CN116063263A - 一种槲皮素苯丙烯酸酯及其制备方法和用途 - Google Patents
一种槲皮素苯丙烯酸酯及其制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116063263A CN116063263A CN202211515642.6A CN202211515642A CN116063263A CN 116063263 A CN116063263 A CN 116063263A CN 202211515642 A CN202211515642 A CN 202211515642A CN 116063263 A CN116063263 A CN 116063263A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- quercetin
- ococh
- preparation
- phenylacrylate
- iii
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N quercetin Natural products C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 159
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 81
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 81
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 81
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 title claims abstract description 81
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 title claims abstract description 81
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 40
- -1 Quercetin benzene acrylic ester Chemical class 0.000 title claims description 40
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N monobenzene Natural products C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 title description 8
- WRAQQYDMVSCOTE-UHFFFAOYSA-N phenyl prop-2-enoate Chemical compound C=CC(=O)OC1=CC=CC=C1 WRAQQYDMVSCOTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 claims abstract description 15
- 201000004810 Vascular dementia Diseases 0.000 claims abstract description 12
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 66
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 42
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical class CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 29
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 27
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 26
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 23
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 15
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 14
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims description 12
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 12
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 11
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 claims description 11
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims description 11
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 9
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 9
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 7
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 7
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 7
- DAFAZBBQRXHSLF-UHFFFAOYSA-N 1-phenylethanone;prop-2-enoic acid Chemical class OC(=O)C=C.CC(=O)C1=CC=CC=C1 DAFAZBBQRXHSLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 6
- 239000000376 reactant Substances 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 5
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-N trans-cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-N 0.000 claims description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- QAGQGVIUPYTPQF-UHFFFAOYSA-N C(C=C)(=O)Cl.C1=CC=CC=C1 Chemical compound C(C=C)(=O)Cl.C1=CC=CC=C1 QAGQGVIUPYTPQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 claims description 2
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 claims description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;ethyl acetate Chemical compound CCOCC.CCOC(C)=O SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 2
- 150000005419 hydroxybenzoic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims 2
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 abstract description 5
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 abstract description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 2
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 63
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 36
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 34
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 30
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 22
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 21
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 21
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 18
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 15
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 13
- NGSWKAQJJWESNS-UHFFFAOYSA-N 4-coumaric acid Chemical compound OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C=C1 NGSWKAQJJWESNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 12
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 11
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 10
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 9
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 8
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 8
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 8
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 8
- PCMORTLOPMLEFB-ONEGZZNKSA-N sinapic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC(OC)=C1O PCMORTLOPMLEFB-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 8
- 238000012549 training Methods 0.000 description 8
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 description 8
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 8
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 7
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 7
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 7
- 230000007971 neurological deficit Effects 0.000 description 7
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 7
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- PCMORTLOPMLEFB-UHFFFAOYSA-N sinapinic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC(OC)=C1O PCMORTLOPMLEFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M (E)-Ferulic acid Natural products COC1=CC(\C=C\C([O-])=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M 0.000 description 4
- IHKNVZISLLDMOR-UHFFFAOYSA-N O-Acetylferulic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC=C1OC(C)=O IHKNVZISLLDMOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 description 4
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 description 4
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N ferulic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N 0.000 description 4
- 229940114124 ferulic acid Drugs 0.000 description 4
- 235000001785 ferulic acid Nutrition 0.000 description 4
- KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N ferulic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 4
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N trans-isoferulic acid Natural products COC1=CC=C(C=CC(O)=O)C=C1O QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003936 working memory Effects 0.000 description 4
- YIYOJQBUCDIGON-XBXARRHUSA-N (2E)-2-[(3,4-dihydroxyphenyl)methylidene]-3-oxobutanoic acid Chemical compound CC(=O)C(\C(O)=O)=C/C1=CC=C(O)C(O)=C1 YIYOJQBUCDIGON-XBXARRHUSA-N 0.000 description 3
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IHKNVZISLLDMOR-GQCTYLIASA-N O-acetylferulic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC=C1OC(C)=O IHKNVZISLLDMOR-GQCTYLIASA-N 0.000 description 3
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 3
- 210000001168 carotid artery common Anatomy 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 2
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 2
- 230000008809 cell oxidative stress Effects 0.000 description 2
- 229940114081 cinnamate Drugs 0.000 description 2
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 2
- 229940114123 ferulate Drugs 0.000 description 2
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N pyrogallol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1O WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 2
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 2
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 2
- 230000006886 spatial memory Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- CPDDDTNAMBSPRN-ZZXKWVIFSA-N (e)-3-(4-bromophenyl)prop-2-enoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(Br)C=C1 CPDDDTNAMBSPRN-ZZXKWVIFSA-N 0.000 description 1
- WOGITNXCNOTRLK-VOTSOKGWSA-N (e)-3-phenylprop-2-enoyl chloride Chemical compound ClC(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WOGITNXCNOTRLK-VOTSOKGWSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YLABICHHIYWLQM-UHFFFAOYSA-N 3-(4-bromophenyl)prop-2-enoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C=CC1=CC=C(Br)C=C1 YLABICHHIYWLQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZFOVCSTVYYYRSU-UHFFFAOYSA-N 3-(4-chlorophenyl)prop-2-enoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C=CC1=CC=C(Cl)C=C1 ZFOVCSTVYYYRSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 241001553178 Arachis glabrata Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 206010065384 Cerebral hypoperfusion Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- 208000030451 Vascular dementia disease Diseases 0.000 description 1
- 108010093894 Xanthine oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100033220 Xanthine oxidase Human genes 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000004227 basal ganglia Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001851 cinnamic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 1
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 1
- 210000003618 cortical neuron Anatomy 0.000 description 1
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 238000009513 drug distribution Methods 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 229940035535 iodophors Drugs 0.000 description 1
- 230000013016 learning Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007087 memory ability Effects 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 125000004309 pyranyl group Chemical group O1C(C=CC=C1)* 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000036186 satiety Effects 0.000 description 1
- 235000019627 satiety Nutrition 0.000 description 1
- 238000013077 scoring method Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000007596 spatial working memory Effects 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 238000010025 steaming Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 230000002889 sympathetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000008736 traumatic injury Effects 0.000 description 1
- 230000001515 vagal effect Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
- C07D311/22—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4
- C07D311/26—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3
- C07D311/28—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3 with aromatic rings attached in position 2 only
- C07D311/30—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3 with aromatic rings attached in position 2 only not hydrogenated in the hetero ring, e.g. flavones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种槲皮素苯丙烯酸酯及其制备方法和用途，其中槲皮素苯丙烯酸酯的结构式如下式(Ⅰ)、式(Ⅱ)、式(Ⅲ)所示：
其中：R1选自H、CH3O、OCOCH3、Br或Cl；R2选自H、OCOCH3、Br或Cl；R3选自H或CH3O。本发明槲皮素苯丙烯酸酯有助于改善缺血性脑血管疾病、血管性痴呆的神经功能评分，缓解氧化应激水平，拓宽了槲皮素在脑血管疾病、血管性痴呆等神经退行性疾病防治方面的用途。
Description
技术领域
本发明涉及一种槲皮素苯丙烯酸酯及其制备方法和用途。本发明槲皮素苯丙烯酸酯能够有效缓解神经元氧化应激损伤，改善血管性痴呆、帕金森和阿尔兹海默症。
背景技术
氧化应激(Oxidative Stress，OS)是指体内氧化与抗氧化作用失衡的一种状态，倾向于氧化，导致中性粒细胞炎性浸润，蛋白酶分泌增加，产生大量氧化中间产物。氧化应激是由自由基在体内产生的一种负面作用，并被认为是导致衰老和疾病的一个重要因素，它与脑血管疾病、血管性痴呆等一系列神经退行性疾病的发生有关。在血管性痴呆的发病原因中，有一种原因即为神经元发生氧化应激损伤导致的损伤、凋亡和缺失，基底神经节、白质、重要脑区产生明显损害，逐渐出现认知功能障碍。为此，缓解神经元氧化损伤、保护神经元细胞活性也为神经退行性疾病的防治提供一种策略。
槲皮素(Ⅳ)是一种天然存在的多酚类黄酮化合物，通常与糖或有机酸酯形式联系在一起。越来越多的证据表明，槲皮素在预防和治疗心脑血管疾病、癌症方面具有巨大的治疗潜力[Sci Rep 2017,7,7543；J Funct Foods 2018,40,68-75.]。
