CN115948280A - 一株产淀粉酶菌株r26及其应用 - Google Patents
一株产淀粉酶菌株r26及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115948280A CN115948280A CN202211208851.6A CN202211208851A CN115948280A CN 115948280 A CN115948280 A CN 115948280A CN 202211208851 A CN202211208851 A CN 202211208851A CN 115948280 A CN115948280 A CN 115948280A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- strain
- fermentation
- lotus root
- water
- polysaccharide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 title claims abstract description 20
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 title claims abstract description 20
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 title claims abstract description 20
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 title claims abstract description 20
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 96
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 96
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 96
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 claims abstract description 76
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 claims abstract description 76
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 64
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 64
- 101100019049 Danio rerio irag2 gene Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 101100019051 Mus musculus Irag2 gene Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 claims abstract description 30
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 claims abstract description 12
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 claims abstract 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 27
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 9
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 7
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 7
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 6
- 238000002386 leaching Methods 0.000 claims description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 6
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 claims description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 claims description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 claims description 4
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 abstract description 9
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract description 9
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 abstract description 9
- 239000008107 starch Substances 0.000 abstract description 9
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 abstract description 7
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract description 5
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 4
- 230000002522 swelling effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 3
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 abstract description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 21
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 21
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 14
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 13
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 12
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 10
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 9
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 9
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 9
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 8
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 8
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 7
- 238000002376 fluorescence recovery after photobleaching Methods 0.000 description 7
- 238000011160 research Methods 0.000 description 7
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 6
- 206010016807 Fluid retention Diseases 0.000 description 6
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- -1 antitumor Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 3
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 3
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 2
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 2
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 2
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 2
- 244000082204 Phyllostachys viridis Species 0.000 description 2
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 description 2
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 2
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 description 2
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 2
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 2
- OCZVHBZNPVABKX-UHFFFAOYSA-N 1,1-diphenyl-2-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazine;ethanol Chemical compound CCO.[O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1NN(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 OCZVHBZNPVABKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 3-Epi-Betulin-Saeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-20(29)-Lupen-3,27-oic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C(O)=O)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000153158 Ammi visnaga Species 0.000 description 1
- 235000010585 Ammi visnaga Nutrition 0.000 description 1
- DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N Betulinic acid Natural products CC(=C)[C@@H]1C[C@H]([C@H]2CC[C@]3(C)[C@H](CC[C@@H]4[C@@]5(C)CC[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]5CC[C@@]34C)[C@@H]12)C(=O)O DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N 0.000 description 1
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 1
- 241000207199 Citrus Species 0.000 description 1
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 241000209445 Nelumbonaceae Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GLEVLJDDWXEYCO-UHFFFAOYSA-N Trolox Chemical compound O1C(C)(C(O)=O)CCC2=C1C(C)=C(C)C(O)=C2C GLEVLJDDWXEYCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 1
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N betulinic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C(=C)C)[C@@H]5[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- OAABHEHWRQAHEJ-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCCCO OAABHEHWRQAHEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N dihydrobetulinic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(C)C)C5C4CCC3C21C PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 208000026500 emaciation Diseases 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 229910001447 ferric ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 1
- 238000010413 gardening Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000007407 health benefit Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000002715 modification method Methods 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N nepehinol Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007965 phenolic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001007 puffing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一株产淀粉酶菌株R26，该菌株经鉴定为鼠李糖乳杆菌，因而命名为Lactobacillus rhamnosus R26。利用该菌株对莲藕渣进行微生物发酵得到的莲藕多糖LrMP的DPPH·自由基清除能力和还原能力明显增强，且与LrMP浓度成正相关，LrMP生物活性得到提高；此外，发酵制得的不溶性膳食纤维LrMIDF在持水性、溶胀性和持油性方面均表现出较佳的特性；鼠李糖乳杆菌R26发酵莲藕渣不仅可以提高莲藕多糖的得率并分解淀粉、蛋白质等杂质，而且提高了莲藕多糖的抗氧化能力，增强了莲藕膳食纤维的功能特性，在功能食品方面具有较好的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于微生物领域，具体涉及一株产淀粉酶菌株R26及其应用。
背景技术
多糖是一种可再生资源，它因具有特殊而良好的理化性质及能提供给人类极具使用价值的产品的特性，而被广泛应用于食品、化工、医药、石油等领域。一般由十个以上单糖分子结合在一起组成的生物聚合物称为多糖，多糖聚合物中通常含有几百甚至几千个单糖分子。那些来自天然产物的多糖由于其广泛的药理活性和相对较低的毒性而吸引了越来越多的关注，人们也对多糖及其产品在治疗疾病和获得其他健康益处方面表现出越来越大的兴趣，包括免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、抗凝血、抗衰老和抗感染的特性。其中，多糖的抗氧化性能备受关注，包括多糖的还原能力、抗脂质过氧化、良好的氧自由基、羟基自由基、DPPH·等自由基的清除率，这些都有助于抑制H2O2诱导的红细胞氧化损伤。
莲藕是一种莲科多年生经济水生植物，用途广泛，常被用作食品、药物以及园艺观赏植物。莲藕的主要成分是淀粉、蛋白质以及碳水化合物，新鲜莲藕中淀粉的含量在15％左右，除此之外，莲藕中还含有生物碱、酚酸和桦木酸等对人体健康有益的成分。莲藕中的水溶性多糖物质，已被证实具有抗氧化能力。此外，莲藕多糖还具有抗肿瘤、免疫调节、抗肥胖和抗糖尿病等生物活性。罗登宏等的研究表明，对于患有糖尿病的实验小鼠，莲藕多糖可以有效减轻病症引起的消瘦症状，莲藕多糖的注射量显著影响小鼠的血糖值，显著提高了小鼠的葡萄糖耐受能力，推测是通过莲藕多糖的降糖作用和抗氧化活性来防治糖尿病的，这可能是该研究的主要药理学基础。莲藕多糖还能够防止大脑老化、延缓衰老，改善体内自由基代谢、抗衰老，这些功效的实现都与莲藕多糖的良好抗氧化性能密切相关，莲藕多糖主要通过抑制氧自由基损伤来获得一系列生理功能。
相关研究表明，多糖的来源、提取工艺的不同不仅影响其感官性能和加工性能，而且还会改变其生理活性和功能特性。适当的改性方式可以优化莲藕多糖的制备工艺，提高多糖的品质，增加其商业经济价值。常用的改性方法包括化学法、物理法和生物发酵法。化学法副反应较多，难以人为控制，局限性较大；目前关于物理法的研究较多，常用的技术有超微粉碎技术、挤压膨化技术以及亚临界水萃取技术等。生物发酵法利用微生物发酵原理，分解大分子物质，提高多糖含量的同时优化其理化特性和生物活性。相比于另外两类方法，发酵法被认为是一种相对安全、高效、低成本的高活性多糖制备和改良方法。
而与固体发酵法相比，液体发酵法具有时间短、用工少、生长速度快、操作简单等优点；此外，液体发酵很容易引导代谢途径并增加代谢物产量。基于安全性、适用性、改良型和培养特性等方面考虑，目前研究中涉及的发酵菌种主要是真菌和乳酸菌。乳酸菌发酵制备高活性多糖的过程简单，生产力更高，易于实现工业化生产，而且乳酸菌发酵制品具有其他发酵菌种不具备的特殊清香风味，达到掩盖部分原料原有的不良风味的目的。乳酸菌发酵普遍是利用的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌进行混合发酵。李成忠研究确定了保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合发酵提取柑橘皮渣膳食纤维的最佳条件。李安平等研究了乳酸菌发酵制得的竹笋膳食纤维理化特性和生理活性更好，且还有乳酸发酵液这一副产品可用来生产竹笋乳酸菌保健饮料。因此研究其他乳酸菌发酵提取多糖对于优化植物多糖提取工艺具有一定意义。
而据目前所掌握的信息可知，现有的利用乳酸菌发酵产植物多糖的研究较少，迄今为止还没有利用乳酸菌发酵莲藕提取莲藕多糖的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术中的不足，提供一株产淀粉酶菌株R26，鼠李糖乳杆菌R26可以有效发酵莲藕渣，制备所得的多糖具有更高的得率和更强的抗氧化能力，莲藕膳食纤维的功能特性也在一定程度上得到改善，在功能食品方面具有较好的应用价值，对实现多糖的有效化利用具有较大实际意义。
本发明的技术方案为：本发明所述的一株产淀粉酶菌株R26，该菌株于2022年07月11日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏地址为位于中国武汉的武汉大学，保藏编号为CCTCC NO:M 20221081，菌株R26属于Lactobacillus rhamnosus。
利用菌株R26可发酵制备莲藕微生物发酵水溶性多糖LrMP，LrMP能够提高莲藕多糖的DPPH·自由基清除能力和还原能力，且与LrMP的浓度成正相关。
利用菌株R26可发酵制备不溶性膳食纤维，利用R26发酵得到的膳食纤维的持水性、溶胀性和持油性均得到提高。
上述莲藕微生物发酵水溶性多糖的制备工艺如下：
1)将菌株R26接种至种子培养基中，恒温培养活化；
2)活化后离心过滤，用无菌生理盐水将菌种沉淀洗脱至灭菌后的发酵培养基中；
3)静置发酵，每天搅拌一次；
4)将发酵液于90℃下高温灭菌3h，灭菌混合物即为莲藕微生物发酵液；
5)冷冻干燥发酵液，加水浸提冻干后的莲藕渣，离心过滤，保留上清液，残渣重复浸提，两次上清液合并得到粗多糖溶液；
6)粗多糖溶液旋转蒸发浓缩至1/3体积，Sevag法除去蛋白；
7)透析粗多糖溶液；
8)旋转蒸发浓缩多糖溶液，用三倍体积的80％乙醇醇沉，剧烈搅拌，过夜，分离沉淀，冷冻干燥即得莲藕微生物发酵水溶性多糖。
进一步地，步骤1)中，菌种接种量为2％，接种后于37℃恒温培养箱培养36h。
进一步地，步骤2)中，发酵培养基中菌种的接种量为5％。
进一步地，步骤3)中，发酵温度为37℃，发酵时间为72h
进一步地，步骤5)中，加水浸提时的料液比为1:20，两次浸提过程均在90℃水浴环境下进行，每次浸提3h。
进一步地，步骤7)中，透析过程在4℃纯水中进行，透析时间为48h，白天1h换一次水。
本发明的有益效果是：
1、本申请筛选得到的是一株产淀粉酶菌株，经分类鉴定为鼠李糖乳杆菌，种类学名是Lactobacillus rhamnosus R26；该菌株通过产生淀粉酶、大量有机酸来降解淀粉等杂质并对纤维素等大分子物质进行分解，可用于发酵莲藕进而高效提取莲藕多糖和不溶性膳食纤维；
2、乳酸菌株R26发酵莲藕可以提高莲藕多糖的得率并分解淀粉、蛋白质等杂质；
3、基于菌株R26，利用微生物发酵法制备的莲藕多糖LrMP能够提高莲藕多糖的DPPH·自由基清除能力和还原能力，使得多糖生物活性有所改善；
4、菌株R26发酵莲藕可改善莲藕膳食纤维的功能特性，制备得到的莲藕不溶性膳食纤维LrMIDF在持水性、溶胀性和持油性方面均有提高，在未来的食品应用中具有相应潜力；
5、本申请筛选出的菌株R26可为后续分离纯化各种多糖提供菌种资源，具有较为广阔的市场应用前景，可为生物发酵法制备的植物多糖食品中的开发和利用提供参考。
附图说明
图1是产淀粉酶乳酸菌菌株的透明圈效果图；
图2是菌株R26的16S rDNA基因序列；
图3是菌株R26的16S rDNA系统发育树；
图4是发酵法制备莲藕多糖的工艺流程图；
图5是制得的莲藕多糖的得率、多糖含量和蛋白含量数据统计图；
图6是葡萄糖标准曲线(A)和蛋白质标准曲线(B)；
图7是LrP和LrMP的DPPH·自由基清除率统计表；
图8是LrP和LrMP的FRAP总抗氧化能力数据统计表；
图9是关于莲藕不溶性膳食纤维的得率和功能特性数据的统计图。
具体实施方式
以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改和替换，均属于本发明的范围。
一株产淀粉酶的菌株R26，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏地址为位于中国武汉的武汉大学，保藏编号：CCTCC NO：M 20221081，保藏日期为2022年07月11日。
供试材料及培养基
供试菌株，均来自扬州大学食品质量与安全课题组；莲藕，扬州市邗江区万达广场永辉超市；脱脂奶粉、玉米油，市售；Lugols碘液购自Solarbio公司；MRS肉汤、葡萄糖、胰蛋白胨、可溶性淀粉、牛肉膏、NaCl、琼脂、氯仿、正丁醇、乙醇、苯酚、硫酸，国药集团化学试剂有限公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒、总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)，上海碧云天生物技术有限公司；DPPH·自由基，上海梯希爱化成工业发展有限公司；0.45μm微孔滤膜，天津市津腾实验设备有限公司；透析袋(7000D)，上海源叶生物科技有限公司；96孔细胞培养板，美国Coaster公司；试剂均为分析纯。
MRS Broth培养基(MRS)：MRS肉汤54g、琼脂15g、水定容至1000mL；
MRS Broth液体培养基(MRS)：MRS肉汤54g、水定容至1000mL；
淀粉酶选择培养基：葡萄糖5.0g、胰蛋白胨10.0g、可溶性淀粉10.0g、牛肉膏5.0g、NaCl 5.0g、Agar 17g、水定容至1000mL，121℃高温高压灭菌20min。
1、实验方法
1.1菌株R26的筛选
1.1.1供试菌株
1.1.2产淀粉酶菌株的筛选
从实验室的乳酸菌保藏管中吸取100μL菌液至5mL MRS液体培养基中(按2％接种量)进行菌种活化，置于37℃恒温培养箱中16-24h。将活化后菌株划线培养于固体MRS培养基上，菌落长出后，用灭过菌的牙签挑取单菌落接种至5mL液体MRS培养基中，在37℃培养箱中放置培养16-24h，菌液浑浊后拿出放置于4℃冰箱中待用。用移液枪精确吸取微量菌液(10μL)，交叉点样接种在淀粉酶选择培养基上，置于超净台中自然风干，将培养平板装进密封袋中倒置于37℃恒温培养箱中培养72h。待菌落长出后，通过Lugols碘液染色法确定是否产生透明圈，选取最佳产酶菌株。
最终从35株乳酸菌株中筛选出1株产淀粉酶乳酸菌菌株，产淀粉酶菌株的透明圈效果图见图2：(A)、(B)为菌株LBP2-3，无透明圈；(R26)为菌株R26。由图2可知，菌株R26能分解淀粉酶选择培养基中加入的可溶性淀粉，表明该菌株产生了淀粉酶。而且在乳酸菌株R26发酵过程中能够使得纤维素大分子的糖苷键断裂，从而产生新的还原性末端，这是乳酸菌发酵产生大量有机酸导致的结果。此外莲藕基质纤维的糖苷键断裂，部分不溶性膳食纤维转化成水溶性多糖，提高了水溶性多糖的含量。因此选择菌株R26作为微生物发酵莲藕制备水溶性多糖和不溶性膳食纤维的发酵菌种。
1.2产淀粉酶乳酸菌菌株的鉴定
纯化和活化筛选出的乳酸菌菌株，送至菌株鉴定机构(上海生工生物公司)，得到筛选菌株的16s rDNA序列结果，测序特异性引物为乳酸菌株鉴定通用引物27F/1492R，所得基因序列如图2所示。
将筛选所得乳酸菌株的16s rDNA序列结果在NCBI数据库中进行BLAST在线相似性比对，得到与其同源的乳酸菌株及它们的16s rDNA序列。绘制乳酸菌的16s rDNA的系统发育树(见图3)，从而确定乳酸菌的进化分类地位。
发育树结果表明，R26菌株与鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)聚为一群。说明R26与鼠李糖乳杆菌高度同源，处于同一进化分支。将R26菌株鉴定为鼠李糖乳杆菌，命名为Lactobacillus rhamnosus R26。
1.3水溶性莲藕多糖和不溶性膳食纤维的提取
1.3.1培养基
种子培养基：采用MRS液体培养基
发酵培养基：取150g切片藕片，按V藕:水＝1:2的体积比加水磨浆，分别加2％脱脂奶粉和1.5％蔗糖，置于1000mL锥形瓶，90℃灭菌15min。
1.3.2菌种培养及发酵工艺
每5mL种子培养基接种100μL活化菌种，37℃恒温培养箱放置36h，活化后进行离心过滤(8000rpm，10min)，用微量无菌生理盐水将菌种沉淀洗脱至灭菌后的发酵培养基中，接种量为5％。37℃静置发酵72h，每天搅拌一次，充分发酵。最后将发酵液在90℃高温灭菌3h。灭菌混合物为莲藕微生物发酵液。发酵工艺流程如图4所示，每组实验做三次重复，取平均值作为实测值。
1.3.3提取工艺
将发酵液进行冷冻干燥，精确称取冻干后莲藕渣，做三个平行，料液比为1:20加水，于90℃水浴中浸提3h，离心过滤(6000rpm，10min)，保留上清液，残渣重复在90℃水浴中浸提3h，离心，将两次上清液合并得到粗多糖溶液，待用。
将残渣冷冻干燥，粉碎，得到莲藕微生物发酵不溶性膳食纤维(LrMIDF)，称重。
将粗多糖溶液旋转蒸发浓缩至1/3体积(50℃)。
Sevag法除去蛋白：取粗多糖浓缩液与Sevag(氯仿-正丁醇混合液，v:v为4:1)溶液置于大容量离心管中，比例为4:1，置于摇床中充分混合30min，经过4200rpm离心5min，吸出水相，弃去氯仿相(中间为蛋白质，水层在上，有机层在下)。收集水相，重复上述过程7次，直到振荡后水层不再出现白色泡沫。
将透析装置置于磁力搅拌器上，在4℃纯水中透析48h，白天1h换一次水。旋转蒸发浓缩多糖溶液至10mL左右。用三倍体积的80％乙醇醇沉，剧烈搅拌，过夜，分离沉淀，冷冻干燥即得莲藕微生物发酵水溶性多糖(LrMP)，制备样品均保存于4℃冰箱中。莲藕多糖得率计算如下：
多糖得率(％)＝产物质量/莲藕鲜重×100％。
对照组：将150g切片莲藕按1:20的料液比混合在300mL水中，磨浆处理，加入高温α-淀粉酶，在95℃下孵育30min，直至上清液在液碘中变为蓝色。最后将混合物在90℃高温下灭菌3h。用与上述获得LrMIDF和LrMP相同的方法获得莲藕不溶性膳食纤维(LrIDF)和莲藕水溶性多糖(LrP)，放置在4℃冰箱中保存。
1.4水溶性多糖的理化性质
1.4.1基本组成测定
苯酚-硫酸法测定多糖含量
葡萄糖标准溶液：葡萄糖于105℃下干燥至恒重，精确称取20mg，用超纯水溶解，定容至500mL，即得到0.04mg/mL的葡萄糖标准溶液，备用。吸取0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL葡萄糖标准溶液于试管中，均加水定容至2mL，加入1mL 6％苯酚(1g苯酚，15mL水)，摇匀，快速滴加浓硫酸5mL，室温静置5min，置80℃水浴中加热20min，冰水浴冷却至室温。样品在490nm处有最大紫外吸收，用分光光度法测定样品在该波长下的吸光度，以试剂空白参比。以测定的吸光度为纵坐标，以配制的一系列葡萄糖质量浓度(mg/mL)为横坐标，绘制标准曲线，计算出多糖含量。
(2)蛋白含量测定
样品LrMP和LrP中的蛋白含量采用BCA蛋白浓度测定试剂盒参考其说明书测定。
从图5可以看出，初步纯化的LrMP为莲藕湿重的3.36％，而对照组的LrP为莲藕湿重的0.85％，实验证明菌株R26发酵莲藕能够有效提高莲藕多糖的提取率。LrMP和LrP的色泽均为白色，LrMP为絮状多糖，而LrP呈现粉末状。均易溶于水，均不溶于高浓度的乙醇、正丁醇等有机溶剂。
图6中(A)小图是葡萄糖标准曲线。标准曲线线性回归方程是y＝0.0559x-0.0131(R2＝0.9909，n＝8)。用标准曲线线性回归方程计算得到所制备的LrMP的多糖含量为78.13％，而对照组LrP多糖含量为72.12％，LrMP多糖含量显著高于LrP。
图6中(B)小图是蛋白质标准曲线，所得标准曲线公式：y＝0.8551x+0.0701，其R2＝0.999。由标准曲线可得LrMP和对照组LrP的蛋白含量分别为1.3％和6.4％，说明多糖中仍然含有少量游离或结合蛋白，可能是由于Sevag法除蛋白未能除尽。相同条件下，LrMP的蛋白含量显著少于LrP，推测原因可能是乳酸菌菌株R26发酵能分解蛋白质，提高多糖纯度。从以上结果可以推断出，乳酸菌株R26能够充分利用莲藕中的营养成分进行生长，产生淀粉酶等酶系来降解淀粉、蛋白质等在多糖提取工艺中需要除去的杂质。
1.4.2抗氧化能力测定
多糖的抗氧化机理涉及还原能力、阻止链引发、清除自由基等多个方面，测定DPPH·自由基清除能力和FRAP总抗氧化能力能综合评价微生物发酵法制备所得多糖的抗氧化能力。
(1)DPPH·自由基清除能力的测定
DPPH溶液：称取7.88mg DPPH溶于100mL无水乙醇中，用包裹锡纸的棕色瓶保存于4℃冰箱中，DPPH溶液的终浓度为0.2mmol/L。
待测样品的配制：分别准确称取LrMP和LrP，用纯水溶解，配制系列浓度的样品溶液(0.5、1、2、3和4mg/mL)，90℃水浴1h，0.45μm滤膜过滤后待测。
DPPH溶于乙醇等极性溶剂中时在波长517nm处有最大紫外吸收，DPPH乙醇溶液遇到抗氧化剂后，会发生脱色反应，样品清除DPPH自由基的能力可以通过在517nm波长处吸光度的变化来反映。
取3支试管，试管①中加入2mL的DPPH溶液和2mL待测样品，涡旋，室温下在密闭无光环境中反应30min后，此时测得的吸光度记为Ax；试管②中加入2mL DPPH溶液与2mL无水乙醇，涡旋后测得的吸光度记为A0；试管③中加入2mL待测样品与2mL无水乙醇，涡旋后测得的吸光度记为Ax0，每组做3个平行，取平均值为实测值，以Trolox标准物作为对比。待测样品的DPPH自由基清除率计算公式为：
DPPH·自由基的清除率(％)＝[1-(Ax-Ax0)/A0]×100％。
(2)还原能力的测定
使用总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)进行测定，待测样品的浓度分别为0.5、1、3、5、7mg/mL，制备方法与(1)相同，在波长594nm处测定吸光度，根据标准曲线计算出样品的FRAP总抗氧化能力，用FeSO4标准溶液的浓度来表示样品的抗氧化能力，单位为mmol/g。
从图7可以看出，LrP和LrMP均能够清除DPPH·自由基，在图中所示浓度范围内，清除率随着多糖浓度的升高而增加。但是清除效果并不相同，在同等质量浓度下，LrMP的DPPH自由基清除率均显著高于LrP。LrMP的浓度为3mg/mL时清除率就能达到88.1％，明显高于4mg/mL的LrP所能达到的最高清除率。LrP和LrMP对DPPH·自由基的50％清除率(IC50)的浓度分别为2.64mg/mL和1.54mg/mL。由此可以推测，微生物发酵法制备多糖能够提高莲藕多糖的DPPH·自由基清除能力，使得多糖生物活性有所改善。
图8显示了LrP和LrMP的还原能力，从图中可以看出，在浓度为0.5～7mg/mL范围内，LrP和LrMP对三价铁离子的还原能力随着各自浓度的增加而增强。LrP和LrMP的FRAP总抗氧化能力从0.5mg/mL的0.005、0.01mmol/g最终上升到7mg/mL的0.08、0.35mmol/g。LrMP的FRAP总抗氧化能力明显高于对照组LrP，表明乳酸菌株R26发酵莲藕能够提高莲藕多糖的还原能力，增加其抗氧化活性。
1.5不溶性膳食纤维的功能特性
(1)持水性测定
称定0.5g LrMIDF和LrIDF于烧杯中，量取30mL超纯水倒入烧杯充分搅拌，放置于摇床中常温振荡1h，然后使用布氏漏斗抽滤至样品无游离水析出，于表面皿中称重。样品的初始干重记录为W1(g)，处理后的残留物质重量记录为W2(g)。持水性计算公式为：
WHC(g/g)＝(W2-W1)/W1
(2)溶胀性测定
准确称取LrMIDF和LrIDF各0.4g，置于10mL量筒中，用移液枪移取3mL超纯水于量筒中，搅拌均匀后在室温下静置24h，记录膳食纤维的最终体积。溶胀性计算公式为：
SC(mL/g)＝V/M1
式中：SC是溶胀性；V是膳食纤维的最终体积，mL；M1是样品的初始质量，g。
(3)持油性测定
各称定0.5g的LrMIDF和LrIDF置于培养皿中，平铺均匀后均匀加入8g食用玉米油，在室温条件下静置1h，使用滤纸吸干样品中游离的玉米油，称重。持油性计算公式为：
OHC(g/g)＝(M2-M1)/M1
式中：OHC是持油性；M2是膳食纤维处理后的质量，g；M1是样品的初始干重，g。
制备得到的莲藕不溶性膳食纤维LrMIDF和LrIDF质地轻柔，均呈现不同程度的浅棕色，推测LrMIDF和LrIDF中都含有含量不等的色素未经除去。从图9可以看出，LrMIDF和LrIDF的得率分别为5.01％和3.84％，得率变化并不显著。此外，与对照组LrIDF相比，LrMIDF在持水性、溶胀性和持油性方面表现更佳。虽然发酵后IDF的含量变化不大，但是持水性和持油性都有不同程度的增加，而且LrMIDF和LrIDF的持水性均优于麸皮膳食纤维的质量标准(持水性为4.00g/g)，持水性增强可能是因为LrMIDF的结构更加疏松，颗粒能够更好的与水的接触，从而增加了LrMIDF颗粒的吸水率。而且发酵增加了颗粒的多孔性，使得膳食纤维对油产生物理吸附，导致LrMIDF持油性的提高。LrMIDF的溶胀性是LrIDF的两倍，这是由于发酵后膳食纤维颗粒比表面积增大。高溶胀性物质进入胃中会吸水膨胀，形成高粘度的凝胶、溶胶，使人产生饱腹感。因此，菌株R26发酵莲藕改善了莲藕膳食纤维的功能特性，增加了其在食品中的潜在应用能力。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征及优点。但是以上所述仅为本发明的具体实施例，本发明的技术特征并不局限于此，任何本领域的技术人员在不脱离本发明的技术方案下得出的其他实施方式均应涵盖在本发明的专利范围之中。
Claims (9)
1.一株产淀粉酶菌株R26，其特征在于，该菌株于2022年07月11日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏地址为位于中国武汉的武汉大学，保藏编号为CCTCC NO:M 20221081，菌株R26属于Lactobacillus rhamnosus。
2.如权利要求1所述的菌株R26发酵制备的莲藕微生物发酵水溶性多糖，其特征在于，莲藕微生物发酵水溶性多糖LrMP能够提高莲藕多糖的DPPH·自由基清除能力和还原能力，且与LrMP的浓度成正相关。
3.如权利要求1所述的菌株R26发酵制备的不溶性膳食纤维，其特征在于，利用R26发酵得到的膳食纤维的持水性、溶胀性和持油性均得到提高。
4.如权利要求2所述的莲藕微生物发酵水溶性多糖的制备工艺，其特征在于，具体制备方法如下：
1)将菌株R26接种至种子培养基中，恒温培养活化；
2)活化后离心过滤，用无菌生理盐水将菌种沉淀洗脱至灭菌后的发酵培养基中；
3)静置发酵，每天搅拌一次；
4)将发酵液于90℃下高温灭菌3h，灭菌混合物即为莲藕微生物发酵液；
5)冷冻干燥发酵液，加水浸提冻干后的莲藕渣，离心过滤，保留上清液，残渣重复浸提，两次上清液合并得到粗多糖溶液；
6)粗多糖溶液旋转蒸发浓缩至1/3体积，Sevag法除去蛋白；
7)透析粗多糖溶液；
8)旋转蒸发浓缩多糖溶液，用三倍体积的80％乙醇醇沉，剧烈搅拌，过夜，分离沉淀，冷冻干燥即得莲藕微生物发酵水溶性多糖。
5.如权利要求4所述的莲藕微生物发酵水溶性多糖的制备工艺，其特征在于，步骤1)中，菌种接种量为2％，接种后于37℃恒温培养箱培养36h。
6.如权利要求4所述的莲藕微生物发酵水溶性多糖的制备工艺，其特征在于，步骤2)中，发酵培养基中菌种的接种量为5％。
7.如权利要求4所述的莲藕微生物发酵水溶性多糖的制备工艺，其特征在于，步骤3)中，发酵温度为37℃，发酵时间为72h。
8.如权利要求4所述的莲藕微生物发酵水溶性多糖的制备工艺，其特征在于，步骤5)中，加水浸提时的料液比为1:20，两次浸提过程均在90℃水浴环境下进行，每次浸提3h。
9.如权利要求4所述的莲藕微生物发酵水溶性多糖的制备工艺，其特征在于，步骤7)中，透析过程在4℃纯水中进行，透析时间为48h，白天1h换一次水。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211208851.6A CN115948280A (zh) | 2022-09-30 | 2022-09-30 | 一株产淀粉酶菌株r26及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211208851.6A CN115948280A (zh) | 2022-09-30 | 2022-09-30 | 一株产淀粉酶菌株r26及其应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115948280A true CN115948280A (zh) | 2023-04-11 |
Family
ID=87286441
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211208851.6A Pending CN115948280A (zh) | 2022-09-30 | 2022-09-30 | 一株产淀粉酶菌株r26及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115948280A (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106544300A (zh) * | 2016-11-23 | 2017-03-29 | 扬州大学 | 一种新型发酵果蔬专用乳酸菌组合及发酵剂制备 |
| CN106579416A (zh) * | 2016-11-03 | 2017-04-26 | 广州凯耀资产管理有限公司 | 一种具有改善肠胃功能的多糖多酚组合物及其制备方法 |
| CN106722544A (zh) * | 2016-11-23 | 2017-05-31 | 扬州大学 | 一种新型天然发酵莲藕的制备方法 |
| CN111150758A (zh) * | 2018-11-07 | 2020-05-15 | 江苏省农业科学院 | 从藕节中连续制备多酚、多糖及膳食纤维的方法 |
| KR102258852B1 (ko) * | 2021-02-17 | 2021-07-16 | 주식회사 지에스엘뷰티 | 연류 발효추출물 및 슝기트 성분을 함유하여 제공되는 화장비누 및 그 제조방법 |
| CN114874951A (zh) * | 2022-06-14 | 2022-08-09 | 内蒙古一康健康发展有限责任公司 | 一种新型鼠李糖乳杆菌菌株及其应用 |
-
2022
- 2022-09-30 CN CN202211208851.6A patent/CN115948280A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106579416A (zh) * | 2016-11-03 | 2017-04-26 | 广州凯耀资产管理有限公司 | 一种具有改善肠胃功能的多糖多酚组合物及其制备方法 |
| CN106544300A (zh) * | 2016-11-23 | 2017-03-29 | 扬州大学 | 一种新型发酵果蔬专用乳酸菌组合及发酵剂制备 |
| CN106722544A (zh) * | 2016-11-23 | 2017-05-31 | 扬州大学 | 一种新型天然发酵莲藕的制备方法 |
| CN111150758A (zh) * | 2018-11-07 | 2020-05-15 | 江苏省农业科学院 | 从藕节中连续制备多酚、多糖及膳食纤维的方法 |
| KR102258852B1 (ko) * | 2021-02-17 | 2021-07-16 | 주식회사 지에스엘뷰티 | 연류 발효추출물 및 슝기트 성분을 함유하여 제공되는 화장비누 및 그 제조방법 |
| CN114874951A (zh) * | 2022-06-14 | 2022-08-09 | 内蒙古一康健康发展有限责任公司 | 一种新型鼠李糖乳杆菌菌株及其应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| BAO LE等人: "Polysaccharide Derived from Nelumbo nucifera Lotus Plumule Shows Potential Prebiotic Activity and Ameliorates Insulin Resistance in HepG2 Cells", POLYMERS, 31 December 2021 (2021-12-31), pages 1 - 12 * |
| 刁春仁: "藕渣可溶性膳食纤维的提取分离、结构表征及其对肠道微生物的影响", CNKI优秀硕士学位论文全文库, 15 February 2020 (2020-02-15) * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111436203B (zh) | 一株发酵植物乳杆菌及其用途 | |
| JP5249817B2 (ja) | フルクタン含有食品からの免疫賦活発酵食品 | |
| CN101225121B (zh) | 一种不饱和果胶低聚糖及复合生物防腐剂 | |
| CN106635924B (zh) | 一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的制备及用途 | |
| CN107227278A (zh) | 一种植物乳杆菌a11及其应用 | |
| CN104945527A (zh) | 一种半乳甘露聚糖抗原及其制备方法 | |
| CN113337545A (zh) | 裂褶菌发酵产物及其制备方法、护肤品、裂褶菌培养基 | |
| CN105695347A (zh) | 一种产普鲁兰多糖菌种及其应用、普鲁兰多糖的生产方法 | |
| US5905035A (en) | Fungus useful for chitin production | |
| CN115572738A (zh) | 一种具有抗炎、舒缓和修护功效的铁皮石斛发酵液及其制备方法和应用 | |
| CN108486002B (zh) | 一株产胞外多糖的罗汉果内生菌菌株及其生产胞外多糖的方法和胞外多糖的应用 | |
| CN108410767B (zh) | 纳豆菌及其在发酵菲律宾蛤仔制备活性多糖中的应用 | |
| CN101144064B (zh) | 一种具有抗致突变活性、产胞外多糖的短乳杆菌及其用途 | |
| CN104046585A (zh) | 一种动物双歧杆菌细菌素及其生产方法与专用生产菌株 | |
| CN115948280A (zh) | 一株产淀粉酶菌株r26及其应用 | |
| CN115537286A (zh) | 一种添加植物乳杆菌j26发酵的蓝莓酒及其制备方法 | |
| CN113372463B (zh) | 一种从蒸馏米酒蒸馏残液中提取益生功能糖的方法 | |
| CN116970665B (zh) | 一种金花菌发酵金耳多糖的提取方法及其应用 | |
| CN111961093B (zh) | 一种从荔枝酒蒸馏液中提取低聚糖的方法及其低聚糖的应用 | |
| CN113278549B (zh) | 一株蜡样芽孢杆菌及其应用 | |
| CN115836709B (zh) | 复合海藻酶解物及其在大黄鱼饲料添加剂中的应用 | |
| CN113801798B (zh) | 食腺嘌呤节孢酵母a50菌株、所产胞外多糖及其应用 | |
| CN113881604B (zh) | 一株植物乳杆菌mm89及其多糖和应用 | |
| CN111838474A (zh) | 一种发酵金银花、发酵金银花浓缩液及发酵金银花提取物及其制备方法与应用 | |
| CN110894472B (zh) | 一种湖北麦冬内生青霉属菌菌株及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20240322 Address after: No.88, South University Road, Yangzhou, Jiangsu 225100 Applicant after: YANGZHOU University Country or region after: China Address before: 222200 No. 8, Jingyi Road, Guanyun Economic Development Zone, Lianyungang City, Jiangsu Province Applicant before: JIANGSU INBLUERA BEVERAGE CO.,LTD. Country or region before: China |