CN115843612A - 富铁高钙黑木耳培养种植方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种富铁高钙黑木耳培养种植方法。该方法利用麦麸、黄豆粉、石膏、米糠、培养基助剂、多孔培养载体、硫酸亚铁制备接种袋对黑木耳进行培养种植。与现有技术相比，本发明培养种植的黑木耳具有产量高，铁、钙含量高，降血脂效果好，预防病原菌的优点。

Description

富铁高钙黑木耳培养种植方法

技术领域

本发明涉及食用菌菌种种植技术领域，尤其涉及一种富铁高钙黑木耳培养种植方法。

背景技术

黑木耳属于真菌界，因其颜色发黑，形状似耳，故名黑木耳。在我国黑木耳有上千年食用历史，耳片呈黑色半透明胶质状，质地柔软，味道鲜美，营养及药用价值极高。黑木耳子实体营养丰富，尤其是铁元素含量相当于肉类中100倍，是治疗缺铁性贫血的极佳食品。黑木耳多糖可联合益生菌提升机体的免疫力；可诱导鼠巨噬细胞分泌细胞因子，提升免疫细胞的吞噬能力；黑木耳中黑色素可治疗急性肝损伤；黑木耳中多酚具有较强的自由基清除能力和抑菌作用；同时，黑木耳能够影响血液的凝结，具有化解体内内结石的功效。从黑木耳中分离得到的木耳黑色素，是一种多糖肽，具有增强机体免疫功能的生理活性，分离出来的黑刺菌素具有抗真菌作用，此外还有无机元素、维生素，铁元素等。在黑木耳的培养中，在培养基的制备上采用黄姜渣和木薯杆作为栽培材料，可以促进黑木耳的菌丝生长，同时采用莲壳进行黑木耳栽培试验，可以有效降低成本。

公开号为CN107278618A的发明专利公开了一种富硒黑木耳的种植方法，该方法包括接种、菌袋培养、割口出耳、出耳管理和采收步骤，种植得到的黑木耳钙含量为0.8g/100g，硒含量为0.883mg/kg，但是该方法种植的黑木耳降血脂效果不佳。

发明内容

有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种铁、钙含量高，产量高、降血脂效果好，且无菌害的黑木耳培养种植方法。

为实现上述目的，本发明提供了一种富铁高钙黑木耳培养种植方法，包括以下步骤：

步骤1、搭建大棚：选择向阳、湿度大的土地作为种植园，清理并整平地面，搭建大棚，在大棚两端设置通风门，地面上装日光灯，对大棚进行臭氧消毒，得到消毒后的大棚；

步骤2、菌种培养：将木屑、米糠、稻草、麦麸、黄豆粉、蔗糖混合均匀，加入水调节水含量为55～65wt％，灭菌处理，待冷却至室温，得到黑木耳原种，然后再接种黑木耳母种，接着在25～29℃下培养9～11天即制得菌种；

步骤3、接种培养：在无菌环境中将步骤制备得到的菌种均匀地撒在接种袋内培养基上，完成接种；再将接种后的接种袋转入步骤1消毒后的大棚进行菌丝培养处理，使接种袋内菌丝占满全袋；

步骤4、将步骤3进行菌丝培养处理后的接种袋进行刺孔，接种袋袋面消毒，风干后用已消毒刀片开V形孔，再将接种袋挂入大棚内，通风条件下催芽，当木耳芽出齐后，浇水、通风，每天晚上对木耳开灯照射，至木耳的耳片舒展变软，肉质肥厚耳根收缩，子实体产生白色孢子粉时，采收，得到富铁高钙黑木耳。

进一步优选的，所述富铁高钙黑木耳培养种植方法，包括以下步骤，以重量份计：

步骤1、搭建大棚：选择向阳、湿度大的土地作为种植园，清理并整平地面，搭建大棚，大棚脊高3～4m，肩高2.0～2.5m，长250～300m，宽4～8m，在大棚两端设置通风门，地面上装日光灯，对大棚进行臭氧消毒，得到消毒后的大棚；

步骤2、菌种培养：将20～50份木屑、10～15份米糠、15～25份稻草、10～15份麦麸、15～30份黄豆粉、10～20份蔗糖混合均匀，加入水调节水含量为55～65wt％，加入到容积为600～1000mL瓶中，在135～140℃灭菌锅中灭菌50～60min，待冷却至20～30℃，得到黑木耳原种瓶，然后再接种黑木耳母种，其中1支黑木耳试管母种接种4～6个黑木耳原种瓶，接着在25～29℃下培养9～11天即制得菌种；

