CN115399449A - 一种骨营养雪花片的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种骨营养雪花片的制备方法。其包括将牛棒骨、牛膝盖骨去除牛骨中的肌肉和脂肪部分，保留肌腱部分，后进行脱脂处理，之后用水清洗后，低温粗粉碎、超低温超微粉碎，获得骨粉；进行酶解，离心，将上清液膜浓缩后与沉淀混合，获得骨泥；将谷物粉，与骨粉/骨泥混合经过适度配比与调和，滚筒干燥后获得骨营养雪花片。本发明提供的制备方法，能将牛骨营养的完整保留，提高牛骨胶原蛋白的提取率和吸收利用率，最终酶解浓缩的多肽分子量5～10kD。本发明获得的骨营养雪花片既能降低骨代谢速率、增强骨密度，又能增加骨骼韧性与弹性，形成骨关节的润滑与防护，是一种天然、安全、无副作用、可长期食用的骨营养补充剂。
Description
技术领域
本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种骨营养雪花片的制备方法。
背景技术
骨关节相关病症已经成为危害人类健康的三大“杀手”之一。骨骼疾病作为一种慢性疾病，具有发病慢、能自愈、难治愈等特点，并随着年龄增长，骨骼问题日益凸显，给人们的日常生活带来无限的困扰。
骨质疏松症OP是中老年人骨折的重要成因，轻微的外伤即可发生骨折。补充足量的钙质和维生素D被认为是防治骨质疏松的基本举措，然而其效果甚微，既无法有效改善骨密度，也不能降低骨质疏松骨折的发生率。另外有研究表明，氨基葡萄糖和硫酸软骨素作为营养补充剂，一定程度上可以缓解关节疼痛或僵硬等症状，预防骨折和骨关节炎的发生。
目前人民一直都有喝骨头汤的饮食习惯，从传统的食补“以形补形”，到日常的保健品补钙，皆指向骨骼与骨关节全面养护的重要性和紧迫性。肉类加工的发展使骨的产量逐年攀升，但是由于加工方式和途径多样化的缺失，造成严重的资源浪费，也污染环境。再者，骨加工产品一般情况下因为加工技术或设备低端，导致骨产品附加值低、品质差，消费人群不接受，最终无法达成产业化。
牛骨营养丰富，骨骼中含有的矿物质，其钙、磷、铁、锌等含量高且比例适宜；其中钙磷比接近2:1，与人骨中钙磷比例相同。骨骼中约90％的蛋白质为胶原蛋白、骨胶原及硫酸软骨素，可增强骨关节防护，补充软骨滑液，发挥润滑和支撑功能。有效防止中老年人随着年龄增长引起的生理性的钙缺乏，骨胶原骤减等现象。骨中的磷脂质、磷蛋白、各种维生素和氨基酸等，是人体必需摄入的营养素。因此，牛骨是一种理想天然、高营养的补钙原料。
“五谷为养”——五谷杂粮是养生的根本。五谷是指“稻、黍、稷、麦、菽”，即大米、小麦、大豆、小米等，亦泛指现在所有谷类和豆类食品。五谷杂粮富含的蛋白质、氨基酸和微量元素等，可缓和疲劳、下肢酸痛等症状。同时五谷杂粮中的膳食纤维，能促进肠胃蠕动及消化液分泌，润肠通便。
现有技术中有已公开的专利申请CN 114009697 A公开了一种用牛骨肽制作肉制品的制备工艺，该工艺采用鲜牛骨制备牛骨肽时，去除了拥有营养价值的牛骨髓，明显损失了牛骨营养的完整性。CN 00135416.7公开了一种超细鲜骨粉及其生产方法和用法，经过粗碎、二级粉碎、细碎和超细碎四大步骤，并持续处于75～85℃恒温下制备。该方法的高温会引起蛋白质变性，失去核心营养成分；粉碎过程繁杂，工序较多，过度的挤压使骨髓等物质流失，一定程度上会造成资源和能源浪费；最终获得骨粉产品杂质含量高，提取量低，活性弱。CN 107594521公开了一种强骨营养粉的制备方法，选取的原料仅采用五谷、蔬菜和中药材，营养成分较为单一，缺少天然骨质带来的独特成分；并且加入中药材的气味偏浓郁，缺少清爽的口感，服药感重。