CN117281209A - 一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料及制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料及制备方法，以苦瓜、沙棘、葵花盘、铁皮石斛及蛹虫草为主要原料，按重量份比包括苦瓜30‑60份、沙棘40‑70份、葵花盘10‑30份、铁皮石斛10‑40份、蛹虫草5‑15份、植物提取液5‑12份、小分子水500‑1000份，在复合酶的作用下，低温酶解制备分子量≤1kD的小分子多肽，按比例添加植物提取液，混匀后喷雾干燥，得到复合肽，再导入到小分子水中，与小分子融合形成复合肽液体饮料，采用微生物制剂和调质结合，达到一定的脱苦效果，制得的复合肽液体饮料，促进人体新陈代谢，能够提升细胞活性和机体免疫力，同时能够提高抑制血管紧张素转化酶活性，具有非常显著的降压活性。

Description

一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料及制备 方法
技术领域
本发明涉及植物多肽功能饮料领域，特别涉及一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料。
背景技术
肽是涉及人体内多种细胞功能的重要物质。肽可以合成细胞，并调节细胞的功能活动。肽在人体作为神经递质，传递信息。肽可在人体内作为运输工具，将人体所食的各种营养物质与各种维生素、生物素、钙及对人体有益的微量元素输送到人体各细胞、器官和组织。肽是人体重要的生理调节物，它可全面调节人体生理功能，增强和发挥人体生理活性，它具有重要的生物学功能。肽对人的细胞活性、功能活动、生命存在来讲，具有不可替代的重要性。
肽是两个或两个以上氨基酸以肽链相连的化合物，是介于大分子蛋白质和小分子氨基酸之间的一段最具活性、最易吸收、最能激发人体再生系统的功能性营养。肽是构成人体内酶、激素、抗体、神经间质等活性物质不可替代的材料，是生命之源。肽具有原蛋白质和单体氨基酸不具备的独特的生理活性和医疗保健作用，具备营养、保健、治疗三重功能。肽的种类繁多，大体上分三类：动物肽(骨胶原蛋白肽、胸腺肽等)、植物肽(大豆肽、核桃肽等)、化学合成肽、药物类(催产肽、胃泌素四肽等)。
研究发现，蛋白质经水解制得的多肽营养性能好，且易于被人体吸收利用。但蛋白质水解会产生不同程度的苦味，苦味是一种阈值很低的味感，当含量在较低的时候就可以品尝出来。由于苦味的产生，使食品无法满足人们的口感和嗜好。
近年来，虽然在探究蛋白水解物的苦味成因及脱苦技术上取得了重大进展，但仍存在一系列问题：(a)对于短肽苦味构效关系的研究欠缺；(b)选择分离法脱苦虽然有一系列优点，但会造成营养物质的损失；(c)包埋法因为不会造成营养物质损失而被广泛应用，但可能产生不愉快的风味；(d)微生物和酶法脱苦效果较好，但由于脱苦选用的微生物种类有限，仅使用微生物脱苦的效果欠佳，也限制了其在食品工业中的应用。
发明内容
鉴于此，本发明提出一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料及其制备方法，解决上述问题。
本发明的技术方案是这样实现的：一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法：以苦瓜、沙棘、葵花盘、铁皮石斛及蛹虫草为主要原料，在复合酶的作用下，低温酶解制备分子量≤1kD的小分子多肽，按比例添加植物提取液，混匀后喷雾干燥，得到复合肽，再导入到小分子水中，与小分子融合形成复合肽液体饮料。
进一步的，所述植物提取液为质量(3.5-4.6):(1.3-2.0):(5.2-8.5)的桑葚、紫苏籽、高良姜的混合醇提液。
进一步的，一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，包括以下步骤：
S1、多肽酶解：将苦瓜、沙棘、葵花盘、铁皮石斛以及蛹虫草原料，筛选、洗净，60-80℃干燥、粉碎成50-80目颗粒，得到混合粉末，加入纯水中，搅拌混合，得到混合溶液，调节pH值为8-10，在80-100℃下浸提30-80min，离心处理，其上清液，调节pH值为6-7，加入复合酶在温度40-60℃下搅拌酶解2-4h，得到酶解液；
S2、脱苦：在酶解液中加入0.8-2.5重量份的微生物制剂，在30-50℃下发酵8-12天，得到发酵液，再转入调质器中，通入水蒸气在70-90℃调质8-12min，得到初调液；
