CN115927007A - 一株多效植物促生菌塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一株多效植物促生菌塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY‑2及其应用。塔巴雷斯坦拟棘壳孢(Pyrenochaetopsis tabarestanensis)PtWFY‑2，于2021年8月11日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，简称GDMCC，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏号为GDMCC No：61862。本发明提供的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY‑2，对稻瘟病菌菌株(Guy11)具有强烈的抑制作用，具有优异的防治稻瘟病的生防作用，而且该生物来源环保无毒性，对生态环境影响小。

Description

一株多效植物促生菌塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2及其应用

技术领域

本发明属于植物促生菌技术领域，特别涉及一种多效植物促生菌株塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2及其应用。

背景技术

水稻(Oryza sativa)是世界上最重要、消耗最大的粮食作物之一，随着世界人口的不断增长，对其产量的需求不断增加(韩笑等，2019；Tiwari et al.,2017)。目前，促进水稻生长及提高产量的主要方式是使用工业化肥和农药，但存在成本高、环境污染严重和效果不持久等问题。因此，开发和利用微生物肥料提高水稻产量已成为水稻生产中亟需解决的问题，对保障我国粮食安全意义重大。植物促生真菌(Plant growth-promoting fungi，PGPF)是一类重要的有益微生物，能够通过产生植物激素、促进解磷、释钾等作用来促进植物生长及营养元素的吸收和利用，也能够通过产生抗生素、几丁质酶等缓解胁迫对植物和微生物生长带来的影响(Paul et al.,2014)。与传统农业中施用化肥相比，PGPF不仅节省了种植成本，同时还降低了对环境的污染，因此作为新的化肥农药替代品，将在现代绿色可持续农业的发展中发挥不可或缺的作用。

迄今为止，科研人员已经从水稻根系和根际土壤中分离到了一些PGPF，已报道的主要是青霉属(Penicillium)、曲霉属(Aspergillus)、木霉菌属(Trichoderma)、拟青霉属(Paec ilomyces)、镰刀菌属(Fusarium)和被孢霉属(Mortierella)等。其中，青霉属、木霉属、曲霉属和镰刀菌属等是研究较多的水稻促生真菌种类(Syamsia et al.,2015；Khan etal.,2019；Xie et al.,2019)。然而，对在稻田生态系统中广泛分布，约占稻田微生物种类的4.0％～6.6％的拟棘壳孢属真菌的报道较少(Papizadeh et al.,2017；Chen et al.,2020)。因此，进一步研究拟棘壳孢属真菌，将加深对于稻田生态系统中PGPF多样性的理解，为稻田促生真菌资源的开发和利用提供重要的前期基础。

拟棘壳孢属(Pyrenochaetopsis Gruyter,Aveskamp&Verkley,gen.nov)是由deGruyt er et al.于2010年建立的一个新属，属于子囊菌门Ascomycota，座囊菌纲Dothideomycetes，格孢腔菌目Pleosporales，拟棘壳孢科Pyrenochaetopsidaceae(deGruyter et al.,2010；Valenz uela-Lopez et al.,2018)。现有研究发现其具有多种生物学功能，例如，de Gruyter et al.,(2010)的研究指出拟棘壳孢属真菌直接参与调节土壤碳循环中的土壤呼吸作用和土壤酶活性，并且对土壤难溶性碳(有机质等)具有较强的溶解能力；Bai et al.,(2019)的研究报道拟棘壳孢属是影响土壤CO₂排放的一类很重要的真菌；与此同时，Xun et al.,(2020)的研究指出，稻田土壤中拟棘壳孢属真菌的相对丰度与N₂O的释放呈正相关关系，是影响N₂O释放的主要微生物类型。此外，土壤有机碳水平、Zn浓度、生物炭添加等也会影响稻田拟棘壳孢属真菌的分布和生态功能(Zheng et al.,2016；Chen et al.,2020)。但目前对水稻内生拟棘壳孢属真菌的研究较少，具有多效性的拟棘壳孢属真菌种类尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种解无机磷和有机磷、拮抗稻瘟病菌、分泌有机酸和植物激素的水稻促生菌塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2及其应用，该菌是一种新的多效植物根际促生菌，可应用于植物促生剂或微生物肥料的制备。

本发明的第一个目的是提供一株解无机磷和有机磷、拮抗稻瘟病菌、分泌有机酸和植物激素的水稻根系内生促生菌塔巴雷斯坦拟棘壳孢，将其命名为塔巴雷斯坦拟棘壳孢(Pyrenoc haetopsis tabarestanensis)PtWFY-2，于2021年08月11日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，简称GDMCC，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏号为GDMCC No：61862。

本发明的第二个目的是提供塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在溶解无机磷和/或有机磷中的应用。

本发明的第三个目的是提供塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在拮抗稻瘟病菌中的应用。

本发明的第四个目的是提供塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在分泌有机酸和/或植物激素中的应用。

本发明的第五个目的是提供塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在促进水稻生长、磷吸收或土壤磷溶解中的应用。

本发明的第六个目的是提供塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在制备土壤磷素活化剂中的应用。

本发明的第七个目的是提供塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在制备促进水稻生长制剂中的用途。

本发明的第八个目的是提供一种生物制剂，其含有塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2作为活性成分。

所述的生物制剂是解无机磷和有机磷、分泌有机酸、植物激素、促进土壤磷溶解、水稻磷吸收、水稻生长、拮抗稻瘟病菌的微生物菌剂或微生物肥料。

所述的生物制剂是将塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在PDB培养液中培养获得。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果

1.本发明提供的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2为首次从广东省农业科学院水稻研究所大丰基地水稻品种五丰优615根系中分离得到的，能很好地在水稻根系定殖；

2.本发明提供的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2可以分泌19种有机酸，对无机磷(磷酸钙Ca₃(PO₄)₂、磷酸镁Mg₃(PO₄)₂、磷矿粉)和有机磷(植酸钙)都有较好的溶解能力；

3.本发明提供的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2，对稻瘟病菌菌株(Guy11)具有强烈的抑制作用，具有优异的防治稻瘟病的生防作用，而且该生物来源环保无毒性，对生态环境影响小；

4.本发明提供的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2可以分泌30种植物激素，对缺磷胁迫下水稻分蘖期的生物量和根系生长均具有显著的促进作用，对水稻磷吸收和土壤磷溶解也有显著促进效应；

5.本发明得到的塔巴雷斯坦拟棘壳孢，培养条件要求低，且从水稻根系分离得到，能很好地在水稻根系定殖，具有很好的开发应用前景。

附图说明

图1为塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在燕麦培养基上的单菌落图，其中A为塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2正面形态特征，B为塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2背面形态特征，C为塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2产生的厚垣孢子，D为基于ITS rDNA序列同源性构建的PtWFY-2菌株系统发育树；

图2是塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在PVK液体培养条件下的溶磷特性结果。其中A为PtWFY-2菌株在PVK液体培养条件下对Ca₃(PO₄)₂的溶磷效果，B为PtWFY-2菌株在PV K液体培养条件下对Mg₃(PO₄)₂的溶磷效果，C为PtWFY-2菌株在PVK液体培养条件下对磷矿粉的溶磷效果，D为PtWFY-2菌株在PVK液体培养条件下对植酸钙的溶磷效果；

图3为塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2对稻瘟病菌(Guy11)的抑制作用效果图以及对照组图，其中A为塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2菌落形态，B为稻瘟病菌(Guy11)正常生长菌落形态，C为塔巴雷斯坦拟棘壳孢(PtWFY-2)+稻瘟病菌(Guy11)形态；

图4为塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2促进水稻生长和磷吸收的结果组图，其中A为不接菌和接菌对水稻鲜重的影响，B为不接菌与接菌对水稻根体积的影响，C为不接菌与接菌对水稻植株磷含量的影响，D为不接菌与接菌对土壤磷含量的影响。Control和PtWFY-2分别代表不接菌和接菌处理。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1：塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2的分离、纯化、鉴定和保藏

(1)PDA(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)的制备：称取马铃薯200g切成小块与1000m L水混合煮沸30min，过滤后取滤液加去离子水至1000mL，加入葡萄糖20g，琼脂20g，自然pH值，121℃灭菌20min，冷却后贮存备用。

(2)燕麦培养基的制备：称取燕麦片40g，定容至1000ml，加入20g琼脂粉，121℃灭菌20min，冷却后贮存备用。

(3)取样：水稻品种五丰优615根系样品采集于广东省农业科学院水稻研究所大丰基地，将水稻根系样品洗净擦干，装入干净的采样袋(瓶)中，做好标记，于4℃冰箱中保存备用。

