CN115595276A - 一种补水美白化妆品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种补水美白化妆品及其制备方法，由以下重量份原料组成：3～5份保湿剂、10～15份功能发酵液、0.5～1.5份乳化剂、0.5～1份增稠剂、50～70份水。本发明制备的补水美白化妆品温和不刺激，不仅具有很好的补水、美白效果，还具有抗氧化、抗衰的作用，为肌肤及时补充所需营养。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，尤其涉及一种补水美白化妆品及其制备方法。
背景技术
由于年龄增长、压力大及生活不规律等原因，人体代谢、免疫力会受到影响，长此以往，皮肤就会表现出暗沉、粗糙、出现色斑、无光泽等现象。通过护肤皮进行适当、合理的皮肤护理必不可少。但是，大多数美白产品只能对某些色斑有效，淡斑美白作用并不全面，见效慢，容易复发；而且对皮肤刺激性大，易造成皮肤过敏。除此之外，在美白的同时不能兼顾补水保湿功效，不能从根本上改善皮肤状态，使皮肤细嫩、富有弹性、光泽。
中国专利CN102920622A公开了一种美白化妆品及其制备方法，其制备方法如下：将50～70wt％黄瓜籽油、15～25wt％圣约翰草油、15～25wt％金盏花油，20～25℃温度下混合、搅拌均匀，即得；本发明的美白化妆品采用天然植物油为原料，绿色、安全、对皮肤无刺激，具有良好的美白功效，对淡化色素沉着、疤痕修复也有一定的效果，但是其美白效果见效慢，此外补水效果也不强，在使用中需要搭配其他化妆品一同使用。
发明内容
针对上述现有技术中存在的不足，本发明提供了一种补水美白化妆品及其制备方法。
一种补水美白化妆品，按照质量份计，由以下原料组成：3～5份保湿剂、10～15份功能发酵液、0.5～1.5份乳化剂、0.5～1份增稠剂、50～70份水。
所述保湿剂为甘油、D-泛醇、水解葡糖氨基聚糖、甲基丙二醇中的至少一种。优选地，所述保湿剂为D-泛醇。
所述乳化剂选自聚甘油-10油酸酯、氢化卵磷脂、甘油硬脂酸酯、甲基葡糖倍半硬脂酸酯、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯中的至少一种。优选地，所述乳化剂为聚甘油-10油酸酯。
所述增稠剂选自丙烯酸类/异癸酸乙烯酯交联聚合物、阿拉伯树胶、黄原胶、卡波姆、羟乙基纤维素中的至少一种。优选地，所述增稠剂为黄原胶。
所述功能发酵液制备，包括以下步骤：
1)挑选无机械损伤的仙人掌嫩叶、黄秋葵嫩果、芦荟叶，将仙人掌嫩叶去刺、去除表皮、芦荟叶去除表皮、黄秋葵嫩果去除果蒂，均切为5～8g的小块，将仙人掌块、黄秋葵嫩果块和芦荟块按照质量比为(5～8):(2～4):(1～3)配伍后加入破壁机中，在2000～2200W功率下破壁5min，得到发酵基体；
2)按照质量份计，将10～15份步骤1)所得发酵基体加入20～30份水中混合均匀，得到预发酵液，再向预发酵液中加入0.03～0.1份发酵剂，搅拌均匀后密封，30～42℃避光发酵7～10天得混合浆液B。
3)将步骤2)得到的混合浆液B在离心机中以3000～4000rpm离心5～8min，取上清液，将上清液在100～110℃、300～400MPa下灭菌10～15min得到灭菌后的上清液，即为功能发酵液。
所述发酵剂为德式乳杆菌、异常汉逊酵母、植物乳杆菌、黑曲霉、酒曲中的至少一种。优选地，所述发酵剂由德式乳杆菌和异常汉逊酵母按照质量比1:(0.8～2)混合而成。
功能发酵液中含有较多的果胶和黏多糖，具有光滑肌肤的作用，芦荟发酵液中含有多种维生素，能够增白、提亮皮肤，含有的蛋白质粘液可以减缓肌肤衰老；仙人掌发酵液具有强保水作用，使水分和补水美白化妆品中的营养物质持续作用于肌肤。此外，经过发酵后，植物中营养成分大部分转化为护肤品小分子，渗透快，不黏腻。
发酵剂中的德式乳杆菌在发酵过程中产生的乳酸刺激胶原蛋白生成、减少皮肤变色，通过溶解死皮细胞、增加新细胞更新，产物中的乳链菌肽有广谱的抗菌性，可以用于敏感肌肤修护，发酵乳中含有乳酸、乙酸、丙酸等有机酸，可以显著降低功能发酵液的pH，使得细胞壁疏松，提高细胞通透性，促进菌丝中中的活性成分释放到发酵液中；发酵过程中还会产生胞外多糖，并螯合Mg2+、Ca2+等阳离子，进一步改变细胞壁的通透性，促进活性成分的溶出，此外，胞外多糖具有增稠、稳定、乳化、胶凝和持水的作用，同时还具有抗免疫活性；发酵剂中的异常汉逊酵母产生乙醇，乙醇可以溶解更多的活性成分在发酵液中，并促进精华乳中的活性成分能够穿透角质层进入肌底，浓度适中的乙醇不会刺激皮肤，还可以在一定程度上收缩毛孔，此外，乙醇的存在避免发酵过程细菌的滋生，使成分不腐败，活性有效成分可以保存更持久。德式乳杆菌和异常汉逊酵母两者协同发酵，可以促进更多活性成分溶出，控制皮肤的炎症，避免炎症释放的一些刺激黑素细胞活跃的物质，间接抑制黑色素的产生，此外发酵乳中含有乳酸菌，可以和乙醇产生酯化反应，防止酒精过多造成活性物质失活。