步骤3、接种培养：将步骤2制备的育有菌种的黑木耳原种瓶的外壁用浓度为70～80vt％的乙醇水溶液消毒，在无菌环境中将黑木耳原种瓶的菌种均匀地撒在接种袋内培养基上，其中菌种厚度为0.8～1.2cm，完成接种；再将接种后的接种袋转入步骤1消毒后的大棚进行菌丝培养处理，使接种袋内菌丝占满全袋；

步骤4、将步骤3进行菌丝培养处理后的接种袋进行刺孔，用浓度为0.18～0.25wt％的高锰酸钾水溶液清洗袋面，风干后用已消毒刀片开V形孔，再将接种袋以每串5～7个挂入大棚内，最低的接种袋距离地面50～60厘米；在温度为25～30℃，湿度为80～90％，通风条件下催芽，当木耳芽出齐后，晴天早中晚分别对木耳浇水一次，傍晚通风1.5～2.0小时，空气湿度保持在85～90％，阴天湿度合适可不浇水，每天晚上对木耳开灯照射，至木耳的耳片舒展变软，肉质肥厚耳根收缩，子实体产生白色孢子粉时，采收，得到富铁高钙黑木耳。

优选的，所述接种袋的制备方法如下：

将麦麸、黄豆粉、石膏、米糠、培养基助剂、多孔培养载体、硫酸亚铁均匀撒在木屑上，混拌混合均匀，然后再洒水，继续混拌混合均匀，再加入水调节水分含量为60～68wt％，装入耐高温聚丙烯袋中，装完的料袋平整结实，料袋内料中间留孔，将料袋口封闭后塞入孔中，再插入木棍紧固袋口；接着常压灭菌，待温度降至65～75℃时出料，出料时将料袋直接搬入无菌室中冷却至25～30℃，无菌室温度为25～30℃，且无菌室已经提前消毒，得到接种袋。

进一步优选的，所述接种袋的制备方法如下，以重量份计：

将5～10份麦麸、15～35份黄豆粉、0.8～2.2份石膏、10～20份米糠、10～20份培养基助剂、15～30份多孔培养载体、10～25份硫酸亚铁均匀撒在20～50份木屑上，混拌15～45分钟，然后再洒25～55份水，继续混拌15～45分钟，再加入水调节水分含量为60～68wt％，装入耐高温聚丙烯袋中，装完的料袋平整结实，料袋内料高20～24厘米，中间有直径为1.5～2.5厘米、深为18～22厘米的孔，将料袋口封闭后塞入孔中，再插入长为18～20厘米，直径为1.5～2.5厘米的木棍紧固袋口；接着常压灭菌，待温度降至65～75℃时出料，出料时将料袋直接搬入无菌室中冷却至25～30℃，无菌室温度为25～30℃，且无菌室已经提前消毒，得到接种袋。

优选的，所述培养基助剂的制备方法如下，以重量份计：

将2～12份黄原胶、0.5～5份酪蛋白酸钠混合，加入2～8份甘油，再加入390～970份水放置14～16小时，再以400～600转/分钟搅拌1.5～2.5小时，得到混合物A；将10～30份营养助剂加入到10～40份水中，以300～500转/分钟搅拌5～15分钟，再加入到混合物A中，以300～500转/分钟搅拌5～15分钟，得到培养基助剂。

优选的，所述营养助剂制备方法如下，以重量份计：

将10～30份玉米醇溶蛋白溶于1000～3000份浓度为80～90vt％乙醇水溶液中，以300～500转/分钟搅拌1.5～2.5小时，再加入1～5份活性助剂，继续以300～500转/分钟搅拌2～4小时，得到混合溶液B；然后将5～15份甲基纤维素加入到2000～4000份水中，以800～1200转/分钟搅拌4～6小时，再以12～25mL/min滴加混合溶液B，继续以800～1200转/分钟搅拌1.5～3小时，接着在99～110℃蒸发至体积减少83～88％，得到营养助剂。

