CN115678791A - 一种植物乳杆菌及其应用 - Google Patents
一种植物乳杆菌及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115678791A CN115678791A CN202110852185.9A CN202110852185A CN115678791A CN 115678791 A CN115678791 A CN 115678791A CN 202110852185 A CN202110852185 A CN 202110852185A CN 115678791 A CN115678791 A CN 115678791A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lactobacillus plantarum
- zkwd
- strain
- lactobacillus
- atcc
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 title claims abstract description 61
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 title claims abstract description 61
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 title claims abstract description 61
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims abstract description 5
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 15
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 8
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 6
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000002778 food additive Substances 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 11
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 abstract description 7
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 abstract description 7
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 abstract description 3
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 abstract description 2
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 description 10
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 10
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 10
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 7
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 241000255588 Tephritidae Species 0.000 description 5
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 5
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 241000255601 Drosophila melanogaster Species 0.000 description 4
- 102000003746 Insulin Receptor Human genes 0.000 description 4
- 108010001127 Insulin Receptor Proteins 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 4
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 4
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 4
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 4
- 235000010149 Brassica rapa subsp chinensis Nutrition 0.000 description 3
- 235000000536 Brassica rapa subsp pekinensis Nutrition 0.000 description 3
- 241000499436 Brassica rapa subsp. pekinensis Species 0.000 description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000001325 log-rank test Methods 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 235000021108 sauerkraut Nutrition 0.000 description 2
- 108091093088 Amplicon Proteins 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 102000004219 Brain-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 1
