CN115501245B - 抗产道细胞损伤促弹性蛋白合成的组分及应用 - Google Patents
抗产道细胞损伤促弹性蛋白合成的组分及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115501245B CN115501245B CN202211250066.7A CN202211250066A CN115501245B CN 115501245 B CN115501245 B CN 115501245B CN 202211250066 A CN202211250066 A CN 202211250066A CN 115501245 B CN115501245 B CN 115501245B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- composition
- cordycepin
- nmn
- smooth muscle
- beta
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 title claims abstract description 30
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 title claims abstract description 29
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 title claims abstract description 29
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 title claims abstract description 29
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title claims abstract description 17
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 title abstract description 12
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 title abstract description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 132
- FZAQROFXYZPAKI-UHFFFAOYSA-N anthracene-2-sulfonyl chloride Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC(S(=O)(=O)Cl)=CC=C3C=C21 FZAQROFXYZPAKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 99
- KQLDDLUWUFBQHP-UHFFFAOYSA-N Cordycepin Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OCC(CO)C1O KQLDDLUWUFBQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 84
- OFEZSBMBBKLLBJ-BAJZRUMYSA-N cordycepin Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)C[C@H]1O OFEZSBMBBKLLBJ-BAJZRUMYSA-N 0.000 claims abstract description 84
- OFEZSBMBBKLLBJ-UHFFFAOYSA-N cordycepine Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)CC1O OFEZSBMBBKLLBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 84
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 52
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 52
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 42
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 claims abstract description 38
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 4
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 claims description 29
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims description 13
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 13
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 13
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 claims description 9
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 7
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 7
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 7
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 claims description 5
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 5
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 5
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 claims description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 5
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 108010045569 atelocollagen Proteins 0.000 claims description 5
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 claims description 5
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 5
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 4
- 230000035899 viability Effects 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 16
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 15
- 210000004994 reproductive system Anatomy 0.000 abstract description 14
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 abstract description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract description 5
- 206010051873 Vaginal relaxation Diseases 0.000 abstract description 4
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000026799 smooth muscle cell apoptotic process Effects 0.000 abstract 1
- 210000004509 vascular smooth muscle cell Anatomy 0.000 abstract 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 53
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 30
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 14
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 13
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 102000002045 Endothelin Human genes 0.000 description 8
- 108050009340 Endothelin Proteins 0.000 description 8
- ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N endothelin-1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]2CSSC[C@@H](C(N[C@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2)=O)NC(=O)[C@@H](CO)NC(=O)[C@H](N)CSSC1)C1=CNC=N1 ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 7
- 230000006870 function Effects 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 6
- 208000029549 Muscle injury Diseases 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 5
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 4
- 208000036029 Uterine contractions during pregnancy Diseases 0.000 description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 4
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 4
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 4
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 4
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 4
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 4
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 4
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 4
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 4
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 210000004177 elastic tissue Anatomy 0.000 description 3
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 3
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 description 3
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 3
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 3
- 210000005000 reproductive tract Anatomy 0.000 description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 3
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 2
- RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 description 2
