CN115735810A - 培育生长速度快的全雄马口鱼的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，该方法经马口鱼幼鱼于室内养殖系统饲料转食、诱导XY的激素饲料A和诱导YY的激素饲料B制作、雌性化诱导、亲本培育与促成熟、YY超雄鱼生产与雌性化诱导、超雄鱼扩群、马口鱼快长品系选育和全雄马口鱼生产的八大步骤培育得到全雄马口鱼；本发明针对马口鱼特殊的生物学特点，结合性别控制育种、群体选育、苗种规模化繁育、驯食人工配合饲料、亲本强化培育等技术措施，可培育生长速度提升35％‑48％的全雄马口鱼新品系，雄性率达95％以上。激素处理仅用于亲本在幼鱼阶段的性逆转方面，商品化的苗种未有激素处理，也不存在激素残留问题，是一种健康的、可持续的培育方式。
Description
技术领域
本发明涉及鱼类遗传育种和性别控制技术领域，具体涉及一种培育生长速度快的全雄马口鱼的方法。
背景技术
马口鱼(Opsariichthys bidens)，是一种小型肉食性鱼类，被称为“鱼中极品”，其人体所必需的多不饱和脂肪酸脑黄金(即DHA)含量丰富，是常见海淡水鱼类大黄鱼、黄颡鱼、鳜、翘嘴鲌等的2倍以上，动脉粥样硬化指数和血栓形成指数远低于猪牛羊肉，经常食用能有效降低胆固醇，增强免疫力，防治动脉硬化、冠心病，孕妇和儿童经常食用有助于儿童脑部发育，是最优质的水产品之一。马口鱼同时也是湖北特色七条鱼的成员之一。马口鱼曾在全国各处小溪或江河支流中广泛分布，由于其味道鲜美、营养丰富、肌间刺熟后较软，又是垂钓爱好者最喜爱的野生鱼类之一，人为的过度捕捞和生境破坏导致马口鱼野生资源量锐减。
近5年来，马口鱼受到众多消费者的欢迎，形成了初具规模的养殖产业。规格1两以上成鱼塘口价高于50元/kg，1.5两以上个体达70元/kg，是老百姓爱吃、养殖户能挣钱的新兴特色养殖品种。但是马口鱼生长速度较慢，且存在巨大的雌雄生长差异(附图1)，雄鱼生长速度较雌鱼快50％以上。同时其性成熟时间短、性成熟规格小，人工养殖条件下，6个月左右、规格在20g左右时雌鱼便达性成熟。雌鱼性成熟之后，生长速度进一步减缓。此外，马口鱼雄鱼在生殖季节期间，体表有10余条彩带状的条纹，非常漂亮，是众多水族缸中的新宠。
因此，不论从养殖产业，还是从颇具潜力的观赏鱼产业来讲，培育生长速度快的全雄马口鱼是产业发展的迫切需要，也是提升老百姓幸福指数的重要举措。然而，马口鱼多数属于野生群体，未经过足够时间的驯养，人工繁殖、苗种培育、饲料驯化等技术问题都未完全攻克，性别分化的时间进程、性激素诱导性逆转研究更是完全未知。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，该方法创新地结合性别控制育种与群体选育，规模化地培育生长速度快的全雄马口鱼。
为实现上述目的，本发明所设计的技术方案如下：
本发明还提供了一种培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，包括以下步骤：
(1)马口鱼幼鱼于室内养殖系统饲料转食：
a.1-3日龄期间，分别在8点、12点、16点、20点四个时间开灯、停气20-30分钟(培养幼鱼对灯光的敏感性和集群习性，为建立条件反射打好基础)；
b.在4-7日龄期间，开灯停气时用蛋黄浆进行开口投喂，建立条件反射；
c.8-10日龄将蛋黄浆与活丰年虫按质量比1:1-4进行混合投喂，
d.从11日龄开始，完全投喂活丰年虫，之后起至13日龄过渡至冷藏丰年虫；
e.13-17日龄期间，冷藏丰年虫中逐步增加微粒饲料的比例，直至18日龄完全进行饲料投喂；
(2)诱导XY的激素饲料A和诱导YY的激素饲料B制作：
将17β-雌二醇溶于体积份数为85-95％乙醇中，均匀喷洒在饲料表面，制作成诱导XY的激素饲料A；其中，每千克(kg)的诱导XY的激素饲料A中，17β-雌二醇含量为50mg-150mg；
将17β-雌二醇溶于体积份数为85-95％乙醇中，均匀喷洒在饲料表面，制作成诱导YY的激素饲料B；其中，每千克(kg)的诱导YY的激素饲料B中，17β-雌二醇含量为125mg-200mg；
用喷壶喷洒激素溶液到饲料表面，边拌边喷，将激素均匀地喷洒于饲料表面，经通风处凉干，酒精完全挥发后，保存于冰箱备用；其中最佳酒精浓度为95％。
(3)雌性化诱导：
从18日龄至76日龄，投喂诱导XY的激素饲料A，将遗传型XY雄鱼性逆转为生理型雌鱼，即为伪雌鱼亲本；
(4)亲本培育与促成熟：
在秋季与春季亲本强化阶段，先用马口鱼亲本饲料对伪雌鱼亲本进行亲本培育；然后从繁殖前2个月开始，以15天为一个周期，用剂量为0.5-1ug/kg的LRH-A2进行催熟处理，促进伪雌鱼亲本发育成熟；
上述促熟激素(LRH-A2)用量低于0.1mL/每尾，并避免操作引起亲鱼损伤。
(5)YY超雄鱼生产与雌性化诱导：
首先对步骤(4)发育成熟的伪雌鱼进行测交，测交后的伪雌鱼与正常雄鱼进行配对产卵，生产YY超雄鱼并利用诱导YY的激素饲料B诱导其转为生理雌鱼，即为YY雌鱼(伪雌鱼是经过测交，以子代性别比例进行的判断，激素诱导与测交同时进行。子代性别在2-3月龄时，用肉眼观察、以醋酸洋红染色辅助进行判断)；
(6)超雄鱼扩群：
将YY雌鱼按步骤(4)的方法进行亲本培育与促成熟，然后将发育成熟与YY超雄鱼进行繁殖，获得大量超雄鱼群体；
(7)马口鱼快长品系选育：
利用不同地域来源的马口鱼群体作为基础选育群体，以生长为目标，利用规格筛，将体宽个体选育出来作为亲本，按照选育强度为10-20％的标准重复群体选育四代，培育长速快的马口鱼品系；
(8)全雄马口鱼生产：
利用含有维生素与鱼油的亲本饲料对步骤(7)得到马口鱼品系的雌鱼进行营养强化培育，然后将其与步骤(6)得到雄鱼进行规模化人工繁殖，获得大量长速快的全雄马口鱼。
进一步地，所述步骤(1)中，室内养殖系统的水温为22-29℃(超过30℃将严重影响雌性化诱导效果)。
再进一步地，所述步骤(1)第c步中，投喂的具体步骤如下：
①8日龄，将蛋黄浆与活丰年虫按质量比1:1进行混合投喂；
②9日龄，将蛋黄浆与活丰年虫按质量比1:2进行混合投喂；
③10日龄，将蛋黄浆与活丰年虫按质量比1:4进行混合投喂。
上述活丰年虫投喂的活丰年虫是新鲜孵化的，将盐度从孵化时的1.5％降低至0.6％，进行保活处理。
再进一步地，所述步骤(1)第e步中，微粒饲料为日清丸红微粒饲料或山东升索微囊饲料；其中，所述微粒饲料为颜色呈棕红色，与丰年虫颜色相近。
再进一步地，所述步骤(2)中，投喂激素饲料前，马口鱼幼鱼全长小于15mm(便于有效进行雌性化诱导)。
再进一步地，所述步骤(4)中，催熟处理的促熟激素注射部位选择背部肌肉注射(因为腹腔注射影响卵巢发育，胸腔注射易针刺入心脏而导致死亡)。
再进一步地，所述步骤(4)中，马口鱼亲本饲料为马口鱼营养需求相当的其他鱼类亲本饲料，
或者，马口鱼亲本饲料为在成鱼养殖饲料中额外加入添加品；其中，添加品为微生素、矿物元素和鱼油中任意一种或多种。
再进一步地，所述步骤(7)中，马口鱼快长品系选育具体步骤如下：
利用来自湖北长阳、长江流域武汉段、江西吉安三处野生马口鱼为基础群体，首先在人工繁殖后，在暂养池中淘汰2-5％的较弱苗种；下池塘培育至10月龄时，利用规格筛，选育强度为10-20％，将体宽个体选育出来作为亲本，开展人工繁殖；按照选育强度为10-20％的标准重复群体选育四代，培育出生长速度较未选育种群快16％-21％的马口鱼新品系。
上述马口鱼快长品系选育时，由于马口鱼雄鱼生长速度为雌鱼2-3倍，在开展体宽个体挑选前，应当通过体表条纹、挤压有精液、胸鳍有追星等特征将雌雄鱼完全分开，再进行有效挑选。
再进一步地，所述步骤(8)中，亲本饲料中，维生素添加量为维生素A 1000-3000IU/kg，维生素C1-1.5g/kg，维生素E 30-50mg/kg，鱼油添加量为饲料量的0.5％-2.0％。
再进一步地，所述步骤(8)得到大量长速快的全雄马口鱼比普通未选育的雌雄混合马口鱼生长速度提升35％-48％，雄性率达95％以上。
本发明的有益效果：
1.本发明结合性别控制和群体选育两项核心技术，培育生长速度快的全雄马品鱼品系，生长速度较未选育的雌雄混合群体提升35％-48％。此外，养殖全雄品系，能减少雌鱼性成熟而引起的饲料系数高、生长减慢等问题，能节约成本，提高效益。生长速度的提升，能将养殖周期从6个月缩短至5个月，增加了资金周围率，降低了养殖风险。
2.本发明中所有涉及的鱼苗和亲本养殖均杜绝了活鱼、冰鲜鱼、鱼浆等的投喂，其中鱼苗是从蛋黄过渡到丰年虫再过渡到饲料，亲本是利用亲本专用培育饲料或在普通饲料中进行营养强化，从而实现避免活鱼等的亲本强化的方式，是环境友好型的生产方式，符合国家水产绿色健康养殖技术推广“五大行动”指南。
综上所述：本发明针对马口鱼特殊的生物学特点，结合性别控制育种、群体选育、苗种规模化繁育、驯食人工配合饲料、亲本强化培育等技术措施，可培育生长速度提升35％-48％的全雄马口鱼新品系，雄性率达95％以上。激素处理仅用于亲本在幼鱼阶段的性逆转方面，商品化的苗种未有激素处理，也不存在激素残留问题，是一种健康的、可持续的培育方式。
附图说明
图1为马口鱼同一群体雌雄生长差异示意图。
图中雄鱼体重为雌鱼体重的2.6倍，显示雌雄间的巨大生长差异。
图2为结合性控育种与群体选育技术培育生长速度快的全雄马口鱼流程图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细描述，以便本领域技术人员理解。
如图2所示的培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，包括以下步骤：
(1)马口鱼幼鱼于室内养殖系统饲料转食：
人工繁殖获得马口鱼苗种放入水温为22-29℃的室内养殖系统进行饲料转食：
a.1-3日龄期间，分别在8点、12点、16点、20点四个时间开灯、停气20-30分钟；
b.在4-7日龄期间，开灯停气时用蛋黄浆进行开口投喂，建立条件反射；
c.8-10日龄将蛋黄浆与活丰年虫进行混合投喂，其中，此时投喂的丰年虫是新鲜孵化的，将盐度从孵化时的1.5％降低至0.6％，投喂的具体步骤如下：
①8日龄，将蛋黄浆与活丰年虫按质量比1:1进行混合投喂；
②9日龄，将蛋黄浆与活丰年虫按质量比1:2进行混合投喂；
③10日龄，将蛋黄浆与活丰年虫按质量比1:4进行混合投喂；
d.从11日龄开始，完全投喂活丰年虫，之后起至13日龄过渡至冷藏丰年虫；
e.13-17日龄期间，冷藏丰年虫中逐步增加微粒饲料的比例，直至18日龄完全进行饲料投喂；其中，所投喂微粒饲料为日清丸红微粒饲料或山东升索微囊饲料，其颜色呈棕红色，与丰年虫颜色相近；马口鱼18日龄完全投喂饲料时全长平均值为14.5mm；
(2)诱导XY的激素饲料A和诱导YY的激素饲料B制作：
将17β-雌二醇溶于体积份数为95％乙醇中，均匀喷洒在饲料表面，制作成诱导XY的激素饲料A；其中，每千克的诱导XY的激素饲料A中，17β-雌二醇含量为100mg；试验发现，使用100mg/kg雌二醇处理，雌性率能达到100％，其他激素及浓度诱导雌性率结果如下表1：
表1 17β-雌二醇与乙炔雌二醇诱导马口鱼雌性率效果
| 处理激素与浓度 | 雌性率％ |
| 17β-雌二醇50mg/kg | 75.0 |
| 17β-雌二醇100mg/kg | 100.0 |
| 乙炔雌二醇50mg/kg | 18.8 |
| 乙炔雌二醇100mg/kg | 31.2 |
将17β-雌二醇溶于体积份数为95％乙醇中，均匀喷洒在饲料表面，制作成诱导YY的激素饲料B；其中，每千克的诱导YY的激素饲料B中，17β-雌二醇含量为150mg-200mg；
用喷壶喷洒激素溶液到饲料表面，边拌边喷，将激素均匀地喷洒于饲料表面，经通风处凉干，酒精完全挥发后，保存于冰箱备用；
(3)雌性化诱导：
从18日龄至76日龄，投喂诱导XY的激素饲料A(18至45日龄为性别分化关键时期，必须进行激素投喂，才能有效诱导雌性化)，将遗传型XY雄鱼性逆转为生理型雌鱼，即为伪雌鱼亲本；
(4)亲本培育与促成熟：
在秋季与春季亲本强化阶段，先用马口鱼亲本饲料对伪雌鱼亲本进行亲本培育；然后从繁殖前2个月开始，以15天为一个周期，用剂量为0.5-1ug/kg的LRH-A2进行催熟处理，促进伪雌鱼亲本发育成熟；其中，
马口鱼亲本饲料为马口鱼营养需求相当的其他鱼类亲本饲料，
或者，马口鱼亲本饲料为在成鱼养殖饲料中额外加入添加品；且添加品为微生素、矿物元素和鱼油中任意一种或多种；催熟处理的促熟激素注射部位选择背部肌肉注射；(5)YY超雄鱼生产与雌性化诱导：
首先对步骤(4)发育成熟的伪雌鱼进行测交，测交后的伪雌鱼与正常雄鱼进行配对产卵，生产YY超雄鱼并利用诱导YY的激素饲料B诱导其转为生理雌鱼，即为YY雌鱼；其中，伪雌鱼是经过测交，以子代性别比例进行的判断，激素诱导与测交同时进行；子代性别在2-3月龄时，用肉眼观察、以醋酸洋红染色辅助进行判断。测交后代一半进行性别鉴定，另一半进行雌二醇激素诱导。上述诱导YY的激素饲料B诱导YY超雄鱼的雌性诱导率达到100％，与诱导XY遗传型有区别。
(6)超雄鱼扩群：
将YY雌鱼按步骤(4)的方法进行亲本培育与促成熟，然后将发育成熟与YY超雄鱼进行繁殖，获得大量超雄鱼群体；
(7)马口鱼快长品系选育：
利用来自湖北长阳、长江流域武汉段、江西吉安三处野生马口鱼为基础群体，首先在人工繁殖后，仔鱼4-6日龄期间在暂养池中淘汰2-5％的较弱苗种。下池塘培育至10月龄时，利用规格筛，选育强度为10-20％，将体宽个体选育出来作为亲本，开展人工繁殖。按照选育强度为10-20％的标准重复群体选育四代，培育出生长速度较未选育种群快16％-21％的马口鱼新品系。马口鱼雄鱼生长速度为雌鱼2-3倍(图1)，在开展体宽个体挑选前，通过体表条纹、挤压有精液、胸鳍有追星等特征将雌雄鱼分开，在雌雄各自群体中进行大个体选择，挑选后进行分开或单独饲养。其中由于人工繁殖中所需要雄鱼数量较少，一般按雌雄比10：1进行挑选。
(8)全雄马口鱼生产：
利用含有维生素与鱼油的亲本饲料对步骤(7)得到马口鱼品系的雌鱼进行营养强化培育，然后将其与步骤(6)得到雄鱼进行规模化人工繁殖，获得大量长速快的全雄马口鱼；且该大量长速快的全雄马口鱼比普通未选育的雌雄混合马口鱼生长速度提升35％-48％，雄性率达95％以上；其中，亲本饲料中，维生素添加量为：维生素A1000-3000IU/kg，维生素C1-1.5g/kg，维生素E 30-50mg/kg，鱼油添加量为饲料量的0.5％-2.0％；不添加维生素时，繁殖出的仔鱼中有5％以上的畸形率。
其它未详细说明的部分均为现有技术。尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。
Claims (10)
1.一种培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)马口鱼幼鱼于室内养殖系统饲料转食：
a.1-3日龄期间，分别在8点、12点、16点、20点四个时间开灯、停气20-30分钟；
b.在4-7日龄期间，开灯停气时用蛋黄浆进行开口投喂，建立条件反射；
c.8-10日龄将蛋黄浆与活丰年虫按质量比1:1-4进行混合投喂，
d.从11日龄开始，完全投喂活丰年虫，之后起至13日龄过渡至冷藏丰年虫；
e.13-17日龄期间，冷藏丰年虫中逐步增加微粒饲料的比例，直至18日龄完全进行饲料投喂；
(2)诱导XY的激素饲料A和诱导YY的激素饲料B制作：
将17β-雌二醇溶于体积份数为85-95％乙醇中，均匀喷洒在饲料表面，制作成诱导XY的激素饲料A；其中，每千克的诱导XY的激素饲料A中，17β-雌二醇含量为50mg-150mg；
将17β-雌二醇溶于体积份数为85-95％乙醇中，均匀喷洒在饲料表面，制作成诱导YY的激素饲料B；其中，每千克的诱导YY的激素饲料B中，17β-雌二醇含量为125mg-200mg；
(3)雌性化诱导：
从18日龄至76日龄，投喂诱导XY的激素饲料A，将遗传型XY雄鱼性逆转为生理型雌鱼，即为伪雌鱼亲本；
(4)亲本培育与促成熟：
在秋季与春季亲本强化阶段，先用马口鱼亲本饲料对伪雌鱼亲本进行亲本培育；然后从繁殖前2个月开始，以15天为一个周期，用剂量为0.5-1ug/kg的LRH-A2进行催熟处理，促进伪雌鱼亲本发育成熟；
(5)YY超雄鱼生产与雌性化诱导：
首先对步骤(4)发育成熟的伪雌鱼进行测交，测交后的伪雌鱼与正常雄鱼进行配对产卵，生产YY超雄鱼并利用诱导YY的激素饲料B诱导其转为生理雌鱼，即为YY雌鱼；
(6)超雄鱼扩群：
将YY雌鱼按步骤(4)的方法进行亲本培育与促成熟，然后将发育成熟与YY超雄鱼进行繁殖，获得大量超雄鱼群体；
(7)马口鱼快长品系选育：
利用不同地域来源的马口鱼群体作为基础选育群体，以生长为目标，利用规格筛，将体宽个体选育出来作为亲本，按照选育强度为10-20％的标准重复群体选育四代，培育长速快的马口鱼品系；
(8)全雄马口鱼生产：
利用含有维生素与鱼油的亲本饲料对步骤(7)得到马口鱼品系的雌鱼进行营养强化培育，然后将其与步骤(6)得到雄鱼进行规模化人工繁殖，获得大量长速快的全雄马口鱼。
2.根据权利要求1所述培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，室内养殖系统的水温为22-29℃。
3.根据权利要求1所述培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，其特征在于：所述步骤(1)第c步中，投喂的具体步骤如下：
①8日龄，将蛋黄浆与活丰年虫按质量比1:1进行混合投喂；
②9日龄，将蛋黄浆与活丰年虫按质量比1:2进行混合投喂；
③10日龄，将蛋黄浆与活丰年虫按质量比1:4进行混合投喂。
上述活丰年虫投喂的活丰年虫是新鲜孵化的，将盐度从孵化时的1.5％降低至0.6％，进行保活处理。
4.根据权利要求1所述培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，其特征在于：所述步骤(1)第e步中，微粒饲料为日清丸红微粒饲料或山东升索微囊饲料；其中，所述微粒饲料为颜色呈棕红色，与丰年虫颜色相近。
5.根据权利要求1所述培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，投喂激素饲料前，马口鱼幼鱼全长小于15mm。
6.根据权利要求1所述培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，催熟处理的促熟激素注射部位选择背部肌肉注射。
7.根据权利要求1所述培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，马口鱼亲本饲料为马口鱼营养需求相当的其他鱼类亲本饲料，
或者，马口鱼亲本饲料为在成鱼养殖饲料中额外加入添加品；其中，添加品为微生素、矿物元素和鱼油中任意一种或多种。
8.根据权利要求1所述培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，其特征在于：所述步骤(7)中，马口鱼快长品系选育具体步骤如下：
利用来自湖北长阳、长江流域武汉段、江西吉安三处野生马口鱼为基础群体，首先在人工繁殖后，在暂养池中淘汰2-5％的较弱苗种；下池塘培育至10月龄时，利用规格筛，选育强度为10-20％，将体宽个体选育出来作为亲本，开展人工繁殖；按照选育强度为10-20％的标准重复群体选育四代，培育出生长速度较未选育种群快16％-21％的马口鱼新品系。
9.根据权利要求1所述培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，其特征在于：所述步骤(8)中，亲本饲料中，维生素添加量为：维生素A 1000-3000IU/kg，维生素C 1-1.5g/kg，维生素E 30-50mg/kg，鱼油添加量为饲料量的0.5％-2.0％。
10.根据权利要求1所述培育生长速度快的全雄马口鱼的方法，其特征在于：所述步骤(8)得到大量长速快的全雄马口鱼比普通未选育的雌雄混合马口鱼生长速度提升35％-48％，雄性率达95％以上。
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