- 108090000715 Brain-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000008960 Diabetic foot Diseases 0.000 description 1
- 108700020371 Drosophila ck Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101710190529 Insulin-like peptide Proteins 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 101100533818 Onchocerca volvulus sod-4 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 1
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 229940077737 brain-derived neurotrophic factor Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 230000003870 intestinal permeability Effects 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- ISPYRSDWRDQNSW-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate monohydrate Chemical compound O.[Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O ISPYRSDWRDQNSW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 238000012257 pre-denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 101150005399 sod2 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 235000021139 traditional diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)及其应用，该植物乳杆菌菌株已在2021年3月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC 21895。本发明的植物乳杆菌菌株相比模式菌株，与肠道表皮细胞有更好的亲和力，有效缓解胰岛素抵抗，能够起到降低血糖作用，服用本发明菌株发酵液具有优良的降血糖效果，具有非常广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种植物乳杆菌及其应用。
背景技术
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)为乳杆菌属(Lactobacillus)革兰氏阳性细菌。兼性厌氧，生长温度区间位于15℃-45℃。植物乳杆菌底物适应性广，在植物源发酵食物、肠道中丰度高，通过产D、L两种构型乳酸实现对其他物种的拮抗，是较好的益生菌候选菌株。
据报道，植物乳杆菌具有显著的抗氧化活性，也有助于保持肠道通透性。能够抑制肠道内产气的细菌的生长。植物乳杆菌已经在实验中被发现可以增加海马体的脑源性神经营养因子，具有治疗退行性神经疾病的潜力。植物乳杆菌在人类的胃肠道中具有大分子固持能力，可以作为药物运送辅助载体。
糖尿病是一类严重的慢性疾病，血糖浓度过高为典型症状。其中ii型糖尿病患者占糖尿病患者的90％以上，心血管、肾脏、神经、视网膜病变以及糖尿病足等并发症危害巨大，糖尿病患者肠道微生态系统失衡已成为临床医学界的公知。口服益生菌制剂作为糖尿病辅助治疗也广泛应用于临床治疗。目前，广泛应用于食品和药品的双歧杆属(Bifidobacterium)，乳杆菌属(Lactobacillus) 部分菌株均被证实有不同程度的降糖效果，但是菌株之间的益生活性差异较大，常见商用菌株普遍存在摄入后定殖率不高，肠道表皮细胞吸附能力不明。乳酸菌资源的开发和利用需要大量菌株水平的活性验证和临床试验。发酵食品在我国传统食谱中占比较大，其中大量具有较高益生活性的的益生菌株资源亟待开发利用。
发明内容
为了解决目前存在的问题，本发明提供一种能够有效缓解糖尿病的植物乳杆菌及其应用。
本发明的第一个目的在于提供一株能有效缓解糖尿病的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)菌株，菌株号为ZKWD-0907，所述植物乳杆菌菌株已在2021年3月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC21895，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。
本发明的第二个目的是提供一种所述的植物乳杆菌ZKWD-0907的发酵液。
本发明的第三个目的是提供一种所述的植物乳杆菌ZKWD-0907或其发酵液制备用于缓解糖尿病的制品中的应用
本发明的又一个目的是提供一种食品或食品添加剂，其含有所述的植物乳杆菌ZKWD-0907菌粉。
优选地，所述植物乳杆菌粉的活菌数＞50亿/g。
本发明的有益效果在于：
1、本发明提供的一种植物乳杆菌ZKWD-0907，由沈阳中科微道生物科技有限公司自延边自治州发酵酸菜中分离筛选获得。中国科学院沈阳应用生态研究所鉴定为植物乳杆菌，将其命名为ZKWD-0907。保藏编号为：(CGMCC21895)，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏日期为2021年3月11日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编： 100101，菌种的分类命名为ZKWD-0907，微生物(株)：植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)其分类单元为：芽孢杆菌纲Bacilli，乳杆菌目Lactobacillales，乳杆菌科Lactobacillaceae，乳杆菌属Lactobacillus。核糖体16s rDNA序列已获得NCBI Genebank登记序列号Accession No.：MW513938。
2、相比植物乳杆菌模式菌株ATCC 14917，植物乳杆菌ZKWD-0907对胃酸屏障有更好的耐受作用，具有更高的肠道定殖能力。服用后能够显著增加肠道有益细菌的含量，驱动肠道微生态系统向好转化。
3、本发明中的所述的含有植物乳杆菌ZKWD-0907发酵液具有改善人血糖代谢功能，提高胰岛素耐受性等生物学功能。该菌株发酵液饲喂高糖尿病果蝇 (胰岛素受体缺陷型)，InR[E19]/TM2，血糖代谢水平仅为野生型的45％)后能够显著改善该型果蝇的胰岛素分泌水平和胰岛素耐受性，氧化应激水平，并且提高糖尿病果蝇的平均寿命。
附图说明
图1为植物乳杆菌ZKWD-0907与模式菌株(ATCC 14917)的16s rDNA 扩增片段(左)和RAPD指纹图谱(右)。
图2为果蝇在饲喂植物乳杆菌ZKWD-0907和ATCC 14917后雌雄果蝇的生存曲线及log-rank检验图。
图3为果蝇CK对照组及在饲喂植物乳杆菌ZKWD-0907和ATCC 14917 后雄果蝇寿命及血糖代谢相关基因的表达图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合实施例及附图对本发明作具体阐述。
本发明提供的一种植物乳杆菌ZKWD-0907来自于延边自治州发酵酸菜中分离筛选获得的，通过鉴定植物乳杆菌属于植物乳杆菌属，将其命名为 ZKWD-0907，保藏编号为：(CGMCC 21895)，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏日期为2019年7月8日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，菌种的分类命名为：植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)其分类单元为：芽孢杆菌纲Bacilli，乳杆菌目Lactobacillales，乳杆菌科Lactobacillaceae，乳杆菌属Lactobacillus。核糖体16s rDNA序列已获得NCBI Genebank登记序列号：MW513938。
本发明中所用对照菌株为Lactobacillus plantarum模式菌株，保藏编号为ATCC14917，购买自美国典型培养物保存中心(American type culture collection)。
细菌基因组提取试剂盒(PureLinkTM Microbiome DNA Purification Kit)购自赛默飞科技(北京)有限公司,货号：A29790；
细菌定殖细胞活性测定试剂盒(Live-or-DyeTM Fixable Dead Cell Stains)购自Biotium，货号：32006-T；
实时荧光定量PCR试剂盒购自赛默飞科技(北京)有限公司，PowerUpTM SYBRTMGreen预混液Kit，货号：A25741；
胃液模拟培养基采购自：PERFEMIKER，货号：PM10004；
植物乳杆菌ZKWD-0907培养基配方：
固态培养基(改良MRS固态培养基)：琼脂15g、MnSO4.H2O 0.05g、牛肉膏10g、酵母粉5g、酪蛋白胨10g、葡萄糖4.5g、NaAc 5g、(NH4)2HC6H5O7 2g、Tween80 1g、K2HPO4 2g、MgSO4.7H2O 0.2g、CaCO3 20g、蒸馏水1.0L。盐酸调pH 6.2±0.2。
液态培养基(改良MRS液态培养基)：组分组分与上述培养基相同，无琼脂。
实施例1
本发明提供一种植物乳杆菌。
1.菌种筛选流程
1)样品来源：
来自于延边自治州发酵酸菜。
2)菌种制备：
样品酸菜匀浆，取1g匀浆后的酸菜，加入0.7％灭菌生理盐水。5ml，充分震荡混匀，形成混合液。在厌氧条件下取10ul混合液体划线接种至上述改良 MRS液态培养基，35℃，厌氧培养48h(O2含量<10ppm)，挑取2mm直径的单菌落，划线接种至改良MRS固态培养基上。厌氧状态下(O2含量<10ppm)， 37℃培养72h，直至菌落形状和大小不发生改变为止。收集所有获得的菌落(总计2620个)并保存，进入菌物筛选和功能鉴定流程，候选菌株给予编号并进入下游试验。
2.菌株鉴定
取菌苔至无菌离心管中，灭酶PBS缓冲液重悬2次。离心收取细菌细胞，采用试剂盒(PureLinkTM Microbiome DNA Purification Kit)进行菌株基因组DNA 片段富集备用。采用通用引物进行16s rDNA扩增并切胶回收扩增子条带。27f： 5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'，1492r：5-'CTACGGCTACCTTGTT-3'；
①按50μLPCR扩增体系加入38μL去离子水、5μL Buffer、1μL上游引物、 1μL下游引物、1μLdNTP(10mM)、0.5uL Taq酶、0.5uL菌株DNA-A，混合均匀、形成PCR扩增液；
②PCR反应参数设定：A、94℃预变性5min；B、30个循环：94℃变性30s、 55℃退火30s、72℃延伸30s；C、72℃充分延伸10min，反应结束，得到PCR 产物Ⅰ；
③将PCR产物Ⅰ由中科院沈阳应用生态研究所进行测序。目标产物与Gene Bank中相关序列进行blast比对，确定本申请中，相关物种的16S rDNA序列与 NCBI收录的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum序列的相似度达到99.9％，认定为植物乳杆菌同源菌株，该菌株16s rDNA序列已获得NCBI Genebank登记序列号：MW513938。
3)菌种的鉴定(基因图谱)
以菌株DNA为模板，采用细菌通用多态性扩增引物5'-GACGGATCAG-3'，对ZKWD-0907和ATCC 14917进行RAPD。采用QIAGEN QIAxcel毛细管电泳仪对扩增产物进行检测；结果见图1；
结果显示(图1)：植物乳杆菌ZKWD-0907与模式菌株(ATCC 14917) 的基因组结构有所不同，属于同一细菌物种下不同菌株；
实施例2
植物乳杆菌ZKWD-0907的胃酸屏障透过性
制备培养液，步骤为：取1mg植物乳杆菌ZKWD-0907和ATCC 14917的液体培养物接种到10ml胃液模拟培养基中，培养2个小时后各取3ml；分别用细菌活死菌染色试剂盒(Live-or-DyeTM Fixable Dead Cell Stains)进行染色，随后采用Leica DMLB正置荧光显微镜落射荧光显微镜进行细胞活性计数；
过性计算依据：存活率＝活菌细胞数/初始活菌细胞数×100％
结果和结论：通过胃酸屏障耐受试验结果显示，植物乳杆菌ZKWD-0907 在pH3.0的胃液模拟培养基中,2小时存活率达80.63％，ATCC 14917为76.62％ (显著性检验，p<0.05)，由此可知，植物乳杆菌ZKWD-0907在胃酸屏障及肠道肠道内的生存率显著高于ATCC14917。
实施例3
植物乳杆菌ZKWD-0907对血糖代谢和胰岛素耐受性的改善作用
以糖尿病模型的果蝇(胰岛素受体缺陷型InR[E19]/TM2)为试验样本，模拟胰岛素抵抗导致的二型糖尿病患者。给予口服植物乳杆菌ZKWD-0907活菌制剂。
通过“全生命周期寿命延长”、“胰岛素敏感”、“氧化应激”等试验，检测植物乳杆菌ZKWD-0907对前列腺癌果蝇寿命的促进作用，同时以ATCC 14917 作为对照菌株；
试验样品：胰岛素受体缺陷型突变体的果蝇，来源于美国印第安纳Bloominton果蝇资源中心，编号：64349。
含植物乳杆菌ZKWD-0907培养物的培养液：取20ml改良MRS液体培养基和植物乳杆菌ZKWD-0907菌苔，混合均匀，35℃，厌氧培养48h(O2含量 <10ppm)，制得含有植物乳杆菌ZKWD-0907的基础培养液。以去离子水稀释培养液，至其中植物乳杆菌ZKWD-0907菌粉的活菌数为50亿/g；
含有ATCC 14917的培养物的培养液：取2ml改良MRS液体培养基和20ug ATCC14917菌粉，混合均匀，制得含有ATCC 14917的基础培养基，其中ATCC 14917菌粉的活菌数为50亿/g；
试验方法：分别将雄性和雌性处女InR[E19]/TM2果蝇分装，分别置于2ml 含有植物乳杆菌ZKWD-0907、ATCC 14917的基础培养物的果蝇管内，每管20 只，每处理各10管。培养条件为：温度为25℃、光暗节律交替(即12h见光培养、12h避光培养)，湿度为60％，每5日更换基础培养基，每日观察并记录果蝇的死亡数目、同时在饲喂60日后，通过实时荧光定量PCR试剂盒对果蝇进行荧光定量PCR。对InR、sod2、eiger三个糖尿病发生发展密切相关的基因进行表达定量，涉及的基因和引物对如表1所示。以期确定植物乳杆菌 ZKWD-0907对二型糖尿病果蝇血糖代谢和胰岛素耐受性的促进作用，结果见表 2、图2、图3；
表1荧光定量PCR检测涉及的基因和引物对
表2 ZKWD-0907对果蝇寿命及血糖代谢相关基因的表达的影响
结果和结论：相比对照菌株ATCC 14917，饲喂ZKWD-0907后，二型糖尿病果蝇的60日存活率显著上升(平均存活率上升3.39％，存活率中位数上升 8.15％Log-rank test p<0.01)。
同时，本发明中涉及的植物乳杆菌ZKWD-0907能够迅诱导胰岛素受体InR 的表达上调(2.74倍，显著高于对照1.25倍，p<0.01)。
同时，ZKWD-0907能够显著提高受试果蝇的超氧化物歧化酶的表达(1.85 倍上调，显著高于对照1.28倍，p<0.01)。相比ATCC 14917，植物乳杆菌 ZKWD-0907饲喂二型糖尿病果蝇后，果蝇促炎因子eiger呈现显著下调(0.54 倍，显著高于对照0.93倍，p＝0.015)。
综上所述，ZKWD-0907能够通过激活菌株可以通过靶向肠道微生态系统，提高胰岛素样肽表达水平，减少氧化胁迫，减少致炎因子表达，具有改善糖尿病患者血糖代谢功能。
以上所述的仅是本发明的优选实施方案，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以作出若干变化合改进，这些都属于本发明的保护范围。
Claims (5)
1.一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)菌株，其特征在于，所述植物乳杆菌菌株已在2021年3月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC 21895，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。
2.一种如权利要求1所述的植物乳杆菌的发酵液。
3.一种如权利要求1所述的植物乳杆菌或权利要求2所述的发酵液制备用于缓解糖尿病的制品中的应用。
4.一种食品或食品添加剂，其特征在于，其含有权利要求1所述的植物乳杆菌菌粉。
5.根据权利要求4所述的一种食品或食品添加剂，其特征在于，所述植物乳杆菌粉的活菌数＞50亿/g。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110852185.9A CN115678791A (zh) | 2021-07-27 | 2021-07-27 | 一种植物乳杆菌及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110852185.9A CN115678791A (zh) | 2021-07-27 | 2021-07-27 | 一种植物乳杆菌及其应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115678791A true CN115678791A (zh) | 2023-02-03 |
Family
ID=85058263
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110852185.9A Pending CN115678791A (zh) | 2021-07-27 | 2021-07-27 | 一种植物乳杆菌及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115678791A (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105105145A (zh) * | 2015-09-14 | 2015-12-02 | 吉林省农业科学院 | 一株植物乳杆菌及其在制备降血糖血脂的功能性食品中的应用 |
| KR101611834B1 (ko) * | 2015-06-08 | 2016-04-14 | 주식회사 쎌바이오텍 | 비만 및 비만으로 야기된 대사성 질환의 예방 또는 치료를 위한 락토바실루스 플란타룸 cbt lp3 균주 및 이를 포함하는 조성물 |
| CN105567586A (zh) * | 2015-12-21 | 2016-05-11 | 南昌大学 | 一株具有抗糖尿病功能的植物乳杆菌及其应用 |
| KR102191775B1 (ko) * | 2019-09-10 | 2020-12-16 | 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 | 신규한 락토바실러스 플란타럼 mkha15 균주 및 이의 용도 |
| CN112111430A (zh) * | 2020-09-27 | 2020-12-22 | 吉林农业大学 | 一种抗氧化与抗衰老双效益生菌及其应用 |
| US20200405786A1 (en) * | 2018-02-13 | 2020-12-31 | Proviva Pharma Inc. | Probiotic formulations for the treatment and alleviation of metabolic and oxidative stress, inflammation and neurodegeneration |
-
2021
- 2021-07-27 CN CN202110852185.9A patent/CN115678791A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101611834B1 (ko) * | 2015-06-08 | 2016-04-14 | 주식회사 쎌바이오텍 | 비만 및 비만으로 야기된 대사성 질환의 예방 또는 치료를 위한 락토바실루스 플란타룸 cbt lp3 균주 및 이를 포함하는 조성물 |
| CN105105145A (zh) * | 2015-09-14 | 2015-12-02 | 吉林省农业科学院 | 一株植物乳杆菌及其在制备降血糖血脂的功能性食品中的应用 |
| CN105567586A (zh) * | 2015-12-21 | 2016-05-11 | 南昌大学 | 一株具有抗糖尿病功能的植物乳杆菌及其应用 |
| US20200405786A1 (en) * | 2018-02-13 | 2020-12-31 | Proviva Pharma Inc. | Probiotic formulations for the treatment and alleviation of metabolic and oxidative stress, inflammation and neurodegeneration |
| KR102191775B1 (ko) * | 2019-09-10 | 2020-12-16 | 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 | 신규한 락토바실러스 플란타럼 mkha15 균주 및 이의 용도 |
| CN112111430A (zh) * | 2020-09-27 | 2020-12-22 | 吉林农业大学 | 一种抗氧化与抗衰老双效益生菌及其应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110144304B (zh) | 干酪乳杆菌菌株及其应用 | |
| AU2020103929A4 (en) | Bacillus coagulans strain BACO-17 with high germination rate in the intestines and its uses for promoting gastrointestinal health | |
| CN109182165B (zh) | 一株瑞士乳杆菌及其在蜜蜂养殖过程中的应用 | |
| CN112592871B (zh) | 一种干酪乳杆菌jylc-374及其在改善男性前列腺产品中的应用 | |
| CN113604384A (zh) | 一种鼠李糖乳杆菌及其应用 | |
| CN107974420B (zh) | 高产乙醛的保加利亚乳杆菌jmcc0018、其分离纯化方法及应用 | |
| CN113564272B (zh) | 一种发酵乳中干酪乳酪杆菌的快速鉴定检测方法 | |
| CN114686402A (zh) | 乳酸乳球菌乳酸亚种hfy14及其应用 | |
| CN114350578A (zh) | 一株产溶菌酶并高效拮抗多药耐药幽门螺杆菌的植物乳杆菌lp1z及其应用 | |
| CN113403227A (zh) | 一株植物乳杆菌及其制备方法和应用 | |
| CN113122485A (zh) | 一株具有拮抗作用的植物乳杆菌hnu082及其应用 | |
| CN108179122B (zh) | 一种高粘附益生性屎肠球菌及其应用 | |
| CN113186136B (zh) | 一种多重耐药的幽门螺旋杆菌及其应用 | |
| CN117099962A (zh) | 发酵粘液乳杆菌LFPerfectus001的新应用 | |
| CN112300962B (zh) | 一株具有特异性分子靶标的抗氧化功能植物乳杆菌及其应用 | |
| CN115678791A (zh) | 一种植物乳杆菌及其应用 | |
| CN112980737B (zh) | 一株促进动物双歧杆菌增殖的青春双歧杆菌及其应用 | |
| CN113308419B (zh) | 一株发酵用的谷糠乳杆菌及其应用 | |
| CN113061550B (zh) | 一株乳杆菌新菌株z6及其在食品中的应用 | |
| US20230250389A1 (en) | Leuconostoc citreum and use thereof in precipitating starch emulsion | |
| CN109161501B (zh) | 一种饲用地衣芽孢杆菌及其应用 | |
| CN112899194A (zh) | 一株短双歧杆菌及其培养方法和用途 | |
| CN117417847B (zh) | 一种大理梭菌及其在制备抗氧化功能性物质中的应用 | |
| CN117070423B (zh) | 一株植物乳植杆菌LPPerfectus001及其应用 | |
| CN114540521B (zh) | 具有降糖降脂功效的植物乳杆菌84-3特异性分子靶标及其检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |