CN115403544A - 一种丹酚酸c的制备方法 - Google Patents
一种丹酚酸c的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115403544A CN115403544A CN202211127476.2A CN202211127476A CN115403544A CN 115403544 A CN115403544 A CN 115403544A CN 202211127476 A CN202211127476 A CN 202211127476A CN 115403544 A CN115403544 A CN 115403544A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- salvianolic acid
- acid
- salvianolic
- catalyst
- ethanol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- GCJWPRRNLSHTRY-VURDRKPISA-N Salvianolic acid C Chemical compound C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C=2C=C(OC=2C(O)=CC=1)C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 GCJWPRRNLSHTRY-VURDRKPISA-N 0.000 title claims abstract description 78
- GCJWPRRNLSHTRY-UHFFFAOYSA-N Salvianolic acid C Natural products C=1C=C(O)C=2OC(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=CC=2C=1C=CC(=O)OC(C(=O)O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 GCJWPRRNLSHTRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 78
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 31
- YMGFTDKNIWPMGF-QHCPKHFHSA-N Salvianolic acid A Natural products OC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)c(O)c1)OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2C=Cc3ccc(O)c(O)c3 YMGFTDKNIWPMGF-QHCPKHFHSA-N 0.000 claims abstract description 28
- YMGFTDKNIWPMGF-AGYDPFETSA-N 3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-[(e)-3-[2-[(e)-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethenyl]-3,4-dihydroxyphenyl]prop-2-enoyl]oxypropanoic acid Chemical compound C=1C=C(O)C(O)=C(\C=C\C=2C=C(O)C(O)=CC=2)C=1/C=C/C(=O)OC(C(=O)O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 YMGFTDKNIWPMGF-AGYDPFETSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims abstract description 14
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Natural products CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 33
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 23
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 12
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 6
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 6
- 229960002089 ferrous chloride Drugs 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 6
- NMCUIPGRVMDVDB-UHFFFAOYSA-L iron dichloride Chemical compound Cl[Fe]Cl NMCUIPGRVMDVDB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical group [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 4
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 claims description 4
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 claims description 3
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 6
- 230000003321 amplification Effects 0.000 abstract description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 abstract description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 16
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 16
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 10
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 9
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 6
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical group [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000304195 Salvia miltiorrhiza Species 0.000 description 3
- 235000011135 Salvia miltiorrhiza Nutrition 0.000 description 3
- YMGFTDKNIWPMGF-UCPJVGPRSA-N Salvianolic acid A Chemical compound C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C(=C(O)C(O)=CC=1)\C=C\C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 YMGFTDKNIWPMGF-UCPJVGPRSA-N 0.000 description 3
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 description 3
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 description 3
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910001448 ferrous ion Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 229930183842 salvianolic acid Natural products 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DOUMFZQKYFQNTF-WUTVXBCWSA-N (R)-rosmarinic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 DOUMFZQKYFQNTF-WUTVXBCWSA-N 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 2
- YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N diphosphonate Chemical compound O=P(=O)OP(=O)=O YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 2
- -1 phenolic acid compounds Chemical class 0.000 description 2
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentoxide Inorganic materials O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000000634 powder X-ray diffraction Methods 0.000 description 2
- STCJJTBMWHMRCD-UHFFFAOYSA-N salvianolic acid B Natural products OC(=O)C(Cc1ccc(O)c(O)c1)OC(=O)C=Cc2cc(O)c(O)c3OC(C(C(=O)OC(Cc4ccc(O)c(O)c4)C(=O)O)c23)c5ccc(O)c(O)c5 STCJJTBMWHMRCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 2
- UJZQBMQZMKFSRV-RGKBJLTCSA-N (2s,3s)-4-[(e)-3-[(1r)-1-carboxy-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethoxy]-3-oxoprop-1-enyl]-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-hydroxy-2,3-dihydro-1-benzofuran-3-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C=2[C@H](C(O)=O)[C@H](OC=2C(O)=CC=1)C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UJZQBMQZMKFSRV-RGKBJLTCSA-N 0.000 description 1
- SNKFFCBZYFGCQN-UHFFFAOYSA-N 2-[3-[3-[1-carboxy-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethoxy]carbonyl-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-hydroxy-2,3-dihydro-1-benzofuran-4-yl]prop-2-enoyloxy]-3-(3,4-dihydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C=1C=C(O)C=2OC(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)C(C(=O)OC(CC=3C=C(O)C(O)=CC=3)C(O)=O)C=2C=1C=CC(=O)OC(C(=O)O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 SNKFFCBZYFGCQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 1
- 201000001431 Hyperuricemia Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- UJZQBMQZMKFSRV-PHQFMFTGSA-N Lithospermic acid Natural products O([C@@H](C(=O)O)Cc1cc(O)c(O)cc1)C(=O)/C=C/c1c2[C@@H](C(=O)O)[C@H](c3cc(O)c(O)cc3)Oc2c(O)cc1 UJZQBMQZMKFSRV-PHQFMFTGSA-N 0.000 description 1
- SNKFFCBZYFGCQN-VWUOOIFGSA-N Lithospermic acid B Natural products C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C=2[C@H](C(=O)O[C@H](CC=3C=C(O)C(O)=CC=3)C(O)=O)[C@H](OC=2C(O)=CC=1)C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SNKFFCBZYFGCQN-VWUOOIFGSA-N 0.000 description 1
- NFOCYHUCMXEHDG-UHFFFAOYSA-N Monomethyl lithospermate Natural products COC(=O)C1C(C=2C=C(O)C(O)=CC=2)OC(C(=CC=2)O)=C1C=2C=CC(=O)OC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 NFOCYHUCMXEHDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(CCNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZZAFFYPNLYCDEP-HNNXBMFYSA-N Rosmarinsaeure Natural products OC(=O)[C@H](Cc1cccc(O)c1O)OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2 ZZAFFYPNLYCDEP-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- 108010093894 Xanthine oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100033220 Xanthine oxidase Human genes 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 230000008809 cell oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011165 process development Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- DOUMFZQKYFQNTF-MRXNPFEDSA-N rosemarinic acid Natural products C([C@H](C(=O)O)OC(=O)C=CC=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 DOUMFZQKYFQNTF-MRXNPFEDSA-N 0.000 description 1
- TVHVQJFBWRLYOD-UHFFFAOYSA-N rosmarinic acid Natural products OC(=O)C(Cc1ccc(O)c(O)c1)OC(=Cc2ccc(O)c(O)c2)C=O TVHVQJFBWRLYOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
- C07D307/82—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
- C07D307/83—Oxygen atoms
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种丹酚酸C的制备方法。将丹酚酸A、氧化剂、催化剂和促进剂混合制成反应体系并进行反应，所述丹酚酸A经催化剂的作用被氧化剂氧化为丹酚酸C，并分离得到丹酚酸C。本发明制备工艺操作简单，易于工业放大，生产成本低，制得的丹酚酸C纯度高，适合丹酚酸C的大量制备。
Description
技术领域
本发明涉及医药化学领域，尤其涉及一种半合成法制备丹酚酸C及其纯化方法。
背景技术
丹参是治疗心血管疾病的常用中药之一，有着悠久的临床应用历史。其水溶性有效成分是以咖啡酸多聚体构成的多种酚酸类化合物，包括迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸A、B、C等，其中咖啡酸的三聚体和四聚体被认为是活性最强的化合物。
中药的应用主要以水煎煮为主，因此丹参水溶性成分受到了大家越来越多的关注。丹酚酸C是丹参药材中天然存在的一种水溶性咖啡酸三聚体类酚酸化合物。研究表明，丹酚酸C有许多方面的药理作用，包括具有较强的黄嘌呤氧化酶抑制活性从而用于高尿酸血症及其并发症，抑制细胞氧化应激及其介导的细胞凋亡，抑制炎症反应抵抗神经细胞损伤，诱导肿瘤细胞凋亡，抗新冠病毒作用等，具有较好的应用前景。
丹酚酸C在丹参中含量较低，目前其分离纯化极其困难，大量杂质的存在严重增加了其纯品的制备难度，导致其生产成本较高，尤其是高纯度样品的制备存在较大的困难。另外，由于丹酚酸C的低含量，即使纯化工艺取得突破，其生产成本也难以获得有效降低。上述缺陷严重限制了丹酚酸C作为药品开发的前景，尤其是其作为化药或注射制剂开发时对原料纯度和成本的要求更是难以得到满足。
因此，本领域的技术人员致力于开发一种工艺简单，产物纯度高，成本低廉且易于工业放大的丹酚酸C制备方法，使其产物能够满足化药原料或者注射剂原料的苛刻要求。
发明内容
本发明提供了一种丹酚酸C的制备方法，所述方法包括步骤：
(1)将丹酚酸A、氧化剂、催化剂和促进剂混合制成反应体系并进行反应，所述丹酚酸A经催化剂的作用被氧化剂氧化为丹酚酸C；和任选的
(2)对所述丹酚酸C进行分离和/或纯化。
在另一优选例中，所述氧化剂选自下组：过氧化氢、氧气、臭氧、或其组合。
在另一优选例中，所述催化剂为亚铁盐，优选氯化亚铁。
在另一优选例中，所述促进剂为乙酸。
在另一优选例中，所述氧化剂为过氧化氢，优选地，所述反应体系中所述过氧化氢的用量为0.2％-1.0％，以混合后的溶液总重量计。
在另一优选例中，所述亚铁盐的摩尔量为丹酚酸A摩尔量的0.05％-0.5％。
在另一优选例中，反应体系中乙酸的用量为30％-70％，以混合后的溶液总重量计。
在另一优选例中，所述步骤(1)包括：将氧化剂(优选过氧化氢)缓慢加入到含有丹酚酸A、促进剂(优选乙酸)和催化剂(优选亚铁盐，如氯化亚铁)的溶液中制成反应体系。
在另一优选例中，所述步骤(1)反应体系中丹酚酸A的用量为1％-10％，以混合后的溶液总重量计；优选地为3％-6％。
在另一优选例中，所述反应是在0-25℃下进行的，较佳地所述反应是在0-5℃下进行的。
在另一优选例中，所述混合反应的时间为0.5-4h，优选1-3h。
在另一优选例中，所述丹酚酸A、氧化剂、催化剂和促进剂在水中混合反应。
在另一优选例中，所述反应过程中进行搅拌。
在另一优选例中，所述纯化包括：层析法纯化、沉淀法纯化、或其组合。
在另一优选例中，所述纯化包括层析纯化，较佳地为色谱柱层析。
在另一优选例中，所述纯化包括对步骤(1)中获得的丹酚酸C进行色谱柱层析，利用有机溶剂洗脱，其中所述有机溶剂选自：甲醇、乙醇、丙酮、或其组合；优选地，所述甲醇的浓度为60-80％(v/v)，优选地，所述乙醇的浓度为50-70％(v/v)，优选地，所述丙酮的浓度为30-50％(v/v)。
在另一优选例中，所述步骤(2)还包括去除纯化后的溶液中洗脱溶剂。
在另一优选例中，所述色谱柱中的树脂为HZ816树脂。
在另一优选例中，所述方法还包括将上一步骤得到的含丹酚酸C的溶液，加酸调节pH值为1～3，降温，过滤，得到丹酚酸C。
在另一优选例中，所述方法包括对步骤(1)得到的丹酚酸C依次进行层析纯化和沉淀法纯化。
在另一优选例中，所述方法包括步骤：(3)将步骤(2)得到的丹酚酸C溶液，去除洗脱剂，调节pH至7.00，得到澄清溶液，加酸调节pH至2.00，降温并过滤沉淀。
在另一优选例中，所述降温为降至0-4℃。
在另一优选例中，所述方法还包括对纯化后得到的丹酚酸C进行干燥。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
图1显示了丹酚酸A原料半合成丹酚酸C的相关HPLC图谱。
图2显示了丹酚酸C沉淀照片。
图3显示了丹酚酸C产物的HPLC图谱(HPLC纯度96.5％)。
图4显示了丹酚酸C沉淀的粉末X射线衍射图(显示产品呈无定型态)。
图5显示了丹酚酸CESI-MS图谱。
图6显示了丹酚酸CNMRH谱。
图7显示了丹酚酸CNMRC谱。
图8显示了丹酚酸C的制备流程。
具体实施方式
本发明人通过广泛而深入的研究，公开了一种丹酚酸C的制备方法。以丹酚酸A为原料，经过过氧化氢氧化后得到的氧化产物中含有大量丹酚酸C，后者通过柱层析法纯化后，得到高纯度的丹酚酸C溶液，再进一步使丹酚酸C沉淀析出，得到纯度超过95％的丹酚酸C样品。本发明的制备方法工艺简单，易于操作和工业放大，能耗低，选择性高，原料消耗低，生产成本低，制得的丹酚酸C纯度高、收率高，适合丹酚酸C的大量制备。在此基础上完成了本发明。