- 230000008828 contractile function Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000003163 gonadal steroid hormone Substances 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 210000002464 muscle smooth vascular Anatomy 0.000 description 2
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 2
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 2
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 2
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 241001264174 Cordyceps militaris Species 0.000 description 1
- 230000005971 DNA damage repair Effects 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 206010021118 Hypotonia Diseases 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-O NAD(+) Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-O 0.000 description 1
- DAYLJWODMCOQEW-TURQNECASA-O NMN(+) Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O2)O)=C1 DAYLJWODMCOQEW-TURQNECASA-O 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 241001248610 Ophiocordyceps sinensis Species 0.000 description 1
- 206010046763 Uterine atony Diseases 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000032677 cell aging Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 230000035606 childbirth Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000019771 cognition Effects 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 230000001120 cytoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000000916 dilatatory effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 238000013537 high throughput screening Methods 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N hydron Chemical compound [H+] GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000008802 morphological function Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000033116 oxidation-reduction process Effects 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 description 1
- 229920006255 plastic film Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000005464 sample preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005090 tracheal smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 210000004325 uterine smooth muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003041 virtual screening Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
- A61K31/728—Hyaluronic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/02—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for disorders of the vagina
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明属于功能性活性成分组合物制备技术领域，公开了一种抗产道细胞损伤促弹性蛋白合成的组分及应用，虫草素和NMN组合物按照质量份数由β‑烟酰胺单核苷酸NMN 0.1％～15％、虫草素0.05％～5％、补水组合物1.5％～2％、保湿组合物10％～20％以及余量纯化去离子水组成。方法包括：将β‑烟酰胺单核苷酸、虫草素与蒸馏水混合搅拌均匀得到虫草素和NMN组合物。本发明发现虫草素和NMN组合物可以促进雌性动物产后阴道平滑肌细胞和腺细胞的存活、生长和功能恢复，对于产后生殖系统康复、阴道松弛症有应用前景。以上活性国内外没有报道，与单独使用虫草素导致高血压患者血管平滑肌细胞凋亡作用相反。本发明的新组合物比单体化合物活性明显不同，有统计学差异，具有明显创新性。
Description
技术领域
本发明属于功能性活性成分及其组合物制备技术领域，尤其涉及一种促产后阴道平滑肌细胞和子宫腺细胞活力并促平滑肌合成弹性蛋白的组合物、制备方法及应用。
背景技术
目前，虫草素是冬虫夏草和蛹虫草中特征性主要活性成分。虫草素单体具有扩张支气管、显著增强肾上腺素的作用、免疫调节以及抗肿瘤、抗真菌、抗疟疾、抗衰老、抗癌等药理作用。
