CN115368454A - 一种明胶及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及明胶制备技术领域，尤其是涉及一种明胶及其制备方法，包括以下步骤：对牛皮进行预处理，得到预处理牛皮；对预处理牛皮进行匀浆处理，得到组织匀浆液；使用复合蛋白酶对所述组织匀浆液进行消化处理，消化后灭酶，得到匀浆消化液；将所述匀浆消化液进行热水提胶，得到明胶液；将所述明胶液依次进行硅藻土吸附过滤、离子交换层析、蒸发浓缩、灭菌和干燥，得到明胶；其中，所述复合蛋白酶包括胃蛋白酶、脂肪酶和糖胺聚糖降解酶。本发明所制备得到的明胶，凝冻强度为309‑320g，等电点pH为7.8‑8.2，灰分含量为0.1‑0.2％，透明度为300‑380mm，水分为6.2‑7.0％，收率为18.9‑20.9％，可满足现有技术中对高质量明胶食品添加剂的需求。

Description

一种明胶及其制备方法

技术领域

本发明涉及明胶制备技术领域，尤其是涉及一种明胶及其制备方法。

背景技术

明胶是由胶原经酸碱法、酶法和超声波处理再经热水提取获得的丧失生物活性的物质。胶原分子发生水解之前，三条肽链之间的氢键互相联结，发生水解时，其组成肽链均会发生程度不等的断裂和分离。这种断裂和分离的方式可能是其中一条肽链断裂分离，另两条肽链通过氢键连接，也可能是三重螺旋彻底松散，成为三条不规则且单独盘旋的α链，甚至可以是三条独立的α肽链部分断裂。而胶原断裂分离后即成为明胶分子的结构。

目前，根据水解方式的不同，明胶的制备可分为酸法明胶、碱法明胶及酶解明胶。在酸、碱、酶或高温等的作用下，胶原蛋白结构中的部分联结点断裂，螺旋结构解链，再在水和热的作用下，胶原分子间的氢键因发生水解而断裂，产生大量不规则的可在水中溶解的线团，俗称熬胶。其中酸法制得的明胶称为A型明胶，等电点的pH约为8-9；碱法明胶称为B型明胶，等电点的pH约为4-6；酶法生产的明胶可称为E型明胶。

明胶作为一种天然营养型的食品增调剂，其不含碳水化合物、脂肪和胆固醇，易于被人体吸收，具有良好的食用价值；同时，因其优良的物理化学性质和多功能性，食品的口感、风味和状态与食品的质构和流变学特征有着密切关系，因此市场上的食品普遍通过添加各类添加剂来避免在加工、储藏和运输等方面不良因素对食品口感造成的影响，而明胶具有比其他食品胶更全面的优点和市场潜力。

其中，作为糖果添加剂的明胶，要求具有较高的透明性以提高产品的美观程度，较高的等电点以便和糖果较低的pH相协调以获得较高的稳定性，较高的冻力以便可以在较少的添加量时任能获得较好的糖果形态和口感，同时，不能含有有毒有害成分。现有技术酶解制备明胶的方法中，普遍采用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶等去除胶原蛋白分子结构间的末端肽，破坏三重螺旋结构，再进行热水提胶。然而，因牛皮成分复杂，上述蛋白酶酶解的方式仍无法有效制得纯度高、质量佳，可满足上述糖果添加剂使用的明胶产品。

有鉴于此，提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种明胶及其制备方法，该制备方法进一步提高了明胶的产品质量，所制备得到的明胶具有纯度高、稳定均一的特点。

本发明提供一种明胶的制备方法，包括以下步骤：

S1、对牛皮进行预处理，得到预处理牛皮；

S2、对预处理牛皮进行匀浆处理，得到组织匀浆液；

S3、使用复合蛋白酶对所述组织匀浆液进行消化处理，消化后灭酶，得到匀浆消化液；

S4、将所述匀浆消化液进行热水提胶，得到明胶液；

S5、将所述明胶液依次进行硅藻土吸附过滤、离子交换层析、蒸发浓缩、灭菌和干燥，得到明胶；

其中，所述复合蛋白酶包括胃蛋白酶、脂肪酶和糖胺聚糖降解酶。作为本技术方案优选地，步骤S1中，首先使用弱酸对牛皮进行浸酸处理，以提高牛皮的溶胀效果，增加胶原分子之间的间隙，以便于酶解消化过程中，酶可以更大程度的接触胶原分子，提高酶解产率。而预处理具体包括：对牛皮进行清洗、清理，随后采用1-10％质量浓度的醋酸进行浸泡，浸泡完成后使用纯水进行清洗，并搅碎成牛真皮颗粒，得到预处理牛皮；优选地，所述浸泡时，控制温度为4-25℃，时间为5-10d。

