CN115518009A

CN115518009A - 一种含芍药花提取液的护肤品及其制备方法

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Publication number: CN115518009A
Application number: CN202211119416.6A
Authority: CN
Inventors: 翟科峰; 段红; 陈远; 汪威; 吕佳敏; 李晗
Original assignee: Suzhou University
Current assignee: Suzhou University
Priority date: 2022-09-14
Filing date: 2022-09-14
Publication date: 2022-12-27

Abstract

本发明公开了一种含芍药花提取液的护肤品及其制备方法，护肤品以芍药花提取液为主要活性成分，所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：将芍药鲜花与提取溶剂混合，升温至85‑95℃加热3‑4h，停止加热，恢复至室温后过滤得到所述芍药花提取液；其中，所述提取溶剂为水、乙醇体积分数≤50％的乙醇水溶液中的一种。本发明制备的护肤品具有皮肤损伤修复、消炎、美白的功效，且安全性高。

Description

一种含芍药花提取液的护肤品及其制备方法

技术领域

本发明涉及护肤品技术领域，具体涉及一种含芍药花提取液的护肤品及其制备方法。

背景技术

芍药(Paeoniae Alba Radix)为毛茛科，芍药属植物。世界约有30种，分布于北温带，大部分产在亚洲，部分种类分布在欧洲南部和北美洲西部。中国有11种，主要分布西南、西北地区，其各种培植变种繁多。芍药多生长于山川河谷地带或土丘陵墓之上，主产于浙江、安徽、四川、山东、贵州、河南、云南等地。芍药作为中国传统名花之一，具悠久的栽培历史，作为观赏植物栽培，最早见于晋代崔豹的《古今注》中，被列为中国六大名花之一。

芍药花，作为芍药生长发育的器官，含有丰富的化合物，包括多种氨基酸、单萜苷类、三萜及其苷类、挥发油类、多糖类、黄酮类、鞣质类、生物碱、甾醇和氨基酸等多种化学成分。具有丰富的生物活性，包括抗氧化、活血化瘀、益气生精。且芍药花无毒故可食用，可作为药食同源植物。目前，国内外对于芍药花的研究有限。因此，基于芍药花开发功能产品可以满足人们对于健康的需求，前景广阔。且芍药花在种植芍药的过程中却被完全忽视，任由其花开凋零，造成巨大的资源浪费。因此，研发相关产品，实现芍药花资源的充分利用，对芍药花的综合开发具有重要意义。

随着时代的不断发展，社会不断进步，社会经济的不断发展，人们越来越注重自身的健康问题。其中皮肤是人体抵御外界的最外层器官，对人体保护以及美观起着极其重要的作用。然而随着现在工作压力日渐增大以及环境污染等问题，人体肌肤面临着巨大考验。皮肤容易出现毛囊炎、疖子、皮藓、疱疹、荨麻疹、色斑、起痘、黑头、皱纹等一系列问题。这些问题主要由包括环境微生物的干扰，自身免疫系统受损以及细胞衰老形成的。改善肤色逐渐成为广受关注的领域，而具有美白功效的产品也备受关注。

美白问题一直是人们亟待解决的问题。皮肤色素形成主要机理：黑色素细胞是位于表皮的基底层，是皮肤里面一种非常特殊的细胞，它约占基底层细胞总量的10％。由于不同外源和内源的因素，会促使黑色素细胞产生黑色素，从而传递给周围的角质形成细胞，一个黑色素细胞周围通常会分布着30～40个角质形成细胞，而黑色素细胞与周围角质形成细胞最终构成了一个黑色素形成单元。通常皮肤中的黑色素细胞会以酪氨酸为自有底物，在多种酶的氧化作用下生成黑色素；也就是非常熟悉的转化流程：酪氨酸——多巴——多巴醌——多巴色素——二羟基吲哚——酮式吲哚——黑色素，最终所形成的黑色素颗粒再由黑色素细胞树突转运至皮肤表皮层的基底层细胞，进一步随着细胞新陈代谢而被带到角质层，最终伴随着角质层的周期脱落而排出。参与黑色素形成的生物酶有多种多样，其中酪氨酸酶是黑色素合成起主要核心作用的酶，它的活性大小决定了黑色素形成的数量。

针对上述黑色素的形成机理，主要的美白作用方式有三种：一、通过抑制黑色素的形成。主要是通过抑制酪氨酸酶的活性，通过将酪氨酸酶抑制剂引入到黑色素细胞中，抑制黑色素的产生。如：熊果苷。二、通过还原性物质，将黑色素细胞中的有色物质还原成无色底物。酪氨酸以及多巴为无色物质，通过酪氨酸酶氧化形成有色物质，最终生成黑色素。然而，在黑色素的形成过程中，有色物质可以在还原性物质的作用下还原成前体物质最终变成无色。如：维生素C。三、通过增强皮肤代谢，将生成的有色物质，从皮肤中代谢出来，从而达到美白的效果。皮肤表面包被一层半透明角质层，是表层细胞代谢产生的蛋白角质层，主要是用来抵御外界环境对皮肤的刺激。但是，过厚的皮肤角质会抑制皮肤表面代谢，从而抑制黑色素的排出。因此，通过促进皮肤角质脱落，有利于增加皮肤美白。如：水杨酸。

目前，市场上以芍药花提取物为主要活性成分的相关产品并不多，且通过调研发现，在药用芍药的栽培过程中，为保证根部养分供给而采取打花措施，造成芍药花资源的流失。芍药花香清新，颜色艳丽，提取芍药花中的生物活性物质，开发以芍药花提取物为主要原料的芍药花洗涤护肤品，不仅避免了芍药花资源的浪费，而且弥补了市场上芍药花相关产品的空缺。不仅能够带动相关产业的发展，还能为药农带来一定经济收益。同时，可以增加芍药花野生资源的综合利用。

公布号为CN114376952A的中国专利申请文献中公开了一种芍药花提取物及其制备方法和应用，包括：(1)将干燥的芍药花花蕾粉碎后，按照1g：10～30mL的料液比加入体积比为60％～90％乙醇水溶液，置于30～60℃条件下浸提制得浸提液；(2)除去浸提液中的乙醇，得到浓缩液，再用水稀释至pH为5～7，然后干燥制得所述芍药花提取物。本发明明确了芍药花中的主要成分，实现了对其中4种活性成分的高效提取，并且工艺操作简便，得到的芍药花提取物质量好、品质稳定。本发明制备的芍药花提取物具有在抗氧化、抗衰老、防晒、美白、抗皱等方面的功效，为芍药花提取物在食品、化妆品方面的应用提供了有力支持；但是其使用的芍药花提取物仅明确了4种活性成分，且不具有皮肤损伤修复、消炎效果，限制了其应用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种具有修复皮肤损伤、消炎、美白功效的含芍药花提取液的护肤品。

本发明通过以下技术手段实现解决上述技术问题：

一种含芍药花提取液的护肤品，其以芍药花提取液为主要活性成分，所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：将芍药鲜花与提取溶剂混合，升温至85-95℃加热3- 4h，停止加热，恢复至室温后过滤得到所述芍药花提取液；其中，所述提取溶剂为水、乙醇体积分数≤50％的乙醇水溶液中的一种。

有益效果：以本发明所述方法制备的芍药花提取液中含有没食子酸、氧化芍药苷、芍药苷、芍药内酯苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、芦丁和苯甲酰芍药苷七种物质，通过控制七种物质的含量，使各物质协同增效，并且芍药花提取液中还含有丰富的氨基酸、多糖、花色苷以及酚类物质，使得到的护肤品不仅能够滋养肌肤，同时还具有较好的皮肤损伤修复、消炎以及美白效果，且对皮肤无明显刺激性，安全性高。

优选地，在所述芍药花提取液的提取工艺中，所述芍药鲜花与提取溶剂的质量体积比为3g：20-50mL。

优选地，在所述芍药花提取液的提取工艺中，所述芍药鲜花与提取溶剂的质量体积比为3g：20mL。

优选地，在所述芍药花提取液的提取工艺中，所述提取溶剂为乙醇体积分数为30％的乙醇水溶液。

优选地，在所述芍药花提取液的提取工艺中，恢复至室温后还包括用提取溶剂调节至升温回流前的重量，即调节至芍药鲜花与提取溶剂混合后的重量，然后再过滤。

优选地，所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：将芍药鲜花按料液比3g：20mL加入体积分数为30％的乙醇水溶液，升温至85℃恒温回流加热3h后，停止加热，恢复至室温用体积分数为30％乙醇水溶液调至升温回流前的重量，摇匀后过滤，所得提取液即为芍药花提取液。

优选地，所述护肤品的形态为霜剂、乳剂、精华液、凝胶剂、面膜中的任意一种。

优选地，所述的含芍药花提取液的护肤品，其为凝胶剂，以所述芍药花提取液为主要活性成分，以氮酮为促透剂，以羧甲基纤维素钠为基质，以甘油为保湿剂制备而成，且所述芍药花提取液、氮酮、羧甲基纤维素钠、甘油的用量比为20mL：0.7-0.8g： 0.15-0.3g：3-7g。

优选地，所述的含芍药花提取液的护肤品，其为精华液，其原料按重量份包括：芍药花提取液25-30份、甘油7.5-10份、异戊二醇0.05-2份、1,2-己二醇2-5份、丁二醇0.5-1.5份、对羟基苯乙酮0.2-1份、烟酰胺1-1.5份、抗坏血酸0.3-0.8份、EDTA二钠0.03-0.06份、泛醇0.5-1份、透明质酸钠0.02-0.06份、α-熊果苷0.02-0.04份、去离子水47.04-62.88份。

本发明还提出一种所述的含芍药花提取液的护肤品的制备方法，包括以下步骤：取羧甲基纤维素钠和氮酮，同时放进研钵中研磨，之后再加入甘油继续研磨，待充分后，加入芍药花提取液，再继续向一个方向研磨，直至其研磨成凝胶状得到所述含芍药花提取液的护肤品。

本发明还提出一种所述的含芍药花提取液的护肤品的制备方法，包括以下步骤：将甘油、异戊二醇、1,2-己二醇、丁二醇、对羟基苯乙酮、抗坏血酸、泛醇和去离子水混合后搅拌均匀，然后加入剩余原料，搅拌分散至无明显颗粒得到所述含芍药花提取液的护肤品。

成熟的芍药花花瓣细胞中含有85％的水。因此，本发明以水或低浓度乙醇水溶液为溶剂来提高溶剂的提取效果，采用热回流提取法进行提取，并控制了提取的温度和时间，使芍药花提取液中包括没食子酸、氧化芍药苷、芍药苷、芍药内酯苷、 1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、芦丁、苯甲酰芍药苷七种物质，使七种物质发挥协同作用，以所述芍药花提取液为活性物质得到的护肤品皮肤损伤修复、消炎、美白效果好，且对皮肤无明显刺激性，安全性高，不仅能够带动相关产业的发展，还能为药农带来一定经济收益。同时，可以增加芍药花野生资源的综合利用。

附图说明

图1为实施例1、7、8以及对比例2-4中不同浓度乙醇通过热回流提取法提取的芍药花提取液的指纹图谱比对；

图2为实施例1以及实施例9-10中不同料液比以30％乙醇进行热回流提取对芍药花提取结果指纹图谱比对；

图3为实施例1、7、8、对比例2-3和对比例5中不同溶剂热回流提取法提取的芍药花提取液以及Vc对ABTS自由基清除的影响；

图4为实施例1、7、8、对比例2-3和对比例5中不同溶剂热回流提取法提取的芍药花提取液和Vc对DPPH自由基清除的影响；

图5为Fe²⁺标准曲线图；

图6为实施例1、7、8以及对比例2-3和对比例5中不同溶剂热回流提取法提取的芍药花提取液和Vc总还原力的测定；

图7为实施例1、7、8、对比例2和对比例5中不同溶剂热回流提取法提取的芍药花提取液对酪氨酸酶活力影响；

图8为实施例1、对比例2和对比例5中的含芍药花提取液的凝胶剂干预皮肤损伤大鼠脾指数、耳肿胀度的影响；

图9为实施例1、对比例2和对比例5中的含芍药花提取液的凝胶剂干预皮肤损伤大鼠皮肤表征；

图10为实施例1、对比例2和对比例5中的含芍药花提取液的凝胶剂干预皮肤损伤大鼠皮肤组织切片HE染色；

图11为实施例1、对比例2和对比例5中的含芍药花提取液的凝胶剂干预皮肤损伤大鼠免疫、炎症因子影响；

图12为含不同浓度实施例4制备的芍药花提取液的精华液以及对比例2和对比例5中的精华液对ABTS自由基清除的影响；

图13为含不同浓度实施例4芍药花提取液的精华液以及对比例2和对比例5中的精华液对DPPH自由基清除的影响。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

下述实施例中所用的试验材料和试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例中未注明具体技术或条件者，均可以按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。

实施例1

一种含芍药花提取液的凝胶剂，其原料包括芍药花提取液、氮酮、羧甲基纤维素钠和甘油，且所述芍药花提取液、氮酮、羧甲基纤维素钠、甘油的用量分别为20mL、0.7g、0.3g、3g。

一种所述的含芍药花提取液的凝胶剂的制备方法，包括以下步骤：取羧甲基纤维素钠和氮酮，同时放进研钵中研磨，再加入甘油继续研磨，待充分后，加入芍药花提取液，继续向一个方向研磨，直至其研磨成凝胶状得到所述含芍药花提取液的凝胶剂。

所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：称取芍药鲜花50g进行提取。具体的，将芍药鲜花按料液比3g：20mL加入体积分数为30％的乙醇水溶液后称重，升温至85℃恒温回流加热3h后，停止加热，恢复至室温，用体积分数为30％乙醇水溶液调至升温回流前称量的重量，摇匀后过滤，所得提取液即为芍药花提取液，作为检测液进行后续检测。

实施例2

与实施例1的不同仅在于：凝胶剂的原料中，所述芍药花提取液、氮酮、羧甲基纤维素钠、甘油的用量分别为20mL、0.8g、0.15g、7g，其余与实施例1相同。

实施例3

与实施例1的不同仅在于：凝胶剂的原料中，所述芍药花提取液、氮酮、羧甲基纤维素钠、甘油的用量分别为20mL、0.76g、0.2g、5g，其余与实施例1相同。

实施例4

一种含芍药花提取液的精华液，其原料按重量份包括：芍药花提取液25份、甘油7.5份、异戊二醇0.05份、1,2-己二醇2份、丁二醇1.5份、对羟基苯乙酮0.2份、烟酰胺1份、抗坏血酸0.5份、EDTA二钠0.05份、泛醇0.75份、透明质酸钠0.05份、α- 熊果苷0.03份、去离子水61.37份。

一种所述的含芍药花提取液的精华液的制备方法，包括以下步骤：将甘油、异戊二醇、1,2-己二醇、丁二醇、对羟基苯乙酮、抗坏血酸、泛醇和去离子水混合后搅拌均匀，然后加入剩余原料，搅拌分散至无明显颗粒得到所述含芍药花提取液的精华液。

所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：称取芍药鲜花50g进行提取，具体的，将芍药鲜花按料液比3g：20mL加入体积分数为30％的乙醇水溶液后称重，升温至85℃恒温回流加热3h后，停止加热，恢复至室温，用体积分数为30％乙醇水溶液调至升温回流前称量的重量后摇匀过滤，所得提取液即为芍药花提取液，作为检测液进行后续检测。

实施例5

一种含芍药花提取液的精华液，其原料按重量份包括：芍药花提取液30份、甘油 8份、异戊二醇2份、1,2-己二醇3份、丁二醇0.6份、对羟基苯乙酮1份、烟酰胺1份、抗坏血酸0.8份、EDTA二钠0.06份、泛醇0.5份、透明质酸钠0.06份、α-熊果苷0.03 份、去离子水52.95份。

所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：称取芍药鲜花50g进行提取，具体的，将芍药鲜花按料液比3g：30mL加入超纯水后称重，升温至90℃恒温回流加热4h 后，停止加热，恢复至室温，用提取溶剂超纯水调至升温回流前称量的重量后过滤，所得提取液即为芍药花提取液，作为检测液进行后续检测。

实施例6

一种含芍药花提取液的精华液，其原料按重量份包括：芍药花提取液28份、甘油7.5份、异戊二醇2份、1,2-己二醇3份、丁二醇0.8份、对羟基苯乙酮0.5份、烟酰胺 1.25份、抗坏血酸0.6份、EDTA二钠0.03份、泛醇0.5份、透明质酸钠0.02份、α-熊果苷0.04份、去离子水55.76份。

所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：称取芍药鲜花50g进行提取，具体的，将芍药鲜花按料液比3g：50mL加入体积分数为50％的乙醇水溶液后称重，升温至95℃恒温回流加热3.5h后，停止加热，恢复至室温，用体积分数为50％乙醇水溶液调至升温回流前称量的重量后摇匀过滤，所得提取液即为芍药花提取液，作为检测液进行后续检测。

实施例7

一种含芍药花提取液的凝胶剂，其原料包括芍药花提取液、氮酮、羧甲基纤维素钠和甘油，且所述芍药花提取液、氮酮、羧甲基纤维素钠、甘油的用量分别为20mL、 0.7g、0.3g、3g。

一种所述的含芍药花提取液的凝胶剂的制备方法，包括以下步骤：取羧甲基纤维素钠和氮酮，同时放进研钵中研磨，之后再加入甘油继续研磨，待充分后，加入芍药花提取液，再继续向一个方向研磨，直至其研磨成凝胶状得到所述含芍药花提取液的凝胶剂。

所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：称取芍药鲜花50g进行提取。具体的，将芍药鲜花按料液比3g：20mL加入超纯水后称重，升温至85℃恒温回流加热3h 后，停止加热，恢复至室温，用超纯水调至升温回流前称量的重量，摇匀后过滤，所得提取液即为芍药花提取液，作为检测液进行后续检测。

实施例8

所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：称取芍药鲜花50g进行提取。具体的，将芍药鲜花按料液比3g：20mL加入体积分数为50％的乙醇水溶液后称重，升温至85℃恒温回流加热3h后，停止加热，恢复至室温，用体积分数为50％乙醇水溶液调至升温回流前称量的重量，摇匀后过滤，所得提取液即为芍药花提取液，作为检测液进行后续检测。

实施例9

一种含芍药花提取液的凝胶剂，其原料包括芍药花提取液、氮酮、羧甲基纤维素钠和甘油，且所述芍药花提取液、氮酮、羧甲基纤维素钠、甘油的用量分别为40mL、 1.4g、0.6g、6g。

所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：称取芍药鲜花50g进行提取，具体的，将芍药鲜花按料液比3g：40mL加入体积分数为30％的乙醇水溶液后称重，升温至85℃恒温回流加热3h后，停止加热，恢复至室温用提取溶剂调至升温回流前称量的重量后过滤，所得提取液即为芍药花提取液，作为检测液进行后续检测。

实施例10

与实施例9的不同仅在于：在所述芍药花提取液的提取工艺中，按料液比3g： 50mL加入体积分数为30％的乙醇水溶液，其余与实施例9相同。

实施例11

与实施例6的不同仅在于：所述精华液的原料按重量份包括：芍药花提取液28份、甘油10份、异戊二醇2份、1,2-己二醇5份、丁二醇0.6份、对羟基苯乙酮0.5份、烟酰胺1.5份、抗坏血酸0.3份、EDTA二钠0.03份、泛醇0.5份、透明质酸钠0.02份、α-熊果苷0.04份、去离子水62.88份。

实施例12

与实施例6的不同仅在于：所述精华液的原料按重量份包括：芍药花提取液28份、甘油8份、异戊二醇2份、1,2-己二醇4份、丁二醇0.5份、对羟基苯乙酮0.5份、烟酰胺1.25份、抗坏血酸0.4份、EDTA二钠0.03份、泛醇1份、透明质酸钠0.02份、α-熊果苷0.02份、去离子水47.04份。

对比例1

一种芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：精密称取芍药鲜花50g进行提取，具体的，将芍药鲜花按料液比3g：20mL加入体积分数为30％的乙醇后称重，于室温浸提3h后，用提取溶剂调至升温回流前称量的重量后过滤，所得提取液即为芍药花提取液，作为检测液进行后续检测。

对比例2

一种含芍药花提取液的凝胶剂，其原料包括芍药花提取液20mL、氮酮0.7g、羧甲基纤维素钠0.3g和甘油3g。

其中，所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：称取芍药鲜花50g进行提取，具体的，将芍药鲜花按料液比3g：20mL加入体积分数为70％的乙醇水溶液后称重，升温至85℃恒温回流加热3h后，停止加热，恢复至室温用提取溶剂调至升温回流前称量的重量后过滤，所得提取液即为芍药花提取液，作为检测液进行后续检测。

所述含芍药花提取液的精华液的制备方法同实施例4；所述含芍药花提取液的凝胶剂的制备方法同实施例1。

对比例3

一种芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：称取芍药鲜花50g进行提取，具体的，将芍药鲜花按料液比3g：20mL加入体积分数为90％的乙醇水溶液后称重，升温至85℃恒温回流加热3h后，停止加热，恢复至室温用提取溶剂调至升温回流前称量的重量后过滤，所得提取液即为芍药花提取液，作为检测液进行后续检测。

对比例4

一种芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：称取芍药鲜花50g进行提取，具体的，将芍药鲜花按料液比3g：20mL加入无水乙醇后称重，升温至85℃恒温回流加热 3h后，停止加热，恢复至室温用提取溶剂调至升温回流前称量的重量后过滤，所得提取液即为芍药花提取液，作为检测液进行后续检测。

对比例5

其中，所述的芍药花提取液参照公布号为CN114376952A的中国专利申请文献实施例1的提取方法提取得到；具体包括以下步骤：将1kg干燥的芍药花花蕾粉碎，按照1g：20mL的料液比，加入80％(v/v)的乙醇水溶液，控制温度为50℃，静置24h；将提取液与芍药花粉末分离得到所述芍药花提取液。

下面对实施例1-12制备得到的芍药花提取液进行检测，对芍药花中主要活性成分进行定量分析，明确指出芍药花中含有以下成分，分别为没食子酸、氧化芍药苷、芍药苷、芍药内酯苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、芦丁、苯甲酰芍药苷。结构式见下式：

(1)标准品溶液的制备

没食子酸：精密称取没食子酸标准品13.40mg溶于10mL甲醇，得到浓度为 1.34mg/mL的没食子酸储备液；

氧化芍药苷：精密称取14.80mg氧化芍药苷溶于10mL甲醇中，得到浓度为 1.48mg/mL的氧化芍药苷标样储备液；

芍药内酯苷：精密称取芍药内酯苷35.50mg于试管中，加入10mL甲醇得到浓度为3.55mg/mL的芍药内酯苷储备液；

芍药苷：精密称取芍药苷18.40mg于试管中，加入10mL甲醇得到浓度为 1.84mg/mL的芍药苷储备液；

1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖：精密称取1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖35.5mg，溶于 10mL甲醇中，得到浓度为3.55mg/mL的五没食子酰葡萄糖标准品储备液；

芦丁：精密称取41.40mg芦丁于10mL容量瓶中以甲醇定容，得到浓度为 4.14mg/mL的芦丁储备液。

苯甲酰芍药苷：精密称取苯甲酰芍药苷16.10mg于10mL容量瓶中，以甲醇为溶剂定容至刻度，得到浓度为1.61mg/mL的苯甲酰芍药苷储备液。

混合标准品溶液的配制：准确量取上述7种标准品储备液各0.2mL至2mL道夫管中，混匀，稀释至1.6mL。得到浓度分别为没食子酸167.5μg/mL、氧化芍药苷185μg/mL、芍药内酯苷443μg/mL、芍药苷230μg/mL、芦丁517μg/mL、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖443μg/mL、苯甲酰芍药苷201μg/mL的混合标准品溶液。

(2)色谱条件

采用shim-pack C18色谱柱，以乙腈(A)-体积分数为0.5％醋酸水溶液(B)为流动相，设置柱温30℃，调整总流速为0.8mL/min；检测波长230nm；梯度洗脱程序中乙腈与体积分数为0.5％醋酸水溶液的体积比见表1。

表1HPLC梯度洗脱时间程序

(3)线性关系

取上述混合标准品溶液1.0mL、0.8mL、0.6mL、0.2mL、0.1mL分别至10mL容量瓶中，以甲醇为溶剂配制成5个梯度溶液。按上述(2)中的色谱条件每个梯度重复进样3次，记录各标准品的出峰时间统计各物质的峰面积，以各标准品浓度(x)为横坐标，平均峰面积(y)为纵坐标绘制标准曲线。结果表明没食子酸在1.68-167.50μg/mL、氧化芍药苷在1.85-185.21μg/mL、芍药内酯苷在4.50-443.75μg/mL、芍药苷在2.32- 230.25μg/mL、芦丁在2.18-517.20μg/mL、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖在4.19- 418.75μg/mL、苯甲酰芍药苷在2.12-200.23μg/mL范围内具有良好的线性关系。各标准品线性关系，结果见表2。

表2各标准品标准曲线

(4)含量测定

将实施例1、7-10以及对比例1-5中制备的芍药花提取液进行检测，取上述制备的供试品溶液，按上述(2)中的色谱条件进样测定，进样量20μL，重复进样3次，记录出峰时间以及峰面积，计算各成分没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、芦丁、五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷的含量。各提取方法中，各物质的平均含量，结果见表3。

表3各提取方法芍药花提取液各物质含量

图1为实施例1、7、8以及对比例2-4不同浓度乙醇通过热回流提取法提取的芍药花提取液的指纹图谱比对，其中，图中纯水指溶剂为超纯水(对应实施例7的芍药花提取液)，30％乙醇指溶剂为体积分数为30％的乙醇水溶液(对应实施例1的芍药花提取液)，50％乙醇指溶剂为体积分数为50％的乙醇水溶液(对应实施例8的芍药花提取液)，70％乙醇指溶剂为体积分数为70％的乙醇水溶液(对应对比例2的芍药花提取液)，90％乙醇指溶剂为体积分数为90％的乙醇水溶液(对应对比例3的芍药花提取液)，无水乙醇指溶剂为无水乙醇(对应对比例4的芍药花提取液)；图2为实施例1 和实施例9-10，不同料液比芍药花在30％乙醇为溶剂通过热回流法对芍药花提取结果指纹图谱比对，其中，1：20对应的是芍药鲜花与溶剂的料液比3g：20mL(实施例1)， 1：40对应的是芍药鲜花与溶剂的料液比3g：40mL(实施例9)，1：50对应的是芍药鲜花与溶剂的料液比3g：50mL(实施例10)；

由表3和图1-2可知，不同提取方法以及料液比对芍药花中不同成分的含量不同。对比例1、5的浸提法提取得到的芍药花提取物的活性成分较少，仅含有没食子酸、芍药内脂苷、芍药苷、五没食子酰葡萄糖，进一步证明了浸提法无法提取得到含较多活性成分的芍药花提取物，对比例2-4的提取在相同提取条件下，通过调整不同浓度的提取溶剂，探究对芍药花中相关物质的提取效果，比较发现70％-90％的乙醇对芦丁的提取效果较好，但对于五没食子酰葡萄糖的提取效果较差。结合图3-6，发现该范围内对芍药花中的抗氧化活性物质提取效果较差，其中对比例5制备的样品虽具有一定的清除自由基能力，但清除自由基效果相较于实施例1、7、8较差。

下面对制备得到的芍药花提取液进行抗氧化测试。

(1)供试样品溶液的配制

分别取上述实施例1、7和8、对比例2-3和对比例5不同提取方法制备的芍药花提取液，于上述HPLC色谱条件下分析，结合线性关系，计算含量，以芍药苷含量为恒定标准。将各样本调整至芍药苷浓度为0.1543μg/mL得到各供试品溶液。

(2)自由基工作液的配制

DPPH工作液的配制：精密称取3.94mg 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)定容至10mL无水乙醇中。取1mL上述溶液定容至10mL，得到0.1mM DPPH溶液，使用前调整工作液吸光值至0.7±0.02。

FRAP工作液的配制：

300mM醋酸缓冲溶液的配制：精密称取1.869g醋酸钠粉末，加16mL醋酸以水为溶剂定容至1L。

10mM三吡啶基三嗪(TPTZ)溶液的配制：精密称取0.312g TPTZ粉末，加入 0.34mL浓盐酸，以水为溶剂定容至100mL。

20mM三氯化铁溶液的配制：精密称取2.703g三氯化铁粉末，以水为溶剂定容至500mL。

使用时将上述三种液体按照醋酸缓冲溶液：TPTZ溶液：三氯化铁溶液体积比＝10:1:1混合。

2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)工作液的配制：分别称取ABTS标准品粉末、过硫酸钾粉末0.0384g和0.0134g分别以水定容至10mL。将上述溶液按体积1：1混合避光反应12h，使用前调整ABTS工作液吸光值至0.7±0.02。

(3)阳性对照品的制备

精密称取维生素C(Vc)样品0.0600g加超纯水定容至10mL，得到6mg/mL的Vc 储备液。将所得V_C储备液以超纯水稀释至0.06mg/mL、0.006mg/mL，其中 0.006mg/mL用于ABTS、DPPH抗氧化检测，0.06mg/mL用于FRAP总还原力的测定。

(4)测试结果

1.芍药花提取液ABTS自由基的清除

分别取上述各供试品溶液100μL于96孔板中，加入ABTS工作液100μL，混匀，室温避光30min，于734nm处测定吸光度。供试品溶液吸光度为A1，以纯化水作为空白对照组，吸光度为A0，以水代替ABTS溶液作为本底组，吸光度为A2。根据公式 (1)计算出不同方法制备的样品溶液对ABTS自由基的清除率。各提取方法为横坐标，自由基清除率为纵坐标绘制柱状图，结果见图3。

2.芍药花提取液对DPPH自由基的清除

分别取上述各供试品溶液100μL于96孔板中，加入DPPH工作液(0.1mmol/L) 100μL，混匀，室温避光30min，于517nm处测定吸光度。供试品溶液与DPPH反应吸光度为Ai，以纯化水替代样品作为空白对照组，吸光度为A0，以无水乙醇代替DPPH工作液作为本底组，吸光度为Aj。根据公式(2)计算出不同方法制备的样品溶液对DPPH自由基的清除率。以各提取方法为横坐标，以自由基清除率值为纵坐标绘制柱状图，结果见图4。

3.芍药花提取液FRAP总还原力的测定

3.1Fe²⁺标准曲线的制作

在96孔板中依次加入180μL的FRAP工作液和20μL不同浓度的FeSO₄溶液。 FeSO₄溶液浓度分别为0.1014mmol/L、0.12675mmol/L、0.2535mmol/L、0.507mmol/L、 1.014mmol/L，摇匀，37℃孵育30min，测定波长为593nm的吸光度A。以吸光值为纵坐标，Fe²⁺浓度为横坐标绘制标准曲线，结果如图5所示。

3.2样品总还原力的测定

于96孔板中依次加入180μL的FRAP工作液和20μL上述各供试品溶液。以 0.06mg/mL的维生素C溶液为阳性对照。摇匀，37℃孵育30min，测定波长为593nm 的吸光度A。在标准曲线上求得相应FeSO₄的浓度，定义为FRAP值。FRAP值越大，抗氧化活性越强。计算总还原力，各提取方法为横坐标，以还原Fe²⁺浓度值为纵坐标绘制柱状图，结果见图6。

通过图3、4和6比较各提取液的DPPH、ABTS以及FRAP体外抗氧化结果。结果表明各提取液均有体外清除自由基能力。其中0％、30％与50％乙醇提取液表现出较强的体外清除自由基能力，其中30％乙醇提取液自由基清除效果最好，对比例5的提取液(Contrast)虽然具有清除自由基的能力，但清除自由基能力较弱。综上所述，以 30％乙醇，按料液比3g:20mL，加热3h，为最佳的提取方法，且具有较好的清除自由基能力。

其中，图3、4和6中，0％指溶剂为超纯水(实施例7)，30％指溶剂为体积分数为30％的乙醇水溶液(对应实施例1中的提取液)，50％指溶剂为体积分数为50％的乙醇水溶液(对应实施例8中的提取液)，70％指溶剂为体积分数为70％的乙醇水溶液 (对应对比例2中的提取液)，90％指溶剂为体积分数为90％的乙醇水溶液(对应对比例3中的提取液)，Contrast对应对比例5中的提取液。

4.酪氨酸酶活性抑制

分别取上述实施例1、7和8以及对比例2和对比例5制备的芍药花提取液，以 PBS缓冲液稀释至芍药苷为5.66、2.83、1.89、1.42、1.13μg/mL。分别取不同浓度的各样品溶液50μL、1 x PBS溶液80μL、100U酪氨酸酶溶液50μL依次加入96孔板中，设 5个复孔，在37℃下孵育10min，再向每个孔中加入20μL L-DOPA底物(10mM)触发反应，孵育30min，用酶标仪测定475nm处的吸光度值，重复测定3次。记录A、B、 C、D的吸光度值。

其中，A为空白对照组(PBS 130μL+酶50μL+底物20μL)在475nm处测定的吸光度；B为空白背景组(PBS 180μL+底物20μL)在475nm处测定的吸光度；C为实验组 (PBS 80μL+酶50μL+供试品溶液50μL+底物20μL)在475nm处测定的吸光度；D为实验背景组(PBS 130μL+供试品溶液50μL+底物20μL)在475nm处测定的吸光度。并计算酪氨酸酶活性抑制率，以芍药花提取液用PBS的稀释浓度为横坐标，以抑制率为纵坐标绘制柱状图(图7)比较各提取液自由基清除能力。图7中水提取物指超纯水提取(对应实施例7的提取液)，30％醇提取物指体积分数为30％的乙醇水溶液提取物 (对应实施例1的提取液)，50％醇提取物指体积分数为50％的乙醇水溶液提取物(对应实施例8的提取液)，70％醇提取物指体积分数为70％的乙醇水溶液提取物(对应对比例2的提取液)，Contrast指的是对比例5制备的芍药花提取液；如图7所示，结果表明，各提取物均具有较好的抑制酪氨酸酶活性能力，其中30％醇提取物活性最好， 50％醇提取物次之，对比例5制备的芍药花提取物虽然具有抑制酶活性，但效果相较于 30％与50％醇提取物较差。

含芍药花提取液的护肤品的皮肤损伤修复活性评价

1.选用6～8周龄、体重280-300g左右的雌性64只SD大鼠，SPF级，购于辽宁长生生物科技有限公司(动物许可证号：SCXK(辽)2020-0001)。

2.试剂配制：

①芍药花提取液凝胶：

低剂量：以实施例1中的芍药花提取液10mL、10mL体积分数为30％乙醇水溶液、0.7g氮酮、0.3g羧甲基纤维素钠、3g甘油为原料制备的芍药花提取液凝胶；

中剂量：以实施例1中的芍药花提取液15mL、5mL体积分数为30％乙醇水溶液、0.7g氮酮、0.3g羧甲基纤维素钠、3g甘油为原料制备的芍药花提取液凝胶；

高剂量：以实施例1中的芍药花提取液20mL、0.7g氮酮、0.3g羧甲基纤维素钠、 3g甘油为原料制备的芍药花提取液凝胶。

Contrast组凝胶：以对比例5中的芍药花提取液20mL、0.7g氮酮、0.3g羧甲基纤维素钠、3g甘油为原料制备的芍药花提取液凝胶。

70％乙醇对比组凝胶：以对比例2中的芍药花提取液20mL、0.7g氮酮、0.3g羧甲基纤维素钠、3g甘油为原料制备的芍药花提取液凝胶。

②致炎药物的制备：以DNFB(2,4-二硝基氟苯)为致炎药物，以橄榄油：丙酮体积比为1:3为溶剂，按照体积比配制5％，2％的致炎药物。

阳性药：市售的999皮炎平乳膏。

3.大鼠的分组

大鼠背部剔除毛发，面积约3×3cm²，分八组(每组n＝8只)：空白对照组， DNFB模型组、给药组(低剂量组使用低剂量凝胶，中剂量组使用中剂量凝胶，高剂量组使用高剂量凝胶)、阳性药组、对比组(Contrast组)、70％乙醇对比组。

4.制备大鼠皮炎模型

第一天，以体积比5％DNFB致炎药物对模型组、给药组、阳性药组、Contrast组以及70％乙醇对比组涂抹大鼠的背部以及右耳，空白组涂抹等量的橄榄油丙酮基质，左耳不做处理。造模第2天，重复上述操作。造模第7天，模型组、给药组、阳性药组、Contrast组以及70％乙醇对比组于背部以及右耳涂抹体积比为2％的DNFB致炎剂，诱导炎症30min后，给药组、Contrast组以及70％乙醇对比组于右耳和后背涂抹芍药花提取液凝胶，阳性药组于右耳和后背涂抹地塞米松软膏999皮炎平乳膏。空白组于背部以及右耳涂抹等量的丙酮和橄榄油，静置30min，于右耳和后背给予等量的无芍药花提取液的凝胶基质(20mL 30％乙醇水溶液、0.7g氮酮、0.3g羧甲基纤维素钠、3g甘油为原料制成)。造模第8天，给药组、Contrast组以及70％乙醇对比组重复涂抹芍药花提取液凝胶，阳性药组重复涂抹地塞米松软膏999皮炎平乳膏，空白组重复涂抹等量的无芍药花提取液的凝胶基质；造模第9天，重复第8天的操作。第10天重复第7 天操作，如此重复造模至21天。第22天，称重，取大鼠眼眶血后，脱颈处死后。取大鼠脾脏，左右耳片称重，取大鼠背部皮肤，并记录数据。计算：大鼠脾指数＝脾质量 /大鼠质量，耳肿胀度＝(右耳质量-左耳质量)/左耳质量，结果见图8，其中，A为大鼠脾指数，B为大鼠耳肿胀度，柱状图从左到右第一列到第八列依次是空白组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、阳性药组、Contrast组、70％乙醇对比组数据，且图中下面的横坐标表示的是分组和给药，+表示有，-表示没有。数字表示给予的浓度(1.0％表示低剂量、1.5％表示中剂量、2.0％表示高剂量)；30％PLPE表示实施例1 芍药花提取液制备的凝胶；DXMS表示阳性药999皮炎平；DNFB表示致炎药物； Contrast表示对比例5芍药花提取液制备的凝胶，70％PLPE表示对比例2芍药花提取液制备的凝胶；如图8A所示，模型组脾指数明显高于空白组(^##P<0.01)，实验各组脾指数明显下降，且随着给药剂量的增加，给药组的脾指数逐渐下降，呈剂量依赖性。图8B显示，模型组耳肿胀度明显高于空白组(^##P<0.01)，实验组耳肿胀度明显下降，且随着给药剂量的增加，给药组的耳肿胀度明显降低，且呈剂量依赖性(^**P<0.01)，虽然Contrast组和70％乙醇对比组也有较好的脾指数以及耳肿胀度抑制效果，但作用功效相较于给药组芍药花提取液制备的凝胶较差，且Contrast组相较于70％乙醇对比组具有较好的治疗效果，但治疗效果相较于30％乙醇实验组效果较差。

5.大鼠皮肤形态观察

对大鼠皮肤形态观察结果见图9，从左到右分别为空白组(Control)、模型组(0.2％DNFB)、低剂量组(PLPE(30％)1.0％)、中剂量组(PLPE(30％)1.5％)、高剂量组(PLPE(30％)2.0％)、阳性药组(DXMS)、对比组(Contrast)、70％乙醇对比组(PLPE(70％))；由图9可知，模型组大鼠背部皮肤损伤严重，呈现典型的皮肤损伤。空白组大鼠皮肤正常，无明显损伤。经过芍药花提取液凝胶治疗，给药组大鼠背部皮肤红肿逐渐消失，损伤得到缓解，且随药物浓度的增加明显得到改善；对比组(Contrast)、70％乙醇对比组(PLPE(70％))虽然有一定的治疗效果，但相较于高剂量组治疗效果较差，其中对比组(Contrast)相较于70％乙醇对比组(PLPE(70％)) 治疗效果较好；

6.大鼠组织病理学检测

取2mm×2mm大鼠皮肤，包埋在OCT包埋胶中，于莱卡冰冻切片机中切出厚度为 7μm组织薄片，贴于载玻片上。

光学显微镜下观察HE染色切片，分析各组大鼠表皮厚度、炎细胞浸润程度。结果显示：空白组大鼠表皮薄，与模型组相比皮下炎细胞浸润少。而模型组大鼠表皮显著增厚，皮下炎细胞浸润明显。与模型组相比，给药组、阳性药组、对比组和70％乙醇对比组芍药花提取液凝胶治疗大鼠的表皮厚度、炎细胞浸润程度均明显减轻 (P<0.001)，但高剂量组相较于对比组仍然具有较好的治疗效果。随着芍药花提取物剂量的升高大鼠的表皮厚度及炎细胞浸润程度呈剂量依赖性(P<0.05)(图10，其中， Control为空白组、DNFB为模型组、30％PLPE1.0％为低剂量组、30％PLPE1.5％为中剂量组、30％PLPE2.0％为高剂量组、DXMS为阳性药组、Contrast为对比组、70％PLPE 为70％乙醇对比组)

7.ELISA检测大鼠血清中IL-1β、TNF-α、IgA、IgG表达

取大鼠眼眶血，静置离心后取上层血清，利用ELISA检测大鼠血清中的炎症和免疫因子，其中图11为大鼠炎症因子和免疫因子的检测结果，其中，图中的A、B分别为炎症因子IL-1β和TNF-α的检测结果，C、D分别为免疫因子IgA和IgG的检测结果，柱状图从左到右，第一列到第八列依次是空白组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、阳性药组、对比组和70％乙醇对比组数据，且图中下面的横坐标表示的是分组和给药，+表示有，-表示没有。数字表示给予的浓度(1.0％表示低剂量、1.5％表示中剂量、2.0％表示高剂量)；30％PLPE表示实施例1对应的芍药花提取液制备的凝胶； DXMS表示阳性药999皮炎平，DNFB表示致炎药物，Contrast表示对比例5制备的芍药花提取液制备的凝胶，70％PLPE表示对比例2对应的芍药花提取液制备的凝胶；结果表明，与模型组相比，芍药花提取液制备的凝胶剂能够有效降低大鼠的炎症，促进大鼠皮肤损伤修复(P<0.001)，模型组大鼠炎症和免疫因子明显升高。随着芍药花提取液剂量的升高大鼠的炎症、免疫效果以及皮损修复呈剂量依赖性(P<0.05)。

将实施例4-6制备的精华液进行人体皮肤实验

1.人体皮肤斑贴试验

参照《化妆品安全技术规范2015版》斑贴试验方法进行试验，选取符合标准受试人员35人测试样品刺激性。挑选年龄在18-45岁，男性10人，女性25人。对上述获得的精华液进行人体皮肤斑贴试验。

选用面积不超过50mm²、深度约1mm的合格斑试器材。将芍药花精华液放入斑试器小室内，受试物为化妆品产品，对照孔为空白对照(不置任何物质)。将加有受试物的斑试器用低致敏胶带贴敷于受试者的背部或前臂屈侧，用手掌轻压使之均匀地贴敷于皮肤上，持续24h。分别于去除受试物斑试器后30min(待压痕消失后)、24h和 48h按表4标准观察皮肤反应。并记录观察结果，见表5。

表4皮肤封闭型斑贴试验皮肤反应分级标准

表5封闭型人体皮肤斑贴试验记录

对35名受试人员进行试验。结果表明，芍药花精华液对皮肤无明显刺激性，具有较高的安全性。

2、重复性开放型涂抹试验

参照《化妆品安全技术规范2015版》斑贴试验方法进行试验，选取符合标准受试人员35人测试样品刺激性。挑选年龄在18-45岁，男性10人，女性25人。对上述获得的精华液进行重复性开放型涂抹试验。

以前臂屈侧作为受试部位，面积3×3cm²，受试部位应保持干燥，避免接触其他外用制剂。将芍药花精华液均匀涂抹至受试区域、每天2次均匀地涂于受试部位，连续7 天，同时观察皮肤反应，在此过程中如出现3分或以上的皮肤反应时，应根据具体情况决定是否继续试验。皮肤反应按表6重复性开放型涂抹试验皮肤反应评判标准进行观察，并记录结果见表7。

表6皮肤重复性开放型涂抹试验皮肤反应评判标准表

表7皮肤重复性开放型涂抹试验皮肤反应评判结果

结果表明，芍药花精华液整体安全性较高，在试验期间对受试者并未造成影响，表明芍药花精华液符合化妆品安全规范，并未出现不良反应，安全性较高。

芍药花提取液精华液ABTS自由基的清除

取实施例4中制备的精华液以及以纯水代替其中的部分和全部芍药花提取液制备的精华液以及对比例2和对比例5中的精华液进行测试；分别取制备好的芍药花提取液精华液，以超纯水为溶剂稀释至芍药苷浓度为0.1543μg/mL。分别取各供试品溶液 100μL于96孔板中，加入ABTS工作液100μL，混匀，室温避光30min，于734nm处测定吸光度。供试品溶液吸光度为A1，以纯化水作为空白对照组，吸光度为A0，以水代替ABTS溶液作为本底组，吸光度为A2。根据公式(1)计算出不同精华液对 ABTS自由基的清除率。不同精华液为横坐标，自由基清除率为纵坐标绘制柱状图，结果见图12。

含芍药花提取液的精华液对DPPH自由基的清除

取实施例4中制备的精华液以及以纯水代替其中的部分和全部芍药花提取液制备的精华液以及对比例2和对比例5中的精华液进行测试；分别取制备好的芍药花提取液精华液，以超纯水为溶剂稀释至芍药苷浓度为0.1543μg/mL。分别取各供试品溶液 100μL于96孔板中，加入DPPH工作液(0.1mmol/L)100μL，混匀，室温避光30min，于517nm处测定吸光度。供试品溶液与DPPH反应吸光度为Ai，以纯化水替代样品作为空白对照组，吸光度为A0，以无水乙醇代替DPPH乙醇溶液作为本底组，吸光度为 Aj。根据公式(2)计算出精华液对DPPH自由基的清除率。以不同精华液为横坐标，以自由基清除率值为纵坐标绘制柱状图，结果见图13。

图12和图13中，图中30％PLPE指实施例4中制备的精华液以及以纯水代替其中的部分和全部芍药花提取液制备的精华液：0％是指以纯水代替25份的芍药花提取液， 20％是指含有5份芍药花提取液和20份纯水，40％是指含有10份芍药花提取液和15 份纯水，60％是指含有15份芍药花提取液和10份纯水，80％是指含有20份芍药花提取液和5份纯水，100％是指含有25份芍药花提取液，70％PLPE指对比例2的精华液， Contrast指对比例5中的精华液；由图12和图13可知，精华液基质本身具有一定的清除自由基的能力。随着芍药花提取液浓度不断提高，芍药花精华液的清除自由基能力不断增强。由此可见芍药花精华液具有较强的清除自由基能力。虽然，对比例2的精华液和对比例5中的精华液均具有一定的清除自由基能力，但自由基清除能力较差，只相当于实施例1中20％清除自由基效果。因此，30％PLPE提取液具有较强的体外活性。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims

1.一种含芍药花提取液的护肤品，其特征在于：其以芍药花提取液为主要活性成分，所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：将芍药鲜花与提取溶剂混合，升温至85-95℃加热3-4h，停止加热，恢复至室温后过滤得到所述芍药花提取液；其中，所述提取溶剂为水、乙醇体积分数≤50％的乙醇水溶液中的一种。

2.根据权利要求1所述的含芍药花提取液的护肤品，其特征在于：在所述芍药花提取液的提取工艺中，所述芍药鲜花与提取溶剂的质量体积比为3g：20-50mL。

3.根据权利要求1所述的含芍药花提取液的护肤品，其特征在于：在所述芍药花提取液的提取工艺中，所述芍药鲜花与提取溶剂的质量体积比为3g：20mL。

4.根据权利要求1所述的含芍药花提取液的护肤品，其特征在于：在所述芍药花提取液的提取工艺中，所述提取溶剂为乙醇体积分数为30％的乙醇水溶液。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的含芍药花提取液的护肤品，其特征在于：所述芍药花提取液的提取工艺包括以下步骤：将芍药鲜花按料液比3g：20mL加入体积分数为30％的乙醇水溶液，升温至85℃恒温回流加热3h后，停止加热，恢复至室温用体积分数为30％乙醇水溶液调至升温回流前的重量，摇匀后过滤，所得提取液即为芍药花提取液。

6.根据权利要求1-4中任一项所述的含芍药花提取液的护肤品，其特征在于：所述护肤品的形态为霜剂、乳剂、精华液、凝胶剂、面膜中的任意一种。

7.根据权利要求1-4中任一项所述的含芍药花提取液的护肤品，其特征在于：其为凝胶剂，以所述芍药花提取液为主要活性成分，以氮酮为促透剂，以羧甲基纤维素钠为基质，以甘油为保湿剂制备而成，且所述芍药花提取液、氮酮、羧甲基纤维素钠、甘油的用量比为20mL：0.7-0.8g：0.15-0.3g：3-7g。

8.根据权利要求1-4中任一项所述的含芍药花提取液的护肤品，其特征在于：其为精华液，其原料按重量份包括：芍药花提取液25-30份、甘油7.5-10份、异戊二醇0.05-2份、1,2-己二醇2-5份、丁二醇0.5-1.5份、对羟基苯乙酮0.2-1份、烟酰胺1-1.5份、抗坏血酸0.3-0.8份、EDTA二钠0.03-0.06份、泛醇0.5-1份、透明质酸钠0.02-0.06份、α-熊果苷0.02-0.04份、去离子水47.04-62.88份。

9.一种如权利要求7所述的含芍药花提取液的护肤品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：取羧甲基纤维素钠和氮酮，同时放进研钵中研磨，之后再加入甘油继续研磨，待充分后，加入芍药花提取液，再继续向一个方向研磨，直至其研磨成凝胶状得到所述含芍药花提取液的护肤品。

10.一种如权利要求8所述的含芍药花提取液的护肤品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：将甘油、异戊二醇、1,2-己二醇、丁二醇、对羟基苯乙酮、抗坏血酸、泛醇和去离子水混合后搅拌均匀，然后加入剩余原料，搅拌分散至无明显颗粒得到所述含芍药花提取液的护肤品。