CN117860649A - 一种调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物及应用，所述调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物包括如下重量含量原料：缓症链球菌发酵产物1%~10%、α‑葡聚糖寡糖0.5%~5%、异麦芽低聚糖0.5%~5%、燕麦β‑葡聚糖1%~3%、菊粉0.1%~1%；该组合物通过特定比例复配可抑制多种细菌生长，尤其对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌具有显著拮抗作用。该组合物通过抑制痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌，达到预防和治疗痤疮的效果，调节皮肤微生态。该组合物通过改善皮肤经皮水分流失量和角质层含水量，恢复皮肤屏障功能，使皮肤恢复健康。
Description
技术领域
本发明属于生物技术、轻医美和护肤品领域，尤其涉及一种调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物及应用。
背景技术
人类皮肤表面共生大约有104~109个/cm2微生物，毛囊和皮脂腺是皮肤微生物主要的寄居场所，构成皮肤第一道微生物屏障，具有维持皮肤微生态平衡与自净的作用。很多原因都会引起皮肤菌群失衡，而菌群失衡时会引发皮肤疾病。例如痤疮丙酸杆菌的过度生长，造成皮肤出现痤疮，而痤疮丙酸杆菌是多重耐药性细菌，其生长易于生成细菌膜。通常痤疮的治疗多采用抗生素、激素等药物，但使用抗生素的弊端除了引起耐药性外，还会破坏生态平衡。
近年来皮肤微生态逐渐成为了皮肤领域的热点，一种新的共识也已经形成,皮肤屏障、皮肤微生态和皮肤免疫三者共同形成了机体的第一道防御体系，抵抗外界的各种因素的刺激，维持皮肤和机体的正常功能。皮肤的常驻菌对微生态平衡恢复和重建起关键作用，同时对于微生物屏障的构成，皮脂腺的分解，酸罩形成起及其重要的作用。巩固常驻菌群定植力，平衡菌群，从而达到治病防病目的，而现有技术中也缺乏有效调节皮肤微生态的药物。因此，提供一种具有良好效果的调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物具有一定的市场价值。
发明内容
针对上述现有技术中的不足，本发明的目的在于提供一种调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。该组合物通过特定比例复配可抑制多种细菌生长，尤其对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌具有显著拮抗作用。该组合物通过抑制痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌，达到预防和治疗痤疮的效果，调节皮肤微生态。该组合物通过改善皮肤经皮水分流失量和角质层含水量，恢复皮肤屏障功能，使皮肤恢复健康。
本发明的目的在于提供一种调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物，包括如下重量含量原料：缓症链球菌发酵产物1%~10%、α-葡聚糖寡糖0.5%~5%、异麦芽低聚糖0.5%~5%、燕麦β-葡聚糖1%~3%、菊粉0.1%~1%。
优选地，所述调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物，包括如下重量含量原料：缓症链球菌发酵产物10%、α-葡聚糖寡糖1%、异麦芽低聚糖1%、燕麦β-葡聚糖1%、菊粉0.1%。
优选地，所述调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物还包括溶剂85.5%~96.5%。
更优选地，所述调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物还包括溶剂86.9%。
优选地，所述溶剂包括去离子水。
优选地，所述缓症链球菌发酵产物的制备，包括如下步骤：
将缓症链球菌在培养基上培养，取有草绿色溶血环的单菌落接种在肉汤中，摇床培养，得缓症链球菌液，离心，取上清液，过滤，收集滤液，冷冻干燥，得缓症链球菌发酵产物。
优选地，所述培养基包括胰酪胨大豆羊血(TSSB)琼脂培养基。
优选地，所述肉汤包括BHI肉汤。
优选地，所述在培养基上培养的温度为35~39℃，时间为20~28h。
更优选地，所述在培养基上培养的温度为37℃，时间为24h。
优选地，所述摇床培养的温度为35~39℃，时间为20~28h。
更优选地，所述摇床培养的温度为37℃，时间为24h。
优选地，所述过滤用的滤膜为0.22μm滤膜。
本发明的另一目的在于提供一种调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物的制备方法，包括如下步骤：
将所述的调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物混合溶解，过滤，即可。
本发明的再一目的在于提供一种护肤品，所述护肤品含有所述组合物。
优选地，以质量百分比计，所述调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物的用量为护肤品的1~10%。
优选地，所述护肤品选自面膜液、乳液、膏霜、爽肤水、精华液、原液、洁面乳、化妆水、香水、卸妆水、粉底液、粉底霜、遮瑕霜中的任一种。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明的组合物对皮损皮肤常驻菌与暂驻菌过度繁殖具有显著抑制作用，组合物的成分可降解为氨基酸，为皮肤修复提供部分营养基质，且异麦芽低聚糖具有有益菌群的作用，促进了皮肤细菌的新陈代谢，恢复和重建皮肤的微生态稳态，本发明的组合物通过调节皮肤表面的微生物菌群，加速生成乳酸、丙酸、超氧化物岐化酶及其他许多生物活性酶形成，帮助恢复皮肤微生态平衡，从而修复肌肤屏障。
(2)本发明的组合物通过复配特定比例的缓症链球菌发酵产物、α-葡聚糖寡糖、异麦芽低聚糖、燕麦β-葡聚糖和菊粉起到抑制多种细菌生长的作用，尤其是对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌的生长具有显著的拮抗作用，可削弱痤疮丙酸杆菌的成膜性生长，从而削弱其皮肤侵袭性，达到预防和治疗痤疮的效果。
(3)本发明的组合物具有防腐性能，同时具备抑制多种细菌生长的作用，尤其是对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌的生长具有显著的拮抗作用，可削弱痤疮丙酸杆菌的成膜性生长，而削弱其皮肤侵袭性，干预痤疮的发生以及化脓性感染，从而达到预防和治疗痤疮的效果。
(4)本发明的组合物可为皮肤局部提供营养，提高皮肤的定植抗力，通过生物刺激产生的反馈作用，恢复皮肤的微生态平衡，修复肌肤屏障，本发明的组合物可应用于临床皮肤微生态制剂、抗挫疮制剂的制备，亦可应用于正常皮肤、皮肤损伤、皮肤感染、皮肤痤疮，而有利于皮肤正常生态稳定和恢复。
(5)将所述组合物添加到制剂中，在皮肤上使用，通过调节皮肤表面的微生物菌群，帮助恢复皮肤微生态平衡，提供了抗生素之外的干预细菌感染的方法。
(6)由于菊粉吸湿性强，在水中分散时极易结块，加入缓症链球菌发酵产物，可提高其溶解性能，提高其分散性，进而提高本发明组合物预防和治疗痤疮的效果。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将结合本发明实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
实验室分离鉴定的缓症链球菌，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCCNo.12916，为市售。
实施例1：调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
室温下，将缓症链球菌发酵产物1%、α-葡聚糖寡糖0.5%、异麦芽低聚糖0.5%、燕麦β-葡聚糖1%、菊粉0.5%和去离子水96.5%混合，搅拌均匀，得调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
实施例2：调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
室温下，将缓症链球菌发酵产物10%、α-葡聚糖寡糖1%、异麦芽低聚糖1%、燕麦β-葡聚糖1%、菊粉0.1%和去离子水86.9%混合，搅拌均匀，得调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
实施例3：调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
室温下，将缓症链球菌发酵产物5%、α-葡聚糖寡糖3%、异麦芽低聚糖3%、燕麦β-葡聚糖3%、菊粉0.5%和去离子水85.5%混合，搅拌均匀，得调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
对比例1：调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
室温下，将缓症链球菌发酵产物13.1%和去离子水86.9%混合，搅拌均匀，得调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
对比例2：调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
室温下，将α-葡聚糖寡糖13.1%和去离子水86.9%混合，搅拌均匀，得调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
对比例3：调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
室温下，将异麦芽低聚糖13.1%和去离子水86.9%混合，搅拌均匀，得调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
对比例4：调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
室温下，将燕麦β-葡聚糖13.1%和去离子水86.9%混合，搅拌均匀，得调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
对比例5：调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
室温下，将菊粉13.1%和去离子水86.9%混合，搅拌均匀，得调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物。
试验例1：抑菌测试。
将金黄色葡萄球菌ATCC6538接种于TSB培养基，将菌液置于37℃下有氧培养24h，将菌液稀释约106cfu/ml。每种稀释菌液各4.5ml，各9份，分别加入0.5mL实施例1~3的组合物、对比例1~5的组合物和去离子水(去离子水作为空白对照)，平行3组，然后将菌液置于37℃下有氧培养24h。
将痤疮丙酸杆菌ATCC6919、痤疮丙酸杆菌ATCC11827接种于BHI培养液，将菌液置于37℃下厌氧培养48h，将菌液稀释约106cfu/ml。每种稀释菌液各4.5ml，各9份，分别加入0.5mL实施例1~3的组合物、对比例1~5的组合物和去离子水(去离子水作为空白对照)，平行3组，然后将菌液置于37℃下厌氧培养48h。
用稀释平板法测定培养前后培养液中各种菌的数目，取平均值。
表1.培养前后金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的计数比较(cfu/ml)。
由表1可知，培养24h或48h后，针对金黄色葡萄球菌ATCC6538和痤疮丙酸杆菌ATCC6919、痤疮丙酸杆菌ATCC11827，实施例2组近乎停止生长，实施例1、3组增长但是低于空白对照组。可见，本发明实施例1~3的组合物能够抑制皮肤常驻菌(如痤疮丙酸杆菌)和皮肤暂驻菌(如金黄色葡萄球菌)过度繁殖，促进皮肤微生态平衡，其中，实施例2组合物的抑制效果最佳。
实施例4~6和对比例6~10：精华液的制备。
按如下质量分数原料制备精华液：不断搅拌下，分别将汉生胶0.05%、羟乙基纤维素0.08%、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵0.15%在加热的余量的去离子水中分散溶解均匀，分别加入EG-1 1%、泛醇0.8%、1,3-丙二醇0.5%、对羟基苯乙酮0.5%、实施例1~3或对比例1~5制备的组合物5%，搅拌30min，不断搅拌下，降温至45℃以下，加入牡丹纯露0.5%和绿茶提取物1%，继续搅拌20min，降温，分别得实施例4~6和对比例6~10精华液。
试验例2：皮肤菌群活菌实验：
研究对象和试验分组：面部痤疮患者90例，男53例，女37例，年龄为18~35岁，要求患者1个月内未使用过抗生素药物，且不伴有其他面部疾病，将痤疮患者随机平均分为A、B、C三个组，A组：清水洁面后于患处涂敷实施例6精华液；B组：清水洁面后于患处涂敷1%克林霉素磷酸酯凝胶；C组：清水洁面后于患处涂敷市售儿童乳液。各组患者每日早晚洁面后各用一次，A~C组产品均为每天使用，每次用量均为2mg/cm2，试验周期为30天，试验期间，患者停用其他药物和化妆品，并保持清淡饮食。皮肤健康无痤疮的年龄为18~35岁的成人30例，记为D组，男11例，女19例，年龄为18~35岁。
样本采集：试验前，用生理盐水清洗患者面部5分钟后，使用PBS缓冲液浸湿无菌棉拭子，于痤疮皮损区4cm×4cm范围内由内向外稍用力涂抹，采集后立即将无菌棉拭子用无菌剪刀剪下，置于装有2mL无菌PBS的试管内。试验结束后，以同样的方法在皮损好转区取样。D组于受试者面部前额正中4cm×4cm采样。
接种培养：以PBS溶液按10倍稀释法稀释至10-1~10-6个稀释度，取原液和各稀释度的溶液0.lmL，分别接种于加入5%脱纤维羊血TYG(丙酸杆菌)培养基、加入5%脱纤维羊血GAM(厌氧菌非选择性培养基)、TSA(葡萄球菌选择性培养基)和NA(非选择性培养基)，TYG 37℃48h厌氧培养，TSA和NA 37℃24h需氧培养。
细菌分离鉴定：从GAM和TYG上挑取3~5个菌落，用微量生化板进行生化性状分析，鉴定菌株。
实验结果活菌计数(cfu/m2为每平方厘米皮肤上以平板活菌计数法测定活菌数，以log10/cm2表示)。正态分布数据用平均数±标准差表示。
表2.治疗前后表皮葡萄球菌计数比较。
由表2可知，治疗后A组(组合物)与B组(克林霉素)均会使皮损区表皮葡萄球菌减少，A组(组合物)治疗后与健康组接近，而B组(克林霉素)低于健康组，C组使用前后无明显差异。
表3.治疗前后痤疮丙酸杆菌计数比较。
由表3可知，治疗后A组(组合物)与B组(克林霉素)均会使皮损区痤疮丙酸杆菌减少，A组(组合物)治疗后与健康组接近，而B组(克林霉素)低于健康组，C组使用前后无明显差异。
表4.治疗前后金黄色葡萄球菌计数比较。
由表4可知，治疗后A组(组合物)与B组(克林霉素)均会使皮损区金黄色葡萄球菌减少，A组(组合物)治疗后与健康组接近，而B组(克林霉素)低于健康组，C组使用前后无明显差异。
表5.治疗前后产色素微球菌计数比较。
由表5可知，治疗后A组(组合物)与B组(克林霉素)均会使皮损区产色素微球菌减少，A组(组合物)治疗后与健康组接近，而B组(克林霉素)低于健康组，C组使用前后无明显差异。
