CN104666368B - 高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法 - Google Patents
高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104666368B CN104666368B CN201410551800.2A CN201410551800A CN104666368B CN 104666368 B CN104666368 B CN 104666368B CN 201410551800 A CN201410551800 A CN 201410551800A CN 104666368 B CN104666368 B CN 104666368B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ganoderma
- acid
- tumor cells
- alcohol
- elution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Abstract
本发明公开了高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法。将灵芝提取液通过大孔树脂和MCI GEL树脂纯化,脱色,浓缩脱色液后喷雾干燥后,获得具有明显的抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜。本发明优点在于制备方法简单快速;无毒性溶剂,对人体及环境无损害;纯化物生产成本低,质量稳定,适宜工业生产,而且纯化的灵芝总三萜有明显的抗人源肿瘤细胞活性,可进一步开发成抗癌药物。
Description
技术领域
本发明涉及具有高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法,尤其涉及利用大孔树脂、MCI GEL树脂和聚酰胺对灵芝总三萜的纯化方法。
背景技术
灵芝为多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子实体。现代研究表明,灵芝的主要化学成分包括糖类、三萜类、甾醇类、核苷、氨基酸及生物碱类等,具有抗肿瘤、防艾滋、保肝排毒、抗衰老、降血脂、安神镇静等药理活性,因而被开发为药品、食品、保健品。
随着现代社会的发展,癌症患者人数正在逐年增长,已经成为人们急需攻克的疾病。三萜类物质是灵芝中主要的抗肿瘤物质,它可以抑制肿瘤细胞的分裂和增殖、抑制肿瘤细胞的侵袭和转移,促进肿瘤细胞的死亡,具有广谱的抗肿瘤细胞活性,所以对灵芝三萜物质的制备及其在抗肿瘤方面的深入研究已经成为一个热点。
目前在灵芝三萜的纯化技术上,现有技术多采用有机溶媒萃取,如专利CN1546519A,使用试剂氯仿及其饱和碳酸氢钠溶液萃取,但该法不仅使用了有毒试剂,而且不能保持灵芝三萜有效成分的完整性;公开号CN102772448A,该法虽然采用了大孔树脂对灵芝三萜进行纯化,保持灵芝三萜有效成分的完整性,但该法大量使用了酸碱,这不仅对树脂损害较大,而且酸碱的使用也可导致物质的变化,不宜于长期工业化生产;灵芝提取物的色素颜色较深,对成分含量影响较大,目前技术较多使用活性炭脱色,但该法脱色过程中,活性炭会吸附大量的灵芝三萜类成分,严重影响灵芝三萜的收率。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种适宜于工业生产、工艺简单、生产速度快、生产成本低、灵芝总三萜纯度高、影响抗肿瘤活性杂质少和所用试剂无毒且可循环利用的高抗人源肿瘤细胞活性灵芝总三萜的纯化方法。其方法包括以下步骤:
1)对灵芝子实体醇提液进行浓缩,使其乙醇的体积分数为0%~20%;
2)将步骤1)所得物通过大孔树脂,上样流速为0.5 BV/h~5 BV/h,再进行洗脱,洗脱时先用4~8倍柱体积水洗脱,洗脱流速为2BV/h~6BV/h,弃去水洗部分,再用4~8倍柱体积乙醇洗脱,乙醇体积分数为60%~90%,洗脱流速为1BV/h~4BV/h,收集醇洗脱液;
3)将步骤2)中所得醇洗脱液减压旋干,得到初步纯化物,再加入重量为初步纯化物2-5倍的乙醇,搅拌溶解;