β-烟酰胺单核苷酸(Nicotinamide Mononucleotide， NMN)是NAD+（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）的直接前体，NAD+存在每一个细胞中，不仅可以提供抗氧化保护作用，还参与细胞的氧化还原等生理反应过程。NMN已被证明可以增强NAD+生物合成，增强供氢离子和抗氧化能力，因此NMN对神经系统疾病，特别是心脑血管疾病、老年退行性疾病、神经退行性疾病等自由基损伤和氧化损伤相关疾病内毒素具有治疗作用。NMN还可以促进DNA损伤修复，因此可以抗癌抗衰老。NMN可以通过提供还原物质直接清除自由基、调节细胞代谢抗细胞衰老、通过细胞保护作用预防组织细胞癌变等活性。同时NMN通过促进组织细胞的敏感性加快血糖下降，其核心原理为促进血液葡萄糖转换为糖原储存。
通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：现有技术资料尚没有发现虫草素、NMN单体及其二者的组合物促进子宫和阴道平滑肌细胞损伤后的存活和功能恢复，未解决促进产后阴道平滑肌和弹性纤维的修复，患者产后导致的阴道平滑肌损伤、产道松弛症仍属于临床难题，临床尚缺乏满意的手段，导致严重影响生活质量，本发明筛选发现的物质新活性具有明显的创新性，极具应用价值。
发明内容
针对针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种促产后阴道平滑肌细胞和子宫腺细胞活力并促平滑肌合成弹性蛋白的组合物、制备方法及应用。
本发明是这样实现的，一种抗生殖细胞损伤和促蛋白合成的组合物，其特征在于，包括β-烟酰胺单核苷酸NMN 0.1%~15%、虫草素 0.05%~5%。
进一步，所述组合物按照质量份数由β-烟酰胺单核苷酸NMN 0.1%~15%、虫草素0.05%~5%、补水组合物1.5%~2%及余量纯化去离子水组成。
进一步，所述补水组合物由透明质酸和胶原蛋白组成。
进一步，所述组合物按照质量份数由β-烟酰胺单核苷酸NMN 0.1%~15%、虫草素0.05%~5%、保湿组合物10%~20%及余量纯化去离子水组成。
进一步，所述保湿组合物质量份数在10%~20%，组合物成分可由蔗糖、山梨糖醇、甘油、丙二醇、硫酸软骨素、透明质酸、硫酸黏多糖、卡洛宁酸、去端肽胶原蛋白任意两种及以上组成。
进一步，所述虫草素结构式为：
。
本发明还提供了一种抗阴道平滑肌细胞和腺细胞损伤并促弹性蛋白合成的组合物的制备方法，其特征在于，包括：
将β-烟酰胺单核苷酸、虫草素与蒸馏水混合搅拌均匀得到所述虫草素和NMN组合物。
进一步，所述制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一，按比例称取β-烟酰胺单核苷酸、虫草素、补水组合物、保湿组合物；
步骤二，将β-烟酰胺单核苷酸、虫草素溶解于补水组合物、保湿组合物溶液中，搅拌得到均相溶液；
步骤三，向所述均相溶液中加入纯化的离子水至全量，进行定容，得到所述虫草素和NMN组合物。
本发明还提供了一种抗阴道平滑肌细胞和腺细胞损伤并促弹性蛋白合成的组合物在制备用于修复产后阴道和子宫平滑肌细胞并促弹性蛋白合成的产品、修复产后生殖系统腺细胞活性的产品中的应用。
本发明还提供了一种促产后阴道平滑肌细胞存活并促收缩能力促弹性蛋白合成的化合物，其特征在于，包括β-烟酰胺单核苷酸NMN 0.1%~15%，其余成分为纯水或者可以接受的辅料。
结合上述的技术方案和解决的技术问题，本发明所要保护的技术方案所具备的优点及积极效果为：
本发明的虫草素和NMN组合物能够保护平滑肌细胞、腺细胞、增强平滑肌和腺细胞存活和机能。
本发明的虫草素和NMN组合物能够促进产后动物阴道平滑肌细胞、腺体细胞恢复形态和机能。
本发明发现虫草素和NMN组合物可以促进雌性动物阴道平滑肌细胞和腺细胞的生长和形态功能恢复、增强两种细胞的存活和机能，提高平滑肌和腺细胞活力。以上活性国内外没有报道，与单独使用虫草素血管平滑肌活性相反。本发明的新组合物活性比以往报道活性不同，具有明显创新性。
本发明的技术方案填补了国内外业内技术空白：本发明的技术方案填补了虫草素单体和NMN组合物促进子宫和阴道平滑肌存活和促进恢复期收缩活性的活性和应用的技术空白。
本发明的技术方案是否解决了人们一直渴望解决、但始终未能获得成功的技术难题：本发明技术方案解决了临床对患者产后导致的阴道平滑肌损伤、松弛问题，以及对子宫平滑肌损伤修复的手段。
附图说明
图1是本发明实施例提供的制备虫草素和NMN组合物的方法流程图；
图2是本发明实施例提供的产后SD大鼠和给药组前后的体重对比图；
图3是本发明实施例提供的产后C57小鼠和给药组前后的体重对比图；
图4（a）是本发明实施例提供的产后SD大鼠解剖图；
图4（b）是本发明实施例提供的SD大鼠产后组解剖图；
图4（c）是本发明实施例提供的SD大鼠组合物给药组解剖图；
图4（d）是本发明实施例提供的SD大鼠NMN给药组解剖图；
图4（e）是本发明实施例提供的SD大鼠虫草素给药组解剖图；
图5（a）是本发明实施例提供的产后C57小鼠解剖图；
图5（b）是本发明实施例提供的C57小鼠产后组解剖图；
图5（c）是本发明实施例提供的C57小鼠组合物给药组解剖图；
图5（d）是本发明实施例提供的C57小鼠NMN给药组解剖图；
图5（e）是本发明实施例提供的C57小鼠虫草素给药组解剖图；
图6是本发明实施例提供的SD大鼠生殖系统质量对比图；
图7是本发明实施例提供的C57小鼠生殖系统质量对比图；
图8是本发明实施例提供的产后SD大鼠子宫收缩张力对比图；
图9是本发明实施例提供的产后C57小鼠子宫收缩张力对比图；
图10是本发明实施例提供的产后SD大鼠平滑肌细胞损伤占比图；
图11是本发明实施例提供的C57小鼠平滑肌细胞损伤占比图；
图12是本发明实施例提供的产后SD大鼠血清sm-troponin含量示意图；
图13是本发明实施例提供的产后SD大鼠血清ET-1含量示意图；
图14是本发明实施例提供的产后C57小鼠血清sm-troponin含量示意图；
图15是本发明实施例提供的产后C57小鼠血清ET-1含量示意图；
图16是本发明实施例提供的CCK-8法检测体外培养的大鼠阴道平滑肌的细胞的活力情况示意图；
图17是本发明实施例提供的大鼠阴道平滑肌细胞胞内弹性蛋白前体相对辉度占比图；
图18是本发明实施例提供的CCK-8法检测体外培养的大鼠子宫内膜腺细胞的活力情况示意图；
图19是本发明实施例提供的SD大鼠和小鼠血清性激素水平对比图。
实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
为了使本领域技术人员充分了解本发明如何具体实现，该部分是对权利要求技术方案进行展开说明的解释说明实施例。
本发明实施例提供的组合物制备的产品，所述组合物按照质量份数由β-烟酰胺单核苷酸NMN 0.1%~15%、虫草素0.05%~5%、补水组合物1.5%~2%及余量纯化去离子水组成。
本发明实施例提供的组合物制备的产品，补水组合物由透明质酸和胶原蛋白组成。
透明质酸的平均分子量为50万-200万，是大量存在于生物体内的众多组织的多糖类物质。其生理功能是能使水分进入细胞间隙，并与蛋白质结合而形成蛋白凝胶，将细胞粘在一起，发挥正常的细胞代谢作用，起到保持细胞水分，保护细胞不受病原菌的侵害，增强免疫力等作用。