优选的，所述活性助剂为天麻提取物和银杏叶提取物以质量比为1:(1～3)混合的混合物。

优选的，所述多孔培养载体的制备方法如下，以重量份计：

将50～100份稻草粉碎得到粒径为1～2厘米的稻草秸秆碎片，分两次加入硝酸铵，加入20～50份沙棘叶、10～20份桔子皮，混拌20～45分钟，用水调节含水量为55～65wt％，再以0.2～5wt％干重接种量接种哈兹木霉菌，然后进行堆肥处理、在温度为30～35℃、湿度为55～65％的无光照环境中堆肥，堆肥时间为3～5个月，堆肥过程中每两周进行翻转曝气，得到多孔培养载体。

优选的，所述两次硝酸铵的加入质量与稻草秸秆碎片的质量比分别为0.95:(900～1200)和1.95:(900～1200)。

优选的，所述常压灭菌为在99～110℃保持7～9小时。

优选的，步骤3所述菌丝培养处理为：在接种后的第1～6天，接种袋竖直摆放，当菌丝扩散至培养基内部后，再将接种袋横放，每隔2～3天翻转一次，在接种后的第7～12天，控制培养室温度为18～23℃，在接种12天后，控制温度为25～30℃，湿度控制为60～70％。

优选的，步骤4所述V形孔每边长2～3厘米，深度为2～3厘米。

优选的，步骤4所述挂入大棚的接种袋，每平方米挂10～19串。

本发明利用哈兹木霉菌对稻草秸秆、沙棘叶、桔子皮进行堆肥处理，得到吸附性和保水性强的多孔培养载体，再将多孔培养载体与黄豆粉、培养基助剂等混合，制备得到接种袋。经过哈兹木霉菌堆肥处后的多孔培养载体，无机营养物质增加，黄酮类化合物增加，可在黑木耳培养种植过程中，抵御外来病原菌的侵害，同时提高黑木耳的降血脂作用，纤维素被分解为小分子营养物质为黑木耳提供营养物质，同时其多孔性，使其具有较好的吸附性能，提高接种袋的保水性，有效维持接种袋内培养料的湿度，提高黑木耳的生长效率，同时，有助于培养基助剂在多孔培养载体上的吸附，提高培养基助剂在培养料中的分散性，进一步提高黑木耳的降血脂效果、产量，以及对培养料中外来病原菌的抑制作用。黄豆粉含有大量蛋白质、黄酮类物质和钙、钾、铁等微量元素，可提高黑木耳的降血脂性能，纤维被破坏，更容易为黑木耳提供营养物质，提高黑木耳中铁、钙的含量，同时黄豆粉在黑木耳培养过程中还促进了黑木耳中木耳多糖的生成，进一步提高黑木耳的降血脂作用；培养基助剂是利用黄原胶和酪蛋白酸钠包覆营养助剂得到，营养助剂是用玉米醇溶蛋白与甲基纤维素作为微纳米载体负载天麻提取物和银杏叶提取物制备得到，提高了天麻提取物和银杏叶提取物的热稳定性和生物利用度，且玉米醇溶蛋白和甲基纤维素也为黑木耳的生长提供了氮源、碳源，同时天麻提取物和银杏提取物的加入提高了黑木耳的降血脂性能，抑制了黑木耳培养种植过程中外来病原菌的侵害，提高黑木耳的产量；黄原胶和酪蛋白酸钠包覆营养助剂，为黑木耳生产提供营养物质的同时，可进一步改善营养助剂的稳定性和水溶性，延长对培养料中外来病原菌的抑制时间，进一步提高黑木耳的产量。

由于采用了上述技术方案，与现有技术相比，本发明具有以下优点：1)多孔培养载体的加入，提高了培养料的保水性，增强了黑木耳的降血脂性能和产量，同时提高了对培养料中外来病原菌的抑制性；2)黄豆粉为黑木耳的生长提供了铁、钙、氮源等营养物质，同时还提提高了黑木耳的降血脂性能；3)营养助剂的加入提高了黑木耳的降血脂性能，抑制了黑木耳培养种植过程中外来病原菌的侵害，提高了黑木耳的产量。

具体实施方式

实施例与对比例部分原料来源：黑木耳试管母种：山东耀胜生物科技有限公司，型号：杂交202。耐高温聚丙烯袋：尺寸：直径11.4厘米，长36厘米，厚0.055毫米。玉米醇溶蛋白：西安普瑞斯生物工程有限公司，货号：7852。天麻提取物：陕西新阳禾生物科技有限公司，提取规格：10:1，水溶性，货号：XYH-TM-000。银杏叶提取物：西安全奥生物科技有限公司，体积规格：10:1，水溶性，货号：QA569。甲基纤维素：甲氧基含量：28～32wt％。沙棘叶：沙棘干叶，产自新疆清河县。桔子皮：桔子皮为收集的新鲜桔子皮在60℃干燥至含水量为5％得到。哈兹木霉菌：山东鑫博瑞生物科技有限公司，含量≥99％，货号：02。

实施例1

一种富铁高钙黑木耳培养种植方法如下：

步骤1、搭建大棚：选择向阳、湿度大的土地作为种植园，清理并整平地面，搭建大棚，大棚脊高3.5m，肩高2.2m，长280m，宽6m，在大棚两端设置通风门，地面上装日光灯，对大棚进行臭氧消毒，得到消毒后的大棚；

步骤2、菌种培养：将350g木屑、120g米糠、200g稻草、120g麦麸、250g黄豆粉、150g蔗糖混合均匀，加入水调节水含量为60wt％，加入到容积为750mL广口瓶中，在136℃灭菌锅中灭菌55min，待冷却至25℃，得到黑木耳原种瓶，然后再接入黑木耳母种，其中1支黑木耳试管母种接种5个黑木耳原种瓶，接着在28℃下培养10天即制得菌种；

步骤3、接种培养：将步骤2得到的育有菌种的黑木耳原种瓶的外壁用浓度为75vt％的乙醇水溶液消毒，在无菌环境中将黑木耳原种瓶中的菌种均匀地撒在接种袋内培养基上、菌种厚度为1cm，完成接种；再将接种后的接种袋转入步骤1消毒后的大棚进行菌丝培养处理、菌丝培养处理为：在接种后的第1～6天，接种袋直立摆放，当菌丝扩散至培养基内部后，将接种袋卧放，每隔两天翻转一次，在接种后的第7～12天、控制培养室温度为20℃，在接种12天后、控制温度为28℃、湿度控制为65％，使接种袋内菌丝占满全袋；

步骤4、将步骤3进行菌丝培养处理后的接种袋进行刺孔，用浓度为0.2wt％的高锰酸钾水溶液清洗袋面，风干后用已消毒刀片开V形孔，其中V形孔每边长2.5厘米，深度为2.5厘米，再将接种袋以每6个为一串挂入大棚内、挂入大棚的接种袋每平方米挂14串，最低的接种袋距离地面55厘米；在温度为28℃，湿度为85％，通风条件下催芽，当木耳芽出齐后，晴天早中晚分别对木耳浇水一次，傍晚通风1.5小时，空气湿度保持在86％，阴天湿度合适可不浇水，每天晚上对木耳开灯照射，至木耳的耳片舒展变软，肉质肥厚耳根收缩，子实体产生白色孢子粉时，采收，得到富铁高钙黑木耳。

所述接种袋的制备方法如下：

将8kg麦麸、25kg黄豆粉、1.48kg石膏、15kg米糠、15kg培养基助剂、25kg多孔培养载体、20kg硫酸亚铁均匀撒在40kg木屑上，混拌30分钟，然后再洒40kg水，继续混拌30分钟，再加入水调节水分含量为66wt％，装入耐高温聚丙烯袋中，使装完的料袋平整结实，料袋内料高22厘米，中间有直径为2厘米、深为20厘米的孔，将料袋口封闭后塞入孔中，再插入长为20厘米，直径为2厘米的木棍紧固袋口；接着常压灭菌，其中常压灭菌的条件为在100℃保持8小时，自动降温至70℃时出料，出料时将料袋直接搬入无菌室中冷却至28℃，无菌室温度为28℃，且无菌室已经提前消毒，得到接种袋。

所述培养基助剂的制备方法如下：

将320g黄原胶、120g酪蛋白酸钠混合，加入240g甘油，再加入20000g水放置15小时，再以500转/分钟搅拌2小时，得到混合物A；将800g营养助剂加入到1200g水中，以400转/分钟搅拌10分钟，再加入到混合物A中，以400转/分钟搅拌10分钟，得到培养基助剂；

所述营养助剂制备方法如下：

将800g玉米醇溶蛋白加入64000g浓度为85vt％的乙醇水溶液中，以400转/分钟搅拌2小时，再加入26g天麻提取物、54g银杏叶提取物，继续以400转/分钟搅拌3小时，得到混合溶液B；然后将288g甲基纤维素加入到96000g水中，以1000转/分钟搅拌5小时，再以15mL/min滴加混合溶液B，继续以1000转/分钟搅拌2小时，接着在100℃蒸发至体积减少85％，得到营养助剂；