CN 110200286 A公开了一种复合型补钙保健品的制备方法，采用牛骨粉、碳酸钙、维生素A、维生素D、维生素C等原料，经研磨制得＜50μm超微粉。其采用了无机钙水溶性低，在人体内，需要经过胃酸解离成钙离子，才能被吸收利用，服用不适可能会出现胃肠道应激症状。为解决上述不足，亟需一种将谷物与骨有机结合，既能方便食用又能保证营养不流失的骨营养片，同时提供清爽不粘牙的口感。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供一种骨营养雪花片的制备方法。该方法能使牛骨营养的完整保留，提高牛骨胶原蛋白的提取率和吸收利用率，最终酶解浓缩的多肽分子量5～10kD。本发明获得的骨营养雪花片既能降低骨代谢速率、增强骨密度，又能增加骨骼韧性与弹性，形成骨关节的润滑与防护，是一种天然、安全、无副作用、可长期食用的骨营养补充剂。
为实现上述目的，本发明采用以下的技术方案为：
一种骨营养雪花片的制备方法，其包括以下步骤：
S1、选取新鲜的牛棒骨、牛膝盖骨作为牛骨原料；
S2、将牛骨原料进行预处理；
S3、之后加入复合脂肪酶进行脱脂处理；
S4、将脱脂处理后的牛骨进行低温粗粉碎，获得粗颗粒；
S5、将粗颗粒进行超低温超微粉碎；
S6、将超微粉碎的物料加入复合蛋白酶解液进行酶解，之后浓缩获得骨泥；
S7、将谷物粉碎配置制备谷物粉；
S8、将骨泥与谷物粉混合成浆；
S9、将步骤S8的浆料干燥，获得骨营养雪花片。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S1中，所述牛棒骨与牛膝盖骨的按重量比为1:1～3:1进行备料。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S2中，预处理为洗清原料并去除牛骨中的肌肉和脂肪部分，保留肌腱部分，并在肌腱部分，间隔1～2cm切割数刀。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S3中，复合脂肪酶为碱性脂肪酶和低温脂肪酶，按重量比计的份碱性脂肪酶40～60％和低温脂肪酶60～40％，脱脂液中复合脂肪酶的重量比占其水溶液的5～10％。
牛骨和脱脂液按料液比1:10～15投入脱脂罐，调节pH值至7.5～8.5，维持温度30～40℃，脱脂处理1～2.5h；脱脂后的牛骨原料用40～50℃热水清洗后备用。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S4中，将脱脂后的牛骨原料控制温度不高于-10℃进行粉碎，粉碎成≤4mm的粗颗粒。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S5中，超低温超微粉碎的条件为液氮-196℃超微粉碎，粉碎直径≤40μm。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S6中，所述复合蛋白酶解液的组成按重量份计，包括活性为木瓜蛋白酶20～30份、中性蛋白酶15～25份、风味蛋白酶10～20份、碱性蛋白酶20～30份、胰蛋白酶10～20份％，复合蛋白酶解液中复合脂肪酶的重量比占其水溶液的5～10％。