胶原蛋白是真皮层的主要成分，胶原蛋白可以改善细胞膜的通透性。胶原蛋白和透明质酸在皮肤表面的吸收可以相互促进，能够使更多透明质酸的营养成分被皮肤吸收。
本发明实施例提供的组合物制备的产品，组合物制备的产品，其特征在于，所述组合物按照质量份数由β-烟酰胺单核苷酸NMN 0.1%~15%、虫草素 0.05%~5%、保湿组合物10%~20%及余量纯化去离子水组成。
本发明实施例提供的组合物制备的药物组合物，所述保湿组合物质量份数在10%~20%，组合物成分可由蔗糖、山梨糖醇、甘油、丙二醇、硫酸软骨素、透明质酸、硫酸黏多糖、卡洛宁酸、去端肽胶原蛋白等任意两种及以上组成。
所述保湿组合物成分，能够具有浓厚感和水润的感触，并且能够抑制组合物水溶液黏腻、发涩，给使用者优异的使用感。
如图1所示，本发明实施例提供的制备虫草素和NMN组合物的方法包括以下步骤：
水溶液制备法：按比例称取β-烟酰胺单核苷酸、虫草素制备成水溶液即可获得组合物水溶液。
进一步，含保湿成分和功能的样品制备法：
S101，也可以在两种化合物之外继续加入补水组合物、保湿组合物；将β-烟酰胺单核苷酸、虫草素溶解于补水组合物、保湿组合物溶液中，搅拌得到均相溶液；
S102，向所述均相溶液中加入纯化的离子水至全量，进行定容，得到所述虫草素和NMN组合物。
本发明实施例提供了一种虫草素与NMN的组合物按照重量份数由NMN（β-烟酰胺单核苷酸）0.5%、虫草素0.1%、补水组合物1.5%、保湿组合物17%以及余量纯化的去离子水组成，重量份数相加为100%。
本发明实施例提供的虫草素与NMN的组合物的制备方法包括：将NMN（β-烟酰胺单核苷酸）、虫草素溶于无菌蒸馏水即可得到。
本发明实施例提供的虫草素与NMN的组合物的组合物的制备方法还包括：
步骤一，按重量份数准备原料：NMN（β-烟酰胺单核苷酸）0.5%、虫草素0.1%、补水组合物1.5%、保湿组合物17%、余量为纯化的去离子水组成，去离子水补足；
步骤二，将NMN（β-烟酰胺单核苷酸）、虫草素溶解于补水组合物、保湿组合物溶液中，搅拌得到均相溶液；
步骤三，加入纯化的离子水至全量，进行定容，得到虫草素与NMN的组合物；
步骤四，灌装封盖，将溶解后得到的混合物采用灌装机配合包装袋进行灌装，采用自动塑料薄膜连续封口机对灌装后的包装袋进行封口；
步骤五，对所得的中间产品进行检验，若合格，检漏喷码，采用喷码机对产品进行依次喷码；
步骤六，包装入库，对成品进行外包装及检验，合格品入成品库存放。
为了证明本发明的技术方案的创造性和技术价值，该部分是对权利要求技术方案进行具体产品上或相关技术上的应用实施例。
本发明实施例提供的补水组合物可由透明质酸和胶原蛋白组成。
本发明实施例提供的保湿组合物的使用能够抑制组合物水溶液黏腻、发涩，并具有浓厚感和水润的感触，使用感优异。
所述保湿剂可以是蔗糖、山梨糖醇、甘油、丙二醇、硫酸软骨素、透明质酸、硫酸黏多糖、卡洛宁酸、去端肽胶原蛋白等
本发明实施例提供的虫草素与NMN的组合物应用于产后动物的治疗中，具体应用方法包括：将制备得到的虫草素与NMN的组合物直接在产后动物生殖系统局部给药。
本发明实施例在研发或者使用过程中取得了一些积极效果和相反的效果，和现有技术相比的确具备很大的优势，下面内容结合试验过程的数据、图表等进行描述。
本发明实施例提供的一种虫草素和NMN组合物、制备方法及应用。虫草素单体具有促进慢性肺病患者支气管平滑肌舒张、促高血压患者心血管平滑肌舒张和凋亡作用，其机制是在病灶微环境的作用下，虫草素调节气管平滑肌和血管平滑肌紧张性，产生松弛效果，与本发明特定环境下，虫草素和NMN组合情况下出现与以上报道完全相反作用。通过高通量筛选技术和虚拟筛选技术，本发明发现虫草素单体与NMN组合后作用与已有报道高血压患者血管平滑肌影响完全不同，具有促进产后子宫平滑肌、阴道平滑肌细胞存活、修复、收缩活性增加，属于新的认知。
本发明实施例提供的一种虫草素和NMN组合物，所述虫草素和NMN组合物可以制备成水溶液、或组合物可以制备成可以接受的辅料、溶媒、剂型或产品。组合物按照质量份数由β-烟酰胺单核苷酸NMN 0.1%~15%、虫草素0.05-5%、补水组合物1.5%~2%、保湿组合物10%~20%以及余量纯化去离子水组成。
本发明实施例提供的一种制备所述虫草素和NMN组合物的方法，所述制备虫草素和NMN组合物的方法包括：
将β-烟酰胺单核苷酸、虫草素与蒸馏水混合搅拌均匀得到所述虫草素和NMN组合物。
本发明实施例提供的制备虫草素和NMN组合物的方法包括以下步骤：
步骤一，按比例称取β-烟酰胺单核苷酸、虫草素、补水组合物、保湿组合物；
步骤二，将β-烟酰胺单核苷酸、虫草素溶解于补水组合物、保湿组合物溶液中，搅拌得到均相溶液；
步骤三，向所述均相溶液中加入纯化的离子水至全量，进行定容，得到所述虫草素和NMN组合物。
本发明实施例提供的一种虫草素和NMN组合物在制备用于修复平滑肌细胞及促弹性蛋白合成的活性成分中的应用。
本发明实施例提供的一种虫草素和NMN组合物在制备用于修复腺细胞的活性成分中的应用。
本发明实施例提供的一种虫草素和NMN组合物在制备用于修复产后子宫的活性成分中的应用。
本发明实施例提供的一种虫草素和NMN组合物在制备用于修复腺体细胞的活性成分中的应用。
本发明实施例提供的一种虫草素和NMN组合物在制备用于保护产后生殖系统的活性成分中的应用。
本发明实施例提供的一种虫草素和NMN组合物在制备用于增强平滑肌、腺细胞活力的活性成分中的应用。
本本发明实施例提供的一种虫草素和NMN组合物在制备用于提高平滑肌、腺细胞活性的活性成分中的应用。
本发明实施例提供的一种虫草素在制备用于提高平滑肌、腺细胞活性的活性成分中的应用。
本发明实施例提供的一种NMN在制备用于提高平滑肌、腺细胞活性的活性成分中的应用。
下面结合实验对本发明的技术效果作进一步说明。
样品配制，采用常规技术配制NMN、虫草素及组合物的溶液，质量浓度均为5%，其中组合物溶液含两种单体质量浓度各2.5%。
统计方法，采用SPSS软件进行统计分析，全部数据进行正态检验、方差齐性检验，并根据结果采用相应的数据转换、Independent-Samples Test或单因素方差分析技术。
实验1：利用动物模型研究样品的活性
1）动物水平分别研究虫草素与β-烟酰胺单核苷酸（NMN）组合物促进产后大鼠和小鼠子宫及卵巢平滑肌存活，减少大鼠和小鼠子宫及卵巢平滑肌细胞损伤。
分娩后第 1 天的产后SPF级SD老龄大鼠40只，体重 182～184g，SPF级老龄小鼠40只，体重 19～20g，由北京大学医学部提供，实验动物生产许可证号SCXK（京）2021-0013。饲养于实验动物独立通风系统，室温(23±2) ℃，湿度 50%±5%，正常昼夜交替，自由饮食。动物实验遵循动物伦理委员会规定。将40只老龄SD大鼠随机分为产后组（模型组）、虫草素与β-烟酰胺单核苷酸（NMN）组合物给药组、β-烟酰胺单核苷酸（NMN）给药组与虫草素给药组，每组10只。将40只产后小鼠随机分为产后组（模型组）、虫草素与β-烟酰胺单核苷酸（NMN）组合物给药组、β-烟酰胺单核苷酸（NMN）给药组与虫草素给药组，每组 10 只。给药组用灌胃器经阴道给药0.1ml，每天一次，共给药2周。
记录给药前后大鼠、小鼠的体重。图2为SD大鼠产后组和给药组前后的体重对比图，图3是C57小鼠产后组和给药组前后的体重对比图。统计学结果显示，在实验进行两周后，产后组与给药组体重均有所上升，但两组间体重不存在统计学显著差异（P>0.05）。该实验结果说明随机分组得到的各组大鼠和小鼠体重无差异，对实验结果无不良影响。
10%水合氯醛腹腔注射法麻醉大鼠、小鼠后剖取生殖系统组织（阴道、子宫、卵巢）并记录组织形态、颜色、重量。图4图5为产后大鼠和小鼠解剖图及生殖系统颜色、形态对比图，图片显示大鼠和小鼠组合物给药组生殖系统（阴道、子宫和卵巢）形态和功能明显优于产后组（模型组）。图6图7对大鼠和小鼠生殖系统质量进行了统计，结果显示，组合物给药组生殖系统质量显著大于产后组（P<0.05），NMN给药组与虫草素给药组对阴道、子宫和卵巢的总质量有增加的趋势，但无统计学显著性差异（P>0.05），说明两个单体的作用弱，组合物效果明显增强。该实验结果说明组合物给药组与单体给药效果明显不同，组合物明显给药后改善了大鼠和小鼠生殖系统形态及质量。局部用于雌性动物分娩后生殖道平滑肌细胞的增大和活细胞数量增加，其机制与生育导致的抗平滑肌细胞牵拉损伤、死亡、促进其生长有关。
2）样品对平滑肌收缩功能的影响。
利用成都泰盟BL-420F生物信号采集处理系统测量并计算 5 min 内离体子宫收缩张力。图8图9是产后大鼠和小鼠子宫收缩张力对比图，统计学结果显示，组合物给药组大鼠和小鼠子宫最大收缩张力与平均收缩张力显著大于产后未给药组大鼠和小鼠，有统计学显著性（P<0.05）。该实验结果说明组合物给药组改善了大鼠和小鼠生殖系统收缩功能。同时提高阴道平滑肌的机能，减轻阴道和子宫松弛问题。
3）样品对平滑肌细胞的病理学实验
常规病理技术和免疫组化法对阴道壁平滑肌细胞进行计数。图10和图11是大鼠和小鼠平滑肌细胞损伤、萎缩、凋亡细胞占比统计结果，统计分析结果显示，组合物给药组大鼠和小鼠损伤平滑肌细胞占比显著低于产后组（P<0.05），NMN给药组与虫草素给药组有改善的趋势但无显著性差异。该实验结果说明产后大鼠和小鼠阴道平滑肌细胞损伤严重，活力下降，数量减少，二组合物给药组明显改善了大鼠和小鼠阴道平滑肌细胞活力，有助于抗损伤。
4）样品对血清中肌肉损伤标志蛋白的影响
ELISA试剂盒检测血清标志物平滑肌肌钙蛋白（sm-troponin）以衡量平滑肌受损情况，检测内皮素（ET-1）以衡量平滑肌存活情况。图12图14为肌钙蛋白（sm-troponin）含量，统计学结果显示，组合物给药组大鼠和小鼠肌钙蛋白（sm-troponin）含量显著低于产后组（P<0.05），NMN给药组与虫草素给药组有降低的趋势但无显著性差异。图13图15为内皮素（ET-1）含量，SPSS软件统计结果显示，组合物给药组大鼠和小鼠内皮素（ET-1）含量显著高于产后组（P<0.05），NMN给药组与虫草素给药组有升高的趋势但无显著性差异，证明组合物样品的活性与单体活性有本质性不同。该实验结果说明产后大鼠和小鼠生殖道平滑肌存在损伤，组合物给药组促进了大鼠和小鼠生殖道平滑肌细胞增长和存活，导致重量增加。
实验2 在细胞水平研究样品对大鼠阴道平滑肌活细胞数量和弹性蛋白合成的影响
1）大鼠阴道平滑肌细胞分离自阴道壁肌层组织，采用常规原代培养技术获得，采用内毒素终浓度 70uL/mL培养基，5%CO2 培养4小时诱导阴道平滑肌细胞损伤。分为正常组、模型组、组合物给药组、NMN给药组与虫草素给药组。采用CCK-8法检测细胞活力与生长情况。酶标仪检测波长λ460处吸光度（A），细胞活力计算公式如下：细胞活力（%）=[A(给药孔X)-A(空白孔B)]/[A(正常组)-A(空白孔B)] ×100%。图16为大鼠阴道平滑肌细胞活力统计图，统计分析结果显示，模型组平滑肌细胞活力显著低于正常组（P<0.05），说明内毒素诱导阴道平滑肌细胞损伤模型成功。组合物给药组活细胞数量和活力显著高于模型组（P<0.05），而NMN给药组与虫草素给药组有升高的趋势但无显著性差异，P>0.05，证明组合物样品的活性与单体活性有本质性不同。以上现象与组合物给药对抗老龄分娩后大鼠阴道平滑肌细胞减少、萎缩有关，证明组合物样品对大鼠阴道平滑肌细胞损伤修复的效果。
2）为研究样品对平滑肌细胞合成弹性蛋白的影响，在12孔板培养原代阴道平滑肌细胞，培养方法和细胞给药分组同上。给药后各组平滑肌细胞在孵箱中静置培养72小时，轻轻吸弃上清，采用弹性蛋白一抗标记平滑肌细胞合成的弹性蛋白，荧光二抗孵育等常规步骤，采用Molecular Device 公司筛选工作站Flexstation3读取荧光，观察平滑肌细胞内弹性蛋白前体的辉度。计算方法为以给药孔荧光辉度和对照孔辉度比值计算平滑肌细胞体内外合成的弹性蛋白含量，给药组均与模型对照组（不给药，只给溶媒）相比。计算公式：胞内外弹性蛋白及前体相对含量（%）=[辉度(给药孔X)-辉度(空白孔B)]/[辉度(正常组)-辉度(空白孔B)] ×100%。图17为大鼠阴道原代平滑肌细胞合成的弹性蛋白及前体相对辉度统计图，统计分析发现组合物给药组荧光辉度明显增加，有统计学显著性（P<0.05），而NMN给药组和虫草素给药组的相对辉度有提供，但无统计学显著性，说明组合物促平滑肌细胞合成弹性蛋白的能力高于单体的活性，有显著提高。产后患者阴道平滑肌细胞和成纤维细胞合成的弹性蛋白与阴道松弛症明显相关，有应用前景。
实验3：在细胞水平研究组合物样品对子宫腺细胞的的影响。
采用常规原代培养法制备子宫内膜腺细胞。将原代子宫内膜腺细胞接种于含10%胎牛血清的DMEM-F12培养基(加双抗和组合物)，置于湿润的含相对体积分数为5% CO2的37°C培养箱中, 24h后换液。分为正常组、组合物给药组、NMN给药组、虫草素给药组。采用CCK-8法检测细胞活力。酶标仪检测波长λ460处吸光度。图18为大鼠子宫内膜腺细胞活力统计图，统计结果显示，组合物给药组活细胞数量和活力显著高于正常组（P<0.05），NMN给药组与虫草素给药组有升高的趋势但无显著性差异。两个化合物组合后明显促进大鼠腺细胞的存活和生长，与两个单体的活性相比，活性明显提高，有统计学差异（P<0.05）。
实验4 在动物水平研究样品促进产后大鼠子宫及卵巢腺细胞存活。
SPF级SD大鼠，体重 182～184g，购于北京大学医学部提供，实验动物生产许可证号SCXK（京）2021-0013。饲养于实验动物独立通风系统，室温(23±2) ℃，湿度 50%±5%，正常昼夜交替，自由饮食。动物实验遵循动物伦理委员会规定。将40只老龄分娩后的SD大鼠随机分为正常组（对照，不给药）、虫草素与β-烟酰胺单核苷酸（NMN）组合物给药组、β-烟酰胺单核苷酸（NMN）给药组与虫草素给药组，每组10只。各给药组用灌胃器经阴道给药0.1ml，正常组用蒸馏水代替，每天1次，共给药2周。
给药结束后，空腹14小时、10%水合氯醛麻醉、腹主动脉采血、血清 3000 rpm离心10分钟后，按雌激素（E）ELISA试剂盒说明书检测大鼠给药前后血清性激素水平，并进行雌激素水平数据对比分析。图19为大鼠两组雌激素水平对比图，统计学结果显示，组合物给药组的睾酮水平和雌二醇水平显著大于正常组（P<0.05），NMN给药组与虫草素给药组有改善的趋势，但无统计学显著性，P>0.05。该实验结果说明组合物的活性明显提高，也明显优于单体化合物。
上述实验证明，本发明提供了一种促产后生殖系统平滑肌细胞和腺细胞存活、增强平滑肌细胞弹性蛋白合成的新组方成分，并且能够对抗产后阴道平滑肌损伤并促进功能修复等作用。阴道平滑肌细胞合成的弹性蛋白是阴道弹性的重要成分，弹性蛋白是弹性纤维(elastic fibers)的主要成分，对于阴道松弛症有重要影响，弹性蛋白也有利于抗生殖系统附件松弛。实验证明了虫草素和β-烟酰胺单核苷酸的新用途，在生殖系统阴道平滑肌和腺细胞损伤后的存活方面均有良好效果，具有良好的抗损伤，增强其存活和功能修复。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种促产后阴道平滑肌细胞和子宫腺细胞活力并促平滑肌合成弹性蛋白的组合物，其特征在于，按照质量份数包括β-烟酰胺单核苷酸NMN 0.1%~15%和虫草素 0.05%~5%。
2.如权利要求1所述的促产后阴道平滑肌细胞和子宫腺细胞活力并促平滑肌合成弹性蛋白的组合物，其特征在于，所述组合物按照质量份数由β-烟酰胺单核苷酸NMN 0.1%~15%、虫草素 0.05%~5%、补水组合物1.5%~2%和余量纯化去离子水组成；
所述补水组合物由透明质酸和胶原蛋白组成。
3.如权利要求1所述的促产后阴道平滑肌细胞和子宫腺细胞活力并促平滑肌合成弹性蛋白的组合物，其特征在于，所述组合物按照质量份数由β-烟酰胺单核苷酸NMN 0.1%~15%、虫草素 0.05%~5%、保湿组合物10%~20%和余量纯化去离子水组成；
所述保湿组合物质量份数在10%~20%，组合物成分由蔗糖、山梨糖醇、甘油、丙二醇、硫酸软骨素、透明质酸、硫酸黏多糖、卡洛宁酸、去端肽胶原蛋白任意两种及以上组成。
4.一种制备如权利要求1所述的促产后阴道平滑肌细胞和子宫腺细胞活力并促平滑肌合成弹性蛋白的组合物的方法，其特征在于，包括：
将β-烟酰胺单核苷酸NMN、虫草素与纯化去离子水混合搅拌均匀得到所述虫草素和NMN组合物。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一，按比例称取β-烟酰胺单核苷酸NMN、虫草素、补水组合物和保湿组合物；所述补水组合物由透明质酸和胶原蛋白组成；所述保湿组合物质量份数在10%~20%，组合物成分由蔗糖、山梨糖醇、甘油、丙二醇、硫酸软骨素、透明质酸、硫酸黏多糖、卡洛宁酸、去端肽胶原蛋白任意两种及以上组成；
步骤二，将β-烟酰胺单核苷酸NMN、虫草素溶解于补水组合物和保湿组合物溶液中，搅拌得到均相溶液；
步骤三，向所述均相溶液中加入纯化的离子水至全量，进行定容，得到所述虫草素和β-烟酰胺单核苷酸NMN组合物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211250066.7A CN115501245B (zh) | 2022-10-12 | 2022-10-12 | 抗产道细胞损伤促弹性蛋白合成的组分及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211250066.7A CN115501245B (zh) | 2022-10-12 | 2022-10-12 | 抗产道细胞损伤促弹性蛋白合成的组分及应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115501245A CN115501245A (zh) | 2022-12-23 |
| CN115501245B true CN115501245B (zh) | 2023-10-31 |
Family
ID=84509983
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211250066.7A Active CN115501245B (zh) | 2022-10-12 | 2022-10-12 | 抗产道细胞损伤促弹性蛋白合成的组分及应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115501245B (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103893200A (zh) * | 2012-12-26 | 2014-07-02 | 中国医学科学院药用植物研究所 | 虫草素用于制备预防和治疗动脉粥样硬化的药物 |
| CN109463730A (zh) * | 2018-12-27 | 2019-03-15 | 深圳松乐生物科技有限公司 | 一种含有虫草素的组合物、液体饮料、糖果、固体饮料和片剂 |
| CN111973614A (zh) * | 2020-07-28 | 2020-11-24 | 南华大学 | 烟酰胺单核苷酸在制备预防、改善和/或治疗囊卵巢综合症的药物中的应用 |
| WO2020244249A1 (zh) * | 2019-06-06 | 2020-12-10 | 泓博元生命科技（深圳）有限公司 | 含烟酰胺单核苷酸的组合物在抗衰老药品/保健品的应用 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106265713B (zh) * | 2012-08-23 | 2019-10-22 | 北京冠瑞金生物科技有限公司 | 虫草素在制备抗抑郁症的药物中的用途及其制备而得的快速抗抑郁症药物 |
-
2022
- 2022-10-12 CN CN202211250066.7A patent/CN115501245B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103893200A (zh) * | 2012-12-26 | 2014-07-02 | 中国医学科学院药用植物研究所 | 虫草素用于制备预防和治疗动脉粥样硬化的药物 |
| CN109463730A (zh) * | 2018-12-27 | 2019-03-15 | 深圳松乐生物科技有限公司 | 一种含有虫草素的组合物、液体饮料、糖果、固体饮料和片剂 |
| WO2020244249A1 (zh) * | 2019-06-06 | 2020-12-10 | 泓博元生命科技（深圳）有限公司 | 含烟酰胺单核苷酸的组合物在抗衰老药品/保健品的应用 |
| CN111973614A (zh) * | 2020-07-28 | 2020-11-24 | 南华大学 | 烟酰胺单核苷酸在制备预防、改善和/或治疗囊卵巢综合症的药物中的应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Restoration of NAD+ homeostasis protects C2C12 myoblasts and mouse levator ani muscle from mechanical stress-induced damage;Huang, Guotao et al.;Animal cells and systems;第26卷(第4期);第192-202页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115501245A (zh) | 2022-12-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6518796B2 (ja) | 相乗的グリコカリックス治療組成物及び方法 | |
| CN115154356B (zh) | 一组胶原蛋白组合在制备抗衰老产品中的应用以及包括其的外用化妆品 | |
| CN114470008A (zh) | 短乳杆菌或罗伊氏乳杆菌在制备治疗卵巢早衰的产品中的应用 | |
| CN116515747A (zh) | 一种牙髓间充质干细胞培养方法 | |
| US7311919B2 (en) | Agents for treating osteoporosis and inhibiting osteoclast formation | |
| CN115501245B (zh) | 抗产道细胞损伤促弹性蛋白合成的组分及应用 | |
| CN110934857B (zh) | 皮树脂醇在制备预防或治疗脑损伤药物中的用途及其药物组合物 | |
| Bai et al. | Chondrocyte targeting gold nanoparticles protect growth plate against inflammatory damage by maintaining cartilage balance | |
| CN114099366B (zh) | 一种促进细胞能量代谢的无菌抗衰祛皱组合液及其制备方法和应用 | |
| WO2023097706A1 (zh) | 一种聚合血红蛋白在制备防治呼吸衰竭药物中的应用 | |
| WO2007009393A1 (fr) | Utilisation d'acide chlorogene dans la fabrication de medicaments pour l'accroissement de l'effet de cellules de moelle osseuse | |
| CN106492224A (zh) | 聚乙二醇青蒿琥酯在制备抗肺纤维化药物中的应用 | |
| CN106806403B (zh) | 一种增加骨密度的中药复方组合物及其制备方法 | |
| CN106924274B (zh) | 葫芦烷型四环三萜类化合物抗肺纤维化应用 | |
| RU2760674C1 (ru) | Применение препаратов растения polyscias filicifolia или его фрагментов для лечения элементозов и их последствий | |
| WO2019119298A1 (zh) | 大麻二酚或大麻提取物在制备美白产品中的用途 | |
| CN109908151A (zh) | 一种五环三萜化合物在制备治疗炎症性肠病的药物的应用 | |
| CN102727487B (zh) | 8-甲氧补骨脂素在防治绝经后妇女骨质疏松症中的新用途 | |
| CN115998741A (zh) | 一种抗肿瘤药物组合物及其制备方法和应用 | |
| CN115919850B (zh) | 一种抗阿霉素心脏毒性的中药单体组合物及其制备方法和应用 | |
| CN115154422B (zh) | Cd44靶向和ros响应的纳米胶束药物组合物及制备方法与应用 | |
| CN114569607B (zh) | 5-羟色氨酸在制备改善高原低氧所致雌性生理周期紊乱保健品或药物中的应用 | |
| CN106854190A (zh) | 一种新的炎琥宁化合物及其药物组合物 | |
| TW202142245A (zh) | 新穎性醫藥組合物及其於修復肝臟損傷、治療肝臟損傷相關疾病與提升肝臟功能之用途 | |
| CN116725894A (zh) | 一种含鹿茸多肽单体的眼部精华液及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20230324 Address after: 710046 Room 10101, Unit 1, Building 1, Science and Technology Enterprise Accelerator Zone 2, No. 6 West Qinling Avenue, Caotang Science and Technology Industry Base, Gaoxin District, Xi'an City, Shaanxi Province Applicant after: Xi'an Xuanyu Pharmaceutical Group Co.,Ltd. Address before: 100081 Minzu University of China, 27 Zhongguancun South Street, Haidian District, Minzu University of China Applicant before: Liu Di |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20240312 Address after: 215100 Suzhou City, Jiangsu Province, China (Jiangsu) Pilot Free Trade Zone Suzhou Area Suzhou Industrial Park Suzhou Central Plaza Building 6 Suzhou Central Office Building C 22nd Floor 03 Patentee after: Hehaopin (Suzhou) Technology Co.,Ltd. Country or region after: China Address before: 710046 Room 10101, Unit 1, Building 1, Science and Technology Enterprise Accelerator Zone 2, No. 6 West Qinling Avenue, Caotang Science and Technology Industry Base, Gaoxin District, Xi'an City, Shaanxi Province Patentee before: Xi'an Xuanyu Pharmaceutical Group Co.,Ltd. Country or region before: China |