(4)分离和纯化：称取水稻根系10g，用体积百分数为70％的酒精浸泡2～3min，再用5％次氯酸钠表面消毒2～10min，最后用无菌水冲洗4次，在无菌滤纸上吸干水分后将样品转入无菌研钵中，加入10mL无菌水碾碎后，静止放置15min，分别取100μL涂布于P DA真菌培养基平板上，每个处理3个重复，28℃恒温培养箱中培养48h-72h。将真菌菌株挑出，纯化分离并多次传代培养，获得菌株PtWFY-2。

(5)鉴定：对上述分离纯化得到的PtWFY-2菌株转移到燕麦培养基上进行真菌形态鉴定，并提取其DNA作为模板，ITS rDNA通用引物为引物，对ITS rDNA核苷酸片段进行扩增，将扩增的片段直接进行序列测定，根据测定结果得出真菌菌株的名称并保藏于菌种保藏中心。

所述的PtWFY-2菌株的ITS rDNA序列的扩增长度为450bp，经同源性比对，与塔巴雷斯坦拟棘壳孢的同源性高达99.77％，结合PtWFY-2菌株形态学特征，鉴定该菌株为Pyrenoc haetopsis属的一个菌株，命名为塔巴雷斯坦拟棘壳孢(Pyrenochaetopsistabarestanensis)Pt WFY-2。

ITS rDNA序列片段如下：

CTTTTGCGTACCGTATGTTTCCTCGGCGGGCTTGCCTGCCGGTTGGACATTATCAAACCTTTTTGTAGTTGCAATCAGCGTCAGAAAATAATAATAATTACAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGAAAAGTAGTGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCCTTGGTATTCCATGGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTTTGTACCCTCAAGCACTGCTTGGTGTTGGGCGCTTGTCCTGCAAAGGACTCGCCTGAAAGCGATTGGCGGCCAACGTACTGGTGGTAGAGCGCAGCACAATTTGCGTCTTTCCCCTCTGCGTTAGCGTCCATGAAGCCTATTTCAACGTTTGACCTCGGATCAGGTAGGGATACCCGCTGAACTTAAGCATAT(SEQ ID NO.1)

所述的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在燕麦培养基上培养，菌落生长迅速。初期菌丝体为白色，无色素，后期颜色逐渐加深，菌丝呈灰褐色，绒状略带絮状，中央呈灰白色，具厚垣孢子。培养14d菌落直径达到50-60mm(见图1)。

(6)保藏：塔巴雷斯坦拟棘壳孢(Pyrenochaetopsis tabarestanensis)PtWFY-2，于2021年8月11日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，简称GDMCC，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏号为GDMCC No：61862。

实施例2塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2的溶磷特性分析

(1)PVK液体培养基的制备：葡萄糖10.0g，NaCl 0.3g，KCl 0.3g，(NH₄)₂SO₄ 0.5g，MgSO₄·7H₂O 0.3g，MnSO₄·4H₂O 0.03g，FeSO₄·7H₂O 0.03g，Ca₃(PO₄)₂/FePO₄/Al PO₄/Mg₃(PO₄)₂/磷矿粉/植酸钙5.0g，定容至1000mL，pH值调节为7.0-7.2，121℃灭菌20min，冷却后贮存备用。

(2)真菌孢子悬浮液制备：将塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2菌株进行活化，将真菌孢子刮入无菌水中制成1.0×10⁶CFU/mL的真菌孢子悬浮液。

(3)塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在PVK液体培养条件下的溶磷特性测定：将塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2孢子悬浮液按体积分数2％的接种量分别接种于以Ca₃(PO₄)₂(5g/L)、FePO₄(5g/L)、AlPO₄(5g/L)、Mg₃(PO₄)₂(5g/L)、磷矿粉(5g/L)和植酸钙(5g/L)作为唯一磷源的PVK液体培养基中，以不接菌培养基制成的悬浮液为对照，每个处理3次重复。28℃恒温摇床分别培养24h、48h、72h、96h、120h、144h和168h后，10000r/min离心10min，采用钼酸铵比色法定量测定上清液中有效磷的浓度，结果如图2所示。

结果分析：塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2对无机磷(Ca₃(PO₄)₂、Mg₃(PO₄)₂、磷矿粉)和有机磷(植酸钙)等难溶性磷酸盐都具有溶解能力。

实施例3塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2对稻瘟病菌(Guy11)生长的抑制效果

(1)PA培养基的制备：称取乳糖5.0g，酵母浸出粉1.0g，西梅汁40mL，琼脂2.0g，去离子水溶解后，终体积定容至1.0L，121℃灭菌20min。

(2)用打孔器从培养5d的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2菌落边缘打取0.6cm的菌饼，接入PDA固体培养基中活化培养5d。