S3、超滤分离：将上述得到的初调液进行超滤分离，工作压力为0.2-0.5MPa，温度5-10℃，收集分子量在1kDa以下的初调多肽液；
S4、二次调质：将初调多肽液再次转入调质器中，进行二次调质，控制通入水蒸气在90-120℃调质3-5min，得到多肽液；
S5、调配：将多肽液导入小分子水中，加入上述植物提取液，高速振荡处理8-15h，振荡速率2000-4000rpm，均质、过滤、灭菌、灌装，得到复合肽液体饮料。
进一步的，所述S1中混合粉末和纯水的质量体积比为3:6-10g/mL。
进一步的，所述S1中上清液和复合酶的体积比为180-230:9-12，所述复合酶为质量比为3-8:1-2:0.3-0.8的菠萝蛋白酶、鼠李糖苷酶、氨肽酶。
进一步的，所述S2中微生物制剂为醋酸杆菌、酿酒酵母菌以及干酪乳杆菌按照5-9:1-3:2-4的重量比混合配置得到。
进一步的，所述S2中微生物制剂的活菌总浓度为1×106-1×108CFU/mL。
进一步的，复合肽液体饮料各原料配方，按重量份比包括苦瓜30-60份、沙棘40-70份、葵花盘10-30份、铁皮石斛10-40份、蛹虫草5-15份、植物提取液5-12份、小分子水500-1000份。
进一步的，一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法制备所述的复合肽液体饮料。
进一步的，所述复合肽液体饮料用于保护心脑血管、提高免疫力。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明通过苦瓜、沙棘、葵花盘、铁皮石斛、蛹虫草按比例复配制得多肽，结合植物提取液，再融入小分子水当中，使制得的复合肽液体饮料，饮用后肽进入人体后，首先与人体的细胞膜融合，使细胞膜产生抗体，与肽融合的细胞膜，能够更好地增强免疫力，抑制血管紧张素转化酶，参与心脑血管的调节，能够保护心脑血管、提高免疫力；
通过复合酶酶解多肽，再加入微生物制剂和调质，使大量的肽链末端的疏水氨基酸水解为游离氨基酸，使苦味下降甚至完全消失，有效达到脱苦效果，提升复合肽液体饮料的风味口感。
本发明的复合肽液体饮料安全性高、效果好，可以广泛应用在食品、保健品领域。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料，按重量份比包括苦瓜30份、沙棘40份、葵花盘10份、铁皮石斛10份、蛹虫草5份、植物提取液5份、小分子水500份；所述植物提取液为质量3.5:1.3:5.2的桑葚、紫苏籽、高良姜的混合醇提液。
实施例2
一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料，按重量份比包括苦瓜60份、沙棘70份、葵花盘30份、铁皮石斛40份、蛹虫草5-15份、植物提取液12份、小分子水1000份；所述植物提取液为质量4.6:2.0:8.5的桑葚、紫苏籽、高良姜的混合醇提液。
实施例3
一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料，按重量份比包括苦瓜45份、沙棘50份、葵花盘20份、铁皮石斛30份、蛹虫草10份、植物提取液8份、小分子水800份；所述植物提取液为质量4:1.8:7.5的桑葚、紫苏籽、高良姜的混合醇提液；
上述实施例1-3的复合肽液体饮料采用以下制备方法：
S1、多肽酶解：将苦瓜、沙棘、葵花盘、铁皮石斛以及蛹虫草原料，筛选、洗净，70℃干燥、粉碎成60目颗粒，得到混合粉末，加入纯水中，混合粉末和纯水的质量体积比为3:8g/mL，搅拌混合，得到混合溶液，调节pH值为9，在90℃下浸提50min，离心处理，其上清液，调节pH值为6.5，加入复合酶在温度50℃下搅拌酶解3h，上清液和复合酶的体积比为200:10，所述复合酶为质量比为5:1.5:0.5的菠萝蛋白酶、鼠李糖苷酶、氨肽酶，得到酶解液；
S2、脱苦：在酶解液中加入1.7重量份的微生物制剂，微生物制剂为醋酸杆菌、酿酒酵母菌以及干酪乳杆菌按照7:2:3的重量比混合配置得到，微生物制剂的活菌总浓度为1×107CFU/mL，在40℃下发酵10天，得到发酵液，再转入调质器中，通入水蒸气在80℃调质10min，得到初调液；
S3、超滤分离：将上述得到的初调液进行超滤分离，工作压力为0.3MPa，温度8℃，收集分子量在1kDa以下的初调多肽液；
S4、二次调质：将初调多肽液再次转入调质器中，进行二次调质，控制通入水蒸气在110℃调质4min，得到多肽液；
S5、调配：将多肽液导入小分子水中，加入上述植物提取液，高速振荡处理12h，振荡速率3000rpm，均质、过滤、灭菌、灌装，得到复合肽液体饮料。
实施例4
一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料，按重量份比包括苦瓜45份、沙棘50份、葵花盘20份、铁皮石斛30份、蛹虫草10份、植物提取液8份、小分子水800份；所述植物提取液为质量4:1.8:7.5的桑葚、紫苏籽、高良姜的混合醇提液；
上述复合肽液体饮料采用以下制备方法：
S1、多肽酶解：将苦瓜、沙棘、葵花盘、铁皮石斛以及蛹虫草原料，筛选、洗净，60℃干燥、粉碎成50目颗粒，得到混合粉末，加入纯水中，混合粉末和纯水的质量体积比为3:6g/mL，搅拌混合，得到混合溶液，调节pH值为8，在80℃下浸提30min，离心处理，其上清液，调节pH值为6，加入复合酶在温度40℃下搅拌酶解2h，上清液和复合酶的体积比为180:9，所述复合酶为质量比为3:1:0.3的菠萝蛋白酶、鼠李糖苷酶、氨肽酶，得到酶解液；
S2、脱苦：在酶解液中加入0.8重量份的微生物制剂，微生物制剂为醋酸杆菌、酿酒酵母菌以及干酪乳杆菌按照5:1:2的重量比混合配置得到，微生物制剂的活菌总浓度为1×106CFU/mL，在30℃下发酵8天，得到发酵液，再转入调质器中，通入水蒸气在70℃调质8min，得到初调液；
S3、超滤分离：将上述得到的初调液进行超滤分离，工作压力为0.2MPa，温度5℃，收集分子量在1kDa以下的初调多肽液；
S4、二次调质：将初调多肽液再次转入调质器中，进行二次调质，控制通入水蒸气在90℃调质3min，得到多肽液；
S5、调配：将多肽液导入小分子水中，加入上述植物提取液，高速振荡处理8h，振荡速率2000rpm，均质、过滤、灭菌、灌装，得到复合肽液体饮料。
实施例5
一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料，按重量份比包括苦瓜45份、沙棘50份、葵花盘20份、铁皮石斛30份、蛹虫草10份、植物提取液8份、小分子水800份；所述植物提取液为质量4:1.8:7.5的桑葚、紫苏籽、高良姜的混合醇提液；
上述复合肽液体饮料采用以下制备方法：
S1、多肽酶解：将苦瓜、沙棘、葵花盘、铁皮石斛以及蛹虫草原料，筛选、洗净，80℃干燥、粉碎成80目颗粒，得到混合粉末，加入纯水中，混合粉末和纯水的质量体积比为3:10g/mL，搅拌混合，得到混合溶液，调节pH值为8-10，在100℃下浸提80min，离心处理，其上清液，调节pH值为6-7，加入复合酶在温度60℃下搅拌酶解4h，上清液和复合酶的体积比为180-230:9-12，，所述复合酶为质量比为8:2:0.8的菠萝蛋白酶、鼠李糖苷酶、氨肽酶，得到酶解液；
S2、脱苦：在酶解液中加入2.5重量份的微生物制剂，微生物制剂为醋酸杆菌、酿酒酵母菌以及干酪乳杆菌按照9:3:4的重量比混合配置得到，微生物制剂的活菌总浓度为1×108CFU/mL，在50℃下发酵12天，得到发酵液，再转入调质器中，通入水蒸气在90℃调质12min，得到初调液；
S3、超滤分离：将上述得到的初调液进行超滤分离，工作压力为0.5MPa，温度10℃，收集分子量在1kDa以下的初调多肽液；
S4、二次调质：将初调多肽液再次转入调质器中，进行二次调质，控制通入水蒸气在120℃调质5min，得到多肽液；
S5、调配：将多肽液导入小分子水中，加入上述植物提取液，高速振荡处理15h，振荡速率4000rpm，均质、过滤、灭菌、灌装，得到复合肽液体饮料。
对比例1
一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，依据实施例3的制备方法，本对比例与实施例3的区别在于，复合肽液体饮料各原料配方，按重量份比包括苦瓜10份、沙棘30份、葵花盘40份、铁皮石斛50份、蛹虫草25份、植物提取液20份、小分子水1000份。
对比例2
一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，依据实施例3的制备方法，本对比例与实施例3的区别在于，未进行S2的脱苦步骤，具体为以下操作步骤：
S1、多肽酶解：将苦瓜、沙棘、葵花盘、铁皮石斛以及蛹虫草原料，筛选、洗净，70℃干燥、粉碎成60目颗粒，得到混合粉末，加入纯水中，混合粉末和纯水的质量体积比为3:8g/mL，搅拌混合，得到混合溶液，调节pH值为9，在90℃下浸提50min，离心处理，其上清液，调节pH值为6.5，加入复合酶在温度50℃下搅拌酶解3h，上清液和复合酶的体积比为200:10，所述复合酶为质量比为5:1.5:0.5的菠萝蛋白酶、鼠李糖苷酶、氨肽酶，得到酶解液；
S2、超滤分离：将上述得到的酶解液进行超滤分离，工作压力为0.3MPa，温度8℃，收集分子量在1kDa以下的初调多肽液；
S3、调质：将初调多肽液再次转入调质器中，进行调质，控制通入水蒸气在110℃调质4min，得到多肽液；
S5、调配：将多肽液导入小分子水中，加入上述植物提取液，高速振荡处理12h，振荡速率3000rpm，均质、过滤、灭菌、灌装，得到复合肽液体饮料。
对比例3
一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，依据实施例3的制备方法，本对比例与实施例3的区别在于，所述S2脱苦方法为在酶解液中加入1.7重量份的掩盖剂，所述掩盖剂为多聚磷酸钠，再转入调质器中，通入水蒸气在80℃调质10min，得到初调液。
对比例4
一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，依据实施例3的制备方法，本对比例与实施例3的区别在于，所述多肽酶解步骤中所述复合酶为质量比为5:1.5:0.5的菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶与胰蛋白酶。
试验例1-氨基酸测定
按照GB/T30987-2014的方法对实施例1-5和对比例1-4的复合肽液体饮料测试其疏水性氨基酸含量及游离氨基酸含量，采用高效液相色谱仪、IPCO、TAG氨基酸分析柱进行测定，测定结果如下表1：
疏水性氨基酸含量mg/100mL 游离氨基酸含量mg/100mL
实施例1 2.51 8.04
实施例2 1.83 8.15
实施例3 1.24 9.26
实施例4 2.41 8.15
实施例5 2.93 8.31
对比例1 3.75 4.26
对比例2 4.67 2.01
对比例3 5.84 1.35
对比例4 3.79 3.21
上述结果可知，通过本发明的制备工艺对多肽进行脱苦，采用微生物制剂对蛋白水解液的疏水性氨基酸有反生作用，选取合适的菌株组合，特定的温度和环境下发酵，大量的肽链末端的疏水氨基酸水解为游离氨基酸，水解后的游离氨基酸含量随之增加，疏水性氨基酸含量降低，使苦味下降甚至完全消失。
试验例2-苦味值评价
随机挑选的90位年龄在20-40岁的味觉敏感的健康人员，分为9组，每组10人，分别食用实施例1-5和对比例1-3制得的复合肽液体饮料，对其进行评分，取平均值；
苦味值评价方法：以奎宁为基准物质，按L.Mogensen和JAdler-Nissen的方法配置标准液。经评定当标准液浓度为A(A＝3×10mol*L时刚好无苦味，定A值为下限7A为上限，在1A～7A之间，奎宁浓度成倍增加，苦味值也相应增加。设定评分标准见表2。
表2苦味值参照表
奎宁浓度 1A 2A 3A 4A 5A 6A 7A
分值 0 2 3 4 5 6 7
苦味等级 无苦味 微微苦 微苦 中度苦 苦 较苦 很苦
表3苦味分值表
苦味分值
实施例1 1.2
实施例2 0
实施例3 0
实施例4 1.3
实施例5 1.2
对比例1 3.1
对比例2 5.6
对比例3 4.5
对比例4 3.2
上述结果表明，采用微生物制剂和调质结合脱苦，协同增效，水解肽链氨基酸疏水性氨基酸，脱去肽链上导致苦味的疏水性氨基酸，达到初步的脱苦目的，容纳后进行调质处理，在水蒸气的作用下将苦味疏水性氨基酸掩藏于水分子结构内部，达到一定的脱苦效果。
试验例3-ACE抑制活性的测定
(1)取40μL上述复合肽液体饮料与40μLACE溶液，37℃保温5min。加入50uL HHL(5mmol/L)溶液，37℃水浴反应1h。然后200uL HCL终止反应。
(2)反应液过滤，用C18分析柱进行分析，检测波长228nm。流动相为乙腈(0.1％TFA):超纯水(0.1％TFA)30％:70％
(3)ACE计算公式：
试验例4-免疫力测定
(1)选初始体重范围为25-30g的白鼠60只，随机分为实验组和空白组每组10只。试验组灌胃实施例1-5所得的复合肽液体饮料，空白组灌胃去离子水。按照0.02mL/g复合肽液体饮料的灌胃标准，每天灌胃白鼠一次，连续灌胃30天。
(2)各组白鼠最后一次灌胃30min后，颈椎脱白法处死白鼠，采用LDH测定法NK细胞活性，采用酶标测定仪检测试验组和空白组的OD值(光密度值)，并计算NK细胞的活性。
表4测试结果
组别 ACE抑制率(％) NK细胞活性(％)
实施例1 66.9 47.1
实施例2 68.4 46.8
实施例3 69.5 49.6
实施例4 64.8 47.5
实施例5 65.8 45.9
空白 40.1 25.9
上述结果显示，本发明的复合肽液体饮料中，通过各小分子肽相互促进、产生协同作用，与植物提取液复配，提高了低聚肽分子的吸收能力，促进人体新陈代谢，能够提升细胞活性和机体免疫力，同时能够提高抑制血管紧张素转化酶活性，具有非常显著的降压活性。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，其特征在于：以苦瓜、沙棘、葵花盘、铁皮石斛及蛹虫草为主要原料，在复合酶的作用下，低温酶解制备分子量≤1kD的小分子多肽，按比例添加植物提取液，混匀后喷雾干燥，得到复合肽，再导入到小分子水中，与小分子融合形成复合肽液体饮料。
2.如权利要求1所述的一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，其特征在于：所述植物提取液为质量(3.5-4.6):(1.3-2.0):(5.2-8.5)的桑葚、紫苏籽、高良姜的混合醇提液。
3.如权利要求1所述的一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、多肽酶解：将苦瓜、沙棘、葵花盘、铁皮石斛以及蛹虫草原料，筛选、洗净，60-80℃干燥、粉碎成50-80目颗粒，得到混合粉末，加入纯水中，搅拌混合，得到混合溶液，调节pH值为8-10，在80-100℃下浸提30-80min，离心处理，其上清液，调节pH值为6-7，加入复合酶在温度40-60℃下搅拌酶解2-4h，得到酶解液；
S2、脱苦：在酶解液中加入0.8-2.5重量份的微生物制剂，在30-50℃下发酵8-12天，得到发酵液，再转入调质器中，通入水蒸气在70-90℃调质8-12min，得到初调液；
S3、超滤分离：将上述得到的初调液进行超滤分离，工作压力为0.2-0.5MPa，温度5-10℃，收集分子量在1kDa以下的初调多肽液；
S4、二次调质：将初调多肽液再次转入调质器中，进行二次调质，控制通入水蒸气在90-120℃调质3-5min，得到多肽液；
S5、调配：将多肽液导入小分子水中，加入上述植物提取液，高速振荡处理8-15h，振荡速率2000-4000rpm，均质、过滤、灭菌、灌装，得到复合肽液体饮料。
4.如权利要求3所述的一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，其特征在于：所述S1中混合粉末和纯水的质量体积比为3:6-10g/mL。
5.如权利要求3所述的一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，其特征在于：所述S1中上清液和复合酶的体积比为180-230:9-12，所述复合酶为质量比为3-8:1-2:0.3-0.8的菠萝蛋白酶、鼠李糖苷酶、氨肽酶。
6.如权利要求3所述的一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，其特征在于：所述S2中微生物制剂为醋酸杆菌、酿酒酵母菌以及干酪乳杆菌按照5-9:1-3:2-4的重量比混合配置得到。
7.如权利要求3所述的一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，其特征在于：所述S2中微生物制剂的活菌总浓度为1×106-1×108CFU/mL。
8.如权利要求1所述的一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法，其特征在于：各原料配方，按重量份比包括苦瓜30-60份、沙棘40-70份、葵花盘10-30份、铁皮石斛10-40份、蛹虫草5-15份、植物提取液5-12份、小分子水500-1000份。
9.如权利要求1-8任一项所述的一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的制备方法制备所述的复合肽液体饮料。
10.如权利要求1所述的一种保护心脑血管、提高免疫力的复合肽液体饮料的应用，其特征在于：所述复合肽液体饮料用于保护心脑血管、提高免疫力。
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