CN116114875A - 一种基于肠-脑轴的植物基组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种基于肠‑脑轴的植物基组合物,按重量计,组合物的制备原料包括:燕麦110~200份、藜麦80~140份、黑苦荞110~250份、青稞60~220份、酸枣仁50~130份、沙棘籽90~210份、益智仁50~100份、黑麦低聚肽20~60份。各组分药食两用,安全无毒副作用,不会产生依耐性、抗药性,也不会在体内蓄积,在调节肠道菌群平衡的同时起到改善大脑健康的功能。本发明还涉及基于肠‑脑轴的植物基组合物的制备方法。该制备方法不但能耗低、效率高,能最大限度地保留各主要活性成分,提高提取物得率,还能产生新的有效物质,提高组合物效果,进一步增加功能营养物质的消化吸收利用率。
Description
技术领域
本发明涉及调节肠道菌群平衡及改善大脑功能技术领域,具体指一种基于肠-脑轴的植物基组合物及其制备方法。
背景技术
大脑是人体高度发达的器官,控制与调节思维、认知判断、呼吸等重要生理活动。肠道是以消化和吸收营养为主要功能的器官,肠道中定植了大量微生物,如细菌、病毒、原生动物、真菌等,构成了肠道微生物菌群。随着人们对肠道菌群调控作用的认识不断加深,发现肠道菌群与神经系统疾病关系密切,越来越多的证据表明肠道和大脑在生物学功能上是密切相关、相互影响的,“肠-脑轴”的理论也由此诞生。大脑功能紊乱可通过肠-脑轴激活肠黏膜免疫,对肠道菌群产生影响,使菌群结构发生改变;反之,肠道菌群结构改变亦会通过肠-脑轴影响脑部神经系统功能和神经行为。因此,素有“肠道是人体的第二大脑”的说法。
随着社会的飞速发展,人们的生活节奏也越来越快,与此同时所带来的竞争越来越强烈,来自工作、生活方方面面的压力也越来越大,再加上长期地饮食、作息不规律、吸烟、大量饮酒以及不合理用药等等,都给我们的大脑健康和肠道菌群带来沉重的负担。
然而,市场现有的众多改善大脑健康或调节肠道菌群的产品,大多存在一定的弊病:一方面,产品的功效成分单一,疗效较差,且可能存在一定副作用;另一方面,大多数都是将二者区别对待,针对其中一种症状,很少有利用脑-肠轴之间的联系,协同二者之间的相互促进和制约作用。比如:常使用吡拉西坦、神经节苷脂、甲钴胺、尼莫地平等治疗脑部疾病,以达到营养脑神经、改善脑循环的作用,但其中很多药物都有一定的副作用,如引起恶心、腹部不适、纳差、腹胀、腹痛等胃肠道不良反应,引起头晕、头痛和失眠等中枢神经系统不良反应以及存在肝功能损害等,且因涉及到直接作用于脑神经,选择和使用上都存在极大风险。又比如:常使用益生菌、益生元等调理肠道菌群,而这类产品多存在菌株复配无指导原则、菌株不稳定、难保存、活力差、外源性定殖率低等问题,容易出现治愈率低、易反复的现象。
经查,公开号为CN 105055457A的专利申请公开了丁酸梭菌在制备防治阿尔茨海默益生菌制剂组合物中的应用,利用丁酸梭菌能够改善肠道菌群失调的作用,通过脑-肠轴之间的关系,提高脑组织抗氧化酶活性、抗神经细胞凋亡,改善学习记忆能力。但是该方法中只采用丁酸梭菌一种益生菌,单一成分,且益生菌为活的微生物,外界温度、湿度对其存活率影响很大,进入人体后,胃酸、胆盐等也会将绝大数益生菌杀死,其真实效果受到严重局限。
因此,需要继续改进。
发明内容
本发明所要解决的第一个技术问题是针对现有技术,提供一种安全高效、无毒副作用,能够协同调节自体肠道菌群平衡及改善大脑功能的植物基组合物。
本发明所要解决的第二个技术问题是针对现有技术的现状,提供一种上述基于肠-脑轴的植物基组合物的制备方法,该制备方法不但能最大限度地保留各主要活性成分,提高提取物得率,还能产生新的有效物质,提高组合物效果。
本发明解决上述第一个技术问题所采用的技术方案为:一种基于肠-脑轴的植物基组合物,其特征在于:按重量计,包括以下组分
燕麦110~200份、藜麦80~140份、黑苦荞110~250份、青稞60~220份、酸枣仁50~130份、沙棘籽90~210份、益智仁50~100份、黑麦低聚肽20~60份。
优选地,所述组合物由下列重量份数的原料制成
所述燕麦180份、藜麦124份、黑苦荞230份、青稞165份、酸枣仁85份、沙棘籽160份、益智仁64份、黑麦低聚肽35份。
具体地,所述组合物包括
复合发芽酵解粉,由燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁制得;
沙棘益智仁微丸粉,由沙棘籽、益智仁制得;
黑麦低聚肽;
辅料。
制剂形式可以有多种,优选地,所述组合物的制剂形式采用片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、丸剂、口服液中的至少一种。
本发明解决上述第二个技术问题所采用的技术方案为:一种应用有所述基于脑-肠轴的植物基组合物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)采用燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁,制备复合发芽酵解粉;
(2)采用沙棘籽、益智仁,并采用亚临界萃取协同微丸包裹技术制备沙棘益智仁微丸粉;
(3)制备黑麦低聚肽;
(4)将步骤(1)、(2)、(3)分别制备的复合发芽酵解粉、沙棘益智仁微丸粉、黑麦低聚肽进行混合,混合均匀,即得到所述的基于肠-脑轴的植物基组合物。
复合发芽酵解粉的制备方法具体是,所述的复合发芽酵解粉通过以下步骤获得:
(a1)将燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁作发芽处理,待出芽后打成浆汁;
(b1)上述步骤(a1)的浆汁加酶酶解,该酶为纤维素酶和果胶酶以质量比1:1~4复配的混合酶;
(c1)酶解后作灭酶处理,冷却至25~40℃后加入104~107CFU/L植物乳杆菌作发酵处理,获得发芽酵解浆汁;
(d1)对所述发芽酵解浆汁进行浓缩、干燥、粉碎处理,即得到所述的复合发芽酵解粉。
优选地,所述复合发芽酵解粉中β-葡聚糖含量不低于7%,γ-氨基丁酸含量不低于0.8%,谷胱甘肽不低于0.01%,总黄酮不低于2.5%,总膳食纤维不低于8%。
沙棘益智仁微丸粉的制备方法具体是,所述的沙棘益智仁微丸粉通过以下步骤获得:
(a2)将沙棘籽、益智仁粗粉后用亚临界低温萃取法萃取,萃取温度30~50℃,料液比1:2~9,萃取时间20~100min,得到沙棘益智仁油;
(b2)将麦芽糊精和α-环状糊精,在60~80℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和α-环状糊精的总质量分数为3~8%,且麦芽糊精和α-环状糊精的质量比为1:1~4;
(c2)将所述步骤(a2)得到的沙棘益智仁油加入含蔗糖脂肪酸酯和单,双甘油脂肪酸酯的10%(V/V)乙醇溶液中,其中蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯质量比为1:1~4,蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯在乙醇溶液中的总质量分数为1~4%,配制成质量分数为4%~10%的沙棘益智仁油乳化液;
(d2)将步骤(c2)制得的乳化液倒入步骤(b2)制得的壁材溶液中,其中乳化液与壁材溶液的体积比为0.6~1:1,于40~60℃下进行乳化均质处理,制得初产品;
(e2)将上述步骤(d)制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为170~185℃,出口温度为85~95℃,上料速度0.5~1.5L/min,制得所需的沙棘益智仁微丸粉。
黑麦低聚肽的制备方法具体是,所述的黑麦低聚肽通过以下步骤获得:
(a3)发芽调浆:将黑麦作发芽处理,待出芽后打浆,得到黑麦芽分散液;
(b3)酶解:将所述黑麦芽分散液加热并使其温度保持在45~55℃之间,接着在黑麦芽分散液中加入风味蛋白酶和碱性蛋白酶,搅拌均匀后酶解4h~6h,其中风味蛋白酶的加入量是分散液中底物质量分数的0.1%~0.5%,碱性蛋白酶的加入量是黑麦芽分散液中底物质量分数的0.2%~0.6%,酶解结束后加热煮沸5~10min灭酶,得到黑麦芽蛋白酶解液;
(c3)分离纯化:将灭酶后的各酶解液分别进行离心去杂,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤后继续过活性炭柱,得到酶解精制液,再将酶解精制液调节pH至8.0~8.2,使酶解液通过分子截留量为1000D的超滤膜,得到黑麦低聚肽酶解液;
(d3)浓缩干燥:将黑麦低聚肽酶解液进行真空浓缩和喷雾干燥,得到所述的黑麦低聚肽。
优选地,所述黑麦低聚肽中分子量小于1000D的低聚肽成分不低于95%,分子量处于180~500D的低聚肽成分不低于65%,谷氨酰胺含量不低于28%。
与现有技术相比,本发明的优点在于:
一、组合物
1、本发明的植物基组合物以传统的药食两用中药和食品原料为主,安全无毒副作用,不会产生依耐性、抗药性,也不会在体内蓄积,安全高效。
2、本发明组合物的配方中,是以传统中医药的养生保健理论及现代医学研究的“肠-脑轴”理论为指导下提出的,经科学合理配伍,协同增效,在调节肠道菌群平衡的同时起到改善大脑健康的功能。具体如下。
燕麦与青稞,同属禾本科植物,均含有丰富的益生菌活化增殖因子β-葡聚糖,能有效促进益生菌增殖,并能有效抑制肠内腐败物质的生成和促进其排泄,有效维持肠道菌群的平衡;二者还富含多酚类成份,配合使用时对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等多种肠道致病菌具有明显的协同抑制作用;
再配以富含黄酮和皂苷类成份的藜麦以及富含类黄酮成份的黑苦荞,能在改善肠道及脑部炎症的同时,进一步强化对肠道致病菌的抑制作用,此外,黑苦荞区别于普通苦荞,其所含类黄酮类成份是普通苦荞的3倍以上,改善微循环作用更突出,与酸枣仁共同起到健脑安神的作用,能修复受损脑细胞及脑部炎症,有效防治用脑过度以及脑功能衰退所致记忆力减退、失眠、健忘等症状,有效改善脑部健康;
沙棘籽,性温,味酸涩,含有丰富的不饱和脂肪酸,还含有黄酮、生物碱、甾醇类及三萜烯类等多种生物活性成分,能有效促进机体新陈代谢,促进受损胃肠上皮细胞再生从而改善肠道免疫、助力自体肠道菌群恢复,沙棘籽还能增强脑组织抗氧化酶类活性,抑制炎性因子生成,还能补充脑细胞营养;同时,益智仁具有较强的抗氧化功能,能抑制自由基生成,从而减轻自由基对脑组织的损伤作用,进而提高脑的抗氧化能力,减少脂质过氧化,二者配合,协同增效,能显著增强机体清除细胞内自由基和脂质过氧化物的能力,在改善肠道微生态平衡的基础上,抑制炎症因子,通过肠-脑轴协同改善肠道及脑部健康;
组合物中还特别添加易于吸收、能显著增强产品功效的黑麦低聚肽,黑麦低聚肽较普通小麦肽而言,特别是还经过发芽后,其分子量更小、更容易消化吸利用、功能肽段更集中、谷氨酰胺含量更丰富,能显著增加脑内乙酰胆碱含量,使大脑皮层神经细胞活动旺盛、促进脑组织新陈代谢、恢复脑细胞功能,在保护脑部健康的同时,增强思维敏捷度,其还具有较强的抗氧化活性和增强免疫力的作用,且与沙棘籽、益智仁共同促使免疫细胞发生特异性结合,刺激体内淋巴细胞、巨噬细胞等产生免疫活性,有效提高机体和肠道的免疫能力,促进肠道菌群平衡和受损脑组织的恢复,其还是优良的益生元,能促进自体肠道菌群平衡,进一步协同强化产品作用。
二、制备方法
1、采用了复合发芽酵解技术,能在保留原料中生理活性物质的同时,降低其致敏性,用发芽的方法激活包括谷氨酸脱羧酶、植酸酶、纤维素酶、半纤维素酶等酶类,β-葡聚糖、总黄酮、总膳食纤维等成份含量显著增加,还能新生成γ-氨基丁酸、谷胱甘肽等,并使矿物质和微量元素形成有机态,增加了吸收利用率,软化了粗纤维,增加吸水膨胀能力;通过生物酶及微生物的酵解技术,使得大分子物质进一步分解为易于消化吸收的小分子物质,进一步增加功能营养物质的消化吸收利用率;
另外,复合发芽酵解技术相较于传统方法,能耗更低,效率更高;
2、通过亚临界萃取协同微丸包裹技术处理,通过沙棘籽、益智仁粗粉后混合萃取,因成分间的相互作用使得终产物收率更高,该方法与传统的超临界技术相比,具有能耗低、生产成本大幅降低等优势,可以工业化大规模地生产,且亚临界萃取的温度通常在30~50℃,温度较低,不会破坏物料中的热敏性成分,并通过协同微丸包裹技术,更加完整地保留了活性成分。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1:
按重量计,本实施例的基于肠-脑轴的植物基组合物采用以下原料制备:燕麦110份、藜麦90份、黑苦荞160份、青稞60份、酸枣仁60份、沙棘籽120份、益智仁90份、黑麦低聚肽40份。
上述基于肠-脑轴的植物基组合物的制备方法为:
(1)将燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁作发芽处理,待出芽后打浆;上述浆汁加酶酶解,该酶为纤维素酶(酶活力105U/g)和果胶酶(酶活力3×105U/g)以质量比1:2复配的混合酶;酶解后作灭酶处理,冷却至37℃后加入104CFU/L植物乳杆菌菌粉作发酵处理;获得发芽酵解浆汁后,浓缩、干燥、超微粉碎处理,即得到复合发芽酵解粉。复合发芽酵解粉中β-葡聚糖含量为7.3%,γ-氨基丁酸含量为0.8%,谷胱甘肽为0.012%,总黄酮含量为2.6%,总膳食纤维含量为8.2%。
(2)将沙棘籽、益智仁粗粉后用亚临界低温萃取法萃取,以CO2为萃取剂,萃取温度40℃,料液比1:5,萃取时间30min,得到沙棘益智仁油;将麦芽糊精和α-环状糊精,在70℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和α-环状糊精的总质量分数为4%,且麦芽糊精和α-环状糊精的质量比为1:3;将沙棘益智仁油加入含蔗糖脂肪酸酯和单,双甘油脂肪酸酯的10%(V/V)乙醇溶液中,其中蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯质量比为1:4,蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯在乙醇溶液中的总质量分数为2%,配制成质量分数为6%的沙棘益智仁油乳化液;将乳化液倒入制得的壁材溶液中,其中乳化液与壁材溶液的体积比为0.8:1,于50℃下进行乳化均质处理,制得初产品;将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为185℃,出口温度为90℃,上料速度0.8L/min,制得所需的沙棘益智仁微丸。
(3)将黑麦作发芽处理,待出芽后打浆,得到黑麦芽分散液,将黑麦芽分散液加热并使其温度保持在45℃,接着在分散液中加入分散液质量分数的0.2%诺维信风味蛋白酶Flavourzyme(酶活力2×104U/g)和0.2%Alcalase碱性蛋白酶(酶活力2×105U/g),搅拌均匀后酶解4h,酶解结束后加热煮沸7min灭酶,得到黑麦芽蛋白酶解液;将灭酶后的各酶解液分别进行离心去杂,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤后继续过活性炭柱,得到酶解精制液,再将酶解精制液调节pH至8.0,使酶解液通过分子截留量为1000D的超滤膜,得到黑麦低聚肽酶解液;将黑麦低聚肽酶解液进行真空浓缩和喷雾干燥,得到黑麦低聚肽。黑麦低聚肽中分子量小于1000D的低聚肽成分为95.4%,分子量处于180~500D的低聚肽成分为65.3%,谷氨酰胺含量为28.1%。
(4)将步骤(1)、(2)、(3)中制备的复合发芽酵解粉、沙棘益智仁微丸粉、黑麦低聚肽进行混合,加入辅料二氧化硅1份,混合均匀,即得到基于肠-脑轴的植物基组合物。
实施例2:
按重量计,本实施例的基于肠-脑轴的植物基组合物采用以下原料制备:燕麦190份、藜麦120份、黑苦荞110份、青稞200份、酸枣仁110份、沙棘籽200份、益智仁80份、黑麦低聚肽50份。
上述基于肠-脑轴的植物基组合物的制备方法为:
(1)将燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁作发芽处理,待出芽后打浆;上述浆汁加酶酶解,该酶为纤维素酶(酶活力105U/g)和果胶酶(酶活力3×105U/g)以质量比1:3复配的混合酶;酶解后作灭酶处理,冷却至37℃后加入105CFU/L植物乳杆菌菌粉作发酵处理;获得发芽酵解浆汁后,浓缩、干燥、超微粉碎处理,即得到复合发芽酵解粉。复合发芽酵解粉中β-葡聚糖含量为7.6%,γ-氨基丁酸含量为0.9%,谷胱甘肽为0.011%,总黄酮含量为2.7%,总膳食纤维含量为8.5%。
(2)将沙棘籽、益智仁粗粉后用亚临界低温萃取法萃取,以CO2为萃取剂,萃取温度40℃,料液比1:6,萃取时间40min,得到沙棘益智仁油;将麦芽糊精和α-环状糊精,在70℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和α-环状糊精的总质量分数为5%,且麦芽糊精和α-环状糊精的质量比为1:2;将沙棘益智仁油加入含蔗糖脂肪酸酯和单,双甘油脂肪酸酯的10%(V/V)乙醇溶液中,其中蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯质量比为1:4,蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯在乙醇溶液中的总质量分数为2%,配制成质量分数为6%的沙棘益智仁油乳化液;将乳化液倒入制得的壁材溶液中,其中乳化液与壁材溶液的体积比为0.7:1,于50℃下进行乳化均质处理,制得初产品;将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为185℃,出口温度为90℃,上料速度0.8L/min,制得所需的沙棘益智仁微丸。
(3)将黑麦作发芽处理,待出芽后打浆,得到黑麦芽分散液,将黑麦芽分散液加热并使其温度保持在55℃,接着在分散液中加入分散液质量分数的0.4%诺维信风味蛋白酶Flavourzyme(酶活力2×104U/g)和0.5%Alcalase碱性蛋白酶(酶活力2×105U/g),搅拌均匀后酶解5.5h,酶解结束后加热煮沸7min灭酶,得到黑麦芽蛋白酶解液;将灭酶后的各酶解液分别进行离心去杂,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤后继续过活性炭柱,得到酶解精制液,再将酶解精制液调节pH至8.2,使酶解液通过分子截留量为1000D的超滤膜,得到黑麦低聚肽酶解液;将黑麦低聚肽酶解液进行真空浓缩和喷雾干燥,得到黑麦低聚肽。黑麦低聚肽中分子量小于1000D的低聚肽成分为95.9%,分子量处于180~500D的低聚肽成分为66.1%,谷氨酰胺含量为28.8%。
(4)将步骤(1)、(2)、(3)中制备的复合发芽酵解粉、沙棘益智仁微丸粉、黑麦低聚肽进行混合,加入辅料二氧化硅1份,混合均匀,即得到基于肠-脑轴的植物基组合物。
实施例3:
按重量计,本实施例的基于肠-脑轴的植物基组合物采用以下原料制备:燕麦180份、藜麦124份、黑苦荞230份、青稞165份、酸枣仁85份、沙棘籽160份、益智仁64份、黑麦低聚肽35份。
上述基于肠-脑轴的植物基组合物的制备方法为:
(1)将燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁作发芽处理,待出芽后打浆;上述浆汁加酶酶解,该酶为纤维素酶(酶活力105U/g)和果胶酶(酶活力3×105U/g)以质量比1:3.5复配的混合酶;酶解后作灭酶处理,冷却至37℃后加入106CFU/L植物乳杆菌菌粉作发酵处理;获得发芽酵解浆汁后,浓缩、干燥、超微粉碎处理,即得到复合发芽酵解粉。复合发芽酵解粉中β-葡聚糖含量为8.1%,γ-氨基丁酸含量为1.0%,谷胱甘肽为0.016%,总黄酮含量为3.2%,总膳食纤维含量为9.0%。
(2)将沙棘籽、益智仁粗粉后用亚临界低温萃取法萃取,以CO2为萃取剂,萃取温度42℃,料液比1:7,萃取时间40min,得到沙棘益智仁油;将麦芽糊精和α-环状糊精,在70℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和α-环状糊精的总质量分数为6%,且麦芽糊精和α-环状糊精的质量比为1:3;将沙棘益智仁油加入含蔗糖脂肪酸酯和单,双甘油脂肪酸酯的10%(V/V)乙醇溶液中,其中蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯质量比为1:4,蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯在乙醇溶液中的总质量分数为2%,配制成质量分数为6%的沙棘益智仁油乳化液;将乳化液倒入制得的壁材溶液中,其中乳化液与壁材溶液的体积比为0.8:1,于50℃下进行乳化均质处理,制得初产品;将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为180℃,出口温度为90℃,上料速度1.0L/min,制得所需的沙棘益智仁微丸。
(3)将黑麦作发芽处理,待出芽后打浆,得到黑麦芽分散液,将黑麦芽分散液加热并使其温度保持在51℃,接着在分散液中加入分散液质量分数的0.3%诺维信风味蛋白酶Flavourzyme(酶活力2×104U/g)和0.4%Alcalase碱性蛋白酶(酶活力2×105U/g),搅拌均匀后酶解5h,酶解结束后加热煮沸7min灭酶,得到黑麦芽蛋白酶解液;将灭酶后的各酶解液分别进行离心去杂,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤后继续过活性炭柱,得到酶解精制液,再将酶解精制液调节pH至8.1,使酶解液通过分子截留量为1000D的超滤膜,得到黑麦低聚肽酶解液;将黑麦低聚肽酶解液进行真空浓缩和喷雾干燥,得到黑麦低聚肽。黑麦低聚肽中分子量小于1000D的低聚肽成分为97.3%,分子量处于180~500D的低聚肽成分为68.2%,谷氨酰胺含量为29.9%。
(4)将步骤(1)、(2)、(3)中制备的复合发芽酵解粉、沙棘益智仁微丸粉、黑麦低聚肽进行混合,加入辅料二氧化硅1份,混合均匀,即得到基于肠-脑轴的植物基组合物。
对比例1:
按重量计,本对比例的基于肠-脑轴的植物基组合物采用以下原料制备:燕麦180份、藜麦124份、黑苦荞230份、青稞165份、酸枣仁85份、沙棘籽160份、益智仁64份、黑麦低聚肽35份。
上述组合物的制备方法为:
(1)将燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁直接打浆后,经干燥、超微粉碎处理,得到复合粉,复合粉中β-葡聚糖含量为3.1%,γ-氨基丁酸含量为0.0%,谷胱甘肽为0.000%,总黄酮含量为1.1%,总膳食纤维含量为3.1%。
(2)将沙棘籽、益智仁粗粉后用亚临界低温萃取法萃取,以CO2为萃取剂,萃取温度42℃,料液比1:7,萃取时间40min,得到沙棘益智仁油;将麦芽糊精和α-环状糊精,在70℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和α-环状糊精的总质量分数为6%,且麦芽糊精和α-环状糊精的质量比为1:3;将沙棘益智仁油加入含蔗糖脂肪酸酯和单,双甘油脂肪酸酯的10%(V/V,体积比)乙醇溶液中,其中蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯质量比为1:4,蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯在乙醇溶液中的总质量分数为2%,配制成质量分数为6%的沙棘益智仁油乳化液;将乳化液倒入制得的壁材溶液中,其中乳化液与壁材溶液的体积比为0.8:1,于50℃下进行乳化均质处理,制得初产品;将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为180℃,出口温度为90℃,上料速度1.0L/min,制得所需的沙棘益智仁微丸。
(3)将黑麦作发芽处理,待出芽后打浆,得到黑麦芽分散液,将黑麦芽分散液加热并使其温度保持在51℃,接着在分散液中加入分散液质量分数的0.3%降低苦味的诺维信风味蛋白酶Flavourzyme(酶活力2×104U/g)和0.4%Alcalase碱性蛋白酶(酶活力2×105U/g),搅拌均匀后酶解5h,酶解结束后加热煮沸7min灭酶,得到黑麦芽蛋白酶解液;将灭酶后的各酶解液分别进行离心去杂,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤后继续过活性炭柱,得到酶解精制液,再将酶解精制液调节pH至8.1,使酶解液通过分子截留量为1000D的超滤膜,得到黑麦低聚肽酶解液;将黑麦低聚肽酶解液进行真空浓缩和喷雾干燥,得到黑麦低聚肽。黑麦低聚肽中分子量小于1000D的低聚肽成分为97.3%,分子量处于180~500D的低聚肽成分为68.2%,谷氨酰胺含量为29.9%。
(4)将步骤(1)、(2)、(3)中制备的复合粉、沙棘益智仁微丸粉、黑麦低聚肽进行混合,加入辅料二氧化硅1份,混合均匀,即得到含未经复合发芽酵解工艺制备的复合粉的基于肠-脑轴的植物基组合物。
对比例2:
按重量计,本对比例的基于肠-脑轴的植物基组合物采用以下原料制备:燕麦180份、藜麦124份、黑苦荞230份、青稞165份、酸枣仁85份、沙棘籽160份、益智仁64份、黑麦低聚肽35份。
上述组合物的制备方法为:
(1)将燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁作发芽处理,待出芽后打浆;上述浆汁加酶酶解,该酶为纤维素酶(酶活力105U/g)和果胶酶(酶活力3×105U/g)以质量比1:3.5复配的混合酶;酶解后作灭酶处理,冷却至37℃后加入106CFU/L植物乳杆菌菌粉作发酵处理;获得发芽酵解浆汁后,浓缩、干燥、超微粉碎处理,即得到复合发芽酵解粉。复合发芽酵解粉中β-葡聚糖含量为8.1%,γ-氨基丁酸含量为1.0%,谷胱甘肽为0.016%,总黄酮含量为3.2%,总膳食纤维含量为9.0%。
(2)将沙棘籽、益智仁粗粉后用80%(V/V)乙醇回流提取两次,每次2h,滤液浓缩成浸膏,冻干后得沙棘益智仁粉。
(3)将黑麦作发芽处理,待出芽后打浆,得到黑麦芽分散液,将黑麦芽分散液加热并使其温度保持在51℃,接着在分散液中加入分散液质量分数的0.3%诺维信风味蛋白酶Flavourzyme(酶活力2×104U/g)和0.4%Alcalase碱性蛋白酶(酶活力2×105U/g),搅拌均匀后酶解5h,酶解结束后加热煮沸7min灭酶,得到黑麦芽蛋白酶解液;将灭酶后的各酶解液分别进行离心去杂,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤后继续过活性炭柱,得到酶解精制液,再将酶解精制液调节pH至8.1,使酶解液通过分子截留量为1000D的超滤膜,得到黑麦低聚肽酶解液;将黑麦低聚肽酶解液进行真空浓缩和喷雾干燥,得到黑麦低聚肽。黑麦低聚肽中分子量小于1000D的低聚肽成分为97.3%,分子量处于180~500D的低聚肽成分为68.2%,谷氨酰胺含量为29.9%。
(4)将步骤(1)、(2)、(3)中制备的复合发芽酵解粉、沙棘益智仁粉、黑麦低聚肽进行混合,加入辅料二氧化硅1份,混合均匀,即得到含未经亚临界萃取协同微丸包裹技术制备的沙棘益智仁粉的基于肠-脑轴的植物基组合物。
对比例3:
按重量计,本对比例的基于肠-脑轴的植物基组合物采用以下原料制备:燕麦180份、藜麦124份、黑苦荞230份、青稞165份、酸枣仁85份、沙棘籽160份、益智仁64份、未经发芽工艺制备的黑麦低聚肽35份。
上述组合物的制备方法为:
(1)将燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁作发芽处理,待出芽后打浆;上述浆汁加酶酶解,该酶为纤维素酶(酶活力105U/g)和果胶酶(酶活力3×105U/g)以质量比1:3.5复配的混合酶;酶解后作灭酶处理,冷却至37℃后加入106CFU/L植物乳杆菌菌粉作发酵处理;获得发芽酵解浆汁后,浓缩、干燥、超微粉碎处理,即得到复合发芽酵解粉。复合发芽酵解粉中β-葡聚糖含量为8.1%,γ-氨基丁酸含量为1.0%,谷胱甘肽为0.016%,总黄酮含量为3.2%,总膳食纤维含量为9.0%。
(2)将沙棘籽、益智仁粗粉后用亚临界低温萃取法萃取,以CO2为萃取剂,萃取温度42℃,料液比1:7,萃取时间40min,得到沙棘益智仁油;将麦芽糊精和α-环状糊精,在70℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和α-环状糊精的总质量分数为6%,且麦芽糊精和α-环状糊精的质量比为1:3;将沙棘益智仁油加入含蔗糖脂肪酸酯和单,双甘油脂肪酸酯的10%(V/V)乙醇溶液中,其中蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯质量比为1:4,蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯在乙醇溶液中的总质量分数为2%,配制成质量分数为6%的沙棘益智仁油乳化液;将乳化液倒入制得的壁材溶液中,其中乳化液与壁材溶液的体积比为0.8:1,于50℃下进行乳化均质处理,制得初产品;将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为180℃,出口温度为90℃,上料速度1.0L/min,制得所需的沙棘益智仁微丸。
(3)将黑麦不经发芽处理,直接打浆,得到黑麦芽分散液,将黑麦芽分散液加热并使其温度保持在51℃,接着在分散液中加入分散液质量分数的0.3%诺维信风味蛋白酶Flavourzyme(酶活力2×104U/g)和0.4%Alcalase碱性蛋白酶(酶活力2×105U/g),搅拌均匀后酶解5h,酶解结束后加热煮沸7min灭酶,得到黑麦芽蛋白酶解液;将灭酶后的各酶解液分别进行离心去杂,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤后继续过活性炭柱,得到酶解精制液,再将酶解精制液调节pH至8.1,使酶解液通过分子截留量为1000D的超滤膜,得到黑麦低聚肽酶解液;将黑麦低聚肽酶解液进行真空浓缩和喷雾干燥,得到黑麦低聚肽。黑麦低聚肽中分子量小于1000D的低聚肽成分为73.2%,分子量处于180~500D的低聚肽成分为38.5%,谷氨酰胺含量为13.9%。
(4)将步骤(1)、(2)、(3)中制备的复合发芽酵解粉、沙棘益智仁微丸粉、黑麦低聚肽进行混合,加入辅料二氧化硅1份,混合均匀,即得到含未经发芽工艺制备的黑麦低聚肽的基于肠-脑轴的植物基组合物。
对比例4:
按重量计,本对比例的基于肠-脑轴的植物基组合物采用以下原料制备:燕麦180份、藜麦124份、黑苦荞230份、青稞165份、酸枣仁85份、沙棘籽160份、益智仁64份、普通小麦低聚肽35份。
上述组合物的制备方法为:
(1)将燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁作发芽处理,待出芽后打浆;上述浆汁加酶酶解,该酶为纤维素酶(酶活力105U/g)和果胶酶(酶活力3×105U/g)以质量比1:3.5复配的混合酶;酶解后作灭酶处理,冷却至37℃后加入106CFU/L植物乳杆菌菌粉作发酵处理;获得发芽酵解浆汁后,浓缩、干燥、超微粉碎处理,即得到复合发芽酵解粉。复合发芽酵解粉中β-葡聚糖含量为8.1%,γ-氨基丁酸含量为1.0%,谷胱甘肽为0.016%,总黄酮含量为3.2%,总膳食纤维含量为9.0%。
(2)将沙棘籽、益智仁粗粉后用亚临界低温萃取法萃取,以CO2为萃取剂,萃取温度42℃,料液比1:7,萃取时间40min,得到沙棘益智仁油;将麦芽糊精和α-环状糊精,在70℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和α-环状糊精的总质量分数为6%,且麦芽糊精和α-环状糊精的质量比为1:3;将沙棘益智仁油加入含蔗糖脂肪酸酯和单,双甘油脂肪酸酯的10%(V/V)乙醇溶液中,其中蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯质量比为1:4,蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯在乙醇溶液中的总质量分数为2%,配制成质量分数为6%的沙棘益智仁油乳化液;将乳化液倒入制得的壁材溶液中,其中乳化液与壁材溶液的体积比为0.8:1,于50℃下进行乳化均质处理,制得初产品;将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为180℃,出口温度为90℃,上料速度1.0L/min,制得所需的沙棘益智仁微丸。
(3)将步骤(1)、(2)中制备的复合发芽酵解粉、沙棘益智仁微丸粉及普通市售小麦低聚肽进行混合,加入辅料二氧化硅1份,混合均匀,即得到含普通小麦低聚肽的基于肠-脑轴的植物基组合物。
对比例5:
按重量计,本对比例的基于肠-脑轴的植物基组合物采用以下原料制备:沙棘籽160份、益智仁64份、黑麦低聚肽35份。
上述组合物的制备方法为:
(1)将沙棘籽、益智仁粗粉后用亚临界低温萃取法萃取,以CO2为萃取剂,萃取温度42℃,料液比1:7,萃取时间40min,得到沙棘益智仁油;将麦芽糊精和α-环状糊精,在70℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和α-环状糊精的总质量分数为6%,且麦芽糊精和α-环状糊精的质量比为1:3;将沙棘益智仁油加入含蔗糖脂肪酸酯和单,双甘油脂肪酸酯的10%(V/V)乙醇溶液中,其中蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯质量比为1:4,蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯在乙醇溶液中的总质量分数为2%,配制成质量分数为6%的沙棘益智仁油乳化液;将乳化液倒入制得的壁材溶液中,其中乳化液与壁材溶液的体积比为0.8:1,于50℃下进行乳化均质处理,制得初产品;将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为180℃,出口温度为90℃,上料速度1.0L/min,制得所需的沙棘益智仁微丸。
(2)将黑麦作发芽处理,待出芽后打浆,得到黑麦芽分散液,将黑麦芽分散液加热并使其温度保持在51℃,接着在分散液中加入分散液质量分数的0.3%诺维信风味蛋白酶Flavourzyme(酶活力2×104U/g)和0.4%Alcalase碱性蛋白酶(酶活力2×105U/g),搅拌均匀后酶解5h,酶解结束后加热煮沸7min灭酶,得到黑麦芽蛋白酶解液;将灭酶后的各酶解液分别进行离心去杂,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤后继续过活性炭柱,得到酶解精制液,再将酶解精制液调节pH至8.1,使酶解液通过分子截留量为1000D的超滤膜,得到黑麦低聚肽酶解液;将黑麦低聚肽酶解液进行真空浓缩和喷雾干燥,得到黑麦低聚肽。黑麦低聚肽中分子量小于1000D的低聚肽成分为97.3%,分子量处于180~500D的低聚肽成分为68.2%,谷氨酰胺含量为29.9%。
(3)将步骤(1)、(2)中制备的沙棘益智仁微丸粉、黑麦低聚肽进行混合,加入辅料二氧化硅1份,混合均匀,即得到不含复合发芽酵解粉的植物基组合物。
对比例6:
按重量计,本对比例的基于肠-脑轴的植物基组合物采用以下原料制备:燕麦180份、藜麦124份、黑苦荞230份、青稞165份、益智仁64份、黑麦低聚肽35份。
上述组合物的制备方法为:
(1)将燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁作发芽处理,待出芽后打浆;上述浆汁加酶酶解,该酶为纤维素酶(酶活力105U/g)和果胶酶(酶活力3×105U/g)以质量比1:3.5复配的混合酶;酶解后作灭酶处理,冷却至37℃后加入106CFU/L植物乳杆菌菌粉作发酵处理;获得发芽酵解浆汁后,浓缩、干燥、超微粉碎处理,即得到复合发芽酵解粉。复合发芽酵解粉中β-葡聚糖含量为8.1%,γ-氨基丁酸含量为1.0%,谷胱甘肽为0.016%,总黄酮含量为3.2%,总膳食纤维含量为9.0%。
(2)将黑麦作发芽处理,待出芽后打浆,得到黑麦芽分散液,将黑麦芽分散液加热并使其温度保持在51℃,接着在分散液中加入分散液质量分数的0.3%诺维信风味蛋白酶Flavourzyme(酶活力2×104U/g)和0.4%Alcalase碱性蛋白酶(酶活力2×105U/g),搅拌均匀后酶解5h,酶解结束后加热煮沸7min灭酶,得到黑麦芽蛋白酶解液;将灭酶后的各酶解液分别进行离心去杂,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤后继续过活性炭柱,得到酶解精制液,再将酶解精制液调节pH至8.1,使酶解液通过分子截留量为1000D的超滤膜,得到黑麦低聚肽酶解液;将黑麦低聚肽酶解液进行真空浓缩和喷雾干燥,得到黑麦低聚肽。黑麦低聚肽中分子量小于1000D的低聚肽成分为97.3%,分子量处于180~500D的低聚肽成分为68.2%,谷氨酰胺含量为29.9%。
(3)将步骤(1)、(2)中制备的复合发芽酵解粉、黑麦低聚肽进行混合,加入辅料二氧化硅1份,混合均匀,即得到不含沙棘益智仁微丸粉的植物基组合物。
对比例7:
按重量计,本对比例的基于肠-脑轴的植物基组合物采用以下原料制备:燕麦180份、藜麦124份、黑苦荞230份、青稞165份、酸枣仁85份、沙棘籽160份、益智仁64份。
上述植物基组合物的制备方法为:
(1)将燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁作发芽处理,待出芽后打浆;上述浆汁加酶酶解,该酶为纤维素酶(酶活力105U/g)和果胶酶(酶活力3×105U/g)以质量比1:3.5复配的混合酶;酶解后作灭酶处理,冷却至37℃后加入106CFU/L植物乳杆菌菌粉作发酵处理;获得发芽酵解浆汁后,浓缩、干燥、超微粉碎处理,即得到复合发芽酵解粉。复合发芽酵解粉中β-葡聚糖含量为8.1%,γ-氨基丁酸含量为1.0%,谷胱甘肽为0.016%,总黄酮含量为3.2%,总膳食纤维含量为9.0%。
(2)将沙棘籽、益智仁粗粉后用亚临界低温萃取法萃取,以CO2为萃取剂,萃取温度42℃,料液比1:7,萃取时间40min,得到沙棘益智仁油;将麦芽糊精和α-环状糊精,在70℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和α-环状糊精的总质量分数为6%,且麦芽糊精和α-环状糊精的质量比为1:3;将沙棘益智仁油加入含蔗糖脂肪酸酯和单,双甘油脂肪酸酯的10%(V/V)乙醇溶液中,其中蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯质量比为1:4,蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯在乙醇溶液中的总质量分数为2%,配制成质量分数为6%的沙棘益智仁油乳化液;将乳化液倒入制得的壁材溶液中,其中乳化液与壁材溶液的体积比为0.8:1,于50℃下进行乳化均质处理,制得初产品;将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为180℃,出口温度为90℃,上料速度1.0L/min,制得所需的沙棘益智仁微丸。
(3)将步骤(1)、(2)中制备的复合发芽酵解粉、沙棘益智仁微丸粉进行混合,加入辅料二氧化硅1份,混合均匀,即得到不含黑麦低聚肽的植物基组合物。
本发明对各实施例和对比例制备的组合物进行了服用效果试验,具体为基于D-半乳糖诱导的脑损伤伴发林可霉素诱导的肠道微生态失调小鼠模型的功效评价试验。
试验方法:昆明种小鼠,体重20±2g,雄性,适应性喂养1周后,随机分成16组,每组10只,分别为阴性对照组、模型对照组、丽珠肠乐组(阳性对照组1,丽珠集团丽珠制药厂)、健脑片组(阳性对照组2,北京长城制药有限公司)、实施例1组、实施例2组、实施例3低剂量组(5.0g/kg)、实施例3中剂量组(10.0g/kg)、实施例3高剂量组(20.0g/kg)、对比例1-7组。
除阴性对照组外,各组小鼠按150mg/kg皮下注射3%的D-半乳糖,每天1次,连续6周,阴性对照组小鼠每天皮下注射等量生理盐水,后同样除阴性对照组外,各组小鼠均用盐酸林可霉素灌胃,按0.3mL/次,每天给药两次,连续给药三天,阴性对照组小鼠灌胃等量的生理盐水,制备急性脑损伤伴发肠道微生态失调的小鼠模型。
模型制备成功后,阴性对照组和模型对照组小鼠均以等容量的生理盐水灌胃,丽珠肠乐组以0.5亿活菌/mL的丽珠肠乐溶液灌胃,给药剂量为0.3mL/次,每天给药一次,健脑片组、实施例1、2组以及实施例3中剂量组、对比例1-7组均以10.0g/kg的给药剂量用生理盐水溶解后灌胃,实施例3低剂量组、实施例3高剂量组分别以5.0g/kg、20.0g/kg的给药剂量用生理盐水溶解后灌胃,每天给药一次,连续给药两周。
实验结束前一周对全部小鼠进行水迷宫神经行为学测试。采用Morris水迷宫进行学习记忆能力测试,包括定向航行和空间探索实验。实验设备由视频采集系统、数据分析系统和四个象限的环形水池构成,检测实验动物的空间学习能力和空间记忆能力。其中,定向航行实验的具体方法为将小鼠面向池壁分别从4个入水点放入水中,记录小鼠找到平台所需时间,即逃避潜伏期(escape latency),连续测试5d;空间探索实验的具体方法为第6天撤除平台,测量小鼠在目标象限停留时间。
神经行为学测试结束后,采用颈椎脱臼法处死小鼠,冰上快速取出小鼠海马组织,用10%甲醛溶液固定,再用冷生理盐水制备10%脑匀浆,测定脑组织匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰胆碱酯酶(AchE)以及谷氨酸(Glu)含量;无菌采集盲肠内容物5.0g,按1.0g内容物加入4mL生理盐水的比例加入生理盐水,置于振荡器上振荡15min制成混悬液,离心后收集上清液,得到肠道菌液,将肠道菌液用无菌生理盐水连续稀释,分别进行双歧杆菌、乳酸杆菌、肠杆菌和肠球菌的选择性培养,培养后进行菌落计数,结果以每克粪便中菌落数的对数值表示。
试验结果:
(1)阴性对照组小鼠在试验过程中精神状态良好,毛色有光泽,摄食、饮水及粪便正常,且对外界刺激反应灵敏;皮下注射D-半乳糖后,小鼠精神萎靡,倦怠懒动,毛色粗糙、暗淡无光泽,并伴有脱毛现象,用林可霉素灌胃后,摄食、饮水量减少,粪便稀湿等状况,精神恍惚以及行动迟缓现象均随时间延续而加重。经过两周给药后,阳性对照组与各给药组均有不同程度好转,行动能力、被毛状况、摄食量、饮水量及粪便干燥程度等均有不同程度改善。
(2)与阴性对照组比较,模型对照组小鼠在目标象限停留时间、脑组织中MDA、AchE和Glu的含量均显著升高(P<0.01),SOD显著降低(P<0.01),提示脑损伤模型建立成功。与模型对照组比较,实施例1组、实施例2组、实施例3组各剂量组小鼠在目标象限停留时间、脑组织中MDA、AchE和Glu的含量均显著减少(P<0.01),SOD显著升高(P<0.05,P<0.01),结合实施例3中剂量组及实施例3高剂量组与阴性对照组的对比结果,小鼠在目标象限停留时间、脑组织中MDA、SOD、AchE和Glu的含量差异均不显著(P>0.05),且存在一定的量效关系,提示各实施例组均能在一定程度上改善脑损伤伴发肠道微生态失调小鼠的脑部健康状况,并以实施例3中、高剂量组最为突出,均远优于两阳性对照组。进一步组间对比结果表明,复合发芽酵解技术、亚临界萃取协同微丸包裹技术等处理对终产品效果影响巨大,且各组分间具有良好的协同增效作用,组合后产生了意想不到的效果,缺一不可。具体试验结果如表1、表2所示。
表1:各试验组小鼠水迷宫神经行为学测试结果比较
与阴性对照组比较:*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较:#P<0.05,##P<0.01
表2:各试验组小鼠脑组织中MDA、SOD、AchE和Glu的含量比较
与阴性对照组比较:*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较:#P<0.05,##P<0.01
与阴性对照组比较,模型对照组小鼠肠道内双歧杆菌和乳酸杆菌数量显著减少(P<0.01),而肠杆菌和肠球菌数量显著增加(P<0.01),表明肠道微生态失调模型建立成功。与模型对照组比较,阳性对照组中健脑片组小鼠肠道内各类菌差异不显著(P>0.05),表明该剂量下健脑片对肠道菌群不具有调节作用;与模型对照组比较,实施例1组、实施例2组、实施例3不同剂量组小鼠肠道内双歧杆菌和乳酸杆菌数量明显增加(P<0.05,P<0.01),肠杆菌和肠球菌数量明显减少(P<0.05,P<0.01)提示各组均能有效促进肠道有益菌的生长与繁殖、抑制有害菌的生长与繁殖,具有良好的调节肠道微生态的作用。进一步的组间对比结果再次验证,复合发芽酵解技术、亚临界萃取协同微丸包裹技术等处理对终产品效果影响巨大,且各组分间具有良好的协同增效作用,组合后产生了意想不到的效果,缺一不可。具体试验结果如表3所示。
表3:各实验组小鼠肠道中的4种细菌定量检测结果比较(logN/g,n=10)
与阴性对照组比较:*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较:#P<0.05,##P<0.01。
Claims (10)
1.一种基于肠-脑轴的植物基组合物,其特征在于:按重量计,包括以下组分
燕麦110~200份、藜麦80~140份、黑苦荞110~250份、青稞60~220份、酸枣仁50~130份、沙棘籽90~210份、益智仁50~100份、黑麦低聚肽20~60份。
2.根据权利要求1所述的基于脑-肠轴的植物基组合物,其特征在于:所述组合物由下列重量份数的原料制成
所述燕麦180份、藜麦124份、黑苦荞230份、青稞165份、酸枣仁85份、沙棘籽160份、益智仁64份、黑麦低聚肽35份。
3.根据权利要求1所述的基于脑-肠轴的植物基组合物,其特征在于:所述组合物包括
复合发芽酵解粉,由燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁制得;
沙棘益智仁微丸粉,由沙棘籽、益智仁制得;
黑麦低聚肽;
辅料。
4.根据权利要求3所述的基于脑-肠轴的植物基组合物,其特征在于:所述组合物的制剂形式采用片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、丸剂、口服液中的至少一种。
5.一种应用有如权利要求1~4中任一项所述基于脑-肠轴的植物基组合物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)采用燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁,制备复合发芽酵解粉;
(2)采用沙棘籽、益智仁,并采用亚临界萃取协同微丸包裹技术制备沙棘益智仁微丸粉;
(3)制备黑麦低聚肽;
(4)将步骤(1)、(2)、(3)分别制备的复合发芽酵解粉、沙棘益智仁微丸粉、黑麦低聚肽进行混合,混合均匀,即得到所述的基于肠-脑轴的植物基组合物。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:所述的复合发芽酵解粉通过以下步骤获得:
(a1)将燕麦、藜麦、黑苦荞、青稞、酸枣仁作发芽处理,待出芽后打成浆汁;
(b1)上述步骤(a1)的浆汁加酶酶解,该酶为纤维素酶和果胶酶以质量比1:1~4复配的混合酶;
(c1)酶解后作灭酶处理,冷却至25~40℃后加入104~107CFU/L植物乳杆菌作发酵处理,获得发芽酵解浆汁;
(d1)对所述发芽酵解浆汁进行浓缩、干燥、粉碎处理,即得到所述的复合发芽酵解粉。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于:所述复合发芽酵解粉中β-葡聚糖含量不低于7%,γ-氨基丁酸含量不低于0.8%,谷胱甘肽不低于0.01%,总黄酮不低于2.5%,总膳食纤维不低于8%。
8.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:所述的沙棘益智仁微丸粉通过以下步骤获得:
(a2)将沙棘籽、益智仁粗粉后用亚临界低温萃取法萃取,萃取温度30~50℃,料液比1:2~9,萃取时间20~100min,得到沙棘益智仁油;
(b2)将麦芽糊精和α-环状糊精,在60~80℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和α-环状糊精的总质量分数为3~8%,且麦芽糊精和α-环状糊精的质量比为1:1~4;
(c2)将所述步骤(a2)得到的沙棘益智仁油加入含蔗糖脂肪酸酯和单,双甘油脂肪酸酯的10%(V/V)乙醇溶液中,其中蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯质量比为1:1~4,蔗糖脂肪酸酯与单,双甘油脂肪酸酯在乙醇溶液中的总质量分数为1~4%,配制成质量分数为4%~10%的沙棘益智仁油乳化液;
(d2)将步骤(c2)制得的乳化液倒入步骤(b2)制得的壁材溶液中,其中乳化液与壁材溶液的体积比为0.6~1:1,于40~60℃下进行乳化均质处理,制得初产品;
(e2)将上述步骤(d)制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为170~185℃,出口温度为85~95℃,上料速度0.5~1.5L/min,制得所需的沙棘益智仁微丸粉。
9.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:所述的黑麦低聚肽通过以下步骤获得:
(a3)发芽调浆:将黑麦作发芽处理,待出芽后打浆,得到黑麦芽分散液;
(b3)酶解:将所述黑麦芽分散液加热并使其温度保持在45~55℃之间,接着在黑麦芽分散液中加入风味蛋白酶和碱性蛋白酶,搅拌均匀后酶解4h~6h,其中风味蛋白酶的加入量是分散液中底物质量分数的0.1%~0.5%,碱性蛋白酶的加入量是黑麦芽分散液中底物质量分数的0.2%~0.6%,酶解结束后加热煮沸5~10min灭酶,得到黑麦芽蛋白酶解液;
(c3)分离纯化:将灭酶后的酶解液进行离心去杂,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤后继续过活性炭柱,得到酶解精制液,再将酶解精制液调节pH至8.0~8.2,使酶解液通过分子截留量为1000D的超滤膜,得到黑麦低聚肽酶解液;
(d3)浓缩干燥:将黑麦低聚肽酶解液进行真空浓缩和喷雾干燥,得到所述的黑麦低聚肽。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于:所述黑麦低聚肽中分子量小于
1000D的低聚肽成分不低于95%,分子量处于180~500D的低聚肽成分不低于65%,
谷氨酰胺含量不低于28%。
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