将超微粉碎后的物料与蛋白酶解液按料液比1:10进行配料，调整pH至 6.0～7.5，温度为35～45℃，酶解反应3～5h。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S6中，浓缩为将酶解后的溶液进行离心，在10000～15000rpm离心5～15min，将离心后的上清液采用超滤膜 20nm进行膜浓缩，将膜浓缩液体与离心后的沉淀混合，获得骨泥，其中骨泥的含水量为70～80％。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S7中，谷物粉碎至100目，谷物粉包括按重量比为2～3:2～3：3～2:3～2的燕麦、荞麦、小米、黑米。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S8中，骨泥与谷物粉按重量比为1:1～3进行混合，再加入该混合物重量5～10％的低聚果糖浆和维生素E，维生素E按50～200mg/kg添加，混合获得浆料。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S9中，干燥采用滚筒干燥，温度为120～140℃，时间为3～5min。
本发明的有益效果在于：
(1)本发明提供的一种骨营养雪花片的制备方法，其选取的原料为牛棒骨与牛膝盖骨(牛窝骨)，实际应用可调整比例(1:1～3:1)。牛棒骨是牛小腿的骨头，骨髓尤其丰富，天然来源的蛋白质、脂肪、维生素和钙，促进骨钙吸收，骨骼生长发育。牛窝骨是牛后腿的膝盖部位，软筋较多，口感脆软有嚼劲，富含骨胶原蛋白，钙和蛋白质，营养价值高。甄选不同部位，采用不同的配比制备的牛骨营养粉，适用人群和核心功效具差异性。针对儿童与青少年，促其长高、茁壮成长、增强体质，选用牛棒骨：牛膝盖骨比例为 2:1～3:1；针对中老年人骨关节养护与骨骼强化，选用牛棒骨：牛膝盖骨比例为1:1。
(2)本发明的方法，优选脱脂工艺和特别添加维生素E(抗氧化剂)。牛骨中的脂肪含量较高，易产生油脂氧化而影响整体风味，对后续酶解及整个制备流程有明显影响，通过采用复合脂肪酶对预处理后的牛骨进行短暂脱脂，遵循所选牛骨中脂肪溶解的特性，严格把控脱脂温度与时间，有效提高脱脂效率，并且仅针对非活性物质的脂肪发挥作用，对活性物质的影响较小，有利于牛骨所含有益成分的全保留。
(3)本发明的方法，采用液氮超低温超微粉碎，真正实现超低温和高热交换率的快速冷冻，降低制备产品的脱水及干耗损失，进一步保持所含营养物质、风味和色泽。同时降低牛骨各成分之间的结合力，有利于提高酶解效率和浓缩混合程度，增强产品的营养功效。
(4)本发明的方法，首先采用酶解后骨渣和滤出液双保留的方法，先选取复合蛋白酶对超微牛骨粉进行骨胶原蛋白大分子的水解，离心后骨渣留存备用，上清液经过膜浓缩，获得的多肽和短肽分子量相对集中(分布于 5～10kD)，此时牛骨肽分子大小更适合人体吸收，活性提高。而骨渣并未丢弃，与浓缩液重新混合成骨泥，精准又完整的牛骨营养成分全保留，最大程度上减少损耗，增加骨质的可回收利用。
(5)本发明的制备方法，以牛骨为原料，加入多种谷物粉复配，经过适度配比与调和，使各原料之间的功效加乘互补，从而使食补保健作用较为单一化的食材，能发挥其最大效用，具有降低骨代谢速率，增强骨密度的有效作用。
(6)本发明的方法，特别添加低聚果糖浆，这是一种水溶性膳食纤维类食品，不被人体直接吸收和提供能量。研究表明，在胃肠道内有助于益生菌的繁殖，还对便秘和腹泻有双向调节作用，润肠通便，预防便秘的形成。经常适量食用，对预防高血压，冠心病，高脂血症有一定的辅助作用。与牛骨粉、谷物粉等原料复配，既能作为黏合剂、增稠剂，使骨泥与谷物粉更加贴合，利于滚筒烘干成片，而表面薄脆光滑；又能协同增效，提高产品的营养价值和清新口感。
具体实施方式
以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的前提下，对本发明所作的修饰或者替换，均属于本发明的范畴。
若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。实施例中所用的酶可以采用市购产品。
实施例1
本发明提供了一种骨营养雪花片的制备方法，包括以下步骤：
S1：选取新鲜的牛棒骨、牛膝盖骨(牛窝骨)作为牛骨原料，其中，牛棒骨与牛膝盖骨的重量比为2:1；
S2：预处理：洗清并去除上述牛骨中的肌肉和脂肪部分，保留肌腱部分，在肌腱部分，间隔2cm切割数刀，以增加接触面积；
S3：脱脂处理：脱脂液中所用的复合脂肪酶包括按重量比计的活性为20 万U/g的碱性脂肪酶40％和活性为20万U/g的低温脂肪酶60％，脱脂液中复合脂肪酶的重量比占其水溶液的10％。
将清洗处理的牛骨和脱脂液按料液比1:15投入脱脂罐中，用6mol/L氢氧化钠溶液调整pH至8.5，维持温度35℃，脱脂处理1.5h；脱脂后的牛骨用 42℃热水清洗后备用。
S4：低温粗粉碎：控制温度≤-10℃，置于低温粉碎机内，粉碎成≤4mm 的粗颗粒。
S5：超低温超微粉碎：置于液氮超低温粉碎机内，通入-196℃液氮进行超微粉碎，粉碎直径≤40μm。
S6：酶解浓缩：
所用的复合蛋白酶解液的组成组分按重量份计，为活性为10万U/g的木瓜蛋白酶20份、活性为5万U/g的中性蛋白酶25份、活性为2万U/g的风味蛋白酶10份、活性为20万U/g的碱性蛋白酶25份、活性为4万U/g的胰蛋白酶20份；复合蛋白酶解液中复合脂肪酶的重量比占其水溶液的5％。
酶解条件：将超微粉碎后的物
料与蛋白酶解液按料液比1:10进行配料，用6mol/L氢氧化钠溶液调整 pH至6.0，置于40℃下酶解反应4h；
放入管式离心机，离心10000～15000rpm离心15min，沉淀留存；上清液膜浓缩(超滤膜20nm，膜内滞留>1kD的生物分子)。
将获得的沉淀与膜浓缩液体进行混合，获得骨泥；
S7：制备谷物粉：燕麦、荞麦、小米、黑米分别100目粉碎；混合谷物粉比例为：燕麦粉10份、荞麦粉10份、小米粉15份、黑米粉15份；
S8：上述骨泥与谷物粉按重量比1:2混合，再加入混合物重量5％的低聚果糖浆和维生素E(按100mg/kg混合物添加)混合成浆，最终的骨泥谷物混合物与水的比例为1:2。
S9：滚筒干燥(130℃3min)后筛分，获得骨营养雪花片。
由上述制备方法获得的骨营养雪花片中牛骨胶原蛋白肽，由凝胶渗透色谱分析法(GPC)测得的分子量分布如表1所示：
表1
实施例2
本发明提供了一种骨营养雪花片的制备方法，包括以下步骤：
S1：选取新鲜的牛棒骨、牛膝盖骨(牛窝骨)作为牛骨原料，其中，牛棒骨与牛膝盖骨的重量比为3:1；
S2：预处理：洗清并去除上述牛骨中的肌肉和脂肪部分，保留肌腱部分，在肌腱部分，间隔1cm切割数刀，以增加接触面积；
S3：脱脂处理：脱脂液中所用的复合脂肪酶包括按重量比计的，活性为 20万U/g的碱性脂肪酶50％、活性为20万U/g的低温脂肪酶50％，脱脂液中复合脂肪酶的重量比占其水溶液的7.5％。
将清洗处理的牛骨和脱脂液按料液比1:10投入脱脂罐中，用6mol/L氢氧化钠溶液调整pH至7.5，维持温度40℃，脱脂处理1h；脱脂后的牛骨用 40℃热水清洗后备用。
S4：低温粗粉碎：控制温度≤-10℃，置于低温粉碎机内，粉碎成≤4mm 的粗颗粒。
S5：超低温超微粉碎：置于液氮超低温粉碎机内，通入-196℃液氮进行超微粉碎，粉碎直径≤40μm。
S6：酶解浓缩：
所述复合蛋白酶解液的组成组分按重量份计，为活性为10万U/g的木瓜蛋白酶25份、活性为5万U/g的中性蛋白酶20份、活性为2万U/g的风味蛋白酶15份、活性为20万U/g的碱性蛋白酶30份、活性为4万U/g的胰蛋白酶10份；复合蛋白酶解液中复合脂肪酶的重量比占其水溶液的10％。
酶解条件：将超微粉碎后的物料与酶解液按料液比1:5进行配料，用 6mol/L氢氧化钠溶液调整pH至7.0，置于45℃下酶解反应3.5h。
放入管式离心机，离心≥10000rpm，持续10min，沉淀留存；上清液膜浓缩(超滤膜20nm，膜内滞留>1kD的生物分子)。
将获得的沉淀与膜浓缩液体进行混合，获得骨泥；
S7：制备谷物粉：燕麦、荞麦、小米、黑米分别100目粉碎；混合谷物粉比例为：燕麦粉15份、荞麦粉15份、小米粉10份、黑米粉10份；
S8：上述骨泥与谷物粉按重量比1:2混合，再加入混合物重量7.5％的低聚果糖浆和维生素E(按125mg/kg混合物添加)混合成浆，最终骨泥谷物混合物与水比例为1:3。
S9：滚筒干燥(120℃4min)后筛分，获得骨营养雪花片。
由上述制备方法获得的骨营养雪花片中牛骨胶原蛋白肽，由凝胶渗透色谱分析法(GPC)测得的分子量分布如表2所示：
表2
实施例3
本发明提供了一种骨营养雪花片的制备方法，包括以下步骤：
S1：选取新鲜的牛棒骨、牛膝盖骨(牛窝骨)作为牛骨原料，其中，牛棒骨与牛膝盖骨的重量比为1:1；
S2：预处理：洗清并去除上述牛骨中的肌肉和脂肪部分，保留肌腱部分，在肌腱部分，间隔1.5cm切割数刀，以增加接触面积；
S3：脱脂处理：脱脂液中所用的复合脂肪酶包括按重量比计的活性为20 万U/g的碱性脂肪酶为60％、活性为20万U/g的低温脂肪酶40％，脱脂液中复合脂肪酶的重量比占其水溶液的5％。
将清洗处理的牛骨和脱脂液按料液比1:10投入脱脂罐中，用6mol/L氢氧化钠溶液调整pH至8.0，维持温度30℃，脱脂处理2h；脱脂后的牛骨用 45℃热水清洗后备用。
S4：低温粗粉碎：控制温度≤-10℃，置于低温粉碎机内，粉碎成≤4mm 的粗颗粒。
S5：超低温超微粉碎：置于液氮超低温粉碎机内，通入-196℃液氮进行超微粉碎，粉碎直径≤40μm。
S6：酶解浓缩：
所用的复合蛋白酶解液的组成组分按重量份计，活性为10万U/g的木瓜蛋白酶25份、活性为5万U/g的中性蛋白酶15份、活性为2万U/g的风味蛋白酶15份、活性为20万U/g的碱性蛋白酶30份、活性为4万U/g的胰蛋白酶15份；复合蛋白酶解液中复合脂肪酶的重量比占其水溶液的7.5％。
酶解条件：将超微粉碎后的物料与酶解液按料液比1:10进行配料，用 6mol/L氢氧化钠溶液调整pH至7.5，置于35℃下酶解反应4h。
放入管式离心机，离心≥10000rpm，持续8min，沉淀留存；上清液膜浓缩(超滤膜20nm，膜内滞留>1kD的生物分子)。
将获得的沉淀与膜浓缩液体进行混合，获得骨泥；
S7：制备谷物粉：燕麦、荞麦、小米、黑米分别100目粉碎；混合谷物粉比例为：燕麦粉15份、荞麦粉10份、小米粉10份、黑米粉15份；
S8：上述骨泥与谷物粉按重量比1:2混合，再加入混合物重量10％的低聚果糖浆和维生素E(按75mg/kg混合物添加)混合成浆，最终浆中骨泥谷物混合物与水比例为1:2.5。
S9：滚筒干燥(140℃3min)后筛分，获得骨营养雪花片。
由上述制备方法获得的骨营养雪花片中牛骨胶原蛋白肽，由凝胶渗透色谱分析法(GPC)测得的分子量分布如表3所示：
表3
由实施例2所得的骨营养雪花片检测成分见表4
表4骨营养雪花片检测成分表
本发明中获得的蛋白质主要为牛骨胶原蛋白，符合人体生理需求。
羟脯氨酸Hyp是人体胶原蛋白的主要成分，为非必须氨基酸，是多种胶原的降解产物。
微量元素丰富，牛骨中的骨钙与骨磷比例接近生理所需的2:1。
脂肪来源牛骨髓部分，以不饱和脂肪酸为主，含必需脂肪酸。
天然来源的硫酸软骨素含量极高，同时含有氨基葡萄糖和透明质酸。
本发明中采用超微粉碎在低温状态下进行，粉碎瞬时即可完成，最大限度地保留粉体的生物活性成分，利于后续制备高质量产品。粉碎过程原料周围的外力分布均匀，严格限制大颗粒同时避免过碎，得到目的粒径的超微粉。经研究表明，超微粉碎的食品，由于其粒径非常小，营养物质不必经过长远路径就能被释放，更容易吸附于小肠内壁，加速营养成分释放。
动物实验
将上述实施例2制备的骨营养雪花片进行实验验证，考察其效果。
实验动物与分组：切除卵巢的雌性大鼠，按体重随机分为4组(假手术组J、模型组M、骨营养雪花片组D、阳性对照组Y)，每组10只。
假手术组J是指对雌性大鼠进行虚拟手术(进行开刀的动作后缝合)但不切除卵巢(即作为空白对照)、模型组M是对雌性大鼠进行模拟手术且实质性切除卵巢；这两组对照为的是排除外科损伤的影响因素。J和M组自由取食，D和Y组自由取食+特定性外源补充(D骨营养雪花片、Y仙灵骨葆片)。
喂食方案：实验组去势大鼠按设定剂量(骨营养雪花片900mg/kg，仙灵骨葆片162mg/kg，以灌胃给药方式进行；人与大鼠喂药剂量换算比为1:6.3，按照成年人70kg，应摄入骨营养雪花片10g/d，仙灵骨葆片1.8g/d；由此推算出大鼠喂药量)每天1次，其他组、其余时间自由取食和饮用纯净水，连续喂养1个月，测量相关指标。
阳性对照组：仙灵骨葆片，国药集团同济堂(贵州)制药有限公司，批准文号：国药准字Z20025357
表1各处理组对骨质疏松大鼠血清ALP、Hyp的影响
与假手术组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与模型组比较，*P<0.05， **P<0.01。
表2各处理组对骨质疏松大鼠血清钙Ca、磷P的影响
与假手术组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与模型组比较，*P<0.05， **P<0.01
表3各处理组对骨质疏松大鼠血清骨密度(BMD)的影响
与假手术组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与模型组比较，*P<0.05， **P<0.01
表4各处理组对骨质疏松大鼠股骨长度和质量的影响
与假手术组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与模型组比较，*P<0.05， **P<0.01
经以上动物实验得出的数据分析可知，骨营养雪花片组同模型组相比较，骨质疏松大鼠的血清碱性磷酸酶ALP和羟脯氨酸Hyp含量降低，血清 Ca、P水平升高，骨密度BMD明显升高，股骨长度、质量都有增加，表明喂食骨营养雪花片有效降低去势大鼠(骨质疏松大鼠)的骨代谢速率，明显提高其骨密度。
适用人群：
(1)生长期的儿童及青少年：夜梦多、易惊醒、频出汗、啼哭不止；身材矮小，发育迟缓；换牙滞后，乳牙松动脱落；下肢容易抽筋、腿疼。
(2)中老年人：身体酸痛、身型萎缩、弯腰驼背、腿抽筋、易摔跤、易骨折；可能伴随食欲减退、便秘等消化系统症状。
(3)更年期妇女：进入更年期后容易身体僵硬、骨关节发僵，腰酸背痛、双膝酸软等不适感，易感疲劳动作迟缓。
