CN117538434A - 一种尼拉帕尼中间体的检测方法 - Google Patents
一种尼拉帕尼中间体的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117538434A CN117538434A CN202311319949.3A CN202311319949A CN117538434A CN 117538434 A CN117538434 A CN 117538434A CN 202311319949 A CN202311319949 A CN 202311319949A CN 117538434 A CN117538434 A CN 117538434A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- nilaparib
- mobile phase
- detection
- aniline
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 50
- COUOFYDJUDASPJ-SNVBAGLBSA-N 4-[(3s)-piperidin-3-yl]aniline Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1[C@H]1CNCCC1 COUOFYDJUDASPJ-SNVBAGLBSA-N 0.000 claims abstract description 16
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 9
- 125000005233 alkylalcohol group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 12
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- SBTVLCPCSXMWIQ-UHFFFAOYSA-N (3,5-dimethylphenyl) carbamate Chemical compound CC1=CC(C)=CC(OC(N)=O)=C1 SBTVLCPCSXMWIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 2
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 14
- 239000000945 filler Substances 0.000 abstract description 2
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 abstract description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 abstract 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 21
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- -1 4- ((3S) -3-piperidyl-phenyl) -2H-indazole-7-formamide Chemical compound 0.000 description 13
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 11
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 10
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 6
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 6
- YKNYRYPSOMLBJT-UHFFFAOYSA-N C(C)(C)O.C(O)CN Chemical compound C(C)(C)O.C(O)CN YKNYRYPSOMLBJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 5
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 5'-adenylphosphoric acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- KUBVAKPLZMILDM-UHFFFAOYSA-N n-ethylethanamine;propan-2-ol Chemical compound CC(C)O.CCNCC KUBVAKPLZMILDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 2
- MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N (S)-camphorsulfonic acid Chemical compound C1C[C@@]2(CS(O)(=O)=O)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N 0.000 description 1
- OCQAXYHNMWVLRH-UHFFFAOYSA-N 2,3-dibenzoyl-2,3-dihydroxybutanedioic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)C(O)(C(O)=O)C(O)(C(=O)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 OCQAXYHNMWVLRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KMGUEILFFWDGFV-UHFFFAOYSA-N 2-benzoyl-2-benzoyloxy-3-hydroxybutanedioic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)C(C(C(O)=O)O)(C(O)=O)OC(=O)C1=CC=CC=C1 KMGUEILFFWDGFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 201000001342 Fallopian tube cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000013452 Fallopian tube neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 208000007571 Ovarian Epithelial Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000026149 Primary peritoneal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012801 analytical assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- MIOPJNTWMNEORI-UHFFFAOYSA-N camphorsulfonic acid Chemical compound C1CC2(CS(O)(=O)=O)C(=O)CC1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000005557 chiral recognition Methods 0.000 description 1
- 238000011217 control strategy Methods 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N ethanesulfonic acid Chemical compound CCS(O)(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 125000003563 glycoside group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- PCHKPVIQAHNQLW-CQSZACIVSA-N niraparib Chemical compound N1=C2C(C(=O)N)=CC=CC2=CN1C(C=C1)=CC=C1[C@@H]1CCCNC1 PCHKPVIQAHNQLW-CQSZACIVSA-N 0.000 description 1
- 229950011068 niraparib Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229940126701 oral medication Drugs 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000004886 process control Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 125000005372 silanol group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 150000003892 tartrate salts Chemical class 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/30—Control of physical parameters of the fluid carrier of temperature
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/60—Construction of the column
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
- G01N2030/027—Liquid chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
- G01N2030/324—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed speed, flow rate
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Hydrogenated Pyridines (AREA)
Abstract
本发明公开了一种尼拉帕尼中间体——(S)‑4‑(哌啶‑3‑基)苯胺或其盐的检测方法,该方法以水和有机溶剂为样品配制溶剂,以表面涂敷有直链淀粉‑三(3,5)‑二甲基苯基氨基甲酸酯的硅胶为色谱柱填充剂,以正己烷为流动相A,碱性电荷迁移剂和低级烷基醇的混合溶液为流动相B,进行洗脱。能够有效溶解尼拉帕尼中间体样品,降低了检验误差;通过有效地洗脱、分离和定量分析尼拉帕尼中间体中异构体杂质,从源头控制尼拉帕尼产品质量,为工业化生产提供简便、准确、快速、可靠的检测方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种尼拉帕尼中间体的检测方法,尤其涉及一种尼拉帕尼中间体中异构体杂质的检测方法。
背景技术
由美国Tesaro公司和默沙东公司共同研制的尼拉帕尼(Niraparib)是一种口服的多聚腺苷二磷酸(ADP)核糖聚合酶(PARP)抑制类药物,主要用于治疗女性高发复发性上皮卵巢癌、输卵管癌和原发性腹膜癌的靶向药物。其作为卵巢癌的重磅药物,兼容性好,受食物和药物的影响小,治疗效果显著。
手性药物的不同立体异构体在药效、药代及毒理等方面都可能存在差异,即在原料药质量研究时,应结合其工艺与各手性中心的稳定性确定需研究控制的立体异构体杂质。手性杂质作为有机杂质的一种,其质控的基本思路与有机杂质相似。在进行研究时,首先应该进行杂质溯源的分析,确定各手性异构体的风险程度,并制定相应的控制策略。
尼拉帕尼活性成分为游离碱,化学名称为2-(4-((3S)-3-哌啶-基)苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺,其分子结构中含有一个手性碳原子,其中S构型的化合物才具备药理活性。此手性碳来源于尼拉帕尼中间体,其游离碱的化学名称为(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺,CAS号1196713-21-9,结构如下:
