CN1157414C - 黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，其特征是采用了过树脂柱工艺或采用超滤、过树脂柱工艺，加上合并提取分离过程中同类成分等手段，最大限度地将黄芪中的多糖和皂甙分离出来，并可得到纯度较高的多糖和皂甙精粉。本发明具有黄芪多糖和黄芪皂甙的提取率和纯度都比较高、生产成本低等优点。

Description

黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法

本发明涉及中药材黄芪的两种有效成分的提取分离方法，即将黄芪中的多糖和皂甙同时提取分离，属于药用植物有效成分的提取分离技术领域。

黄芪(Radix Astragali)是豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.Var.mongholicus(Bge)Hsiao.或膜荚黄芪A.membranaceus(Fisch)Bge.的干燥根，属补益药，味甘，性微温，补气固表，利水托疮，药用历史悠久，药用广泛，在我国产量很大，且畅销国内外。近代药理研究证明，黄芪多糖和黄芪皂甙为黄芪的主要成分，有着广泛的药理作用。目前，黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法主要有水提醇沉法，沉淀用于分离多糖，上清液用于分离皂甙；也可先以醇类有机溶剂提取，再水提药渣，醇提液用于分离皂甙，如需精制，再用正丁醇萃取，想得到单体再过硅胶柱层析，再醇沉水提液得多糖粗品。采用这两种方法，黄芪多糖和皂甙的得率及纯度都较低。

本发明的目的是要提供黄芪多糖和皂甙的得率及纯度都较高的黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法。

为了达到本发明的目的所采取的一种黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，其特征是采用了过树脂柱工艺，具体步骤如下：

1、黄芪原料经乙醇回流提取得醇提液和药渣，分离醇提液得到上清液A、沉淀物A；

2、水提挥去溶剂后的药渣得水提液，浓缩水提液，然后用醇沉法得上清液B和沉淀物B：

3、合并上清液A和上清液B，回收乙醇后，加水稀释、过滤，然后过树脂柱得到流出液，再水洗该树脂柱得到水洗液；然后用乙醇洗脱该树脂柱得洗脱液，真空浓缩该洗脱液回收乙醇，再经干燥、粉碎得到黄芪皂甙粉；

4、合并由步骤1和步骤2得到的沉淀物A和沉淀物B，经干燥、粉碎得到黄芪多糖粉；

5、合并步骤3中得到的树脂柱流出液和水洗液，经浓缩、干燥、粉碎得到黄芪多糖粉。

上述步骤1中的乙醇回流提取可以由两次构成：第一次，加6-8倍重量的乙醇，回流提取2-3小时，得醇提液A，第二次，将药渣加4-8倍重量的乙醇，回流提取1-2小时，得醇提液B，合并醇提液A和B得醇提液；上述步骤2中的水提也可以由两次构成：第一次，加6-10倍重量的水，水提2-3小时，得水提液A，第二次，加4-8倍重量的水，水提1-2小时，得水提液B，合并水提液A和B得水提液。

上述步骤4和5得到的黄芪多糖粉可以合并使用。步骤3中所用树脂柱为AB-8型树脂柱。

实现本发明的目的所采取的另一种黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，其特征在于采取了超滤、过树脂柱工艺，具体步骤是：

1、将黄芪原料经水回流提取得水提液，絮凝水提液，然后超滤，超滤膜为1000-10000道尔顿，得到滤渣和滤出液；

2、将滤出液过树脂柱，得到流出液，再水洗该树脂柱得到水洗液；然后用乙醇洗脱该树脂柱得洗脱液，浓缩该洗脱液回收乙醇，再经干燥、粉碎得到黄芪皂甙粉；

3、干燥、粉碎由步骤1得到的滤渣，即得黄芪多糖粉；

4、合并步骤2中得到的树脂柱流出液和水洗液，经浓缩、干燥、粉碎得到黄芪多糖粉。

上述步骤1中的水回流提取可以由两次构成：第一次，加6-10倍重量的水，水回流提取2-3小时，得水提液A，第二次，加4-8倍重量的水，水回流提取1-2小时，得水提液B，合并水提液A和B得水提液；

上述步骤3和4得到的黄芪多糖粉可以合并使用。步骤1中所用超滤膜为3000～6000道尔顿；步骤2中所用的树脂柱为AB-8型树脂柱。

本发明具有黄芪多糖和黄芪皂甙的提取率和纯度都比较高、生产成本低等优点。

本发明通过AB-8型树脂柱吸附法，超滤法及合并提取分离过程中同类成分等手段，最大限度地将黄芪中的多糖和皂甙分离出来，并可得到纯度较高的多糖和皂甙精粉。由于AB-8树脂是一种球形弱极性聚合物吸附剂，结构上该树脂是一个交联聚合物，在其骨架结构中附加了亲水基团，且具有相当大的比表面和适且的孔径，并且由于该树脂对皂甙有特殊的选择性，适合从水溶液中提取皂甙和某些有机物质。由于吸附树脂柱可通过再生反复使用，所得皂甙纯度较高，是一种产业化容易且经济简便的提取分离方法。另外，研究表明黄芪多糖的分子量多在1万以上，而黄芪皂甙的分子量在1千以下，故此可选择截留分子量为1000-10000的超滤膜根据超滤膜的截留分子量将水提液分为富集多糖和富含甲甙的部分，再利用树脂吸附法精制皂甙，故多糖和皂甙的得率都较高。在本发明中还通过确定提取分离各部分产物的主体成分，采用将同类成分合并的处理方法，进一步提高得率，避免资源浪费。

下面结合实施例和工艺流程对本发明做进一步的说明：

采用本发明的工艺流程(一)：

1、将粉碎((约20目)的黄芪原料经乙醇回流提取(微沸)，第一次(加6-10倍重量的乙醇，2-3小时)→得醇提液A→第二次(加4-8倍重量的乙醇，1-2小时)→得醇提液B(药渣，挥去溶剂后备用)→合并醇提液A、B→静置12-24小时得沉淀物A和上清液A；

2、水提挥去溶剂后的药渣，第一次(6-10倍重量的水，2-3小时)→得水提液A→第二次(4-8倍重量的水，1-2小时)→得水提液B→合并水提液A、水提液B→真空浓缩至1∶1→醇沉(加2-4倍量95％乙醇)得上清液B和沉淀物B；

3、合并上清液A和上清液B，真空浓缩回收乙醇→加3-5倍量水稀释→过滤→过AB-8树脂柱得流出液→乙醇洗脱树脂柱得洗脱液→真空浓缩洗脱液回收乙醇→真空干燥→粉碎(80目以上)→黄芪皂甙粉；

4、合并由步骤1和2得到的沉淀物A和沉淀物B→真空干燥→粉碎(80目以上)→黄芪多糖粉；

5、合并步骤3中得到的树脂柱流出液和水洗液→真空干燥→粉碎(80目以上)→黄芪多糖粉。

工艺流程(一)的特点是：通过醇提、过树脂柱、水提、醇沉将黄芪中的多糖和皂甙充分提取出来，并分别得到黄芪多糖和黄芪皂甙粉，可直接作为药用，也可作为免疫增强剂、保健品等的原料。成品贮存、运输、使用方便。

采用本发明的工艺流程(二)：

1、粉碎(约20目)的黄芪原料→水回流提取，第一次(6-10倍重量的水，2-3小时)→得水提液A→第二次(4-8倍重量的水，1-2小时)→得水提液B→合并水提液A和水提液B→絮凝→超滤(1000-10000道尔顿)得滤渣和滤出液；

2、将滤出液过AB-8树脂柱得流出液→水洗树脂柱得水洗液→乙醇洗脱树脂柱得洗脱液→真空浓缩洗脱液回收乙醇→真空干燥→粉碎(80目以上)→黄芪皂甙粉：

3、由步骤1得到的滤渣→干燥→粉碎(80目)→黄芪多糖粉；

4、合并步骤2中得到的树脂柱流出液和水洗液→浓缩、干燥→粉碎(80目)→黄芪多糖粉；

工艺流程(二)的特点是：多糖提取不需要醇沉，通过超滤，根据截留分子量的大小可得到含量较高的黄芪多糖精粉。超滤的滤出液中富含皂甙，通过树脂柱(AB-8型)的吸附作用，可得到纯度较高的黄芪皂甙。

实施例1：黄芪投料量100公斤，采用本发明的第一种提取分离方法：

1、经粉碎约20目的黄芪原料→75％乙醇回流提取(微沸)，第一次(10倍重量的乙醇，2小时)→得醇提液A→第二次(8倍重量的乙醇，1小时)→得醇提液B(药渣挥去溶剂后备用)→合并醇提液A、醇提液B→静置12小时得沉淀物A和上清液A；

2、水提挥去溶剂后的药渣，第一次(10倍量水，2小时)→得水提液A→第二次(8倍量水，1小时)得水提液B→合并水提液A和水提液B→真空浓缩至1∶1→醇沉(加3倍量95％乙醇)→静置12小时→分离得上清液B和沉淀B；

3、合并上清液A和上清液B→真空浓缩回收乙醇→加5倍量水溶解→过滤→过AB-8型树脂柱，得流出液→水洗该树脂柱，得水洗液→3倍量95％乙醇洗脱树脂柱得洗脱液→真空浓缩洗脱液回收乙醇→真空干燥→粉碎(80目以上)→黄芪皂甙粉；

4、合并由步骤1和步骤2得到的沉淀物A和沉淀物B→真空干燥→粉碎(80目以上)→黄芪多糖粉；

5、合并由步骤3得到的树脂柱流出液和水洗液→浓缩、干燥→粉碎(80目以上)→黄芪多糖粉。

上述实施例提取的结果为：

黄芪多糖18.9公斤，含量54％(以葡萄糖为标准品，分光光度法测定)；

黄芪皂甙2.1公斤，含量83％(以黄芪甲甙为标准品，分光光度法测定)。

实施例2：黄芪投料量2公斤，采用本发明的第二种提取分离方法：

1、经粉碎约20目的黄芪原料→水回流提取(微沸)，第一次提取(10倍重量的水，2小时)，得水提液A→第二次提取(8倍重量的水，1.5小时)，得水提液B→合并水提液A和水提液B→絮凝→上清液超滤(6000道尔顿)，得滤渣和滤出液；

2、将滤出液过AB-8树脂柱，得流出液→水洗该树脂柱，得水洗液→95％乙醇洗脱得洗脱液→真空浓缩该洗脱液回收乙醇→真空干燥→粉碎(80目以上)→黄芪皂甙粉；

3、由步骤1得到滤渣→干燥→粉碎(80目)→黄芪多糖粉；合并由步骤2得到的树脂柱流出液和水洗液→浓缩至1∶1、干燥→粉碎(80目)→黄芪多糖粉。

上述实施例提取的结果为：

黄芪多糖483克，含量64％(以葡萄糖为标准品，分光光度法测定)；

黄芪皂甙24.6克，含量89％(以黄芪甲甙为标准品，分光光度法测定)。

Claims (8)

1、一种黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，其特征是采用了过树脂柱工艺，其具体步骤如下：

1)黄芪原料经乙醇回流提取得醇提液和药渣，分离醇提液得到上清液A、沉淀物A；

2)水提挥去溶剂后的药渣得水提液，浓缩水提液，然后用醇沉法得上清液B和沉淀物B；

3)合并上清液A和上清液B，回收乙醇后，加水稀释、过滤，然后过树脂柱得到流出液，再水洗该树脂柱得到水洗液；然后用乙醇洗脱该树脂柱得洗脱液，浓缩该洗脱液回收乙醇，再经干燥、粉碎得到黄芪皂甙粉；

4)合并由步骤1)和步骤2)得到的沉淀物A和沉淀物B，经干燥、粉碎得到黄芪多糖粉；

5)合并步骤3)中得到的树脂柱流出液和水洗液，经浓缩、干燥、粉碎得到黄芪多糖粉。

2、根据权利要求1所述的黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，其特征在于，其步骤1)中的乙醇回流提取由两次构成：第一次，加6-8倍重量的乙醇，回流提取2-3小时，得醇提液A，第二次，将药渣加4-8倍重量的乙醇，回流提取1-2小时，得醇提液B，合并醇提液A和B得醇提液；其步骤2)中的水提也由两次构成：第一次，加6-10倍重量的水，水提2-3小时，得水提液A，第二次，加4-8倍重量的水，水提1-2小时，得水提液B，合并水提液A和B得水提液。

3、根据权利要求1或2所述的黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，其特征在于，其步骤4)和步骤5)得到的黄芪多糖粉可以合并使用。

4、根据权利要求1或2所述的黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，其特征在于，步骤3)中所用树脂柱为AB-8型树脂柱。

5、一种黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，其特征在于采取了超滤、絮凝、过树脂柱工艺，其具体步骤是：

1)将黄芪原料经水回流提取得水提液，絮凝水提液，然后超滤，超滤膜的截留分子量为1000-10000道尔顿，得到滤渣和滤出液；

2)将滤出液过树脂柱，得到流出液，再水洗该树脂柱得到水洗液；然后用乙醇洗脱该树脂柱得洗脱液，浓缩该洗脱液回收乙醇，再经干燥、粉碎得到黄芪皂甙粉；

3)干燥、粉碎由步骤1得到的滤渣，即得黄芪多糖粉；

4)合并步骤2中得到的树脂柱流出液和水洗液，经浓缩、干燥、粉碎得到黄芪多糖粉。

6、根据权利要求5所述的黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，其特征在于，其步骤1)中的水回流提取由两次构成：第一次，加6-10倍重量的水，水回流提取2-3小时，得水提液A，第二次，加4-8倍重量的水，水回流提取1-2小时，得水提液B，合并水提液A和B得水提液。

7、根据权利要求5或6所述的黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，其特征在于，其步骤3和步骤4得到的黄芪多糖粉可以合并使用。

8、根据权利要求5或6所述的黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，其特征在于，步骤1中所用超滤膜为3000～6000道尔顿；步骤2中所用的树脂柱为AB-8型树脂柱。