CN108524531B - 一种药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种药物组合物，具体为一种治疗缺血性脑卒中的药物组合物，以组合物总重量为基准，其组成为：内酯类成分，18.1‑50.9％；黄酮类成分，48.8‑81.8％；有机酸类成分，0.07‑6.83％。现有技术中没有报道内酯类成分、黄酮类成分及有机酸类成分的药物组合物及其在治疗缺血性脑卒中方面的应用。本发明提供的药物组合物可以有效降低脑缺血再灌注模型小鼠的脑梗死面积，并降低其神经功能评分，可以显著提高糖氧剥夺/缺氧复氧神经元细胞损伤模型中神经元细胞的活力，对LPS诱导的小胶质细胞的炎症具有显著的保护作用，安全有效，可以制备成预防或治疗缺血性脑卒中的药物。

Description

一种药物组合物
技术领域
本发明属于医药领域，涉及药物组合物，具体涉及一种治疗缺血性脑卒中的药物组合物。
背景技术
缺血性脑卒中又称“中风”、是一种急性脑血管疾病，是由于脑部血管突然阻塞导致血液不能流入大脑而引起脑组织损伤的一组疾病。缺血性卒中的发病率占脑卒中总数的60％～70％，具有发病率高、死亡率高和致残率高的特点，但是一直缺乏有效的治疗手段。
溶栓治疗是目前公认的脑卒中最有效的救治方法，但有严格的时间窗要求(静脉溶栓限定在4.5小时内，动脉溶栓可以适当延长)。已有高血压、糖尿病、高血脂等疾病的患者有必要采取以下药物治疗：阿司匹林、β-阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂、他汀类药物。
中药制剂在缺血性脑卒中治疗也有一定使用，包括金纳多注射剂，丹参注射剂，参麦注射剂等，但是这些制剂有效成分含量低，特别是中药复方成分复杂，无质量控制指标，其安全性难以控制。这些不足限制了中药制剂的推广和使用。
萜类内酯主要存在与银杏科植物中，其中白果内酯具有显著的抗炎，神经细胞保护作用，而银杏内酯成分是天然存在的最强的血小板活化因子抑制剂，具有显著的抗血小板聚集作用。
黄酮类成分广泛存在与自然界的植物和浆果中，如银杏，山楂，葡萄等。黄酮总数大概有4千多种，其分子结构不尽相同，如芸香苷、橘皮苷、栎素、绿茶多酚、花色糖苷、花色苷酸等都属黄酮。黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧剂，可有效清除体内的氧自由基，如花青素可以抑制油脂性过氧化物的全阶段溢出，这种阻止氧化的能力是维生素E的十倍以上，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生[Journal ofNutrition in Gerontology&Geriatrics,2012,31(3):206-238]。黄酮还可改善循环，降低胆固醇。
有机酸类在中草药的叶、根、特别是果实中广泛分布，如乌梅、五味子，覆盆子等。如杜仲中绿原酸有显著的抗氧化，抗凋亡作用。原儿茶酸可以对抗肾上腺素所致的心肌耗氧量增加，使心肌耐缺氧时间增长。
现有技术中没有报道关于内酯类成分、黄酮类成分及有机酸类成分的药物组合物及其在治疗缺血性脑卒中方面的应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗缺血性脑卒中的药物组合物。
本发明上述目的是通过以下技术方案得以实现：
一种药物组合物，以组合物总重量为基准，其组成为：
内酯类成分18.1-50.9％；
黄酮类成分48.8-81.8％；
有机酸类成分0.07-6.83％。
优选地，所述内酯类成分含有白果内酯。
更优选地，所述内酯类成分还含有银杏内酯B，白果内酯和银杏内酯B的重量份之比为(1.90-4.44)：(0.65-1.57)。
更优选地，所述内酯类成分还含有银杏内酯A和银杏内酯C，白果内酯、银杏内酯B、银杏内酯A和银杏内酯C的重量份之比为(1.90-4.44)：(0.65-1.57)：(1.33-3.12)：(0.6-1.4)。
优选地，所述有机酸类成分含有绿原酸。
更优选地，所述有机酸类成分还含有原儿茶酸，绿原酸和原儿茶酸的重量份之比为(0.01-0.02)：(1-2.33)。
优选地，所述黄酮类成分含有槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素和异鼠李素-3-O-芸香糖苷，重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)。
更优选地，所述黄酮类成分还含有山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷，其与槲皮素的重量份之比为(1.73-2.59)：(0.088-1.32)。其中，山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷为申请人新发现的一种黄酮苷，其化学结构式如下式所示：
Figure BDA0001235730180000021
实施例具体介绍了山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的制备方法、结构确证和药理作用，证明其是一种黄嘌呤氧化酶抑制剂。含有该黄酮苷的药物组合物具有更为优异神经保护作用，治疗缺血性脑卒中的效果更优。
更优选地，所述黄酮类成分还含有异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素香豆酰基黄酮苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷；所述槲皮素香豆酰基黄酮苷的基本母核为槲皮素，基本母核的C-3位连接糖侧链，香豆酰基连接在其糖侧链上；槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素香豆酰基黄酮苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷的重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)：(1.73-2.59)：(0.043-0.064)：(3.13-4.7)：(1.8-2.71)：(2.36-3.55)。
更优选地，槲皮素香豆酰基黄酮苷为槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷。
