CN117205291A - 一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，改善呼吸道免疫力组合物由以下重量份的组分制成：金银花50～150份、陈皮20～80份、余甘子10～50份、甘草10～50份、山药10～30份、薄荷10～30份、显齿蛇葡萄叶10～30份、紫苏籽5～15份、罗汉果5～15份、云南小黄姜1～5份、姜黄12～48份和黑胡椒20～80份。通过抗病毒性肺炎斑马鱼试验，该改善呼吸道免疫力组合物具有抗病毒性肺炎功效，具体表现为具有改善中性粒细胞聚集功效、改善巨噬细胞聚集功效、T细胞减少的改善功效和改善鱼鳔部位病变程度的功效，适合应用在制备抗病毒性肺炎药物中。
Description
技术领域
本发明涉及一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用。
背景技术
病毒性肺炎是由呼吸道病毒感染鼻腔、咽喉后向下发展引起的肺部炎症。中医药在治疗COVID-19感染者中发挥着重要作用，且预后良好。
目前针对病毒性肺炎，西医多采用对症治疗如抗病毒、抗细菌及真菌治疗，而中医药治疗病毒性肺炎并不仅仅针对病毒本身，而是通过对机体的整体调节，如增强机体免疫应答等来达到治疗作用。西药主要用于解热镇痛、抗病毒，虽然不能杀死病毒但可以缓解发热、肌肉酸痛等症状，但副作用较大，如美国目前临床证明有效的瑞德西韦，该药能缩短肺炎患者临床症状改善时间、有效促进伴下呼吸道感染的病毒肺炎住院成年患者的恢复临床表现良好，但其临床最常见的不良反应也较多如肝酶升高、腹泻、皮疹、肾功能损害和低血压、多器官功能障碍综合症、感染性休克、急性肾损伤等严重不良事件出现。另外，能够阻滞病毒复制的Paxlovid(奈玛特韦/利托那韦组合片)具有味觉受损、腹泻、高血压和肌肉酸痛等副作用。
目前市场上未见有抗病毒性肺炎的可食用组合物产品。在申请号为CN202310295063.3的专利中公开了一种改善呼吸道免疫力的组合物，可以改善呼吸道免疫力及其紊乱所致的咳嗽、咳痰、乏力、嗜睡、精神不济等症状，但是并未将其应用在制备抗病毒性肺炎药物中。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，通过抗病毒性肺炎斑马鱼试验，改善呼吸道免疫力组合物具有抗病毒性肺炎功效，具体表现为具有改善中性粒细胞聚集功效、改善巨噬细胞聚集功效、T细胞减少的改善功效和改善鱼鳔部位病变程度的功效。
实现上述目的的技术方案是：一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，所述改善呼吸道免疫力组合物由以下重量份的组分制成：金银花50～150份、陈皮20～80份、余甘子10～50份、甘草10～50份、山药10～30份、薄荷10～30份、显齿蛇葡萄叶10～30份、紫苏籽5～15份、罗汉果5～15份、云南小黄姜1～5份、姜黄12～48份和黑胡椒20～80份。
上述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其中，所述改善呼吸道免疫力组合物采用如下方法制备：按比例取各组分的原料药，无需捣碎或捣碎后过3目～5目的标准筛，混匀所有药材后，加入10～15倍体积的水，在90℃～100℃温度下加热回流1.5～3h，提取液使用150目筛或300目筛过滤，重复加热提取1～3次并过滤，将所有滤液合并，在温度50℃～70℃、真空度70～100mbar的条件下真空浓缩至原有滤液体积的1/5至1/10，然后将浓缩液冷冻干燥得到改善呼吸道免疫力组合物。
上述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其中，按比例称取改善呼吸道免疫力组合物中的各组分的生药，破碎后包装成袋泡茶。
上述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其中，所述改善呼吸道免疫力组合物具有改善中性粒细胞聚集功效。
上述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其中，所述改善呼吸道免疫力组合物具有改善巨噬细胞聚集功效。
上述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其中，所述改善呼吸道免疫力组合物具有改善T细胞减少功效。
上述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其中，所述改善呼吸道免疫力组合物具有改善鱼鳔部位病变程度功效。
本发明的改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，通过抗病毒性肺炎斑马鱼试验，改善呼吸道免疫力组合物具有抗病毒性肺炎功效，具体表现为具有改善中性粒细胞聚集功效、改善巨噬细胞聚集功效、T细胞减少的改善功效和改善鱼鳔部位病变程度的功效。
附图说明
图1为样品处理后斑马鱼鱼鳔组织结构典型图。
具体实施方式
为了使本技术领域的技术人员能更好地理解本发明的技术方案，下面结合附图对其具体实施方式进行详细地说明：
改善呼吸道免疫力组合物，由以下重量份的组分制成：金银花50～150份、陈皮20～80份、余甘子10～50份、甘草10～50份、山药10～30份、薄荷10～30份、显齿蛇葡萄叶10～30份、紫苏籽5～15份、罗汉果5～15份、云南小黄姜1～5份、姜黄12～48份和黑胡椒20～80份。
将改善呼吸道免疫力组合物采用如下方法制备：按比例取各组分的原料药，无需捣碎或捣碎后过3目～5目的标准筛，混匀所有药材后，加入10～15倍体积的水，在90℃～100℃温度下加热回流1.5～3h，提取液使用150目筛或300目筛过滤，重复加热提取1～3次并过滤，将所有滤液合并，在温度50℃～70℃、真空度70～100mbar的条件下真空浓缩至原有滤液体积的1/5至1/10，然后将浓缩液冷冻干燥得到改善呼吸道免疫力组合物。
按比例称取改善呼吸道免疫力组合物中的各组分的生药，破碎后包装成袋泡茶。
改善呼吸道免疫力组合物最佳配比为：金银花100份、陈皮50份、余甘子30份、甘草30份、山药20份、薄荷20份、显齿蛇葡萄叶20份、紫苏子10份、罗汉果10份、云南小黄姜3份、姜黄30份和黑胡椒50份。
通过抗病毒性肺炎斑马鱼试验，改善呼吸道免疫力组合物具有抗病毒性肺炎功效，具体表现为具有改善中性粒细胞聚集功效、改善巨噬细胞聚集功效、T细胞减少的改善功效和改善鱼鳔部位病变程度的功效。该改善呼吸道免疫力组合物适合在制备抗病毒性肺炎药物中的应用。
具体试验过程如下：
样品配制：改善呼吸道免疫力组合物用沸水(标准稀释水)冲泡，每次冲泡20min，共冲泡2次，配制成7.75mg/mL母液，分别稀释不同浓度样品S1-S4，样品S1-S4浓度分别是517mg/L、775mg/L、1033mg/L、2067mg/L，放凉后直接用于斑马鱼处理，现配现用。
阳性对照：乙酸地塞米松，白色粉末，批号B1828095，上海阿拉丁生化科技股份有限公司，阴凉避光储存。用DMSO配制成10.0mM母液，-20℃储存。
实验动物：斑马鱼均饲养于28℃的养鱼用水中(水质：每1L反渗透水中加入200mg速溶海盐，电导率为450～550μS/cm；pH为6.5～8.5；硬度为50～100mg/LCaCO3)，由本公司养鱼中心繁殖提供，实验动物使用许可证号为：SYXK(浙)2022-0004，饲养管理符合国际AAALAC认证(认证编号：001458)的要求。
转基因中性粒细胞绿色荧光MPX品系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为受精后5天(5dpf)的斑马鱼用于样品抗病毒性肺炎功效评价(改善中性粒细胞聚集功效)。
转基因巨噬细胞绿色荧光品系斑马鱼以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为5dpf的斑马鱼用于样品抗病毒性肺炎功效评价(改善巨噬细胞聚集功效和改善鱼鳔部位病变程度的功效)。
转基因T细胞红色荧光品系斑马鱼以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为5dpf的斑马鱼用于样品抗病毒性肺炎功效评价(T细胞减少的改善功效)。
检测方法：
1.抗病毒性肺炎功效评价(改善中性粒细胞聚集功效)
随机选取5dpf转基因中性粒细胞绿色荧光MPX品系斑马鱼于6孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。分别水溶给予样品(浓度见表1)，阳性对照乙酸地塞米松100μM浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL。除正常对照组外，其余各实验组均鱼鳔注射给予Poly(I:C)建立斑马鱼病毒性肺炎模型。28℃处理3h后，每个实验组随机选取10尾斑马鱼置于荧光显微镜下拍照，使用NIS-Elements D 3.20高级图像处理软件采集数据，分析斑马鱼鱼鳔炎症部位中性粒细胞数目(N)，以该指标的统计学分析结果评价样品抗病性肺炎功效。改善中性粒细胞聚集功效计算公式如下：
统计学处理结果采用mean±SE表示。用SPSS26.0软件进行统计学分析，p<0.05表明差异具有统计学意义。
2.抗病毒性肺炎功效评价(改善巨噬细胞聚集功效)
随机选取5dpf转基因巨噬细胞绿色荧光品系斑马鱼于6孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。分别水溶给予样品(浓度见表2)，阳性对照乙酸地塞米松100μM浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL。除正常对照组外，其余各实验组均鱼鳔注射给予Poly(I:C)建立斑马鱼病毒性肺炎模型。28℃处理3h后，每个实验组随机选取10尾斑马鱼置于荧光显微镜下拍照，使用NIS-Elements D 3.20高级图像处理软件采集数据，分析斑马鱼鱼鳔炎症部位巨噬细胞荧光强度(S)，以该指标的统计学分析结果评价样品抗病性肺炎功效。改善巨噬细胞聚集功效计算公式如下：
统计学处理结果采用mean±SE表示。用SPSS26.0软件进行统计学分析，p<0.05表明差异具有统计学意义。
3.抗病毒性肺炎功效评价(T细胞减少的改善功效)
随机选取5dpf转基因T细胞红色荧光品系斑马鱼于6孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。分别水溶给予样品(浓度见表3)，阳性对照乙酸地塞米松100μM浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL。除正常对照组外，其余各实验组均鱼鳔注射给予Poly(I:C)建立斑马鱼病毒性肺炎模型。28℃处理24h后，每个实验组随机选取10尾斑马鱼置于荧光显微镜下拍照，使用NIS-Elements D 3.20高级图像处理软件采集数据，分析斑马鱼鱼鳔炎症部位T细胞荧光强度(S)，以该指标的统计学分析结果评价样品抗病性肺炎功效。T细胞减少的改善功效计算公式如下：
统计学处理结果采用mean±SE表示。用SPSS26.0软件进行统计学分析，p<0.05表明差异具有统计学意义。
4.抗病毒性肺炎功效评价(改善鱼鳔部位病变程度的功效)
随机选取5dpf转基因巨噬细胞绿色荧光品系斑马鱼于6孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。分别水溶给予样品(浓度见表1)，阳性对照乙酸地塞米松100μM浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL。除正常对照组外，其余各实验组均鱼鳔注射给予Poly(I:C)建立斑马鱼病毒性肺炎模型。28℃处理3h后，将各组斑马鱼经过固定、脱水、包埋、切片、H&E染色等步骤，进行组织病理学观察分析，评价样品改善鱼鳔部位病变程度的功效。
试验结果：
1.抗病毒性肺炎功效评价(改善中性粒细胞聚集功效)
在本实验条件下，S3、S4均具有抗病毒性肺炎功效，具体表现为均具有改善中性粒细胞聚集功效；S1和S2抗病毒性肺炎功效不明显,详见表1。
表1，样品改善中性粒细胞聚集功效评价实验结果(n＝10)：
与模型对照组比较(两组间)，**p<0.01，***p<0.001；
与模型对照组比较(多组间)，##p<0.01，###p<0.001。
2.抗病毒性肺炎功效评价(改善巨噬细胞聚集功效)
在本实验条件下，S3、S4均具有抗病毒性肺炎功效，具体表现为均具有改善巨噬细胞聚集功效；S1和S2抗病毒性肺炎功效不明显。详见表2。
表2，样品改善巨噬细胞聚集功效评价实验结果(n＝10)：
与模型对照组比较(两组间)，*p<0.05，**p<0.01,***p<0.001；
与模型对照组比较(多组间)，#p<0.05。
3.抗病毒性肺炎功效评价(T细胞减少的改善功效)
在本实验条件下，S3、S4均具有抗病毒性肺炎功效，具体表现为T细胞荧光强度增大；S1和S2抗病毒性肺炎功效不明显。详见表3。
表3，样品T细胞减少的改善功效评价实验结果(n＝10)：
与模型对照组比较(两组间)，*p<0.05，**p<0.01,***p<0.001；
与模型对照组比较(多组间)，#p<0.05。
4.抗病毒性肺炎功效评价(改善鱼鳔部位病变程度的功效)
在本实验条件下，从细胞形态和结构上分析，正常对照组鱼鳔组织结构规则，细胞形态完整，细胞质均匀；模型对照组鱼鳔内可见明显炎性细胞浸润，并可见明显的细胞脱落；乙酸地塞米松100μM组鱼鳔炎性浸润有所改善，细胞规则分布；S3、S4对鱼鳔炎性浸润和细胞脱落情况均有所改善，S1和S2对鱼鳔炎性浸润和细胞脱落情况改善不明显。详见图1。图1的模型对照组中箭头指示为炎性细胞所处位置。
综上所述，本发明的改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，通过抗病毒性肺炎斑马鱼试验，改善呼吸道免疫力组合物具有抗病毒性肺炎功效，具体表现为具有改善中性粒细胞聚集功效、改善巨噬细胞聚集功效、T细胞减少的改善功效和改善鱼鳔部位病变程度的功效。
本技术领域中的普通技术人员应当认识到，以上的实施例仅是用来说明本发明，而并非用作为对本发明的限定，只要在本发明的实质精神范围内，对以上所述实施例的变化、变型都将落在本发明的权利要求书范围内。
Claims (7)
1.一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其特征在于，所述改善呼吸道免疫力组合物由以下重量份的组分制成：金银花50～150份、陈皮20～80份、余甘子10～50份、甘草10～50份、山药10～30份、薄荷10～30份、显齿蛇葡萄叶10～30份、紫苏籽5～15份、罗汉果5～15份、云南小黄姜1～5份、姜黄12～48份和黑胡椒20～80份。
2.根据权利要求1所述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其特征在于，所述改善呼吸道免疫力组合物采用如下方法制备：按比例取各组分的原料药，无需捣碎或捣碎后过3目～5目的标准筛，混匀所有药材后，加入10～15倍体积的水，在90℃～100℃温度下加热回流1.5～3h，提取液使用150目筛或300目筛过滤，重复加热提取1～3次并过滤，将所有滤液合并，在温度50℃～70℃、真空度70～100mbar的条件下真空浓缩至原有滤液体积的1/5至1/10，然后将浓缩液冷冻干燥得到改善呼吸道免疫力组合物。
3.根据权利要求1所述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其特征在于，按比例称取改善呼吸道免疫力组合物中的各组分的生药，破碎后包装成袋泡茶。
4.根据权利要求1所述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其特征在于，所述改善呼吸道免疫力组合物具有改善中性粒细胞聚集功效。
5.根据权利要求1所述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其特征在于，所述改善呼吸道免疫力组合物具有改善巨噬细胞聚集功效。
6.根据权利要求1所述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其特征在于，所述改善呼吸道免疫力组合物具有改善T细胞减少功效。
7.根据权利要求1所述的一种改善呼吸道免疫力组合物在制备抗病毒性肺炎药物中的应用，其特征在于，所述改善呼吸道免疫力组合物具有改善鱼鳔部位病变程度功效。
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| CN116616395A (zh) * | 2023-03-24 | 2023-08-22 | 云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司 | 一种改善呼吸道免疫力的植物固体饮料及其制备工艺 |
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