所述多孔培养载体的制备方法如下：

将70kg稻草粉碎得到粒径为1.5厘米的碎片，分两次分别加入0.06kg和0.15kg硝酸铵，再加入30kg沙棘叶、15kg桔子皮，混拌35分钟，用水调节含水量为60wt％，再以2.5wt％干重接种量接种哈兹木霉菌，然后进行堆肥处理，在温度为33℃、湿度为60％的无光照环境中堆肥，堆肥时间为4个月，堆肥过程中每两周进行翻转曝气，得到多孔培养载体。

对比例1

一种富铁高钙黑木耳培养种植方法与实施例1基本相同，唯一区别在于接种袋的制备方法不同。

所述接种袋的制备方法如下：

将8kg麦麸、1.48kg石膏、15kg米糠、15kg培养基助剂、25kg多孔培养载体、20kg硫酸亚铁均匀撒在40kg木屑上，混拌30分钟，然后再洒40kg水，继续混拌30分钟，再加入水调节水分含量为66wt％，装入耐高温聚丙烯袋中，使装完的料袋平整结实，料袋内料高22厘米，中间有直径为2厘米、深为20厘米的孔，将料袋口封闭后塞入孔中，再插入长为20厘米，直径为2厘米的木棍紧固袋口；接着常压灭菌、常压灭菌为在100℃保持8小时，自动降温，待温度降至70℃时出料，出料时将料袋直接搬入无菌室中冷却至28℃，无菌室温度为28℃，且无菌室已经提前消毒，得到接种袋。

所述培养基助剂的制备方法与多孔培养载体的制备方法与实施例1相同。

对比例2

一种富铁高钙黑木耳培养种植方法与实施例1基本相同，唯一区别在于培养基助剂的制备方法不同。

所述培养基助剂的制备方法如下：

将320g黄原胶、120g酪蛋白酸钠混合，加入240g甘油，再加入20000g水放置15小时，再以500转/分钟搅拌2小时，得到混合物A；加入1200g水，以400转/分钟搅拌10分钟，得到培养基助剂。

所述多孔培养载体的制备方法与实施例1相同。

对比例3

一种富铁高钙黑木耳培养种植方法与实施例1基本相同，唯一区别在于接种袋的制备方法不同。

所述接种袋的制备方法如下：

将8kg麦麸、25kg黄豆粉、1.48kg石膏、15kg米糠、15kg培养基助剂、20kg硫酸亚铁均匀撒在40kg木屑上，混拌30分钟，然后再洒40kg水，继续混拌30分钟，再加入水调节水分含量为66wt％，装入耐高温聚丙烯袋中，使装完的料袋平整结实，料袋内料高22厘米，中间有直径为2厘米、深为20厘米的孔，将料袋口封闭后塞入孔中，再插入长为20厘米，直径为2厘米的木棍紧固袋口；接着常压灭菌、常压灭菌为在100℃保持8小时，自动降温，待温度降至70℃时出料，出料时将料袋直接搬入无菌室中冷却至28℃，无菌室温度为28℃，且无菌室已经提前消毒，得到接种袋。

所述培养基助剂的制备方法与实施例1相同。

对比例4

一种富铁高钙黑木耳培养种植方法与实施例1基本相同，唯一区别在于所述接种袋的制备方法不同。

所述接种袋的制备方法如下：

将8kg麦麸、25kg黄豆粉、1.48kg石膏、15kg米糠、25kg多孔培养载体、20kg硫酸亚铁均匀撒在40kg木屑上，混拌30分钟，然后再洒40kg水，继续混拌30分钟，再加入水调节水分含量为66wt％，装入耐高温聚丙烯袋中，使装完的料袋平整结实，料袋内料高22厘米，中间有直径为2厘米、深为20厘米的孔，将料袋口封闭后塞入孔中，再插入长为20厘米，直径为2厘米的木棍紧固袋口；接着常压灭菌、常压灭菌为在100℃保持8小时，自动降温，待温度降至70℃时出料，出料时将料袋直接搬入无菌室中冷却至28℃，无菌室温度为28℃，且无菌室已经提前消毒，得到接种袋。

