真空干燥，得牡丹皮总苷膏。
经本方法提取的牡丹皮总苷膏粉，经HPLC与牡丹皮对照，两者色谱峰基本一致(见附件1)，说明本方法提取的牡丹皮总苷基本保留了原药材中的基本成份；并且经HPLC测定和总苷类测定，其总苷含量过50％(见附件2)。通过对化学性肝损伤、免疫性肝损伤、免疫性肝纤维化模型和利胆实验模型研究牡丹皮总苷的抗炎作用，并从影响免疫抗氧化等方面探讨了牡丹皮总苷抗炎作用的部分机制，结果表明：
1、牡丹皮总苷25、50、100mg·KG-1ig给药每天一次连续7天对四氯化碳(CCl4)和D-半乳糖胺盐(D-Gal-N)诱导的小鼠化学性肝损伤具有明显作用，可使升高的ALT和AST降低，且能明显对抗CCl4和D-Gal-N所致的肝匀浆和血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSHpx)的降低，明显减轻小鼠肝细胞变性、坏死和炎细胞漫润。
2、牡丹皮总苷25、50、100mg·KG-1ig给药每天一次连续9天，对卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤有明显作用，不仅可显著降低BCG加LPS诱导的ALT和AST升高，明显减轻肝脏病理损害，而且还能使升高的血清和肝组织丙二醛明显降低。
3、在人血清白蛋白(HAS)所致慢性免疫性大鼠肝纤维化的研究发现，牡丹皮总苷50、100mg·KG-1ig预防和治疗给药，每天一次连续8周，均可使升高的血清唾液酸(SA)水平和肝脏羟脯氨酸(HYP)水平明显降低，且对纤维化的病理损害有明显减轻趋势。
4、免疫学研究表明：牡丹皮总苷25、50、100mg·KGig给药每天一次连续7天，对环磷酰胺所致小鼠溶血素抗体产生的减少和脾指数的降低及小鼠迟发性变态反应的低下均有明显的对抗作用，而且还明显增强小鼠单核巨噬细胞的廓清指数；体外研究发现，牡丹皮总苷2-50mg·L-1可调节小鼠T、B淋巴细胞增殖反应、大鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素1(IL-1)和大鼠脾细胞IL-2产生。
5、牡丹皮总苷50、100mg·KG-1ig给药每天一次连续7天，对大鼠的胆汁流量和总胆红素、胆固醇、胆汁酸的含量无明显影响。
综上所述，在体内外动物实验中，经本方法提取的牡丹皮总苷具有明显的保肝降酶、防治慢性肝纤维化、改善肝细胞病理变化、抗氧化和免疫调节作用，为其临床试验和今后的临床应用提供了重要的药理学依据。
实施方式：
取干燥的100kg牡丹皮打成粗粉。用400kg的浓度为30-70％的乙醇浸泡24小时后渗漉，接取渗漉液。
将得到的渗漉液，用减压蒸馏法回收乙醇试剂。具体要求是：减压到400mmHG，在水浴锅中加热，直到回收的溶剂中无乙醇味，此时得到牡丹皮漫膏。
取牡丹皮漫膏，按容积1∶1比例加入乙酸乙酯-乙醇混合液进行萃取。乙酸乙酯-乙醇混合液的比例为2∶1。在溶液分层后取上层的溶液。
将取出的上层溶液用减压蒸馏法回收乙酸乙酯-乙醇试剂，具体要求是：减压到400mmHg在水浴锅中加热，直到浓缩成稠膏。
在740mmHg下，温度为50-60℃时，进行真空干燥，得牡丹皮总苷膏。
取出干膏粉碎后得牡丹皮总苷膏粉。本品为黄色粉末，易吸湿，出膏率约为3％，且总苷的含量超过了50％。
干膏粉加不同的辅料混匀后，可做成胶囊剂、片剂、颗粒剂、糖浆剂等各种剂型。

Claims (4)

1、一种用于治疗肝炎类的牡丹皮总苷的提取方法，其特征在于其方法包括步骤：
A、将干燥的牡丹皮打成粗粉，用3-5倍的乙醇进行浸泡渗漉；
B、将得到的渗漉液用减压蒸馏法回收乙醇，得牡丹皮浸膏；
C、取牡丹皮浸膏，按1∶1比例加入乙酸乙酯—乙醇混合液进行萃取，在溶液分层后取上层的溶液；
D、将取出的上层溶液用减压蒸馏法回收乙酸乙酯—乙醇试剂，并浓缩至稠膏；
E、在740mmHG下，温度为50-60℃时进行真空干燥，得牡丹皮总苷膏。
2、如权利要求1所述的一种提取方法，其特征是：所述的乙醇的浓度为30-70％。
3、如权利要求1所述的一种提取方法，其特征是：所述的乙酸乙酯—乙醇混合液，其比例为2∶1。
4、如权利要求1所述的一种提取方法，其特征是：所述的减压蒸馏法回收乙醇和乙酸乙酯—乙醇试剂，其具体要求是：减压到400mmHG在水浴锅中蒸馏。
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