综上所述，本发明的组合物治疗后痤疮患者皮损区与健康对照组皮肤菌群活菌计数相比，常驻菌(如痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌)，暂驻菌(金黄色葡萄球菌、产色素微球菌)无明显变化。克林霉素治疗组治疗后痤疮病人皮损区与健康对照组皮肤菌群活菌数相比，常驻菌与暂驻菌均明显减少。表明本发明的组合物能够调节皮肤上痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌等微生物过度繁殖，促进皮肤微生态平衡。
试验例3：治疗痤疮效果评价测试。
面部痤疮患者120例，男86例，女34例，年龄为18~35岁，要求患者1个月内未使用过抗生素药物，且不伴有其他面部疾病，将痤疮患者随机平均分为6个组，每组20人，每组分别清水洁面后于患处涂敷实施例5或对比例6~10精华液。各组患者每日早晚洁面后各使用一次，每次用量均为2mg/cm2，试验周期为30天，试验期间，患者停用其他药物和化妆品，并保持清淡饮食。
使用效果判定标准：痊愈：面部痤疮基本消失；有效：面部痤疮有所改善；无效：面部痤疮没有好转或变严重。
表6.治疗痤疮效果评价结果。
由表6可知，本发明组合物制得的精华液治疗痤疮效果显著。
试验例4：皮肤含水量测试。
皮肤角质层含水量、经表皮水分流失(TEWL)检测：采样前，运用无创性皮肤生理功能测试仪检测A组患者治疗前后皮损处和D组采样区的皮肤角质层含水量、经表皮水分流失(TEWL)，所有检测均在温度23~25℃，湿度为50%~60%的室内进行，每次测量前患者均先在此环境下静坐30min，每次在同样皮损部位测量3次，取平均值，其中A组和D组同试验例2。
患者治疗前后皮损处的皮肤角质层含水量与皮肤经表皮水分流失(TEWL)变化。数据用平均数±标准差表示。
表7.皮肤角质层含水量(%)比较。
由表7可知，组合物治疗后痤疮患者皮损区角质层含水量上升，接近于健康组。
表8.皮肤经表皮水分流失[g/(h·cm2)]比较。
由表8可知，组合物治疗后痤疮患者皮损区皮肤经表皮水分流失减少，接近于健康组。
表7和表8的试验结果表明，本发明的组合物能够改善痤疮患者皮损区角质层含水量和皮肤经表皮水分流失，修复肌肤屏障。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制，尽管对照上述实施例对本发明进行了详细的说明，所属领域的普通技术人员应当理解，技术人员阅读本申请说明书后依然可以对本发明的具体实施方式进行修改或者等同替换，但这些修改或变更均未脱离本发明申请待批权利要求保护范围之内。
Claims (10)
1.一种调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物，其特征在于，包括如下重量含量原料：缓症链球菌发酵产物1%~10%、α-葡聚糖寡糖0.5%~5%、异麦芽低聚糖0.5%~5%、燕麦β-葡聚糖1%~3%、菊粉0.1%~1%。
2.如权利要求1所述的调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物，其特征在于，还包括溶剂85.5%~96.5%。
3.如权利要求2所述的调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物，其特征在于，所述溶剂包括去离子水。
4.如权利要求1所述的调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物，其特征在于，所述缓症链球菌发酵产物的制备包括如下步骤：
将缓症链球菌在培养基上培养，取有草绿色溶血环的单菌落接种在肉汤中，摇床培养，得缓症链球菌液，离心，取上清液，过滤，收集滤液，冷冻干燥，得缓症链球菌发酵产物。
5.如权利要求4所述的调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物，其特征在于，所述培养基包括胰酪胨大豆羊血琼脂培养基；
和/或，所述肉汤包括BHI肉汤。
6.如权利要求4所述的调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物，其特征在于，所述在培养基上培养的温度为35~39℃，时间为20~28h；
所述摇床培养的温度为35~39℃，时间为20~28h。
7.如权利要求4所述的调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物，其特征在于，所述过滤用的滤膜为0.22μm滤膜。
8.一种调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将权利要求2~7任一项所述的调节皮肤微生态和修复肌肤屏障的组合物混合溶解，过滤，即可。
9.一种护肤品，其特征在于，所述护肤品含有所述权利要求2~7任一项所述的组合物。
10.如权利要求9所述的护肤品，其特征在于，所述护肤品选自面膜液、乳液、膏霜、爽肤水、精华液、原液、洁面乳、化妆水、香水、卸妆水、粉底液、粉底霜、遮瑕霜中的任一种。
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