(4)骨骼或骨关节遭受创伤的患者：因车祸或过激运动的外部创伤。
为了更好地说明本发明的优点，下面列举出本发明的典型病例：
病例1
宋同学，男，15岁，初中生，平常课业繁重，极少外出运动。吃饭挑食，长不高。从2020年9月1日开始，每天冲服按实施例1制备的骨营养雪花片 (骨粉含量30％)10g，试食半年后，吃饭香，明显长高，体格变强壮。另外，食用此骨营养雪花片，谷物香味浓郁，表面光滑薄脆，体验感佳。
病例2
刘先生，男，61岁，生活中常见的腰背酸痛、双膝酸软和下肢无力、肌肉痉挛等症状，典型骨质疏松症OP患者。从2021年10月开始，连续3个月早餐冲服按实施例3制备的骨营养雪花片(骨粉含量30％)10g，明显减轻关节酸软和疼痛的症状，行动更轻松快捷。另外，食用此骨营养雪花片，谷物香味浓郁，口感清爽不粘牙，体验感良好。
病例3
马女士，女，52岁，弯腰驼背，无法长时间直立或久坐，夜间双腿伴随抽筋。从2020年6月开始，每天冲服按实施例2制备的骨营养雪花片(骨粉含量30％)10g，1个月后，双腿抽筋次数减少，腰椎酸软的情况得以缓解。另外，食用此骨营养雪花片，谷物香味浓郁，表面光滑不粘牙，体验感良好。
病例4
严先生，男，40岁，手臂因外部创伤而骨折，处于恢复期。从2021年 4月开始，每天冲服按实施例2制备的骨营养雪花片(骨粉含量30％)15g， 5个月后，明显感觉到损伤部位的愈合加快，手臂的基本动作得以恢复正常。另外，食用此骨营养雪花片，冲服溶解快，体验感良好。
对比例1
一种牛骨营养粉的制备方法，其包括以下步骤：
1、选取新鲜的牛棒骨、牛膝盖骨(牛窝骨)作为牛骨原料，其中，牛棒骨与牛膝盖骨的重量比为1:1；
2、预处理：洗清并去除上述牛骨中的肌肉和脂肪部分，保留肌腱部分，在肌腱部分，间隔1.5cm切割数刀，并用45℃热水清洗后备用。
3、低温粗粉碎：控制温度≤-10℃，置于低温粉碎机内，粉碎成≤4mm的粗颗粒。
4、超低温超微粉碎：液氮-196℃超微粉碎，粉碎直径≤40μm。
5、酶解浓缩：
所述复合蛋白酶解液的组成组分按重量份计，为活性10万U/g木瓜蛋白酶20份、活性5万U/g中性蛋白酶15份、活性2万U/g风味蛋白酶15份，复合蛋白酶解液中复合脂肪酶的重量比占其水溶液的10％。
酶解条件：将超微粉碎后的物料与酶解液按料液比1:5进行配料，用 6mol/L氢氧化钠溶液调整pH至7.5，置于35℃下酶解反应3h。
放入管式离心机，离心≥10000rpm，持续10min，沉淀留存；上清液膜浓缩(超滤膜20nm，膜内滞留>1kD的生物分子)。
将获得的沉淀与膜浓缩液体进行混合，获得骨泥；
6、制备谷物粉：黑米、小米分别100目粉碎；混合谷物粉比例为：黑米粉10份、小米粉10份；
7、上述骨泥与谷物粉1:2混合，滚筒干燥(120℃5min)后筛分，获得骨营养雪花片。
由上述制备方法获得的骨营养雪花片中牛骨胶原蛋白肽，由凝胶渗透色谱分析法(GPC)测得的分子量分布如表3所示：
表9
对比例因缺少脱脂步骤，复合蛋白酶解液未加碱性蛋白酶和胰蛋白酶，明显酶解所得的牛骨胶原蛋白肽的分子量较大，5-10kD的占比较多，而过大的分子量不利于人体吸收。另外因未添加低聚果糖浆而导致口感略差。
病例5
马女士，女，52岁，弯腰驼背，无法长时间直立或久坐，夜间双腿伴随抽筋。从2020年4月开始，每天冲服按对比例制备的骨营养雪花片(骨粉含量30％)10g，1个月后，腰椎酸软等不适症略微缓解，但效果不明显。另外，食用此骨营养雪花片，腥味略重，表面粗糙磨牙，体验感一般。
Claims (10)
1.一种骨营养雪花片的制备方法，其包括以下步骤：
S1、选取新鲜的牛棒骨、牛膝盖骨作为牛骨原料；
S2、将牛骨原料进行预处理；
S3、之后加入复合脂肪酶进行脱脂处理；
S4、将脱脂处理后的牛骨进行低温粗粉碎，获得粗颗粒；
S5、将粗颗粒进行超低温超微粉碎；
S6、将超微粉碎的物料加入复合蛋白酶解液进行酶解，之后浓缩获得骨泥；
S7、将谷物粉碎配置制备谷物粉；
S8、将骨泥与谷物粉混合成浆；
S9、将步骤S8的浆料干燥，获得骨营养雪花片。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤S1中，所述牛棒骨与牛膝盖骨的按重量比为1:1～3:1进行备料。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤S2中，预处理为洗清原料并去除牛骨中的肌肉和脂肪部分，保留肌腱部分，并在肌腱部分，间隔1～2cm切割数刀。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤S3中，复合脂肪酶为碱性脂肪酶和低温脂肪酶，按重量比计的碱性脂肪酶40～60％和低温脂肪酶40～60％，脱脂液中复合脂肪酶的重量比占其水溶液的5～10％。
牛骨和脱脂液按料液比1:10～15投入脱脂罐，调节pH值至7.5～8.5维持温度30～40℃，脱脂处理1～2.5h；脱脂后的牛骨原料用40～50℃热水清洗后备用。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤S4中，将脱脂后的牛骨原料控制温度不高于-10℃进行粉碎，粉碎成≤4mm的粗颗粒。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤S5中，超低温超微粉碎的条件为液氮-196℃超微粉碎，粉碎直径≤40μm。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤S6中，所述复合蛋白酶解液的组成按重量份计，包括木瓜蛋白酶20～30份、中性蛋白酶15～25份、风味蛋白酶10～20份、碱性蛋白酶20～30份、胰蛋白酶10～20份，复合蛋白酶解液中复合脂肪酶的重量比占其水溶液的5～10％。
将超微粉碎后的物料与复合蛋白酶解液按料液比1:10进行配料，调节pH至6.0～7.5，温度为35～45℃，酶解反应3～5h。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤S6中，浓缩为将酶解后的溶液进行离心，在10000～15000rpm离心5～15min，将离心后的上清液采用超滤膜20nm进行膜浓缩，将膜浓缩液体与离心后的沉淀混合，获得骨泥，其中骨泥的含水量为70～80％。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤S7中，谷物粉碎至100目，谷物粉包括按重量比为2～3:2～3：3～2:3～2的燕麦、荞麦、小米、黑米。
10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤S8中，骨泥与谷物粉按重量比为1：1～3进行混合，再加入该混合物重量5～10％的低聚果糖浆和维生素E，维生素E按50～200mg/kg添加，混合获得浆料；
在步骤S9中，干燥采用滚筒干燥，温度为120～140℃，时间为3～5min。
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