一些研究报道了槲皮素的神经保护作用，包括神经退行性疾病的体外和体内模型，如认知障碍、创伤性损伤、帕金森病(PD)和亨廷顿病(HD)[Bba-MolBasisDis2013,1832,421-430.]。槲皮素通过维持动态的氧化平衡显示出很强的抗氧化活性。然而，槲皮素β吡喃环羰基空间位阻的影响，只能在空间上形成较大的共轭体系，从而形成非平面结构[Molecules 2014,19,2226-2237.]，非平面结构的晶格排列致密而刚性，3位和5位羟基与4位羰基形成分子内氢键，导致分子间作力更大，这使其在脂质和水中的溶解度变差，影响槲皮素的生物活性和药效发挥。为了获得抗氧化性能优异且适于临床使用的药物分子，对槲皮素进行结构修饰至关重要[J Med Chem 2010,53,6153-6163.]，常用的修饰基团为苯甲酸，尽管其脂溶性获得了较大改善，但抗氧化效果未有明显增加。为此，本发明通过对槲皮素酯化连接基团及酯化位置的筛选，以期在改善槲皮素脂溶性基础上，实现抗氧化效能的显著提升。
肉桂酸是一种天然存在于植物中的有机酸，其具有显著的抗氧化效果[FreeRadical Res earch 2009,36,711-716]。肉桂酸衍生物，如对羟基肉桂酸、阿魏酸、芥子酸和咖啡酸，是众所周知的抗氧化剂，具有强大的自由基清除能力[Food Chem Toxicol2015,77,12-21]，通常作为开发新的高效药物的前体化合物[Curr Med Chem 2011,18,1672-1703.]。
在槲皮素结构中引入肉桂酸及其衍生物，这些基团由于空间位阻较大，它们与槲皮素三环之间的二面角增大，破坏了原有三环的近平面结构，削弱了分子间作用力，从而提高了化合物的溶解度，改善其血脑屏障通透性。此外，肉桂酸及其衍生物也具有较强的抗氧化活性和较低的毒性，这类基团的引入有望增强槲皮素的抗氧化能力。据此，本发明主要通过肉桂酸及其衍生物等本身具有抗氧化活性分子对槲皮素进行酯化修饰得到一系列槲皮素苯丙烯酸酯。
发明内容
本发明旨在提供一种槲皮素苯丙烯酸酯及其制备方法和用途，所要解决的技术问题是遴选合适的分子结构使其具有较优的体外抗氧化活性和抑制PC12细胞氧化应激损伤，能够改善血管性痴呆小鼠氧化应激水平，且具有较好的血脑屏障穿透性。
本发明解决技术问题采用以下技术方案：
本发明槲皮素苯丙烯酸酯，其结构式如下式(Ⅰ)、式(Ⅱ)、式(Ⅲ)所示：
其中：R1选自H、CH3O、OCOCH3、Br或Cl；R2选自H、OCOCH3、Br或Cl；R3选自H或CH3O。
本发明槲皮素苯丙烯酸酯的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：羟基苯丙烯酸衍生物的乙酰化
取醋酸酐与羟基取代的苯丙烯酸衍生物A，于70℃下搅拌反应0.5h，反应液冷却结晶，除去多余的醋酸酐，粗品采用氯仿重结晶，得乙酰苯丙烯酸衍生物B；
本步骤的反应路线如下所示：
其中：
R0＝H、OH、OCOCH3、CH3O、Br或Cl；R3＝H或CH3O。
R1＝H、OCOCH3、CH3O、Br或Cl；R3＝H或OCH3。
步骤1中，当R0＝H、OCOCH3、CH3O、Br或Cl，则醋酸酐与羟基取代的苯丙烯酸衍生物A的摩尔比为4：1；
步骤1中，当R0＝OH，则醋酸酐与羟基取代的苯丙烯酸衍生物A的摩尔比为8：1。
步骤2：苯丙烯酰氯的合成
在反应瓶中加入步骤1制得的乙酰苯丙烯酸衍生物B或不含羟基取代的苯丙烯酸C，氯化亚砜和少量DMF，于60℃下搅拌反应1h，减压蒸出过量氯化亚砜，得苯丙烯酰氯中间体D；反应路线如下所示：
步骤2中，R1＝H、OCOCH3、CH3O、Br或Cl；R2'＝H、Br或Cl；R2＝H、OCOCH3、Br或Cl；R3＝H,CH3O。
步骤2中，氯化亚砜、乙酰苯丙烯酸衍生物B或不含羟基取代的苯丙烯酸C及DMF三者投料的摩尔比为4-6.5：1：0.01。
步骤3：槲皮素苯丙烯酸酯的合成
将槲皮素置于5％的NaOH水溶液中，室温搅拌30min待其全部溶解后，降温至5℃，缓缓滴入苯丙烯酰氯中间体D的丙酮溶液，滴毕，控制温度、pH继续搅拌反应2h；反应结束后，冷冻离心收集不溶物，粗品经硅胶柱层析分离纯化得到目标产物(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)。
步骤3中，反应温度控制为5～15℃，体系pH值为9.5～10.5。
步骤3中，当反应物槲皮素与苯丙烯酰氯D的摩尔投料比为1：2-4时，所得粗品经硅胶柱层析分离纯化，以石油醚-乙酸乙酯＝3：1为洗脱剂，分别得到Rf＝0.3的产物(I)和Rf＝0.25的产物(II)。
步骤3中，当反应物槲皮素与苯丙烯酰氯D的摩尔投料比为1：5-8时，产物结构式为(III)。
本步骤的反应路线如下所示：
其中：R1＝H、CH3O、OCOCH3、Br或Cl；R2＝H、OCOCH3、Br或Cl；R3＝H或CH3O。
本发明槲皮素苯丙烯酸酯的用途，是以所述槲皮素苯丙烯酸酯制备药物制剂，所述药物制剂能有效缓解神经元氧化损伤，可用于缺血性脑血管疾病、血管性痴呆氧化损伤的治疗。
本发明槲皮素苯丙烯酸酯保留了槲皮素的抗氧化性能，同时由于肉桂酸及其衍生物等抗氧化活性分子引入而强化了其对氧化应激损伤的抑制作用。此外，槲皮素苯丙烯酸酯的脂溶性改善，其血脑屏障穿透性也得以提高，能显著缓解血管性痴呆的氧化应激水平。
与已有技术相比，本发明的有益效果体现在：
与槲皮素母体分子或引入的活性分子苯丙烯酸(如阿魏酸、咖啡酸等)相比，本发明槲皮素苯丙烯酸酯的血脑屏障通透性增大，且对神经元氧化损伤的保护效果均得到明显提升；与现有报道的槲皮素苯甲酸酯相比，槲皮素苯丙烯酸酯保护PC12细胞氧化应激损伤的效果显著优于槲皮素苯甲酸酯。本发明槲皮素苯丙烯酸酯有助于改善缺血性脑血管疾病、血管性痴呆的神经功能评分，缓解氧化应激水平，拓宽了槲皮素在脑血管疾病、血管性痴呆等神经退行性疾病防治方面的用途。
具体实施方式
以下内容为本发明的具体实施例说明，旨在对本发明的技术方案作进一步的描述，但本发明包括且不限于以下实施例。
实施例1：槲皮素-肉桂酯的制备
1a、肉桂酰氯的制备
在烧瓶中加入肉桂酸12.2g(0.1mol M＝122)、氯化亚砜10ml和3滴DMF，60℃条件下回流1h，蒸除过量氯化亚砜，如果不能完全蒸除氯化亚砜，则加入适量甲苯带出氯化亚砜，抽滤得黄色结晶，真空干燥称重，产率78.0％。
1b、槲皮素-肉桂酸酯制备
称取槲皮素3.04(0.01mol M＝304)溶于5％NaOH水溶液中，室温搅拌30min全部溶解，降温至5℃；在强烈搅拌下，缓缓滴入肉桂酰氯丙酮溶液，在1h内全部滴完，控制温度5-15℃和pH在9.5-10.5继续搅拌2h，反应结束后用4℃离心30min，先后用10ml 5％HAc溶液、适量蒸馏水洗涤，洗至近中性80℃真空干燥过夜，加入10倍量丙酮，加热回流，使固体大部分溶解。趁热抽滤，滤除其中绿色杂质。溶液蒸馏浓缩至原体积的一半，室温放置过夜，抽滤得粘稠状固体物。晾干后，加入5倍量无水乙酸乙酯，80℃水浴加热回流，使沉淀溶解。趁热抽滤，滤除少量粘稠杂质。室温放置72小时，溶液中逐渐有疏松粉末状沉淀产生，抽滤，用少量乙酸乙酯洗涤。沉淀用TLC检查有无有色杂质，必要时重复重结晶过程，硅胶柱层析，洗脱剂为乙酸乙酯：石油醚＝3：1，收集Rf＝0.3左右的样品洗脱液，减压浓缩，得主要产物(Ⅰ)和(Ⅱ)，产率分别为32.1％、39.4％。产物(Ⅰ)：1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ10.78(s,1H),9.54(s,1H),7.74(d,1H),7.66(s,1H),7.61(d,2H),7.38(s,1H),7.37(s,87H),7.33(d,J＝8.3Hz,1H),7.15(s,1H),7.12(s,1H),6.92(s,1H),6.79–6.75(m,1H),6.16(d,1H)。产物(Ⅱ)：1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ12.50(s,1H),9.47(s,1H),7.68(s,1H),7.59(d,J＝6.6Hz,2H),7.44(s,1H),7.37(d,J＝6.7Hz,3H),7.35–7.30(m,2H),7.17(s,1H),6.81(s,1H),6.79(s,2H),6.63(d,J＝2.7Hz,1H),6.23(s,1H),4.88(s,1H).
实施例2：槲皮素-对羟基肉桂酯的制备
2a、乙酰对羟基肉桂酸的制备
取醋酸酐10ml和对羟基肉桂酸16.4g(0.1mol M＝164)加入烧瓶中，70℃条件下反应0.5h，待反应完全，冷却待物质析出，得白色固体乙酰对羟基肉桂酸，产率75.4％。
2b、乙酰对羟基肉桂酸酰氯的制备
在装有回流冷凝管和干燥管中加入乙酰对羟基肉桂酸0.1mol、氯化亚砜10ml和3滴DMF，60℃条件下回流1h，蒸除过量氯化亚砜，如果不能完全蒸除氯化亚砜，则加入适量甲苯带出氯化亚砜，抽滤得黄色结晶乙酰肉桂酸酰氯，真空干燥称重，产率79.4％。
2c、槲皮素-对羟基肉桂酯的制备
称取槲皮素3.04(0.01mol M＝304)溶于5％NaOH水溶液中，室温搅拌30min全部溶解，降温至5℃。在强烈搅拌下，缓缓滴入乙酰肉桂酸酰氯丙酮溶液，在1h内全部滴完。控制温度5-15℃和pH在9.5-10.5继续搅拌2h，反应结束后用4℃离心30min，先后用10ml 5％HAc溶液、适量蒸馏水洗涤，洗至近中性80℃真空干燥过夜，加入10倍量丙酮，加热回流，使固体大部分溶解。趁热抽滤，滤除其中绿色杂质。溶液蒸馏浓缩至原体积的一半，室温放置过夜，抽滤得粘稠状固体物。晾干后，加入5倍量无水乙酸乙酯，80℃水浴加热回流，使沉淀溶解。趁热抽滤，滤除少量粘稠杂质。室温放置72小时，溶液中逐渐有疏松粉末状沉淀产生，抽滤，用少量乙酸乙酯洗涤。沉淀用TLC检查有无有色杂质，必要时重复重结晶过程，硅胶柱层析，洗脱剂为乙酸乙酯：石油醚＝3：1，全部收集Rf＝0.3左右的样品洗脱液，减压浓缩，得主要产物(Ⅰ)、(Ⅱ)，产率分别为35.1％和50.7％。产物(Ⅰ)：1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ10.78(s,1H),9.54(s,1H),7.74(d,1H),7.66(s,1H),7.61(d,2H),7.38(s,1H),7.37(s,87H),7.33(d,J＝8.3Hz,41H),7.12(s,1H),6.92(s,1H),6.79–6.75(m,1H),6.16(d,1H),2.28(s,3H)，产物(Ⅱ)：1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ12.50(s,1H),9.47(s,1H),7.68(s,1H),7.59(d,J＝6.6Hz,2H),7.44(s,1H),7.37(d,J＝6.7Hz,3H),7.35–7.30(m,2H),,6.81(s,1H),6.79(s,2H),6.63(d,J＝2.7Hz,1H),6.23(s,1H),4.88(s,1H),2.28(s,3H)。
实施例3：槲皮素-阿魏酯的制备
3a、乙酰阿魏酸的制备
取醋酸酐10ml和阿魏酸19.4(0.1mol M＝194)加入一洁净、干燥配有冷凝装置的单颈烧瓶中，70℃条件下反应0.5h，待反应完全，冷却待物质析出，得白色固体乙酰阿魏酸，产率78.7％。
3b、乙酰阿魏酸酰氯的制备
在装有回流冷凝管和干燥管中加入乙酰对羟基肉桂酸0.1mol、氯化亚砜10ml和3滴DMF，60℃条件下回流1h，蒸除过量氯化亚砜，如果不能完全蒸除氯化亚砜，则加入适量甲苯带出氯化亚砜，抽滤得黄色结晶乙酰肉桂酸酰氯，真空干燥称重，产率71.2％。
3c、槲皮素-阿魏酯的制备
称取槲皮素3.04(0.01mol M＝304)溶于5％NaOH水溶液中，室温搅拌30min全部溶解，降温至5℃。在强烈搅拌下，缓缓滴入乙酰阿魏酸酰氯丙酮溶液，在1h内全部滴完。控制温度5-15℃和pH在9.5-10.5继续搅拌2h，反应结束后用4℃离心30min，先后用10ml 5％HAc溶液、适量蒸馏水洗涤，洗至近中性80℃真空干燥过夜，加入10倍量丙酮，加热回流，使固体大部分溶解。趁热抽滤，滤除其中绿色杂质。溶液蒸馏浓缩至原体积的一半，室温放置过夜，抽滤得粘稠状固体物。晾干后，加入5倍量无水乙酸乙酯，80℃水浴加热回流，使沉淀溶解。趁热抽滤，滤除少量粘稠杂质。室温放置72小时，溶液中逐渐有疏松粉末状沉淀产生，抽滤，用少量乙酸乙酯洗涤。沉淀用TLC检查有无有色杂质，必要时重复重结晶过程，硅胶柱层析，洗脱剂为乙酸乙酯：石油醚＝2：1，全部收集Rf＝0.3左右的样品洗脱液，减压浓缩，得纯产物(Ⅲ-3)，产率为55.4％。产物(Ⅲ-3)：1HNMR(DMSO)δ:8.13–8.02(m,1H),7.94(dd,J＝24.2,16.0Hz,1H),7.84(d,J＝16.0Hz,1H),7.60(t,J＝2.0Hz,2H),7.50–7.29(m,3H),7.24(ddd,J＝26.9,8.2,1.9Hz,1H),7.19–7.10(m,2H),7.09–7.05(m,1H),6.88(d,J＝49.4Hz,1H),6.82–6.77(m,1H),6.76(d,J＝2.8Hz,1H),3.95–3.74(m,6H),2.26(dd,J＝14.1,2.9Hz,6H).
实施例4：槲皮素-芥子酯的制备
4a、乙酰芥子酸的制备
取醋酸酐10ml和芥子酸22.4(0.1mol M＝224)加入一洁净、干燥配有冷凝装置的单颈烧瓶中，70℃条件下反应0.5h，待反应完全，冷却待物质析出，得白色固体乙酰芥子酸，产率70.6％。
4b、乙酰芥子酸酰氯的制备
在装有回流冷凝管和干燥管中加入乙酰对羟基肉桂酸0.1mol、氯化亚砜10ml和3滴DMF，60℃条件下回流1h，蒸除过量氯化亚砜，如果不能完全蒸除氯化亚砜，则加入适量甲苯带出氯化亚砜，抽滤得黄色结晶乙酰肉桂酸酰氯，真空干燥称重，产率69.2％。
4c、槲皮素-芥子酯的制备
称取槲皮素3.04(0.01mol M＝304)溶于5％NaOH水溶液中，室温搅拌30min全部溶解，降温至5℃。在强烈搅拌下，缓缓滴入乙酰芥子酸酰氯丙酮溶液，在1h内全部滴完。控制温度5-15℃和pH在9.5-10.5继续搅拌2h，反应结束后用4℃离心30min，先后用10ml 5％HAc溶液、适量蒸馏水洗涤，洗至近中性80℃真空干燥过夜，加入10倍量丙酮，加热回流，使固体大部分溶解。趁热抽滤，滤除其中绿色杂质。溶液蒸馏浓缩至原体积的一半，室温放置过夜，抽滤得粘稠状固体物。晾干后，加入5倍量无水乙酸乙酯，80℃水浴加热回流，使沉淀溶解。趁热抽滤，滤除少量粘稠杂质。室温放置72小时，溶液中逐渐有疏松粉末状沉淀产生，抽滤，用少量乙酸乙酯洗涤。沉淀用TLC检查有无有色杂质，必要时重复重结晶过程，硅胶柱层析，硅胶柱层析，洗脱剂乙酸乙酯：石油醚＝2：1，全部收集Rf＝0.3左右的样品洗脱液，减压浓缩，得纯产物(Ⅲ-4)，产率为52.1％。产物(Ⅲ-4)：1H NMR(DMSO)δ:7.22(td,J＝9.5,3.5Hz,3H),7.16–7.10(m,3H),7.09(s,3H),7.02(s,3H),6.56(d,J＝16.0Hz,1H),3.95–3.86(m,12H),2.25(dt,J＝11.1,3.5Hz 6H).
实施例5：槲皮素-咖啡酯的制备
5a、乙酰咖啡酸的制备
取醋酸酐10ml和咖啡酸18g(0.1mol M＝180)加入一洁净、干燥配有冷凝装置的单颈烧瓶中，70℃条件下反应0.5h，待反应完全，冷却待物质析出，得白色固体乙酰咖啡酸，产率53.1％。
5b、乙酰咖啡酸酰氯的制备
在装有回流冷凝管和干燥管中加入乙酰对羟基肉桂酸0.1mol、氯化亚砜10ml和3滴DMF，60℃条件下回流1h，蒸除过量氯化亚砜，如果不能完全蒸除氯化亚砜，则加入适量甲苯带出氯化亚砜，抽滤得黄色结晶乙酰肉桂酸酰氯，真空干燥称重，产率65.8％。
5c、槲皮素-咖啡酯的制备
称取槲皮素3.04(0.01mol M＝304)溶于5％NaOH水溶液中，室温搅拌30min全部溶解，降温至5℃。在强烈搅拌下，缓缓滴入肉桂酰氯丙酮溶液，在1h内全部滴完。控制温度5-15℃和pH在9.5-10.5继续搅拌2h，反应结束后用4℃离心30min，先后用10ml 5％HAc溶液、适量蒸馏水洗涤，洗至近中性80℃真空干燥过夜，加入10倍量丙酮，加热回流，使固体大部分溶解。趁热抽滤，滤除其中绿色杂质。溶液蒸馏浓缩至原体积的一半，室温放置过夜，抽滤得粘稠状固体物。晾干后，加入5倍量无水乙酸乙酯，80℃水浴加热回流，使沉淀溶解。趁热抽滤，滤除少量粘稠杂质。室温放置72小时，溶液中逐渐有疏松粉末状沉淀产生，抽滤，用少量乙酸乙酯洗涤。沉淀用TLC检查有无有色杂质，必要时重复重结晶过程，硅胶柱层析，硅胶柱层析，洗脱剂乙酸乙酯：石油醚＝2：1，收集Rf＝0.3左右的样品洗脱液，减压浓缩，得纯产物(Ⅲ-5)，产率为37.2％。产物(Ⅲ-5)：1HNMR(DMSO)δ:7.67(s,1H),7.64(s,1H),7.62(d,J＝2.1Hz,1H),7.60(t,J＝2.2Hz,3H),7.32(s,1H),7.31(s,1H),6.54(d,J＝0.8Hz,1H),6.52(d,J＝0.8Hz,1H),2.29(dd,J＝3.9,0.8Hz,12H).
实施例6：槲皮素-对氯肉桂酯的制备
6a、对氯肉桂酸酰氯的制备
在装有回流冷凝管和干燥管中加入乙酰对羟基肉桂酸0.1mol、氯化亚砜10ml和3滴DMF，60℃条件下回流1h，蒸除过量氯化亚砜，如果不能完全蒸除氯化亚砜，则加入适量甲苯带出氯化亚砜，抽滤得黄色结晶乙酰肉桂酸酰氯，真空干燥称重，产率78.0％。
6b、槲皮素-对氯肉桂酯的制备
称取槲皮素3.04(0.01mol M＝304)溶于5％NaOH水溶液中，室温搅拌30min全部溶解，降温至5℃。在强烈搅拌下，缓缓滴入对氯肉桂酸酰氯丙酮溶液，在1h内全部滴完。控制温度5-15℃和pH在9.5-10.5继续搅拌2h，反应结束后用4℃离心30min，先后用10ml 5％HAc溶液、适量蒸馏水洗涤，洗至近中性80℃真空干燥过夜，加入10倍量丙酮，加热回流，使固体大部分溶解。趁热抽滤，滤除其中绿色杂质。溶液蒸馏浓缩至原体积的一半，室温放置过夜，抽滤得粘稠状固体物。晾干后，加入5倍量无水乙酸乙酯，80℃水浴加热回流，使沉淀溶解。趁热抽滤，滤除少量粘稠杂质。室温放置72小时，溶液中逐渐有疏松粉末状沉淀产生，抽滤，用少量乙酸乙酯洗涤。沉淀用TLC检查有无有色杂质，必要时重复重结晶过程，硅胶柱层析，硅胶柱层析，洗脱剂乙酸乙酯：石油醚＝3：1，全部收集Rf＝0.3左右的样品洗脱液，减压浓缩，得主要产物(Ⅰ)、(Ⅱ)，产率分别为37.3％和39.3％。产物(Ⅰ)：1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ10.78(s,1H),9.54(s,1H),7.74(d,1H),7.66(s,1H),7.61(d,2H),7.38(s,1H),7.33(d,J＝8.3Hz,41H),7.15(s,1H),7.12(s,1H),6.92(s,1H),6.79–6.75(m,1H),6.16(d,1H)。产物(Ⅱ)：1HNMR(600MHz,Chloroform-d)δ12.50(s,1H),9.47(s,1H),7.68(s,1H),7.59(d,J＝6.6Hz,2H),7.44(s,1H),7.37(d,J＝6.7Hz,3H),7.35–7.30(m,2H),6.81(s,1H),6.79(s,2H),6.63(d,J＝2.7Hz,1H),6.23(s,1H),4.88(s,1H)。
实施例7：槲皮素-对溴肉桂酯的制备
7a、对溴肉桂酸酰氯的制备
在烧瓶中加入对溴肉桂酸0.1mol、氯化亚砜10ml和3滴DMF，60℃条件下回流1h，蒸除过量氯化亚砜，如果不能完全蒸除氯化亚砜，则加入适量甲苯带出氯化亚砜，抽滤得黄色结晶，真空干燥称重，产率89％。
7b、槲皮素-对溴肉桂酯的制备
称取槲皮素3.04(0.01mol M＝304)溶于5％NaOH水溶液中，室温搅拌30min全部溶解，降温至5℃。在强烈搅拌下，缓缓滴入对溴肉桂酸酰氯丙酮溶液，在1h内全部滴完。控制温度5-15℃和pH在9.5-10.5继续搅拌2h，反应结束后用4℃离心30min，先后用10ml 5％HAc溶液、适量蒸馏水洗涤，洗至近中性80℃真空干燥过夜，加入10倍量丙酮，加热回流，使固体大部分溶解。趁热抽滤，滤除其中绿色杂质。溶液蒸馏浓缩至原体积的一半，室温放置过夜，抽滤得粘稠状固体物。晾干后，加入5倍量无水乙酸乙酯，80℃水浴加热回流，使沉淀溶解。趁热抽滤，滤除少量粘稠杂质。室温放置72小时，溶液中逐渐有疏松粉末状沉淀产生，抽滤，用少量乙酸乙酯洗涤。沉淀用TLC检查有无有色杂质，必要时重复重结晶过程，硅胶柱层析，硅胶柱层析，洗脱剂乙酸乙酯：石油醚＝3：1，全部收集Rf＝0.3左右的样品洗脱液，减压浓缩，得主要产物(Ⅰ)和(Ⅱ)，产率分别为34.5％和35.4％。产物(Ⅰ)：1H NMR(600MHz,Chloroform-d)δ10.78(s,1H),9.54(s,1H),7.74(d,1H),7.66(s,1H),7.61(d,2H),7.38(s,1H),7.33(d,J＝8.3Hz,41H),7.15(s,1H),7.12(s,1H),6.92(s,1H),6.79–6.75(m,1H),6.16(d,1H)。产物(Ⅱ)：1HNMR(600MHz,Chloroform-d)δ12.50(s,1H),9.47(s,1H),7.68(s,1H),7.59(d,J＝6.6Hz,2H),7.44(s,1H),7.37(d,J＝6.7Hz,3H),7.35–7.30(m,2H),6.81(s,1H),6.79(s,2H),6.63(d,J＝2.7Hz,1H),6.23(s,1H),4.88(s,1H).
实施例8：槲皮素-苯丙烯酸酯清除超氧自由基的能力
取4.5ml Tris-HCl溶液于比色管中，置于25℃恒温水浴中预热20min，加入不同浓度的样品溶液0.1ml，再加入0.4ml在25℃恒温水浴中已预热的焦性没食子酸溶液，摇匀后于25℃恒温水浴中准确反应4min，然后加入2滴浓盐酸(8mol/L)中止反应，测定溶液在320nm处的吸光度。
清除率(％)＝[1-(Ab-Ac)/Aa]×100％
其中，Aa为不加样品只加焦性没食子酸时的吸光度；Ab为加入样品又加焦性没食子酸时吸光度，Ac为加样品不加焦性没食子酸时吸光度。
表1化合物(1-5)清除超氧阴离子的能力
上述结果显示，合成的槲皮素丙烯酸酯类化合物在10～100μmol/L的浓度时清除能力逐渐上升，而大于100μmol/L时则会变低。结果提示化合物Ⅲ-3、Ⅲ-4、Ⅲ-5可能具有更好的清除超氧阴离子的能力。
实施例9：槲皮素-苯丙烯酸酯对PC12细胞毒性作用
PC12细胞在养含10％FBS的DMEM培养基中，放置在37℃含5％CO2的培养箱中培养。实验分为空白控制组(不含细胞，只含有DMSO)，空白组(正常培养中的PC12细胞)、对照组(PC12细胞+槲皮素)和实验组(PC12细胞+槲皮素苯丙烯酸酯)。在实验组中，使用相同体积(10、20、50、100和200μmol/L)的槲皮素苯丙烯酸酯处理PC12细胞12h。处理12h后，添加20μLMTT溶液，最终浓度为5mg/mL/孔。培养4小时后终止培养。从96孔板的每个孔中吸取培养上清液，向每个孔中添加150μLDMSO，在37℃下孵育10分钟并摇动。在孔中的颗粒完全溶解后，选择490nm的波长。使用酶标记物测量每个孔的吸光度(OD)。PC12细胞的存活率计算如下：
在给予H2O2之前，用槲皮素-苯丙烯酸酯处理PC12细胞。实验中，空白组(含药物但不含H2O2)和实验组(同时添加药物和H2O2)，槲皮素-苯丙烯酸酯配置为10、20、50、100、200μmol/L。每组设6组平行，取平均值。
表2化合物对PC12细胞的毒性
*P<0.05,**P<0.01vs槲皮素组
由实验结果显示，槲皮素苯丙烯酸酯的毒性小于槲皮素、阿魏酸、咖啡酸和槲皮素苯甲酯，增强对PC12细胞的保护作用；当槲皮素苯丙烯酸酯的浓度不超过100μmol/L时，对细胞的毒性作用逐渐变强，当槲皮素苯丙烯酸酯的浓度超过100μmol/L时，对细胞的保护作用减小，毒性增大。
实施例10：槲皮素-苯丙烯酸酯对H2O2诱导的PC12细胞的氧化应激损伤的保护作用
PC12细胞在养含10％FBS的DMEM培养基中，放置在37℃含5％CO2的培养箱中培养。实验分为空白控制组(不含细胞，只含有DMSO)，空白组(正常培养中的PC12细胞)、H2O2组(PC12细胞+H2O2)、对照组(PC12细胞+槲皮素)和实验组(PC12细胞+槲皮素苯丙烯酸酯)。在实验组中，使用不同浓度(10、20、50、100和200μmol/L)的槲皮素苯丙烯酸酯处理PC12细胞12h。处理12h后，再添加200μmol/L的H2O2100μl，处理12h后添加20μL MTT溶液，使最终浓度为5mg/mL/孔。培养4小时后终止培养。从96孔板的每个孔中吸取培养上清液，向每个孔中添加150μLDMSO，在37℃下孵育10分钟并摇动。在孔中的颗粒完全溶解后，选择490nm的波长。使用酶标仪测量每个孔的吸光度(OD)。
表3苯丙烯酸酯对PC12细胞氧化应激损伤存活率的影响
*P<0.05,**P<0.01vs H2O2模型组
由实验结果可见，苯丙烯酸酯对PC12细胞氧化应激损伤存活率保护效果效果比较好的为化合物Ⅲ-3、Ⅲ-4和Ⅲ-5，且在浓度为80μmol·L-1时保护效果最明显。
实施例11：化合物(Ⅲ-3、Ⅲ-4和Ⅲ-5)的血脑屏障通透性研究
试验过程如下：昆明小鼠72只，雌雄各半，体重范围为20±2g，随机分为槲皮素对照组、化合物给药组分别尾静脉注射给药(对照组和实验组等摩尔剂量)。给药后各组于10min、30min、90min、180min、480min时分别取一组，获得血浆及脑组织，脑组织称重，加入3倍重量的生理盐水制成匀浆，-80℃冷冻备用。
精密吸取血浆或脑匀浆液200μL，加入内标溶液20μL，涡旋混匀，加入1mL甲醇涡旋混合5min进行提取，4000rpm离心10min，取上清液1μL注入HPLC-MS，记录色谱图及化合物3(4、5)、槲皮素(As)及内标(Ai)的峰面积，根据线性方程计算血浆及脑匀浆中药物含量。
以logBB表示药物的血脑屏障通透性。logBB的定义是：在药物分布达到稳态时，药物在脑中浓度(ng/g)与血中浓度比值(ng/mL)的对数值，数学表达式为
logBB＝log(Cbrain /Cblood)
化合物Ⅲ-3、Ⅲ-4和Ⅲ-5的研究结果如表4所示。
表4化合物(Ⅲ-3、Ⅲ-4和Ⅲ-5)血脑屏障通透性研究
小鼠经尾静脉注射槲皮素后，脑匀浆中检测到的药物浓度较低，推测槲皮素很难通过血脑屏障，在给药后30-180min内，其logBB处于稳态，平均值-2.26；而化合物Ⅲ-3、Ⅲ-4和Ⅲ-5在给药后30-180min或30-480min内，logBB处于相对稳态，平均值分别为-1.20、-1.11和-1.50。
由表4的结果可知：将槲皮素改造为酯类衍生物后其穿透血脑屏障能力均有较大幅度提高。化合物Ⅲ-3、Ⅲ-4和Ⅲ-5由血液快速转运入脑，且脑药浓度可以维持较长时间(180min或480min的BB值相对稳定)，推测化合物Ⅲ-5可能具有较好的血脑屏障穿透能力。
实施例12：化合物Ⅲ-5对血管性痴呆大鼠空间记忆的改善作用
11a.VD模型的制备
采用双侧颈总动脉永久性结扎法制作VD大鼠模型，模拟慢性脑低灌注状态下的认知功能损害。
(1)SD大鼠在实验室饲养观察10天，在恒温条件下饲养(24±2℃)，喂食普通饲料，术前12h禁食，5h禁水，称重。
(2)根据大鼠体重，用3.5％水合氯醛(1.0mL/100g，i.P.)腹腔注射麻醉，待翻正反射消失后，将大鼠仰卧位固定于手术台上，再将大鼠舌头轻轻牵出，用静脉夹固定，保证大鼠呼吸畅通。
(3)碘伏常规消毒后，沿大鼠颈正中切口1-2cm，钝性分离双侧颈总动脉(过程中动作应轻柔，不要过度牵拉迷走及交感神经链)，用l号线将其永久性结扎。
(4)切口常规消毒(庆大霉素)后，逐层缝合切口，腹腔注射青霉素0.5mL以预防感染，持续3d。
(5)假手术组手术方法同上，但仅分离并不结扎双侧颈总动脉，术后缝合伤口。整个实验过程中采用100W日光灯照射，维持大鼠肛温在36.5-37.5℃。
11b.大鼠神经功能缺陷评分
按照Zea Longa等5级评分法进行神经功能缺陷评分，分值越高，说明动物行为障碍越严重：
1级(0分)：无神经缺损体征。
2级(1分)：侧肢体不能充分屈曲。
3级(2分)：拖鼠尾后拉时肢体无力。
4级(3分)：拖鼠尾后拉时转圈。
5级(4分)：自发转圈或倾倒，不能自发行走。
11c.分组及给药
实验SD大鼠75只用于造模，手术4周后存活56只，假手术组8只无死亡。48只模型大鼠术后术后4周行为学评分，分值≥2分的判定为造模成功，剔除8只大鼠达不到评分标准大鼠，剩余40只造模成功大鼠随机分为5组，其模型对照组，化合物Ⅲ-5的高、中、低剂量组，槲皮素阳性对照组各8只，实验过程中若大鼠死亡，平行条件下补充大鼠数量。
VD大鼠连续给药28d后，模型对照组与假手术组相比，神经功能缺陷评分存在显著性差异(P<0.01)，说明造模成功；与模型对照组相比，高、中剂量组和阳性对照组神经功能缺陷明显改善(P<0.01)；低剂量组神经功能缺陷有所改善但不具备统计学意义(P>0.05)。
表5给药结束后神经功能缺陷评分
*P<0.01vs模型组。
11d.大鼠学习、记忆能力考察
采用放射状八臂迷宫研究大鼠空间工作记忆及参照记忆能力。大鼠在每天迷宫实验前12h内进行禁食控制，只饮水不进食，以排除动物饱食干扰，整个实验过程在安静状态下进行，防止噪音影响实验结果。
(1)训练期：大鼠训练前先在迷宫内适应2d，每天1次，适应时3至4只大鼠同时置于八臂迷宫中，自由活动和摄取食物10min。随后进行每天2次训练，每次10min，共7d，每次训练时均设置八臂中只有4臂(1、3、5、7臂)放有40-60mg花生米诱饵为工作臂，其余为参考臂。实验时将大鼠放在迷宫中央区，15S后将四周小门打开，大鼠可选择任意臂摄取食物，大鼠进入有工作臂且摄取食物为1次正确，否则为错误选择，连续5次训练错误选择次数为1次或0次，认为训练成功。
(2)测试期：各组大鼠经过前期训练以后，造模，给药，按照前期训练方法，于第28-29天给药前在固定时间开始八臂迷宫实验。
(3)每次实验记录大鼠下列参数：重新进入放饵臂称为工作记忆错误，进入不放饵臂称为参照记忆错误，记录10min内每只大鼠每次实验的参考记忆错误和工作记忆错误。
表6化合物Ⅲ-5对VD大鼠空间记忆再现能力的作用
*P<0.05vs假手术组；#P<0.05vs模型组；
VD大鼠连续灌胃给药第28d，模型对照组与假手术组相比，总记忆错误次数、参考记忆错误和工作记忆错误次数有显著差异(P<0.05)；与模型对照组相比，高、中剂量组和阳性对照组可显著减少参考记忆错误、工作记忆错误(P<0.05)；低剂量组的总记忆错误次数参考记忆错误显著减少(P<0.05)。
实施例13：化合物Ⅲ-5对血管性痴呆大鼠海马氧化应激及神经元损伤的影响
12a.取材及处理
按照实施例11造模，在末次给药的第二日，大鼠腹腔注射2.5％戊巴比妥钠(0.2ml/100g)麻醉，冰台上快速断头取脑组织，大鼠冰浴剥取脑分离海马组织，取海马组织，盐水洗尽血液，滤纸吸干水分，投入液氮中速冻，检测前取出并称重，按1:9加入生理盐水，冰浴条件下匀浆，在3500rpm离心10min，取上清液用于酶联免疫吸附实验。
12b.神经元损伤检测
将切片置于50℃焦油紫染色液中孵育45min，用蒸馏水冲洗除去浮色，再用乙醇梯度脱水、二甲苯透明，最后用中性树脂及盖玻片封片，镜下观察皮层神经元改变。
表7化合物Ⅲ-5对VD大鼠神经元数量的影响
*P<0.05vs假手术组；#P<0.05vs模型组；
12c.海马活性氧检测
室温下将切片滴加DHE试剂避光孵育30min，封片后用荧光显微镜观察，其中激发波长为540nm，发射波长为590nm。
表8化合物Ⅲ-5对VD大鼠海马活性氧的影响
*P<0.05vs假手术组；#P<0.05vs模型组；
12d.超氧化物歧化酶活性检测
采用黄嘌呤氧化酶法测定，按照SOD试剂盒说明书操作，用分光光度仪测定。
研究结果表明，化合物Ⅲ-5可显著改善VD模型大鼠的神经功能缺陷和学习、记忆能力，药理活性优于槲皮素。研究证实，Ⅲ-5具有保护神经元降低活性氧以及升高SOD的作用，同时保留了槲皮素和肉桂酸的抗氧化活性；相对于槲皮素，其优势体现于抗氧化性更强，且具有保护神经元的作用。
表9化合物Ⅲ-5对VD大鼠SOD的影响
*P<0.05vs假手术组；#P<0.01vs模型组。
Claims (9)