优选地，所述功能发酵液制备，包括以下步骤：
1)挑选无机械损伤的仙人掌嫩叶、黄秋葵嫩果、芦荟叶，将仙人掌嫩叶去刺去除表皮、芦荟叶去除表皮、黄秋葵嫩果去除果蒂，均切为5～8g的小块，将仙人掌块、黄秋葵嫩果块和芦荟块按照质量比为(5～8):(2～4):(1～3)配伍后加入破壁机中，在2000～2200W功率下破壁5min，得到发酵基体；
2)按照质量份计，将10～15份步骤1)所得发酵基体、0.5～1份金虫草菌丝粉末加入20～30份水中混合均匀，得到预发酵液，再向预发酵液中加入0.03～0.1份发酵剂，搅拌均匀后密封，30～42℃避光发酵7～10天得混合浆液B。
3)将步骤2)得到的混合浆液B在离心机中以3000～4000rpm离心5～8min，取上清液，将上清液在100～110℃、300～400MPa下灭菌10～15min得到灭菌后的上清液，即为功能发酵液。
所述金虫草菌丝粉末的制备方法，包括以下步骤：
按照质量份计，将2～3份金虫草母种接种到40～60份液体培养基上，在温度为25～30℃下培养1～2d，进行菌种的活化，得到活化菌液，然后将活化后的菌种放到摇床上，维持温度为20～30℃，在150～200r/min的条件下震荡3～5d，生长出金虫草菌丝球，将金虫草菌丝球与液体培养基分离，并用水冲洗干净，将洗净的金虫草菌丝球放在-35～-30℃下冷冻干燥8～10h，得到冷冻干燥后的金虫草菌丝球，再将冷冻干燥后的金虫草菌丝球研碎，所得粉末过300～400目筛，得金虫草菌丝粉末。
所述液体培养基按质量份计，由5～8份豆粕饼、12～15份葡萄糖、2.5～5份蛋白胨、0.1～0.3份硫酸镁和70份水组成。
发酵过程中产生大量的有机酸，使得功能发酵液pH降低，加入金虫草菌丝球共同发酵，能够溶出更多的虫草素、虫草酸、虫草多糖和超氧岐化酶(SOD)，虫草素具有抗炎作用，虫草酸可以特异性清除基体产生的自由基，虫草多糖具有抗衰老作用，可以改善皮肤状态，增强皮肤细胞的免疫功能，还可以促进功能发酵液中美白活性成分的吸收，超氧岐化酶以自由基为底物，可以清除人体代谢产生的自由基，避免细胞受到氧化、老化和破坏，对于人体活性氧的代谢具有维护平衡的作用。
优选地，所述液体培养基按质量份计，由5～8份豆粕饼、0.3～0.5份纤维素酶、0.1～0.5份小肽螯合盐或改性小肽螯合盐、12～15份葡萄糖、2.5～5份蛋白胨、0.1～0.3份硫酸镁和70份水组成。
所述小肽螯合盐的制备方法，包括以下步骤：
(1)缓冲液的配制：将0.2mol/L的磷酸二氢钠和0.2mol/L磷酸氢二钠按照体积比(1～3):(2～4)混合得到缓冲液；
(2)将羊毛按照浴比(1～3)g:(5～8)mL加入步骤1)所述的缓冲液中，在30～40℃下，在100～200r/min的转速下搅拌10～15min，得到混合液A，按照质量份计，在40～60份混合液A中加入0.4～0.6份角蛋白酶和0.6～0.8份碱性蛋白酶，得到混合液B，将混合液B放在摇床上，维持温度为50～60℃、转速150～200r/min的条件下酶解6～10h，酶解结束后在100～120℃灭酶30～40min，得到酶解液，将酶解液在-35～-30℃冷冻干燥8～10h，得到干肽粉；
(3)按照质量份计，将3～5份步骤(2)所得干肽粉、0.1～0.3份硫酸铜、0.3～0.5份硫酸亚铁和0.1～0.3份硫酸锰加入到10～12份水中，在40～60℃、200～300r/min下反应30～50min，得到混合液C，将混合液在-35～-30℃冷冻干燥8～10h，得到小肽螯合盐。
羊毛纤维酶解得到的小肽化合物，具有自由巯基、氨基和羧基多种活性基团，可以以多种配位模式与铜离子、亚铁离子和锰离子配位，进而合成小肽螯合盐，将小肽螯合盐加入金虫草菌丝的培养基中，补充金虫草菌丝合成虫草酸、SOD必需的铜、铁、锰元素，小肽螯合盐促进金虫草菌丝对金属元素的吸收，为合成SOD提供了有效物质基础，大大提高了金虫草菌丝中SOD的含量，得到Cu-SOD、Fe-SOD和Mn-SOD多种不同金属辅基的超氧岐化酶，增强美白护肤的效果。
优选地，所述改性小肽螯合盐的制备方法，包括以下步骤：
(1)缓冲液的配制：将0.2mol/L的磷酸二氢钠和0.2mol/L磷酸氢二钠按照体积比(1～3):(2～4)混合得到缓冲液；
(2)将羊毛按照浴比(1～3)g:(5～8)mL加入步骤1)所述的缓冲液中，在30～40℃下，在100～200r/min的转速下搅拌10～15min，得到混合液A，按照质量份计，在40～60份混合液A中加入0.4～0.6份角蛋白酶和0.6～0.8份碱性蛋白酶，得到混合液B，将混合液B放在摇床上，维持温度为50～60℃、转速150～200r/min的条件下酶解6～10h，酶解结束后在100～120℃灭酶30～40min，得到酶解液，将酶解液在-35～-30℃冷冻干燥8～10h，得到干肽粉；
(3)按照质量份计，将3～5份步骤(2)所得干肽粉、0.1～0.3份硫酸铜、0.3～0.5份硫酸亚铁和0.1～0.3份硫酸锰加入到10～12份水中，在40～60℃、200～300r/min下反应30～50min，得到混合液C，将混合液在-35～-30℃冷冻干燥8～10h，得到小肽螯合盐；
(4)按照质量份计，将3～4份小肽螯合盐、0.1～0.3份2-羟基乙胺、0.05～1份醋酸铈加入10～15份水中，在200～300W、20～25kHz的功率和频率下超声分散30min，得到混合液D，将混合液在-35～-30℃冷冻干燥8～10h，得到改性小肽螯合盐。
2-羟基乙胺可以和小肽螯合盐通过氢键和肽键作用结合，再进一步螯合醋酸铈，得到改性小肽螯合盐，在菌丝培养前期，2-羟基乙胺可以促进细胞壁组分磷脂乙醇胺的合成，从而提高菌丝增殖速率；醋酸铈能够促进菌丝增殖，提高菌丝细胞膜与细胞壁分解与合成所需的酶活性。同时避免了直接加入醋酸铈浓度过高，造成菌株放缓和死亡。
上述补水美白化妆品的制备方法，包括以下步骤：
S1：按照质量份计，将3～5份保湿剂和10～15份功能发酵液混合搅拌均匀，加热至75～85℃反应10～15min，得到混合物Ⅰ；
S2：按照质量份计，将0.5～1.5份乳化剂、0.5～1份增稠剂加入50～70份水中搅拌均匀，加热至70～80℃停止加热，得到混合物Ⅱ，自然冷却至35～45℃，加入上述混合物Ⅰ搅拌均匀，冷却至温度为25～30℃时，停止搅拌，出料即得补水美白化妆品。
本发明的有益效果：本发明制备的补水美白化妆品具有很好的补水、美白、抗氧化效果，温和不刺激。其中的活性组分之一功能发酵液，不仅富含果胶、黏多糖等强保水物质，使化妆品配方中的营养物质持续作用于肌肤，让肌肤滑嫩，而且在制备中加入了金虫草菌丝粉末共同发酵，使功能发酵液富含虫草素、虫草酸、虫草多糖和超氧岐化酶等，虫草素具有抗菌作用，虫草酸可以特异性清除基体产生的自由基，虫草多糖具有抗衰老作用，可以改善皮肤状态，增强皮肤细胞的免疫功能，此外金虫草菌丝培养基中加入的小肽螯合盐或改性小肽螯合盐，进一步提高超氧岐化酶等积累，活性更高。
具体实施方式
部分原料如下：
聚甘油-10油酸酯，CAS号：9007-48-1，含量≥99％，广东高良科技有限公司。
黄原胶，货号：001，含量≥85％，河南初微生物科技有限公司。
仙人掌，拉丁属名：Opuntia stricta(Haw.)Haw.var.dillenii(Ker-Gawl.)Benson。
黄秋葵嫩果，黄秋葵(拉丁属名：Abelmoschus esculentus)的果实。
芦荟，拉丁属名：Aloe vera Berg。
金虫草母种，Cordyceps militaris，编号：CICC 14013，购买自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
德式乳杆菌，Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus，编号：CICC 6045，购买自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
异常汉逊酵母，Hansenula anomala，编号CICC1295，购买自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
羊毛，货号：03，长度：50mm，购买自河北霖沃绒毛制品有限公司。
角蛋白酶，货号：9014011，酶活力：20万u/g，购买自青岛海维森生物科技有限公司。
碱性蛋白酶，货号：FDG-2202，酶活力：20万u/g，购买自沧州夏盛酶生物技术有限公司。
对比例1
补水美白化妆品的制备方法，包括以下步骤：
S1：按照质量份计，将3份保湿剂和10份水混合搅拌均匀，加热至85℃，并在85℃下反应10min，得到混合物Ⅰ；
S2：按照质量份计，将1份乳化剂、0.5份增稠剂加入50份水中，加热至80℃后停止加热，得到混合物Ⅱ，待温度降至45℃，加入上述混合物Ⅰ搅拌均匀，冷却至温度至30℃时，停止搅拌，出料即得补水美白化妆品。
所述保湿剂为D-泛醇。
所述乳化剂为聚甘油-10油酸酯。
所述增稠剂为黄原胶。
实施例1
补水美白化妆品的制备方法，包括以下步骤：
S1：按照质量份计，将3份保湿剂和10份功能发酵液混合搅拌均匀，加热至85℃，在85℃下保温10min，得到混合物Ⅰ；
S2：按照质量份计，将1份乳化剂、0.5份增稠剂加入50份水中，加热至80℃停止加热，得到混合物Ⅱ，自然冷却，待温度降至45℃，加入上述混合物Ⅰ搅拌均匀，冷却至温度为30℃时，停止搅拌，出料即得补水美白化妆品。
所述保湿剂为D-泛醇。
所述乳化剂为聚甘油-10油酸酯。
所述增稠剂为黄原胶。
所述功能发酵液的制备，包括以下步骤：
1)挑选无机械损伤的仙人掌嫩叶、黄秋葵嫩果、芦荟叶，将仙人掌嫩叶去刺去除表皮、芦荟叶去除表皮、黄秋葵嫩果去除果蒂，均切为5g的小块，将仙人掌块、黄秋葵嫩果块和芦荟块按照质量比为5：4：1配伍后加入破壁机中，在2000W功率下破壁5min，得到发酵基体；
2)按照质量份计，将10份步骤1)所得发酵基体加入20份水中混合均匀，得到预发酵液，再向预发酵液中加入0.05份发酵剂，搅拌均匀后密封，30℃避光发酵10天得混合浆液B；
3)将步骤2)得到的混合浆液B在离心机中以3000rpm离心5min，取上清液，将上清液在110℃、400MPa下灭菌15min得到灭菌后的上清液，即为功能发酵液。
所述发酵剂为德式乳杆菌。
实施例2
补水美白化妆品的制备方法，包括以下步骤：
S1：按照质量份计，将3份保湿剂和10份功能发酵液混合均匀，搅拌，加热至85℃反应10min，得到混合物Ⅰ；
S2：按照质量份计，将1份乳化剂、0.5份增稠剂加入50份水中搅拌均匀，加热至80℃停止加热，得到混合物Ⅱ，自然冷却至45℃，加入上述混合物Ⅰ搅拌均匀，冷却至温度为30℃时，停止搅拌，出料即得补水美白化妆品。
所述保湿剂为D-泛醇。
所述乳化剂为聚甘油-10油酸酯。
所述增稠剂为黄原胶。
所述功能发酵液的制备，包括以下步骤：
1)挑选无机械损伤的仙人掌嫩叶、黄秋葵嫩果、芦荟叶，将仙人掌嫩叶去刺去除表皮、芦荟叶去除表皮、黄秋葵嫩果去除果蒂，均切为5g的小块，将仙人掌块、黄秋葵嫩果块和芦荟块按照质量比为5：4：1配伍后加入破壁机中，在2000W功率下破壁5min，得到发酵基体；
2)按照质量份计，将10份步骤1)所得发酵基体加入20份水中混合均匀，得到预发酵液，再向预发酵液中加入0.05份发酵剂，搅拌均匀后密封，30℃避光发酵10天得混合浆液B；
3)将步骤2)得到的混合浆液B在离心机中以3000rpm离心5min，取上清液，将上清液在110℃、400MPa下灭菌15min得到灭菌后的上清液，即为功能发酵液。
所述发酵剂为异常汉逊酵母。
实施例3
补水美白化妆品的制备方法，包括以下步骤：
S1：按照质量份计，将3份保湿剂和10份功能发酵液混合搅拌均匀，加热至85℃反应10min，得到混合物Ⅰ；
S2：按照质量份计，将1份乳化剂、0.5份增稠剂加入50份水中搅拌均匀，加热至80℃后停止加热，得到混合物Ⅱ，自然冷却，待温度降至45℃，加入上述混合物Ⅰ搅拌均匀，冷却至温度为30℃时，停止搅拌，出料即得补水美白化妆品。
所述保湿剂为D-泛醇。
所述乳化剂为聚甘油-10油酸酯。
所述增稠剂为黄原胶。
所述功能发酵液的制备，包括以下步骤：
1)挑选无机械损伤的仙人掌嫩叶、黄秋葵嫩果、芦荟叶，将仙人掌嫩叶去刺去除表皮、芦荟叶去除表皮、黄秋葵嫩果去除果蒂，均切为5g的小块，将仙人掌块、黄秋葵嫩果块和芦荟块按照质量比为5：4：1配伍后加入破壁机中，在2000W功率下破壁5min，得到发酵基体；
2)按照质量份计，将10份步骤1)所得发酵基体加入20份水中混合均匀，得到预发酵液，再向预发酵液中加入0.05份发酵剂，搅拌均匀后密封，30℃避光发酵10天得混合浆液B；
3)将步骤2)得到的发酵后的混合浆液B在离心机中以3000rpm离心5min，取上清液，将上清液在110℃、400MPa下灭菌15min得到灭菌后的上清液，即为功能发酵液。
所述发酵剂由德式乳杆菌和异常汉逊酵母按照质量比1:1.5混合而成。
实施例4
补水美白化妆品的制备方法，包括以下步骤：
S1：按照质量份计，将3份保湿剂和10份功能发酵液混合均匀加热至85℃反应10min，得到混合物Ⅰ；
S2：按照质量份计，将1份乳化剂、0.5份增稠剂加入50份水中搅拌均匀，加热至80℃后停止加热，得到混合物Ⅱ，自然冷却至45℃，加入上述混合物Ⅰ搅拌均匀，冷却至温度至30℃时，停止搅拌，出料即得补水美白化妆品。
所述保湿剂为D-泛醇。
所述乳化剂为聚甘油-10油酸酯。
所述增稠剂为黄原胶。
所述功能发酵液的制备，包括以下步骤：
1)挑选无机械损伤的仙人掌嫩叶、黄秋葵嫩果、芦荟叶，将仙人掌嫩叶去刺去除表皮、芦荟叶去除表皮、黄秋葵嫩果去除果蒂，均切为5g的小块，将仙人掌块、黄秋葵嫩果块和芦荟块按照质量比为5：4：1配伍后加入破壁机中，在2000W功率下破壁5min，得到发酵基体；
2)按照质量份计，将10份步骤1)所得发酵基体、0.5份金虫草菌丝粉加入20份水中混合均匀，得到预发酵液，再向预发酵液中加入0.05份发酵剂，搅拌均匀后密封，30℃避光发酵10天得混合浆液B；
3)将步骤2)得到的发酵后的混合浆液B在离心机中以3000rpm离心5min，取得上清液，将上清液在110℃、400MPa下灭菌15min得到灭菌后的上清液，即为功能发酵液。
所述金虫草菌丝粉末的制备方法，包括以下步骤：按照质量份计，将2份金虫草母种接种到50份液体培养基上，在温度为26℃下培养2d，进行菌种的活化，得到活化菌液，然后将活化后的菌种放到摇床上，维持温度为30℃，在200r/min的条件下震荡3d，生长出金虫草菌丝球，将金虫草菌丝球与液体培养基分离，并用水冲洗干净，将洗净的金虫草菌丝球放在-35℃下冷冻干燥10h，得到冷冻干燥后的金虫草菌丝球，再将冷冻干燥后的金虫草菌丝球研碎，所得粉末过400目筛，得金虫草菌丝粉末。
所述发酵剂由德式乳杆菌和异常汉逊酵母按照质量比1:1.5混合而成。
所述液体培养基按质量份计，由5份豆粕饼、12份葡萄糖、2.5份蛋白胨、0.3份硫酸镁和70份水组成。
实施例5
一种补水美白化妆品的制备方法，包括以下步骤：
S1：按照质量份计，将3份保湿剂和10份功能发酵液混合搅拌均匀，加热至85℃反应10min，得到混合物Ⅰ；
S2：按照质量份计，将1份乳化剂、0.5份增稠剂加入50份水中搅拌均匀，加热至80℃后停止加热，得到混合物Ⅱ，自然冷却至45℃，再加入上述混合物Ⅰ搅拌均匀，冷却至温度为30℃时，停止搅拌，出料即得补水美白化妆品。
所述保湿剂为D-泛醇。
所述乳化剂为聚甘油-10油酸酯。
所述增稠剂为黄原胶。
所述功能发酵液的制备，包括以下步骤：
1)挑选无机械损伤的仙人掌嫩叶、黄秋葵嫩果、芦荟叶，将仙人掌嫩叶去刺去除表皮、芦荟叶去除表皮、黄秋葵嫩果去除果蒂，均切为5g的小块，将仙人掌块、黄秋葵嫩果块和芦荟块按照质量比为5:4:1配伍后加入破壁机中，在2000W功率下破壁5min，得到发酵基体；
2)按照质量份计，将10份步骤1)所得发酵基体、0.5份金虫草菌丝粉加入20份水中混合均匀，得到预发酵液，再向预发酵液中加入0.05份发酵剂，搅拌均匀后密封，30℃避光发酵10天得混合浆液B；
3)将步骤2)得到的混合浆液B在离心机中以3000rpm离心5min，取上清液，将上清液在110℃、400MPa下灭菌15min，得到灭菌后的上清液，即为功能发酵液。
所述金虫草菌丝粉末的制备方法，包括以下步骤：按照质量份计，将2份金虫草母种接种到50份液体培养基上，在温度为26℃下培养2d进行菌种的活化，得到活化菌液，然后将活化后的菌种放到摇床上，维持温度为30℃、在200r/min的条件下震荡3d，生长出金虫草菌丝球，将金虫草菌丝球与液体培养基分离，并用水冲洗干净，将洗净的金虫草菌丝球放在-35℃下冷冻干燥10h，得到冷冻干燥后的金虫草菌丝球用研钵研碎过400目筛，得金虫草菌丝粉末。
所述发酵剂由德式乳杆菌和异常汉逊酵母按照质量比1:1.5混合而成。
所述液体培养基按质量份计：由5份豆粕饼、0.5份小肽螯合盐、12份葡萄糖、2.5份蛋白胨、0.3份硫酸镁和70份水组成。
所述小肽螯合盐的制备方法，包括以下步骤：
(1)缓冲液的配制：将0.2mol/L的磷酸二氢钠和0.2mol/L磷酸氢二钠按照体积比1:1混合，得到缓冲液；
(2)将羊毛按照浴比1g:5mL加入步骤(1)所述的缓冲液中，在40℃下，在100r/min的转速下搅拌15min，得到混合液A；按照质量份计，在50份混合液A中加入0.4份角蛋白酶和0.6份碱性蛋白酶，得到混合液B，将混合液B放在摇床上，维持温度为55℃、转速150r/min的条件下酶解8h，酶解结束后在100℃灭酶30min，得到酶解液，将酶解液在-35℃冷冻干燥10h，得到干肽粉；
(3)按照质量份计，将3份步骤(2)所得干肽粉、0.3份硫酸铜、0.5份硫酸亚铁和0.3份硫酸锰加入到10份水中，在50℃、200r/min下反应30min，得到混合液C，将混合液在-35℃冷冻干燥10h，得到小肽螯合盐。
实施例6
一种补水美白化妆品的制备方法，包括以下步骤：
S1：按照质量份计，将3份保湿剂和10份功能发酵液混合搅拌均匀，加热至85℃反应10min，得到混合物Ⅰ；
S2：按照质量份计，将1份乳化剂、0.5份增稠剂加入50份水中搅拌均匀，加热至80℃后停止加热，得到混合物Ⅱ，自然冷却至45℃，再加入上述混合物Ⅰ搅拌均匀，冷却至温度为30℃时，停止搅拌，出料即得补水美白化妆品。
所述保湿剂为D-泛醇。
所述乳化剂为聚甘油-10油酸酯。
所述增稠剂为黄原胶。
所述功能发酵液的制备，包括以下步骤：
1)挑选无机械损伤的仙人掌嫩叶、黄秋葵嫩果、芦荟叶，将仙人掌嫩叶去刺去除表皮、芦荟叶去除表皮、黄秋葵嫩果去除果蒂，均切为5g的小块，将仙人掌块、黄秋葵嫩果块和芦荟块按照质量比为5:4:1配伍后加入破壁机中，在2000W功率下破壁5min，得到发酵基体；
2)按照质量份计，将10份步骤1)所得发酵基体、0.5份金虫草菌丝粉末加入20份水中混合均匀，得到预发酵液，再向预发酵液中加入0.05份发酵剂，搅拌均匀后密封，30℃避光发酵10天得混合浆液B；
3)将步骤2)得到的混合浆液B在离心机中以3000rpm离心5min，取上清液，将上清液在110℃、400MPa下灭菌15min，得到灭菌后的上清液，即为功能发酵液。
所述金虫草菌丝粉末的制备方法，包括以下步骤：按照质量份计，将2份金虫草母种接种到50份液体培养基上，在温度为26℃下培养2d进行菌种的活化，得到活化菌液，然后将活化后的菌种放到摇床上，维持温度为30℃、在200r/min的条件下震荡3d，生长出金虫草菌丝球，将金虫草菌丝球与液体培养基分离，并用水冲洗干净，将洗净的金虫草菌丝球放在-35℃下冷冻干燥10h，得到冷冻干燥后的金虫草菌丝球研碎，所得粉末过400目筛，得金虫草菌丝粉末。
所述发酵剂由德式乳杆菌和异常汉逊酵母按照质量比1:1.5混合而成。
所述液体培养基按质量份计：由5份豆粕饼、0.5份改性小肽螯合盐、12份葡萄糖、2.5份蛋白胨、0.3份硫酸镁和70份水组成。
所述改性小肽螯合盐的制备方法，包括以下步骤：
(1)缓冲液的配制：将0.2mol/L的磷酸二氢钠和0.2mol/L磷酸氢二钠按照体积比1:1混合，得到缓冲液；
(2)将羊毛按照浴比1g:5mL加入步骤(1)所述的缓冲液中，在40℃下，在100r/min的转速下搅拌15min，得到混合液A；按照质量份计，在50份混合液A中加入0.4份角蛋白酶和0.6份碱性蛋白酶，得到混合液B，将混合液B放在摇床上，维持温度为55℃、转速150r/min的条件下酶解8h，酶解结束后在100℃灭酶30min，得到酶解液，将酶解液在-35℃冷冻干燥10h，得到干肽粉；
(3)按照质量份计，将3份步骤(2)所得干肽粉、0.3份硫酸铜、0.5份硫酸亚铁和0.3份硫酸锰加入到10份水中，在50℃、200r/min下反应30min，得到混合液C，将混合液在-35℃冷冻干燥10h，得到小肽螯合盐；
(4)按照质量份计，将3份小肽螯合盐、0.1份2-羟基乙胺、0.05份醋酸铈加入10份水中，在200W、25kHz的功率和频率下超声分散30min，得到混合液D，将混合液D在-35℃冷冻干燥10h，得到改性小肽螯合盐。
测试例1
抗氧化能力测试：将1mL实施例和对比例中的补水美白化妆品加水稀释至10mL，具体测试指标有：超氧自由基清除率、羟自由基清除率。
DPPH自由基清除率：配制0.04mg/mL的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼溶液(DPPH)，溶剂为无水乙醇；将2mL实施例和对比例中制备的补水美白化妆品样品的稀释液和2mL无水乙醇分别加入到2mLDPPH溶液中，室温反应30min，无水乙醇作为空白对照，分别测试样品和对照组在517nm处的吸光度值，根据公式1计算DPPH自由基清除率。
公式1：DPPH自由基清除率＝1-(精华液样品组/空白对照组)×100％。
羟自由基清除率：向5mL 3mmol/L的水杨酸醇溶液中加入2mL3mmol/L的硫酸铁溶液，再加入1mL实施例和对比例中制备的补水美白化妆品样品的稀释液，最后加入1mL3mmol/L的过氧化氢溶液，37℃下水浴加热15min，测试样品在510nm处的吸光度值。将上述步骤中1mL实施例1制备的补水美白化妆品样品换成1mL蒸馏水为空白对照，重复上述步骤。根据公式2计算羟自由基清除率。
公式2：羟自由基清除率＝1-(补水美白化妆品样品组吸光度/空白对照组吸光度)×100％
总还原能力：配制0.2mol/L的PBS，将1mL实施例和对比例中制备的补水美白化妆品样品分别加入到2.5mLPBS中，再加入2.5mL质量分数为1％铁氰化钾溶液，混匀后50℃反应20min，再加入2.5mL质量分数为10％三氯乙酸终止反应，5000rpm离心10min，上清液中加入0.5mL氯化铁溶液，测试在700nm处的吸光度值。
表1补水美白化妆品抗氧化测试
与对比例1相比，实施例1中添加了功能发酵液，发酵剂为德式乳杆菌，功能发酵液中含有的含有多种维生素，增强人体表皮细胞SOD活力和清除活性氧自由基的能力，乳酸还可以刺激胶原蛋白生成并帮助减少黑色素生成；实施例2中添加了功能发酵液，发酵剂为异常汉逊酵母，能够溶出更多的活性成分，并促进这些活性成分进一步穿透皮肤角质层进入肌低，使皮肤从根本上变白；实施例3中，发酵剂德式乳杆菌和异常汉逊酵母协同作用，增强皮肤的抗氧化功能；实施例4中功能发酵液中还加入了金虫草菌丝粉末一起发酵，功能发酵液中含有较多虫草酸、超氧岐化酶，虫草酸可以特异性清除基体产生的自由基，超氧岐化酶以自由基为底物，可以清除人体代谢产生的自由基，避免细胞受到氧化、老化和破坏，对于人体活性氧的代谢具有维护平衡的作用；实施例5中金虫草菌丝粉末的培养基中添加了小肽螯合盐，提高了菌丝产量，补充金虫草菌丝转化过程中转化虫草酸、SOD必需的铜、铁、锰元素，得到Cu-SOD、Fe-SOD和Mn-SOD多种不同金属辅基的超氧岐化酶。
测试例2
补水保湿效果测试：邀请30-40岁的女性为受试者，妊娠期或哺乳期妇女除外，受试者一个月内未使用激素类药物，将受试者随机分为7组，每组10人。
保湿测试参考QB/T 4256-2011《化妆品保湿功效评价指南》，取1mL实施例和对比例中的补水美白化妆品，均匀涂抹在受试者手背区，通过电容法皮肤水分测试仪测试受试者在使用精华液前和涂抹3h后的皮肤含水量，测试结果取10人的皮肤含水量的平均值，测试环境维持在25℃和40％的相对湿度环境中。
表2补水美白化妆品补水保湿效果测试
美白效果测试：女性受试者每天取用2mL实施例和对比例中的补水美白化妆品均匀涂于面部，坚持使用30天，使用MX18的皮肤黑色素和血红素测试仪检测各组志愿者的皮肤黑色素含量MI值。其中，MI值测量数值越高，说明黑色素含量越高。
表3补水美白化妆品美白效果测试
可以看出，与对比例1相比，实施例1中添加了功能发酵液，发酵剂为德式乳杆菌，所得功能发酵液中含有的胞外多糖和粘多糖具有持水、保湿的作用，还可以刺激胶原蛋白生成并帮助减少黑色素生成；实施例2中的发酵剂为异常汉逊酵母，发酵产生的乙醇可以溶出更多的活性成分，促进精华乳中的活性成分能够穿透角质层进入肌底，提高保湿和美白效果；实施例3中德式乳杆菌和异常汉逊酵母协同发酵，可以促进更多活性成分发挥美白护肤功效，同时控制皮肤的炎症，避免炎症释放的一些刺激黑素细胞活跃的物质，间接抑制黑色素的产生，此外发酵乳中含有有机酸，可以和乙醇产生酯化反应，防止酒精过多造成活性物质失活；实施例4中功能发酵液中还添加了金虫草菌丝粉末一起发酵，功能发酵液中的有机酸、酒精可以溶出更多的虫草酸、虫草多糖和超氧岐化酶，虫草酸能够清除皮肤自由基，具有抗氧化、促进新陈代谢的功能；实施例5中金虫草菌丝粉末的培养基中添加了小肽螯合盐，补充金虫草菌丝转化过程中转化虫草酸、SOD必需的铜、铁、锰元素，提高了金虫草菌丝中的超氧岐化酶含量，增强美白功效；实施例6中金虫草菌丝粉末的培养基中添加了改性小肽螯合盐，通过将2-羟基乙胺和醋酸铈改性，增加了菌丝的产率和有效成分的含量。
测试例3
刺激性测试：测试标准参考SN/T 4577-2016《化妆品皮肤刺激性检测重建人体表皮模型体外检测方法》。
表4补水美白化妆品刺激性测试
与对比例1相比，实施例1中添加了功能发酵液，发酵剂为德式乳杆菌，促进了细胞的新陈代谢，改善机体代谢，保护皮肤细胞免受损伤；实施例2中发酵剂为异常汉逊酵母，能够促进精华乳中的活性成分进入细胞，提高细胞活性；实施例3中德式乳杆菌和异常汉逊酵母共同作用，提高了有效控制炎症，促进细胞对精华乳中营养物质的吸收；实施例4中功能发酵液中添加了金虫草菌丝粉末一起发酵，功能发酵液中的有机酸、酒精可以溶出更多的虫草素、虫草素具有抗炎功效，能够增强细胞免疫；实施例5中金虫草菌丝粉末的培养基中添加了小肽螯合盐，补充金虫草菌丝有效成分所必需的金属微量元素；实施例6金虫草菌丝粉末的培养基中添加了改性小肽螯合盐，促进金虫草菌丝粉末有效活性物质含量的提高，进一步提高对皮肤细胞的养护功能。
Claims (7)
1.金虫草菌丝粉末，其特征在于，由以下方法制备而成：
按照质量份计，将2～3份金虫草母种接种到40～60份液体培养基上，在温度为25～30℃下培养1～2d，进行菌种的活化，得到活化菌液，然后将活化后的菌种放到摇床上，维持温度为20～30℃，在150～200r/min的条件下震荡3～5d，生长出金虫草菌丝球，将金虫草菌丝球与液体培养基分离，并用水冲洗干净，将洗净的金虫草菌丝球放在-35～-30℃下冷冻干燥8～10h，得到冷冻干燥后的金虫草菌丝球，再将冷冻干燥后的金虫草菌丝球研碎，所得粉末过300～400目筛，得所述金虫草菌丝粉末；
所述液体培养基按质量份计：由5～8份豆粕饼、0.1～0.5份小肽螯合盐或改性小肽螯合盐、12～15份葡萄糖、2.5～5份蛋白胨、0.1～0.3份硫酸镁和70份水组成。
2.如权利要求1所述的金虫草菌丝粉末，其特征在于，所述小肽螯合盐的制备方法为：
(1)缓冲液的配制：将0.2mol/L的磷酸二氢钠和0.2mol/L磷酸氢二钠按照体积比(1～3):(2～4)混合得到缓冲液；
(2)将羊毛按照浴比(1～3)g:(5～8)mL加入步骤1)所述的缓冲液中，在30～40℃下，在100～200r/min的转速下搅拌10～15min，得到混合液A，按照质量份计，在40～60份混合液A中加入0.4～0.6份角蛋白酶和0.6～0.8份碱性蛋白酶，得到混合液B，将混合液B放在摇床上，维持温度为50～60℃、转速150～200r/min的条件下酶解6～10h，酶解结束后在100～120℃灭酶30～40min，得到酶解液，将酶解液在-35～-30℃冷冻干燥8～10h，得到干肽粉；
(3)按照质量份计，将3～5份步骤(2)所得干肽粉、0.1～0.3份硫酸铜、0.3～0.5份硫酸亚铁和0.1～0.3份硫酸锰加入到10～12份水中，在40～60℃、200～300r/min下反应30～50min，得到混合液C，将混合液在-35～-30℃干燥8～10h，得到小肽螯合盐。
3.如权利要求1所述的金虫草菌丝粉末，其特征在于，所述改性小肽螯合盐的制备方法为：
(1)缓冲液的配制：将0.2mol/L的磷酸二氢钠和0.2mol/L磷酸氢二钠按照体积比(1～3):(2～4)混合得到缓冲液；
(2)将羊毛按照浴比(1～3)g:(5～8)mL加入步骤1)所述的缓冲液中，在30～40℃下，在100～200r/min的转速下搅拌10～15min，得到混合液A，按照质量份计，在40～60份混合液A中加入0.4～0.6份角蛋白酶和0.6～0.8份碱性蛋白酶，得到混合液B，将混合液B放在摇床上，维持温度为50～60℃、转速150～200r/min的条件下酶解6～10h，酶解结束后在100～120℃灭酶30～40min，得到酶解液，将酶解液在-35～-30℃冷冻干燥8～10h，得到干肽粉；
(3)按照质量份计，将3～5份步骤(2)所得干肽粉、0.1～0.3份硫酸铜、0.3～0.5份硫酸亚铁和0.1～0.3份硫酸锰加入到10～12份水中，在40～60℃、200～300r/min下反应30～50min，得到混合液C，将混合液在-35～-30℃干燥8～10h，得到小肽螯合盐；
(4)按照质量份计，将3～4份小肽螯合盐、0.1～0.3份2-羟基乙胺、0.05～1份醋酸铈加入10～15份水中，在200～300W、20～25kHz的功率和频率下超声分散30～40min，得到混合液D，将混合液D在-35～-30℃冷冻干燥8～10h，得到改性小肽螯合盐。
4.功能发酵液，其特征在于，由以下方法制备而成：
1)挑选无机械损伤的仙人掌嫩叶、黄秋葵嫩果、芦荟叶，将仙人掌嫩叶去刺去除表皮、芦荟叶去除表皮、黄秋葵嫩果去除果蒂，均切为5～8g的小块，按照质量比为(5～8)：(2～4)：(1～3)配伍后加入破壁机中，在2000～2200W功率下破壁5～8min，得到发酵基体；
2)按照质量份计，将10～15份步骤1)所得发酵基体、0.5～1份权利要求1-3任一项所述的金虫草菌丝粉末加入20～30份水中，得到预发酵液，再向预发酵液中加入0.03～0.1份发酵剂，搅拌均匀后密封，30～42℃避光发酵7～10天得混合浆液B；
3)将步骤2)得到发酵后的混合浆液B在离心机中3000～4000rpm离心5～8min得上清液，将上清液在100～110℃、300～400MPa下灭菌10～15min得到灭菌后的上清液，得到所述功能发酵液。
5.如权利要求4所述的功能发酵液，其特征在于，所述发酵剂为德式乳杆菌和异常汉逊酵母中的一种或两种的混合物。
6.一种补水美白化妆品，其特征在于，按照质量份计，由以下原料组成：3～5份保湿剂、10～15份权利要求4或5所述的功能发酵液、0.5～1.5份乳化剂、0.5～1份增稠剂、50～70份水。
7.如权利要求6所述补水美白化妆品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：将保湿剂和功能发酵液混合搅拌均匀，加热至75～85℃反应10～15min，分散均匀，得到混合物Ⅰ；
S2：将乳化剂、增稠剂加入水中搅拌均匀，加热至70～80℃，得到混合物Ⅱ，自然冷却至35～45℃，加入上述混合物Ⅰ搅拌均匀，冷却至温度为25～30℃时，停止搅拌，出料，即得补水美白化妆品。
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