所述多孔培养载体的制备方法与实施例1相同。

测试例1

黑木耳中铁、钙元素含量的测定：

参考期刊论文(不同产地黑木耳中矿质元素含量的测定，作者：冯小飞，贵州农业科学，2016)对本发明培养种植的黑木耳进行铁、钙元素含量进行测定，步骤如下：1.利用浓度为1000μg/mL的铁标准储备液和钙标准储备液，用浓度为5vt％硝酸水溶液配制浓度梯度为0μg/mL、0.2μg/mL、0.4μg/mL、0.6μg/mL、0.8μg/mL、1μg/mL的铁溶液和钙溶液，利用电感耦合原子发射光谱测试铁、钙元素吸光值，结合浓度做以各元素浓度为横坐标，吸光值为纵坐标的标准曲线，相关系数都大于0.999；2.将本发明培养种植的黑木耳晾晒干后，粉碎，称取0.5g粉碎后的黑木耳放入烧杯消解罐中，加入9mL浓度为69wt％的硝酸水溶液浸泡，烧杯消解罐口用保鲜膜封住，12小时后将烧杯消解罐在电热板上加热至微沸腾，30分钟后停止加热，取下，冷却至25℃，加入1mL浓度为30wt％双氧水混匀，再缓慢加热至溶液清亮，蒸发至干，停止加热，冷却至70℃，加入1mL浓度为69wt％的硝酸水溶液，缓慢加热至残渣溶解后，停止加热，冷却至25℃，将溶液倒入50mL容量瓶中，用浓度为5vt％硝酸定容，得到待测试样，同时全程做样品空白，用电感耦合原子发射光谱测试铁、钙元素吸光值，根据步骤1的标准曲线，代入吸光值，得到测试样中铁、钙元素的含量，每个样品做3个平行，取平均值，结果见表1。

表1测试结果1

对比实施例1与对比例1～4可以发现，实施例1的铁元素含量和钙元素含量均优于对比例1～4，可能是实施例1中加入的黄豆粉提供了丰富的钙、铁元素，再加上多孔培养载体的作用，使黄豆粉中的微量元素在培养料中扩散，分散均匀，使被黑木耳，提高黑木耳中的钙、铁元素含量。

测试例2

黑木耳的降血脂测试：

参考期刊论文(蛹虫草黄豆粉发酵饮料对小鼠免疫及降血脂功能的影响，作者：朴美子等人，中国食品学报，2016年1月)对本发明培养种植的黑木耳进行降血脂测试，步骤如下：1.选取42只初始质量为18～22g的8周龄昆明种清洁级雄性小鼠，随机分为7组，每组6只，分别为空白组、实验组1、对比组1、对比组2、对比组3、对比组4、高脂模型组；空白组喂食基础饲料，高脂模型组喂食高脂饲料，实验组1、对比组1、对比组2、对比组3、对比组4、喂食含本发明黑木耳含量为50g/kg的高脂饲料，其中高脂饲料包括89％基础饲料、10％猪油、1％胆固醇，每日定时灌胃一次，自由连续灌胃7周，每周记录小时质量一次；2.在小鼠最后一次进食后禁食12小时，眼球取血，静置3小时，在3000转/分钟离心15分钟，取血清用试剂盒做降血脂试验指标检测，测试总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)浓度，结果见表2。

表2测试结果2

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(备注：与高脂模型组相比较：**P＜0.01极显著差异；*P＜0.05，显著差异；与实施例1相比较：##P＜0.01极显著差异；#P＜0.05，显著差异)

由表2可见，空白组小鼠和实施例1小鼠的TG、TC均极显著低于高脂模型组(P＜0.01)，HDL-C均极显著高于高脂模型组(P＜0.01)，说明实施例1具有较好的降血脂效果；对比实施例1与对比例1～4可以发现，对比例1～4小鼠的TG、TC均极显著高于实施例1(P＜0.01)，HDL-C均极显著低于实施例1(P＜0.01)，说明实施例1的降血脂效果优于对比例1～4，可能是实施例的接种袋制备过程中加入了多孔培养载体、黄豆粉、培养基助剂，提高了培养料的保水性，为增强了黑木耳的降血脂性能。

Claims (10)

1.一种富铁高钙黑木耳培养种植方法，其特征在于，包括以下制备步骤：

步骤1、搭建大棚：选择向阳、湿度大的土地作为种植园，清理并整平地面，搭建大棚，在大棚两端设置通风门，地面上装日光灯，对大棚进行臭氧消毒，得到消毒后的大棚；

步骤2、菌种培养：将木屑、米糠、稻草、麦麸、黄豆粉、蔗糖混合均匀，加入水调节水含量为55～65wt％，灭菌处理，待冷却至室温，得到黑木耳原种，然后再接种黑木耳母种，接着在25～29℃下培养9～11天即制得菌种；

步骤3、接种培养：在无菌环境中将步骤制备得到的菌种均匀地撒在接种袋内培养基上，完成接种；再将接种后的接种袋转入步骤1消毒后的大棚进行菌丝培养处理，使接种袋内菌丝占满全袋；

步骤4、将步骤3进行菌丝培养处理后的接种袋进行刺孔，接种袋袋面消毒，风干后用已消毒刀片开V形孔，再将接种袋挂入大棚内，通风条件下催芽，当木耳芽出齐后，浇水、通风，每天晚上对木耳开灯照射，至木耳的耳片舒展变软，肉质肥厚耳根收缩，子实体产生白色孢子粉时，采收，得到富铁高钙黑木耳；

所述接种袋的制备方法如下：将麦麸、黄豆粉、石膏、米糠、培养基助剂、多孔培养载体、硫酸亚铁均匀撒在木屑上，混拌混合均匀，然后再洒水，继续混拌混合均匀，再加入水调节水分含量为60～68wt％，装入耐高温聚丙烯袋中，装完的料袋平整结实，料袋内料中间留孔，将料袋口封闭后塞入孔中，再插入木棍紧固袋口；接着常压灭菌，待温度降至65～75℃时出料，出料时将料袋直接搬入无菌室中冷却至25～30℃，无菌室温度为25～30℃，且无菌室已经提前消毒，得到接种袋。

2.如权利要求1所述的一种富铁高钙黑木耳培养种植方法，其特征在于，所述培养基助剂的制备方法如下，以重量份计：将2～12份黄原胶、0.5～5份酪蛋白酸钠混合，加入2～8份甘油，再加入390～970份水放置14～16小时，再以400～600转/分钟搅拌1.5～2.5小时，得到混合物A；将10～30份营养助剂加入到10～40份水中，以300～500转/分钟搅拌5～15分钟，再加入到混合物A中，以300～500转/分钟搅拌5～15分钟，得到培养基助剂。

3.如权利要求2所述的一种富铁高钙黑木耳培养种植方法，其特征在于，所述营养助剂制备方法如下，以重量份计：

将10～30份玉米醇溶蛋白溶于1000～3000份浓度为80～90vt％乙醇水溶液中，以300～500转/分钟搅拌1.5～2.5小时，再加入1～5份活性助剂，继续以300～500转/分钟搅拌2～4小时，得到混合溶液B；然后将5～15份甲基纤维素加入到2000～4000份水中，以800～1200转/分钟搅拌4～6小时，再以12～25mL/min滴加混合溶液B，继续以800～1200转/分钟搅拌1.5～3小时，接着在99～110℃蒸发至体积减少83～88％，得到营养助剂。

4.如权利要求3所述的一种富铁高钙黑木耳培养种植方法，其特征在于：所述活性助剂为天麻提取物和银杏叶提取物以质量比为1:(1～3)混合的混合物。

5.如权利要求1～4所述的一种富铁高钙黑木耳培养种植方法，其特征在于，包括以下制备步骤，以重量份计：

步骤1、搭建大棚：选择向阳、湿度大的土地作为种植园，清理并整平地面，搭建大棚，大棚脊高3～4m，肩高2.0～2.5m，长250～300m，宽4～8m，在大棚两端设置通风门，地面上装日光灯，对大棚进行臭氧消毒，得到消毒后的大棚；

步骤2、菌种培养：将20～50份木屑、10～15份米糠、15～25份稻草、10～15份麦麸、15～30份黄豆粉、10～20份蔗糖混合均匀，加入水调节水含量为55～65wt％，加入到容积为600～1000mL瓶中，在135～140℃灭菌锅中灭菌50～60min，待冷却至20～30℃，得到黑木耳原种瓶，然后再接种黑木耳母种，其中1支黑木耳试管母种接种4～6个黑木耳原种瓶，接着在25～29℃下培养9～11天即制得菌种；

步骤3、接种培养：将步骤2制备的育有菌种的黑木耳原种瓶的外壁用浓度为70～80vt％的乙醇水溶液消毒，在无菌环境中将黑木耳原种瓶中的菌种均匀地撒在接种袋内培养基上、菌种厚度为0.8～1.2cm，完成接种；再将接种后的接种袋转入步骤1消毒后的大棚进行菌丝培养处理，使接种袋内菌丝占满全袋；

步骤4、将步骤3进行菌丝培养处理后的接种袋进行刺孔，用浓度为0.18～0.25wt％的高锰酸钾水溶液清洗袋面，风干后用已消毒刀片开V形孔，再将接种袋以每串5～7个挂入大棚内，最低的接种袋距离地面50～60厘米；在温度为25～30℃，湿度为80～90％，通风条件下催芽，当木耳芽出齐后，晴天早中晚分别对木耳浇水一次，傍晚通风1.5～2.0小时，空气湿度保持在85～90％，阴天湿度合适可不浇水，每天晚上对木耳开灯照射，至木耳的耳片舒展变软，肉质肥厚耳根收缩，子实体产生白色孢子粉时，采收，得到富铁高钙黑木耳；

所述接种袋的制备方法如下，以重量份计：

将5～10份麦麸、15～35份黄豆粉、0.8～2.2份石膏、10～20份米糠、10～20份培养基助剂、15～30份多孔培养载体、10～25份硫酸亚铁均匀撒在20～50份木屑上，混拌15～45分钟，然后再洒25～55份水，继续混拌15～45分钟，再加入水调节水分含量为60～68wt％，装入耐高温聚丙烯袋中，装完的料袋平整结实，料袋内料高20～24厘米，中间有直径为1.5～2.5厘米、深为18～22厘米的孔，将料袋口封闭后塞入孔中，再插入长为18～20厘米，直径为1.5～2.5厘米的木棍紧固袋口；接着常压灭菌，待温度降至65～75℃时出料，出料时将料袋直接搬入无菌室中冷却至25～30℃，无菌室温度为25～30℃，且无菌室已经提前消毒，得到接种袋。

6.如权利要求1或5所述的一种富铁高钙黑木耳培养种植方法，其特征在于，所述多孔培养载体的制备方法如下，以重量份计：

将50～100份稻草粉碎得到粒径为1～2厘米的稻草秸秆碎片，分两次加入硝酸铵，加入20～50份沙棘叶、10～20份桔子皮，混拌20～45分钟，用水调节含水量为55～65wt％，再以0.2～5wt％干重接种量接种哈兹木霉菌，然后进行堆肥处理、在温度为30～35℃、湿度为55～65％的无光照环境中堆肥，堆肥时间为3～5个月，堆肥过程中每两周进行翻转曝气，得到多孔培养载体。

7.如权利要求6所述的一种富铁高钙黑木耳培养种植方法，其特征在于：所述两次硝酸铵的加入质量与稻草秸秆碎片的质量比分别为0.95:(900～1200)和1.95:(900～1200)。

8.如权利要求1或5所述的一种富铁高钙黑木耳培养种植方法，其特征在于：步骤3所述菌丝培养处理为：在接种后的第1～6天，接种袋竖直摆放，当菌丝扩散至培养基内部后，再将接种袋横放，每隔2～3天翻转一次，在接种后的第7～12天，控制培养室温度为18～23℃，在接种12天后，控制温度为25～30℃，湿度控制为60～70％。

9.一种富铁高钙黑木耳，其特征在于，采用如权利要求1～8任一项所述的方法制备而成。

10.一种培养基助剂，其特征在于，采用如下制备方法制备得到，以重量份计：将2～12份黄原胶、0.5～5份酪蛋白酸钠混合，加入2～8份甘油，再加入390～970份水放置14～16小时，再以400～600转/分钟搅拌1.5～2.5小时，得到混合物A；将10～30份营养助剂加入到10～40份水中，以300～500转/分钟搅拌5～15分钟，再加入到混合物A中，以300～500转/分钟搅拌5～15分钟，得到培养基助剂；

所述营养助剂制备方法如下，以重量份计：

将10～30份玉米醇溶蛋白溶于1000～3000份浓度为80～90vt％乙醇水溶液中，以300～500转/分钟搅拌1.5～2.5小时，再加入1～5份活性助剂，继续以300～500转/分钟搅拌2～4小时，得到混合溶液B；

然后将5～15份甲基纤维素加入到2000～4000份水中，以800～1200转/分钟搅拌4～6小时，再以12～25mL/min滴加混合溶液B，继续以800～1200转/分钟搅拌1.5～3小时，接着在99～110℃蒸发至体积减少83～88％，得到营养助剂；

所述活性助剂为天麻提取物和银杏叶提取物以质量比为1:(1～3)混合的混合物。