CN117129596B - 基于高效液相技术的STING激动剂环二核苷酸cGAMP定量检测方法的建立 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药生物领域，涉及基于高效液相技术的STING激动剂环二核苷酸cGAMP定量检测方法的建立。本发明的目的在于建立一种稳定、操作简便、检测时间短、灵敏度高的反相高效液相色谱法的检测方法，以实现对2’,3’‑cGAMP的定量检测。
Description
技术领域
本发明属于医药生物领域，涉及基于高效液相技术的STING激动剂环二核苷酸cGAMP定量检测方法的建立。
背景技术
2',3'-cGAMP是一种哺乳动物细胞中的内源性cGAMP。2',3'-cGAMP以高亲和力结合STING，是干扰素-β(IFNβ)的有效诱导物。2',3'-cGAMP是在哺乳动物细胞中为响应细胞质中的DNA而产生。2’,3’-cGAMP是最常见的STING激动剂。
目前，在研究生理病理功能、cGAS-STING信号通路激活与抑制的动态变化以及纳米递送系统的释药量和包封率中，检测cGAMP的方法包括：薄层色谱检测、酶联免疫吸附实验检测等，但这些方法存在一定的局限性，例如：操作复杂、检测时间长、灵敏度低、分离度小等。
为此，本发明对现有的检测方法进行改进，有效的提高检测的灵敏度。
发明内容
本发明的目的在于建立一种稳定、操作简便、检测时间短、灵敏度高的反相高效液相色谱法的检测方法，以实现对2’,3’-cGAMP的定量检测。
2’,3’-cGAMP的结构式如下所示：
本发明所述的一种反相高效液相定量检测2’,3’-cGAMP的方法，包括以下步骤：
取待测样品，以高效液相色谱法对待测样品进行检测，色谱条件为：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
流动相A为15～50mM三乙基乙酸铵缓冲液(TEAA)，pH＝6.2～8.2；
流动相B为乙腈溶液(ACN)；
流动A和流动相B一定的比例进行梯度程序：
在0～20min内，流动相A由100％降至87％，流动相B由0升至13％；在20～23min内，流动相A由87％降至60％，流动相B由13％升至40％；在23～25min内，流动相A由60％恢复至起始100％，流动相B由40％降至0；在25～35min内，流动相A保持100％，流动相B保持0。
其中，流动相的流速为0.5～1.2mL/min，进样量为20μL。
其中，柱温为25～40℃。
其中，检测波长为230～290nm。
其中，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂选择Agilent ZORBAX SB-C18柱，柱长为250mm，柱内径为4.6mm，柱粒度为5μm。
其中，检测器为紫外检测器或二极管阵列检测器。
其中，所述的待测样品为标准品溶液和供试品溶液。
其中，所述的标准品溶液按照以下方法配制得到：称取2’,3’-cGAMP标准品配制成200ug/mL浓度的溶液，依次稀释成40、20、10、5、2.5、1.25、0.625μg/mL浓度的标准品溶液。
其中，所述的供试品溶液为：取2’,3’-cGAMP的纳米制剂，使用超滤管离心，取上下层溶液，过滤，即得供试品溶液。
2’,3’-cGAMP的纳米制剂，采用反相微乳法制备得到，步骤如下：
(1)锰盐水溶液的配制：称取0.7921g四水氯化锰于8mL超纯水中溶解得到浓度为0.5mol/L的锰盐水溶液；
(2)铵盐水溶液的配制：称取0.3844g碳酸铵粉末于8mL超纯水中得到浓度为0.5mol/L的铵盐水溶液；
(3)油乳液的配制：吸取1.67mL环己烷，133.3μL正戊醇加入小烧杯中，磁力搅拌30min，再加入133.3mg CTAB，超声溶解30min；
(4)将20μL四水氯化锰溶液加入到(3)溶液中，磁力搅拌100min；
(5)在20μL碳酸铵水溶液中加入5％ CDNs，混合均匀；
(6)将(5)溶液逐滴加入(4)溶液中，充分搅拌使之完全陈化，陈化2h；
(7)待反应结束后将所得产物离心分离，并用无水乙醇、超纯水交替洗涤3～5次，得到白色固体产品，即为平行六面体的碳酸锰纳米制剂。
本发明提供的检测方法可以有效定量2’,3’-cGAMP的含量，
(1)在0.625～200ug/mL范围内线性关系良好,其回归方程为y＝68554x+2237.7，R2＝0.9991。
(2)在2’,3’-cGAMP浓度为1μg/mL，亦可得到较准确的响应值，准确度为(103.82±12.66％)，RSD为6.4％。
(3)准确度和精密度较高。
附图说明
图1、实施例1中的线性关系图
图2、实施例2中的定量限图
图3A、实施例4中的稳定性色谱图
图3B、实施例4中的稳定性色谱峰面积统计表
图4、实施例4中的供试品色谱图
具体实施方式
以下通过实施例进一步说明本发明。
下面结合具体实施例对本发明所述的产品及其制备方法作进一步阐述,但本发明并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径获得。
实施例1：
色谱条件为：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18柱，检测波长为260nm，柱温为30℃，流动相A为25mM TEAA溶液(pH＝7.2)，流动相B为ACN溶液，进样量为20μL；
梯度洗脱程序为：
线性关系：取2’,3’-cGAMP标准品适量，精密称定，加入超纯水，依次配制成200、40、20、10、5、2.5、1.25、0.625μg/mL浓度的溶液，按照(1)中设置的色谱条件进行检测，记录色谱图：以2’,3’-cGAMP的峰面积为纵坐标y，浓度为横坐标x，得到回归线方程y＝68554x+2237.7，R2＝0.9991，因此，2’,3’-cGAMP在0.625～200ug/mL范围内线性关系良好。结果见图1。
实施例2：
定量限：以灵敏度表示该方法定量检出限，要求其信噪比(S/N)≥10，且可接受的准确度需为(100±20)％，精密度为RSD≤20％。结果见图2。
实施例3：
准确度和精密度：取2’,3’-cGAMP浓度分别为1.25、40、200μg/mL(低、中、高)的溶液进行分析，每浓度在1d内分别测5次，计算日内精密度/准确度；每个浓度连续测定3d，计算日内精密度/准确度。准确度以回收率(％)表示，精密度以相对标准偏差(RSD％)表示。结果显示，在低、中、高浓度内的批内/批间RSD均＜20％；批内/批间准确度在83％～97％之间。结果见表1。
实施例4：
供试品溶液检测：
取2’,3’-cGAMP的纳米制剂，使用超滤管离心，取上下层溶液，过滤，进样检测，准确定量，稳定性好。结果见图3和图4。
表1：
以上所述仅为本发明的优选实施方式，应当指出的是，本发明的实施方式并不受所述实施例的限制。在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，这些也应视为本发明发保护范围。
Claims (4)
1.一种反相高效液相定量检测2’,3’-cGAMP的方法，其特征在于，包括以下步骤：
取待测样品，以高效液相色谱法对待测样品进行检测，色谱条件为：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
流动相A为15~50 mM三乙基乙酸铵缓冲液，pH=6.2~8.2；
流动相B为乙腈溶液；
流动相A和流动相B一定的比例进行梯度程序：在0~20 min内，流动相A由100%降至87%，流动相B由0升至13%；在20~23 min内，流动相A由87%降至60%，流动相B由13%升至40%；在23~25 min内，流动相A由60%恢复至起始100%，流动相B由40%降至0；在25~35 min内，流动相A保持100%，流动相B保持0；
其中，流动相的流速为0.5~1.2 mL/min，进样量为20 μL；
其中，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂选择Agilent ZORBAX SB-C18柱，柱长为250mm，柱内径为4.6 mm，柱粒度为5 μm；
其中，所述的待测样品为标准品溶液和供试品溶液；
其中，所述的标准品溶液按照以下方法配制得到：称取2’,3’-cGAMP标准品配制成200ug/mL浓度的溶液，依次稀释成40、20、10、5、2.5、1.25、0.625 μg/mL浓度的标准品溶液；
其中，所述的供试品溶液为：取2’,3’-cGAMP的纳米制剂，使用超滤管离心，取上下层溶液，过滤，即得供试品溶液。
2.根据权利要求1所述的2’,3’-cGAMP的高效液相检测方法，其特征在于，柱温为25~40℃。
3.根据权利要求1所述的2’,3’-cGAMP的高效液相检测方法，其特征在于，检测波长为230~290 nm。
4.根据权利要求1所述的2’,3’-cGAMP的高效液相检测方法，其特征在于，检测器为紫外检测器或二极管阵列检测器。
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Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103197011A (zh) * | 2013-04-12 | 2013-07-10 | 张家港威胜生物医药有限公司 | 一种高效液相色谱法测定二盐酸奎宁注射液中二盐酸奎宁含量的方法 |
| WO2016051170A1 (en) * | 2014-10-01 | 2016-04-07 | Isis Innovation Limited | Hydrophilic interaction liquid chromatography |
| CN108508109A (zh) * | 2018-03-29 | 2018-09-07 | 西北大学 | 丙烯酸高碳烷基酯的含量检测方法 |
| CN108802254A (zh) * | 2018-05-17 | 2018-11-13 | 武汉赛沃医药科技有限公司 | 一种检测原料药中二甲基亚砜含量的液相方法 |
| CN111007180A (zh) * | 2019-12-29 | 2020-04-14 | 无锡殷达尼龙有限公司 | 一种利用高效液相色谱定量检测脂肪族二元胺的方法 |
| WO2021093733A1 (zh) * | 2019-11-11 | 2021-05-20 | 广东华南药业集团有限公司 | 一种羧甲司坦原料及其制剂的质量控制方法及其应用 |
| CN113336844A (zh) * | 2021-05-28 | 2021-09-03 | 闽江学院 | 一种靶向新冠病毒n蛋白的鲨鱼单域抗体及其制备方法和应用 |
-
2023
- 2023-08-29 CN CN202311090632.7A patent/CN117129596B/zh active Active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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