本发明还意外地发现乙酸作为体系的稳定剂，有助于反应的顺利进行(不加冰乙酸会导致体系中的物质迅速沉淀，反应难以进行)。此外，对反应中原料、氧化剂、催化剂和促进剂(也称稳定剂)的比例进行了优化，有效地提高了收率和纯度。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。本发明对所有原料的来源并没有特殊的限制，为市售即可。
如本文所用，在提到具体列举的数值中使用时，术语“约”意指该值可以从列举的值变动不多于1％。例如，如本文所用，表述“约100”包括99和101和之间的全部值(例如，99.1、99.2、99.3、99.4等)。
如本文所用，术语“含有”或“包括(包含)”可以是开放式、半封闭式和封闭式的。换言之，所述术语也包括“基本上由…构成”、或“由…构成”。
如本文所用，术语“促进剂”和“稳定剂”可互换使用。
在本发明的方法中，混合后发生以下反应：
在本发明的一个优选例中，所述方法包括：
(1)将丹酚酸A、氧化剂、催化剂和促进剂混合反应，得到丹酚酸C，所述氧化剂优选为过氧化氢(用量优选为反应体系的0.2％-1.0％(w/w))，所述催化剂优选为亚铁离子(反应体系中亚铁离子与丹酚酸A摩尔百分比优选为0.05％-0.5％)，所述促进剂优选为乙酸(用量优选为反应体系的30％-70％(w/w))；和
(2)将上一步骤得到的丹酚酸C溶液经过色谱柱吸附后，再采用不同浓度的有机溶剂洗脱，其中有机溶剂的种类包括60％-80％(v/v)的甲醇或50％-70％(v/v)的乙醇或30％-50％(v/v)的丙酮；和
(3)将上一步骤得到的丹酚酸C溶液，去除洗脱剂，调节至pH7.00，可得澄清溶液，加酸调节pH至2.00，逐渐降温，过滤沉淀；和任选地
(4)对所述沉淀进行干燥。
在本发明的一个优选例中，丹酚酸C的制备流程如图8所示。
以下结合具体实施案例对本发明进一步说明，以下实施例仅用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。以下实施例中所用的实验材料和试剂如无特别说明均可从市售渠道获得。常温或室温指4℃-25℃，较佳地15-25℃。
实施例1丹酚酸A氧化法半合成制备丹酚酸C
本实施例中采用的丹酚酸A，作为制备丹酚酸C的原料，其可通过市售渠道获得或者参考专利ZL201310487751.6中的方法进行制备。
取丹酚酸A3.0g，配置成质量浓度10％的水溶液30g，加入冰乙酸30g，加入氯化亚铁溶液1g(浓度1mg/g，氯化亚铁与丹酚酸A的摩尔百分比为0.13％)，反应体系降温至4℃并搅拌。取20％(w/w)过氧化氢溶液2g(体系中过氧化氢终浓度0.63％)，缓慢滴加入反应体系，继续低温搅拌反应，120min后终止反应，得到氧化产物丹酚酸C粗品。
本实施例所涉及的反应原料及产物的HPLC图谱如图1所示。
结果显示，通过本实施例所述的方法，丹酚酸A被有效氧化生成了丹酚酸C，得率以丹酚酸A计为50.2％。
实施例2柱色谱法及沉淀法纯化丹酚酸C
取采用实施例1的方法制备的丹酚酸C粗品(其中含丹酚酸C约15g)，溶解于20％乙醇(v/v)中。
取HZ816(华东理工大学上海华震科技有限公司)树脂1L，参考使用说明，处理完毕后装柱(柱径6cm)，待用。
丹酚酸C溶液流经树脂柱吸附，后依次采用20％(v/v)乙醇6L，40％(v/v)乙醇6L洗脱树脂柱，继续采用60％(v/v)乙醇洗脱树脂柱，分步收集500mL/瓶，HPLC检测流出物，合并HPLC纯度超过80％之丹酚酸C样品。
丹酚酸C样品合并溶液，浓缩去除乙醇，调节pH至7.00，可得澄清溶液，搅拌的过程中，缓慢加入盐酸调节pH至2.00，可见溶液逐渐浑浊，沉淀出现(图2)，逐渐降温，过滤沉淀，以五氧化二磷为干燥剂的干燥器常温干燥，可得丹酚酸C固体粉末7.08g，纯度96.5％(图3)，显微镜下呈无规则形状，X射线粉末衍射亦显示其呈无定型态(图4)，ESI-MS(图5)、NMRH谱(图6)及NMRC谱(图7)结果确认其为丹酚酸C。
实施例3柱色谱法及沉淀法纯化丹酚酸C
取采用实施例1方法制备得到的丹酚酸C粗品，溶解于20％(v/v)乙醇中。
取HZ816(华东理工大学上海华震科技有限公司)树脂1L，参考使用说明，处理完毕后装柱(柱径6cm)，待用。
丹酚酸C溶液流经树脂柱吸附，后依次采用15％(v/v)乙醇6L，30％(v/v)乙醇6L洗脱树脂柱，继续采用50％(v/v)乙醇洗脱树脂柱，分步收集500mL/瓶，HPLC检测流出物，合并HPLC纯度超过80％之丹酚酸C样品。
丹酚酸C样品合并溶液，浓缩去除乙醇，调节pH至7.00，可得澄清溶液，搅拌的过程中，缓慢加入盐酸调节pH至2.00，可见溶液逐渐浑浊，逐渐降温，过滤沉淀，以五氧化二磷为干燥剂的干燥器常温干燥，可得丹酚酸C固体粉末8.2g，纯度95.5％，
实施例4过氧化氢、亚铁离子、乙酸对反应的影响
反应采用过氧化氢作为氧化剂，亚铁离子作为催化剂，在工艺开发过程中，偶然间意外地发现乙酸作为体系的稳定剂，有助于反应的顺利进行(不加冰乙酸会导致体系中的物质迅速沉淀，反应难以进行)。在本实施例中，探索了其加入量对反应的影响。
本实施例采用丹酚酸A作为半合成的原料，其方法简单描述如下：
取丹酚酸A 3.0g，加入水30g溶解，参考实施例1的方法，采用单因素法，分别加入不同量的催化剂氯化亚铁、滴加入不同量的H2O2，加入不同量的冰乙酸，4℃低温反应120min，具体加入量和最终反应得率如下表：
本实施例结果表明，H2O2和Fe2+和冰乙酸的适量加入，可以显著提升反应的得率，使反应体系维持在较均一的状态，且在表1中的加入范围内，皆具有较好的收率，综上，本发明选择反应体系中H2O2终浓度0.2-1.0％(w/w)，亚铁盐与丹酚酸A摩尔百分比0.05-0.5％，冰乙酸终浓度30-70％(w/w)。
实施例5不同洗脱液对丹酚酸C柱层析洗脱效果的影响
本实施例，选择实施例1制备得到的丹酚酸C为原料，采用实施例2类似的方法，研究甲醇、乙醇和丙酮洗脱液对丹酚酸C柱层析效果的影响。试验方法简单描述如下：
取丹酚酸C粗品溶液(其中含丹酚酸C1g)，HZ816树脂100ml/份若干份，装柱于相同规格的玻璃色谱柱(内径3cm)，丹酚酸C溶液流经树脂柱被吸附后，先统一采用20％(v/v)乙醇600mL和40％(v/v)乙醇600mL洗脱后，再分别采用不同浓度的甲醇、乙醇、丙酮洗脱，分步收集25mL/瓶，HPLC检测洗脱液中丹酚酸C的纯度和含量，并合并纯度超过80％的样品。
所得到的结果统计如下表：
表2不同洗脱液丹酚酸C柱层析产物纯度、收率汇总表
结果表明，甲醇、乙醇、丙酮作为洗脱液时，皆可以有效将丹酚酸C从树脂柱上洗脱下来，且产物纯度较高、收率较高，满足纯化的需求。最终选择该三种洗脱液的参数如下：甲醇(浓度60-80％(v/v))，乙醇(浓度50-70％(v/v))、丙酮(浓度30-50％(v/v))
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术无需创造性劳动就可以根据本发明的构思做出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域汇总技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。
Claims (10)
1.一种丹酚酸C的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
(1)将丹酚酸A、氧化剂、催化剂和促进剂混合制成反应体系并进行反应，所述丹酚酸A经催化剂的作用被氧化剂氧化为丹酚酸C；和任选的
(2)对所述丹酚酸C进行分离和/或纯化。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述氧化剂选自下组：过氧化氢、氧气、臭氧、或其组合。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述催化剂为亚铁盐，优选氯化亚铁。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述促进剂为乙酸。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述氧化剂为过氧化氢，优选地，所述反应体系中所述过氧化氢的用量为0.2％-1.0％，以混合后的溶液总重量计。
6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述亚铁盐的摩尔量为丹酚酸A摩尔量的0.05％-0.5％。
7.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，反应体系中乙酸的用量为30％-70％，以混合后的溶液总重量计。
8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述纯化包括层析纯化，较佳地为色谱柱层析。
9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述纯化包括对步骤(1)中获得的丹酚酸C进行色谱柱层析，利用有机溶剂洗脱，其中所述有机溶剂选自：甲醇、乙醇、丙酮、或其组合；优选地，所述甲醇的浓度为60-80％(v/v)，优选地，所述乙醇的浓度为50-70％(v/v)，优选地，所述丙酮的浓度为30-50％(v/v)。
10.如权利要求1或8所述的制备方法，其特征在于，所述方法还包括将上一步骤得到的含丹酚酸C的溶液，加酸调节pH值为1～3，降温，过滤，得到丹酚酸C。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211127476.2A CN115403544B (zh) | 2022-09-16 | 一种丹酚酸c的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211127476.2A CN115403544B (zh) | 2022-09-16 | 一种丹酚酸c的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115403544A true CN115403544A (zh) | 2022-11-29 |
| CN115403544B CN115403544B (zh) | 2024-05-31 |
Family
ID=
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0132130A2 (en) * | 1983-07-14 | 1985-01-23 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Aroyl benzofuran and benzothiophene acetic and propionic acids processes for their production and pharmaceutical compositions containing them |
| CN105859667A (zh) * | 2016-02-03 | 2016-08-17 | 中国药科大学 | 一种芳基苯并呋喃类酰胺化衍生物及医药用途 |
| WO2019087162A1 (en) * | 2017-11-06 | 2019-05-09 | Novartis Ag | Polycyclic herg activators |
| CN114401962A (zh) * | 2019-09-12 | 2022-04-26 | 南京明德新药研发有限公司 | 作为crbn蛋白调节剂的双并环类化合物 |
| CN114555570A (zh) * | 2019-10-09 | 2022-05-27 | 拜奥克里斯特制药公司 | 口服补体因子d抑制剂 |
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0132130A2 (en) * | 1983-07-14 | 1985-01-23 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Aroyl benzofuran and benzothiophene acetic and propionic acids processes for their production and pharmaceutical compositions containing them |
| CN105859667A (zh) * | 2016-02-03 | 2016-08-17 | 中国药科大学 | 一种芳基苯并呋喃类酰胺化衍生物及医药用途 |
| WO2019087162A1 (en) * | 2017-11-06 | 2019-05-09 | Novartis Ag | Polycyclic herg activators |
| CN114401962A (zh) * | 2019-09-12 | 2022-04-26 | 南京明德新药研发有限公司 | 作为crbn蛋白调节剂的双并环类化合物 |
| CN114555570A (zh) * | 2019-10-09 | 2022-05-27 | 拜奥克里斯特制药公司 | 口服补体因子d抑制剂 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| BENJAMIN L. ALFORD 等: "Total synthesis of (+)-pentamethylsalvianolic acid C†", 《ORGANIC & BIOMOLECULAR CHEMISTRY》, vol. 11, pages 2724 - 2727 * |
| FENGFENG WANG 等: "Study on the Formation Mechanisms of the Degradation Products of Salvianolic Acid A", 《CURRENT ANALYTICAL CHEMISTRY》, vol. 13, no. 2, pages 150 - 157 * |
| YAN CHENG: "Reaction Kinetics and Pathways for Salvianolic Acid B in High Temperature Water", 《CHEMISTRY SELECT COMMUNICATION》, vol. 3, no. 10, pages 2734 - 2737 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110845328B (zh) | 一种以迷迭香油膏副产品制备高纯度鼠尾草酸的方法 | |
| CN104666368B (zh) | 高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法 | |
| CN110734419A (zh) | 一种桉叶烷型倍半萜并香叶基尿黑酸甲酯杂合物及其制备方法与应用 | |
| CN106565425B (zh) | 一种从左旋多巴母液中回收邻苯二酚和左旋多巴的方法 | |
| CN108530500A (zh) | 一种合欢皮木脂素苷单体的制备方法及其应用 | |
| CN115403544A (zh) | 一种丹酚酸c的制备方法 | |
| CN115403544B (zh) | 一种丹酚酸c的制备方法 | |
| CN108997349B (zh) | 一种依匹斯汀有关物质的制备方法 | |
| CN112159445A (zh) | β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法和制备方法 | |
| CN108864023B (zh) | 一种制备高纯度木犀草素的方法 | |
| CN115215765A (zh) | 一种克立硼罗聚合物杂质的制备方法 | |
| CN111154012A (zh) | 一种超高纯度硫酸乙酰肝素的制备方法 | |
| CN107417750B (zh) | 一种从微生物发酵液中提取环磷酸腺苷的方法 | |
| AU2020104046A4 (en) | A method for extracting anti-tumor compounds from Actinidia eriantha Benth. root | |
| CN113511967B (zh) | 一种从银杏叶提取物层析废水中提取奎宁酸的方法 | |
| CN110592164A (zh) | 一种单唾液酸四己糖神经节苷脂的制备方法 | |
| JPH01246299A (ja) | エルゴステロール誘導体およびその製法 | |
| CN112047988B (zh) | 鸡矢藤苷单体化合物、其制备方法和用途 | |
| CN112047989B (zh) | 鸡矢藤苷酸甲酯单体化合物、其制备方法和用途 | |
| CN113717131B (zh) | 一种紫杉醇的分离纯化方法 | |
| CN114716492B (zh) | 一种高纯度中生菌素e对照品及其制备方法 | |
| CN115232182B (zh) | 一种高纯度中生菌素d对照品及其制备方法 | |
| CN113121320B (zh) | 一种使用高速逆流色谱分离杨梅树皮中杨梅醇的方法 | |
| CN115872960B (zh) | 倍半萜及二聚体化合物和其制备方法、应用 | |
| CN109541063B (zh) | 从南山茶中提取山奈酚葡萄糖苷类化合物的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant |