CN110269128A - 一种纳米级小分子复合肽的制备方法 - Google Patents

一种纳米级小分子复合肽的制备方法 Download PDF

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CN110269128A CN201910658483.7A CN201910658483A CN110269128A CN 110269128 A CN110269128 A CN 110269128A CN 201910658483 A CN201910658483 A CN 201910658483A CN 110269128 A CN110269128 A CN 110269128A
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丁金华
曾蕊
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Abstract

本发明公开了一种纳米级小分子复合肽的制备方法,将原料在浸泡槽中进行搅拌浸泡、蒸煮、碱泡、水漂洗、脱脂、除杂、开片,将原料控水后进行pH值调值并冷冻;对冷冻后的肉质单片解冻后调节pH值;然后进行焙烤,在原料上形成胶原蛋白结膜组织,再进行压延、轧松处理;将胶原蛋白结膜组织从原料上剥离出来,得到小分子肽制备原料。将小分子肽制备原料解冻后纯净水浸泡脱盐、沥干,之后切碎;将切碎后的小分子肽制备原料和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中,使小分子肽制备原料降解为纳米级胶原蛋白肽提取液;对纳米级胶原蛋白肽提取液进行过滤除杂、浓缩、灭活后输入储液槽中,输送到喷干机或冻干机中,制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。

Description

一种纳米级小分子复合肽的制备方法
技术领域
本发明涉及医药生物领域,尤其是一种纳米级小分子复合肽的制备方法。
背景技术
渔业捕捞以及食品加工产生的废弃海鱼,资源丰富。但是,目前水产品深加工较少,仅占水产品总量的30.7%,大部分仅仅进行了低值利用,存在着生产工艺不尽合理、品质普遍偏低、适口性差、营养价值不高和消化利用率低等问题。同时,这种低值利用的方式易造成资源浪费和环境污染。
研究表明,小分子肽的吸收量及吸收速度都要优于氨基酸,且小分子肽能够保护氨基酸不被破坏。在生物体再合成新的蛋白质时,小分子肽和氨基酸的混合物能够省去一部分重新组合的步骤,具有更高的生物效价。但目前已有的小分子肽含量相对较低,无法满足市场需求。
发明内容
本发明目的在于提供一种工艺简单、分子肽含量高、应用广泛的纳米级小分子复合肽的制备方法。
为实现上述目的,采用了以下技术方案:
一种纳米级小分子复合肽的制备方法,所述工艺过程包括以下步骤:
S1,将优质鱼肉或鱿鱼肉或动物胎盘作为原料,在18~21℃温度环境中,在浸泡槽内用纯净水进行搅拌浸泡;搅拌速度为180转/min,搅拌时间为6h,原料∶水=1∶6,浸泡时间为6~12h;
S2,对步骤S1中的原料经蒸煮、碱泡、水漂洗,甩干进行脱脂操作;
S3,利用纯净水对脱脂操作后的原料进行清洗去除杂质;
S4,使用开片机对原料进行切片,动物胎盘的剖片厚度在4~6mm之间,鱿鱼肉的剖片厚度在6~8mm之间,鱼肉的剖片厚度在8~10mm之间;
S5,在非叠压条件下将原料单片摆放,在40~60℃范围内烘干2~4h,烘干水分控制在20~30%,制成半生半熟的肉质单片;
S6,将步骤S5制成的半生半熟的肉质单片装入塑料袋并扎紧密封,在-18℃以下冷冻7天以上;
S7,对冷冻后的半生半熟的肉质单片解冻,纯净水浸泡,调节pH值至中性;
S8,将浸泡后的肉质单片沥干,摆片进行焙烤;这时在原料上形成胶原蛋白结膜组织,然后将整个肉质单片进行压延、轧松处理;
S9,将胶原蛋白结膜组织从肉质单片上剥离出来,将结膜组织上的其它肉质等杂质刮除后洗净,得到小分子肽制备原料;
S10,经烘干、回潮后进行金属探测,去除金属杂质;再进行冷冻保存;
S11,将小分子肽制备原料解冻后纯净水浸泡脱盐、沥干;
S12,将脱盐沥干处理后的小分子肽制备原料切碎;
S13,将切碎后的小分子肽制备原料和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中,加水搅拌进行反应;小分子肽制备原料∶复合蛋白酶∶水=140∶1∶660;搅拌速度为100~300转/min,搅拌时间为3~6h,加热温度为35~60℃;加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.25~0.3%;
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到80%以上;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
反应结束后将水解液冷却至30℃左右,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入0.1~5g的食品级脂肪酶,在40~50℃和100~300转/min的搅拌条件下,反应时间1h,使残留的脂肪水解成小分子,易于膜过滤去除脂肪杂质;
所述食品级脂肪酶可为诺维信脂肪酶435、酶活力为20000LU/g、品名为诺维信、产地为丹麦的食品级脂肪酶,或品名为Solarbio、产地为中国上海、酶活力为20000LU/g的脂肪酶;
S14,利用过滤装置对水解液未降解的物料进行过滤除去后,制得纳米级胶原蛋白肽提取液,备用;
S15,用高压泵将过滤后的纳米级胶原蛋白肽提取液输入分离装置,经至少两次分离,对纳米级胶原蛋白肽提取液进行分离和浓缩;
S16,将浓缩的纳米级胶原蛋白肽提取液输入储液槽中,采用造粒机或冷冻干燥机对其进行干燥;造粒机的干燥温度为105~125℃;冷冻干燥在-20℃以下进行真空干燥;制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。
进一步的,本发明还提供了一种纳米级小分子复合肽的制备方法,工艺过程包括以下步骤:
S1,将一定量的鱼皮或骨头、贝壳、虾壳、动物内脏、虾肉、螺肉、假鲍鱼肉、鲍鱼肉作为原料;将原料用水洗净后,进行碱泡、脱脂、用纯净水除碱除脂后进行粉碎或打浆;
S2,将粉碎后的粉末或打浆后的打浆料加水进行水煮6~12h;搅拌速度为180转/min,原料∶水=1∶6;
S3,冷却后筛网过滤,滤液经活性炭脱色,脱色滤液作为纳米级小分子肽制备原料;
S4,将纳米级小分子肽制备原料和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中搅拌均匀;纳米级小分子肽制备原料∶复合蛋白酶=800∶0.5~1;搅拌速度为100~300转/min,搅拌时间为3~6h,加热温度为35~60℃;
加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.25~0.3%;
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到70%以上;
水解液冷却至30℃,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入0.1~5g的食品级脂肪酶;然后加热至40~50℃,反应时间为1h,使残留的脂肪水解成小分子,易于膜过滤去除脂肪杂质;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
所述食品级脂肪酶可为诺维信脂肪酶435、酶活力为20000LU/g、品名为诺维信、产地为丹麦的食品级脂肪酶,或品名为Solarbio、产地为中国上海、酶活力为20000LU/g的脂肪酶;
S5,利用过滤装置对未降解消化的物料进行过滤除杂,制得纳米级胶原蛋白肽提取液,备用;对未降解的物料返回S4进行继续操作;
S6,用高压泵将过滤后的纳米级胶原蛋白肽提取液输入分离装置,经至少两次分离,对纳米级胶原蛋白肽提取液进行分离和浓缩;
S7,将浓缩的纳米级胶原蛋白肽提取液输入储液槽中,采用造粒机或冷冻干燥机对其进行干燥;造粒机的干燥温度为105~125℃;冷冻干燥在-20℃以下进行真空干燥;制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。
进一步的,本发明还提供了一种纳米级小分子复合肽的制备方法,所述方法的原料为蛋清,包括以下步骤:
S1,将蛋清和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中并加水搅拌均匀;蛋清∶复合蛋白酶∶水=300∶0.5~1∶500;搅拌速度为100~300转/min,搅拌时间为3~6h,加热至35~60℃;加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.25~0.3%;
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到80%以上;水解液冷却至30℃,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入0.1~5g的食品级脂肪酶;然后加热至40~50℃,反应时间1h;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
所述食品级脂肪酶可为诺维信脂肪酶435、酶活力为20000LU/g、品名为诺维信、产地为丹麦的食品级脂肪酶,或品名为Solarbio、产地为中国上海、酶活力为20000LU/g的脂肪酶;
S2,利用过滤装置对水解液未降解的物料进行过滤除去后,制得纳米级胶原蛋白肽提取液,备用;
S3,用高压泵将过滤后的纳米级胶原蛋白肽提取液输入分离装置,经至少两次分离,对纳米级胶原蛋白肽提取液进行分离和浓缩;
S4,将浓缩的纳米级胶原蛋白肽提取液输入储液槽中,采用造粒机或冷冻干燥机对其进行干燥;造粒机的干燥温度为105~125℃;冷冻干燥在-20℃以下进行真空干燥;制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。
进一步的,本发明还提供了一种纳米级小分子复合肽的制备方法,所述工艺过程包括以下步骤:
S1,将一定量的切开状态的鱼鳔,在18~21℃温度环境下,用纯净水进行搅拌浸泡;搅拌速度为180转/min,搅拌时间为6h,原料∶水=1∶6;浸泡时间为6~12h;
S2,在漂洗甩干机中对步骤S1中的原料经碱洗、纯净水漂洗后进行脱脂操作;
S3,脱脂操作的原料经粉碎机粉碎;再利用纯净水对粉碎后的原料进行清洗去除杂质;
S4,将粉碎后的鱼鳔原料和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中并加水搅拌均匀:粉碎后的鱼鳔原料∶复合蛋白酶∶水=150∶1∶650;搅拌速度为100~300转/min,搅拌时间为3~6h;加热至35~60℃;加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.25~0.3%;
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到80%以上;
发水解液冷却至30℃,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入0.1~5g的食品级脂肪酶;然后加热至40~50℃,反应时间1h,使残留的脂肪水解成小分子,易于膜过滤去除脂肪杂质;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
所述食品级脂肪酶可为诺维信脂肪酶435、酶活力为20000LU/g、品名为诺维信、产地为丹麦的食品级脂肪酶,或品名为Solarbio、产地为中国上海、酶活力为20000LU/g的脂肪酶;
S5,利用过滤装置对水解液未降解的物料进行过滤除去后,制得纳米级胶原蛋白肽提取液,备用;
S6,用高压泵将过滤后的纳米级胶原蛋白肽提取液输入分离装置,经至少两次分离,对纳米级胶原蛋白肽提取液进行分离和浓缩;
S7,将浓缩的纳米级胶原蛋白肽提取液输入储液槽中,采用造粒机或冷冻干燥机对其进行干燥;造粒机的干燥温度为105~125℃;冷冻干燥在-20℃以下进行真空干燥;制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。
与现有技术相比,本发明具有如下优点:加工工艺合理、产品可长期保存、小分子肽含量高,大分子肽被酶解以后变成小分子肽,小分子肽的分子量比例1000道尔顿以下占95%以上,产生的小分子肽,易被人体吸收和输送到细胞内。
具体实施方式
下面对本发明做进一步说明:
实施例1:
本发明所述工艺过程包括以下步骤:
S1,将优质鱼肉或鱿鱼肉或动物胎盘作为原料,在18~21℃温度环境中(优选20℃),在浸泡槽内用纯净水进行搅拌浸泡;搅拌速度为180转/min,搅拌时间为6h,原料∶水=1∶6,浸泡时间为6~12h(优选8h);
S2,对步骤S1中的原料经蒸煮、碱泡、水漂洗,甩干进行脱脂操作;
S3,利用纯净水对脱脂操作后的原料进行清洗去除杂质;
S4,使用开片机对原料进行切片,动物胎盘的剖片厚度在4~6mm之间(优选5mm),鱿鱼肉的剖片厚度在6~8mm之间(优选7mm),鱼肉的剖片厚度在8~10mm之间(优选9mm);
S5,在非叠压条件下将原料单片摆放,在40~60℃(优选50℃)范围内烘干2~4h(优选3h),烘干水分控制在20~30%(优选25%),制成半生半熟的肉质单片;
S6,将步骤S5制成的半生半熟的肉质单片装入塑料袋并扎紧密封,在-18℃以下冷冻7天以上;
S7,对冷冻后的半生半熟的肉质单片解冻,纯净水浸泡,调节pH值至中性;
S8,将浸泡后的肉质单片沥干,摆片进行焙烤;这时在原料上形成胶原蛋白结膜组织,然后将整个肉质单片进行压延、轧松处理;
S9,将胶原蛋白结膜组织从肉质单片上剥离出来,将结膜组织上的其它肉质等杂质刮除后洗净,得到小分子肽制备原料;
S10,经烘干、回潮后进行金属探测,去除金属杂质;再进行冷冻保存;
S11,将小分子肽制备原料解冻后纯净水浸泡脱盐、沥干;
S12,将脱盐沥干处理后的小分子肽制备原料切碎;
S13,将切碎后的小分子肽制备原料和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中,加水搅拌进行反应;小分子肽制备原料∶复合蛋白酶∶水=140∶1∶660;搅拌速度为100~300转/min(优选250转/min),搅拌时间为3~6h(优选5h),加热温度为35~60℃(优选50℃);加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.25~0.3%(优选0.3%);
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到80%以上;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
反应结束后将水解液冷却至30℃左右,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入0.1~5g的食品级脂肪酶,在40~50℃和100~300转/min的搅拌条件下,反应时间1h,使残留的脂肪水解成小分子,易于膜过滤去除脂肪杂质;
所述食品级脂肪酶可为诺维信脂肪酶435、酶活力为20000LU/g、品名为诺维信、产地为丹麦的食品级脂肪酶,或品名为Solarbio、产地为中国上海、酶活力为20000LU/g的脂肪酶;
S14,利用过滤装置对水解液未降解的物料进行过滤除去后,制得纳米级胶原蛋白肽提取液,备用;
S15,用高压泵将过滤后的纳米级胶原蛋白肽提取液输入分离装置,经至少两次分离,对纳米级胶原蛋白肽提取液进行分离和浓缩;
S16,将浓缩的纳米级胶原蛋白肽提取液输入储液槽中,采用造粒机或冷冻干燥机对其进行干燥;造粒机的干燥温度为105~125℃(优选110℃);冷冻干燥在-20℃以下进行真空干燥;制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。
实施例2:
本发明所述工艺过程包括以下步骤:
S1,将一定量的鱼皮或骨头、贝壳、虾壳、动物内脏、虾肉、螺肉、假鲍鱼肉、鲍鱼肉作为原料;将原料用水洗净后,进行碱泡、脱脂、用纯净水除碱除脂后进行粉碎或打浆;
S2,将粉碎后的粉末或打浆后的打浆料加水进行水煮6~12h(优选10h);搅拌速度为180转/min,原料∶水=1∶6;
S3,冷却后筛网过滤,滤液经活性炭脱色,脱色滤液作为纳米级小分子肽制备原料;
S4,将纳米级小分子肽制备原料和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中搅拌均匀;纳米级小分子肽制备原料∶复合蛋白酶=800∶0.5~1;搅拌速度为300转/min,搅拌时间为6h,加热温度为60℃;
加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.3%;
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到70%;
水解液冷却至30℃,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入3g的食品级脂肪酶;然后加热至45℃,反应时间为1h,使残留的脂肪水解成小分子,易于膜过滤去除脂肪杂质;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
所述食品级脂肪酶可为诺维信脂肪酶435、酶活力为20000LU/g、品名为诺维信、产地为丹麦的食品级脂肪酶,或品名为Solarbio、产地为中国上海、酶活力为20000LU/g的脂肪酶;
S5,利用过滤装置对未降解消化的物料进行过滤除杂,制得纳米级胶原蛋白肽提取液,备用;对未降解的物料返回S4进行继续操作;
S6,用高压泵将过滤后的纳米级胶原蛋白肽提取液输入分离装置,经至少两次分离,对纳米级胶原蛋白肽提取液进行分离和浓缩;
S7,将浓缩的纳米级胶原蛋白肽提取液输入储液槽中,采用造粒机或冷冻干燥机对其进行干燥;造粒机的干燥温度为110℃;冷冻干燥在-20℃以下进行真空干燥;制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。
实施例3:
本发明所述工艺过程包括以下步骤:
S1,将蛋清和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中并加水搅拌均匀;蛋清∶复合蛋白酶∶水=300∶0.5~1∶500;搅拌速度为100转/min,搅拌时间为3h,加热至40℃;加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.25%;
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到80%以上;水解液冷却至30℃,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入4g的食品级脂肪酶;然后加热至40℃,反应时间1h;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
所述食品级脂肪酶可为诺维信脂肪酶435、酶活力为20000LU/g、品名为诺维信、产地为丹麦的食品级脂肪酶,或品名为Solarbio、产地为中国上海、酶活力为20000LU/g的脂肪酶;
S2,利用过滤装置对水解液未降解的物料进行过滤除去后,制得纳米级胶原蛋白肽提取液,备用;
S3,用高压泵将过滤后的纳米级胶原蛋白肽提取液输入分离装置,经至少两次分离,对纳米级胶原蛋白肽提取液进行分离和浓缩;
S4,将浓缩的纳米级胶原蛋白肽提取液输入储液槽中,采用造粒机或冷冻干燥机对其进行干燥;造粒机的干燥温度为105℃;冷冻干燥在-20℃以下进行真空干燥;制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。
实施例4:
本发明所述工艺过程包括以下步骤:
S1,将一定量的切开状态的鱼鳔,在18℃温度环境下,用纯净水进行搅拌浸泡;搅拌速度为180转/min,搅拌时间为6h,原料∶水=1∶6;浸泡时间为6h;
S2,在漂洗甩干机中对步骤S1中的原料经碱洗、纯净水漂洗后进行脱脂操作;
S3,脱脂操作的原料经粉碎机粉碎;再利用纯净水对粉碎后的原料进行清洗去除杂质;
S4,将粉碎后的鱼鳔原料和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中并加水搅拌均匀;粉碎后的鱼鳔原料∶复合蛋白酶∶水=150∶1∶650;搅拌速度为200转/min,搅拌时间为5h;加热至45℃;加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.25%;
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到80%以上;
发水解液冷却至30℃,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入5g的食品级脂肪酶;然后加热至40℃,反应时间1h,使残留的脂肪水解成小分子,易于膜过滤去除脂肪杂质;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
所述食品级脂肪酶可为诺维信脂肪酶435、酶活力为20000LU/g、品名为诺维信、产地为丹麦的食品级脂肪酶,或品名为Solarbio、产地为中国上海、酶活力为20000LU/g的脂肪酶;
S5,利用过滤装置对水解液未降解的物料进行过滤除去后,制得纳米级胶原蛋白肽提取液,备用;
S6,用高压泵将过滤后的纳米级胶原蛋白肽提取液输入分离装置,经至少两次分离,对纳米级胶原蛋白肽提取液进行分离和浓缩;
S7,将浓缩的纳米级胶原蛋白肽提取液输入储液槽中,采用造粒机或冷冻干燥机对其进行干燥;造粒机的干燥温度为115℃;冷冻干燥在-20℃以下进行真空干燥;制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。
所得纳米级小分子复合肽冻干粉或喷干粉的检测结果如下:
以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述,并非对本发明的范围进行限定,在不脱离本发明设计精神的前提下,本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进,均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (4)

1.一种纳米级小分子复合肽的制备方法,其特征在于,所述工艺过程包括以下步骤:
S1,将优质鱼肉或鱿鱼肉或动物胎盘作为原料,在18~21℃温度环境中,在浸泡槽内用纯净水进行搅拌浸泡;搅拌速度为180转/min,搅拌时间为6h,原料∶水=1∶6,浸泡时间为6~12h;
S2,对步骤S1中的原料经蒸煮、碱泡、水漂洗,甩干进行脱脂操作;
S3,利用纯净水对脱脂操作后的原料进行清洗去除杂质;
S4,使用开片机对原料进行切片,动物胎盘的剖片厚度在4~6mm之间,鱿鱼肉的剖片厚度在6~8mm之间,鱼肉的剖片厚度在8~10mm之间;
S5,在非叠压条件下将原料单片摆放,在40~60℃范围内烘干2~4h,烘干水分控制在20~30%,制成半生半熟的肉质单片;
S6,将步骤S5制成的半生半熟的肉质单片装入塑料袋并扎紧密封,在-18℃以下冷冻7天以上;
S7,对冷冻后的半生半熟的肉质单片解冻,纯净水浸泡,调节pH值至中性;
S8,将浸泡后的肉质单片沥干,摆片进行焙烤;这时在原料上形成胶原蛋白结膜组织,然后将整个肉质单片进行压延、轧松处理;
S9,将胶原蛋白结膜组织从肉质单片上剥离出来,将结膜组织上的其它肉质等杂质刮除后洗净,得到小分子肽制备原料;
S10,经烘干、回潮后进行金属探测,去除金属杂质;再进行冷冻保存;
S11,将小分子肽制备原料解冻后纯净水浸泡脱盐、沥干;
S12,将脱盐沥干处理后的小分子肽制备原料切碎;
S13,将切碎后的小分子肽制备原料和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中,加水搅拌进行反应;小分子肽制备原料∶复合蛋白酶∶水=140∶1∶660;搅拌速度为100~300转/min,搅拌时间为3~6h,加热温度为35~60℃;加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.25~0.3%;
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到80%以上;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
反应结束后将水解液冷却至30℃左右,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入0.1~5g的食品级脂肪酶,在40~50℃和100~300转/min的搅拌条件下,反应时间1h,使残留的脂肪水解成小分子,易于膜过滤去除脂肪杂质;
所述食品级脂肪酶可为诺维信脂肪酶435、酶活力为20000LU/g、品名为诺维信、产地为丹麦的食品级脂肪酶,或品名为Solarbio、产地为中国上海、酶活力为20000LU/g的脂肪酶;
S14,利用过滤装置对水解液未降解的物料进行过滤除去后,制得纳米级胶原蛋白肽提取液,备用;
S15,用高压泵将过滤后的纳米级胶原蛋白肽提取液输入分离装置,经至少两次分离,对纳米级胶原蛋白肽提取液进行分离和浓缩;
S16,将浓缩的纳米级胶原蛋白肽提取液输入储液槽中,采用造粒机或冷冻干燥机对其进行干燥;造粒机的干燥温度为105~125℃;冷冻干燥在-20℃以下进行真空干燥;制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。
2.一种纳米级小分子复合肽的制备方法,其特征在于,所述工艺过程包括以下步骤:
S1,将一定量的鱼皮或骨头、贝壳、虾壳、动物内脏、虾肉、螺肉、假鲍鱼肉、鲍鱼肉作为原料;将原料用水洗净后,进行碱泡、脱脂、用纯净水除碱除脂后进行粉碎或打浆;
S2,将粉碎后的粉末或打浆后的打浆料加水进行水煮6~12h;搅拌速度为180转/min,原料∶水=1∶6;
S3,冷却后筛网过滤,滤液经活性炭脱色,脱色滤液作为纳米级小分子肽制备原料;
S4,将纳米级小分子肽制备原料和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中搅拌均匀;纳米级小分子肽制备原料∶复合蛋白酶=800∶0.5~1;搅拌速度为100~300转/min,搅拌时间为3~6h,加热温度为35~60℃;
加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.25~0.3%;
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到70%以上;
水解液冷却至30℃,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入0.1~5g的食品级脂肪酶;然后加热至40~50℃,反应时间为1h,使残留的脂肪水解成小分子,易于膜过滤去除脂肪杂质;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
所述食品级脂肪酶可为诺维信脂肪酶435、酶活力为20000LU/g、品名为诺维信、产地为丹麦的食品级脂肪酶,或品名为Solarbio、产地为中国上海、酶活力为20000LU/g的脂肪酶;
S5,利用过滤装置对未降解消化的物料进行过滤除杂,制得纳米级胶原蛋白肽提取液,备用;对未降解的物料返回S4进行继续操作;
S6,用高压泵将过滤后的纳米级胶原蛋白肽提取液输入分离装置,经至少两次分离,对纳米级胶原蛋白肽提取液进行分离和浓缩;
S7,将浓缩的纳米级胶原蛋白肽提取液输入储液槽中,采用造粒机或冷冻干燥机对其进行干燥;造粒机的干燥温度为105~125℃;冷冻干燥在-20℃以下进行真空干燥;制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。
3.一种纳米级小分子复合肽的制备方法,其特征在于:所述方法的原料为蛋清,包括以下步骤:
S1,将蛋清和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中并加水搅拌均匀;蛋清∶复合蛋白酶∶水=300∶0.5~1∶500;搅拌速度为100~300转/min,搅拌时间为3~6h,加热至35~60℃;加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.25~0.3%;
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到80%以上;水解液冷却至30℃,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入0.1~5g的食品级脂肪酶;然后加热至40~50℃,反应时间1h;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
所述食品级脂肪酶可为诺维信脂肪酶435、酶活力为20000LU/g、品名为诺维信、产地为丹麦的食品级脂肪酶,或品名为Solarbio、产地为中国上海、酶活力为20000LU/g的脂肪酶;
S2,利用过滤装置对水解液未降解的物料进行过滤除去后,制得纳米级胶原蛋白肽提取液,备用;
S3,用高压泵将过滤后的纳米级胶原蛋白肽提取液输入分离装置,经至少两次分离,对纳米级胶原蛋白肽提取液进行分离和浓缩;
S4,将浓缩的纳米级胶原蛋白肽提取液输入储液槽中,采用造粒机或冷冻干燥机对其进行干燥;造粒机的干燥温度为105~125℃;冷冻干燥在-20℃以下进行真空干燥;制成的纳米级小分子复合肽为干燥粉末。
4.一种纳米级小分子复合肽的制备方法,其特征在于,所述工艺过程包括以下步骤:
S1,将一定量的切开状态的鱼鳔,在18~21℃温度环境下,用纯净水进行搅拌浸泡;搅拌速度为180转/min,搅拌时间为6h,原料∶水=1∶6;浸泡时间为6~12h;
S2,在漂洗甩干机中对步骤S1中的原料经碱洗、纯净水漂洗后进行脱脂操作;
S3,脱脂操作的原料经粉碎机粉碎;再利用纯净水对粉碎后的原料进行清洗去除杂质;
S4,将粉碎后的鱼鳔原料和复合蛋白酶放入封闭发酵罐中并加水搅拌均匀;粉碎后的鱼鳔原料∶复合蛋白酶∶水=150∶1∶650;搅拌速度为100~300转/min,搅拌时间为3~6h;加热至35~60℃;加入有机硅消泡剂,添加量控制在由原料、复合蛋白酶、水构成反应体系的0.25~0.3%;
以上条件能使小分子肽制备原料降解成小分子活性肽,且小分子活性肽制成率达到80%以上;
发水解液冷却至30℃,然后加入食品级脂肪酶,添加量为每升水解液加入0.1~5g的食品级脂肪酶;然后加热至40~50℃,反应时间1h,使残留的脂肪水解成小分子,易于膜过滤去除脂肪杂质;
所述复合蛋白酶可为上海源叶生物产品出产的120U/mg,货号为S1055的复合蛋白酶,或品名为诺维信,产地为丹麦、酶活力为1.5AU/g的复合蛋白酶;
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