为进一步提高牛皮的溶胀效果以及胶原分子与酶的接触面积，在对牛皮预处理完成后，进一步进行匀浆处理，将毫米级别的牛真皮颗粒进一步搅散成肉末状，进而加大胶原的水解程度，使多肽的肽键更容易发生断裂。而所述匀浆处理具体包括：向预处理后的牛真皮颗粒中加入注射用水进行匀浆，得到组织匀浆液；优选地，牛真皮颗粒与注射用水的比例为1kg：(2-10)L。

作为本技术方案优选地，步骤S3中，所述消化处理包括：

利用脂肪酶和糖胺聚糖降解酶在pH为6.5-7.5条件下对组织匀浆液进行第一次消化处理；使用醋酸将pH值调至2-3，利用胃蛋白酶溶液对第一次消化处理的产物进行第二次消化处理；对第二次消化处理的产物进行灭酶处理，得到匀浆消化液；

优选地，每g牛真皮颗粒所对应的所述脂肪酶、所述糖胺聚糖降解酶和所述胃蛋白酶的用量分别为(1-10IU)、(20-30IU)和(40-400IU)。

将脂肪酶和糖胺聚糖降解酶作为复合酶，先加入到中性的组织匀浆液中，以将牛皮中的脂肪、透明质酸、硫酸皮肤素和肝素等杂质成分进行酶解，从而使胶原蛋白在一定程度上与脂肪等杂质彻底分开；此时，再将第一次消化处理的产物使用冰醋酸调至酸性，加入胃蛋白酶溶液，以去除胶原蛋白分子结构间的末端肽，将胶原蛋白从牛皮基质中提取出来。不仅提高了胶原蛋白的纯度，而且提高了胶原蛋白的收率。

其中，糖胺聚糖降解酶包括透明质酸酶、硫酸皮肤素降解酶和肝素酶中的任意一种或多种，并优选为湖北信康医药化工有限公司的透明质酸酶；胃蛋白酶溶液采用0.4-0.6M的醋酸作为溶剂，且胃蛋白酶溶液的酶活为1000-9000IU/ml。

研究表明，所述第一次消化处理时，控制温度为35-40℃，时间为60-120min；所述第二次消化处理时，控制温度为4-22℃，时间为5-9d，处理效果最佳。

作为本技术方案优选地，所述灭酶处理时，使用8-12M的氢氧化钠溶液将第二次消化处理的产物pH调至9-10，静置过夜，得到匀浆消化液。

热水提胶的过程中会加速氢键和其他离子键的断裂，从而提高牛皮明胶提取率和凝胶强度。具体地，随着提取温度的升高，稳定胶原结构的部分肽键及三螺旋结构次级键断开，其单链、单链断裂片段和少量聚集体进入溶液，明胶的提取率和凝胶强度均上升，当温度超过60℃时，明胶分子在高温的作用下裂解为分子量较小的肽链小片段，明胶的凝胶强度反而降低，并且，蛋白质在高温下极易变形，影响明胶产品的质量；当温度过低时，胶原蛋白转化为明胶的速率较低，大部分肽链无法从牛皮中溶出，导致明胶的收率降低、质量较低。因此，本发明的热水提胶过程具体包括：向所述匀浆消化液中加入注射用水，于50-60℃恒温水浴中振荡溶胶2-10h；优选地，所述匀浆消化液与注射用水的体积比为(1-2)：10。

在消化完成之后，首先使用硅藻土对匀浆消化液进行吸附处理，以去除未被酶解的牛皮颗粒，以降低后续纯化的负担。而所述硅藻土吸附过滤具体包括：将明胶液按1:1的比例加入注射用水，使用5mol/l的盐酸溶液调节pH至4，充分搅拌后，加入预处理后的硅藻土进行静置吸附1-3h，收集上清液并使用板框过滤机进行过滤，得到吸附过滤液；优选地，每1L明胶液需加入硅藻土的量为13-17g；优选地，所述硅藻土的预处理方法为：将硅藻土使用8-12mM的盐酸溶液浸泡2-6h，浸泡后采用注射用水清洗3次以上；