4)将步骤3)所得物通过MCI GEL树脂,上样完后,先加入去离子水洗脱到流出液无醇味,再用6~8倍柱体积乙醇溶液洗脱,乙醇体积分数为10%~30%,弃去该部分洗脱液,再用体积分数为80%~90%的乙醇洗脱,乙醇用量为4~8倍,收集洗脱液;
5)将步骤4)所得醇洗脱液过聚酰胺柱进行脱色,取脱色液;
6)浓缩脱色液,然后进行喷雾干燥,获得具有高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物。
优选的,所述大孔树脂是D-101苯乙烯型大孔树脂或HPD-100苯乙烯型大孔树脂。
优选的,步骤2)中,洗脱时先用4~8倍柱体积水洗脱,洗脱流速为2BV/h~6BV/h,再用4~8倍柱体积乙醇洗脱,乙醇体积分数为60%~90%,洗脱流速为1BV/h~4BV/h。在此操作参数范围内,洗脱液中的灵芝总三萜含量较高。
所述的灵芝醇提液是利用乙醇对灵芝子实体回流提取而得,先将灵芝子实体粉碎,再加入质量为灵芝子实体的4~6倍量体积分数为为60%~80%的乙醇回流提取1~3h,回流提取2~4次,即得灵芝醇提液。
所述步骤2)中大孔树脂的用量为灵芝子实体的0.5~1.5倍。
优选的,步骤3)中,先加入去离子水洗脱到流出液无醇味,再用6~8倍柱体积乙醇溶液洗脱,乙醇体积分数为10%~30%,弃去该部分洗脱液,再用体积分数为80%~90%的乙醇洗脱,乙醇用量为4~8倍。
单纯利用大孔树脂纯化,灵芝总三萜含量纯度和含量不高,无法具备高抗人源肿瘤细胞活性,通过MCI GEL的再次纯化,可以进一步除去极性较大的物质,如核苷等成分,以及影响抗肿瘤活性的杂质,以提高总三萜的纯度及纯化物的抗肿瘤活性。通过MCI GEL树脂纯化后,总三萜的纯度最少能提高10%,并基本清除影响抗肿瘤活性的杂质。
所述步骤5)的流速为2~6BV/h。
所述步骤5)中所述聚酰胺的用量为灵芝子实体重量的0.5~1.5倍。
所述具有高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物中,灵芝总三萜含量不低于60%,总三萜中九个指标性成分所占的重量百分比为:
灵芝酸C2 1.5%~3.0%
灵芝酸C6 1.0%~2.2%
灵芝酸G 3.1%~6.0%
灵芝酸A 10.0%~25.0%
12-hydroxy-3,7,11,15,23-pentaoxo-5α-lanost-8-en-26-oic acid 1.2%~3.5%
灵芝酸D 5.0%~18.5%
灵芝酸F 3.2%~10.0%
灵芝醇A 0.5%~4.8%
灵芝酮三醇 2.5%~10.5%
本发明的第二个目的是提供一种具有高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜,所述灵芝总三萜含量至少为60%,总三萜中九个指标性成分所占的重量百分比为:
灵芝酸C2 1.5%~3.0%
灵芝酸C6 1.0%~2.2%
灵芝酸G 3.1%~6.0%
灵芝酸A 10.0%~25.0%
12-hydroxy-3,7,11,15,23-pentaoxo-5α-lanost-8-en-26-oic acid 1.2%~3.5%
灵芝酸D 5.0%~18.5%
灵芝酸F 3.2%~10.0%
灵芝醇A 0.5%~4.8%
灵芝酮三醇 2.5%~10.5%
本发明所制备得的灵芝总三萜纯化物,相对于现有技术(如CN102772448A),不仅在总三萜含量上得到了显著性的提高,同时九个主要指标性成分的含量比较为合理,特别是具有重要抗人源肿瘤细胞活性的灵芝酸A,不仅结构完整,而且含量高。
一般而言,常规的纯化方法所得到的灵芝总三萜纯化物的抗肿瘤活性不高,不仅需要较高的施加量,还伴生纯度不高导致的副反应。本发明的一个实施例显示,本发明所制备得到的灵芝总三萜纯化物具有明显的抗人源肿瘤细胞活性。
本发明与现有技术相比具有以下优点:
(1)本发明中采用树脂纯化灵芝总三萜过程简单,纯化过程中无需加入大量酸碱调节pH,从而避免酸碱对树脂的损耗及其繁琐的后处理,使用的溶媒无毒,可回收循环使用,避免了对人体及其环境的损害。
(2)本发明获得的灵芝总三萜具有高抗人源肿瘤细胞活性,无需后续繁琐再纯化处理,具有较大医用潜力。
(3)本发明中所用的聚酰胺脱色方法,相对于传统的活性碳脱色方法,不仅脱去色素的效果较好,而且对灵芝三萜成分的吸附较小。