1.一种槲皮素苯丙烯酸酯，其特征在于其结构式如下式(Ⅰ)、式(Ⅱ)、式(Ⅲ)所示：
其中：R1选自H、CH3O、OCOCH3、Br或Cl；R2选自H、OCOCH3、Br或Cl；R3选自H或CH3O。
2.一种权利要求1所述的槲皮素苯丙烯酸酯的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
步骤1：羟基苯丙烯酸衍生物的乙酰化
取醋酸酐与羟基取代的苯丙烯酸衍生物A，于70℃下搅拌反应0.5h，反应液冷却结晶，除去多余的醋酸酐，粗品采用氯仿重结晶，得乙酰苯丙烯酸衍生物B；反应路线如下所示：
其中：R0＝H、OH、OCOCH3、CH3O、Br或Cl；R1＝H、OCOCH3、CH3O、Br或Cl；R3＝H或CH3O；
步骤2：苯丙烯酰氯的合成
在反应瓶中加入步骤1制得的乙酰苯丙烯酸衍生物B或不含羟基取代的苯丙烯酸C，氯化亚砜和少量DMF，于60℃下搅拌反应1h，减压蒸出过量氯化亚砜，得苯丙烯酰氯中间体D；反应路线如下所示：
其中，R1＝H、OCOCH3、CH3O、Br或Cl；R2'＝H、Br或Cl；R2＝H、OCOCH3、Br或Cl；R3＝H,CH3O；
步骤3：槲皮素苯丙烯酸酯的合成
将槲皮素置于5％的NaOH水溶液中，室温搅拌30min待其全部溶解后，降温至5℃，缓缓滴入苯丙烯酰氯中间体D的丙酮溶液，滴毕，控制温度、pH继续搅拌反应2h；反应结束后，冷冻离心收集不溶物，粗品经硅胶柱层析分离纯化得到目标产物(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)；反应路线如下所示：
其中：R1＝H、CH3O、OCOCH3、Br或Cl；R2＝H、OCOCH3、Br或Cl；R3＝H或CH3O。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
步骤1中，当R0＝H、OCOCH3、CH3O、Br或Cl，则醋酸酐与羟基取代的苯丙烯酸衍生物A的摩尔比为4：1；当R0＝OH，则醋酸酐与羟基取代的苯丙烯酸衍生物A的摩尔比为8：1。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
步骤2中，氯化亚砜、乙酰苯丙烯酸衍生物B或不含羟基取代的苯丙烯酸C及DMF三者投料的摩尔比为4-6.5：1：0.01。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
步骤3中，反应温度控制为5～15℃，体系pH值为9.5～10.5。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
步骤3中，当反应物槲皮素与苯丙烯酰氯D的摩尔投料比为1：2-4时，所得粗品经硅胶柱层析分离纯化，以石油醚-乙酸乙酯＝3：1为洗脱剂，分别得到Rf＝0.3的产物(I)和Rf＝0.25的产物(II)。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
步骤3中，当反应物槲皮素与苯丙烯酰氯D的摩尔投料比为1：5-8时，产物结构式为(III)。
8.一种权利要求1所述的槲皮素苯丙烯酸酯的用途，其特征在于：
以所述槲皮素苯丙烯酸酯制备药物制剂，所述药物制剂能有效缓解神经元氧化损伤，缓解血管性痴呆的氧化应激水平。
9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：
所述药物制剂具有保护神经元降低活性氧以及升高SOD的作用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211515642.6A CN116063263A (zh) | 2022-11-30 | 2022-11-30 | 一种槲皮素苯丙烯酸酯及其制备方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211515642.6A CN116063263A (zh) | 2022-11-30 | 2022-11-30 | 一种槲皮素苯丙烯酸酯及其制备方法和用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116063263A true CN116063263A (zh) | 2023-05-05 |
Family
ID=86169049
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211515642.6A Pending CN116063263A (zh) | 2022-11-30 | 2022-11-30 | 一种槲皮素苯丙烯酸酯及其制备方法和用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116063263A (zh) |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05255376A (ja) * | 1992-03-11 | 1993-10-05 | Shiseido Co Ltd | ５−ヒドロキシ−７−（６”−パラクマロイルグルコシル）フラボノール誘導体及びこれを含有する皮膚外用剤 |
| CN101015543A (zh) * | 2007-02-15 | 2007-08-15 | 浙江海正天华新药研发有限公司 | 苯丙烯酸苯丙烯酯类化合物抗氧化保肝及保护脑损伤用途 |
| WO2009064485A1 (en) * | 2007-11-16 | 2009-05-22 | Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Antioxidant flavonoid derivatives |
| KR20110064006A (ko) * | 2009-12-07 | 2011-06-15 | 건국대학교 산학협력단 | 신규한 케르세틴 콘쥬게이트, 피발록시메틸 케르세틴 및 이소프로필록시카르보닐메톡시 케르세틴 및 그 제조방법 |
| WO2013130020A1 (en) * | 2012-02-29 | 2013-09-06 | Ústav Experimentálnej Farmakológie A Toxikológie Sav | Quercetin derivatives, their pharmaceutical composition and use |
| WO2019111265A1 (en) * | 2017-12-10 | 2019-06-13 | Share Gal Research And Development Ltd | Compounds and methods for treating cancer |
| CN112174824A (zh) * | 2020-09-10 | 2021-01-05 | 河南牧业经济学院 | 一种新型阿魏酸酯衍生物及其制备方法和应用 |
-
2022
- 2022-11-30 CN CN202211515642.6A patent/CN116063263A/zh active Pending
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05255376A (ja) * | 1992-03-11 | 1993-10-05 | Shiseido Co Ltd | ５−ヒドロキシ−７−（６”−パラクマロイルグルコシル）フラボノール誘導体及びこれを含有する皮膚外用剤 |