为确保临床用药的安全有效,产品质量控制必须与原物料的源头控制及生产的过程控制相结合才能切实控制产品的质量,因此,有必要对尼拉帕尼中间体(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺或其盐的异构体杂质进行有效的分离、控制,与终产品的质量控制相结合,可达到全面控制产品光学纯度的目的,现有技术中未见针对(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺及其盐中异构体的检测方法。
发明内容
发明目的:本发明旨在提供一种能够专属地针对尼拉帕尼中间体——(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺或其盐中的异构体杂质,进行有效地洗脱、分离和定量检测的分析方法。
技术方案:本发明所述的尼拉帕尼中间体——(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺或其盐的检测方法包括以下步骤:
(1)配制样品:将尼拉帕尼中间体样品溶于水后,加入有机溶剂配制至设定浓度即得;
(2)检测:采用正相色谱柱,以正己烷为流动A,碱性电荷迁移剂和低级烷基醇的混合溶液为流动相B,进行洗脱;
(3)分析:记录色谱图,计算结果。
其中,(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺的盐包括其硫酸盐、草酸盐、樟脑磺酸盐、乙基磺酸盐、二苯甲酰酒石酸盐、酒石酸盐。
在步骤(1)中,配制的样品具体包含:
a、供试品溶液:将尼拉帕尼中间体溶于水后,加入有机溶剂定量稀释至设定浓度,得供试品溶液,供试品溶液的具体浓度为0.5mg/ml~2.5mg/ml;
b、定位溶液:将尼拉帕尼中间体和其对映异构体的对照品溶于水后,加入低级烷基醇定量稀释至设定浓度,得定位溶液。
在步骤(3)中,将待测供试品溶液和定位溶液分别进样,记录色谱图,按面积归一化法计算尼拉帕尼中间体的异构体杂质含量。
优选,步骤(2)中进行等度洗脱时,所述的流动相A的体积分数不低于85%,更优选为流动相A:流动相B=85:15(V/V)。
优选,步骤(1)中所述的有机溶剂为甲醇、无水乙醇、异丙醇中的一种或多种。
优选,步骤(1)中所述的有机溶剂的体积分数不得高于90%。
考虑到硫酸、草酸、樟脑磺酸、乙基磺酸、二苯甲酰酒石酸、酒石酸溶于水或乙醇,而(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺极性较大,需加入些许水才可溶解,步骤(1)中,有机溶剂的体积占比不得高于90%,优选的为无水乙醇。
优选,步骤(2)中所述的碱性电荷迁移剂选自二乙胺、三乙胺、乙醇胺中的一种或多种,碱性电荷迁移剂更优选为乙醇胺,乙醇胺体积分数优选为0.4%。
进一步优选,步骤(2)中所述的低级烷基醇为无水乙醇、异丙醇中的一种或两种混合,低级烷基醇更优选为异丙醇。
优选,步骤(2)中所述的碱性电荷迁移剂在流动相B中的体积分数为0.2%~0.5%。
优选,步骤(2)中所述的色谱柱以表面涂敷有直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)为硅胶为填充剂,进一步优选的色谱柱规格为4.6*250mm,5μm,更优选的色谱柱为CHIRALPAKAD-H。
CHIRALPAKAD-H固定相中含有为亲水性糖苷结构和疏水性的苯环结构。尼拉帕尼中间体的分子结构中含有氨基,可以与固定相结构中的酰胺键形成较强的氢键作用;此外还含有苯环,可以和固定相中的苯环产生π-π电子作用。尼拉帕尼中间体为碱性化合物,会与手性柱中裸露的硅醇基发生次级作用,导致其峰形差。故流动相中添加碱性的电荷迁移剂来改善峰形。
优选,步骤(2)中,采用紫外检测器,所述检测的检测波长为210nm~240nm,更优选为240nm。
优选,步骤(2)中,所述的色谱柱的柱温为20℃~35℃,流动相的流速为0.8ml/min~1.2ml/min,进样量为5μl~10μl。更优选地,柱温为30℃,流速为1.0ml/min,进样量为5μl。
有益效果:与现有技术相比,本发明具有如下显著优点:
能够有效溶解尼拉帕尼中间体样品,降低了检验误差;通过有效地洗脱、分离和定量分析尼拉帕尼中间体中异构体杂质,从源头控制尼拉帕尼产品质量,为工业化生产提供简便、准确、快速、可靠的检测方法。
附图说明
图1为对比例1的定位溶液的HPLC检测色谱图;
图2为对比例2的定位溶液的HPLC检测色谱图;
图3为对比例3的定位溶液的HPLC检测色谱图;
图4为对比例4的供试品溶液的HPLC检测色谱图;
图5为对比例5的供试品溶液的HPLC检测色谱图;
图6为对比例6的供试品溶液的HPLC检测色谱图;
图7为实施例1的定位溶液的HPLC检测色谱图;
图8为实施例1的供试品溶液的HPLC检测色谱图;
图9为实施例2的供试品溶液的HPLC检测色谱图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步说明。
对比例1
1、检测方法
(1)配制定位溶液:分别取(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺和对映异构体的对照品各约5mg,置20ml容量瓶中,先加水2ml使溶解,再加无水乙醇稀释至刻度。
(2)设置色谱条件:所用高效液相色谱仪为Agilent 1260液相色谱仪,色谱柱为CHIRALPAKAD-H(4.6*250mm,5μm),进样量:10μl;流动相A:正己烷;流动相B:0.1%二乙胺-异丙醇;等度洗脱:流速:1.0ml/min,流动相A:流动相B=90:10(V/V);色谱柱柱温:30℃;紫外检测器的检测波长:210nm,运行35min。
(3)测定分析:定位溶液进样,记录色谱图,按面积归一化法计算尼拉帕尼中间体的异构体含量。
2、检测结果
由图1可见,CHIRALPAKAD-H对ZJ991117的对映异构体有很强的手性识别作用,保留较强,但峰形拖尾严重,不对称因子分别为1.60和1.58。
对比例2
1、检测方法
与对比例1的不同之处在于色谱条件流动相B为0.2%二乙胺-异丙醇;等度洗脱时流动相A:流动相B=80:20(V/V);其余分析条件均与对比例1相同。
2、检测结果
由图2可见,相比于对比例1,峰形有所改善,分离度为1.10。
对比例3
1、检测方法
与对比例2的不同之处在于色谱条件流动相B:0.2%乙醇胺-异丙醇;其余分析条件均与对比例2相同。
2、检测结果
由图3可见,峰形改善,且分离度为1.65。通过对比例1至3相比较,流动相中的碱性电荷迁移剂优选为乙醇胺。
对比例4
1、检测方法
(1)配制供试品溶液:取(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺酒石酸盐约20mg,置10ml容量瓶中,先加水1ml使溶解,再加无水乙醇稀释至刻度。
(2)配制定位溶液:分别取(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺酒石酸盐和对映异构体的对照品各约5mg,置20ml容量瓶中,先加水2ml使溶解,再加无水乙醇稀释至刻度。
(3)设置色谱条件:所用高效液相色谱仪为Agilent 1260液相色谱仪,色谱柱为CHIRALPAKAD-H(4.6*250mm,5μm),进样量:10μl;流动相A:正己烷;流动相B:0.4%乙醇胺-异丙醇;等度洗脱:流速:1.0ml/min,流动相A:流动相B=80:20(V/V);色谱柱柱温:30℃;紫外检测器的检测波长:210nm,运行35min。
(4)测定分析:供试品溶液和定位溶液分别进样,记录色谱图,按面积归一化法计算尼拉帕尼中间体的异构体含量。
2、检测结果
提高乙醇胺浓度为0.4%时,主峰与异构体的分离度为2.11,但样品检测时,异构体峰有杂质干扰,如图4所示。
对比例5
1、检测方法
与对比例4的不同之处在于设置色谱条件:流动相A:流动相B=85:15(V/V);其余分析条件均与对比例4相同。
2、检测结果
提高流动相中正己烷的比例,来降低流动相的洗脱强度。主峰与异构体的分离度为3.23,且样品检测时,异构体峰无杂质干扰,如图5所示。通过对比例4至5相比较,筛选的流动相比例为正己烷:0.4%乙醇胺-异丙醇=85:15(V/V)。但紫外检测器的采集波长为210nm时,色谱图基线波动较大,异构体占比为8.40%时,S/N为29.1,灵敏度差。
对比例6
1、检测方法
(1)配制供试品溶液:取(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺酒石酸盐20mg,置10ml容量瓶中,先加水1ml使溶解,再加无水乙醇稀释至刻度。
(2)设置色谱条件:所用高效液相色谱仪为Agilent 1260液相色谱仪,色谱柱为CHIRALPAKAD-H(4.6*250mm,5μm),进样量:5μl;流动相A:正己烷;流动相B:0.4%乙醇胺-异丙醇;等度洗脱:流速:1.0ml/min,流动相A:流动相B=85:15(V/V);色谱柱柱温:30℃;紫外检测器的检测波长:240nm,运行25min。
(3)测定分析:供试品溶液进样,记录色谱图,按面积归一化法计算尼拉帕尼中间体的异构体含量。
2、检测结果
由图6可知,采集波长改为最大吸收波长240nm后,其异构体占比为0.17%时,S/N为216。优选240nm波长为检测波长。此方法为最终检测方法。
实施例1
1、检测方法
(1)配制供试品溶液:取(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺酒石酸盐约20mg,置10ml容量瓶中,先加水1ml使溶解,再加无水乙醇稀释至刻度。
(2)配制定位溶液:分别取(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺酒石酸盐和对映异构体的对照品各约5mg,置20ml容量瓶中,先加水2ml使溶解,再加无水乙醇稀释至刻度。
(3)设置色谱条件:所用高效液相色谱仪为Agilent 1260液相色谱仪,色谱柱为CHIRALPAKAD-H(4.6*250mm,5μm),进样量:5μl;流动相A:正己烷;流动相B:0.4%乙醇胺-异丙醇;等度洗脱:流速:1.0ml/min,流动相A:流动相B=85:15(V/V);色谱柱柱温:30℃;紫外检测器的检测波长:240nm,运行25min。
(4)测定分析:待测供试品溶液和定位溶液分别进样,记录色谱图,按面积归一化法计算尼拉帕尼中间体的异构体杂质含量。
2、检测结果
由图7定位溶液的色谱图可知,(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺和其对映异构体的峰形较好,(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺的保留时间为14.9min,其对映异构体保留时间为12.9min;二者的分离度为3.23。由图8供试品溶液的色谱图可知,(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺酒石酸盐供试品溶液色谱图中异构体占比为0.083%时,S/N为99.6。此方法为最终检测方法。
对实施例1提供的分析测定方法进行方法学验证,结果如下表:
根据实施例1验证数据可知,本发明所述的尼拉帕尼中间体及异构体含量的测定方法,灵敏度高、专属性强、精密度高,且有良好色谱条件耐用性,可用于尼拉帕尼中间体中异构体的质量控制。
实施例2
1、检测方法
与实施例1的不同之处在于:
(1)配制供试品溶液:取(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺草酸盐约20mg,置10ml容量瓶中,先加水1ml使溶解,再加无水乙醇稀释至刻度。
(2)配制定位溶液:分别取(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺草酸盐和对映异构体的对照品各约5mg,置20ml容量瓶中,先加水2ml使溶解,再加无水乙醇稀释至刻度。
其余分析条件均与实施例1相同。
2、检测结果
由图9可知,(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺和其对映异构体的峰形尖锐,异构体占比为0.37%,且其检测无干扰,异构体与其主峰的分离度为3.02。
Claims (10)
1.一种尼拉帕尼中间体的检测方法,所述尼拉帕尼中间体为(S)-4-(哌啶-3-基)苯胺或其盐,其特征在于,包括以下步骤:
(1)配制样品:将尼拉帕尼中间体样品溶于水后,加入有机溶剂配制至设定浓度即得;
(2)检测:采用正相色谱柱,以正己烷为流动A,碱性电荷迁移剂和低级烷基醇的混合溶液为流动相B,进行洗脱;
(3)分析:记录色谱图,计算结果。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)中进行洗脱时,所述的流动相A的体积分数不低于85%。
3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(1)中所述的有机溶剂为甲醇、无水乙醇、异丙醇中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(1)中所述的有机溶剂的体积分数不得高于90%。
5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)中所述的碱性电荷迁移剂选自二乙胺、三乙胺、乙醇胺中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)中所述的低级烷基醇为无水乙醇、异丙醇中的一种或两种混合。
7.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)中所述的碱性电荷迁移剂在流动相B中的体积分数为0.2%~0.5%。
8.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)中所述的色谱柱以表面涂敷有直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶为填充剂。
9.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)中,所述检测的检测波长为210nm~240nm。
10.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)中,所述的色谱柱的柱温为20℃~35℃,流动相的流速为0.8ml/min~1.2ml/min。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202311319949.3A CN117538434A (zh) | 2023-10-12 | 2023-10-12 | 一种尼拉帕尼中间体的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202311319949.3A CN117538434A (zh) | 2023-10-12 | 2023-10-12 | 一种尼拉帕尼中间体的检测方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN117538434A true CN117538434A (zh) | 2024-02-09 |
Family
ID=89794649
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202311319949.3A Pending CN117538434A (zh) | 2023-10-12 | 2023-10-12 | 一种尼拉帕尼中间体的检测方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN117538434A (zh) |
-
2023
- 2023-10-12 CN CN202311319949.3A patent/CN117538434A/zh active Pending
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN109870521B (zh) | 一种正相色谱法分离磷酸奥司他韦对映异构体的方法 | |
CN110726788B (zh) | 一种高效液相色谱法分离和测定盐酸左西替利嗪及其有关物质的方法 | |
CN111983074B (zh) | 一种用高效液相色谱测定帕拉米韦中间体异构体的方法 | |
CN112697906B (zh) | 一种检测托法替布手性中间体及其对映异构体的方法 | |
CN104965041A (zh) | 一种帕瑞昔布钠异构体的高效液相色谱检测方法 | |
CN111189947B (zh) | 一种分离检测富马酸丙酚替诺福韦异构体的分析方法 | |
CN114166983B (zh) | 一种分离与检测磷酸奥司他韦中间体及其杂质的分析方法 | |
CN113866337B (zh) | 一种分离与测定磷酸奥司他韦同分异构体的质量分析方法 | |
CN111122736B (zh) | 一种用于检测布瓦西坦中间体中对映异构体的方法 | |
Patti et al. | Chiral HPLC analysis of milnacipran and its FMOC‐derivative on cellulose‐based stationary phases | |
CN117538434A (zh) | 一种尼拉帕尼中间体的检测方法 | |
CN112834637B (zh) | 反相高效液相色谱检测帕拉米韦中间体i的方法 | |
CN108344832A (zh) | 一种主成分与其杂质完全分离的检测方法 | |
CN114324699A (zh) | 气相色谱法分析4-(异丙氨基)丁醇的方法 | |
CN114235998B (zh) | 超高效液相色谱测定盐酸卡替洛尔及其滴眼液中有关物质的方法 | |
CN111257441B (zh) | 一种帕瑞昔布钠合成工艺杂质的检测方法 | |
CN113419006B (zh) | 一种阿瑞匹坦光学异构体的液相分析方法 | |
CN114295747B (zh) | 一种帕拉米韦起始物料及杂质的分析方法 | |
CN117723680B (zh) | 一种盐酸洛贝林杂质的分离检测方法 | |
CN110361472B (zh) | 一种米库氯铵中间体miv-g异构体的hplc检测方法 | |
CN110850012B (zh) | 一种1-(2,3-二氯苯基)哌嗪盐酸盐及其有关物质的检测方法 | |
CN117074579B (zh) | 一种氨磺必利口服溶液有关物质的分析方法 | |
CN113917027B (zh) | 一种阿伐那非及其中间体的光学异构体分离检测方法 | |
CN112684092A (zh) | 利伐沙班中间体对映异构体杂质的分析方法 | |
CN110702830A (zh) | 一种盐酸伊立替康注射液中异构体的高效液相色谱检测方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |