CN116686705B - 一种快速扩繁木奶果组培苗的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种快速扩繁木奶果组培苗的方法，本发明采用丛生芽诱导、组织苗复壮、生根培养、无菌苗继代培养的快繁方法，实现95％以上的不定芽诱导率，提高组培苗根活力和练苗成活率，不定芽增值倍数明显增加，练苗成活率高达98.9％，实现木奶果优良种质规模化离体组培快繁与利用，通过组织培养木奶果快速获得新生植株，减少对自然资源的破坏，具有较好的经济、社会和生态效益，为木奶果大规模生产应用提供有效的技术支撑。
Description
技术领域
本发明涉及植物扩繁组培苗技术领域，特别涉及一种快速扩繁木奶果组培苗的方法。
背景技术
木奶果别称山萝葡、木荔枝、大连果、黄果树、树葡萄，分布于印度、缅甸、泰国、越南、老挝和中国的广西、云南、广东、海南等南方地区，木奶果是一种营养价值极高的美味水果，果实味道酸甜，含有多种化学成分，富含糖类、维生素及人体所需的多种微量元素，能为人体补充丰富维生素，更能让人体吸收多种矿物质和氨基酸，它能促进人体生长代谢增强人体身体素质，可让人体健康水平明显提高。木奶果含有丰富的果酸和柠檬酸，人体在吸收它含有的酸性物质以后，都能促进唾液胃液等多种消化液分泌，可加快肠胃蠕动，促进肠胃对身体内食物的消化与吸收，经常食用能增加食欲也能提高肠胃消化能力；还是一种性质微寒的水果，能清理身体内的热毒，而且能促进唾液分泌，它具有生津止渴的重要作用，对人类经常出现的口干眼干以及咽喉肿痛等症都有一定缓解作用，另外在炎热夏天中人们出现中暑或暑热烦渴时，多吃一些木奶果也能让症状缓解。木根果能消炎杀菌，这种水果的果肉可以直接吃，果皮却可以入药，而且入药以后药用价值特别高，它能消灭人类皮肤表面的多种真菌和敏感菌，也能止痛止痒，人们出现皮炎和足癣以及皮肤湿疹时都能用它来治疗，能让人体不适症状尽快减轻。
木奶果具有较高的营养价值，木奶果在国内分布较少，而国内也在规模种植木奶果，但是传统的繁殖方法有种子繁殖、扦插繁殖、高压繁殖，但是种子繁殖和扦插繁殖成活率低、扩繁周期长，繁殖系数低，致使其扩繁和推广受到影响，高压繁殖生根慢，繁殖时间长，数量少，在同一时期内一根枝条上只能高压一株新苗，且在培养过程中使用传统培养基对根的呼吸作用和营养吸收有一定影响，使组培苗在练苗时死亡，增加木奶果苗的死亡率。
发明内容
鉴于此，本发明提出一种快速扩繁木奶果组培苗的方法，解决上述问题。
本发明的技术方案是这样实现的：一种快速扩繁木奶果组培苗的方法：包括以下步骤：
S1、外植体选择和获取：选择红果种质的2-3年的木奶果主茎上新生侧芽作为外植体，再对外植体进行灭菌消毒；
S2、丛生芽诱导：将灭菌消毒后的外植体剪成1-1.2cm的带腋芽小段接种至诱导培养基中，先在低光培养11-20d，再转光照培养5-8d，光照时间为6-9h/d；
S3、组培苗复壮：当外植体分化出幼芽时，在无菌环境下取出幼芽分成单株，切去基部愈伤组织，接种至复壮培养基中培养继代培养，培养条件为温度23-25℃，光照12-18h/d，光照强度2000-3000Lux的环境条件下培养10-15d，隔3-6天更换一次新的复壮培养基；
S4、生根培养：在无菌环境下取上述≥1.8cm的丛芽植株接种至生根培养基中进行生根培养，生根培养温度为20-30℃，光照周期为12-16h/d，光照强度为1600-2000Lux，直至获得5-10cm高的幼苗；
S5、无菌苗继代培养：将上述生根组培幼苗每个节切开为新的芽，接种在继代培养基进行无菌培养，获得大量生根的无菌苗，再将无菌苗移至室内，控制光照200-800Lux，温度20-28℃，湿度50-70％，开盖练苗.3-5d，待根系发育正常后进行种苗移栽培育。
进一步的，所述S1灭菌消毒将外植体用无菌水冲洗1-3次，用毛笔清刷表面，再用质量浓度70-80％的乙醇溶液消毒10-30s，无菌水再次冲洗5-8次，置于无菌水中，备用。
进一步的，所述S2低光培养条件为光照强度为低于500lux，温度23-28℃，湿度控制50-70％。
进一步的，所述S2光照培养条件为光照强度为1200-2000lux，温度28-32℃，湿度50-70％。
进一步的，所述S2的所述诱导培养基以MS培养基作为基本培养基，在基本培养基中添加琼脂粉5-9g/L，白糖2.8-3.0g/L，鼠李糖脂0.5-0.6g/L，青鲜素12-35g/L，香蕉泥65-75mg/L，橙皮提取物1.5-2ml/L，灭菌剂1.5-2.5ml/L，灭菌剂为青霉素或多菌灵，调节pH为6-7。
进一步的，所述S3的复壮培养基包括MS培养基、硝酸铵1.4-1.6mg/L、氨基寡糖素6-10mg/L、水解乳蛋白300-800mg/L、肌醇0.8-1.0mg/L、茉莉酸甲酯3.2-4.5g/L、木糖醇5.6-8.6mg/L、毛蕊异黄酮苷0.9-2.5g/L。
进一步的，所述S4的生根培养基以MS培养基为基础培养基，再添加吲哚丁酸0.01-0.05mg/L、萘乙酸0.08-0.12mg/L、激动素0.3-0.5mg/L、硝酸铵1.8-2.1mg/L、氨基寡糖素3-8mg/L、胺鲜酯0.03-0.12mg/L、乙蒜素0.5-0.7mg/L。
进一步的，所述S5的继代培养基以DKW培养基为基础，其中DKW培养基含有水解酪蛋白3.5-5.8m/L、烟酸1.5-3.5mg/L、激动素0.3-0.5mg/L、硝酸铵1.8-2.1mg/L、氨基寡糖素3-8mg/L、胺鲜酯0.03-0.12mg/、乙蒜素0.3-0.7mg/L与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1.本发明采用丛生芽诱导、组织苗复壮、生根培养、无菌苗继代培养的快繁方法，中间没有初代培养，在每个培养阶段采用不同的培养基及培养条件进行培养，可实现95％以上的不定芽诱导率，提高组培苗根活力和练苗成活率，不定芽增值倍数明显增加。
2.本发明对每个培养阶段设置特定的培养条件和培养基，合理选择培养基原料组成，及科学配比协同发挥其主要作用，其中诱导培养过程中采用短时低光培养结合相应的诱导培养基能高效吸附培养时产生的有毒物质，极大抑制次生代谢物质的光氧化作用，为组培苗提供良好的生长环境，与光照协同培养，直接促进木奶果外植体的芽诱导分化，提高不定芽诱导率；复壮培养阶段采用特定的复壮培养基且配置特定的浓度和比例，使得组培苗提高繁殖效率；加入毛蕊异黄酮苷对组培苗的复壮有显著影响，有利于协助复壮培养基培养组培苗的增值、提高芽苗活力，生根培养基中加入乙蒜素，可促进诱导生根，提高木奶果组培苗的根系活力；
3.本发明练苗成活率高达98.9％，实现木奶果优良种质规模化离体组培快繁与利用，通过组织培养木奶果快速获得新生植株，减少对自然资源的破坏，具有较好的经济、社会和生态效益，为木奶果大规模生产应用提供有效的技术支撑。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
一种快速扩繁木奶果组培苗的方法，包括以下步骤：
S1、外植体选择和获取：选择红果种质的2-3年的木奶果主茎上新生侧芽作为外植体，再对外植体进行灭菌消毒，将外植体用无菌水冲洗1-3次，用毛笔清刷表面，再用质量浓度70％的乙醇溶液消毒10s，无菌水再次冲洗5次，置于无菌水中，备用；
S2、丛生芽诱导：将灭菌消毒后的外植体剪成1-1.2cm的带腋芽小段接种至诱导培养基中，先在低光培养11d，光照强度为低于500lux，温度23℃，湿度控制50％，再转光照培养5d，光照强度为1200lux，温度28℃，湿度50％，光照时间为6h/d，所述诱导培养基以MS培养基作为基本培养基，在基本培养基中添加琼脂粉5g/L，白糖2.8g/L，鼠李糖脂0.5g/L，青鲜素12g/L，香蕉泥65mg/L，橙皮提取物1.5ml/L，青霉素1.5ml/L，调节pH为6；
S3、组培苗复壮：当外植体分化出幼芽时，在无菌环境下取出幼芽分成单株，切去基部愈伤组织，接种至复壮培养基中培养继代培养，培养条件为温度23℃，光照12h/d，光照强度2000Lux的环境条件下培养10d，隔3天更换一次新的复壮培养基，复壮培养基包括MS培养基、硝酸铵1.4mg/L、氨基寡糖素6mg/L、水解乳蛋白300mg/L、肌醇0.8mg/L、茉莉酸甲酯3.2g/L、木糖醇5.6mg/L、毛蕊异黄酮苷0.9g/L；
S4、生根培养：在无菌环境下取上述≥1.8cm的丛芽植株接种至生根培养基中进行生根培养，生根培养温度为20℃，光照周期为12h/d，光照强度为1600Lux，直至获得5-10cm高的幼苗，生根培养基以MS培养基为基础培养基，再添加吲哚丁酸0.01mg/L、萘乙酸0.08mg/L、激动素0.3mg/L、硝酸铵1.8mg/L、氨基寡糖素3mg/L、胺鲜酯0.03mg/L、乙蒜素0.5mg/L；
S5、无菌苗继代培养：将上述生根组培幼苗每个节切开为新的芽，接种在继代培养基进行无菌培养，获得大量生根的无菌苗，再将无菌苗移至室内，控制光照200Lux，温度20℃，湿度50％，开盖练苗3d，待根系发育正常后进行种苗移栽培育，继代培养基以DKW培养基为基础，其中DKW培养基含有水解酪蛋白3.5m/L、烟酸1.5mg/L、激动素0.3mg/L、硝酸铵1.8mg/L、氨基寡糖素3mg/L、胺鲜酯0.03mg/、乙蒜素0.3mg/L。
实施例2
一种快速扩繁木奶果组培苗的方法，包括以下步骤：
S1、外植体选择和获取：选择红果种质的2-3年的木奶果主茎上新生侧芽作为外植体，再对外植体进行灭菌消毒，将外植体用无菌水冲洗1-3次，用毛笔清刷表面，再用质量浓度80％的乙醇溶液消毒30s，无菌水再次冲洗8次，置于无菌水中，备用；
S2、丛生芽诱导：将灭菌消毒后的外植体剪成1-1.2cm的带腋芽小段接种至诱导培养基中，先在低光培养20d，光照强度为低于500lux，温度28℃，湿度控制70％，再转光照培养8d，光照强度为2000lux，温度32℃，湿度70％，光照时间为9h/d，所述诱导培养基以MS培养基作为基本培养基，在基本培养基中添加琼脂粉9g/L，白糖3.0g/L，鼠李糖脂0.6g/L，青鲜素35g/L，香蕉泥75mg/L，橙皮提取物2ml/L，多菌灵2.5ml/L，调节pH为7；
S3、组培苗复壮：当外植体分化出幼芽时，在无菌环境下取出幼芽分成单株，切去基部愈伤组织，接种至复壮培养基中培养继代培养，培养条件为温度25℃，光照18h/d，光照强度3000Lux的环境条件下培养15d，隔3-6天更换一次新的复壮培养基，复壮培养基包括MS培养基、硝酸铵1.6mg/L、氨基寡糖素10mg/L、水解乳蛋白800mg/L、肌醇1.0mg/L、茉莉酸甲酯4.5g/L、木糖醇8.6mg/L、毛蕊异黄酮苷2.5g/L；
S4、生根培养：在无菌环境下取上述≥1.8cm的丛芽植株接种至生根培养基中进行生根培养，生根培养温度为30℃，光照周期为16h/d，光照强度为2000Lux，直至获得10cm高的幼苗，生根培养基以MS培养基为基础培养基，再添加吲哚丁酸0.05mg/L、萘乙酸0.12mg/L、激动素0.5mg/L、硝酸铵2.1mg/L、氨基寡糖素8mg/L、胺鲜酯0.12mg/L、乙蒜素0.7mg/L；
S5、无菌苗继代培养：将上述生根组培幼苗每个节切开为新的芽，接种在继代培养基进行无菌培养，获得大量生根的无菌苗，再将无菌苗移至室内，控制光照800Lux，温度28℃，湿度70％，开盖练苗5d，待根系发育正常后进行种苗移栽培育，继代培养基以DKW培养基为基础，其中DKW培养基含有水解酪蛋白5.8m/L、烟酸3.5mg/L、激动素0.5mg/L、硝酸铵2.1mg/L、氨基寡糖素8mg/L、胺鲜酯0.12mg/、乙蒜素0.7mg/L。
实施例3
一种快速扩繁木奶果组培苗的方法，包括以下步骤：
S1、外植体选择和获取：选择红果种质的2-3年的木奶果主茎上新生侧芽作为外植体，再对外植体进行灭菌消毒，将外植体用无菌水冲洗2次，用毛笔清刷表面，再用质量浓度75％的乙醇溶液消毒20s，无菌水再次冲洗7次，置于无菌水中，备用；
S2、丛生芽诱导：将灭菌消毒后的外植体剪成1-1.2cm的带腋芽小段接种至诱导培养基中，先在低光培养16d，光照强度为低于500lux，温度25℃，湿度控制60％，再转光照培养7d，光照强度为1600lux，温度30℃，湿度60％，光照时间为7h/d，所述诱导培养基以MS培养基作为基本培养基，在基本培养基中添加琼脂粉7g/L，白糖2.9g/L，鼠李糖脂0.5g/L，青鲜素24g/L，香蕉泥70mg/L，橙皮提取物1.8ml/L，青霉素2.0ml/L，调节pH为6；
S3、组培苗复壮：当外植体分化出幼芽时，在无菌环境下取出幼芽分成单株，切去基部愈伤组织，接种至复壮培养基中培养继代培养，培养条件为温度24℃，光照15h/d，光照强度2500Lux的环境条件下培养13d，隔5天更换一次新的复壮培养基，复壮培养基包括MS培养基、硝酸铵1.5mg/L、氨基寡糖素8mg/L、水解乳蛋白700mg/L、肌醇0.9mg/L、茉莉酸甲酯4.1g/L、木糖醇7.6mg/L、毛蕊异黄酮苷1.8g/L；
S4、生根培养：在无菌环境下取上述≥1.8cm的丛芽植株接种至生根培养基中进行生根培养，生根培养温度为25℃，光照周期为14h/d，光照强度为1800Lux，直至获得8cm高的幼苗，生根培养基以MS培养基为基础培养基，再添加吲哚丁酸0.03mg/L、萘乙酸0.10mg/L、激动素0.4mg/L、硝酸铵2.0mg/L、氨基寡糖素5mg/L、胺鲜酯0.08mg/L、乙蒜素0.6mg/L；
S5、无菌苗继代培养：将上述生根组培幼苗每个节切开为新的芽，接种在继代培养基进行无菌培养，获得大量生根的无菌苗，再将无菌苗移至室内，控制光照600Lux，温度25℃，湿度60％，开盖练苗4d，待根系发育正常后进行种苗移栽培育，继代培养基以DKW培养基为基础，其中DKW培养基含有水解酪蛋白4.5m/L、烟酸2.5mg/L、激动素0.5mg/L、硝酸铵2.0mg/L、氨基寡糖素5mg/L、胺鲜酯0.08mg/、乙蒜素0.5mg/L。
实施例4
一种快速扩繁木奶果组培苗的方法，包括以下步骤：
S1、外植体选择和获取：选择红果种质的2-3年的木奶果主茎上新生侧芽作为外植体，再对外植体进行灭菌消毒，将外植体用无菌水冲洗2次，用毛笔清刷表面，再用质量浓度75％的乙醇溶液消毒20s，无菌水再次冲洗7次，置于无菌水中，备用；
S2、丛生芽诱导：将灭菌消毒后的外植体剪成1-1.2cm的带腋芽小段接种至诱导培养基中，先在低光培养16d，光照强度为低于500lux，温度25℃，湿度控制60％，再转光照培养7d，光照强度为1600lux，温度30℃，湿度60％，光照时间为7h/d，所述诱导培养基以MS培养基作为基本培养基，在基本培养基中添加琼脂粉5g/L，白糖2.8g/L，鼠李糖脂0.5g/L，青鲜素12g/L，香蕉泥65mg/L，橙皮提取物1.5ml/L，青霉素1.5ml/L，调节pH为6；
S3、组培苗复壮：当外植体分化出幼芽时，在无菌环境下取出幼芽分成单株，切去基部愈伤组织，接种至复壮培养基中培养继代培养，培养条件为温度24℃，光照15h/d，光照强度2500Lux的环境条件下培养13d，隔5天更换一次新的复壮培养基，复壮培养基包括MS培养基、硝酸铵1.4mg/L、氨基寡糖素6mg/L、水解乳蛋白300mg/L、肌醇0.8mg/L、茉莉酸甲酯3.2g/L、木糖醇5.6mg/L、毛蕊异黄酮苷0.9g/L；
S4、生根培养：在无菌环境下取上述≥1.8cm的丛芽植株接种至生根培养基中进行生根培养，生根培养温度为25℃，光照周期为14h/d，光照强度为1800Lux，直至获得8cm高的幼苗，生根培养基以MS培养基为基础培养基，再添加吲哚丁酸0.01mg/L、萘乙酸0.08mg/L、激动素0.3mg/L、硝酸铵1.8mg/L、氨基寡糖素3mg/L、胺鲜酯0.03mg/L、乙蒜素0.5mg/L；
S5、无菌苗继代培养：将上述生根组培幼苗每个节切开为新的芽，接种在继代培养基进行无菌培养，获得大量生根的无菌苗，再将无菌苗移至室内，控制光照600Lux，温度25℃，湿度60％，开盖练苗4d，待根系发育正常后进行种苗移栽培育，继代培养基以DKW培养基为基础，其中DKW培养基含有水解酪蛋白3.5m/L、烟酸1.5mg/L、激动素0.3mg/L、硝酸铵1.8mg/L、氨基寡糖素3mg/L、胺鲜酯0.03mg/、乙蒜素0.3mg/L。
实施例5
一种快速扩繁木奶果组培苗的方法，包括以下步骤：
S1、外植体选择和获取：选择红果种质的2-3年的木奶果主茎上新生侧芽作为外植体，再对外植体进行灭菌消毒，将外植体用无菌水冲洗2次，用毛笔清刷表面，再用质量浓度75％的乙醇溶液消毒20s，无菌水再次冲洗7次，置于无菌水中，备用；
S2、丛生芽诱导：将灭菌消毒后的外植体剪成1-1.2cm的带腋芽小段接种至诱导培养基中，先在低光培养16d，光照强度为低于500lux，温度25℃，湿度控制60％，再转光照培养7d，光照强度为1600lux，温度30℃，湿度60％，光照时间为7h/d，所述诱导培养基以MS培养基作为基本培养基，在基本培养基中添加琼脂粉9g/L，白糖3.0g/L，鼠李糖脂0.6g/L，青鲜素35g/L，香蕉泥75mg/L，橙皮提取物2ml/L，多菌灵2.5ml/L，调节pH为7；
S3、组培苗复壮：当外植体分化出幼芽时，在无菌环境下取出幼芽分成单株，切去基部愈伤组织，接种至复壮培养基中培养继代培养，培养条件为温度24℃，光照15h/d，光照强度2500Lux的环境条件下培养13d，隔5天更换一次新的复壮培养基，复壮培养基包括MS培养基、硝酸铵1.6mg/L、氨基寡糖素10mg/L、水解乳蛋白800mg/L、肌醇1.0mg/L、茉莉酸甲酯4.5g/L、木糖醇8.6mg/L、毛蕊异黄酮苷2.5g/L；
S4、生根培养：在无菌环境下取上述≥1.8cm的丛芽植株接种至生根培养基中进行生根培养，生根培养温度为25℃，光照周期为14h/d，光照强度为1800Lux，直至获得8cm高的幼苗，生根培养基以MS培养基为基础培养基，再添加吲哚丁酸0.05mg/L、萘乙酸0.12mg/L、激动素0.5mg/L、硝酸铵2.1mg/L、氨基寡糖素8mg/L、胺鲜酯0.12mg/L、乙蒜素0.7mg/L；
S5、无菌苗继代培养：将上述生根组培幼苗每个节切开为新的芽，接种在继代培养基进行无菌培养，获得大量生根的无菌苗，再将无菌苗移至室内，控制光照600Lux，温度25℃，湿度60％，开盖练苗4d，待根系发育正常后进行种苗移栽培育，继代培养基以DKW培养基为基础，其中DKW培养基含有水解酪蛋白5.8m/L、烟酸3.5mg/L、激动素0.5mg/L、硝酸铵2.1mg/L、氨基寡糖素8mg/L、胺鲜酯0.12mg/、乙蒜素0.7mg/L。
对比例1
本对比例与实施例3的区别在于，所述S2的丛生芽诱导中将带腋芽小段接种至诱导培养基中未进行低光培养，培养条件为光照培养，光照强度为1600lux，温度30℃，湿度60％，光照时间为7h/d，培养7d。
对比例2
本对比例与实施例3的区别在于，所述诱导培养和复壮培养采用相同的培养基，具体为以MS培养基作为基本培养基，在基本培养基中添加琼脂粉7g/L，白糖2.9g/L，鼠李糖脂0.5g/L，青鲜素24g/L，香蕉泥70mg/L，橙皮提取物1.8ml/L，青霉素2.0ml/L。
对比例3
本对比例与实施例3的区别在于，所述复壮培养基不含有毛蕊异黄酮苷。
对比例4
本对比例与实施例3的区别在于，所述生根培养基不含有乙蒜素，具体为生根培养基以MS培养基为基础培养基，再添加吲哚丁酸0.03mg/L、萘乙酸0.10mg/L、激动素0.4mg/L、硝酸铵2.0mg/L、氨基寡糖素5mg/L、胺鲜酯0.08mg/L。
根据上述木奶果组培苗的快繁方法进行木奶果种苗的组织培养的效果测定。
实验方法：将实施例1-5和对比例1-3设三个重复，分别统计每个实验组的木奶果组培苗的芽诱导率、增值倍数、根诱导周期以及根的生长情况，其结果如下表1所示：
实验时间：2022.01-2022.03；
数据统计方法：
不定芽诱导率(％)＝(诱导芽外植体数/总的外植体数)×100％；
不定芽增殖倍数＝增殖不定芽数/接种芽数；
有上述结果可知，本发明采用丛生芽诱导、组织苗复壮、生根培养、无菌苗继代培养的快繁方法，中间没有初代培养，在每个培养阶段采用不同的培养基及培养条件进行培养，可实现95％以上的不定芽诱导率，提高组培苗根活力和练苗成活率，不定芽增值倍数明显增加；
从实施例组与对比例1对比，采用短时低光培养结合相应的诱导培养基能高效吸附培养时产生的有毒物质，极大抑制次生代谢物质的光氧化作用，为组培苗提供良好的生长环境，与光照协同培养，直接促进木奶果外植体的芽诱导分化，提高不定芽诱导率；
实施例组与对比例2、3比较，复壮培养阶段采用特定的复壮培养基且配置特定的浓度和比例，使得组培苗提高繁殖效率；加入毛蕊异黄酮苷对组培苗的复壮有显著影响，有利于协助复壮培养基培养组培苗的增值、提高芽苗活力；
实施例组与对比开4比较，生根培养基中加入乙蒜素，可以刺激嫩叶和嫩芽的IAA的运输，从而促进诱导生根，提高木奶果组培苗的根系活力。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种快速扩繁木奶果组培苗的方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、外植体选择和获取：选择红果种质的2-3年的木奶果主茎上新生侧芽作为外植体，再对外植体进行灭菌消毒；
S2、丛生芽诱导：将灭菌消毒后的外植体剪成1-1.2cm的带腋芽小段接种至诱导培养基中，先在低光培养11-20d，光照强度低于500lux，培养温度23-28℃，湿度控制50-70％，再转光照培养5-8d，光照时间为6-9h/d，所述诱导培养基以MS培养基作为基本培养基，在基本培养基中添加琼脂粉5～9g/L，白糖2.8～3.0g/L，鼠李糖脂0.5～0.6g/L，青鲜素12-35g/L，香蕉泥65～75mg/L，橙皮提取物1.5～2ml/L，灭菌剂1.5～2.5ml/L，灭菌剂为青霉素或多菌灵，调节pH为6-7；
S3、组培苗复壮：当外植体分化出幼芽时，在无菌环境下取出幼芽分成单株，切去基部愈伤组织，接种至复壮培养基中培养继代培养，培养条件为温度23-25℃，光照12-18h/d，光照强度2000-3000Lux的环境条件下培养10-15d，隔3-6天更换一次新的复壮培养基，所述复壮培养基包括MS培养基、硝酸铵1.4～1.6mg/L、氨基寡糖素6～10mg/L、水解乳蛋白300～800mg/L、肌醇0.8～1.0mg/L、茉莉酸甲酯3.2～4.5g/L、木糖醇5.6-8.6mg/L、毛蕊异黄酮苷0.9-2.5g/L；
S4、生根培养：在无菌环境下取上述≥1.8cm的丛芽植株接种至生根培养基中进行生根培养，生根培养温度为20-30℃，光照周期为12-16h/d，光照强度为1600-2000Lux，直至获得5-10cm高的幼苗，所述生根培养基以MS培养基为基础培养基，再添加吲哚丁酸0.01～0.05mg/L、萘乙酸0.08～0.12mg/L、激动素0.3～0.5mg/L、硝酸铵1.8～2.1mg/L、氨基寡糖素3～8mg/L、胺鲜酯0.03～0.12mg/L、乙蒜素0.5～0.7mg/L；
S5、无菌苗继代培养：将上述生根组培幼苗每个节切开为新的芽，接种在继代培养基进行无菌培养，获得大量生根的无菌苗，再将无菌苗移至室内，控制光照200-800Lux，温度20-28℃，湿度50-70％，开盖炼苗3-5d，待根系发育正常后进行种苗移栽培育。
2.如权利要求1所述的一种快速扩繁木奶果组培苗的方法，其特征在于：所述S1灭菌消毒将外植体用无菌水冲洗1-3次，用毛笔清刷表面，再用质量浓度70-80％的乙醇溶液消毒10-30s，无菌水再次冲洗5-8次，置于无菌水中，备用。
3.如权利要求1所述的一种快速扩繁木奶果组培苗的方法，其特征在于：所述S2的光照培养条件为光照强度为1200-2000lux，温度28-32℃，湿度50-70％。
4.如权利要求1所述的一种快速扩繁木奶果组培苗的方法，其特征在于：所述S5的继代培养基以DKW培养基为基础，其中DKW培养基含有水解酪蛋白3.5-5.8m/L、烟酸1.5-3.5mg/L、激动素0.3-0.5mg/L、硝酸铵1.8-2.1mg/L、氨基寡糖素3-8mg/L、胺鲜酯0.03-0.12mg/L、乙蒜素0.3-0.7mg/L。
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| CN (1) | CN116686705B (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007195407A (ja) * | 2006-01-23 | 2007-08-09 | Hiroshima Pref Gov | カンキツ類樹木における品種更新の方法 |
| CN115885753A (zh) * | 2022-11-24 | 2023-04-04 | 广西南亚热带农业科学研究所 | 一种提高木奶果幼苗移栽成活率的方法 |
| CN116616066A (zh) * | 2023-03-24 | 2023-08-22 | 海南金棕榈生态科技发展有限公司 | 一种木奶果的高接换冠方法 |
-
2023
- 2023-04-14 CN CN202310400851.4A patent/CN116686705B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007195407A (ja) * | 2006-01-23 | 2007-08-09 | Hiroshima Pref Gov | カンキツ類樹木における品種更新の方法 |
| CN115885753A (zh) * | 2022-11-24 | 2023-04-04 | 广西南亚热带农业科学研究所 | 一种提高木奶果幼苗移栽成活率的方法 |
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 不同遮阴环境下木奶果幼苗生长与生理生化的响应;黄河腾;黄剑坚;陈杰;陈玉娟;管东生;;生态学杂志;20200403(第05期);第1538-1547页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116686705A (zh) | 2023-09-05 |
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