| CN101015543A (zh) * | 2007-02-15 | 2007-08-15 | 浙江海正天华新药研发有限公司 | 苯丙烯酸苯丙烯酯类化合物抗氧化保肝及保护脑损伤用途 |
| WO2009064485A1 (en) * | 2007-11-16 | 2009-05-22 | Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Antioxidant flavonoid derivatives |
| KR20110064006A (ko) * | 2009-12-07 | 2011-06-15 | 건국대학교 산학협력단 | 신규한 케르세틴 콘쥬게이트, 피발록시메틸 케르세틴 및 이소프로필록시카르보닐메톡시 케르세틴 및 그 제조방법 |
| WO2013130020A1 (en) * | 2012-02-29 | 2013-09-06 | Ústav Experimentálnej Farmakológie A Toxikológie Sav | Quercetin derivatives, their pharmaceutical composition and use |
| WO2019111265A1 (en) * | 2017-12-10 | 2019-06-13 | Share Gal Research And Development Ltd | Compounds and methods for treating cancer |
| CN112174824A (zh) * | 2020-09-10 | 2021-01-05 | 河南牧业经济学院 | 一种新型阿魏酸酯衍生物及其制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| ACS: "CAS RN：1641548-31-3", STN-REGISTRY数据库, pages 1 * |
| DASA KRUZLICOVA ET AL.: "QUANTITATIVE STRUCTURE-ANTIOXIDANT ACTIVITY RELATIONSHIP OF QUERCETIN AND ITS NEW SYNTHETISED DERIVATIVES", NOVA BIOTECHNOLOGICA ET CHIMICA, vol. 11, no. 1, pages 37 - 44 * |
| IVANA MILACKOVA ET AL.: "Screening for antiradical efficiency of 21 semi-synthetic derivatives of quercetin in a DPPH assay", INTERDISCIP TOXICOL., vol. 6, no. 1, pages 13 - 17 * |
| JIAN-WEN LI ET AL.: "Synthesis of Quercetin-Acid Esters and Its Reduction of H2O2- Triggered PC12 Cells Damage by Down-Regulating ROS", CHEM. BIODIVERSITY, vol. 20, no. 2, 11 January 2023 (2023-01-11), pages 1 - 9 * |
| MARTINA DANIHELOVÁ ET AL.: "Antioxidant action and cytotoxicity on HeLa and NIH-3T3 cells of new quercetin derivatives", INTERDISCIP TOXICOL., vol. 6, no. 4, pages 209 - 216 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR940000073B1 (ko) | 아스코르브산 유도체의 제조방법 | |
| SA109300201B1 (ar) | مركبات دايوسميتين جديدة، وعملية لتحضيرها وتركيبات صيدلانية تحتوي عليها | |
| Ding et al. | Design, synthesis and biological evaluation of hesperetin derivatives as potent anti-inflammatory agent | |
| CN113234089B (zh) | 柠檬苦素类化合物、制备方法及其作为治疗棘球蚴包虫病药物的应用 | |
| JP3577183B2 (ja) | 動脈硬化症予防・治療剤 | |
| CN116063263A (zh) | 一种槲皮素苯丙烯酸酯及其制备方法和用途 | |
| KR100823155B1 (ko) | 신규한 카테콜릭 잔톤 계열 화합물 및 꾸지뽕나무 추출물 또는 그로부터 분리된 카테콜릭 잔톤 계열 화합물을 포함하는 심장순환계 질환의 예방 및 치료용 조성물 | |
| CN115594646B (zh) | 一种β-榄香烯硫化氢供体型衍生物、其制备方法及医药用途 | |
| CN115160251B (zh) | 一种n-n-双-恶唑烷酮生物碱类化合物、制备方法及在医药领域的应用 | |
| IE58791B1 (en) | Flavolignan derivatives and pharmaceutical compositions containing them | |
| CN109956868A (zh) | 一类苯基羧酸衍生物、其制备方法及其用途 | |
| CN108524531B (zh) | 一种药物组合物 | |
| CN102260239B (zh) | 胡黄连素衍生物及其制备与应用 | |
| KR100933770B1 (ko) | 세코이소라리시레시놀 유도체 및 이를 유효성분으로 하는항암제 | |
| CN105753785A (zh) | 一种依达拉奉化合物及其制备方法 | |
| US20070105946A1 (en) | Tocopherol derivatives with a long hydroxylated chain, which can be used as neurotrophics | |
| WO2003087082A1 (en) | Pyranocoumarin derivatives | |
| CA2631127A1 (en) | Biologically active compounds | |
| JPH0940597A (ja) | シナモフィリン及びその誘導体とこれらの製造方法及び血小板凝集抑制薬剤、気管弛緩薬剤、酸化防止剤及び血管弛緩薬剤 | |
| JP3740284B2 (ja) | 抗マラリア活性を有する新規化合物又はその塩 | |
| KR20070081294A (ko) | 감수에서 분리된 테르페노이드 또는 이를 포함하는감수추출물을 함유하는 골다공증 예방 및 치료용 약학조성물 | |
| CN115073463B (zh) | 一类苦参碱型二聚体生物碱类化合物、其药物组合物及其应用 | |
| KR100604696B1 (ko) | 신규한 커큐민 유도체 | |
| KR100481684B1 (ko) | 피누솔리드 유도체를 유효성분으로 포함하는 퇴행성뇌신경계 질환의 예방 및 치료제 | |
| CN114702506B (zh) | 11-羰基-20-乙氧基济源冬凌草甲素及其14-oh酯化系列衍生物和用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |