CN107348521B - 具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物及其制备方法,中药复合肽组合物按重量份数计,包括淡竹叶提取物5~13份,熟地提取物4~10份,山茱萸提取物4~10份,当归微囊6~14份,薏苡仁微囊6~14份,酪蛋白肽8~16份,小麦低聚肽10~20份,低聚木糖8~12份,菊粉1~13份。本发明中的各组分配伍可起到相互促进、协同增效的作用,从而很好的改善胃肠道功能;并且,将当归、薏苡仁经过超临界CO2萃取并包埋制成微囊,将淡竹叶、熟地、山茱萸等中药经过前处理、提取浓缩、喷雾干燥制成提取物,最大程度地保留了药物的主要功效成分,食用量显著下降的同时极大地提高了药物的生物利用度,显著提升了药效,从而真正实现改善胃肠道功能。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物及其制备方法。
背景技术
胃肠道作为人体的消化器官,在机体物质代谢中占据着不可取代的重要地位,同时胃肠道还有分泌、排泄、生物转化等多方面的功能,胃肠道及其附属器官会分泌各种消化液,参与食物的消化吸收过程。肠道微生物菌群如双歧杆菌,乳酸杆菌等能合成多种人体生长发育必须的维生素,如B族维生素,维生素K,烟酸、泛酸等,还能利用蛋白质残渣合成必需氨基酸,如天门冬氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸和苏氨酸等,并参与糖类和蛋白质的代谢,同时还能促进铁、镁、锌等矿物元素的吸收,这些营养物质对人类的健康有着重要作用。人体肠道内寄生着10万亿个细菌,它们能影响体重和消化能力、抵御病原菌的感染和自体免疫疾病的患病风险,促进胃肠道蠕动防止便秘及腹泻,促进排出有害物质,人类与微生物之间的动态平衡称为微生态平衡,对宿主营养、免疫、消化等正常生理功能的维持具有举足轻重的作用。
随着人们日常生活水平的提高,生活节奏的加快,压力情绪的变化将直接影响人身体的器官发生变化,而表现最为敏感的就是胃肠,不良情绪可以通过大脑皮层导致下丘脑功能紊乱,影响胃肠道功能从而导致胃肠功能紊乱。长期饮食不规律,大量的饮酒及食用刺激性食物,暴饮暴食或由于工作顾不上吃饭,会导致胃肠的蠕动功能紊乱,胃肠液分泌不规律,胃肠道粘膜损坏、肠道微生态失衡。本来存在消化系统疾病,肠胃不好,加上不注意饮食就会产生胃肠功紊乱,久而久之导致消化不良、急性胃肠炎、溃疡、胃肠穿孔等等。此外现代人工作压力大、经常熬夜加班这些都容易引起胃肠道供血不足而出现无法控制的疲惫感、免疫力下降、很难缓解的亚健康状态。
我国是胃肠病大国,而且大多数人对胃肠病引起的反酸、嗳气、厌食、恶心、呕吐、疼痛、腹胀、腹泻、便秘、出血、溃疡、痉挛等症状并不十分重视。胃肠道疾病往往起病缓慢,病程经年累月,呈持续性或反复性发作,很难治愈。
近年来,欧美及日韩畅销的治疗胃肠道疾病药多为阿托品、扑热息痛、多潘立酮、氢氧化铝、氢氧化镁、碳酸氢钠、抗生素、维生素和矿物质等,这些物质只能暂时缓解胃肠道症状,对胃肠道损伤并无确切疗效,治标不治本,且长期服用抗生素消炎会导致肠道微生态失衡,影响到人体的消化吸收及免疫调节功能。
随着胃肠功能紊乱、肠道微生态失衡、胃肠器质性疾病人数的不断暴增,迫切需要开发出能够真正调节肠道微生态、修复胃肠道粘膜、改善胃肠道功能且副作用较小的产品。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的现状,提供一种具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物。
本发明所要解决的另一个技术问题是针对现有技术的现状,提供一种上述中药复合肽组合物的制备方法,最大程度地保留了药物的主要功效成分、极大地提高了药物的生物利用度、显著提升了药效。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为:一种具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物,其特征在于:按重量份数计,包括以下组分
淡竹叶性味甘淡,归心、肺、胃、膀胱经,能起到清凉消炎、清热解毒、利尿通淋、防治胃热呕哕之功效,含有大量的黄酮糖苷、香豆素类内酯、生物活性多糖及其它有效成分,具有优良的抗自由基抗氧化、抗衰老、降血脂和血胆固醇的作用。
熟地性温味甘,归肝肾经,具有补血养阴,填精益髓的功效,又能补脾阴,止久泻,解肝肾阴亏,虚损百病,改善胃肠道功能。熟地中的多糖、环烯醚萜类功效成分具有显著的抗氧化、延缓衰老的功效,同时能促进胸腺及脾淋巴细胞增殖,提高机体免疫力。
山茱萸性微温味酸涩,归肝、肾经,具有补益肝肾、收涩固脱、补血固精、调气补虚、明目强身的功效,与熟地合用更能发挥其止血、滋补肝肾、修复胃肠道粘膜,改善胃肠道健康的作用。山茱萸中的多糖成分可促进机体的免疫反应,促使NK细胞与巨噬细胞激活;山茱萸中的苷类成分表现出良好的抗炎免疫抑制及镇痛作用。
薏苡仁性味甘、淡、凉,归脾、胃、肺经,具有健脾益胃,健脾止泻、清热镇痛、祛风除湿、促进新陈代谢、轻身延年、利尿消肿、促进排便的功效,薏苡仁还具有抗肿瘤、增强机体免疫力的双重作用。
当归,性温味甘辛,归肝、心、脾经。具有补血活血、通经活络、消炎镇痛、润燥滑肠、保肝利胆、抗癌免疫之功效。主血虚、肠燥诸证。其消炎、润肠作用对于胃肠道的保护特别适用。
酪蛋白肽是从牛乳酪蛋白中提炼定向酶切及特定小肽分离技术获得的出来的小分子蛋白多肽,可以针对人体免疫细胞完成激活、修复、再生、提升活性的全过程,激发自身免疫系统的主动性,从根本上恢复和加固自身免疫系统。同时酪蛋白肽也可防治血栓、高血脂、高血压,延缓衰老,抗疲劳,提高机体免疫力,促进人体对营养物质及有益微量元素的吸收。
小麦低聚肽能促进胰岛素分泌,调节血糖,抑制胆固醇上升,促进胃肠道粘膜修复,抑制血管紧张素转化酶的活性从而能降血压;具有ACE抑制作用、免疫调节、抗氧化等多种生物活性,能够刺激机体淋巴细胞增殖,增强巨噬细胞吞噬功能,提高机体免疫力。
低聚木糖是由2-7个木糖分子以β-1,4糖苷键结合而成的功能性聚合糖,低聚木糖很难为人体消化酶所分解,具有减少有毒发酵产物及有害细菌酶的产生、抑制病原菌和腹泻、保护肝脏、降低血清胆固醇、降低血压、增强机体免疫力、刺激肠道蠕动防止便秘、促进动物消化道内有益菌的繁殖,改善微生物菌群平衡的功效。
菊粉能控制血脂、降低血糖、促进矿物质吸收、调节肠道微生物环境、增进肠道有益菌群数量、改善肠道健康、防止便秘、抑制有毒发酵产物的生成、增强新陈代谢、促进粘膜组织修复。
在上述方案中,所述的淡竹叶提取物、熟地提取物、山茱萸提取物分别由相应的淡竹叶、熟地、山茱萸依次经过动态逆流提取及后处理过程而获得。
优选地,所述的后处理过程依次包括减压浓缩、喷雾干燥。
作为优选,所述的当归微囊、薏苡仁微囊分别由相应的当归、薏苡仁依次经过超临界萃取、乳化并与壁材均质、喷雾干燥而获得。
优选地,所述酪蛋白肽、小麦低聚肽中分子量小于1000D的低聚肽成分占95%以上,以有效提高机体对酪蛋白肽、小麦低聚肽的吸收利用率,达到无需消化或稍加消化即能吸收的效果;所述当归微囊、薏苡仁微囊中功效成分的包埋率为90%以上,粒径为 1~300μm,以使所得的当归、薏苡仁微囊具有良好的溶解性,对光、热均具有良好的稳定性。
一种具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)将酪蛋白粉、谷朊粉 分别经调浆、酶解、灭酶、离心分离、膜过滤、离子交换、真空浓缩、灭菌、喷雾干燥得到所需的酪蛋白肽粉、小麦低聚肽粉,该酪蛋白肽粉及小麦低聚肽粉中分子量小于1000D的低聚肽成分占95%以上;
(2)将淡竹叶、熟地、山茱萸分别经过动态逆流提取,得到的提取液分别经过离心分离、减压浓缩、喷雾干燥最终得到所述的淡竹叶提取物、熟地提取物及山茱萸提取物;
(3)将当归、薏苡仁分别经过切片或粗粉前处理后,分别投入超临界CO2萃取装置中进行CO2超临界萃取,所得萃取物经过乳化,与壁材溶液混合均质处理,喷雾干燥后即得所需的当归微囊、薏苡仁微囊;
(4)按照配方将上述制得的相应质量份数的酪蛋白肽粉、小麦低聚肽粉、淡竹叶提取物、熟地提取物、山茱萸提取物以及低聚木糖、菊粉混合均匀得到混合物,再将该混合物加入到上述制备的当归微囊及薏苡仁微囊中,混合均匀,即得所述的中药复合肽组合物。
所述酪蛋白肽粉、小麦低聚肽粉的制备方法如下:
(a)调浆:将酪蛋白或谷朊粉 用纯净水配制成蛋白分散液,调节蛋白分散液的pH至 7~9之间;
(b)酶解:谷朊粉 蛋白分散液加热并使其温度保持在40~50℃之间,接着在该蛋白分散液中分别加入中性蛋白酶和木瓜蛋白酶,搅拌均匀后酶解2h~4h,其中中性蛋白酶加入的量为底物含量的0.2%~0.5%,木瓜蛋白酶的加入量是底物含量0.1%~0.3%,酶解结束后进行高温灭酶;
酪蛋白分散液加热并使其温度保持在36~38℃之间,接着在该蛋白分散液中分别加入胰蛋白酶和木瓜蛋白酶,搅拌均匀后酶解2h~4h,其中胰蛋白酶加入的量为底物含量的0.3%~0.5%,木瓜蛋白酶的加入量是底物含量0.2%~0.3%,酶解结束后进行高温灭酶;
(c)离心过滤:将灭酶后的酶解液进行离心去杂,保持12000~16000r/min的离心转速,蠕动泵上料速度1.5~3.5L/min,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤,滤膜厚度为90~150μm,过滤的粒径为4~8μm,操作压力为0.01~0.2MPa,确保滤液澄清透明,去除滤渣;
(d)离子交换:将离心过滤后的滤液经过离子交换柱及活性炭柱,进行脱盐脱色处理;
(e)真空浓缩:将离子交换后的溶液依次进行真空浓缩,浓缩温度65~85℃,真空度-0.05~-0.08Mpa,得肽浓缩液,相对密度控制在1.03~1.08之间;
(f)喷雾干燥:将上述肽浓缩液进行喷雾干燥,工艺参数为喷口温度165~185℃,出口温度80-95℃,上料速度1.5~3.5L/min,得到所述的酪蛋白肽粉或小麦低聚肽粉。
所述淡竹叶提取物、熟地提取物、山茱萸提取物均可通过以下步骤获得:
(a)取粉碎过的淡竹叶或熟地或山茱萸,加入物料体积8~10倍的水,于90~100℃下动态逆流提取,得到提取液;
(b)离心分离:将提取液进行离心分离,获得澄清液;
(c)减压浓缩:将澄清液进行减压浓缩,浓缩温度控制在60~80℃,真空度控制在-0.05~-0.08Mpa,相对密度控制在1.03~1.08之间,获得浸膏;
(d)喷雾干燥:将浸膏灭菌过滤后喷雾干燥,工艺参数为喷口温度170~190℃,出口温度85-95℃,上料速度1.0~2.0L/min,得到淡竹叶提取物或熟地提取物或山茱萸提取物。
所述薏苡仁微囊的制备方法如下:
(a)将薏苡仁粗粉后用CO2超临界萃取法提取,萃取温度38~46℃,萃取压力25~40Mpa,CO2流量8~12kg/h,萃取时间160~200min,得到薏苡仁萃取物;
(b)称取适量的麦芽糊精和γ—环状糊精,在80℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和γ—环状糊精的总质量分数为3~8%,且麦芽糊精和γ—环状糊精的质量比为1:1~5;
(c)将薏苡仁萃取物加入含蔗糖酯和磷脂的10%乙醇溶液中,其中蔗糖酯与磷脂比例为1:1~5,蔗糖酯与磷脂在乙醇溶液中的总质量分数为1~3%,配制成质量分数为5%~10%的薏苡仁乳化液;
(d)将步骤(c)制得的薏苡仁乳化液倒入步骤(b)制得的壁材溶液中,其中薏苡仁乳化液与壁材溶液的体积比为0.8~1:1,于50℃下进行乳化均质处理,制得初产品;
(e)将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为170~185℃,出口温度为85~95℃,上料速度0.5~1.5L/min,制得所需的薏苡仁微囊成品。
所述当归微囊的制备方法如下:
(a)将当归切片后用CO2超临界萃取法提取,萃取温度35~50℃,萃取压力25~40Mpa,CO2流量8~12kg/h,萃取时间150~200min,得到当归萃取物;
(b)称取适量的阿拉伯胶和大豆分离蛋白,在65℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中阿拉伯胶和大豆分离蛋白的总质量分数为0.5~1%,且阿拉伯胶和大豆分离蛋白的质量比为1:1~9;
(c)将当归萃取物加入含蔗糖酯和磷脂的10%乙醇溶液中,其中蔗糖酯与磷脂比例为1:1~5,蔗糖酯与磷脂在乙醇溶液中的总质量分数为1.5~3.5%,配制成质量分数为3.5%~4.0%的当归乳化液;
(d)将步骤(c)制得的当归乳化液倒入步骤(b)制得的壁材溶液中,其中当归乳化液与壁材溶液的体积比为0.8~1:1,于50℃下进行乳化均质处理,调节pH至4.2~6.5,反应时间5~20min,制得初产品;
(e)将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为120~190℃,出口温度为85~95℃,上料速度0.5~1.5L/min,制得所需的当归微囊成品。
本发明中当归微囊的制备方法中,传统壁材如阿拉伯胶和麦芽糊精等缺乏乳化性和成膜性而不能单独作为壁材,而乳蛋白,包括乳清蛋白、酪蛋白本身及与其不同糖类的混合体,虽然表现出较好的包埋特性,但其高成本限制了市场消费,本发明选择阿拉伯胶和大豆分离蛋白作为壁材,可起到很好的包埋作用,且成本低。
优选地,所述的中药复合肽组合物能通过制剂技术制备成口服液、片剂、硬胶囊剂、粉剂、软胶囊剂中的任意一种剂型。
与现有技术相比,本发明的优点在于:
(1)本发明中淡竹叶消炎清热解毒、利尿通淋、防治胃热呕哕;熟地补血养阴,填精益髓,改善胃肠道功能;山茱萸补血固精、调气补虚、修复胃肠道粘膜;酪蛋白肽及小麦低聚肽调节血糖血压、增强免疫力、促进胃肠道粘膜修复;当归及薏苡仁通经活络、消炎镇痛、润燥滑肠、健脾止泻、增强免疫力;而低聚木糖和菊粉作为益生元及膳食纤维,在改善调节肠道微生态,改善胃肠道功能方面效果显著;本发明中的各组分配伍可起到相互促进、协同增效的作用,从而很好地改善胃肠道功能;
(2)本发明针对现有技术药物食用量较多的状况,将当归、薏苡仁经过超临界CO2萃取并包埋制成微囊,将淡竹叶、熟地、山茱萸等中药经过前处理、提取浓缩、喷雾干燥制成提取物,最大程度地保留了药物的主要功效成分,食用量显著下降的同时极大地提高了药物的生物利用度,显著提升了药效,降低了消费者对饮药的厌恶心理,从而真正实现改善胃肠道的功能。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
一、表1为按照重量份数计,实施例中具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物配方。
表1
淡竹叶提取物 | 5 |
熟地提取物 | 4 |
山茱萸提取物 | 4 |
当归微囊 | 6 |
薏苡仁微囊 | 6 |
酪蛋白肽 | 8 |
小麦低聚肽 | 10 |
低聚木糖 | 8 |
菊粉 | 1 |
二、以下为具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物的制备方法。
本实施例具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)将酪蛋白粉、谷朊粉 分别经调浆、酶解、灭酶、离心分离、膜过滤、离子交换、真空浓缩、灭菌、喷雾干燥得到所需的酪蛋白肽粉、小麦低聚肽粉,该酪蛋白肽粉及小麦低聚肽粉中分子量小于1000D的低聚肽成分占95%以上;具体的,酪蛋白肽粉、小麦低聚肽粉的制备方法如下:
(a)调浆:将酪蛋白或谷朊粉 用纯净水配制成蛋白分散液,调节蛋白分散液的pH至 7~9之间;
(b)酶解:谷朊粉 蛋白分散液加热并使其温度保持在40℃之间,接着在该蛋白分散液中分别加入中性蛋白酶和木瓜蛋白酶,搅拌均匀后酶解2h,其中中性蛋白酶加入的量为底物含量的0.2%,木瓜蛋白酶的加入量是底物含量0.1%,酶解结束后进行高温灭酶;
酪蛋白分散液加热并使其温度保持在36℃之间,接着在该蛋白分散液中分别加入胰蛋白酶和木瓜蛋白酶,搅拌均匀后酶解2h,其中胰蛋白酶加入的量为底物含量的0.3%,木瓜蛋白酶的加入量是底物含量0.2%,酶解结束后进行高温灭酶;
(c)离心过滤:将灭酶后的酶解液进行离心去杂,保持12000r/min的离心转速,蠕动泵上料速度1.5L/min,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤,滤膜厚度为90μm,过滤的粒径为4μm,操作压力为0.01MPa,确保滤液澄清透明,去除滤渣;
(d)离子交换:将离心过滤后的滤液经过离子交换柱及活性炭柱,进行脱盐脱色处理;
(e)真空浓缩:将离子交换后的溶液依次进行真空浓缩,浓缩温度65℃,真空度 -0.05Mpa,得肽浓缩液,相对密度控制在1.03;
(f)喷雾干燥:将上述肽浓缩液进行喷雾干燥,工艺参数为喷口温度165℃,出口温度80℃,上料速度1.5L/min,得到所述的酪蛋白肽粉或小麦低聚肽粉。
下表2为本实施例制备的小麦低聚肽的主要组分的相对分子质量分布与含量,由表 2可以看出,本实施例所制备的小麦低聚肽中分子量在1000D以下的占到95%以上,达到了不需要消化或稍加消化即可吸收的程度,具有很高的吸收效率。下表3为本实施例所制备的小麦低聚肽中氨基酸组成,由表3可见,本实施例所制备的小麦低聚肽中谷氨酸、脯氨酸的含量较多。
表2
表3
小麦低聚肽相对于谷朊粉 来说,分子量大幅降低,溶解性改善、吸收率大幅提高,去除了蛋白质的过敏原,有利于其改善胃肠道功能的发挥。
下表4为本实施例制备的酪蛋白肽的主要组分的相对分子质量分布与含量,由表4可以看出,本实施例所制备的小麦低聚肽中分子量在1000D以下的占到95%以上,达到了不需要消化或稍加消化即可吸收的程度,具有很高的吸收效率。下表5为本实施例所制备的酪蛋白肽中氨基酸组成,由表5可见,本实施例所制备的酪蛋白肽中谷氨酸、胱氨酸、脯氨酸的含量较多。
表4
表5
酪蛋白肽相对于酪蛋白来说,分子量大幅降低,溶解性改善、吸收率大幅提高,去除了蛋白质的过敏原,有利于其改善胃肠道功能的发挥。
(2)将淡竹叶、熟地、山茱萸分别经过动态逆流提取,得到的提取液分别经过离心分离、减压浓缩、喷雾干燥最终得到所述的淡竹叶提取物、熟地提取物及山茱萸提取物;具体的,淡竹叶提取物、熟地提取物、山茱萸提取物均可通过以下步骤获得:
(a)取粉碎过的淡竹叶或熟地或山茱萸,加入物料体积8倍的水,于90℃下动态逆流提取,得到提取液;
(b)离心分离:将提取液进行离心分离,获得澄清液;
(c)减压浓缩:将澄清液进行减压浓缩,浓缩温度控制在60℃,真空度控制在 -0.05Mpa,相对密度控制在1.03,获得浸膏;
(d)喷雾干燥:将浸膏灭菌过滤后喷雾干燥,工艺参数为喷口温度170℃,出口温度85℃,上料速度1.0L/min,得到淡竹叶提取物或熟地提取物或山茱萸提取物。
(3)将当归、薏苡仁分别经过切片或粗粉前处理后,分别投入超临界CO2萃取装置中进行CO2超临界萃取,所得萃取物经过乳化,与壁材溶液混合均质处理,喷雾干燥后即得所需的当归微囊、薏苡仁微囊;具体的,薏苡仁微囊的制备方法如下:
(a)将薏苡仁粗粉后用CO2超临界萃取法提取,萃取温度38℃,萃取压力25Mpa, CO2流量8kg/h,萃取时间160min,得到薏苡仁萃取物;
(b)称取适量的麦芽糊精和γ—环状糊精,在80℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和γ—环状糊精的总质量分数为3%,且麦芽糊精和γ—环状糊精的质量比为1:1;
(c)将薏苡仁萃取物加入含蔗糖酯和磷脂的10%乙醇溶液中,其中蔗糖酯与磷脂比例为1:1,蔗糖酯与磷脂在乙醇溶液中的总质量分数为1%,配制成质量分数为5%的薏苡仁乳化液;
(d)将步骤(c)制得的薏苡仁乳化液倒入步骤(b)制得的壁材溶液中,其中薏苡仁乳化液与壁材溶液的体积比为0.8:1,于50℃下进行乳化均质处理,制得初产品;
(e)将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为170℃,出口温度为85℃,上料速度0.5L/min,制得所需的薏苡仁微囊成品。
当归微囊的制备方法如下:(a)将当归切片后用CO2超临界萃取法提取,萃取温度35℃,萃取压力25Mpa,CO2流量8kg/h,萃取时间150min,得到当归萃取物;
(b)称取适量的阿拉伯胶和大豆分离蛋白,在65℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中阿拉伯胶和大豆分离蛋白的总质量分数为0.5%,且阿拉伯胶和大豆分离蛋白的质量比为1:1;
(c)将当归萃取物加入含蔗糖酯和磷脂的10%乙醇溶液中,其中蔗糖酯与磷脂比例为1:1,蔗糖酯与磷脂在乙醇溶液中的总质量分数为1.5%,配制成质量分数为3.5%的当归乳化液;
(d)将步骤(c)制得的当归乳化液倒入步骤(b)制得的壁材溶液中,其中当归乳化液与壁材溶液的体积比为0.8:1,于50℃下进行乳化均质处理,调节pH至4.2,反应时间5min,制得初产品;
(e)将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为120℃,出口温度为85℃,上料速度0.5L/min,制得所需的当归微囊成品。
(4)按照配方将上述制得的相应质量份数的酪蛋白肽粉、小麦低聚肽粉、淡竹叶提取物、熟地提取物、山茱萸提取物以及低聚木糖、菊粉混合均匀得混合物,再将该混合物加入到上述制备的当归微囊及薏苡仁微囊中,混合均匀,即得中药复合肽组合物。
以下为本实施例所制备的中药复合肽组合物的临床试验数据:
1.1本发明中药复合肽组合物对烫伤后大鼠肠道黏膜损伤的影响
动物分组与药物剂量:如表6所示,健康雄性SD大鼠66只,体重200-250g共48 只,随机分为:对照组(麻醉、背部剃毛并浸于37℃水)、模型组(麻醉、背部剃毛并浸于沸水中造模)、中药复合肽组合物高剂量组和低剂量组(本发明中药复合肽组合物灌胃,造模同模型组)共4组,每组12只。手术前12小时禁食不禁水,手术前6小时按大鼠体重灌胃相应溶液。
表6灌胃药物及剂量
动物造模:用盐酸氯氨酮注射液80mg/kg腹腔注射麻醉,背部剃毛。将大鼠背部浸泡于沸水12s,造成30%总体表面积(TBSA)Ⅲ度烫伤,烫伤后立即腹腔注射生理盐水0.4mL/10g进行液体复苏,放回笼中自由饮食。
各指标检测:造模24小时后,进行各指标检测。进行血浆中LPS及TNF-α浓度检测,肠黏膜Chiu’s损伤评分操作。检测结果如表7所示。
表7实验各组肠黏膜损伤Chiu’s评分、血浆中LPS、TNF-α浓度
与对照组对照,*:p<0.05,**:p<0.01;与模型组对照,Δ:p<0.05;ΔΔ:p<0.01。
实验结果显示,烫伤引发的应急反应对SD大鼠肠黏膜产生明显损伤,内毒素移位导致血浆中内毒素浓度升高,并导致肿瘤细胞坏死因子TNF-α浓度提高。本发明中药复合肽组合物可明显减轻烫伤对肠黏膜造成的损伤,降低血液中内毒素的浓度和前炎症性细胞因子TNF-α浓度。上述数据显示,与模型组对照,损伤评分有显著下降,从而反映出本发明中药复合肽组合物对肠道黏膜损伤具有明显的修复作用。
1.2本发明中药复合肽组合物对小鼠肠道菌群的影响
动物分组与药物剂量:50只BALB/c小鼠,按照体重将小鼠随机分成正常对照组、0.6g/kg剂量组、1.0g/kg剂量组、2.0g/kg剂量组共4组,药物为本发明中药复合肽组合物。每组10只小鼠。给予受试物前及14d后,无菌采取小鼠粪便(约0.1g),进行肠道双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌、肠杆菌的检测,菌群数量以菌落形成单位的对数值表示。采用SPSS统计软件对各组数据进行方差齐性分析,满足方差齐性要求之后对受试组数据与对照组数据进行两两比较分析,以P<0.05作为差异显著性判定标准。
表8摄入中药复合肽组合物前后动物肠道菌群的变化(1g cfu/g)
注:a表示实验前后对比差异有显著性,p<0.05;b表示与正常组对比差异有显著性, p<0.05。
从表8可以看出,与实验前比较,正常对照组小鼠肠道内的双歧杆菌和乳杆菌数量对数值在实验前后未出现显著变化(p>0.05)。在摄入本发明中药复合肽组合物14d后,小鼠肠道内的双歧杆菌与乳杆菌数量对数值较实验前明显增加(p<0.01)。与正常对照组相比,摄入中药复合肽组合物14d后小鼠肠道内双歧杆菌及乳杆菌数量对数值均显著高于正常对照组(p<0.01),肠杆菌和肠球菌的数量对数值未见显著性变化。实验前后各组小鼠肠道内的肠杆菌数量对数值未有显著性变化(p>0.05),小鼠肠道内肠球菌数量对数值较实验前增加,但其增加幅度远远低于双歧杆菌及乳杆菌增加幅度。
本发明中药复合肽组合物的摄入促进了小鼠的肠道双歧杆菌、乳杆菌的增殖,进而可以推论摄入中药复合肽组合物对于改善机体肠道具有积极作用,可以认为中药复合肽组合物具有调节肠道菌群的功能。
以上所述仅为本发明的优选实施例,并非因此限制本发明的专利范围,凡是利用本发明权利要求书内容所作的等效结构或流程变换,或在不脱离本发明原理的前提下做出的若干改进和润饰,或直接或间接运用在其他相关的技术领域,均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (3)
1.一种具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物,其特征在于:按重量份数计,采用以下原料组分进行制备:
淡竹叶提取物 5~13份,
熟地提取物 4~10份,
山茱萸提取物 4~10份,
当归微囊 6~14份,
薏苡仁微囊 6~14份,
酪蛋白肽 8~16份,
小麦低聚肽 10~20份,
低聚木糖 8~12份,
菊粉 1~13份;
上述组合物由以下方法获得:
(1)将酪蛋白粉、谷朊 粉分别经调浆、酶解、灭酶、离心分离、膜过滤、离子交换、真空浓缩、灭菌、喷雾干燥得到所需的酪蛋白肽粉、小麦低聚肽粉,该酪蛋白肽粉及小麦低聚肽粉中分子量小于1000D的低聚肽成分占95%以上;
(2)将淡竹叶、熟地、山茱萸分别经过动态逆流提取,得到的提取液分别经过离心分离、减压浓缩、喷雾干燥最终得到所述的淡竹叶提取物、熟地提取物及山茱萸提取物;
(3)将当归、薏苡仁分别经过切片或粗粉前处理后,分别投入超临界CO2萃取装置中进行CO2超临界萃取,所得萃取物经过乳化,与壁材溶液混合均质处理,喷雾干燥后即得所需的当归微囊、薏苡仁微囊;
(4)按照配方将上述制得的相应质量份数的酪蛋白肽粉、小麦低聚肽粉、淡竹叶提取物、熟地提取物、山茱萸提取物以及低聚木糖、菊粉混合均匀得混合物,再将该混合物加入到上述制备的当归微囊及薏苡仁微囊中,混合均匀,即得所述的中药复合肽组合物;
所述酪蛋白肽粉、小麦低聚肽粉的制备方法如下:
(a)调浆:将酪蛋白或谷朊粉 用纯净水配制成蛋白分散液,调节蛋白分散液的pH至7~9之间;
(b)酶解:谷朊粉 蛋白分散液加热并使其温度保持在40~50℃之间,接着在该蛋白分散液中分别加入中性蛋白酶和木瓜蛋白酶,搅拌均匀后酶解2h~4h,其中中性蛋白酶加入的量为底物含量的0.2%~0.5%,木瓜蛋白酶的加入量是底物含量0.1%~0.3%,酶解结束后进行高温灭酶;
酪蛋白分散液加热并使其温度保持在36~38℃之间,接着在该蛋白分散液中分别加入胰蛋白酶和木瓜蛋白酶,搅拌均匀后酶解2h~4h,其中胰蛋白酶加入的量为底物含量的0.3%~0.5%,木瓜蛋白酶的加入量是底物含量0.2%~0.3%,酶解结束后进行高温灭酶;
(c)离心过滤:将灭酶后的酶解液进行离心去杂,保持12000~16000r/min的离心转速,蠕动泵上料速度1.5~3.5L/min,收集清液,启动膜过滤设备,清液经过微孔滤膜过滤,滤膜厚度为90~150μm,过滤的粒径为4~8μm,操作压力为0.01~0.2MPa,确保滤液澄清透明,去除滤渣;
(d)离子交换:将离心过滤后的滤液经过离子交换柱及活性炭柱,进行脱盐脱色处理;
(e)真空浓缩:将离子交换后的溶液依次进行真空浓缩,浓缩温度65~85℃,真空度-0.05~-0.08Mpa,得肽浓缩液,相对密度控制在1.03~1.08之间;
(f)喷雾干燥:将上述肽浓缩液进行喷雾干燥,工艺参数为喷口温度165~185℃,出口温度80-95℃,上料速度1.5~3.5L/min,得到所述的酪蛋白肽粉或小麦低聚肽粉;
所述淡竹叶提取物、熟地提取物、山茱萸提取物均可通过以下步骤获得:
(a)取粉碎过的淡竹叶或熟地或山茱萸,加入物料体积8~10倍的水,于90~100℃下动态逆流提取,得到提取液;
(b)离心分离:将提取液进行离心分离,获得澄清液;
(c)减压浓缩:将澄清液进行减压浓缩,浓缩温度控制在60~80℃,真空度控制在-0.05~-0.08Mpa,相对密度控制在1.03~1.08之间,获得浸膏;
(d)喷雾干燥:将浸膏灭菌过滤后喷雾干燥,工艺参数为喷口温度170~190℃,出口温度85-95℃,上料速度1.0~2.0L/min,得到淡竹叶提取物或熟地提取物或山茱萸提取物;
所述薏苡仁微囊的制备方法如下:
(a)将薏苡仁粗粉后用CO2超临界萃取法提取,萃取温度38~46℃,萃取压力25~40Mpa,CO2流量8~12kg/h,萃取时间160~200min,得到薏苡仁萃取物;
(b)称取适量的麦芽糊精和γ—环状糊精,在80℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中麦芽糊精和γ—环状糊精的总质量分数为3~8%,且麦芽糊精和γ—环状糊精的质量比为1:1~5;
(c)将薏苡仁萃取物加入含蔗糖酯和磷脂的10%乙醇溶液中,其中蔗糖酯与磷脂比例为1:1~5,蔗糖酯与磷脂在乙醇溶液中的总质量分数为1~3%,配制成质量分数为5%~10%的薏苡仁乳化液;
(d)将步骤(c)制得的薏苡仁乳化液倒入步骤(b)制得的壁材溶液中,其中薏苡仁乳化液与壁材溶液的体积比为0.8~1:1,于50℃下进行乳化均质处理,制得初产品;
(e)将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为170~185℃,出口温度为85~95℃,上料速度0.5~1.5L/min,制得所需的薏苡仁微囊成品;
所述当归微囊的制备方法如下:
(a)将当归切片后用CO2超临界萃取法提取,萃取温度35~50℃,萃取压力25~40Mpa,CO2流量8~12kg/h,萃取时间150~200min,得到当归萃取物;
(b)称取适量的阿拉伯胶和大豆分离蛋白,在65℃热水中搅拌使其溶解,得到壁材溶液,该壁材溶液中阿拉伯胶和大豆分离蛋白的总质量分数为0.5~1%,且阿拉伯胶和大豆分离蛋白的质量比为1:1~9;
(c)将当归萃取物加入含蔗糖酯和磷脂的10%乙醇溶液中,其中蔗糖酯与磷脂比例为1:1~5,蔗糖酯与磷脂在乙醇溶液中的总质量分数为1.5~3.5%,配制成质量分数为3.5%~4.0%的当归乳化液;
(d)将步骤(c)制得的当归乳化液倒入步骤(b)制得的壁材溶液中,其中当归乳化液与壁材溶液的体积比为0.8~1:1,于50℃下进行乳化均质处理,调节pH至4.2~6.5,反应时间5~20min,制得初产品;
(e)将上述制得的初产品进行喷雾干燥,其中喷雾干燥的进口温度为120~190℃,出口温度为85~95℃,上料速度0.5~1.5L/min,制得所需的当归微囊成品。
2.根据权利要求1所述的具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物,其特征在于:所述当归微囊、薏苡仁微囊中功效成分的包埋率为90%以上,粒径为1~300μm。
3.一种权利要求1或2所述具有改善胃肠道功能的中药复合肽组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)将酪蛋白粉、谷朊粉 分别经调浆、酶解、灭酶、离心分离、膜过滤、离子交换、真空浓缩、灭菌、喷雾干燥得到所需的酪蛋白肽粉、小麦低聚肽粉,该酪蛋白肽粉及小麦低聚肽粉中分子量小于1000D的低聚肽成分占95%以上;
(2)将淡竹叶、熟地、山茱萸分别经过动态逆流提取,得到的提取液分别经过离心分离、减压浓缩、喷雾干燥最终得到所述的淡竹叶提取物、熟地提取物及山茱萸提取物;
(3)将当归、薏苡仁分别经过切片或粗粉前处理后,分别投入超临界CO2萃取装置中进行CO2超临界萃取,所得萃取物经过乳化,与壁材溶液混合均质处理,喷雾干燥后即得所需的当归微囊、薏苡仁微囊;
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