在硅藻土吸附过滤后，进一步使用GPCM-30弱阳离子交换介质进行纯化，在醋酸钠体系下去除体系中的杂蛋白，以提高明胶的纯度及质量。而具体地，所述离子交换层析包括：使用弱阳离子交换树脂作为层析柱，采用浓度为10-20mM、pH值为4-5的醋酸钠缓冲液冲洗平衡，上样后使用含有10-300mM氯化钠的10-20mM醋酸钠缓冲液进行蛋白洗脱，收集洗脱液，得到层析液。

最后，对层析液依次进行蒸发浓缩和灭菌，而本发明对于浓缩和灭菌的具体工艺不作严格限定。其中，所述蒸发浓缩包括：将层析液转入旋转蒸发仪进行蒸发浓缩，浓缩至原体积的1/3-1/5，得到浓缩液；所述灭菌时，控制温度为110-140℃，时间为5-60s。

本发明还公开了上述制备方法所制备得到的明胶，且明胶的凝冻强度为309-320g，等电点pH为7.8-8.2，灰分含量为0.1-0.2％，透明度为300-380mm，水分为6.2-7.0％，收率为18.9-20.9％。

本发明的明胶及其制备方法，至少具有以下技术效果：

1、在本发明的制备方法中，首先，使用脂肪酶和糖胺聚糖降解酶将牛皮等动物皮肤原材料中的脂肪和糖胺聚糖等杂质成分进行部分酶解，使胶原蛋白能够在一定程度上完全与脂肪及多糖等杂质分开；进而使用胃蛋白酶去除胶原蛋白分子结构间的末端肽，将胶原蛋白从牛皮基质中提取出来；最后，利用热水提胶，破坏三重螺旋结构，从而得到明胶。整个酶解过程中，未引入有毒有害物质，具有较强的专一性，生产过程稳定可控，易于操作，有效保证了明胶的质量和纯度，并提高了明胶的收率；

2、在本发明的制备方法中，组合了硅藻土吸附过滤、阳离子交换层析等工艺，不仅有效除去了酶解不完全的不溶物，而且有效去除了脂肪和透明质酸等酶解消化产物，所制备得到的明胶具有纯度高、稳定均一的特点；

3、本发明所制备得到的明胶，凝冻强度为309-320g，等电点pH为7.8-8.2，灰分含量为0.1-0.2％，透明度为300-380mm，水分为6.2-7.0％，收率为18.9-20.9％，可满足现有技术中对高质量明胶食品添加剂的需求，具有良好的经济效益和市场效益。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明明胶制备方法的流程图。

具体实施方式

应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。

下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

S1、对牛皮进行清洗、清理，随后采用10％质量浓度的醋酸进行浸泡10天并保留牛皮真皮层，浸泡完成后使用纯水进行清洗，处理后的牛真皮组织搅碎成均匀的牛真皮颗粒，得到预处理牛皮；

S2、取牛真皮颗粒，按1kg牛真皮颗粒：5L注射用水的比例浸泡解冻，搅散，匀浆后得到组织匀浆液；

S3、加入脂肪酶和透明质酸酶在pH为6.5-7.5条件下对组织匀浆液进行第一次消化处理；使用冰醋酸将pH值调至2-3，利用胃蛋白酶溶液对第一次消化处理的产物进行第二次消化处理；其中，每g牛真皮颗粒所对应的脂肪酶、糖胺聚糖降解酶和胃蛋白酶的用量分别为1IU、20IU和40IU；最后，使用10M的氢氧化钠溶液将第二次消化处理的产物pH调至9-10，静置过夜，得到匀浆消化液；

S4、将匀浆消化液按1：5的料液比加注射水，于恒温水浴中振荡溶胶5h，得到明胶液；

S5、将明胶液按1:1比例加入注射水，用5mol/LHcl调节pH至4.0，30min/次搅拌，持续2h，硅藻土用10mM Hcl浸泡2h，注射用水清洗3次以上，硅藻土按照15g/L比例加入上述溶液静置沉淀2h，得到上清液，上清液经板框过滤机吸附得到吸附过滤液，取样，检测蛋白质含量；

使用GPCM-30弱阳离子交换介质进行纯化，平衡液为20mM pH4.6醋酸钠、洗脱液为含有300mM Nacl的20mM pH4.6醋酸钠收集洗脱液，得到层析液；

将层析液转入旋转蒸发仪进行蒸发浓缩，浓缩至1/4体积；

浓缩液进行高温瞬时杀菌，控制温度为140℃，时间为7s；

冷冻干燥机进行干燥，得到成品明胶。

实施例2

S1、对牛皮进行清洗、清理，随后采用5％质量浓度的醋酸进行浸泡7天并保留牛皮真皮层，浸泡完成后使用纯水进行清洗，处理后的牛真皮组织搅碎成均匀的牛真皮颗粒，得到预处理牛皮；

S2、取牛真皮颗粒，按1kg牛真皮颗粒：8L注射用水的比例浸泡解冻，搅散，匀浆后得到组织匀浆液；

S3、加入脂肪酶和透明质酸酶在pH为6.5-7.5条件下对组织匀浆液进行第一次消化处理；使用冰醋酸将pH值调至2-3，利用胃蛋白酶溶液对第一次消化处理的产物进行第二次消化处理；其中，每g牛真皮颗粒所对应的脂肪酶、糖胺聚糖降解酶和胃蛋白酶的用量分别为5IU、25IU和200IU；最后，使用10M的氢氧化钠溶液将第二次消化处理的产物pH调至9-10，静置过夜，得到匀浆消化液；

S4、将匀浆消化液按1：8的料液比加注射水，于恒温水浴中振荡溶胶8h，得到明胶液；

S5、将明胶液按1:1比例加入注射水，用5mol/LHcl调节pH至4.0，30min/次搅拌，持续2h，硅藻土用10mM Hcl浸泡3h，注射用水清洗3次以上，硅藻土按照16g/L比例加入上述溶液静置沉淀3h，得到上清液，上清液经板框过滤机吸附得到吸附过滤液，取样，检测蛋白质含量；

使用GPCM-30弱阳离子交换介质进行纯化，平衡液为15mM pH4.6醋酸钠、洗脱液为含有200mM Nacl的15mM pH4.6醋酸钠收集洗脱液，得到层析液；

将层析液转入旋转蒸发仪进行蒸发浓缩，浓缩至1/3体积；

浓缩液进行高温瞬时杀菌，控制温度为130℃，时间为30s；

冷冻干燥机进行干燥，得到成品明胶。

实施例3

S1、对牛皮进行清洗、清理，随后采用8％质量浓度的醋酸进行浸泡5天并保留牛皮真皮层，浸泡完成后使用纯水进行清洗，处理后的牛真皮组织搅碎成均匀的牛真皮颗粒，得到预处理牛皮；

S2、取牛真皮颗粒，按1kg牛真皮颗粒：10L注射用水的比例浸泡解冻，搅散，匀浆后得到组织匀浆液；

S3、加入脂肪酶和透明质酸酶在pH为6.5-7.5条件下对组织匀浆液进行第一次消化处理；使用冰醋酸将pH值调至2-3，利用胃蛋白酶溶液对第一次消化处理的产物进行第二次消化处理；其中，每g牛真皮颗粒所对应的脂肪酶、糖胺聚糖降解酶和胃蛋白酶的用量分别为10IU、30IU和400IU；最后，使用10M的氢氧化钠溶液将第二次消化处理的产物pH调至9-10，静置过夜，得到匀浆消化液；

S4、将匀浆消化液按1：7的料液比加注射水，于恒温水浴中振荡溶胶2h，得到明胶液；

S5、将明胶液按1:1比例加入注射水，用5mol/LHcl调节pH至4.6，30min/次搅拌，持续2h，硅藻土用10mM Hcl浸泡6h，注射用水清洗3次以上，硅藻土按照13g/L比例加入上述溶液静置沉淀1h，得到上清液，上清液经板框过滤机吸附得到吸附过滤液，取样，检测蛋白质含量；

使用GPCM-30弱阳离子交换介质进行纯化，平衡液为10mM pH4.6醋酸钠、洗脱液为含有300mM Nacl的10mM pH4.6醋酸钠收集洗脱液，得到层析液；

将层析液转入旋转蒸发仪进行蒸发浓缩，浓缩至1/5体积；

浓缩液进行高温瞬时杀菌，控制温度为110℃，时间为20s；

冷冻干燥机进行干燥，得到成品明胶。

对照例1

①浸酸处理：

原料：牛皮3000kg，辅料：5.45％浓度的稀硫酸

1)按照皮料：稀硫酸＝1:2比例配制19.2℃温度的稀硫酸6000kg，并将稀硫酸先投入带搅拌的浸酸池中；

2)开起搅拌，24r/min的转速下匀速投入定量的牛皮，投料时间控制在0.5h，投料后在22r/min的转速条件下保持0.5h，保证牛皮与稀硫酸混合均匀；混匀后停止搅拌，静态浸酸24h，静态浸酸期间每隔4h启动搅拌10min；

3)浸酸完成后开启排液阀排去酸液。

②退酸水洗

排去酸液后，按照单次料水比1:1.5比例加水4500kg水洗皮料，水洗3次后进行中和工序。

③中和

水洗后的牛皮投入带搅拌的中和罐中，加水至没过皮料10cm，使用10％浓度的氢氧化钠溶液调节pH值，调节pH至5.3-5.8，中和期间分3次添加氢氧化钠溶液，中和时间15h，稳定4h，pH值稳定后排去中和液进入下一工序。

④水洗

排去中和液后，按照单次料水比1:1.5比例加水4500kg水洗皮料，皮料进入粉碎工序。

⑤粉碎

经水洗后的皮料使用粉碎机粉碎至20-40目的细度后酶解提胶。

⑥酶解提胶

将水洗后的牛皮投入带搅拌的反应釜，按照干牛皮：水＝1:2.5比例加入纯水7500kg，升温至45℃，按照原始皮的万分之四的比例加入酸性蛋白酶，此时酸性蛋白酶加入量为每克干牛皮加40IU的酸性蛋白酶，在45-55℃、pH＝3-4条件下酶解提胶4h，此时胶液浓度为5.5％；使用10％氢氧化钠溶液将pH调节至5.5将酸性蛋白酶灭活，升温至75℃，并保持20min彻底杀酶。

⑦精制处理

将酶解提胶的胶液进行澄清、过滤、离子交换。

⑧浓缩、蒸发、灭菌、挤胶干燥

将精制后的胶液使用超滤膜进行浓缩，浓缩至浓度为10％-12％，再经四效蒸发器提浓至20％-25％浓度，在142℃温度条件下灭菌3-5s，冷冻成型后挤条、干燥，得到明胶。

对照例2

①在室温下将牛皮置于10倍体积的0.05mol/L的NaOH溶液中搅拌4h并每隔30min换一次料液；

②然后用蒸馏水洗涤，0.05mol/L的NaOH直至pH为7.5；

③胃蛋白酶和乙酸处理：浸酸料液比为1:10(g/mL)；胃蛋白酶量为10U/g，处理温度为20℃，处理时间72h；

④使用NaOH将第三步所得物调节pH至7.5，并于4℃下搅拌1.5h；

⑤将第四步所得物在40℃水浴提胶18h；

⑥取第五步所得提取液进行离心，转速为11000转/分钟离心25min,留上清液；

⑦冷冻干燥：将第六步所得物在-45℃下冷冻干燥72h，得到成品明胶。

对比例3

消化处理包括：使用0.5M醋酸溶液配制酶活约9000IU/ml的胃蛋白酶溶液，然后胃蛋白酶溶液按0.8:100的比例加入组织匀浆液中，混匀，室温消化10天，使用8-12M的氢氧化钠溶液将消化处理的产物pH调至9-10，静置过夜，得到匀浆消化液；

其他步骤及工艺参数同实施例2。

对比例4

消化处理包括：加入脂肪酶在pH为6.5-7.5条件下对组织匀浆液进行第一次消化处理，使用冰醋酸将pH值调至2-3，利用胃蛋白酶溶液对第一次消化处理的产物进行第二次消化处理，其中，每g牛真皮颗粒所对应的脂肪酶和胃蛋白酶的用量分别为5IU和200IU；最后，使用10M的氢氧化钠溶液将第二次消化处理的产物pH调至9-10，静置过夜，得到匀浆消化液；

其他步骤及工艺参数同实施例2。

本发明对上述实施例1-3及对照例1-4所制得明胶产品的质量进行测试，如表1所示。

表1产品质量

由表1可知，本发明实施例1-3所制备得到的明胶凝冻强度为309-320g，等电点pH为7.8-8.2，灰分含量为0.1-0.2％，透明度为300-380mm，水分为6.2-7.0，收率为18.9-20.9％，均明显优于对照例1-4。这可能是因为对照例2中的碱浸预处理过程未充分将牛皮进行溶胀，胶原分子发生分子间分离收到抑制；对照例1-3中胶原蛋白分子被脂肪包覆不仅影响了明胶的收率，而且降低了明胶的纯度和透明度；对照例4中透明质酸等多种多糖的存在影响了明胶的质量。此外，尤为重要的的一点是，本发明的明胶制备方法生产周期短，且未引入有毒有害物质，具有较强的专一性，生产过程稳定可控，大幅降低了污染负荷。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.一种明胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、对牛皮进行预处理，得到预处理牛皮；

S2、对预处理牛皮进行匀浆处理，得到组织匀浆液；

S3、使用复合蛋白酶对所述组织匀浆液进行消化处理，消化后灭酶，得到匀浆消化液；

S4、将所述匀浆消化液进行热水提胶，得到明胶液；

S5、将所述明胶液依次进行硅藻土吸附过滤、离子交换层析、蒸发浓缩、灭菌和干燥，得到明胶；

其中，所述复合蛋白酶包括胃蛋白酶、脂肪酶和糖胺聚糖降解酶。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述预处理包括：对牛皮进行清洗、清理，随后采用1-10％质量浓度的醋酸进行浸泡，浸泡完成后使用纯水进行清洗，并搅碎成牛真皮颗粒，得到预处理牛皮；

优选地，所述浸泡时，控制温度为4-25℃，时间为5-10d。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述匀浆处理包括：向预处理后的牛真皮颗粒中加入注射用水进行匀浆，得到组织匀浆液；

优选地，牛真皮颗粒与注射用水的比例为1kg：(2-10)L。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述消化处理包括：

利用脂肪酶和糖胺聚糖降解酶在pH为6.5-7.5条件下对组织匀浆液进行第一次消化处理；

使用醋酸将pH值调至2-3，利用胃蛋白酶溶液对第一次消化处理的产物进行第二次消化处理；

对第二次消化处理的产物进行灭酶处理，得到匀浆消化液；

优选地，每g牛真皮颗粒所对应的所述脂肪酶、所述糖胺聚糖降解酶和所述胃蛋白酶的用量分别为(1-10IU)、(20-30IU)和(40-400IU)。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述第一次消化处理时，控制温度为35-40℃，时间为60-120min；

所述第二次消化处理时，控制温度为4-22℃，时间为5-9d。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述灭酶处理时，使用8-12M的氢氧化钠溶液将第二次消化处理的产物pH调至9-10，静置过夜，得到匀浆消化液。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S4中，所述热水提胶包括：向所述匀浆消化液中加入注射用水，于50-60℃恒温水浴中振荡溶胶2-10h；

优选地，所述匀浆消化液与注射用水的体积比为(1-2)：10。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述硅藻土吸附过滤包括：将明胶液按1:1的比例加入注射用水，使用5mol/l的盐酸溶液调节pH至4，充分搅拌后，加入预处理后的硅藻土进行静置吸附1-3h，收集上清液并使用板框过滤机进行过滤，得到吸附过滤液；

优选地，每1L明胶液需加入硅藻土的量为13-17g；

优选地，所述硅藻土的预处理方法为：将硅藻土使用8-12mM的盐酸溶液浸泡2-6h，浸泡后采用注射用水清洗3次以上；

所述离子交换层析包括：使用弱阳离子交换树脂作为层析柱，采用浓度为10-20mM、pH值为4-5的醋酸钠缓冲液冲洗平衡，上样后使用含有10-300mM氯化钠的10-20mM醋酸钠缓冲液进行蛋白洗脱，收集洗脱液，得到层析液。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述蒸发浓缩包括：将层析液转入旋转蒸发仪进行蒸发浓缩，浓缩至原体积的1/3-1/5，得到浓缩液；

所述灭菌时，控制温度为110-140℃，时间为5-60s。

10.一种明胶，其特征在于，根据权利要求1-9任一项所述的制备方法制得，

优选地，所述明胶的凝冻强度为309-320g，等电点pH为7.8-8.2，灰分含量为0.1-0.2％，透明度为300-380mm，水分为6.2-7.0％，收率为18.9-20.9％。

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