更优选地，所述黄酮类成分还含有碟豆素和山柰酚香豆酰基黄酮苷；所述山柰酚香豆酰基黄酮苷的基本母核为山柰酚，基本母核的C-3位连接糖侧链，香豆酰基连接在其糖侧链上；槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素香豆酰基黄酮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、碟豆素和山柰酚香豆酰基黄酮苷的重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)：(1.73-2.59)：(0.043-0.064)：(3.13-4.7)：(1.8-2.71)：(2.36-3.55)：(1.24-1.88)：(0.8-1.2)。
更优选地，山柰酚香豆酰基黄酮苷为山柰酚-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷。
优选地，所述内酯类成分为白果内酯；所述有机酸类成分为绿原酸；黄酮类成分由槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷和山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷组成，重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)：(1.73-2.59)。
优选地，所述内酯类成分由白果内酯、银杏内酯B组成，重量份之比为(1.90-4.44)：(0.65-1.57)；所述有机酸类成分为绿原酸；所述黄酮类成分由槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷组成，重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)：(1.73-2.59)：(0.043-0.064)：(3.13-4.7)：(1.8-2.71)：(2.36-3.55)。
优选地，所述内酯类成分由白果内酯、银杏内酯B、银杏内酯A和银杏内酯C组成，重量份之比为(1.90-4.44)：(0.65-1.57)：(1.33-3.12)：(0.6-1.4)；所述有机酸类成分由绿原酸、原儿茶酸组成，重量份之比为(0.01-0.02)：(1-2.33)；所述黄酮类成分由槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、碟豆素和山柰酚-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷组成，重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)：(1.73-2.59)：(0.043-0.064)：(3.13-4.7)：(1.8-2.71)：(2.36-3.55)：(1.24-1.88)：(0.8-1.2)。
香豆酰基黄酮苷指基本母核为黄酮且含有糖侧链的化合物，其中，基本母核为2-苯基色原酮结构，糖侧链通过糖苷键连接在基本母核的C-3位，香豆酰基连接在糖侧链上。在本案中，槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷和山柰酚-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷均为所述香豆酰基黄酮苷，其基本母核分别为槲皮素和山柰酚。申请人首次发现该类黄酮苷基本母核C-3位糖侧链上的香豆酰基与提高黄酮苷的神经细胞保护作用并降低细胞毒性有关，即减毒增效，具体见实施例。
上述药物组合物具有降低脑缺血再灌注模型小鼠的脑梗死面积，并降低其神经功能评分的作用，还可以显著提高糖氧剥夺/缺氧复氧神经元细胞损伤模型中神经元细胞的活力，对LPS诱导的小胶质细胞的炎症具有显著的保护作用，安全有效。
上述组合物可以制备成药物制剂，以上述组合物为活性成分，辅以药学上可以接受的载体或赋形剂，从而制成药学上可以接受的剂型。所述药学上可以接受的载体或赋形剂包括一种或多种固体、半固体或液体辅料。所述药学上可以接受的剂型包括片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、注射剂、粉针剂、冻干粉针剂、微丸剂、滴丸剂、糖浆剂、散剂、浸膏剂、煎膏剂、口服液体制剂。
本发明的有益效果：
本发明提供的药物组合物可以有效降低脑缺血再灌注模型小鼠的脑梗死面积，并降低其神经功能评分，可以显著提高糖氧剥夺/缺氧复氧神经元细胞损伤模型中神经元细胞的活力，对LPS诱导的小胶质细胞的炎症具有显著的保护作用，安全有效，可以制备成预防或治疗缺血性脑卒中的药物。
附图说明
图1为山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的完整HMBC谱图；
图2为山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的局部HMBC谱图；
图3为山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的局部HMBC谱图；
图4为山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的局部HMBC谱图；
图5为山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的局部HMBC谱图；
图6为山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的局部HMBC谱图；
图7为山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的局部HMBC谱图；
图8为山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的局部HMBC谱图；
图9为不同浓度的山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷对黄嘌呤氧化酶的抑制效果；
图10为黄酮苷QCGR和QGR化学结构式；
图11为黄酮苷KG和KCG化学结构式；
图12为黄酮苷KGR和KCGR化学结构式。
具体实施方式
下面结合附图和实施例进一步说明本发明的实质性内容。
下述实施例中，组合物的制备采用医药领域常规手段均匀混合制成。未详述的实验试剂和实验方法均为本领域技术人员所熟知的常规实验试剂和实验方法。
实施例1：本发明药物组合物(7+1个成分，重量份比中间值)
由表1中的成分均匀混合制成：
表1药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000051
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的37.80％；黄酮类成分占组合物总重的61.99％；有机酸类成分占组合物总重的0.21％。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷和山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的重量份之比为0.110：0.039：0.030：0.040：2.827：2.163。
实施例2：本发明药物组合物(12+1个成分，重量份比中间值)
由表2中的成分均匀混合制成：
表2药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000061
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的22.81％；黄酮类成分占组合物总重的77.09％；有机酸类成分占组合物总重的0.10％。白果内酯和银杏内酯B的重量份之比为3.176：1.084。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷的重量份之比为0.110：0.039：0.030：0.040：2.827：2.163：0.054：3.918：2.259：2.958。
实施例3：本发明药物组合物(17+1个成分，重量份比中间值)
由表3中的成分均匀混合制成：
表3药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000062
Figure BDA0001235730180000071
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的28.67％；黄酮类成分占组合物总重的64.88％；有机酸类成分占组合物总重的6.45％。白果内酯、银杏内酯B、银杏内酯A和银杏内酯C的重量份之比为3.176：1.084：2.232：1.003。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、碟豆素和山柰酚-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷的重量份之比为0.110：0.039：0.030：0.040：2.827：2.163：0.054：3.918：2.259：2.958：1.565：1。绿原酸和原儿茶酸的重量份之比为0.018：1.668。
实施例4：本发明药物组合物(7个成分，重量份比中间值)
由表4中的成分均匀混合制成：
表4药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000072
Figure BDA0001235730180000081
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的50.90％；黄酮类成分占组合物总重的48.81％；有机酸类成分占组合物总重的0.29％。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素和异鼠李素-3-O-芸香糖苷的重量份之比为0.110：0.039：0.030：0.040：2.827。
实施例5：本发明药物组合物(7+1个成分，重量份比下限)
由表5中的成分均匀混合制成：
表5药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000082
Figure BDA0001235730180000091
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的31.28％；黄酮类成分占组合物总重的68.56％；有机酸类成分占组合物总重的0.16％。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷和山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的重量份之比为0.088：0.031：0.024：0.032：2.26：1.73。
实施例6：本发明药物组合物(7+1个成分，重量份比上限)
由表6中的成分均匀混合制成：
表6药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000092
Figure BDA0001235730180000101
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的37.34％；黄酮类成分占组合物总重的62.49％；有机酸类成分占组合物总重的0.17％。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷和山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的重量份之比为1.32：0.047：0.036：0.048：3.39：2.59。
实施例7：本发明药物组合物(12+1个成分，重量份比下限)
由表7中的成分均匀混合制成：
表7药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000102
Figure BDA0001235730180000111
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的18.14％；黄酮类成分占组合物总重的81.79％；有机酸类成分占组合物总重的0.07％。白果内酯和银杏内酯B的重量份之比为1.90：0.65。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷的重量份之比为0.088：0.031：0.024：0.032：2.26：1.73：0.043：3.13：1.8：2.36。
实施例8：本发明药物组合物(12+1个成分，重量份比上限)
由表8中的成分均匀混合制成：
表8药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000112
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的24.55％；黄酮类成分占组合物总重的75.37％；有机酸类成分占组合物总重的0.08％。白果内酯和银杏内酯B的重量份之比为4.44：1.57。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷的重量份之比为1.32：0.047：0.036：0.048：3.39：2.59：0.064：4.7：2.71：3.55。
实施例9：本发明药物组合物(17+1个成分，重量份比下限)
由表9中的成分均匀混合制成：
表9药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000121
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的23.54％；黄酮类成分占组合物总重的71.15％；有机酸类成分占组合物总重的5.31％。白果内酯、银杏内酯B、银杏内酯A和银杏内酯C的重量份之比为1.90：0.65：1.33：0.6。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、碟豆素和山柰酚-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷的重量份之比为0.088：0.031：0.024：0.032：2.26：1.73：0.043：3.13：1.8：2.36：1.24：0.8。绿原酸和原儿茶酸的重量份之比为0.01：1。
实施例10：本发明药物组合物(17+1个成分，重量份比上限)
由表10中的成分均匀混合制成：
表10药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000131
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的30.60％；黄酮类成分占组合物总重的62.57％；有机酸类成分占组合物总重的6.83％。白果内酯、银杏内酯B、银杏内酯A和银杏内酯C的重量份之比为4.44：1.57：3.12：1.4。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、碟豆素和山柰酚-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷的重量份之比为1.32：0.047：0.036：0.048：3.39：2.59：0.064：4.7：2.71：3.55：1.88：1.2。绿原酸和原儿茶酸的重量份之比为0.02：2.33。
实施例11：本发明药物组合物(7个成分，重量份比下限)
由表11中的成分均匀混合制成：
表11药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000141
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的43.73％；黄酮类成分占组合物总重的56.04％；有机酸类成分占组合物总重的0.23％。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素和异鼠李素-3-O-芸香糖苷的重量份之比为0.088：0.031：0.024：0.032：2.26。
实施例12：本发明药物组合物(7个成分，重量份比上限)
由表12中的成分均匀混合制成：
表12药物组合物成分及含量
Figure BDA0001235730180000151
该实施例中，内酯类成分占组合物总重的47.74％；黄酮类成分占组合物总重的52.05％；有机酸类成分占组合物总重的0.21％。槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素和异鼠李素-3-O-芸香糖苷的重量份之比为1.32：0.047：0.036：0.048：3.39。
实施例13：对比组合物
在实施例2组合物组成基础上，去掉槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷，其他组分及含量同实施例2。将各成分按重量混合制成组合物。
实施例14：对比组合物
在实施例3组合物组成基础上，去掉槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷和山柰酚-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷，其他组分及含量同实施例3。将各成分按重量混合制成组合物。
实施例15：组合物药效实施例
1.实验材料
胎牛血清(Gibco公司，USA)，胰酶，Hank’s缓冲液(Gibco公司，USA)；高糖含双抗DMEM培养基(凯基生物科技发展有限公司，中国)；小鼠BV2细胞株(ATCC,USA)；N2A小鼠源性永生化神经元细胞细胞株(ATCC,USA)。DMEM高糖培养基、胎牛血清、胰蛋白酶(Gibco,USA)；亚硝酸钠(南京化学试剂有限公司，中国)；N-(1-萘基)乙二胺二盐酸、磺胺(国药集团化学试剂有限公司，北京)；PBS(北京博奥森生物技术有限公司，北京)；DMSO(Sigma公司，USA)；96孔板(Corning公司，USA)；多功能酶标仪(Bio-TekInstruments，USA)；生物安全柜(Thermo Fisher Scientific，USA)，CO2细胞培养箱(ThermoFisher Scientific，USA)。青霉素-链霉素溶液(Life Technologies公司，USA)；微量台式离心机(赛默飞世尔科技公司，USA)，微量移液器(Eppendoff公司，German)，超低温冰箱(海尔公司，中国)，净化工作台(净化设备厂，中国)，祸旋混合器(其林贝尔仪器制造有限公司，中国)。
样品配制：
细胞实验：精密称取各实施例组合物、木犀草素溶于DMSO中，生理盐水稀释为2.5mg/mL母液(DMSO占1％)。给药前用培养基稀释至不同倍数。在-20℃条件下贮存备用。
动物实验：精密称取各实施例组合物、氯吡格雷溶于DMSO和吐温80中，生理盐水稀释为2.5mg/mL母液(DMSO，吐温80各占1％)。在-20℃条件下贮存备用。
Griess试剂：由0.1％的萘基二胺盐酸盐(0.1g萘基二胺盐酸盐+100mL PBS)和含5％H3PO4的1％磺酸(0.4g磺胺+2.352mL H3PO4+37.65mL双蒸水)以1：1比例配制。两液体临用时混合，配制成所需液体。
NO标准溶液配制：精密称取0.0691g亚硝酸钠，用1mL PBS溶解配制1mM亚硝酸钠溶液。取990μL PBS加10μL 1mmol/mL的亚硝酸钠得10μM母液,再用PBS依次稀释至200nM、100nM、25nM、5nM和1nM，共6个浓度，临用时配制。
脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)：按1mg/L溶解于无血清DMEM培养液中，用0.22μm滤膜过滤，分装，在-20℃条件下贮存备用，现配现用。
2.实验方法
2.1脑缺血再灌注模型的建立(小鼠MCAO手术造模)
根据小鼠体重，腹腔注射3％的水合氯醛(450mg/kg)进行麻醉，分离颌下腺体和左侧颈总动脉并游离，分离颈内动脉和颈外动脉，用栓线柱塞颈内动脉，系紧颈外动脉近心端活结建立脑缺血模型，分为溶剂组和给药组，给药组腹腔分别给与实施例1-12组合物25mg/kg，阳性药组给予相同剂量氯吡格雷。溶剂组给与等体积溶剂。同时设置假手术组，假手术组不栓线、不给药。小鼠脑缺血1h后，缓慢撤出全部线栓，恢复大脑供血，实现缺血再灌注过程。小鼠手术后置于恒温加热台上，维持体温37℃左右，待小鼠清醒后，放在安静清洁环境中分笼饲养。
2.2小鼠TTC染色及脑梗死面积测定
小鼠缺血再灌注24h后，迅速断头取脑，除去嗅球、小脑和低位脑干，置于-20℃冰箱冷冻约13min，取出大脑，连续均匀做6个脑冠状切片，37℃水浴避光加热约15min(每间隔5min晃动脑片一次，保证染色均匀)。梗死区脑组织由于线粒体过氧化氢酶失活，无法与TTC作用着色，呈现白色，正常脑组织染色呈现红色。用图像分析软件Image-Pro Plus测量缺血梗死区面积占整个脑切片面积的百分比，评价脑损伤的程度。
2.3小鼠神经功能评分
小鼠缺血再灌注24h后，根据Zea-Longa五级4分法对小鼠进行神经功能损害评分。
Zea-Longa五级4分法：
0分：无任何神经缺损症状；
1分：提尾时对侧前肢内收，不能完全伸直；
2分：行走时向对侧转圈；
3分：行走时向对侧倾倒；
4分：意识昏迷，四肢瘫软无法自己行走。
得分越高，说明小鼠神经功能损害越严重。
2.4细胞培养
BV2细胞和Neuro-2A细胞(N2A细胞)按ATCC的推荐方法进行培养，将保存于液氮冷冻的BV2细胞取出迅速置于37℃水浴中振荡至细胞融化后，转入无菌离心管中，加9mL含血清培养基，以1000rpm离心5min。在无菌超净台上，弃去上清液，加入少量培养液并轻轻吹吸均匀，将细胞悬液移入培养皿，在37℃，5％CO2、饱和湿度条件下，用含10％胎牛血清的DMEM培养液常规培养。细胞隔天换液，待生长接近融合时，用0.25％胰蛋白酶-EDTA消化液消化，按1:3比例传代。实验所用的细胞均在指数生长期内，倒置显微镜下观察细胞呈圆形或椭圆形，选取形态饱满，生长状态均一良好的细胞供试验用。
2.5糖氧剥夺/缺氧复氧神经元细胞损伤模型的建立
选取处于对数生长期的Neuro-2A细胞进行实验。当细胞密度达到90％时，将细胞传到培养皿中，分为空白组、模型组和给药组，给药组培养基中分别含有不同浓度的实施例1-12组合物(终浓度7.5、12.5、25μg/ml)，空白组和模型组不添加药物组合物，使N2A细胞贴壁培养。16h后，模型组和给药组弃去原来的培养基，用PBS洗净残余细胞碎片和培养基，加入无糖培养基，移至三气培养箱中(气体参数设置为:1％O2，94％N2，5％CO2)，O2浓度降至1.0％时开始计时，稳定4h后，取出培养皿，将皿中无糖培养基换成正常培养基。放回正常培养箱，37℃继续培养，实现复糖复氧培养(气体参数设置为:21％O2，74％N2，5％CO2)。待复糖复氧24h后用MTT法测定细胞活力。空白组细胞整个实验过程中使用完全培养基培养，不进行缺氧缺糖处理。
MTT测定方法：复糖复氧24h后，在培养基中加入5mg/mL MTT溶液20μL，混匀后继续培养4h。取出细胞培养板，吸弃上清，每孔加DMSO 150μL，将培养板置于酶标仪中，10min震荡后使紫色结晶物完全溶解，在波长490nm条件下，测定各孔的吸光度(OD)值。
2.6 LPS细胞小胶质细胞炎症损伤模型建立
选取处于对数生长期的BV2细胞进行实验。当细胞密度达到90％时，将细胞传到培养皿中，分为空白组、模型组和给药组，贴壁培养过夜。吸去培养基，加入100μL新的培养基继续培养20h，其中，模型组和给药组培养基中含有10μL LPS，给药组培养基中还分别含有实施例1-12的组合物(终浓度分别为1.875、7.5、12.5、25μg/ml)，阳性药组给予木犀草素(终浓度5μM)，空白组培养基中不含有LPS和上述组合物，每个样品3个复孔。收集细胞上清液，测定上清液中NO浓度。
3.实验结果
3.1对糖氧剥夺模型神经元细胞的保护作用
实施例1-12的组合物对糖氧剥夺模型神经元细胞的保护作用见下表13：
表13对糖氧剥夺模型神经元细胞的保护作用
Figure BDA0001235730180000181
Figure BDA0001235730180000191
上述表格中，与模型组比，给与不同剂量的实施例1-12的组合物可以显著提高细胞活力，证明实施例1-12的组合物对糖氧剥夺模型神经元细胞具有保护作用，且呈现剂量依赖关系。
3.2对LPS诱导的小胶质细胞的炎症的保护作用
实施例1-12的组合物对LPS诱导的小胶质细胞的炎症的保护作用见表14：
表14对LPS诱导的小胶质细胞的炎症的保护作用
Figure BDA0001235730180000192
上述表格中，与模型组相比，给与不同剂量的实施例1-12的组合物可以显著降低NO浓度，效果与阳性药木犀草素相当，证明实施例1-12的组合物对LPS诱导的小胶质细胞的炎症具有保护作用，且呈现剂量依赖关系。
3.3对MCAO小鼠脑梗死面积的改善作用
实施例1-12的组合物对MCAO小鼠脑梗死面积的改善作用见表15：
表15对MCAO小鼠脑梗死面积的改善作用
Figure BDA0001235730180000201
上述表格中，与溶剂组相比，给与实施例1-12的组合物可以显著降低MCAO小鼠脑梗死面积，效果与阳性药氯吡格雷相当，证明实施例1-12的组合物对MCAO小鼠脑梗死面积具有改善作用。
3.4对MCAO小鼠神经评分的改善作用
实施例1-12的组合物对MCAO小鼠神经评分的改善作用见表16：
表16对MCAO小鼠神经评分的改善作用
Figure BDA0001235730180000202
上述表格中，与溶剂组相比，给与实施例1-12的组合物可以降低MCAO小鼠神经评分，部分实施例组合物的效果与阳性药氯吡格雷相当，但是，实施例4、11和12的组合物对MCAO小鼠神经评分的降低作用不明显。
实施例16：山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷的制备、结构确证和活性
制备方法：
第一步，取EGB 50标准银杏叶提取物10克，用D101型大孔树脂吸附，然后分别以不同梯度的乙醇水溶液洗脱，收集体积百分含量40％-70％乙醇洗脱液的流分，浓缩、干燥，得提取物(1)；
第二步，将提取物(1)用甲醇溶解，过硅胶柱分离，二氯甲烷-甲醇不同体积比例洗脱，收集40:1～20:1之间的流分，浓缩、干燥，得黄酮类成分(2)；
第三步，将黄酮类成分(2)用甲醇水溶液溶解，过反相层析柱分离，以不同体积比的甲醇-水溶液洗脱，收集40:1～20:1之间的流分，浓缩干燥即得山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷，HPLC归一化纯度为98％。
结构确证：
HPLC Q-TOF MS负离子模式检测，分子量为739.1885，分子式为C36H36O17。核磁氢谱和碳谱信号归属如下表(DMSO-d6,500MHz)，HMBC二维谱见图1-9：
Figure BDA0001235730180000211
Figure BDA0001235730180000221
综合文献和质谱、H-NMR、C-NMR、HMBC二维谱鉴定其结构为：山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷，化学结构式如下：
Figure BDA0001235730180000222
药理作用：对黄嘌呤氧化酶的抑制作用
实验材料：黄嘌呤氧化酶(Sigma，USA)，酶标仪(ThermoFisher，美国)，黄嘌呤(上海博蕴试剂公司)，其他试剂均购自上海沪试实验室器材股份有限公司。取山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷溶于含有1％DMSO的磷酸盐缓冲溶液，配置成浓度为1mM的母液。黄嘌呤氧化酶用5mL磷酸盐缓冲液配成1U/mL的母液，分装后置于-20℃冰箱保存。每次使用前用缓冲液稀释至0.08U/mL。取一定量的黄嘌呤标准品，加入磷酸盐缓冲液后于45℃水浴30min，再涡旋2min使之充分溶解，配成浓度为0.48mM的标准溶液。
实验方法：制备含有/不含样品的磷酸盐缓冲溶液(75mM，pH7.4)的空白溶液。将含有100μL样品溶液(终浓度为0,15.6,31.25,62.5,125,250,500μM)和50μL 0.08U/mL黄嘌呤氧化酶溶液的反应混合物加入96孔板中，避光室温孵育30分钟。加入50μL的0.48mM黄嘌呤起始反应，在290nm处用酶标仪每隔15秒测量吸光度一次，测定0-300s内吸光度值。所有样品各4个重复，通过Graph Pad Prism version 6.02软件计算酶抑制率和IC 50值。
黄嘌呤氧化酶抑制率根据下列公式计算：
抑制率＝[dA/dt(BLANK)-dA/dt(TEST)]/dA/dt(BLANK)*100
实验结果：不同浓度山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷对黄嘌呤氧化酶抑制率见下表和图9。
Figure BDA0001235730180000231
上述结果证明，山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷是一种有效的黄嘌呤氧化酶抑制剂。含有该黄酮苷的药物组合物具有更为优异神经保护作用，治疗缺血性脑卒中的效果更优。
实施例17：香豆酰基对黄酮苷的减毒增效作用
第一部分：槲皮素-3-O-2”-(6”-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷(缩写QCGR，结构如图10A)与槲皮素-3-O-2”-葡萄糖基鼠李糖苷(缩写QGR，结构如图10B)的神经保护作用
一、实验材料
DMEM高糖培养基、0.25％胰蛋白酶、Gibco胎牛血清；DMSO(美国Sigma公司)；96孔板(美国Corning公司)；多功能酶标仪(Bio-Tek Instruments,USA)；生物安全柜(ThermoFisher Scientific,USA),CO2细胞培养箱(Thermo Fisher Scientific,USA)。
细胞株：本实验应用N2A细胞株是小鼠源性永生化神经细胞。细胞培养于正常含10％胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM(Gibco,USA)的完全培养基中。
溶液配制：无糖Eagles液，分别称取NaCl 6.68g,MgSO4.7H2O 0.2g,CaCl20.2g,NaHCO32.2g,KCl 0.04g,NaH2PO4.2H2O溶于三蒸水中并定容至1L，用0.22μm滤膜过滤分装至无菌瓶内，于4℃冰箱内保存备用。MTT试剂，称取250mg MTT溶于50ml PBS中配制成浓度为5mg/ml的溶液然后用0.22μm的滤膜过滤后分装，-20℃保存。
二、实验方法
1、细胞模型建立(糖氧剥夺模型模拟神经缺血损伤)
N2A细胞培养并接种于细胞培养板中，采用体外氧糖剥夺模型(oxygen andglucose deprivation,OGD)。将培养板中的细胞用Eagles液洗一遍后换成Eagles液，放入参数预先设置好的三气培养箱(气体参数设置为：1％O2,94％N2,5％CO2)，O2浓度降至1.0％时开始计时，培养4h后，将Eagles液换成10％FBS的完全培养基，并置于正常(气体参数设置为：21％O2，74％N2，5％CO2)的细胞培养箱中继续培养。
2、药物干预方法
N2A细胞培养并接种于细胞培养板中，随机分为空白对照组、模型组、QCGR干预组和QGR干预组。预先给予QCGR、QGR培养12h后，对N2A细胞按照上述方法进行糖氧剥夺4h，然后换正常培养基继续培养24h。
3、细胞形态学观察和存活率测定
显微镜下观察各组N2A细胞复糖复氧培养24h的细胞形态学变化。存活率采用MTT法测定：N2A细胞复糖复氧培养24h后每孔避光加入5mg/ml MTT溶液10μl，37℃培养4h，吸出培养基，每孔加入150μl DMSO溶解紫色结晶，在酶标仪上摇匀后490nm下检测吸光度。
4、对神经细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率的影响
按照前述方法对N2A细胞进行造模，N2A细胞复糖复氧培养24h后，每孔取20μl上清液于新的培养板中，加入基质缓冲液25μl混匀，37℃温孵15min，加入2,4-二硝基苯肼25μl混匀，37℃温孵15min，再加入0.4mol/L NaOH溶液250μl混匀，室温放置5min，波长450nm，在酶标仪测定吸光度。乳酸脱氢酶计算公式：LDH活性(U/L)＝(测定OD值-对照OD值)/(标准OD值-空白OD值)×标准品浓度(0.2mmol/L)×1000
三、实验结果
1、细胞形态学变化
N2A细胞在正常培养条件下呈类圆形，有突起，轮廓清晰；OGD培养4h复糖复氧24h后，细胞胞体增大，突起缩短，轮廓不清晰；QCGR干预能抑制N2A细胞形态异常变化。
2、对细胞存活率的影响
采用体外模拟脑缺血再灌注造成神经损伤的神经氧糖剥夺/复糖复氧模型，表17结果表明，模型组与空白对照组相比细胞存活率显著降低，损伤严重，说明造模成功(p<0.01)。与模型组相比，QCGR干预组给药20μM时神经细胞存活率显著提高(p<0.01)，QGR干预组给药80μM时细胞存活率显著提高(p<0.01)。这证明QCGR和QGR均具备神经保护作用，QCGR比QGR的剂量低4倍可达到相同药效。
表17药物干预对神经损伤的保护作用
Figure BDA0001235730180000241
Figure BDA0001235730180000251
3、对神经细胞LDH释放率的影响
缺氧导致细胞膜损伤后细胞内LDH外漏，培养基中LDH活性增高，LDH释放量可以反应细胞的损伤程度。LDH的含量以相对百分含量计，与空白对照组相比，模型组LDH相对含量显著升高(p<0.001)，给予QCGR 20μM、40μM保护可有效减少LDH的释放(p<0.001)。
实验结果见表18。
表18药物干预对神经细胞LDH释放率的影响
Figure BDA0001235730180000252
第二部分：槲皮素-3-O-2”-(6”-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷(缩写为QCGR)与槲皮素-3-O-2”-葡萄糖基鼠李糖苷(缩写为QGR)的细胞毒作用
一、实验材料
DMEM高糖培养基、0.25％胰蛋白酶、Gibco胎牛血清；DMSO(美国Sigma公司)；96孔板(美国Corning公司)；多功能酶标仪(Bio-Tek Instruments,USA)；生物安全柜(ThermoFisher Scientific,USA),CO2细胞培养箱(Thermo Fisher Scientific,USA)。
细胞株：本实验应用N2A细胞株是小鼠源性永生化神经细胞。细胞培养于正常含10％胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM(Gibco,USA)的完全培养基中。
二、实验方法
称取QCGR和QGR溶解于二甲基亚砜中，制备成母液，使用时稀释至所需浓度。N2A细胞培养并接种于细胞培养板中，给予QCGR和QGR培养12h后，每孔避光加入10μl MTT，37℃培养4h，吸出培养基，每孔加入150μlDMSO溶解紫色结晶，在酶标仪上摇匀后490nm下检测吸光度。
三、实验结果
与溶剂组相比，QCGR在测试剂量范围内没有显著的细胞毒性，QGR在200μM时有显著的细胞毒性(p<0.01)，结果见表19。
表19 QCGR和QGR的细胞毒作用
Figure BDA0001235730180000261
实验结果表明，QCGR比QGR具有更高的神经保护活性，且无明显细胞毒性。发明人还比较了另外两对黄酮苷的神经保护活性，其化学结构如图11和12所示，神经保护活性和细胞毒活性比较见表20(其中，相同活性给药剂量比指不同药物干预组N2A细胞存活率达到70％时给药浓度之比；细胞毒中的显著指细胞存活率在85％以下，与溶剂组差异显著；不显著指细胞存活率在93％以上，与溶剂组无显著性差异)。
表20另外两对黄酮苷的神经保护活性和细胞毒大小
Figure BDA0001235730180000262
上表中，山柰酚-3-O-葡萄糖苷缩写为KG，山柰酚-3-O-(6″-p-香豆酰基)-葡萄糖苷缩写为KCG；山柰酚-3-O-2”-葡萄糖基鼠李糖苷缩写为KGR，山柰酚-3-O-2”-(6”-p-香豆酰基)-葡萄糖基鼠李糖苷缩写为KCGR。
发明人分别测试了实施例2-3和实施例13-14组合物对正常N2A细胞的细胞毒作用，结果证明实施例13-14组合物具有一定的细胞毒作用，以200μg/ml的给药浓度作用12h后，与溶剂组比较，细胞存活率显著降低，而实施例2-3组合物与溶剂组无显著差异(溶剂组细胞存活率95.49％，实施例13、14组合物组细胞存活率分别为81.23％、82.18％，实施例2、3组合物组细胞存活率分别为94.18％、95.09％，与溶剂组无显著差异)。
该实施例证实香豆酰基黄酮苷具有神经保护作用，香豆酰基可以增强黄酮苷的神经保护效果，同时降低黄酮苷的细胞毒性。含有该香豆酰基黄酮苷的组合物细胞毒性更低，更安全。
上述实施例仅用于解释本发明技术方案，但本发明要求保护的范围不局限于上述实施例。

Claims (11)

1.一种药物组合物，以组合物总重量为基准，其组成为：
内酯类成分18.1-50.9％；
黄酮类成分48.8-81.8％；
有机酸类成分0.07-6.83％；
其中：
所述内酯类成分含有白果内酯；所述有机酸类成分含有绿原酸；
所述黄酮类成分含有槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素和异鼠李素-3-O-芸香糖苷，重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)，还含有如下化学结构式所示的山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷，其与槲皮素的重量份之比为(1.73-2.59)：(0.088-1.32)；
Figure FDA0002367559790000011
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述内酯类成分还含有银杏内酯B，白果内酯和银杏内酯B的重量份之比为(1.90-4.44)：(0.65-1.57)。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于：所述内酯类成分还含有银杏内酯A和银杏内酯C，白果内酯、银杏内酯B、银杏内酯A和银杏内酯C的重量份之比为(1.90-4.44)：(0.65-1.57)：(1.33-3.12)：(0.6-1.4)。
4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述有机酸类成分还含有原儿茶酸，绿原酸和原儿茶酸的重量份之比为(0.01-0.02)：(1-2.33)。
5.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述黄酮类成分还含有异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素香豆酰基黄酮苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷；所述槲皮素香豆酰基黄酮苷的基本母核为槲皮素，基本母核的C-3位连接糖侧链，香豆酰基连接在其糖侧链上；槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素香豆酰基黄酮苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷的重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)：(1.73-2.59)：(0.043-0.064)：(3.13-4.7)：(1.8-2.71)：(2.36-3.55)。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于：所述槲皮素香豆酰基黄酮苷为槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于：所述黄酮类成分还含有碟豆素和山柰酚香豆酰基黄酮苷；所述山柰酚香豆酰基黄酮苷的基本母核为山柰酚，基本母核的C-3位连接糖侧链，香豆酰基连接在其糖侧链上；槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素香豆酰基黄酮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、碟豆素和山柰酚香豆酰基黄酮苷的重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)：(1.73-2.59)：(0.043-0.064)：(3.13-4.7)：(1.8-2.71)：(2.36-3.55)：(1.24-1.88)：(0.8-1.2)。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于：所述山柰酚香豆酰基黄酮苷为山柰酚-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷。
9.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述内酯类成分为白果内酯；所述有机酸类成分为绿原酸；黄酮类成分由槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷和山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷组成，重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)：(1.73-2.59)。
10.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述内酯类成分由白果内酯、银杏内酯B组成，重量份之比为(1.90-4.44)：(0.65-1.57)；所述有机酸类成分为绿原酸；所述黄酮类成分由槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷组成，重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)：(1.73-2.59)：(0.043-0.064)：(3.13-4.7)：(1.8-2.71)：(2.36-3.55)。
11.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述内酯类成分由白果内酯、银杏内酯B、银杏内酯A和银杏内酯C组成，重量份之比为(1.90-4.44)：(0.65-1.57)：(1.33-3.12)：(0.6-1.4)；所述有机酸类成分由绿原酸、原儿茶酸组成，重量份之比为(0.01-0.02)：(1-2.33)；所述黄酮类成分由槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-7-O-p-香豆酰基-3-O-鼠李糖-(1,2)-葡萄糖苷、异鼠李素、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、碟豆素和山柰酚-3-O-2"-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖基-鼠李糖苷组成，重量份之比为(0.088-1.32)：(0.031-0.047)：(0.024-0.036)：(0.032-0.048)：(2.26-3.39)：(1.73-2.59)：(0.043-0.064)：(3.13-4.7)：(1.8-2.71)：(2.36-3.55)：(1.24-1.88)：(0.8-1.2)。
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