(4)本发明所制备的灵芝三萜纯化物中三萜成分完整,灵芝总三萜及九种指标性成分的含量高,抗人源肿瘤细胞效果明显。
(5)灵芝三萜生产成本低,生产效率高,产品质量稳定,适宜于工业化生产。
附图说明
图1为灵芝总三萜纯化物的HPLC检测结果。图1中,九种指标性成分的情况为:灵芝酸C2(1号峰),灵芝酸C6(2号峰),灵芝酸G(3号峰),灵芝酸A(7号峰),12-hydroxy-3,7,11,15,23-pentaoxo-5α-lanost-8-en-26-oic acid(10号峰),灵芝酸D(12号峰),灵芝酸F(15号峰),灵芝醇A(23号峰),灵芝酮三醇(25号峰)。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行具体描述,有必要在此指出的是以下实施例只是用于对本发明进行进一步的说明,不能理解为对本发明保护范围的限制,该领域的技术熟练人员根据上述发明内容所做出的一些非本质的改进和调整,仍属于本发明的保护范围。
本发明中灵芝总三萜含量测定方法用紫外分光度法测定。含量测定条件为:对照品为灵芝酸A,显色剂:浓硫酸-香草醛,测定波长:480nm。
本发明中九个指标性成分含量测定方法用HPLC测定。HPLC测定条件:流动相:乙腈:0.1%醋酸梯度洗脱,色谱柱:UltimateXB-C18(Welch Materials 4.6 mm×250 mm,5 μm),柱温:30 ℃,检测波长:254 nm,流速:0.8 mL/min。
实施例1
取灵芝子实体10 kg,粉碎,加入体积分数为60%的乙醇40 L回流提取2h,加热℃温度80℃,过滤,残渣再加入体积分数为60%的乙醇40 L回流提取一次,合并提取液,将提取液浓缩,浓缩液中乙醇浓度为20%,。将浓缩液上处理好的HPD-100苯乙烯型大孔树脂柱,树脂用量5 kg,上样流速0.5 BV/h,上样完成后加入60 L去离子水洗脱,洗脱流速2 BV/h,弃去水洗脱液,再用体积分数为60%的乙醇洗脱,洗脱流速1 BV/h,收集醇洗脱液。醇洗脱液减压旋干,再加入2倍重的乙醇溶解,上样MCI GEL柱分离纯化,上样完后,先加入去离子水洗脱到流出液无醇味,再加入乙醇溶液6倍柱体积洗脱,乙醇体积分数为10%,弃去该部分洗脱液,再用体积分数为80%的乙醇洗脱,乙醇用量4倍,收集该部分醇洗脱液,将醇洗脱液通过聚酰胺柱脱色,流速2 BV/h,聚酰胺用量5 kg,收集脱色后的醇洗脱液,浓缩到无醇味,直接喷雾干燥,得灵芝三萜纯化物240 g,经检测灵芝总三萜含量60%。
实施例2
取灵芝子实体10 kg,粉碎,加入体积分数为70%的乙醇60 L回流提取2h,加热℃温度80℃,过滤,残渣再加入体积分数为70%的乙醇40 L回流提取两次,合并提取液,将提取液浓缩,浓缩液中乙醇浓度为5%,。将浓缩液上处理好的D-101苯乙烯型大孔树脂柱,树脂用量10 kg,上样流速2 BV/h,上样完成后加入80 L去离子水洗脱,洗脱流速4 BV/h,弃去水洗脱液,再用体积分数为85%的乙醇洗脱,洗脱流速2 BV/h,收集醇洗脱液。醇洗脱液减压旋干,再加入4倍重的乙醇溶解,上样MCI GEL柱分离纯化,上样完后,先加入去离子水洗脱到流出液无醇味,再加入乙醇溶液7倍柱体积洗脱,乙醇浓度30%,弃去该部分洗脱液,再用体积分数为90%的乙醇洗脱,乙醇用量6倍,收集该部分醇洗脱液,将醇洗脱液通过聚酰胺柱脱色,流速4 BV/h,聚酰胺用量10 kg,收集脱色后的醇洗脱液,浓缩到无醇味,直接喷雾干燥,得灵芝三萜纯化物220 g,经检测灵芝总三萜含量80.5%。
实施例3
取灵芝子实体10 kg,粉碎,加入体积分数为80%的乙醇60 L回流提取2h,加热℃温度80℃,过滤,残渣再加入体积分数为80%的乙醇40 L回流提取三次,合并提取液,将提取液浓缩,浓缩液中乙醇浓度为10%,。将浓缩液上处理好的D-101苯乙烯型大孔树脂柱,树脂用量15 kg,上样流速5BV/h,上样完成后加入70 L去离子水洗脱,洗脱流速6 BV/h,弃去水洗脱液,再用体积分数为90%的乙醇洗脱,洗脱流速4 BV/h,收集醇洗脱液。醇洗脱液减压旋干,再加入5倍重的乙醇溶解,上样MCI GEL柱分离纯化,上样完后,先加入去离子水洗脱到流出液无醇味,再加入乙醇溶液8倍柱体积洗脱,乙醇浓度20%,弃去该部分洗脱液,再用体积分数为90%的乙醇洗脱,乙醇用量8倍,收集该部分醇洗脱液,将醇洗脱液通过聚酰胺柱脱色,流速6 BV/h,聚酰胺用量15 kg,收集脱色后的醇洗脱液,浓缩到无醇味,直接喷雾干燥,得灵芝三萜纯化物235 g,经检测灵芝总三萜含量75%。
实施例4
灵芝总三萜纯化物(由实施例1方法制备)用甲醇溶解,配制成样品浓度1mg/ml溶液,采用HPLC检测。
色谱条件:色谱柱UltimateXB-C18(Welch Materials 4.6 mm×250 mm,5 μm)紫外检测波长254nm,柱温30℃,洗脱流速0.8mL/min,进样量10ul,流动相:A:0.1%醋酸溶液,B:乙腈,线性梯度洗脱:0min:80% A;10min:70% A;45min:60% A;70min 20% A;80min:0%A。
本实施例中,九种指标性成分的含量为:
灵芝酸C2 1.5%
灵芝酸C6 1.6%
灵芝酸G 3.1%
灵芝酸A 10%
12-hydroxy-3,7,11,15,23-pentaoxo-5α-lanost-8-en-26-oic acid 1.2%
灵芝酸D 5.0%
灵芝酸F 8%
灵芝醇A 4.8%
灵芝酮三醇 2.5%
实施例5
灵芝总三萜纯化物(由实施例2方法制备)用甲醇溶解,配制成样品浓度1mg/ml溶液,采用HPLC检测。
色谱条件:色谱柱UltimateXB-C18(Welch Materials 4.6 mm×250 mm,5 μm)紫外检测波长254nm,柱温30℃,洗脱流速0.8mL/min,进样量10ul,流动相:A:0.1%水(0.1%醋酸,B:乙腈,线性梯度洗脱:0min:80% A;10min:70% A;45min:60% A;70min 20% A;80min:0%A。
灵芝酸C2 3.0%
灵芝酸C6 2.2%
灵芝酸G 6%
灵芝酸A 25.0%
12-hydroxy-3,7,11,15,23-pentaoxo-5α-lanost-8-en-26-oic acid 1.5%
灵芝酸D 12%
灵芝酸F 10%
灵芝醇A 0.5%
灵芝酮三醇 10.5%
实施例6
灵芝总三萜纯化物(由实施例3方法制备)用甲醇溶解,配制成样品浓度1mg/ml溶液,采用HPLC检测。
色谱条件:色谱柱UltimateXB-C18(Welch Materials 4.6 mm×250 mm,5 μm)紫外检测波长254nm,柱温30℃,洗脱流速0.8mL/min,进样量10ul,流动相:A:0.1%水(0.1%醋酸,B:乙腈,线性梯度洗脱:0min:80% A;10min:70% A;45min:60% A;70min 20% A;80min:0%A。
灵芝酸C2 2.0%
灵芝酸C6 1.0%
灵芝酸G 5.0%
灵芝酸A 19.0%
12-hydroxy-3,7,11,15,23-pentaoxo-5α-lanost-8-en-26-oic acid 3.5%
灵芝酸D 18.5%
灵芝酸F 3.2%
灵芝醇A 3%
灵芝酮三醇 8%
实施例7
本实施例说明灵芝总三萜纯化物的抗肿瘤效果
1、实验材料及处理
细胞系 A549细胞株为人肺腺癌细胞,MKN45为人胃癌细胞,7402为人肝癌细胞,由四川大学人类疾病与相关多肽实验室冻存。贴壁生长于RPMI-1640培养基中,内含10%小牛血清,1mmol/L谷胺酰胺及100U/ml青霉素、100μg/ml链霉素。于37℃,5%C02的饱和湿度孵箱中培养,每2~3天换液传代一次。
实验药物 灵芝总三萜纯化物(由实施例1方法制备)用DMSO培养基溶解配成2.5mg/ml的原药贮存液,4℃ 保存。临用时以RPMI-1640培养基稀释,过滤除菌。
2方法与结果
2.1 细胞培养 常规复苏,传代。细胞用含有10%胎牛血清的改良型RPMI-1640培养基,在5% C02、37℃的细胞培养箱内常规培养,0.1%胰蛋白酶消化传代,待细胞长至80%融合时进行实验。
2.2 MTT法测抑制率 取对数生长期细胞制成细胞浓度1×104/ml,接种于96孔培养板内,每孔200μl,调零孔(空白孔)加200μlRPMI-1640完全培养基。5% C02、饱和湿度37℃培养。待24小时后细胞完全贴壁,实验组加入RPMI-1640完全培养基稀释的灵芝三萜纯化物至终浓度分别为10、20、25、50μg/ml,阴性对照组再加入完全培养基,每孔体积为200μl。每组设3个复孔,继续培养24h,于实验终止前4h,加20μl MTT(5mg/ml),于5% C02、饱和湿度37℃孵箱中培养4h至实验终止,吸去全部上清,仅留少量残液,每孔加150μl二甲基亚砜(DMSO)摇匀振荡,使结晶充分溶解。于10min内在全自动酶联免疫检测仪上避光振荡混匀并测各孔吸光值(OD值),波长490nm。用SPSS软件计算IC50值。按公式:GI(生长抑制率)=(1—药物组OD值/对照组OD值)×100%计算各组的生长抑制率。显著性检验采用单因素方差分析和t检验。
2.3 灵芝总三萜纯化物作用于肺腺癌A549细胞、胃癌MKN45细胞、肝癌7402细胞24h的IC50值结果。
表1 灵芝总三萜纯化物的抗癌效果
肺腺癌A549细胞(μg/ml) | 胃癌MKN45细胞(μg/ml) | 肝癌7402细胞(μg/ml) | |
灵芝三萜纯化物 | 28.589 | 32.032 | 32.977 |
由表1可看出本发明制备的灵芝三萜纯化物具有明显的抗人源肿瘤细胞活性,非常具有药物开发潜力。
Claims (6)
1.高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜的纯化方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
1)先将灵芝子实体粉碎,再加入质量为灵芝子实体的4~6倍量体积分数为60%~80%的乙醇回流提取1~3h, 回流提取2~4次,即得灵芝子实体醇提液,再对灵芝子实体醇提液进行浓缩,使其乙醇的体积分数为0%~20%;
2)将步骤 1)所得物通过大孔树脂,上样流速为 0.5BV/h~5BV/h,再进行洗脱,洗脱时先用4~8倍柱体积水洗脱,洗脱流速为 2BV/h ~ 6BV/h,弃去水洗部分,再用4~ 8倍柱体积乙醇洗脱,乙醇体积分数为 60%~90%,洗脱流速为 1BV/h~4BV/h,收集醇洗脱液;
3)将步骤 2)中所得醇洗脱液减压旋干,得到初步纯化物,再加入重量为初步纯化物2-5 倍的乙醇,搅拌溶解;
4)将步骤 3)所得物通过MCI GEL树脂,上样完后,先加入去离子水洗脱到流出液无醇味,再用6~8倍柱体积乙醇溶液洗脱,乙醇体积分数为10%~30%,弃去该部分洗脱液,再用体积分数为80%~90%的乙醇洗脱,乙醇用量为4~8倍,收集洗脱液;
5)将步骤 4)所得醇洗脱液过聚酰胺柱进行脱色,取脱色液;
6)浓缩脱色液,然后进行喷雾干燥,获得具有高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物;
所述大孔树脂是D-101苯乙烯型大孔树脂或HPD-100苯乙烯型大孔树脂。
2.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤 2)中大孔树脂的用量为灵芝子实体重量的0.5~1.5倍。
3.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤 5)的流速为2~6BV/h。
4.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,步骤 5)中所述聚酰胺的用量为灵芝子实体重量的0.5~1.5倍。
5.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物中,灵芝总三萜含量不低于60%,总三萜中九个指标性成分所占的重量百分比为:
灵芝酸C2 1.5% ~ 3.0%
灵芝酸C6 1.0% ~ 2.2%
灵芝酸G 3.1% ~ 6.0%
灵芝酸A 10.0%~25.0%
12-hydroxy-3,7,11,15,23-pentaoxo-5α-lanost-8-en-26-oic acid
1.2% ~ 3.5%
灵芝酸D 5.0% ~ 18.5%
灵芝酸F 3.2% ~ 10.0%
灵芝醇A 0.5% ~ 4.8%
灵芝酮三醇 2.5% ~ 10.5% 。
6.根据权利要求1-5任一方法制备得到的高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物,其特征在于,所述高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物中,灵芝总三萜含量不低于60%,总三萜中九个指标性成分所占的重量百分比为:
灵芝酸C2 1.5% ~ 3.0%
灵芝酸C6 1.0% ~ 2.2%
灵芝酸G 3.1% ~ 6.0%
灵芝酸A 10.0% ~ 25.0%
12-hydroxy-3,7,11,15,23-pentaoxo-5α-lanost-8-en-26-oic acid
1.2% ~ 3.5%
灵芝酸D 5.0% ~ 18.5%
灵芝酸F 3.2% ~ 10.0%
灵芝醇A 0.5% ~ 4.8%
灵芝酮三醇 2.5% ~ 10.5% 。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410551800.2A CN104666368B (zh) | 2014-10-17 | 2014-10-17 | 高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410551800.2A CN104666368B (zh) | 2014-10-17 | 2014-10-17 | 高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104666368A CN104666368A (zh) | 2015-06-03 |
CN104666368B true CN104666368B (zh) | 2018-08-03 |
Family
ID=53302304
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201410551800.2A Active CN104666368B (zh) | 2014-10-17 | 2014-10-17 | 高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN104666368B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111686136A (zh) * | 2019-03-15 | 2020-09-22 | 乔璞科技有限公司 | 纯化三萜类化合物的方法 |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105106250B (zh) * | 2015-07-17 | 2019-07-12 | 成都大学 | 一种灵芝总三萜组合物及其制备方法 |
CN105294802B (zh) * | 2015-11-17 | 2017-06-30 | 上海市农业科学院 | 一种灵芝萜烯酮醇的制备方法 |
CN111826416A (zh) * | 2020-07-13 | 2020-10-27 | 浙江寿仙谷植物药研究院有限公司 | 一种基于体外肿瘤细胞培养模型的灵芝质量评价方法 |
CN112603932B (zh) * | 2020-12-22 | 2022-10-25 | 广州白云山汉方现代药业有限公司 | 一种快速分离灵芝醇提物中三萜和甾醇的方法 |
CN115737691B (zh) * | 2022-11-24 | 2023-11-10 | 浙江寿仙谷植物药研究院有限公司 | 一种灵芝强效应组分及其制备方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102772448A (zh) * | 2012-08-15 | 2012-11-14 | 苏州菩芸生物科技有限公司 | 灵芝三萜提取方法 |
-
2014
- 2014-10-17 CN CN201410551800.2A patent/CN104666368B/zh active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102772448A (zh) * | 2012-08-15 | 2012-11-14 | 苏州菩芸生物科技有限公司 | 灵芝三萜提取方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