(3)塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2对稻瘟病菌生长的抑制作用测定：

将稻瘟病菌菌饼接种到PA培养皿一点上，4d后将步骤(2)制得的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2接种到于该点相对的点上。实验以单接种塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2(图3A)和单接种稻瘟病菌(图3B)为对照，各设3个重复，置28℃下恒温培养。4d后观察实验结果。

结果分析：如图3所示，塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2对稻瘟病菌菌株(Guy11)具有强烈的抑制作用(图3C)，具有优异的防治稻瘟病的生防作用。

实施例4塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2分泌有机酸的能力分析

(1)菌株发酵液制备：将塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2菌株进行活化，将真菌孢子刮入含磷酸钙的PVK液体培养基中制成1.0×10⁶CFU/mL的真菌孢子悬浮液，摇床28℃，180rpm培养5d，在4℃，12000r·min^-1，离心10min，取上清液放于-80℃冰箱保存。

(2)样本前处理：菌株上清液解冻后，涡旋10s混匀；取上清液50μL(取完样的样本尽快放回-80℃冰箱保存)加入到对应的已编号的1.5mL离心管中，加入250μL 20％乙腈甲醇提取液；涡旋3min后离心，12000r/min，4℃条件下离心10min；离心完后吸取上清液250μL到另一个编好号的1.5mL离心管中，-20℃冰箱中静置30min；12000r/min，4℃条件下再离心10min；移取180μL上清液于进样小瓶中，置于-20℃保存。

(3)色谱质谱采集条件：数据采集仪器系统主要包括超高效液相色谱(UltraPerformance Liquid Chromatography，UPLC)(ExionLC^TMAD，https://sciex.com.cn/)和串联质谱(Tandem Mass Spectrometry，MS/MS)(

6500+，https://sciex.com.cn/)。

(4)液相条件主要包括：色谱柱：ACQUITY HSS T3柱(1.8μm，100mm×2.1mm i.d.)；流动相：A相，超纯水(0.05％甲酸)，B相，乙腈(0.05％甲酸)；梯度洗脱程序：0-8.0min A/B为95:5(V/V)，8.0-9.5min A/B为5:95(V/V)，9.6-12.0min A/B为95:5(V/V)；流速0.35mL/min；柱温40℃；进样量2μL。

(5)质谱条件主要包括：电喷雾离子源(Electrospray Ionization，ESI)温度550℃，正离子模式下质谱电压5500V，负离子模式下质谱电压-4500V，气帘气(Curtain Gas，CUR)35psi。在Q-Trap 6500+中，每个离子对是根据优化的去簇电压(declusteringpotential，DP)和碰撞能(collision energy，CE)进行扫描检测。

(6)定性与定量分析：基于标准品构建MWDB(Metware Database)数据库，对质谱检测的数据进行定性分析。定量是利用三重四级杆质谱的多反应监测模式(MultipleReaction Monitoring，MRM)分析完成。获得不同样本的质谱分析数据后，对所有目标物的色谱峰进行积分，通过标准曲线进行定量分析。结果如表1所示。

表1

结果分析：塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在溶磷过程中可以分泌19种有机酸，含量较高的有机酸为：α-酮戊二酸、丙酮酸、柠康酸、L-苹果酸，分泌有机酸的总量为3930.20ng·m l^-1。

实施例5塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2分泌植物激素的能力分析

(1)菌株发酵液制备：将塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2菌株进行活化，将真菌孢子刮入PDB液体培养基中制成1.0×10⁶CFU/mL的真菌孢子悬浮液，摇床28℃，180rpm培养15d，在4℃，12 000r·min^-1，离心10min，取上清液放于-80℃冰箱保存。

(2)液体样本：取出超低温保存的上清液生物样本，于冰上解冻；移取50μL样本，分别加入10μL浓度为100ng/mL的内标混合溶液，混匀，浓缩至干；浓缩后用100μL 80％甲醇/水溶液复溶，过0.22μm滤膜，置于进样瓶中，用于LC-MS/MS分析。

(3)色谱质谱采集条件：数据采集仪器系统主要包括超高效液相色谱(UltraPerformance Liquid Chromatography，UPLC)(ExionLC^TMAD，https://sciex.com.cn/)和串联质谱(Tandem Mass Spectrometry，MS/MS)(

6500+，https://sciex.com.cn/)。

(4)液相条件主要包括：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C18柱(1.8μm，100mm×2.1mm i.d.)；流动相：A相，超纯水(加入0.04％的乙酸)；B相，乙腈(加入0.04％的乙酸)；梯度洗脱程序：0-1.0min A/B为95:5(V/V)，1.0-8.0min A/B为95:5(V/V)，8.0-9.0min为5:95(V/V)，9.1-12.0min为95:5(V/V)；流速0.35mL/min；柱温40℃；进样量2μL。

(5)质谱条件主要包括：电喷雾离子源(Electrospray Ionization，ESI)温度550℃，正离子模式下质谱电压5500V，负离子模式下质谱电压-4500V，气帘气(Curtain Gas，CUR)35psi。在Q-Trap 6500+中，每个离子对是根据优化的去簇电压(declusteringpotential，DP)和碰撞能(collision energy，CE)进行扫描检测。

(6)定性与定量原理

基于标准品构建MWDB(Metware Database)数据库，对质谱检测的数据进行定性分析。定量是利用三重四级杆质谱的多反应监测模式(Multiple Reaction Monitoring，MRM)分析完成。获得不同样本的质谱分析数据后，对所有目标物的色谱峰进行积分，通过标准曲线进行定量分析。结果如表2所示。

表2

结果分析：塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2可以分泌30种植物激素，含量较高的植物激素为：L-色氨酸、1-氨基环丙烷羧酸、吲哚-3-乙酸，分泌植物激素的总量为1136.96ng·ml^-1。

实施例6塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2对缺磷胁迫下分蘖期水稻的促生效果

(1)水稻种子的消毒和萌发：取适量扬稻6号水稻种子进行杀菌消毒，先用70％乙醇溶液浸泡1min，用灭菌水漂洗1次，用2.5％的次氯酸钠溶液浸泡，37℃振荡灭菌30min，用灭菌水清洗5～6次。将已清洗好的水稻种子放入铺有灭菌双层滤纸的无菌培养皿中，30℃避光培养3d，使种子萌发和露白。

(2)盆栽基质的制备：采用体积比为3:1(v/v)的水稻土与沙子混合得到盆栽基质，然后在121℃灭菌20min，冷却按比例装入水稻盆中，每盆约需300g种植基质。

(3)塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2菌液的制备：取单一菌落的塔巴雷斯坦拟棘壳孢Pt WFY-2进行活化，用接种环轻轻刮取真菌孢子到3mL无菌水中。在显微计数板上计数，用无菌水平衡至孢子数量约为1.0×10⁶CFU/mL。

(4)水稻种植和指标测定：取6粒步骤(1)的水稻种子，用灭菌镊子夹入水稻盆中，将1.0×10⁶CFU/mL塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2菌液按装土质量的2％，以灌根的方式施入土壤，以不接菌培养基制成的悬浮液为对照。随后将水稻盆放入温度和光照保持在30℃、16h光照和24℃、8h黑暗左右的人工气候室中培养，一周后间苗，每盆留3株苗。水稻培养60d左右结束实验，记录水稻的鲜重、根体积、磷含量和土壤总磷含量等指标。

结果分析：盆栽控制实验的结果表明，塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2对水稻生物量、根体积和磷吸收具有显著促进效应，对土壤磷溶解也具有显著促进效应(见图4)。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.塔巴雷斯坦拟棘壳孢(Pyrenochaetopsis tabarestanensis)PtWFY-2，保藏号为GDMCCNo：61862。

2.权利要求1所述的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在溶解无机磷和/或有机磷中的应用。

3.权利要求1所述的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在拮抗稻瘟病菌中的应用。

4.权利要求1所述的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在分泌有机酸和/或植物激素中的应用。

5.权利要求1所述的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在促进水稻生长、磷吸收或土壤磷溶解中的应用。

6.权利要求1所述的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在制备土壤磷素活化剂中的应用。

7.权利要求1所述的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在制备促进水稻生长制剂中的用途。

8.一种生物制剂，其特征在于，含有权利要求1所述的塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2作为活性成分。

9.根据权利要求8所述的生物制剂，其特征在于，所述的生物制剂是解无机磷和有机磷、分泌有机酸、植物激素、促进土壤磷溶解、水稻磷吸收、水稻生长、拮抗稻瘟病菌的微生物菌剂或微生物肥料。

10.根据权利要求8或9所述的生物制剂，其特征在于，所述的生物制剂是将塔巴雷斯坦拟棘壳孢PtWFY-2在PDB培养液中培养获得。

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