CN117256865A - 一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物及其制备方法与应用，属于保健食品的技术领域。所述茶叶茶氨酸组合物按重量份数包括以下组分：茶叶茶氨酸、酸枣仁粉、蛋黄卵磷脂、酪蛋白水解物、蜂胶、蜂蜡和混合发酵物。本发明通过将混合发酵物、酪蛋白水解物和茶叶茶氨酸搭配，具有协同作用，能够促进睡眠的发生，也有助于提高睡眠质量和维持充足的睡眠。
Description
技术领域
本发明属于保健食品的技术领域，涉及一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物及其制备方法与应用。
背景技术
失眠是一种现代社会常见的睡眠障碍，通常指患者对睡眠时间或质量不满足并影响白天社会功能的一种主观体验，严重影响人们的身心健康。临床以入睡困难、睡后较易醒、醒后不能再睡、时睡时醒，彻夜不眠为其症候特点，并常伴有白天精神恍惚、反应迟钝、体倦乏力甚至懊恼心烦等症状。随着我国经济的快速发展，生活节奏不断加快，人们的生活压力、工作压力剧增，导致睡眠障碍相关流行性疾病的发生率日益提高。
睡眠障碍已经成为全球关注的重要健康问题。现代医学则认为睡眠障碍的发生常与神经递质、免疫调节、肠道菌群、环境及心理因素等有关，临床上常采取以药物治疗为主，心理行为干预为辅的治疗模式。持续的睡眠障碍将引发人体慢性疲劳、记忆力减退、免疫力低下、心血管损害及代谢性紊乱等多种相关疾病，严重者甚至导致自杀。因此，改善睡眠对于调理人体亚健康，降低相关流行性疾病发生，提高人们生活质量起关键作用。
目前临床上治疗睡眠障碍的化学药物主要有巴比妥类、苯二氮卓类、非苯二氮卓类等，这些药物起效快且作用机制明确，但长期服用易产生残留效应、遗忘效应、停药效应等副作用。
茶氨酸在体内表现出多种药理作用，包括预防心血管疾病、对神经系统的影响、调节血糖、辅助治疗或治疗肿瘤、抗氧化与保护细胞等。其中，茶氨酸对神经系统的作用主要表现在促进脑内多巴胺的释放，增加α-脑电波，减少β-脑电波，从而改善睡眠和调节情绪。
酸枣仁是鼠李科植物酸枣的干燥成熟种子，含有黄酮苷、三萜、皂苷及有机酸等多种成分。传统中医认为酸枣仁具有养肝、宁心、安神的功效。现代药理研究表明，酸枣仁能够有效镇静安神，对失眠者疗效显著。酸枣仁主要是通过调节人体脏腑气血的功能来明显改善睡眠状况的，且很少产生毒副作用。
黄精提取物具有补肺肾脾阴、补脾气、益肾精的功效，可以用于治疗脾脏气阴两虚所引起的失眠多梦、困倦乏力、面色萎黄、口干舌燥、大便干燥等病症。但直接服用黄精提取物可能会引起胃肠道不适、过敏反应等不良反应。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物及其制备方法与应用，通过将混合发酵物、酪蛋白水解物和茶叶茶氨酸搭配，具有协同作用，能够促进睡眠的发生，也有助于提高睡眠质量和维持充足的睡眠。
本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物，按重量份数包括以下组分：
茶叶茶氨酸20-30份、酸枣仁粉20-25份、蛋黄卵磷脂4-7份、酪蛋白水解物5-8份、蜂胶3-5份、蜂蜡30-35份、混合发酵物3-5份。
作为本发明的一种优选技术方案，酸枣仁提取物富含多种活性成分(黄酮类化合物、脂肪酸和皂苷类化合物等)，其中皂苷类化合物是普遍认可的具有镇静催眠作用的物质。此外，摄入酸枣仁提取物后可快速增加血浆游离脂肪酸浓度，进而使色氨酸和白蛋白解离从而上调血浆色氨酸浓度，过量的色氨酸会引起体内生成更多的5-羟色胺从而使机体产生劳累感和睡意，更容易进入睡眠状态；龙眼肉提取物富含酚类物质如没食子酸乙酯，有利于5-羟色胺的产生；酪蛋白水解物中具有睡眠增强作用的生物活性肽，会通过GABA触发受体蛋白，从而增强戊巴比妥诱导的睡眠的物质，因此具有增强睡眠的特性。
本发明公开了一种所述混合发酵物的制备方法，包括以下步骤：
1)将鲜黄精进行洗净、切片、干燥和研磨后，得到黄精粉体；
2)向黄精粉体加入混合液混合均匀后，加热浸取，得到浸取物；
3)向浸取物加入虾青素和无水乙醇低温沉降后，进行离心取固体，紫外线灭菌进行冷冻干燥后，得到混合体；