大孔树脂在分离提取灵芝酸的应用;金德宽;《食品工业》;20111231(第12期);21-25 * |
灵芝中性三萜类成分的抗肿瘤作用;唐庆九等;《食用菌学报》;20101231;第17卷(第1期);60-64 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111686136A (zh) * | 2019-03-15 | 2020-09-22 | 乔璞科技有限公司 | 纯化三萜类化合物的方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104666368A (zh) | 2015-06-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104666368B (zh) | 高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法 | |
EP2329816B1 (en) | An anti-cancer active substance from antrodia camphorata, method for preparing the same and use thereof | |
Weng et al. | The anti‐invasive effect of lucidenic acids isolated from a new Ganoderma lucidum strain | |
US10183028B2 (en) | Enrichment method of ergosterol peroxide from sporoderm-broken Ganoderma lucidum spore powder | |
CN102443613B (zh) | 牛樟芝抗癌活性物质、制备方法及其用途 | |
CN101229335B (zh) | 酶法制备黑刺菝葜总皂苷提取物的方法 | |
CN101993370A (zh) | 蓝萼甲素酸酯衍生物及其制备方法和应用 | |
CN106749281A (zh) | 一种依匹斯汀杂质a的制备方法 | |
CN105601693B (zh) | 人参皂苷f1的制备及其抗肿瘤作用 | |
CN102764320B (zh) | 山大颜提取物及其制备方法与抗肿瘤应用 | |
CN103610682B (zh) | 3α-羟基-30-齐墩果-12,20(29)-二烯-28-酸的制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
CN106265681B (zh) | 一种三萜化合物在制备糖苷酶抑制剂药物中的应用 | |
CN103191143B (zh) | 一种强心苷化合物的用途 | |
CN106749124B (zh) | 具有抗肿瘤活性的邻双四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物及其制备方法与应用 | |
CN106942737A (zh) | 沙棘黄酮及其应用 | |
CN103833823A (zh) | 二萜二聚体类化合物及其药物组合物和制备方法与应用 | |
CN114605422A (zh) | 一对对映体生物碱二聚体类化合物及其制备方法和应用 | |
CN103623066B (zh) | 一种用于制备抗癌药物的塞北紫堇总生物碱提取物及其应用 | |
CN102389456A (zh) | 一种提取蓝萼香茶菜总二萜或蓝萼甲素的方法 | |
CN105037470A (zh) | 一种新的三萜类化合物及其制备方法和医药用途 | |
CN106632207B (zh) | 一种高纯度gcg的制备方法 | |
CN115433152B (zh) | 从金丝梅果实内分离出的化合物、制备方法和用途 | |
CN104398532B (zh) | 一种强心苷化合物的用途 | |
CN106905391A (zh) | 一种蓝莓花色苷提取、分离纯化方法 | |
CN101993373A (zh) | 酰氯化蓝萼甲素衍生物及其制备方法和应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant |