CN115735766A - 一种瓜蒌组织培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种瓜蒌组织培养方法，包括雌株过冬块根苗和雄株过冬块根苗，将雌、雄根苗进行顶芽剥取，并依次进行标记；用流水首次冲洗；将首冲完成的顶芽放置洗衣粉水中进行浸泡；将顶芽取出，并用细毛软刷进行轻刷，刷去其表面细小尘土；用流水进行二次冲洗，直到无泡沫；在超净工作台上的酒精容器内进行浸泡；用汞对浸泡后的顶芽进行消毒；采用无菌水进行冲洗；接种在诱导培养基上；通过瓜蒌组织培养，建立了瓜蒌快速繁育体系，解决了瓜蒌以种子繁育雌雄比例不协调的问题，可大量提供优质瓜蒌组培苗，能够降低繁育成本，加速种苗繁育进程，同时对种苗的脱毒和品种更新复壮及品种遗传改良、细胞新陈代谢产物的高效生产具有一定的指导意义。
Description
技术领域
本发明涉及瓜蒌种苗培养技术领域，具体为一种瓜蒌组织培养方法。
背景技术
瓜蒌又称药瓜、野瓜、吊瓜等，葫芦科多年生攀缘草本植物，其个大质优，近年来种植面积不断扩大，而优质种苗却供应不足，而优质种苗却供应不足，由于瓜蒌雌雄异株，开花前无明显的形态差异，难以分辨，种植后常导致雄株多，而影响产量和经济效益，为此提出一种瓜蒌组织培养方法。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种瓜蒌组织培养方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
(二)技术方案
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种瓜蒌组织培养方法，包括雌株过冬块根苗和雄株过冬块根苗，其中：
步骤一、将雌、雄根苗进行顶芽剥取，并依次进行标记；
步骤二、用流水首次冲洗；
步骤三、将首冲完成的顶芽放置洗衣粉水中进行浸泡；
步骤四、将顶芽取出，并用细毛软刷进行轻刷，刷去其表面细小尘土；
步骤五、用流水进行二次冲洗，直到无泡沫；
步骤六、在超净工作台上的酒精容器内进行浸泡；
步骤七、用汞对浸泡后的顶芽进行消毒；
步骤八、采用无菌水进行冲洗；
步骤九、接种在诱导培养基上；
步骤十、瓜蒌组培苗长至1.8-2cm时切下，并接入生根培养基中。
优选的，根据步骤二中所提出的，首次流水冲洗的时间为3h。
优选的，根据步骤三中所提出的，顶芽在洗衣粉水内浸泡的时间为10min。
优选的，根据步骤六中所提出的，酒精的浓度为75％，浸泡时间为30s。
优选的，根据步骤七所提出的，汞的容量为0.1％，且消毒时间为10min。
优选的，根据步骤八所提出的，无菌水冲洗的次数为3-4次。
优选的，根据步骤九所提出的，诱导、增殖的培养基为MS培养基，生根培养基为1/2MS培养基，附加不同浓度的6BA、NAA，蔗糖为3％，琼脂为0.65％，PH值为5.8-6.0，培养条件为25度，且温度区间值为±2度，每天进行12h的光照，光照强度为2000-2500lx。
优选的，根据步骤一中所提出的，需选取为健康无病、虫斑的顶芽。
(三)有益效果
与现有技术相比，本发明提供了一种瓜蒌组织培养方法，具备以下有益效果：
通过瓜蒌组织培养，建立了瓜蒌快速繁育体系，解决了瓜蒌以种子繁育雌雄比例不协调的问题，可大量提供优质瓜蒌组培苗，能够降低繁育成本，加速种苗繁育进程，同时对种苗的脱毒和品种更新复壮及品种遗传改良、细胞新陈代谢产物的高效生产具有一定的指导意义。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供一个技术方案，一种瓜蒌组织培养方法，包括雌株过冬块根苗和雄株过冬块根苗，其中：
步骤一、将雌、雄根苗进行顶芽剥取，并依次进行标记；
步骤二、用流水首次冲洗；
步骤三、将首冲完成的顶芽放置洗衣粉水中进行浸泡；
步骤四、将顶芽取出，并用细毛软刷进行轻刷，刷去其表面细小尘土；
步骤五、用流水进行二次冲洗，直到无泡沫；
步骤六、在超净工作台上的酒精容器内进行浸泡；
步骤七、用汞对浸泡后的顶芽进行消毒；
步骤八、采用无菌水进行冲洗；
步骤九、接种在诱导培养基上；
步骤十、瓜蒌组培苗长至1.8-2cm时切下，并接入生根培养基中。
进一步地，根据步骤二中所提出的，首次流水冲洗的时间为3h。
进一步地，根据步骤三中所提出的，顶芽在洗衣粉水内浸泡的时间为10min。
进一步地，根据步骤六中所提出的，酒精的浓度为75％，浸泡时间为30s。
进一步地，根据步骤七所提出的，汞的容量为0.1％，且消毒时间为10min。
进一步地，根据步骤八所提出的，无菌水冲洗的次数为3-4次。
进一步地，根据步骤九所提出的，诱导、增殖的培养基为MS培养基，生根培养基为1/2MS培养基，附加不同浓度的6BA、NAA，蔗糖为3％，琼脂为0.65％，PH值为5.8-6.0，培养条件为25度，且温度区间值为±2度，每天进行12h的光照，光照强度为2000-2500lx。
优选的，根据步骤一中所提出的，需选取为健康无病、虫斑的顶芽。
本装置的工作原理：材料分别选取雌、雄株的过冬块根苗，剥取顶芽，做好标记，选择健康的无病、虫斑的顶芽，用流水冲洗3h，用洗衣粉水中浸泡10分钟，用细毛软刷子进行轻刷，随后用自来水冲洗，在超净工作台上用75％的酒精浸泡30s，再用0.1％的升汞消毒10min，无菌水冲洗3-4次后，接种在诱导培养基上，诱导、增殖的培养基为MS培养基，生根培养基为1/2MS培养基，附加不同浓度的6BA、NAA，蔗糖为3％，琼脂为0.65％，PH值为5.8-6.0，培养条件为25度，且温度区间值为±2度，每天进行12h的光照，光照强度为2000-2500lx，其中：
1)、不同培养基对初代诱导的影响：
大部分外植体接种10天后，基部切口处开始膨大，随后慢慢出现许多绿色的小芽点，30天左右开始分化出不定芽，40天后开始统计诱导率；
2)、不同培养基对瓜蒌增殖的影响：
瓜蒌组培苗增殖有2种方式，一是基部长丛生芽增殖，二是茎长长后，分割茎段增殖；
3)、不同培养基对瓜蒌生根的影响：
当瓜蒌长至2cm时切下接入生根培养基中，培养25天后组培苗开始陆续生根当瓜蒌组培苗长至高约2cm时切下接入生根培养基中。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (8)
1.一种瓜蒌组织培养方法，其特征在于：包括雌株过冬块根苗和雄株过冬块根苗，其中：
步骤一、将雌、雄根苗进行顶芽剥取，并依次进行标记；
步骤二、用流水首次冲洗；
步骤三、将首冲完成的顶芽放置洗衣粉水中进行浸泡；
步骤四、将顶芽取出，并用细毛软刷进行轻刷，刷去其表面细小尘土；
步骤五、用流水进行二次冲洗，直到无泡沫；
步骤六、在超净工作台上的酒精容器内进行浸泡；
步骤七、用汞对浸泡后的顶芽进行消毒；
步骤八、采用无菌水进行冲洗；
步骤九、接种在诱导培养基上；
步骤十、瓜蒌组培苗长至1.8-2cm时切下，并接入生根培养基中。
2.根据权利要求1所述的一种瓜蒌组织培养方法，其特征在于：根据步骤二中所提出的，首次流水冲洗的时间为3h。
3.根据权利要求1所述的一种瓜蒌组织培养方法，其特征在于：根据步骤三中所提出的，顶芽在洗衣粉水内浸泡的时间为10min。
4.根据权利要求1所述的一种瓜蒌组织培养方法，其特征在于：根据步骤六中所提出的，酒精的浓度为75％，浸泡时间为30s。
5.根据权利要求1所述的一种瓜蒌组织培养方法，其特征在于：根据步骤七所提出的，汞的容量为0.1％，且消毒时间为10min。
6.根据权利要求1所述的一种瓜蒌组织培养方法，其特征在于：根据步骤八所提出的，无菌水冲洗的次数为3-4次。
7.根据权利要求1所述的一种瓜蒌组织培养方法，其特征在于：根据步骤九所提出的，诱导、增殖的培养基为MS培养基，生根培养基为1/2MS培养基，附加不同浓度的6BA、NAA，蔗糖为3％，琼脂为0.65％，PH值为5.8-6.0，培养条件为25度，且温度区间值为±2度，每天进行12h的光照，光照强度为2000-2500lx。
8.根据权利要求1所述的一种瓜蒌组织培养方法，其特征在于：根据步骤一中所提出的，需选取为健康无病、虫斑的顶芽。
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Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104521756A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-04-22 | 广西大学 | 一种生产栝楼组培苗的方法 |
| CN106417033A (zh) * | 2016-11-10 | 2017-02-22 | 聊城大学 | 一种高唐栝楼快速繁殖方法 |
| CN107568064A (zh) * | 2017-09-22 | 2018-01-12 | 无为县姚沟镇太白瓜蒌种植专业合作社 | 一种瓜蒌组织培养育苗方法 |
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Patent Citations (3)
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|---|---|---|---|---|
| CN104521756A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-04-22 | 广西大学 | 一种生产栝楼组培苗的方法 |
| CN106417033A (zh) * | 2016-11-10 | 2017-02-22 | 聊城大学 | 一种高唐栝楼快速繁殖方法 |
| CN107568064A (zh) * | 2017-09-22 | 2018-01-12 | 无为县姚沟镇太白瓜蒌种植专业合作社 | 一种瓜蒌组织培养育苗方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 林贵美等: "栝楼组织培养与快繁研究", 《广东农业科学》, no. 02, pages 32 - 33 * |
| 蔡宣梅等: "福建省道地瓜蒌组织培养体系的建立", 《福建热作科技》, vol. 41, no. 02, pages 1 - 3 * |
| 郑树松等: "药用植物栝楼的组织培养及其表达蛋白的分析", 《生物工程学报》, no. 04, pages 420 - 422 * |
| 饶宝蓉等: "瓜蒌组培快繁体系研究", 《热带农业科学》, vol. 40, no. 03, pages 55 - 60 * |
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