4)向混合体加入龙眼肉提取物和去离子水搅拌混合后，得到培养液；对培养液进行灭菌后，按照6-7％接种量将菌体浓度为107cfu/mL的植物乳杆菌加入至培养液中，发酵后，得到混合发酵物。
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤1)中，所述干燥的条件为在60℃干燥至含水量6-8％。
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤2)中，所述黄精粉体与混合液的用量比为1g：40mL；所述混合液为50％质量浓度的乙醇水溶液。
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤2)中，所述加热浸取的条件为在70-75℃温度下、浸取1-3h。
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤3)中，所述离心的条件为在转速5000-6000r/min下、离心8-10min；在步骤3)-4)中，所述浸取物、虾青素、无水乙醇、龙眼肉提取物和去离子水的质量比为1.0-1.2：0.2-0.3：4.5：3：10；在步骤4)中，所述发酵的条件为在37℃温度、无氧的环境下发酵18-20h；在此设计中，虾青素的引入能吸附黄精多糖组分并且使黄精多糖自装式负载在虾青素上，利于黄精多糖的浸出，增加其稳定性；虾青素配合黄精多糖的抗氧化作用可以减轻氧化应激对睡眠的干扰，改善睡眠质量，同时，黄精多糖还可以通过调节脑内5-羟色胺(5-HT)等神经递质的水平，影响睡眠-觉醒的调节过程，本发明通过采用植物乳杆菌对黄精提取物和龙眼肉提取物进行混合发酵过程中，产生γ-氨基丁酸(GABA)，可抑制神经元的活动，促进放松和睡眠，植物乳杆菌发酵可能改变黄精多糖和龙眼肉提取物组分的结构，促进其分解成小分子的物质，使其更易被吸收利用，从而增强了对睡眠的影响。
本发明公开了一种茶叶茶氨酸组合物的制备方法，包括以下步骤：
S1、在容器中加入蛋黄卵磷脂、蜂胶和蜂蜡混合均匀进行加热保温后，得到混合物料；
S2、将茶叶茶氨酸、酪蛋白水解物、酸枣仁粉和混合发酵物搅拌混合后，加入至混合物料中，降温至室温，冷冻干燥后，得到茶叶茶氨酸组合物。
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤S1中，所述加热保温的条件为加热至55-68℃、保温3-5min。
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤S2中，所述搅拌混合的条件为在30-35℃温度、转速20-30r/min下、搅拌10-15min。
作为本发明的一种优选技术方案，茶叶茶氨酸和酸枣仁粉均购于湖南金农生物资源股份有限公司；植物乳杆菌购于上海交大昂立股份有限公司，选自中国微生物菌种保藏中心注册号为CGMCC No.1258；酪蛋白水解物购于法国Ingredia公司；龙眼肉提取物(水提物)购于黄山华绿园生物科技有限公司提供，多糖含量≥30％。
本发明公开了所述茶叶茶氨酸组合物在制备保健食品中的应用。
本发明的有益效果：
本发明通过将混合发酵物、酪蛋白水解物和茶叶茶氨酸搭配，具有协同作用，能够促进睡眠的发生，也有助于提高睡眠质量和维持充足的睡眠。
具体实施方式
为更进一步阐述本发明为实现预定发明目的所采取的技术手段及功效，以下结合实施例，对依据本发明的具体实施方式、结构、特征及其功效，详细说明如下。
实施例1
一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物，按重量份数包括以下组分：
茶叶茶氨酸20份、酸枣仁粉20份、蛋黄卵磷脂4份、酪蛋白水解物5份、蜂胶3份、蜂蜡30份、混合发酵物3份。
所述混合发酵物的制备方法包括以下步骤：
1)将鲜黄精进行洗净、切片、干燥和研磨后，得到黄精粉体；其中，所述干燥的条件为在60℃干燥至含水量6％；
2)向黄精粉体加入混合液混合均匀后，加热浸取，得到浸取物；其中，所述黄精粉体与混合液的用量比为1g：40mL；所述混合液为50％质量浓度的乙醇水溶液；所述加热浸取的条件为在70℃温度下、浸取1h；
3)向浸取物加入虾青素和无水乙醇低温沉降后，进行离心取固体，紫外线灭菌进行冷冻干燥后，得到混合体；其中，所述离心的条件为在转速5000r/min下、离心8min；
4)向混合体加入龙眼肉提取物和去离子水搅拌混合后，得到培养液；对培养液进行灭菌后，按照6％接种量将菌体浓度为107cfu/mL的植物乳杆菌加入至培养液中，发酵后，得到混合发酵物；其中，所述发酵的条件为在37℃温度、无氧的环境下发酵18h；
所述浸取物、虾青素、无水乙醇、龙眼肉提取物和去离子水的质量比为1.0：0.2：4.5：3：10。
一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物的制备方法包括以下步骤：
S1、在容器中加入蛋黄卵磷脂、蜂胶和蜂蜡混合均匀进行加热保温后，得到混合物料；其中，所述加热保温的条件为加热至55℃、保温3min；
S2、将茶叶茶氨酸、酪蛋白水解物、酸枣仁粉和混合发酵物搅拌混合后，加入至混合物料中，降温至室温，冷冻干燥后，得到茶叶茶氨酸组合物；其中，所述搅拌混合的条件为在30℃温度、转速20r/min下、搅拌10min。
实施例2
一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物，按重量份数包括以下组分：
茶叶茶氨酸25份、酸枣仁粉22.5份、蛋黄卵磷脂5.5份、酪蛋白水解物6.5份、蜂胶4份、蜂蜡32.5份、混合发酵物4份。
所述混合发酵物的制备方法包括以下步骤：
1)将鲜黄精进行洗净、切片、干燥和研磨后，得到黄精粉体；其中，所述干燥的条件为在60℃干燥至含水量7％；
2)向黄精粉体加入混合液混合均匀后，加热浸取，得到浸取物；其中，所述黄精粉体与混合液的用量比为1g：40mL；所述混合液为50％质量浓度的乙醇水溶液；所述加热浸取的条件为在73℃温度下、浸取2h；
3)向浸取物加入虾青素和无水乙醇低温沉降后，进行离心取固体，紫外线灭菌进行冷冻干燥后，得到混合体；其中，所述离心的条件为在转速5500r/min下、离心9min；
4)向混合体加入龙眼肉提取物和去离子水搅拌混合后，得到培养液；对培养液进行灭菌后，按照6.5％接种量将菌体浓度为107cfu/mL的植物乳杆菌加入至培养液中，发酵后，得到混合发酵物；其中，所述发酵的条件为在37℃温度、无氧的环境下发酵19h；
所述浸取物、虾青素、无水乙醇、龙眼肉提取物和去离子水的质量比为1.1：0.25：4.5：3：10。
一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物的制备方法包括以下步骤：
S1、在容器中加入蛋黄卵磷脂、蜂胶和蜂蜡混合均匀进行加热保温后，得到混合物料；其中，所述加热保温的条件为加热至58℃、保温4min；
S2、将茶叶茶氨酸、酪蛋白水解物、酸枣仁粉和混合发酵物搅拌混合后，加入至混合物料中，降温至室温，冷冻干燥后，得到茶叶茶氨酸组合物；其中，所述搅拌混合的条件为在32.5℃温度、转速25r/min下、搅拌13min。
实施例3
一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物，按重量份数包括以下组分：
茶叶茶氨酸30份、酸枣仁粉25份、蛋黄卵磷脂7份、酪蛋白水解物8份、蜂胶5份、蜂蜡35份、混合发酵物5份。
所述混合发酵物的制备方法包括以下步骤：
1)将鲜黄精进行洗净、切片、干燥和研磨后，得到黄精粉体；其中，所述干燥的条件为在60℃干燥至含水量8％；
2)向黄精粉体加入混合液混合均匀后，加热浸取，得到浸取物；其中，所述黄精粉体与混合液的用量比为1g：40mL；所述混合液为50％质量浓度的乙醇水溶液；所述加热浸取的条件为在75℃温度下、浸取3h；
3)向浸取物加入虾青素和无水乙醇低温沉降后，进行离心取固体，紫外线灭菌进行冷冻干燥后，得到混合体；其中，所述离心的条件为在转速6000r/min下、离心10min；
4)向混合体加入龙眼肉提取物和去离子水搅拌混合后，得到培养液；对培养液进行灭菌后，按照7％接种量将菌体浓度为107cfu/mL的植物乳杆菌加入至培养液中，发酵后，得到混合发酵物；其中，所述发酵的条件为在37℃温度、无氧的环境下发酵20h；
所述浸取物、虾青素、无水乙醇、龙眼肉提取物和去离子水的质量比为1.2：0.3：4.5：3：10。
一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物的制备方法包括以下步骤：
S1、在容器中加入蛋黄卵磷脂、蜂胶和蜂蜡混合均匀进行加热保温后，得到混合物料；其中，所述加热保温的条件为加热至68℃、保温5min；
S2、将茶叶茶氨酸、酪蛋白水解物、酸枣仁粉和混合发酵物搅拌混合后，加入至混合物料中，降温至室温，冷冻干燥后，得到茶叶茶氨酸组合物；其中，所述搅拌混合的条件为在35℃温度、转速30r/min下、搅拌15min。
实施例4
与实施例2相比，不同之处在于，实施例4采用混合发酵物5份，其余组分、制备步骤和参数均一致。
实施例5
与实施例2相比，不同之处在于，实施例5采用酪蛋白水解物8份，其余组分、制备步骤和参数均一致。
实施例6
与实施例2相比，不同之处在于，实施例6采用茶叶茶氨酸30份，其余组分、制备步骤和参数均一致。
实施例7
与实施例2相比，不同之处在于，实施例7步骤3)中的浸取物、虾青素和无水乙醇的质量比为1.1：0.3：4.5，其余组分、制备步骤和参数均一致。
对比例1
与实施例2相比，不同之处在于，对比例1不加入混合发酵物，其余组分、制备步骤和参数均一致。
对比例2
与实施例2相比，不同之处在于，对比例2不加入酪蛋白水解物，其余组分、制备步骤和参数均一致。
对比例3
与实施例2相比，不同之处在于，对比例3不加入茶叶茶氨酸，其余组分、制备步骤和参数均一致。
对比例4
与实施例2相比，不同之处在于，对比例4不加入龙眼肉提取物，其余组分、制备步骤和参数均一致。
对比例5
与实施例2相比，不同之处在于，对比例5步骤3)不加入虾青素，虾青素于步骤4)中加入，其余组分、制备步骤和参数均一致。
步骤3)向浸取物加入无水乙醇低温沉降后，进行离心取固体，紫外线灭菌进行冷冻干燥后，得到混合体；其中，所述离心的条件为在转速5500r/min下、离心9min；
步骤4)向混合体加入虾青素、龙眼肉提取物和去离子水搅拌混合后，得到培养液；对培养液进行灭菌后，按照6.5％接种量将菌体浓度为107cfu/mL的植物乳杆菌加入至培养液中，发酵后，得到混合发酵物；其中，所述发酵的条件为在37℃温度、无氧的环境下发酵19h；
所述浸取物、虾青素、无水乙醇、龙眼肉提取物和去离子水的质量比为1.1：0.25：4.5：3：10。
对比例6
与实施例2相比，不同之处在于，对比例6不加入虾青素，其余组分、制备步骤和参数均一致。
对比例7
与实施例2相比，不同之处在于，对比例7步骤4)不对培养液进行发酵，其余组分、制备步骤和参数均一致。
小鼠睡眠治疗实验
(1)取20-22g雌性昆明白小鼠160只，经适应饲养7天后随机分为16个处理组，分别为空白组、模型组、实施例1-7组、对比例1-7组，每组10只。
(2)实施例1-7组、对比例1-7组连续灌喂相应样品(茶叶茶氨酸组合物)15d，给食剂量为人体等效剂量(人体用量为10g/d，依据体表面积折算小鼠每日给食剂量；给食体积为0.5mL/只)；空白组和模型组给予等量的蒸馏水。
(3)模型组、实施例1-7组、对比例1-7组按照400mg/kg的剂量腹腔注射PCPA(对氯苯丙氨酸)混悬液连续2天，空白组腹腔注射同体积的生理盐水溶液。
(4)在给末次样品20min后，按照45mg/kg的剂量腹腔注射戊巴比妥钠(PCPA)溶液。注射后立刻计时并观察和记录小鼠睡眠持续时间(从翻正反射消失到翻正反射恢复的时间段)。测试结果如表1所示。
表1
注：用one-wayANOVA方法进行统计分析时，样品组与模型组相比，显著性以*表示，*p-value＜0.05表示具有显著性差异，**p-value＜0.01表示有极显著差异。
从表1测试结果可知，与模型组相比，实施例1-7与对比例1-7制备的茶叶茶氨酸组合物均能够改善PCPA引发小鼠睡眠症状，延长睡眠；与对比例1-7相比，本发明实施例1-7制备茶叶茶氨酸组合物对小鼠睡眠作用持续时间更长，表明混合发酵物、酪蛋白水解物和茶叶茶氨酸搭配具有协同作用，能够促进睡眠的发生，也有助于提高睡眠质量和维持充足的睡眠。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限定本发明，任何本领域技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的技术内容做出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简介修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。
Claims (10)
1.一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物，其特征在于，所述茶叶茶氨酸组合物按重量份数包括以下组分：
茶叶茶氨酸20-30份、酸枣仁粉20-25份、蛋黄卵磷脂4-7份、酪蛋白水解物5-8份、蜂胶3-5份、蜂蜡30-35份、混合发酵物3-5份。
2.根据权利要求1所述的一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物，其特征在于，所述混合发酵物的制备方法包括以下步骤：
1)将鲜黄精进行洗净、切片、干燥和研磨后，得到黄精粉体；
2)向黄精粉体加入混合液混合均匀后，加热浸取，得到浸取物；
3)向浸取物加入虾青素和无水乙醇低温沉降后，进行离心取固体，紫外线灭菌进行冷冻干燥后，得到混合体；
4)向混合体加入龙眼肉提取物和去离子水搅拌混合后，得到培养液；对培养液进行灭菌后，按照6-7％接种量将菌体浓度为107cfu/mL的植物乳杆菌加入至培养液中，发酵后，得到混合发酵物。
3.根据权利要求2所述的一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物，其特征在于：在步骤1)中，所述干燥的条件为在60℃干燥至含水量6-8％。
4.根据权利要求2所述的一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物，其特征在于：在步骤2)中，所述黄精粉体与混合液的用量比为1g：40mL；所述混合液为50％质量浓度的乙醇水溶液。
5.根据权利要求2所述的一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物，其特征在于：在步骤2)中，所述加热浸取的条件为在70-75℃温度下、浸取1-3h。
6.根据权利要求2所述的一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物，其特征在于：在步骤3)中，所述离心的条件为在转速5000-6000r/min下、离心8-10min。
7.根据权利要求2所述的一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物，其特征在于：在步骤3)-4)中，所述浸取物、虾青素、无水乙醇、龙眼肉提取物和去离子水的质量比为1.0-1.2：0.2-0.3：4.5：3：10；在步骤4)中，所述发酵的条件为在37℃温度、无氧的环境下发酵18-20h。
8.一种如权利要求1～7任一项所述的茶叶茶氨酸组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
S1、在容器中加入蛋黄卵磷脂、蜂胶和蜂蜡混合均匀进行加热保温后，得到混合物料；
S2、将茶叶茶氨酸、酪蛋白水解物、酸枣仁粉和混合发酵物搅拌混合后，加入至混合物料中，降温至室温，冷冻干燥后，得到茶叶茶氨酸组合物。
9.根据权利要求8所述的一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物的制备方法，其特征在于：在步骤S1中，所述加热保温的条件为加热至55-68℃、保温3-5min；在步骤S2中，所述搅拌混合的条件为在30-35℃温度、转速20-30r/min下、搅拌10-15min。
10.一种如权利要求1～7任一项所述的茶叶茶氨酸组合物的应用，其特征在于：所述应用是指茶叶茶氨酸组合物在制备保健食品中的应用。
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