CN115353509B - 含氮杂芳类衍生物调节剂、其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及含氮杂芳类衍生物调节剂、其制备方法和应用。特别地，本发明涉及通式(I)所示的化合物、其制备方法及含有该化合物的药物组合物，及其作为蛋白酪氨酸磷酸酶‑2C(SHP2)抑制剂，在治疗白血病、神经母细胞瘤、黑色素瘤、乳癌、肺癌及其结肠癌等疾病或病症的用途，其中通式(I)中的各取代基与说明书中的定义相同。

Description

含氮杂芳类衍生物调节剂、其制备方法和应用
本发明是中国专利申请号为201980005252.4，发明名称为“含氮杂芳类衍生物调节剂、其制备方法和应用”，国际申请日为2019年10月10日的进入中国的PCT专利申请的分案申请。
技术领域
本发明属于药物合成领域，具体涉及一种含氮杂芳类衍生物抑制剂及其制备方法和应用。
背景技术
SHP-2(Src homology-2 domain-containing phosphatase 2)，又称PTPN11(tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 11)，由PTPN11基因编码，隶属于蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatase，PTPs)家族。作为细胞因子、生长因子及其他胞外刺激因素的下游信号分子，SHP-2广泛表达于机体各组织和细胞，参与细胞信号转导，调节细胞生长、分化、迁移、代谢、基因转录和免疫应答等。
SHP-2主要有3个组成部分：SH-2结构域(N-SH2和C-SH2)、PTP活性结构域、C-末端(含酪氨酸磷酸化位点)。其中SH2结构域高度保守，是磷酸酪氨酸结合位点，并介导PTP结构域与其配体的结合。
SHP-2在机体内主要有2种状态：失活与激活。在失活状态下，SHP-2内部N-SH2与PTP结构域相互结合，由于PTP结构域被占领，使SHP-2失活。而当N-SH2与磷酸化酪氨酸残基配体特异性结合时，PTP结构域重新暴露，SHP-2恢复活性。据最新研究表明，SHP-2还能在体内形成二聚体，同样也可导致SHP-2失活。
SHP-2主要通过调节ERK/MAPK、JAK-STAT、PI3K/AKT、Hippo、Wnt/β-catenin等信号通路发挥功能，以此维持生物体发育和体内动态平衡。具体研究表明，SHP-2通过直接与酪氨酸激酶受体(receptor tyrosine kinase,RTKs)或scaffold结合，参与激活ERK/MAPK通路。除此之外，活化的SHP-2还能招募GRB2/SOS，间接促进RAS信号通路的激活。此外，SHP-2还参与抑制免疫反应的信号传导，如SHP-2与SHP-1能够结合并激活免疫抑制受体(如PD-1)，阻断T细胞激活。
作为一类重要的细胞信号因子，SHP-2突变与多种疾病密切相关。研究发现：在神经母细胞瘤、AML(4％)、乳腺癌、NSCLC(10％)、肺腺癌(30％)、食道癌、头颈部肿瘤、黑色素瘤和胃癌中，发现存在SHP-2突变。
SHP-2的突变位点多发生在N-SH2、PTP活性区域，解除了N-CH2/PTP结构域的相互抑制，产生高活性的SHP-2，如Cys459Ser mutant、E76K mutant等突变均会影响SHP-2活性。有研究表明，高活性的SHP-2与炎症、肝硬化、幽门螺旋杆菌所分泌的毒素CagA等密切相关，能够导致肿瘤的再生与发展，相当于原癌基因。随着对SHP-2认识的不断深入，SHP-2已经作为肿瘤治疗靶点进行药物的开发。
目前已有多个SHP-2的变构抑制剂进入临床研究阶段，如Novartis公司开发的TNO-155，Revolution Medicine公司开发的RMC-4630，以及北京加科思的JAB-3068都已经进入临床I期研究阶段。但还没有一款开发上市的SHP-2抑制剂用于制备治疗努南氏症候群、豹皮症候群、白血病、神经母细胞瘤、黑色素瘤、乳腺癌、食道癌、头颈部肿瘤、肺癌及其结肠癌。因此迫切需要开发一类成药性好的SHP-2抑制剂药物。
发明内容
本发明的目的在于提供一种通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其中通式(I)所示的化合物结构如下：
其中：
W选自CR4或N；
Q选自CR5或N；
L1选自键、氧、硫、亚烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基或-NRaa-；
L2选自键、氧或硫；
环A选自环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，任选进一步被选自氘、烷基、卤代烷基、卤素、氨基、氧代基、硝基、氰基、羟基、烯基、炔基、烷氧基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH2)n1-、-(CH2)n1Raa、-(CH2)n1ORaa、-(CH2)n1SRaa、-(CH2)n1C(O)Raa、-(CH2)n1C(O)ORaa、-(CH2)n1S(O)m1Raa、-(CH2)n1NRaaRbb、-(CH2)n1C(O)NRaaRbb、-(CH2)n1NRaaC(O)Rbb和-(CH2)n1NRaaS(O)m1Rbb中的一个或多个取代基所取代；
环B选自环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，任选进一步被选自氘、烷基、卤代烷基、卤素、氨基、氧代基、硝基、氰基、羟基、烯基、炔基、烷氧基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH2)n1-、-(CH2)n1Raa、-(CH2)n1ORaa、-(CH2)n1SRaa、-(CH2)n1C(O)Raa、-(CH2)n1C(O)ORaa、-(CH2)n1S(O)m1Raa、-(CH2)n1NRaaRbb、-(CH2)n1C(O)NRaaRbb、-(CH2)n1NRaaC(O)Rbb和-(CH2)n1NRaaS(O)m1Rbb中的一个或多个取代基所取代；
R1选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟烷基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、氧代杂环基、硫代杂环基、芳基、杂芳基、-(CH2)n1Raa、-(CH2)n1ORaa、-NRaaC(O)(CH2)n1ORaa、-NRaaC(＝S)(CH2)n1ORbb、-(CH2)n1SRaa、-(CH2)n1C(O)Raa、-(CH2)n1C(O)ORaa、-(CH2)n1S(O)m1Raa、-(CH2)n1NRaaRbb、-(CH2)n1C(O)NRaaRbb、-N＝S＝O(RaaRbb)、-P(O)RaaRbb、-(CH2)n1NRaaC(O)Rbb或-(CH2)n1NRaaS(O)m1Rbb，其中所述的烷基、氘代烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、氧代基、氨基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，任选进一步被氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R2选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH2)n1Raa、-(CH2)n1ORaa、-(CH2)n1SRaa、-(CH2)n1C(O)Raa、-(CH2)n1C(O)ORaa、-(CH2)n1S(O)m1Raa、-(CH2)n1NRaaRbb、-(CRaaRbb)n1NRccRdd、-(CH2)n1C(O)NRaaRbb、-(CH2)n1C(O)NHRaa、-(CH2)n1NRaaC(O)Rbb或-(CH2)n1NRaaS(O)m1Rbb；
或，相同碳原子或者不相同碳原子上的两个R2链接形成一个环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，任选进一步被选自氘、取代或未取代的烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的卤代烷基、卤素、取代或未取代的氨基、氧代基、硫代基、硝基、氰基、羟基、酯基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的卤代烷氧基、取代或未取代的羟烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、-(CH2)n1Raa、-(CH2)n1ORaa、-(CH2)n1SRaa、-(CH2)n1C(O)Raa、-(CH2)n1C(O)ORaa、-(CH2)n1S(O)m1Raa、-(CH2)n1NRaaRbb、-(CRaaRbb)n1NRccRdd、-(CH2)n1C(O)NRaaRbb、-(CH2)n1C(O)NHRaa、-(CH2)n1NRaaC(O)Rbb和-(CH2)n1NRaaS(O)m1Rbb中的一个或多个取代基所取代；
R3选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH2)n1Raa、-(CH2)n1ORaa、-(CH2)n1SRaa、-(CH2)n1C(O)Raa、-(CH2)n1C(O)ORaa、-(CH2)n1S(O)m1Raa、-(CH2)n1NRaaRbb、-(CRaaRbb)n1NRccRdd、-(CH2)n1C(O)NRaaRbb、-(CH2)n1C(O)NHRaa、-(CH2)n1NRaaC(O)Rbb或-(CH2)n1NRaaS(O)m1Rbb，其中所述的烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、氨基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，任选进一步被氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
或，相同碳原子或者不相同碳原子上的两个R3链接形成一个环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，任选进一步被选自氘、取代或未取代的烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的卤代烷基、卤素、取代或未取代的氨基、氧代基、硫代基、硝基、氰基、羟基、酯基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的卤代烷氧基、取代或未取代的羟烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、-(CH2)n1Raa、-(CH2)n1ORaa、-(CH2)n1SRaa、-(CH2)n1C(O)Raa、-(CH2)n1C(O)ORaa、-(CH2)n1S(O)m1Raa、-(CH2)n1NRaaRbb、-(CRaaRbb)n1NRccRdd、-(CH2)n1C(O)NRaaRbb、-(CH2)n1C(O)NHRaa、-(CH2)n1NRaaC(O)Rbb和-(CH2)n1NRaaS(O)m1Rbb中的一个或多个取代基所取代；
R4和R5相同或不同，各自独立的选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH2)n1Raa、-(CH2)n1ORaa、-(CH2)n1SRaa、-(CH2)n1C(O)Raa、-(CH2)n1C(O)ORaa、-(CH2)n1S(O)m1Raa、-(CH2)n1NRaaRbb、-(CH2)n1C(O)NRaaRbb、-(CH2)n1C(O)NHRaa、-(CH2)n1NRaaC(O)Rbb或-(CH2)n1NRaaS(O)m1Rbb；
Raa、Rbb、Rcc和Rdd相同或不同，且各自独立地选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氰基、硝基、羟基、氨基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，任选进一步被选自氘、取代或未取代的烷基、卤素、羟基、取代或未取代的氨基、氧代基、硝基、氰基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的羟烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
x为0、1、2、3、4或5；
y为0、1、2、3、4或5；
m1为0、1或2；且
n1为0、1、2、3、4或5。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(II)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
L1选自键、氧、烯基、炔基、杂环基或-NRaa-；
L2选自键或硫；
环A选自芳基或杂芳基；
环B选自环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；
R1选自氢、卤素、烷基、羟烷基、杂环基、杂芳基、羟烷基或-(CH2)n1ORaa，其中所述的烷基、羟烷基、杂环基和杂芳基，任选进一步被氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R2选自氢、卤素、羟烷基、氨基、氰基、烷基、环烷基、杂环基、-(CH2)n1C(O)ORaa或-(CH2)n1C(O)NRaaRbb；
R3选自氢、氨基、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH2)n1NRaaRbb或-(CRaaRbb)n1NRccRdd，其中所述的氨基、烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，任选进一步被氢、卤素、羟基、烷基和氨基中的一个或多个取代基所取代；
R5选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；
Raa、Rbb、Rcc和Rdd相同或不同，且各自独立地选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氰基、硝基、羟基、氨基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；
x为0、1、2、3、4或5；
y为0、1、2、3、4或5；
m1为0、1或2；且
n1为0、1、2、3、4或5。
在本发明的一个优选实施例方案中，通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(III)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
L2选自键或硫；
环A选自芳基或杂芳基；
环B选自杂环基、芳基或杂芳基；
R1选自氢、烷基、羟烷基、杂环基、杂芳基或-(CH2)n1ORaa；
R2选自氢、卤素、羟烷基、氨基、氰基、烷基、环烷基、杂环基、-(CH2)n1C(O)ORaa或-(CH2)n1C(O)NRaaRbb；
R3选自氢、氨基、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH2)n1NRaaRbb或-(CRaaRbb)n1NRccRdd，其中所述的氨基、烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，任选进一步氢、卤素、羟基、烷基和氨基中的一个或多个取代基所取代；
R4选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；
R5选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；
Raa、Rbb、Rcc和Rdd相同或不同，且各自独立地选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氰基、硝基、羟基、氨基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；
x为0、1、2、3、4或5；
y为0、1、2、3、4或5；
m1为0、1或2；且
n1为0、1、2、3、4或5。
在本发明的一个优选实施例方案中，通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(IV)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
L1选自键、氧、烯基、炔基、杂环基或-NRaa-；
L2选自键或硫；
环A选自芳基或杂芳基；
环B选自环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；
R1选自氢、烷基、羟烷基、杂环基、杂芳基或-(CH2)n1ORaa；
R2选自氢、卤素、羟烷基、氨基、氰基、烷基、环烷基、杂环基、-(CH2)n1C(O)ORaa或-(CH2)n1C(O)NRaaRbb；
R3选自氢、氨基、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH2)n1NRaaRbb或-(CRaaRbb)n1NRccRdd，其中所述的氨基、烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，任选进一步氢、卤素、羟基、烷基和氨基中的一个或多个取代基所取代；
R4选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；
Raa、Rbb、Rcc和Rdd相同或不同，且各自独立地选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氰基、硝基、羟基、氨基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；
x为0、1、2、3、4或5；
y为0、1、2、3、4或5；
m1为0、1或2；且
n1为0、1、2、3、4或5。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(V)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
环A、环B、L1、R2、R3、x和y如通式(II)所述。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(VI)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
环A、环B、L1、R2、R3、x和y如通式(II)所述。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(VII)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
n为0、1、2或3的整数；
环A、环B、L2、R2、R3、x和y如通式(II)所述。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(IIA)和(IIB)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
环A、环B、L1、R1～R3、R5、x和y如通式(II)所述。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(IIIA)和(IIIB)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
m为0、1、2或3的整数；
R6和R7相同或不同，各自独立的选自氢、氘、烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、羟烷基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH2)n1Raa、-(CH2)n1ORaa、-(CH2)n1SRaa、-(CH2)n1C(O)Raa、-(CH2)n1C(O)ORaa、-(CH2)n1NRaaRbb、-(CRaaRbb)n1NRccRdd、-(CH2)n1C(O)NRaaRbb和-(CH2)n1NRaaC(O)Rbb；
或者，R6和R7链接形成一个环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；其中所述的环烷基、杂环基、芳基或杂芳基进一步被自氘、烷基、环烷基、卤代烷基、卤素、氨基、氧代基、硫代基、硝基、氰基、羟基、烯基、炔基、烷氧基、卤代烷氧基、羟烷基、杂环基、芳基或杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
环A、R2、R4、Raa、Rbb、Rcc、Rdd和x如通式(III)所述。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(IVA)和(IVB)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
环A、环B、R2、R3、x和y如通式(IV)所述。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(VA)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
环A、R2、R3、x和y如通式(II)所述。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(VIII)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
L2选自键或硫；
环A选自C6-12芳基或5-12元杂芳基；
R1选自氢、卤素、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基或5-12元杂芳基，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基或5-12元杂芳基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R2选自氢、卤素、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基、-(CH2)n1C(O)ORaa或-(CH2)n1C(O)NRaaRbb，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基和3-12元杂环基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R3选自氢、氨基、卤素、氧代基、羟基、C1-6烷基或C3-8环烷基；
R5选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基或C3-8环烷基；
R8和R9相同或不同，各自独立的选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基或5-12元杂芳基；
或，R8和R9连接形成一个C3-12环烷基或3-12元杂环基，其中所述的C3-12环烷基和3-12元杂环基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
n1为0、1、2、3、4或5的整数；
x为0、1、2、3、4或5的整数；且
y为0、1、2、3、4或5的整数。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(IX)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
M选自CR11或N；
L2选自键或硫；
环C选自C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-10芳基或5-12元杂芳基；
R1选自氢、卤素、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基或5-12元杂芳基，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基或5-12元杂芳基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R5选自氢、氨基或C1-6烷基；
R10选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基或5-12元杂芳基；
R11选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基或5-12元杂芳基；
R12选自氢、卤素、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基或3-12元杂环基，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基和3-12元杂环基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R13选自氢、卤素、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基或3-12元杂环基，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基和3-12元杂环基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
z为0、1、2或3的整数。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(X)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
环A选自C6-10芳基或5-12元杂芳基；
R1选自氢、卤素、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基或5-12元杂芳基，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基或5-12元杂芳基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R2选自氢、卤素、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基、-(CH2)n1C(O)ORaa或-(CH2)n1C(O)NRaaRbb，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基和3-12元杂环基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R5选自氢、氨基或C1-6烷基；
R14选自氢、卤素、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基或3-12元杂环基，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基和3-12元杂环基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；且
x为0、1、2、3、4或5的整数。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其为通式(XI)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐：
其中：
环A选自C6-10芳基或5-12元杂芳基；
R1选自氢、卤素、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基或5-12元杂芳基，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基或5-12元杂芳基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R2选自氢、卤素、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基、-(CH2)n1C(O)ORaa或-(CH2)n1C(O)NRaaRbb，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基和3-12元杂环基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R5选自氨基或C1-6烷基；
R15和R16相同或不同，各自独立的选自氢、卤素、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基或3-12元杂环基，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基和3-12元杂环基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；且
x为0、1、2、3、4或5的整数。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，其具体结构如通式(X-A)所示：
其中：
R1、R5和R14如通式(X)所述。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，其具体结构如通式(XII)所示：
其中：
环C选自C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-10芳基或5-12元杂芳基，优选环丙基、苯基、吡啶基、吡唑基、咪唑基、噁唑基和噻唑基；
R1选自氢、卤素、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基或5-12元杂芳基，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、3-12元杂环基或5-12元杂芳基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
优选氢、卤素、C1-3烷基、C1-3羟烷基或C3-6环烷基，其中所述的C1-3烷基、C1-3羟烷基或C3-6环烷基，任选的进一步被氢、卤素或羟基中的一个或多个所取代；
更优选氢、氟、氯、溴、甲基、羟乙基、羟基取代的环丙基；
R5选自氢、氨基或C1-6烷基，优选氢、氨基或甲基；
R10选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基或5-12元杂芳基；
优选氢、卤素、C1-3烷基或C3-6环烷基；
更优选氢、氯或甲基；
R12选自氢、卤素、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基或3-12元杂环基，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基和3-12元杂环基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
优选卤素、C1-3烷基或C3-6环烷基；
更优选氟、氯、环丙基或甲基；
R13选自氢、卤素、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基或3-12元杂环基，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基和3-12元杂环基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
优选氢、氟、氯、氨基、甲基、环丙基、吡咯烷基、氮杂环丁烷基、氟取代的氮杂环丁烷基、氮杂环丁烷酮基、吗啡啉基或吡咯烷酮基；
z为0、1、2或3；
当R5为氨基或氢，R12为氯，R13为氨基、二甲氨基、氟或氯时，R1不为氢。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，其具体结构如通式(XII-A)所示：
其中：
R1、R5和R12～R13如通式(XII)所述。
在本发明的一个优选实施例方案中，所述的通式(I)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于，其具体结构如通式(XII-B)所示：
其中：
E选自O、S或NR15；
R14选自氢、卤素或C1-6烷基；
R15选自氢或C1-6烷基；
R1、R5和R12～R13如通式(XII)所述。
在本发明的一个优选实施例方案中，任意所述的通式所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于：
环A选自如下基团：
更优选以下基团：
在本发明的一个优选实施例方案中，任意所述的通式所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于：
环B选自如下基团：
在本发明的一个优选实施例方案中，任意所述的通式所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其特征在于：
环C选自如下基团：
在本发明的一个优选实施例方案中，任意所述的通式、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，
R1选自氢、卤素、C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6羟烷基、3-8元杂环基、5-8元杂芳基或-(CH2)n1ORaa，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基、C1-6羟烷基、3-8元杂环基和5-8元杂芳基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R2选自氢、卤素、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、-(CH2)n1C(O)ORaa或-(CH2)n1C(O)NRaaRbb，其中所述的C1-6烷基、C3-8环烷基和3-8元杂环基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、氧代基、C1-6烷基、C1-6氘代烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C1-6卤代烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-12元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R3选自氢、氨基、C1-6烷基、C3-8环烷基、3-8元杂环基、5-12元杂芳基、-(CH2)n1NRaaRbb或-(CRaaRbb)n1NRccRdd；
R4选自氢、卤素、氨基、C1-6烷基或C1-6羟烷基；
R5选自氢、C1-6烷基或氨基；
R14选自氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、3-8元杂环基或5-12元杂芳基；
R15和R16相同或不同，且各自独立地选自氢或C1-6烷基；
Raa和Rbb相同或不同，且各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6卤代烷基或C1-6烷氧基；
Rcc和Rdd相同或不同，且各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6卤代烷基或C1-6烷氧基。
在本发明的一个优选实施例方案中，任意所述的通式、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，
R1选自氢、卤素、C1-3烷基、C3-6环烷基、C1-3羟烷基、C1-3烷氧基、3-6元杂环基或5-6元杂芳基，其中所述的C1-3烷基、C1-3羟烷基、C1-3烷氧基、C3-6环烷基、3-6元杂环基和5-6元杂芳基，任选进一步被氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、氧代基、C1-3烷基、C1-3氘代烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3羟烷基、C1-3卤代烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-6环烷基、3-16元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R5选自氢、氨基或C1-3烷基；
优选地，R1和R5均不为氢；
R12或R13独立地选自氢、卤素、氨基、C3-6环烷基氨基、氰基、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C3-6环烷基或含1-2个氮原子或氧原子的3-6元杂环基，任选进一步被氘、卤素、氨基、羟基、氰基、氧代基、C1-3烷基、C1-3氘代烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3羟烷基、C1-3卤代烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-6环烷基、3-6元杂环基、C6-12芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；优选地，所述杂环基选自
在本发明的一个优选实施例方案中，任意所述的通式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，选自如下化合物：
/>
/>
/>
/>
本发明还涉及一种制备所述的通式(XII)所示的化合物或其立体异构体及其药学上可接受盐的方法，包含以下步骤：
通式(XII-a)发生取代反应，得到通式(XII)所示化合物或其立体异构体及其药学上可接受盐。
进一步地，包含以下步骤：
通式(XII-b)脱保护，得到通式(XII-a)所示化合物或其立体异构体及其药学上可接受盐；
其中：
Pg为氨基保护基，选自叔丁基亚磺酰基、苄氧羰基、叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、苄基、对甲氧基苄基、烯丙氧羰基、三苯甲基或邻苯二甲酰基；优选叔丁基亚磺酰基。
进一步地，包含以下步骤：
通式(XII-c)与通式(XII-d)反应，得到通式(XII-b)所示化合物或其立体异构体及其药学上可接受盐；
其中：
X选自卤素；优选氟、氯、溴或碘；更优选氯。
本发明还涉及一种制备通式(XII)所示的化合物或其立体异构体及其药学上可接受盐的方法，包含以下步骤：
本发明还涉及一种制备通式(XII-A)所示的化合物或其立体异构体及其药学上可接受盐的方法，包含以下步骤：
本发明还涉及一种制备通式(XII-A)所示的化合物或其立体异构体及其药学上可接受盐的方法，进一步包含以下步骤：
其中：
X1选自卤素；优选氟、氯、溴或碘；更优选碘；
X2选自卤素；优选氟、氯、溴或碘；更优选氯；
X3选自卤素；优选氟、氯、溴或碘；更优选溴。
本发明进一步涉及任一所示的通式(I)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或所述的药物组合物在制备SHP-2抑制剂药物中的应用。
本发明还涉及一种治疗预防和/或治疗预制备治疗由SHP-2抑制剂介导的病症的方法，其包括向患者施用治疗有效剂量的通式(I)所示的化合物其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物。
在一些实施例中，本发明的化合物和组合物可用于治疗在制备治疗努南氏症候群、豹皮症候群、白血病、神经母细胞瘤、黑色素瘤、乳腺癌、食道癌、头颈部肿瘤、胃癌、肺癌及其结肠癌等疾病或病症中的用途。
本发明的化合物和组合物可用于治疗在制备治疗努南氏症候群、豹皮症候群、白血病、神经母细胞瘤、黑色素瘤、乳腺癌、食道癌、头颈部肿瘤、肺癌及其结肠癌等疾病或病症中的方法。
在一些实施例中，本发明提供一种治疗癌症病症的方法，其包含将本发明的化合物或组合物给予患有癌症病症的患者。
在一些实施例中，由本发明的化合物或组合物治疗的癌症为努南氏症候群、豹皮症候群、白血病、神经母细胞瘤、黑色素瘤、乳腺癌、食道癌、头颈部肿瘤、胃癌、肺癌及其结肠癌；优选非小细胞肺癌、食管癌和头颈部肿瘤，更进一步优选方案为：白血病优选AML，肺癌优选NSCLC。
附图说明
图1为雄性小鼠在给药后16天内的体重变化率
图2为雄性小鼠在给药后16天内的体重变化
图3为雌性小鼠在给药后16天内的体重变化率
图4为雌性小鼠在给药后16天内的体重变化
发明的详细说明
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至8个碳原子的烷基，更优选1至6个碳原子的烷基，最更优选1至3个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基，本发明优选甲基、乙基、异丙基、叔丁基、卤代烷基、氘代烷基、烷氧基取代的烷基和羟基取代的烷基。
术语“亚烷基”是指烷基的一个氢原子进一步被取代，例如：“亚甲基”指-CH2-、“亚乙基”指-(CH2)2-、“亚丙基”指-(CH2)3-、“亚丁基”指-(CH2)4-等。术语“烯基”指由至少由两个碳原子和至少一个碳-碳双键组成的如上定义的烷基，例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基等。烯基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基。
术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，更优选包含3至8个碳原子，最优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基，优选环丙基、环丁基、环己基、环戊基和环庚基，更优选环丙基、环丁基和环戊基。
术语“螺环烷基”指5至20元的单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：
也包含单螺环烷基与杂环烷基共用螺原子的螺环烷基，非限制性实例包括：
术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为4元/4元、5元/5元或5元/6元双环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：
术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：
所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧、硼、磷、S(O)m(其中m是整数0至2)或P(O)n(其中n是整数0至2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个环原子，其中1～4个是杂原子；更优选包含3至8个环原子；最优选包含3至8个环原子。单环杂环基的非限制性实例包括氧杂环丁基、氮杂环庚烷基、吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基、吡喃基等，优选氧杂环丁基、氮杂环庚烷基、四氢呋喃基、吡唑烷基、吗啉基、哌嗪基和吡喃基。更优选氮杂环庚烷基、哌嗪基、四氢哌啶和吡咯烷基。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基；其中涉及到的螺环、稠环和桥环的杂环基任选与其他基团通过单键相连接，或者通过环上的任意两个或者两个以上的原子与其他环烷基、杂环基、芳基和杂芳基进一步并环连接。
术语“螺杂环基”指3至20元的单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为氮、氧、硼、磷、S(O)m(其中m是整数0至2)或P(O)n(其中n是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为3元/5元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：
等。
术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为3元/5元、4元/5元或5元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：
等。
术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：
所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：
等。
杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。更优选苯基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，其非限制性实例包括：
等。
芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元，更优选为5元或6元，例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、吡咯基、三唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、噁二唑、吡嗪基等，优选为噁唑基、噁二唑、四氮唑、三氮唑基、噻吩基、咪唑基、吡啶基、吡唑基、嘧啶基或噻唑基；更有选噁唑基、噁二唑、四氮唑、三氮唑基、噻吩基、吡啶基、噻唑基和嘧啶基。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：
杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
术语“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(非取代的环烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
“卤代烷基”指被一个或多个卤素取代的烷基，其中烷基如上所定义。
“卤代烷氧基”指被一个或多个卤素取代的烷氧基，其中烷氧基如上所定义。
“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基如上所定义。
“烯基”指链烯基，又称烯烃基，其中所述的烯基可以进一步被其他相关基团取代，例如：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
“炔基”指(CH≡C-或-C≡C-)，其中所述的炔基可以进一步被其他相关基团取代，例如：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
“羟基”指-OH基团。
“卤素”指氟、氯、溴或碘。
“氨基”指-NH2。
“氰基”指-CN。
“硝基”指-NO2。
“羧基”指-C(O)OH。
“THF”指四氢呋喃。
“EtOAc”指乙酸乙酯。
“MeOH”指甲醇。
“DMF”指N、N-二甲基甲酰胺。
“DIPEA”指二异丙基乙胺。
“TFA”指三氟乙酸。
“MeCN”指乙晴。
“DMA”指N,N-二甲基乙酰胺。
“Et2O”指乙醚。
“DCE”指1,2二氯乙烷。
“DIPEA”指N，N-二异丙基乙胺。
“NBS”指N-溴代琥珀酰亚胺。
“NIS”指N-碘代丁二酰亚胺。
“Cbz-Cl”指氯甲酸苄酯。
“Pd2(dba)3”指三(二亚苄基丙酮)二钯。
“Dppf”指1,1’-双二苯基膦二茂铁。
“HATU”指2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯。
“KHMDS”指六甲基二硅基胺基钾。
“LiHMDS”指双三甲基硅基胺基锂。
“MeLi”指甲基锂。
“n-BuLi”指正丁基锂。
“NaBH(OAc)3”指三乙酰氧基硼氢化钠。
“X选自A、B、或C”、“X选自A、B和C”、“X为A、B或C”、“X为A、B和C”等不同用语均表达了相同的意义，即表示X可以是A、B、C中的任意一种或几种。
本发明所述的氢原子均可被其同位素氘所取代，本发明涉及的实施例化合物中的任一氢原子也均可被氘原子取代。
“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
“可药用盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。
具体实施方式
以下结合实施例进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。
实施例
本发明的化合物结构是通过核磁共振(NMR)或/和液质联用色谱(LC-MS)来确定的。NMR化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)，氘代甲醇(CD3OD)和氘代氯仿(CDCl3)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
液质联用色谱LC-MS的测定用Agilent 1200Infinity Series质谱仪。HPLC的测定使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(Sunfire C18 150×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(Gimini C18 150×4.6mm色谱柱)。
薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，TLC采用的规格是0.15mm～0.20mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
本发明实施例中的起始原料是已知的并且可以在市场上买到，或者可以采用或按照本领域已知的方法来合成。
在无特殊说明的情况下，本发明的所有反应均在连续的磁力搅拌下，在干燥氮气或氩气氛下进行，溶剂为干燥溶剂，反应温度单位为摄氏度。
实施例1
(3-(4-(氨基甲基)苯基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
第一步：3-羟基-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯的制备
将1,2-丙二胺(7.4g，0.10mol)和丙酮二羧酸二乙酯(17.4g，0.10mol)于150mL乙醇中回流搅拌24h，浓缩至干，柱层析(CH2Cl2/MeOH＝10：1)纯化得到目标产物3-羟基-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(5.3g，产率29％)。
MS m/z(ESI):183.1[M+H]+.
第二步：6-溴-3-羟基-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯的制备
将3-羟基-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(5.3g，29.09mmol)溶于100mL DMF中，冰水浴冷却，加入NBS(5.4g，30.56mmol)，搅拌30min，升至室温搅拌2h。加水，乙酸乙酯提取，盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得到产物6-溴-3-羟基-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(5.5g，产率72％)。
MS m/z(ESI):261.0[M+H]+,262.9[M+2+H]+.
第三步：6-(2,3-二氯苯基)-3-羟基-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯的制备
6-溴-3-羟基-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(2.5g，9.58mmol)，2,3-二氯苯硼酸(2.7g，14.15mmol)，Pd(dppf)Cl2(690mg，0.94mmol)和碳酸钾(2.6g，18.81mmol)溶于无水二氧六环(50mL)/水(10mL)中，氮气置换，加热到80℃搅拌过夜。冷却至室温，加水，用二氯甲烷提取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相得到粗品，柱层析纯化得到产物6-(2,3-二氯苯基)-3-羟基-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(2.0g，产率64％)。
MS m/z(ESI):327.0[M+H]+,329.0[M+2+H]+.
第四步：3-氯-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯的制备
将6-(2,3-二氯苯基)-3-羟基-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(2.0g，6.11mmol)和三氯氧磷(10mL)于120℃搅拌过夜。冷至室温，滴加冰水，二氯甲烷提取。无水硫酸钠干燥，浓缩至干得到粗品，柱层析纯化得到产物3-氯-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(1.2g,产率57％)。
MS m/z(ESI):345.0[M+H]+,347.0[M+2+H]+.
第五步：3-(4-(氨基甲基)苯基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯的制备
将3-氯-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(100mg，0.29mmol)、4-(氨基甲基)苯基硼酸盐酸盐(54mg，0.29mmol)、Pd(dppf)Cl2(42mg，0.057mmol)和碳酸钾(80mg，0.58mmol)溶于无水二氧六环(10mL)/水(2mL)中，氮气置换，加热到100℃搅拌过夜。冷至室温，加水，二氯甲烷提取。无水硫酸钠干燥，浓缩至干得到粗品，柱层析纯化得到产物3-(4-(氨基甲基)苯基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(57mg,产率47％)。
MS m/z(ESI):416.0[M+H]+,418.0[M+2+H]+.
第六步：(3-(4-(氨基甲基)苯基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
将3-(4-(氨基甲基)苯基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(57mg，0.13mmol)溶于THF(5mL)，冰水浴冷却，滴加2M的硼氢化锂THF溶液(0.14mL，0.28mmol)，搅拌1h，加水，用二氯甲烷萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩至干得到粗品，柱层析得到产物(3-(4-(氨基甲基)苯基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇(20mg,产率39％)。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ:7.76(d,J＝8.0Hz,2H),7.70(d,J＝7.8Hz,1H),7.54(d,J＝8.0Hz,2H),7.47(d,J＝7.8Hz,1H),7.43(d,J＝6.2Hz,1H),4.70(s,2H),3.95(s,2H),2.43(s,3H).
MS m/z(ESI):374.1[M+H]+,376.1[M+2+H]+.
实施例2-20，50-54参考实施例1实验方案制备。
实施例2
(3-(3-(2-氨基丙烷-2-基)苯基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例2的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):402.1[M+H]+,404.1[M+2+H]+.
实施例3
(R)-(3-(3-(1-氨基乙基)苯基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例3的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):388.1[M+H]+,390.1[M+2+H]+.
实施例4
(S)-(3-(3-(1-氨基乙基)苯基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例4的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):388.1[M+H]+,390.1[M+2+H]+.
实施例5
(3-(2-氨基-2,3-二氢-1H-茚-5-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例5的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):400.1[M+H]+,402.1[M+2+H]+.
实施例6
(3-(3-(1-氨基乙基)苯基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例6的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):388.1[M+H]+,340.1[M+2+H]+.
实施例7
(6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基-3-(3-((甲基氨基)甲基)苯基)吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例7的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):388.1[M+H]+,340.1[M+2+H]+.
实施例8
(3-(3-((环丙基氨基)甲基)苯基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例8的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):414.1[M+H]+,416.1[M+2+H]+.
实施例9
(3-(2-氨基-2-甲基-2,3-二氢-1H-茚-5-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
/>
实施例9的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):414.1[M+H]+,416.1[M+2+H]+.
实施例10
(6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基-3-(1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例10的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):400.1[M+H]+,402.1[M+2+H]+.
实施例11
(3-(3-(氨基甲基)苯基)-5-甲基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例11的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):360.1[M+H]+.
实施例12
(3-(3-(氨基甲基)苯基)-6-(6-溴萘-2-基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例12的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):434.1[M+H]+,436.1[M+2+H]+.
实施例13
6-(5-(3-(氨基甲基)苯基)-6-(羟甲基)-3-甲基吡嗪-2-基)-2-萘酸乙酯的制备
/>
实施例13的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):428.1[M+H]+.
实施例14
(3-(3-(氨基甲基)苯基)-5-甲基-6-(喹啉-7-基)吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例14的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):357.1[M+H]+.
实施例15
(3-(3-(氨基甲基)苯基)-6-(苯并[d][1,3]二噁唑-5-基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例15的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):350.1[M+H]+.
实施例16
(3-(3-(氨基甲基)苯基)-6-(3-氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例16的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):340.1[M+H]+,342.1[M+2+H]+.
实施例17
(3-(3-(氨基甲基)苯基)-6-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例17的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):358.1[M+H]+,360.1[M+2+H]+.
实施例18
(3-(3-(氨基甲基)苯基)-6-(2,4-二氟苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例18的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):342.1[M+H]+.
实施例19
(3-(3-(氨基甲基)苯基)-6-(5-氯吡啶-3-基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例19的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):341.1[M+H]+,343.1[M+2+H]+.
实施例20
3-(5-(3-(氨基甲基)苯基)-6-(羟甲基)-3-甲基吡嗪-2-基)-N,N-二甲基苯酰胺的制备
实施例20的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):377.1[M+H]+.
实施例21
(3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
第一步：1-(2-硝基苯基)哌嗪的制备
将邻氟硝基苯(5.0g，35.44mmol)和无水哌嗪(12.2g，0.14mol)溶于30mL乙醇中室温搅拌2h，浓缩至干，加入二氯甲烷(80mL)溶解，水洗，干燥，浓缩至干得油状物，直接用于下步反应。
MS m/z(ESI):208.1[M+H]+.
第二步：2-(哌嗪-1-基)苯胺的制备
将上一步的油状物1-(2-硝基苯基)哌嗪溶于50mL乙醇中，加入10％的Pd/C(200mg)，氢气置换，氢气球下室温反应12h。过滤，乙醇洗涤，浓缩至干得到棕色油状物粗品(7.1g)。
MS m/z(ESI):178.2[M+H]+.
第三步：3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯的制备
将3-氯-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(100mg，0.29mmol)、2-(哌嗪-1-基)苯胺(103mg，0.58mmol)和二异丙基乙胺(1mL)溶于DMF(5mL)中，氮气置换，加热到80℃搅拌过夜。冷却至室温，加水，用二氯甲烷提取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相得到粗品，柱层析纯化得到产物3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(100mg，产率71％)。
MS m/z(ESI):486.1[M+H]+,488.1[M+2+H]+.
第四步：(3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
将3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(100mg，0.21mmol)溶于THF(5mL)，冰水浴冷却，滴加2M的硼氢化锂THF溶液(0.6mL，1.2mmol)，搅拌1h，加水，二氯甲烷提取。无水硫酸钠干燥，浓缩至干得到粗品，柱层析纯化得到产物(3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇(60mg,产率66％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.55(dd,J＝7.9,1.6Hz,1H),7.31(t,J＝7.8Hz,1H),7.28–7.23(m,1H),7.07(d,J＝7.8Hz,1H),7.02–6.93(m,1H),6.78(t,J＝7.5Hz,2H),4.75(s,2H),4.40–3.68(m,3H),3.47(s,4H),3.22–2.99(m,4H),2.33(s,3H).
MS m/z(ESI):444.1[M+H]+,446.1[M+2+H]+.
实施例22-30、55-59参考实施例21实验方案制备。
实施例22
(3-(4-(3-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例22的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):444.1[M+H]+,446.1[M+2+H]+.
实施例23
(3-(4-(2-氨基苯基)-1,4-重氮基庚环-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例23的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):458.1[M+H]+,460.1[M+2+H]+.
实施例24
(3-(4-(2-(环丙基氨基)苯基)哌嗪-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例24的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):484.1[M+H]+,486.1[M+2+H]+.
实施例25
(6-(2,3-二氯苯基)-3-(4-(咪唑并[1,5-a]吡啶-5-基)哌嗪-1-基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例25的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):469.1[M+H]+,471.1[M+2+H]+.
实施例26
(6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基-3-(4-(2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-基)哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例26的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):483.1[M+H]+,485.1[M+2+H]+.
实施例27
(3-(4-(3-(1-氨基乙基)苯基)哌嗪-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例27的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):472.1[M+H]+,474.1[M+2+H]+.
实施例28
(3-(4-(3-(2-氨基丙烷-2-基)苯基)哌嗪-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例28的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):486.1[M+H]+,488.1[M+2+H]+.
实施例29
(3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-5-甲基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例29的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):430.1[M+H]+.
实施例30
(3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-(苯并[d][1,3]二噁唑-5-基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例30的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):420.1[M+H]+.
实施例31
(R)-8-(6-氨基-5-(2,3-二氯苯基)-3-(1,3,4-恶二唑-2-基)吡嗪-2-基)-8-氮杂螺[4.5]癸
-1-胺的制备
第一步：5-氨基-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-羧酸乙酯的制备
将5-氨基-6-溴吡嗪-2-羧酸乙酯(1.0g，4.08mmol)，2,3-二氯苯硼酸(930mg，4.90mmol)和碳酸钾(1.7g,12.24mmol)溶于50ml四氢呋喃和5mL水中，加入Pd(dppf)Cl2(599mg，0.82mmol)，氮气置换。90℃微波反应3h。浓缩除去溶剂，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相得粗品，柱层析纯化得到目标产物5-氨基-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-羧酸乙酯(680mg，产率54％)。
MS m/z(ESI):312.1[M+H]+,314.1[M+2+H]+.
第二步：5-氨基-3-氯-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-羧酸乙酯的制备
将5-氨基-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-羧酸乙酯(650mg，2.09mmol)溶于50mL DMF中，加入NCS(335mg，2.51mmol)，然后加入KOH(234mg，4.18mmol)，室温搅拌3h。加200mL水，搅拌30min，过滤，水洗，烘干得固体粗品。滤液用二氯甲烷提取，无水硫酸钠干燥，浓缩得粗品，一起用柱层析纯化得到产物5-氨基-3-氯-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-羧酸乙酯(650mg，产率90％)。
MS m/z(ESI):346.1[M+H]+,348.1[M+2+H]+.
第三步：(R)-5-氨基-3-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-羧酸乙酯的制备
将5-氨基-3-氯-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-羧酸乙酯(600mg，1.74mmol)，(R)-8-氮杂螺[4.5]癸烷-1-胺(402mg，2.61mmol)和DIPEA(673mg，5.22mmol)，溶解于DMF(20mL)中，加热到80℃反应过夜。冷却至室温，加入水(50mL)，用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相得到粗品，柱层析纯化得到产物(R)-5-氨基-3-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-羧酸乙酯(640mg，产率79％)。
MS m/z(ESI):464.1[M+H]+,466.1[M+2+H]+.
第四步：(R)-5-氨基-3-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-甲酰肼的制备
将(R)-5-氨基-3-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-羧酸乙酯(200mg，0.43mmol)溶于甲醇(30mL)中，室温下滴加水合肼(215mg，4.3mmol)，滴完室温搅拌过夜，加入乙酸乙酯(100mL)，有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩滤液得到产物(R)-5-氨基-3-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-甲酰肼(183mg,产率95％)。
MS m/z(ESI):450.1[M+H]+,452.1[M+2+H]+.
第五步：(R)-8-(6-氨基-5-(2,3-二氯苯基)-3-(1,3,4-恶二唑-2-基)吡嗪-2-基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺的制备
将(R)-5-氨基-3-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡嗪-2-甲酰肼(180mg，0.4mmol)加入原甲酸三乙酯(20mL)中，加热回流24小时，降至室温，加入乙酸乙酯(100mL)，有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩滤液，粗品柱层析纯化得到产物(R)-8-(6-氨基-5-(2,3-二氯苯基)-3-(1,3,4-恶二唑-2-基)吡嗪-2-基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺的制备(35mg,产率19％)。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ：8.05(d,J＝7.2Hz,1H),7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.54(t,J＝7.2Hz,1H),5.54(s,1H),3.24(m,4H),2.55(m,1H),1.78-1.54(m,2H),1.51-1.34(m,6H),1.28-1.14(m,2H).
MS m/z(ESI):460.1[M+H]+,462.1[M+2+H]+.
实施例32-49、60-65参考实施例31实验方案制备。
实施例32
6-(3-氨基哌啶-1-基)-3-(2,3-二氯苯基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例32的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):406.1[M+H]+,408.1[M+2+H]+.
实施例33
N2-(3-氨基-3-甲基环丁基)-5-(2,3-二氯苯基)-N2-甲基-3-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪
-2,6-二胺的制备
实施例33的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):420.1[M+H]+,422.1[M+2+H]+.
实施例34
3-(6-氨基-5-(2,3-二氯苯基)-3-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-氮杂二环[3.1.0]己烷-6-胺的制备
实施例34的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):404.1[M+H]+,406.1[M+2+H]+.
实施例35
2-(6-氨基-5-(2,3-二氯苯基)-3-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-胺的制备
实施例35的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):432.1[M+H]+,434.1[M+2+H]+.
实施例36
3-(2,3-二氯苯基)-6-(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪
-2-胺的制备
实施例36的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):418.1[M+H]+,420.1[M+2+H]+.
实施例37
6-(((2R)-2-氨基环戊基)乙炔基)-3-(2,3-二氯苯基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例37的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):415.1[M+H]+,417.1[M+2+H]+.
实施例38
6-(((3R)-3-氨基环戊基)乙炔基)-3-(2,3-二氯苯基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例38的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):415.1[M+H]+,417.1[M+2+H]+.
实施例39
(3S,4S)-8-(6-氨基-5-(2,3-二氯苯基)-3-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺的制备
实施例39的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):476.1[M+H]+,478.1[M+2+H]+.
实施例40
6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-3-(2,3-二氯苯基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
M实S施m例/z 4(0ES的I):制42备0.方1[法M参+H考]+,实4施22例.1[3M1+实2+验H]方+.案。
实施例41
6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-3-(3,5-二氯苯基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
/>
实施例41的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):420.1[M+H]+,422.1[M+2+H]+.
实施例42
6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-3-(2-氯吡啶-4-基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例42的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):387.1[M+H]+,389.1[M+2+H]+.
实施例43
6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-3-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例43的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):406.1[M+H]+.
实施例44
6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-3-(苯并[d][1,3]二噁唑-4-基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例44的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):396.1[M+H]+.
实施例45
6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)-3-(喹啉-7-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例45的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):403.1[M+H]+.
实施例46
6-(3-氨基-5-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)-2-萘酸乙酯的制备
实施例46的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):474.1[M+H]+.
实施例47
3-(3-氨基-5-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)-N,N-二甲基苯酰胺的制备
实施例47的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):423.1[M+H]+.
实施例48
6-(3-(1-氨基乙基)苯基)-3-(2,3-二氯苯基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例48的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):427.1[M+H]+,429.1[M+2+H]+.
实施例49
6-(2-氨基-2,3-二氢-1H-茚-5-基)-3-(2,3-二氯苯基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例49的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):439.1[M+H]+,441.1[M+2+H]+.
实施例50
(6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(3-(氨基甲基)苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例50的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):388.1[M+H]+,390.1[M+2+H]+.
实施例51
(3-(3-(氨基甲基)苯基)-6-((2,3-二氯苯基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例51的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):406.1[M+H]+,408.1[M+2+H]+.
实施例52
(3-(3-(氨基甲基)苯基)-6-((2,3-二氯吡啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例52的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):407.1[M+H]+,409.1[M+2+H]+.
实施例53
4-((5-(3-(氨基甲基)苯基)-6-(羟甲基)-3-甲基吡嗪-2-基)硫代)-3-氯氰基吡啶的制备
实施例53的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):398.1[M+H]+,400.1[M+2+H]+.
实施例54
(3-(3-(氨基甲基)苯基)-6-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例54的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):458.1[M+H]+,460.1[M+2+H]+.
实施例55
(6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-5-甲基吡嗪-2-基)
甲醇的制备
实施例55的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):458.1[M+H]+,460.1[M+2+H]+.
实施例56
(3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例56的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):528.1[M+H]+,530.1[M+2+H]+.
实施例57
(3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-((2,3-二氯吡啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例57的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):477.1[M+H]+,479.1[M+2+H]+.
实施例58
4-((5-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-(羟甲基)-3-甲基吡嗪-2-基)硫代)-3-氯氰基吡啶的制备
实施例58的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):468.1[M+H]+,470.1[M+2+H]+.
实施例59
(3-(4-(2-氨基苯基)哌嗪-1-基)-6-((2,3-二氯苯基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例59的制备方法参考实施例21实验方案。
MS m/z(ESI):476.1[M+H]+,478.1[M+2+H]+.
实施例60
3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例60的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):434.1[M+H]+,436.1[M+2+H]+.
实施例61
6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-3-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)-5-(1,3,4-噁二唑-2-
基)吡嗪-2-胺的制备
实施例61的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):504.1[M+H]+,506.1[M+2+H]+.
实施例62
6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-3-((2,3-二氯吡啶-4-基)硫代)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例62的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):453.1[M+H]+,455.1[M+2+H]+.
实施例63
4-((3-氨基-5-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)硫代)-3-
氯氰基吡啶的制备
实施例63的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):444.1[M+H]+,446.1[M+2+H]+.
实施例64
6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-3-((2,3-二氯苯基)硫代)-5-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例64的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):452.1[M+H]+,454.1[M+2+H]+.
实施例65
(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-
基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺的制备
实施例65的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):490.1[M+H]+,492.1[M+2+H]+.
实施例66
(R)-(3-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,3-二氯苯基)-4-甲基吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例66的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):420.1[M+H]+,422.1[M+2+H]+.
实施例67
(R)-(4-氨基-3-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例67的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):421.1[M+H]+,423.1[M+2+H]+.
实施例68
(4-氨基-3-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例68的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):381.1[M+H]+,383.1[M+2+H]+.
实施例69
(4-氨基-3-(4-(1-氨基环丙基)哌啶-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例69的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):407.1[M+H]+,409.1[M+2+H]+.
实施例70
(4-氨基-3-(4-(氨基(环丙基)甲基)哌啶-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例70的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):421.1[M+H]+,423.1[M+2+H]+.
实施例71
(4-氨基-3-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例71的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):381.1[M+H]+,383.1[M+2+H]+.
实施例72
(4-氨基-3-(3-(氨基甲基)吡咯烷-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例72的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):367.1[M+H]+,369.1[M+2+H]+.
实施例73
(4-氨基-3-(3-氨基吡咯烷-1-基)-6-(2,3-二氯苯基)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例73的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):353.1[M+H]+,355.1[M+2+H]+.
实施例74
(4-氨基-3-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例74的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):367.1[M+H]+.
实施例75
(4-氨基-3-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-(苯并[d][1,3]二噁唑-5-基)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例75的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):357.1[M+H]+.
实施例76
(4-氨基-3-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-(喹啉-7-基)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例76的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):364.1[M+H]+.
实施例77
乙基7-(4-氨基-5-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-(羟甲基)吡啶-2-基)-2-萘酸酯的制备
实施例77的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):435.1[M+H]+.
实施例78
4-(4-氨基-5-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-(羟甲基)吡啶-2-基)-N,N-二甲基苯酰胺的制备
实施例78的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):384.1[M+H]+.
实施例79
(4-氨基-3-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例79的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):465.1[M+H]+,467.1[M+2+H]+.
实施例80
(4-氨基-3-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-((2,3-二氯吡啶-4-基)硫代)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例80的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):414.1[M+H]+,416.1[M+2+H]+.
实施例81
(4-氨基-6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-2-基)甲醇的制备
实施例81的制备方法参考实施例1实验方案。
MS m/z(ESI):395.1[M+H]+,397.1[M+2+H]+.
实施例82
(R)-(6-氨基-5-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-基)甲醇的制备
第一步：6-氨基-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-羧酸甲酯的制备
将6-氨基-2-氯嘧啶-4-羧酸甲酯(1.0g，5.35mmol)，2,3-二氯苯硼酸(1.2g，6.42mmol)和碳酸钾(2.2g,16.05mmol)溶于30ml四氢呋喃和5mL水中，加入Pd(dppf)Cl2(782mg，1.07mmol)，在氮气条件下，将反应中的空气排出。微波条件90℃反应120分钟。浓缩除去溶剂，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相得粗品，柱层析纯化得到目标产物6-氨基-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-羧酸甲酯(1.1g，产率69％)。
MS m/z(ESI):298.1[M+H]+,300.1[M+2+H]+.
第二步：6-氨基-5-溴-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-羧酸甲酯的制备
将6-氨基-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-羧酸酯(1.0g，3.37mmol)溶于50mL DMF中，加入NBS(719mg，4.04mmol)，然后加入KOH(377mg，6.74mmol)，室温搅拌3h。加200mL水，搅拌30min，过滤，水洗，烘干得固体粗品。滤液用二氯甲烷提取，无水硫酸钠干燥，浓缩所得固体和烘干的固体一起用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相得到粗品，柱层析纯化得到产物甲基6-氨基-5-溴-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-羧酸甲酯(890mg，产率70％)。
MS m/z(ESI):376.1[M+H]+,378.1[M+2+H]+.
第三步：6-氨基-5-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-羧酸甲酯的制备
将6-氨基-5-溴-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-羧酸甲酯(800mg，2.13mmol)，(3S,4S)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺(400mg，2.35mmol)，Pd2(dba)3(394mg，0.43mmol)，XantPhos(295mg，0.51mmol)和碳酸铯(2.1g，6.39mmol)溶解于无水二氧六环(40mL)中，氮气置换，加热到100℃反应过夜。冷却至室温，浓缩除去溶剂，用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相得到粗品，柱层析得到产物6-氨基-5-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-羧酸甲酯(340mg，产率34％)。
MS m/z(ESI):466.1[M+H]+,468.1[M+2+H]+.
第四步：(R)-(6-氨基-5-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-基)甲醇的制备
将6-氨基-5-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-羧酸甲酯(160mg，0.56mmol)和湿钯炭(50mg)加入四氢呋喃(30mL)中，氢气球下室温搅拌2小时，过滤反应液，浓缩滤液得到产物(R)-(6-氨基-5-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-基)甲醇(130mg,产率90％)。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ：8.13(d,J＝7.6Hz,1H),7.89(d,J＝8Hz,1H),7.45(t,J＝7.6Hz,1H),4.24(m,2H),3.54(m,4H),2.48(m,1H),1.87-1.65(m,2H),1.55-1.33(m,6H),1.27-1.20(m,2H).
MS m/z(ESI):422.1[M+H]+,424.1[M+2+H]+.
实施例83-90参考实施例82实验方案制备。
实施例83
(6-氨基-5-(3-氨基哌啶-1-基)-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-基)甲醇的制备
/>
实施例83的制备方法参考实施例82实验方案。
MS m/z(ESI):368.1[M+H]+,370.1[M+2+H]+.
实施例84
(6-氨基-5-(6-氨基-3-氮杂二环[3.1.0]己烷-3-基)-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-基)甲醇的制备
实施例84的制备方法参考实施例82实验方案。
MS m/z(ESI):366.1[M+H]+,368.1[M+2+H]+.
实施例85
(6-氨基-5-(5-氨基六氢环戊二烯并[c]吡咯-2(1H)-基)-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-基)甲醇的制备
实施例85的制备方法参考实施例82实验方案。
MS m/z(ESI):394.1[M+H]+,396.1[M+2+H]+.
实施例86
(6-氨基-2-(2,3-二氯苯基)-5-(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)嘧啶-4-基)甲醇的制备
实施例86的制备方法参考实施例82实验方案。
MS m/z(ESI):380.1[M+H]+,382.1[M+2+H]+.
实施例87
(6-氨基-5-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2-(2,3-二氯苯基)嘧啶-4-基)甲醇的制备
实施例87的制备方法参考实施例82实验方案。
MS m/z(ESI):438.1[M+H]+,440.1[M+2+H]+.
实施例88
(6-氨基-2-((3-氨基-2-氯吡啶-4-基)硫代)-5-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)甲醇的制备
实施例88的制备方法参考实施例82实验方案。
MS m/z(ESI):396.1[M+H]+,398.1[M+2+H]+.
实施例89
4-((4-氨基-5-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-6-(羟甲基)嘧啶-2-基)硫代)-2-氯尼古丁腈的制备
实施例89的制备方法参考实施例82实验方案。
MS m/z(ESI):406.1[M+H]+,408.1[M+2+H]+.
实施例90
(6-氨基-5-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-2-((2,3-二氯苯基)硫代)嘧啶-4-基)甲醇的制备
实施例90的制备方法参考实施例82实验方案。
MS m/z(ESI):414.1[M+H]+,416.1[M+2+H]+.
实施例91
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-
哌啶]-1-胺的制备
第一步：3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯的制备
将3-氯-4-碘吡啶-2-胺(800mg，3.15mmol)，3-巯基丙酸-2-乙基己酯(687mg，3.15mmol)溶于1,4-二氧六环(7mL)，置于微波反应管中，加入DIPEA(813mg，6.3mmol)、醋酸钯(35mg，0.16mmol)以及Xantphos(109mg，0.19mmol)，氮气鼓泡3分钟后，微波加热至100℃反应1小时。待反应液冷却后，将反应液用20mL乙酸乙酯稀释，用硅藻土过滤除去不溶物，滤液旋干后柱层析纯化(15～25％乙酸乙酯/石油醚)，得棕色固体产物(1.03g，产率95％)。
MS m/z(ESI):345.1[M+H]+.
第二步：3-((2-氨基-3-环丙基吡啶-4-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯的制备
将3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯(500mg，1.45mmol)溶于甲苯和水的(甲苯/水＝10mL/1mL)混合溶剂，置于封管中，加入环丙基三氟硼酸钾(280mg，1.89mmol)、正丁基二(1-金刚烷基)膦(52mg，0.145mmol)、醋酸钯(16mg，0.073mmol)以及碳酸铯(1.41g，4.35mmol)，氮气鼓泡3分钟后，加热至100℃反应5小时。待反应液冷却至室温，向反应液中加入20mL饱和NH4Cl溶液，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)；乙酸乙酯层用饱和氯化钠溶液洗涤后，用无水硫酸钠干燥，柱层析(50％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得棕色油状产物(220mg，产率43％)。
MS m/z(ESI):350.1[M+H]+.
第三步：2-氨基-3-环丙基吡啶-4-硫醇酸钾的制备
将3-((2-氨基-3-环丙基吡啶-4-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯(220mg，0.63mmol)溶于10mL乙醇中，加入叔丁醇钾(74mg，0.66mmol)，室温搅拌1小时。将反应液浓缩至干，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):165.1[M-H]-.
第四步：3-((2-氨基-3-环丙基吡啶-4-基)硫代)-6-氯吡嗪-2-胺的制备
将2-氨基-3-环丙基吡啶-4-硫醇酸钾(128mg，0.63mmol)、2-氨基-3-溴-6-氯吡嗪(149mg，0.72mmol)溶于7mL 1,4-二氧六环，置于微波反应管中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(33mg，0.036mmol)、Xantphos(42mg，0.072mmol)以及DIPEA(279mg，2.16mmol)，氮气鼓泡3分钟。将反应液微波加热至110℃反应1小时；待反应液冷却至室温后，用20mL乙酸乙酯稀释，用硅藻土过滤后，滤液旋干，柱层析(50～70％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得棕色固体产物(50mg，产率24％)。
MS m/z(ESI):294.1[M+H]+.
第五步：(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
取(S)-1-(((R)-叔丁基亚硫酰基)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(69mg，0.17mmol)溶于3mL二氯甲烷，加入1mL三氟乙酸，室温下反应1小时。将此反应液浓缩至干，用5mL DMF溶解后，加入碳酸钾(352mg，2.55mmol)、3-((2-氨基-3-环丙基吡啶-4-基)硫代)-6-氯吡嗪-2-胺(50mg，0.17mmol)，氮气保护下加热至100℃反应12小时。待反应液冷却后，加入20mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)；乙酸乙酯层用饱和氯化钠溶液洗涤(20mL×3)，无水硫酸钠干燥后柱层析(75～80％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得油状产物(20mg，产率21％)。
MS m/z(ESI):564.1[M+H]+.
第六步：(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
将(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(20mg，0.035mmol)溶于5mL二氯甲烷，加入1mL 4M HCl的二氧六环溶液，于室温反应1小时。将反应液浓缩至干，用5mL甲醇溶解后，用7M NH3的甲醇溶液调节pH至碱性，将此反应液旋干后柱层析(0～10％MeOH inDCM)，所得粗品用薄层层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10：1)得棕色固体产物(9.0mg，产率56％)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.90(d,J＝5.4Hz,1H),7.61(s,1H),7.40–7.33(m,1H),7.27–7.16(m,3H),6.57(d,J＝5.4Hz,1H),4.28(d,J＝13.6Hz,2H),3.96(s,1H),3.30–3.19(m,2H),3.15(d,J＝15.7Hz,1H),2.81(d,J＝15.7Hz,1H),1.90–1.78(m,2H),1.82–1.70(m,1H),1.58(d,J＝13.5Hz,1H),1.43(d,J＝13.1Hz,1H),1.26–1.15(m,2H),0.94–0.85(m,2H).
MS m/z(ESI):460.1[M+H]+.
实施例92
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氯-3-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.88(d,J＝5.5Hz,1H),7.60(s,1H),7.38–7.30(m,1H),7.25–7.15(m,3H),6.54(d,J＝5.5Hz,1H),4.26(d,J＝13.7Hz,2H),3.95(s,1H),3.28–3.17(m,2H),3.13(d,J＝15.6Hz,1H),2.79(d,J＝15.6Hz,1H),1.88–1.74(m,2H),1.80–1.70(m,1H),1.56(d,J＝13.7Hz,1H),1.43(d,J＝13.1Hz,1H),1.24–1.13(m,2H),0.93–0.83(m,2H).
MS m/z(ESI):479.1[M+H]+，481.1[M+2+H]+.
实施例92参考实施例93实验方案制备。
实施例93
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
第一步：3-((2,3-二氯吡啶-4-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯的制备
将2,3-二氯-4-碘吡啶(1.0g，3.65mmol)，3-巯基丙酸-2-乙基己酯(0.88g，4.03mmol)溶于7mL 1,4-二氧六环，置于微波反应管中，加入DIPEA(0.95g，7.34mmol)、醋酸钯(41mg，0.18mmol)以及Xantphos(127mg，0.22mmol)，氮气鼓泡3分钟后，微波加热至100℃反应1小时。待反应液冷却后，将反应液用20mL乙酸乙酯稀释，用硅藻土过滤除去不溶物，滤液旋干后柱层析(10～15％乙酸乙酯/石油醚)，得棕色油状物(1.29g，产率97％)。
MS m/z(ESI):364.1[M+H]+.
第二步：3-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯的制备
将3-((2,3-二氯吡啶-4-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯(1.29g，3.54mmol)溶于甲苯和水的(甲苯/水＝20mL/2mL)混合溶剂，置于封管中，加入环丙基三氟硼酸钾(624mg，4.25mmol)、正丁基二(1-金刚烷基)膦(95mg，0.267mmol)、醋酸钯(40mg，0.178mmol)以及碳酸铯(3.43g，3.54mmol)，氮气鼓泡3分钟后，加热至100℃反应5小时。待反应液冷却至室温，向反应液中加入20mL饱和NH4Cl溶液，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)；乙酸乙酯层用饱和氯化钠溶液洗涤后，用无水硫酸钠干燥，柱层析(5～8％乙酸乙酯/石油醚)，得黄色油状物(600mg，产率45％)。
MS m/z(ESI):370.1[M+H]+.
第三步：3-氯-2-环丙基吡啶-4-硫醇酸钾的制备
将2-乙基己基3-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)丙酸酯(600mg，1.62mmol)溶于15mL乙醇中，加入叔丁醇钾(190mg，1.70mmol)，室温搅拌1小时。将反应液浓缩至干，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):186.1[M+H]+。
第四步：6-氯-3-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-胺的制备
将3-氯-2-环丙基吡啶-4-硫醇酸钾(120mg，0.54mmol)、2-氨基-3-溴-6-氯吡嗪(112mg，0.54mmol)溶于5mL 1,4-二氧六环，置于微波反应管中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(25mg，0.027mmol)、Xantphos(31mg，0.054mmol)以及DIPEA(209mg，1.62mmol)，氮气鼓泡3分钟。将反应液微波加热至110℃反应1小时；待反应液冷却至室温后，用20mL乙酸乙酯稀释，用硅藻土过滤后，滤液旋干柱层析(10～20％乙酸乙酯/石油醚)，得灰白色固体产物(135mg，产率80％)。
MS m/z(ESI):313.1[M+H]+.
第五步：叔丁基1-羰基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸酯的制备
将1-茚酮(5.14g，38.9mmol)、N,N-双(2-氯乙基)氨基甲酸叔丁酯(9.42g，38.9mmol)溶于100mL DMF中，冰浴下分批加入60％氢化钠(3.89g，97.3mmol)。将反应液转至油浴，氮气保护下加热至60℃反应过夜。待反应液冷却后，向反应液中加入250mL饱和氯化钠溶液，用乙酸乙酯萃取(150mL×2)；乙酸乙酯层用饱和氯化钠溶液洗涤(100mL×3)，无水MgSO4干燥后，柱层析(10～20％乙酸乙酯/石油醚)，得棕色油状物粗品(2.80g，产率23％)。
MS m/z(ESI):202.1[M-Boc+H]+.
第六步：(R,E)-1-((叔丁基亚硫酰基)亚氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯的制备
将钛酸四乙酯(40mL)加热至90℃，加入1-羰基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(2.80g，9.27mmol)、(R)-(+)-叔丁基亚磺酰胺(3.36g，27.8mmol)；氮气保护下90℃反应24小时。待反应完毕后将反应液倒入400mL乙酸乙酯中，搅拌下缓慢加入400mL饱和氯化钠溶液，并于室温搅拌20分钟。用硅藻土将析出的固体过滤，所得滤液分层后将乙酸乙酯层用无水硫酸镁干燥，柱层析(20～30％乙酸乙酯/石油醚)，得棕色油状产物(2.20g，产率59％)。
MS m/z(ESI):405.1[M+H]+.
第七步：(S)-1-(((R)-叔丁基亚硫酰基)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯的制备
将(R,E)-1-((叔丁基亚硫酰基)亚氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(2.20g，5.44mmol)溶于30mL四氢呋喃，置于-78℃，于此温度下分批加入硼氢化钠(308mg，8.16mmol)，氮气保护下令反应液逐渐升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入200mL饱和氯化钠溶液，用乙酸乙酯萃取(100mL×2)，乙酸乙酯层用饱和氯化钠溶液洗涤(100mL)，无水硫酸钠干燥后，柱层析(20～35％乙酸乙酯/石油醚)，得棕色泡沫状固体(1.21g，产率54％)。
MS m/z(ESI):407.1[M+H]+.
第八步：(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
/>
取(S)-1-(((R)-叔丁基亚硫酰基)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(100mg，0.25mmol)溶于3mL二氯甲烷，加入1mL三氟乙酸，室温下反应1小时。将此反应液浓缩至干，用5mL DMF溶解后，加入碳酸钾(517mg，3.75mmol)、6-氯-3-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-胺(78mg，0.25mmol)，氮气保护下加热至100℃反应12小时。待反应液冷却后，加入20mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)；乙酸乙酯层用饱和氯化钠溶液洗涤(20mL×3)，无水硫酸钠干燥后柱层析(50％乙酸乙酯/石油醚)，得油状产物(26mg，产率18％)。
MS m/z(ESI):583.1[M+H]+.
第九步：(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
将(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(26mg，0.044mmol)溶于5mL二氯甲烷，加入1mL 4M HCl的二氧六环溶液，于室温反应1小时。将反应液浓缩至干，用5mL甲醇溶解后，用7M NH3的甲醇溶液调节pH至碱性，将此反应液旋干后柱层析(5～8％MeOH inDCM)，得淡黄色固体产物(12mg，产率57％)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.03(d,J＝5.2Hz,1H),7.67(s,1H),7.44–7.37(m,1H),7.24(dd,J＝6.4,3.9Hz,3H),6.39(d,J＝5.2Hz,1H),4.85(s,2H),4.21–4.13(m,2H),4.07(s,1H),3.23–3.21(m,2H),3.13(d,J＝15.8Hz,1H),2.79(d,J＝15.7Hz,1H),2.57–2.48(m,1H),1.88–1.73(m,2H),1.63–1.56(m,1H),1.50–1.42(m,1H),1.09–1.00(m,4H).
MS m/z(ESI):479.1[M+H]+.
实施例94
(2R)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)螺[二环[3.1.0]己烷
-3,4'-哌啶]-2-胺的制备
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.73–7.67(m,1H),7.65–7.60(m,1H),6.08–6.01(m,1H),4.53–4.41(m,2H),3.63–3.51(m,2H),3.14(p,J＝9.6Hz,1H),2.41–2.33(m,1H),1.56–1.40(m,3H),1.44–1.35(m,1H),1.39–1.19(m,4H),0.89–0.81(m,2H),0.76–0.60(m,2H),0.44–0.28(m,2H).
MS m/z(ESI):424.1[M+H]+.
实施例94参考实施例91实验方案制备。
实施例95
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-溴吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-
哌啶]-1-胺制备
第一步：3-((3-氨基-5-氯吡嗪-2-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯的制备
3-溴-6-氯吡嗪-2-胺(4g,20mmol)，3-巯基丙酸(2-乙基)己酯(5.2g,24mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(916mg,1mmol),4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(1.16g,2mmol)和N，N-二异丙基乙胺(5.12g,40mmol)在二氧六环(35mL)中100℃搅拌18小时。过滤反应液，滤饼用乙酸乙酯(30mL)洗两次，浓缩滤液后柱层析[洗脱剂:石油醚～石油醚/乙酸乙酯(90:10)]纯化得到3-((3-氨基-5-氯吡嗪-2-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯(5.5g,产率82％)棕色油状物。
MS m/z(ESI):146.1[M+H]+，148.1[M+2+H]+.
第二步：3-氨基-5-氯吡嗪-2-硫醇的制备
往2-乙基己基3-((3-氨基-5-氯吡嗪-2-基)硫代)丙酸酯(5.5g,15.9mmol)的乙醇(100mL)溶液中加叔丁醇钾(2.7g,23.9mmol)，加完室温搅拌3小时。旋掉大约50mL乙醇，再把剩下的反应液倒入氯化铵水溶液(100mL)，用乙酸乙酯(100mL)萃取两遍，二氯甲烷(100mL)萃取两遍，浓缩有机相，然后柱层析[洗脱剂:二氯甲烷～二氯甲烷/甲醇(95:5)]纯化得到3-氨基-5-氯吡嗪-2-硫醇(1.8g,产率70％)墨绿色固体。
MS m/z(ESI):162.0[M+H]+，164.0[M+2+H]+.
第三步：3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-6-氯吡嗪-2-胺的制备
3-氨基-5-氯吡嗪-2-硫醇(500mg,3.1mmol)，3-氯-4-碘吡啶-2-胺(789mg,3.1mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(142mg,0.16mmol)，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(179mg,0.31mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.2g,9.3mmol)在二氧六环(10mL)中130℃微波搅拌1小时。浓缩反应液，柱层析[洗脱剂:二氯甲烷～二氯甲烷/甲醇(99:1)]纯化得到粗品1g。用乙醇(5mL)打浆，过滤得到3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-6-氯吡嗪-2-胺(580mg,产率65％)灰色固体。
MS m/z(ESI):288.0[M+H]+，290.0[M+2+H]+.
第四步：N-((S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
往叔-丁基(1S)-1-((叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸酯(150mg,0.37mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液里加三氟乙酸(1mL)，加完室温搅拌2小时。浓缩反应液得到N-((S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺盐酸盐(150mg,产率100％)淡黄色固体。
MS m/z(ESI):307.2[M+H]+.
[α]20 D＝1.773.
第五步：N-((S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
N-((S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺盐酸盐(150mg,0.37mmol)，3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-6-氯吡嗪-2-胺(100mg,0.35mmol)和碳酸钾(335mg,2.43mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中100℃搅拌18小时。浓缩反应液，柱层析[洗脱剂:二氯甲烷～二氯甲烷/甲醇(97:3)]纯化得到N-((S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(100mg,产率52％)紫色固体。
MS m/z(ESI):558.1[M+H]+，560.2[M+2+H]+.
第六步：(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-溴吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
N-((S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(100mg，0.18mmol)，N-溴代琥珀酰亚胺(64mg，0.36mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中室温搅拌18小时后，将反应液浓缩得粗品，柱层析[洗脱剂:二氯甲烷～二氯甲烷/甲醇(95:5)]纯化得到(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-溴吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺(80mg,产率84％)土黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.72-7.64(m,1H),7.36(d,J＝4Hz,1H),7.27-7.16(m,3H),6.58(s,2H),6.33(s,2H),5.80(d,J＝4Hz,1H),3.99(s,1H),3.94-3.83(m,2H),3.17(d,J＝4Hz,1H),3.14-2.98(m,3H),2.77-2.64(m,1H),1.97-1.74(m,2H),1.55(d,J＝12Hz,1H).
MS m/z(ESI):532.0[M+H]+,534.0[M+2+H]+.
实施例96
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚
-2,4'-哌啶]-1-胺制备
第一步：(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-溴吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺(30mg,0.056mmol)，三甲基环三硼氧烷(789mg,3.1mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(4mg,0.0056mmol)，和碳酸钾(15mg,0.11mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中130℃微波搅拌1小时。浓缩反应液，高效液相色谱分离纯化得到(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺(0.7mg,产率3％)灰色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.73-7.62(m,1H),7.35(d,J＝4Hz,1H),7.28-7.16(m,3H),6.57(s,2H),6.32(s,2H),5.78(d,J＝4Hz,1H),3.97(s,1H),3.94-3.81(m,2H),3.15(d,J＝4Hz,1H),3.12-2.95(m,3H),2.75-2.64(m,1H),2.41(s,3H),1.99-1.75(m,2H),1.58(d,J＝12Hz,1H).
MS m/z(ESI):468.1[M+H]+，470.1[M+2+H]+.
实施例97
(S)-1'-(5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
/>
第一步：2-氯-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪的制备
将3-氯-2-环丙基吡啶-4-硫醇酸钾(120mg，0.54mmol)、2-溴-5-氯吡嗪(104mg，0.54mmol)溶于5mL二氧六环，置于微波反应管中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(25mg，0027mmol)、Xantphos(31mg，0.054mmol)以及DIPEA(209mg，1.62mmol)，氮气鼓泡3分钟。将反应液微波加热至110℃反应1小时；待反应液冷却至室温后，用20mL乙酸乙酯稀释，用硅藻土过滤后，滤液旋干柱层析(10～20％乙酸乙酯/石油醚)，得淡黄色油状物(120mg，产率74％)。
MS m/z(ESI):298.0[M+H]+.
第二步：(R)-N-((S)-1'-(5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
取叔丁基(S)-1-(((R)-叔丁基亚硫酰基)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸酯(81mg，0.20mmol)溶于3mL二氯甲烷，加入1mL三氟乙酸，室温下反应1小时。将此反应液浓缩至干，用5mL DMF溶解后，加入碳酸钾(373mg，2.70mmol)、2-氯-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪(55mg，0.18mmol)，氮气保护下加热至100℃反应12小时。待反应液冷却后，加入20mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)；乙酸乙酯层用饱和氯化钠溶液洗涤(20mL×3)，无水硫酸钠干燥后柱层析(50％乙酸乙酯/石油醚)，得油状产物(48mg，产率47％)。
MS m/z(ESI):568.1[M+H]+.
第三步：(S)-1'-(5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
将(R)-N-((S)-1'-(5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(48mg，0.085mmol)溶于5mL二氯甲烷，加入1mL 4M HCl的二氧六环溶液，于室温反应1小时。将反应液浓缩至干，用5mL甲醇溶解后，用7M NH3的甲醇溶液调节pH至碱性，将此反应液旋干后柱层析(0～10％MeOH in DCM)，得淡黄色固体产物(23mg，产率58％)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.36(s,1H),8.30(s,1H),7.98(d,J＝5.3Hz,1H),7.42(d,J＝6.8Hz,1H),7.32–7.21(m,3H),6.43(d,J＝5.3Hz,1H),4.44–4.29(m,2H),4.14(s,1H),3.41–3.30(m,2H),3.19(d,J＝15.9Hz,1H),2.96(d,J＝15.9Hz,1H),2.60–2.49(m,1H),1.90–1.76(m,2H),1.67–1.54(m,2H),1.09–0.99(m,4H).
MS m/z(ESI):464.1[M+H]+.
实施例98
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
第一步：叔-丁基(5-溴-1,3,4-噻二唑-2-基)氨基甲酸酯的制备
将乙基2-氯噻唑-4-羧酸酯(9.0g，46.97mmol)溶于150mL甲醇中，室温搅拌，加入NaBH4(7.1g,分三批加入)，搅拌直至原料消失。然后，将反应液缓慢加入搅动的食盐水中，淬灭反应液，将其中的溶剂蒸出，乙酸乙酯萃取(200mL)萃取三次，合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝3：1)纯化得到无色油状液体目标产物(2-氯噻唑-4-基)甲醇(4.2g，产率60％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.11(s,1H),4.71(s,2H),2.22(s,1H).
MS m/z(ESI):150.0[M+H]+，152.0[M+2+H]+.
第二步：(2-氯噻唑-4-基)甲基甲磺酸酯的制备
将(2-氯噻唑-4-基)甲醇(2.6g，17.4mmol)溶于40mL二氯甲烷中，氮气保护下，冰水浴条件下，滴加甲磺酰氯(1.6mL,20.88mmol,d＝1.48g/mL)，冰水浴条件下搅拌30min。反应结束，将反应液滴加到饱和氯化钠(100mL)中，二氯甲烷(100mL)萃取三次，合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到白色固体目标产物(2-氯噻唑-4-基)甲基甲磺酸酯(3.9g，产率97％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35(s,1H),5.25(s,2H),3.07(s,3H).
第三步：4-((2-氯噻唑-4-基)甲基)哌啶-1,4-二羧酸1-(叔-丁基)-4-乙酯的制备
将哌啶-1,4-二羧酸1-(叔-丁基)-4-乙酯(4.8g，18.59mmol)溶于THF(40mL)中，氮气保护下，冷却到-60℃，滴加二异丙基氨基锂(12.7mL，25.35mmol),滴加完毕，反应液在-60℃到-50℃条件下，搅拌30min。然后滴加(2-氯噻唑-4-基)甲基甲磺酸酯的THF(15mL)溶液。滴加完毕，在-60℃条件下搅拌30min，然后缓慢升温到室温搅拌2小时。反应结束，将反应液滴加到饱和食盐水(150mL)中。乙酸乙酯(100mL)萃取三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩浓缩得到粗品，柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝3：1)纯化得到黄色液体目标产物4-((2-氯噻唑-4-基)甲基)哌啶-1,4-二羧酸1-(叔-丁基)-4-乙酯(3.7g，产率56％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.79(s,1H),4.14(dd,J＝7.1,3.1Hz,2H),3.91–3.85(m,2H),2.92(s,2H),2.86(dd,J＝16.3,13.6Hz,2H),2.10(d,J＝13.5Hz,2H),1.53(s,2H),1.44(s,9H),1.25–1.22(m,3H).
MS m/z(ESI):289[M-100+H]+.
第四步：2-氯-6-羰基-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯的制备
将4-乙基4-((2-氯噻唑-4-基)甲基)哌啶-1,4-二羧酸1-(叔-丁基)-4-乙酯(4.1g，10.6mmol)溶于THF(40mL)中，氮气保护下，冷却到-70℃，滴加二异丙基氨基锂(13.4mL，26.5mmol),滴加完毕，反应液在-70℃条件下，搅拌30min。反应结束，将反应液滴加到饱和食盐水(150mL)中，乙酸乙酯(100mL)萃取三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝3：1)纯化得到黄色固体目标产物叔-丁基2-氯-6-羰基-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸酯(1.2g，产率33％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.15(s,4H),3.05(s,2H),2.06–1.93(m,2H),1.60(d,J＝12.7Hz,2H),1.48(s,9H).
MS m/z(ESI):243[M-100+H]+.
第五步：(R,Z)-6-((叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)亚氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯的制备
将叔-丁基2-氯-6-羰基-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸酯(1.2g，3.5mmol)溶于THF(10mL)中，加入Ti(OEt)4(10mL),氮气保护下，加热到95℃条件下，搅拌10小时。冷却到室温，用乙酸乙酯(200mL)稀释反应液，搅拌条件下，加入水(20mL)，继续搅拌至浑浊，往其中加入无水硫酸钠，至混合物中固体呈沙状。过滤，滤液浓缩得到粗品，柱层析(PE/EA＝5：1)纯化得到黄色固体目标产物(R,Z)-6-((叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)亚氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(1.1g，产率75％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.13(dd,J＝22.7,15.6Hz,4H),2.92(d,J＝2.9Hz,2H),2.05(s,2H),1.57(s,2H),1.48(s,9H),1.29–1.22(m,9H).
MS m/z(ESI):346[M-100+H]+.
第六步：(S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸酯和叔-丁基(S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯的制备
将(R,Z)-6-((叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)亚氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(600mg，1.35mmol)溶于无水THF(10mL)中，置于50mL三口瓶中，氮气保护下，冷却到-70℃，滴加BH3/THF(4.0mL，D＝1M)，滴加完毕，缓慢升温至室温，搅拌10小时。将反应液滴加到水中，用碳酸氢钠饱和溶液条件至pH＝9,乙酸乙酯(100mL)萃取三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，柱层析(PE/EA＝1：1)纯化得到黄色液体目标产物叔-丁基(S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸酯(112mg，产率20％)和黄色液体(S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(56mg，产率9％)。
MS m/z(ESI):414.0[M+H]+；
MS m/z(ESI):448.1[M+H]+，450.1[M+H+2]+.
第七步：(R)-N-((S)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
将(S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(112mg，0.27mmol)溶于无水CH2Cl2(5mL)中，加入三氟乙酸(1.0mL)，室温搅拌2小时，浓缩反应液得到黄色液体粗品(R)-N-((S)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(67mg，产率76％)。
MS m/z(ESI):314.0[M+H]+.
第八步：(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
将(R)-N-((S)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(67mg，0.21mmol)，6-氯-3-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-胺(78mg,0.25mmol)和DIPEA(0.4mL)溶于DMF(2.0mL),加热到110℃，搅拌10小时。将反应液溶于乙酸乙酯(100mL)，水洗(50mL)两次，饱和食盐水(50mL)洗三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，柱层析(EtOAc)纯化得到黄色液体目标产物(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(30mg，产率19％)。
MS m/z(ESI):590.0[M+H]+.
第九步：(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
将(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(30mg，0.05mmol)溶于无水甲醇(3.0mL)中，加入盐酸/1,4-二氧六环(1.0mL)，室温搅拌0.5小时，浓缩反应液得到粗品，溶于水中，用碳酸氢钠饱和溶液调节pH＝10,二氯甲烷(50mL)萃取两次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，制备HPLC纯化得到黄色固体目标产物(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺(3.4mg，产率49％)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.77(s,1H),8.48(s,1H),7.45(d,J＝9.7Hz,2H),4.45(s,1H),3.38(d,J＝61.4Hz,4H),2.91(s,2H),2.22(s,1H),1.92(s,1H),1.71(s,1H),1.52(s,2H),1.33–0.92(m,8H).
MS m/z(ESI):486[M+H]+.
实施例99
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
第一步：(R)-N-((S)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
/>
将(S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(56mg，0.13mmol)溶于无水CH2Cl2(5mL)中，加入三氟乙酸(1.0mL)，室温搅拌2小时，浓缩反应液得到黄色液体粗品(R)-N-((S)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(40mg，产率100％)。
MS m/z(ESI):348.0[M+H]+.
第二步：(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
将(R)-N-((S)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(40mg，0.1mmol)，6-氯-3-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-胺(15mg,0.05mmol)和DIPEA(0.1mL)溶于DMF(0.8mL)，加热到110℃，搅拌10小时。将反应液溶于乙酸乙酯(100mL)，水洗(50mL)两次，饱和食盐水(50mL)三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，柱层析(EtOAc)纯化得到黄色液体目标产物(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(8.2mg，产率26％)。
MS m/z(ESI):624.1[M+H]+.
第三步：(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
将(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(8.2mg，0.01mmol)溶于无水甲醇(2.0mL)中，加入盐酸/二氧六环(0.5mL)，室温搅拌0.5小时，浓缩反应液得到粗品，溶于水中，用碳酸氢钠饱和溶液调节pH＝10,二氯甲烷(50mL)萃取两次，合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，制备HPLC纯化得到黄色固体目标产物(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺(1.5mg，产率22％)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.48(s,1H),7.45(d,J＝10.3Hz,2H),4.71(s,1H),3.41(d,J＝74.5Hz,4H),2.92(s,2H),2.16(d,J＝56.0Hz,2H),1.74(s,1H),1.52(s,2H),1.26(d,J＝15.5Hz,4H),1.03(d,J＝39.0Hz,4H).
MS m/z(ESI):520.1[M+H]+.
实施例100
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚
-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
第一步：2-乙基己基3-((2,3-二氯吡啶-4-基)硫代)丙酸酯的制备
将2,3-二氯-4-碘吡啶(2.0g，7.31mmol)，2-乙基己基3-巯基丙酸酯(1.8g，8.24mmol)，醋酸钯(82mg，0.37mmol)，Xantphos(254mg，0.44mmol)，二异丙基乙胺(1.9g，14.70mmol)于15mL二氧六环,氮气下100℃搅拌5h，冷至室温，加乙酸乙酯，过滤，浓缩至干，柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3：1)纯化得到目标产物2-乙基己基3-((2,3-二氯吡啶-4-基)硫代)丙酸酯(910mg，产率34％)。
MS m/z(ESI):364.1[M+H]+
第二步：2-乙基己基3-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)丙酸酯的制备
2-乙基己基3-((2,3-二氯吡啶-4-基)硫代)丙酸酯(200mg，0.55mmol)，氮杂环丁烷(63mg，1.10mmol)，1,4-二氧六环(5mL),于120℃下微波搅拌3h。浓缩至干，加水，二氯甲烷提取，浓缩至干，柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3：1)得到产物(130mg，产率62％)。
MS m/z(ESI):385.1[M+H]+.
第三步：2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-硫醇的制备
3-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)丙酸(2-乙基己)酯(130mg，0.34mmol)，叔丁醇钾(38mg，0.34mmol)于无水乙醇(5mL)中,室温搅拌1h，浓缩至干得到产物，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):201.0[M+H]+.
第四步：3-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)-6-氯吡嗪-2-胺的制备
2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-硫醇(上一步所得)、3-溴-6-氯吡嗪-2-胺(84mg，0.40mmol)、Pd2(dba)3(15mg，0.016mmol)、Xantphos(20mg，0.035mmol)，二异丙基乙胺(87mg，0.67mmol)加于5mL 1,4-二氧六环中,氮气下100℃搅拌过夜，冷至室温，浓缩至干，柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1：1)纯化得到浅黄色固体(71mg,产率64％)。
MS m/z(ESI):328.0[M+H]+.
第五步：(R)-N-((S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
(S)-1-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(100mg，0.25mmol)溶于二氯甲烷(1mL)，加1mL三氟乙酸，室温搅拌1h，浓缩至干得到油状物，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):307.1[M+H]+.
[α]20 D＝1.773.
第六步：(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
3-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)-6-氯吡嗪-2-胺(71mg，0.22mmol)、(R)-N-((S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(上一步反应所得)、碳酸钾(299mg，2.16mmol)于DMF(5mL)中，氮气下100℃微波搅拌2h，加水，乙酸乙酯提取。无水硫酸钠干燥，浓缩至干得到油状物，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):598.2[M+H]+.
第七步：(S)-1'-(6-氨基-5-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-
基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(上一步反应所得)溶于甲醇(5mL)，加4M HCl/1,4-二氧六环(5mL)室温搅拌1h，浓缩至干，柱层析纯化得到目标产物(S)-1'-(6-氨基-5-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺(8.7mg，收率8％)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.69(d,J＝5.4Hz,1H),7.58(s,1H),7.42–7.32(m,1H),7.28–7.14(m,3H),5.97(d,J＝5.5Hz,1H),4.35–4.16(m,6H),3.96(s,1H),3.28–3.19(m,2H),3.15(d,J＝15.7Hz,1H),2.81(d,J＝15.7Hz,1H),2.32(q,J＝7.5Hz,2H),1.80(dtd,J＝32.3,12.6,4.3Hz,2H),1.58(d,J＝13.4Hz,1H),1.42(d,J＝13.4Hz,1H),1.31(d,J＝16.2Hz,1H).
MS m/z(ESI):494.1[M+H]+.
实施例101
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
第一步：3-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯的制备
将3-((2,3-二氯吡啶-4-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯(200mg，0.55mmol)，吗啉(96mg，1.10mmol)和1,4-二氧六环(5mL)于120℃下微波搅拌8h。浓缩至干，加水，二氯甲烷提取。浓缩至干，柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3：1)得到产物(152mg，产率67％)。
MS m/z(ESI):415.2[M+H]+.
第二步：3-氯-2-吗啉代吡啶-4-硫醇钾的制备
3-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)丙酸(2-乙基)己酯(100mg，0.24mmol)，叔丁醇钾(27mg，0.24mmol)于无水乙醇(5mL)中室温搅拌1h。浓缩至干得到产物，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):231.0[M+H]+.
第三步：6-氯-3-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-胺的制备
将3-氯-2-吗啉代吡啶-4-硫醇钾(上一步所得)、3-溴-6-氯吡嗪-2-胺(60mg，0.29mmol)、Pd2(dba)3(11mg，0.012mmol)、Xantphos(14mg，0.024mmol)和二异丙基乙胺(62mg，0.48mmol)于5mL二氧六环中，氮气下100℃搅拌过夜。冷至室温，浓缩至干，柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1：1)纯化得到浅黄色固体(60mg,产率70％)。
MS m/z(ESI):358.0[M+H]+.
第四步：(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
将6-氯-3-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-胺(60mg，0.22mmol)、(R)-N-((S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(76mg，0.25mmol)、碳酸钾(231mg，1.67mmol)溶于DMF(5mL)中，氮气下100℃微波搅拌2h，加水，乙酸乙酯提取。无水硫酸钠干燥，浓缩至干得到油状物，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):628.2[M+H]+.
第五步：(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(上一步反应所得)溶于甲醇(5mL)，加4M HCl/1,4-二氧六环(5mL)，室温搅拌1h，浓缩至干，柱层析纯化得到目标产物(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺(6mg，2步收率5％)。
MS m/z(ESI):524.1[M+H]+,526.1[M+H]+.
实施例102-103，108-110，120-130参考实施例101实验方案制备。
实施例102
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-(3,3-二氟吖丁啶-1-基)吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
实施例102的制备方法参考实施例101实验方案。
MS m/z(ESI):530.1[M+H]+,532.1[M+2+H]+.
实施例103
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-(吡咯烷-1-基)吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚
-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
实施例103的制备方法参考实施例101实验方案。
MS m/z(ESI):508.1[M+H]+,510.1[M+2+H]+.
实施例104
6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-3-(2,3-二氯苯基)-5-(噁丁环-3-基)吡嗪-2-胺的制备
实施例104的制备方法参考实施例31实验方案。
MS m/z(ESI):408.1[M+H]+,410.1[M+2+H]+.
实施例105
(S)-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)
甲醇制备
/>
第一步：(S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
往(1S)-1-((叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-羧酸叔丁酯(100mg,0.25mmol)的甲醇(3mL)溶液中加盐酸乙酸乙酯(4.0M,3mL)，室温搅拌3小时。浓缩反应液得到(S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐(100mg，产率100％)白色固体。
MS m/z(ESI):203.1[M+H]+，
[α]20 D＝1.773。
第二步：乙基(S)-3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯的制备
3-氯-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(50mg,0.15mmol)，(S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐(100mg,0.25mmol)和碳酸钾(20mg,0.73mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中100℃搅拌18小时。浓缩反应液，柱层析[洗脱剂：二氯甲烷～二氯甲烷/甲醇(97:3)]纯化得到(S)-3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(60mg,产率81％)黄色油状物。
MS m/z(ESI):511.1[M+H]+，513.1[M+2+H]+.
第三步：(S)-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
-78℃下，往(S)-3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(60mg,0.12mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液里滴加二异丁基氢化铝(0.47mL，1.0M)，-78℃搅拌30分钟，0℃搅拌30分钟，再室温搅拌2小时。用酒石酸钠钾盐萃灭反应，搅拌过夜。用二氯甲烷(50mL)萃取，浓缩有机相，薄层层析(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到(S)-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇(14mg,25％)白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.77-7.69(m,1H),7.53-7.39(m,2H),7.33-7.32(m,1H),7.23–7.11(m,3H),5.27(t,J＝8Hz,1H),4.52(d,J＝8Hz,2H),3.88(s,1H),3.76-3.69(m,2H),3.22–2.94(m,4H),2.70–2.55(m,2H),2.19(s,3H),1.97–1.78(m,2H),1.56(d,J＝12Hz,1H),1.17(d,J＝12Hz,1H).
MS m/z(ESI):469.1[M+H]+，471.1[M+2+H]+.
实施例106
(3-((S)-1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-
基)(环丙基)甲醇的制备
第一步：(S)-3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-甲醛的制备
(S)-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇(100mg,0.21mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，加入Dess-Martin试剂(130mg,0.31mmol)，室温搅拌30分钟，加水淬灭反应，用二氯甲烷(50mL)萃取，有机相用饱和NaHCO3水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗品(S)-3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-甲醛(120mg)。直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):447.1[M+H]+,449.1[M+2+H]+.
第二步：(3-((S)-1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)(环丙基)甲醇的制备
-20℃下，往(S)-3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-甲醛(120mg粗,0.21mmol)的THF(20mL)溶液里滴加异丙基溴化镁(0.3mL，1.0M)，滴完搅拌30分钟，升至室温搅拌1小时。加水淬灭反应，用二氯甲烷(3*20mL)萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，制备HPLC纯化得到(3-((S)-1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)(环丙基)甲醇(6mg,两步产率5％)白色固体。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.15(s,8H),7.88(s,8H),7.37(s,4H),7.26(s,10H),7.22(s,8H),7.13(s,11H),7.06(s,4H),5.48(s,8H),3.73(s,8H),3.47(s,9H),3.32(s,6H),3.18(s,8H),2.92(s,16H),2.80(s,24H),2.04(s,8H),1.78(d,J＝18.1Hz,18H),1.51(s,5H),0.88(s,3H),0.49(s,8H),0.25(s,8H).
MS m/z(ESI):509.1[M+H]+,511.1[M+2+H]+.
实施例107
(S)-1-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-
基)环丙烷-1-醇的制备
第一步：(S)-1-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
0℃下，往(S)-3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(50mg,0.10mmol)的THF(10mL)溶液里滴加乙基溴化镁(0.1mL,0.30mmol,3M)和钛酸四异丙酯(43mg,0.15mmol)，升至室温搅拌5小时。用饱和NH4Cl水溶液淬灭反应，用二氯甲烷(3*20mL)萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩有机相，制备HPLC纯化得到(S)-1-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇(5mg,产率10％)白色固体。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.15(s,22H),7.88(s,22H),7.40(s,6H),7.40(s,5H),7.40–7.20(m,59H),7.13(s,27H),7.06(s,11H),3.72(s,21H),3.54(s,32H),3.31(s,29H),3.07(s,42H),2.80(s,63H),2.21(s,21H),2.05(s,21H),1.95(s,21H),1.76(s,31H),1.51(s,31H),0.96(s,37H),0.72(s,28H).
MS m/z(ESI):495.1[M+H]+,497.1[M+2+H]+.
实施例108
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例108的制备方法参考实施例101实验方案。
MS m/z(ESI):508.1[M+H]+,510.1[M+2+H]+.
实施例109
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1-甲基-4,6-二氢-1H-螺[环戊二烯并[d]咪唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例109的制备方法参考实施例101实验方案。
MS m/z(ESI):498.1[M+H]+,500.1[M+2+H]+.
实施例110
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-(吖丁啶-1-基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-甲基-2,6-二氢-4H-螺[环戊二烯并[c]吡唑-5,4'-哌啶]-4-胺的制备
实施例110的制备方法参考实施例101实验方案。
MS m/z(ESI):498.1[M+H]+,500.1[M+2+H]+.
实施例111
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚
-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
/>
实施例111的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):538.1[M+H]+,540.1[M+2+H]+.
实施例112
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-(吡咯烷-1-基)吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
实施例112的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):522.1[M+H]+,524.1[M+2+H]+.
实施例113
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-(吡咯烷-1-基)吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例113的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):529.1[M+H]+,531.1[M+2+H]+.
实施例114
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-(吡咯烷-1-基)吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例114的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):513.1[M+H]+,515.1[M+2+H]+.
实施例115
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-(吡咯烷-1-基)吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-1-甲基
-4,6-二氢-1H-螺[环戊二烯并[d]咪唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例115的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):526.1[M+H]+,528.1[M+2+H]+.
实施例116
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-(吡咯烷-1-基)吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-2-甲基
-2,6-二氢-4H-螺[环戊二烯并[c]吡唑-5,4'-哌啶]-4-胺的制备
实施例116的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):526.1[M+H]+,528.1[M+2+H]+.
实施例117
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例117的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):529.1[M+H]+,531.1[M+2+H]+.
实施例118
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-吗啉代吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-2-甲基-2,6-二氢-4H-螺[环戊二烯并[c]吡唑-5,4'-哌啶]-4-胺的制备
/>
实施例118的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):542.1[M+H]+,544.1[M+2+H]+.
实施例119
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例119的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):484.1[M+H]+,486.1[M+2+H]+.
实施例120
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例120的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):470.1[M+H]+,472.1[M+2+H]+.
实施例121
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]
噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例121的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):436.1[M+H]+.
实施例122
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-环丙基-3-甲基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例122的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):450.1[M+H]+.
实施例123
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-环丙基-3-氟吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例123的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):454.1[M+H]+.
实施例124
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-环丙基嘧啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]
噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例124的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):437.1[M+H]+.
实施例125
(S)-1-(4-((3-氨基-5-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)吡嗪-2-基)硫代)-3-氯吡啶-2-基)吖丁啶-2-酮的制备
实施例125的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):508.1[M+H]+,510.1[M+2+H]+.
实施例126
(S)-1-(4-((3-氨基-5-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)吡嗪-2-基)硫代)-3-氯吡啶-2-基)吡咯烷-2-酮的制备
实施例126的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):522.1[M+H]+,524.1[M+2+H]+.
实施例127
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-环丙基苯基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
实施例127的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):444.1[M+H]+.
实施例128
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-环丙基-4-氟苯基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-
胺的制备
实施例128的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):462.1[M+H]+.
实施例129
(S)-1'-(6-氨基-5-((3-环丙基-2-氟苯基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-
胺的制备
实施例129的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):462.1[M+H]+.
实施例130
(S)-1'-(6-氨基-5-((4-氟-3-吗啉代苯基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-
胺的制备
实施例130的制备方法参考实施例101实验方案。
MS m/z(ESI):507.1[M+H]+.
实施例131
2-(3-((S)-1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-
基)环丙烷-1-醇的制备
实施例131的制备方法参考实施例106实验方案。
MS m/z(ESI):495.1[M+H]+,497.1[M+2+H]+.
实施例132
(S)-1-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-
基)吖丁啶-3-醇的制备
实施例132的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):510.1[M+H]+,512.1[M+2+H]+.
实施例133
(S)-1-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-
基)吖丁啶-3-酮的制备
实施例133的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):508.1[M+H]+,510.1[M+2+H]+.
实施例134
(S)-1-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-
基)吖丁啶-2-酮的制备
实施例134的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):508.1[M+H]+,510.1[M+2+H]+.
实施例135
(S)-1-(3-(5-氨基-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例135的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):496.1[M+H]+,498.1[M+2+H]+.
实施例136
(S)-1-(3-(6-氨基-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例136的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):502.1[M+H]+,504.1[M+2+H]+.
实施例137
(S)-1-(3-(6-氨基-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例137的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):486.1[M+H]+,488.1[M+2+H]+.
实施例138
(S)-1-(3-(6-氨基-1-甲基-4,6-二氢-1H-螺[环戊二烯并[d]咪唑-5,4'-哌啶]-1'-
基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例138的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):499.1[M+H]+,501.1[M+2+H]+.
实施例139
(S)-1-(3-(4-氨基-2-甲基-2,6-二氢-4H-螺[环戊二烯并[c]吡唑-5,4'-哌啶]-1'-
基)-6-(2,3-二氯苯基)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例139的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):499.1[M+H]+,501.1[M+2+H]+.
实施例140
(S)-1-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((2-环丙基吡啶-4-基)硫代)-5-
甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例140的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):500.1[M+H]+.
实施例141
(S)-1-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例141的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):534.1[M+H]+,536.1[M+2+H]+.
实施例142
(S)-1-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例142的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):509.1[M+H]+,511.1[M+2+H]+.
实施例143
(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺
[4.5]癸-2-烯-1-胺制备
第一步：叔-丁基4-烯丙基-4-甲酰基哌啶-1-羧酸酯的制备
在0℃下，往叔-丁基4-甲酰基哌啶-1-羧酸酯(30g,14.1mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(300mL)中加叔丁醇锂(13.5g,16.9mmol)，加完搅拌30分钟，再加烯丙基溴(19g,16.2mmol)，加完0℃搅拌2小时。把反应液倒入氯化铵水溶液(1L)里，用乙酸乙酯萃取(1L×2)，乙酸乙酯层用饱和氯化钠水溶液(500mL)洗涤，无水硫酸钠干燥后柱层析[洗脱剂:石油醚～乙酸乙酯/石油醚从0％到2％]纯化得到无色油状产物叔-丁基4-烯丙基-4-甲酰基哌啶-1-羧酸酯(15g,产率42％)。
第二步：叔-丁基4-烯丙基-4-(1-羟基烯丙基)哌啶-1-羧酸酯的制备
在-78℃下，往叔-丁基4-烯丙基-4-甲酰基哌啶-1-羧酸酯(25g,99mmol)的四氢呋喃(300mL)溶液中滴加乙烯基氯化镁(65mL,123.5mmol)，加完慢慢升至室温搅拌30分钟。把反应液倒入氯化铵水溶液(1L)里，用乙酸乙酯萃取(1L×2)，乙酸乙酯层用饱和氯化钠水溶液(500mL)洗涤，无水硫酸钠干燥后柱层析[洗脱剂:石油醚～乙酸乙酯/石油醚从0％到5％]纯化得到无色油状产物叔-丁基4-烯丙基-4-(1-羟基烯丙基)哌啶-1-羧酸酯(25g,产率90％)。
第三步：叔-丁基4-丙烯酰-4-烯丙基哌啶-1-羧酸酯的制备
在0℃下往叔-丁基4-烯丙基-4-(1-羟基烯丙基)哌啶-1-羧酸酯(25g,89mmol)的二氯甲烷(400mL)溶液里加戴斯马丁试剂(41.5g,98mmol)，加完40℃搅拌1小时。把反应液慢慢倒入碳酸氢钠/亚硫酸钠水溶液(1/1,1L)里，用二氯甲烷萃取(1L×2)，二氯甲烷层用饱和氯化钠水溶液(500mL)洗涤，无水硫酸钠干燥后旋干，再加正庚烷(200mL)，搅拌5分钟，过滤掉不溶物，浓缩滤液得到无色油状产物叔-丁基4-丙烯酰-4-烯丙基哌啶-1-羧酸酯(24.8g,产率100％)，快速投下一步。
第四步：叔-丁基1-羰基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯的制备
叔-丁基4-丙烯酰-4-烯丙基哌啶-1-羧酸酯(24.8g,89mmol)和二氯(邻异丙氧基苯基亚甲基)(三环己基膦)钌(II)(1.2g,1.4mmol)在甲苯(700mL)中90℃搅拌2小时。待反应液冷却后，浓缩反应液，柱层析[洗脱剂:石油醚～乙酸乙酯/石油醚从0％到20％]纯化得到红黑色固体产物叔-丁基1-羰基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯(13g,产率58％)。
MS m/z(ESI):252.1[M+H]+。
第五步：叔-丁基2-溴-1-羰基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯的制备
往叔-丁基1-羰基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯(13g,51.8 51.8mmol)的乙腈(300mL)溶液里加吡啶氮氧化物(11g,116mmol)，再加N-溴代丁二酰亚胺(28g,157mmol)，加完80℃搅拌18小时。待反应液冷却后，浓缩反应液，柱层析[洗脱剂:石油醚～乙酸乙酯/石油醚从0％到20％]纯化得到黄色固体产物叔-丁基2-溴-1-羰基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯(4.2g,产率25％)。
MS m/z(ESI):330.1[M+H]+，332.1[M+2+H]+
第六步：叔-丁基2-环丙基-1-羰基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯的制备
叔-丁基2-溴-1-羰基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯(4.2g,12.8mmol)，环丙基三氟硼酸钾(3.79g,25.6mmol)，碳酸铯(12.5g,38.4mmol)和[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(731mg,0.9mmol)在二氧六环(100mL)和水(10mL)中100℃搅拌18小时。往反应液里加水淬灭(150mL)，用乙酸乙酯(150mL×2)萃取，乙酸乙酯层用饱和氯化钠水溶液(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥后柱层析[洗脱剂:石油醚～乙酸乙酯/石油醚从0％到12％]纯化得到黄色油状产物叔-丁基2-环丙基-1-羰基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯(1g,产率27％)。
MS m/z(ESI):292.2[M+H]+
第七步：叔-丁基(R,Z)-1-((叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)亚氨基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯的制备
叔-丁基2-环丙基-1-羰基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯(1g,3.4mmol)和(R)-(+)-叔丁基亚磺酰胺(2g,17.2mmol)在钛酸四乙酯(30mL)中100℃搅拌18小时。冷却后，往反应液里加乙酸乙酯(100mL)，再倒入水(150mL)中，有大量白色固体析出，通过硅藻土过滤，分液，有机相旋干，柱层析[洗脱剂:石油醚～乙酸乙酯/石油醚从0％到50％]纯化得到黄色油状产物叔-丁基(R,Z)-1-((叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)亚氨基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯(190mg,产率14％)。
MS m/z(ESI):395.2[M+H]+。
第八步：叔-丁基(S)-1-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯的制备
-78℃往叔-丁基(R,Z)-1-((叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)亚氨基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯(210mg,0.53mmol)的四氢呋喃(10mL)滴加二异丁基氢化铝(0.9mL,1mmol)，加完搅拌15分钟。在-78℃用十水硫酸钠淬灭反应，搅拌10分钟，过滤反应液，把滤液浓缩后柱层析[洗脱剂:石油醚～乙酸乙酯/石油醚从0％到5％]纯化得到无色油状产物叔-丁基(S)-1-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯(105mg,产率50％)。
MS m/z(ESI):397.2[M+H]+。
第九步：(S)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
往叔-丁基(S)-1-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸酯(105mg,0.27mmol)的甲醇(3mL)溶液里加盐酸二氧六环(15mL,60mmol)，加完室温搅拌1小时。旋干反应液得到白色固体产物(S)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺(105mg,产率100％)。
MS m/z(ESI):193.2[M+H]+。
第十步：(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-6-氯吡嗪-2-胺(76mg,0.26mmol)，(S)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺(80mg,0.2mmol)和碳酸钾(167mg,1.2mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(8mL)中100℃搅拌7小时。往反应液里加水(60mL)，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，乙酸乙酯层用饱和氯化钠水溶液(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥后爬板[洗脱剂:二氯甲烷/甲醇＝7/1]纯化得到黄色油状产物(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺(37mg,产率41％)。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.67–7.51(m,2H),5.92(d,J＝8Hz,1H),5.27(s,1H),4.26–4.04(m,2H),3.33(s,1H),3.27–3.08(m,2H),2.44–2.18(m,2H),1.81–1.69(m,1H),1.68–1.47(m,2H),1.42–1.24(m,2H),0.81–0.60(m,2H),0.57–0.28(m,2H).
MS m/z(ESI):444.1[M+H]+，446.1[M+2+H]+
实施例144
(S)-8-(5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸
-2-烯-1-胺的制备
第一步：3-氯-4-((5-氯吡嗪-2-基)硫代)吡啶-2-胺的制备
2-氨基-3-氯吡啶-4-硫醇酸钾(1g，2.64mmol)，2-溴-5-氯吡嗪(597mg，3.11mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(284mg，0.311mmol)、氯[(4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽)-2-(2-氨基联苯)]钯(II)(360mg，0.622mmol)以及N,N-二异丙基乙胺(1.2g，9.33mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中90℃微波搅拌1小时，旋干后柱层析[洗脱剂:石油醚～乙酸乙酯/石油醚从0％到30％]纯化得到白色固体产物3-氯-4-((5-氯吡嗪-2-基)硫代)吡啶-2-胺(250mg，产率35％)。
MS m/z(ESI):273.0[M+H]+，275.0[M+2+H]+。
第二步：(S)-8-(5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
3-氯-4-((5-氯吡嗪-2-基)硫代)吡啶-2-胺(100mg,0.368mmol)，(S)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺盐酸盐(105mg,0.265mmol)和碳酸钾(254mg,1.84mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(8mL)中100℃搅拌6小时。往反应液加水(40mL)，用乙酸乙酯(40mL*2)萃取，浓缩有机相，薄层层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝10/1)得到黄色固体产物(S)-8-(5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺(40mg，产率35％)。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.29(d,J＝16Hz,2H),7.60(d,J＝4Hz,1H),5.93(d,J＝4Hz,1H),5.31(s,1H),4.34–4.14(m,2H),3.43–3.35(m,2H),3.28–3.21(m,1H),2.45–2.21(m,2H),1.86–1.49(m,3H),1.44–1.22(m,2H),0.82–0.61(m,2H),0.58–0.30(m,2H).
MS m/z(ESI):429.1[M+H]+，431.1[M+2+H]+。
实施例145
(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-2-甲基-8-氮杂螺
[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
实施例145的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):432.1[M+H]+,434.1[M+2+H]+.
实施例146
(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-2-乙基-8-氮杂螺
[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
实施例146的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):446.1[M+H]+,448.1[M+2+H]+.
实施例147
(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-2-异丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
实施例147的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):460.1[M+H]+,462.1[M+2+H]+.
实施例148
(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
实施例148的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):458.1[M+H]+,460.1[M+2+H]+.
实施例149
(R)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-8-氮杂二螺
[2.1.55.23]十二烷-4-胺的制备
实施例149的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):446.1[M+H]+,448.1[M+2+H]+.
实施例150
(R)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-11-氧杂-8-氮杂二螺[2.1.55.23]十二烷-4-胺的制备
实施例150的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):448.1[M+H]+,450.1[M+2+H]+.
实施例151
(R)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-8-氮杂二螺[2.1.55.23]十二烷-4-胺的制备
实施例151的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):432.1[M+H]+,434.1[M+2+H]+.
实施例154
(S)-8-(6-氨基-3-甲基-5-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-甲基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
实施例154的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):451.1[M+H]+.
实施例155
(S)-8-(6-氨基-3-甲基-5-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
实施例155的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):477.1[M+H]+.
实施例157
(R)-8-(6-氨基-3-甲基-5-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫代)吡嗪-2-基)-11-氧杂-8-氮杂二螺[2.1.55.23]十二烷-4-胺的制备
实施例157的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):467.1[M+H]+.
实施例159
(S)-1-(6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(6-氨基-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噁唑
-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例159的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):500.1[M+H]+,502.1[M+2+H]+.
实施例160
(R)-1-(6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例160的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):459.1[M+H]+,461.1[M+2+H]+.
实施例161
(S)-1-(3-(1-氨基-2-甲基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例161的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):473.1[M+H]+,475.1[M+2+H]+.
实施例162
(S)-1-(3-(1-氨基-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例162的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):499.1[M+H]+,501.1[M+2+H]+.
实施例163
(R)-1-(6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(4-氨基-8-氮杂二螺[2.1.55.23]十二烷-8-
基)-5-甲基吡嗪-2-基)环丙烷-1-醇的制备
实施例163的制备方法参考实施例107实验方案。
MS m/z(ESI):487.1[M+H]+,489.1[M+2+H]+.
实施例164
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基嘧啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
实施例164的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):426.1[M+H]+.
实施例165
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基嘧啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
实施例165的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):435.1[M+H]+.
实施例166
(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基嘧啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-2-甲基-8-氮杂螺[4.5]
癸-2-烯-1-胺的制备
实施例166的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):399.1[M+H]+.
实施例167
(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基嘧啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]
癸-2-烯-1-胺的制备
实施例167的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):425.1[M+H]+.
实施例168
(S)-1'-(6-氨基-3-甲基-5-((2-(甲基氨基)嘧啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚
-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
实施例168的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):449.1[M+H]+.
实施例169
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-(环丙基氨基)嘧啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺
[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
实施例169的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):475.1[M+H]+.
实施例170
(S)-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-5-
甲基吡嗪-2-基)甲醇制备
/>
第一步：2-乙基己基3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)丙酸酯的制备
3-氯-4-碘吡啶-2-胺(3g，11.8mmol)，2-乙基己基3-巯基丙酸酯(2.9g，14.2mmol)，醋酸鈀(132mg，0.59mmol)，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(683mg,1.18mmol)和N，N-二异丙基乙胺(561mg,4.3mmol)在二氧六环(80mL)中100℃搅拌18小时。过滤反应液，浓缩滤液后柱层析[洗脱剂:石油醚～石油醚/乙酸乙酯60:40)]纯化得到2-乙基己基3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)丙酸酯淡黄色固体(3.8g,产率94％)。
MS m/z(ESI):345.1[M+H]+，347.0[M+2+H]+
第二步：2-氨基-3-氯吡啶-4-硫醇钾的制备
往2-乙基己基3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)丙酸酯(500mg,1.5mmol)的乙醇(30mL)溶液中加叔丁醇钾(174mg,1.53mmol)，加完40℃搅拌2小时。浓缩反应液得到2-氨基-3-氯吡啶-4-硫醇钾(500mg)黄色固体，粗品直接投下一步。
MS m/z(ESI):161.0[M+H]+，163.0[M+2+H]+
第三步：乙基6-溴-3-((S)-1-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯的制备
6-溴-3-氯-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(840mg,3mmol)，(S)-N-(1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)特戊酰茚二酮酰胺三氟乙酸盐(1.5g,3.6mmol)和碳酸钾(1.7g,12mmol)在乙腈(40mL)中55℃搅拌18小时。过滤反应液，浓缩滤液后柱层析[洗脱剂:石油醚～石油醚/乙酸乙酯60:40)]纯化得到6-溴-3-((S)-1-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯黄色固体(1.5g,产率91％)。
MS m/z(ESI):549.2[M+H]+，551.2[M+2+H]+
第四步：6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-((S)-1-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯的制备
6-溴-3-((S)-1-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(798mg,1.45mmol)，2-氨基-3-氯吡啶-4-硫醇钾(500mg,1.45mmol，粗品)，三(二亚苄基丙酮)二钯(66mg,0.073mmol)，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(84mg,0.145mmol)和N，N-二异丙基乙胺(561mg,4.35mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中100℃微波搅拌1.5小时。过滤反应液，滤液浓缩后柱层析[洗脱剂:二氯甲烷～二氯甲烷/甲醇(98.5:1.5)]纯化得到6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-((S)-1-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯黄色固体(500mg,产率55％)。
MS m/z(ESI):629.1[M+H]+，631.1[M+2+H]+
第五步：(R)-N-((S)-1'-(5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(羟甲基)-6-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
0℃往6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-((S)-1-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(500mg,0.795mmol)的四氢呋喃(30mL)溶液里滴加四氢锂铝(0.7mL，2.5M)，0℃搅拌30分钟。用十水硫酸钠淬灭反应，搅拌10分钟。通过硅藻土过滤，滤饼用四氢呋喃(50mL)洗两遍，浓缩滤液，柱层析[洗脱剂:二氯甲烷～二氯甲烷/甲醇(95:5)]纯化得到(R)-N-((S)-1'-(5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(羟甲基)-6-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺黄色固体(220mg,产率47％)。
MS m/z(ESI):587.1[M+H]+，589.1[M+2+H]+
第六步：(S)-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
往(R)-N-((S)-1'-(5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(羟甲基)-6-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(220mg,0.375mmol)的甲醇(3mL)溶液里加盐酸二氧六环(20mL，4.0M)，室温搅拌30分钟。浓缩反应液，再加甲醇(10mL)溶解，氨水调碱，旋干后柱层析[洗脱剂:二氯甲烷～二氯甲烷/甲醇(1％NH3-H2O)(95:5)]纯化得到(S)-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇(115mg,产率63％)白色固体。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.59(d,J＝4Hz,1H),7.41–7.34(m,1H),7.27–7.16(m,3H),5.89(d,J＝4Hz,1H),4.64(s,2H),4.00(s,1H),3.88(d,J＝12Hz,2H),3.28–3.20(m,2H),3.14(d,J＝16Hz,1H),2.82(d,J＝16Hz,1H),2.48(s,3H),2.01–1.85(m,2H),1.67–1.58(m,1H),1.52–1.43(m,1H).
MS m/z(ESI):483.2[M+H]+，485.2[M+2+H]+
实施例171
(S)-(6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(6-氨基-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
第一步：乙基6-溴-3-((S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯的制备
将(R)-N-((S)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(470mg，1.5mmol，1.0eq)，乙基6-溴-3-氯-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯(398mg,1.43mmol,0.95eq)和碳酸钾(1.04g,7.5mmol,5.0eq)溶于DMF(4.0mL)中。氮气保护下，加热到60℃，搅拌反应3小时。反应结束，浓缩除去DMF，粗品柱层析纯化(100％EtOAc in Petroether)，得到黄色固体产物乙基6-溴-3-((S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯(600mg，产率72％)。
MS m/z(ESI):556.1[M+H]+,558.1[M+H+2]+。
第二步：乙基6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-((S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯的制备
/>
将乙基6-溴-3-((S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯(600mg，1.08mmol，1.0eq),2-氨基-3-氯吡啶-4-硫醇酸钾(536mg，2.70mmol，2.5eq)溶于10mL DMF，置于微波反应管中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(50mg，0.054mmol，0.05eq)、Xantphos(62mg，0.11mmol，0.1eq)以及DIPEA(419mg，3.24mmol，3.0eq)，氮气鼓泡3分钟。将反应液微波加热至105℃反应75min；待反应液冷却至室温后，用20mL乙酸乙酯稀释，用硅藻土过滤后，浓缩，粗品柱层析纯化(10％MeOH in CH2Cl2)，得黄色固体产物乙基6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-((S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯(360mg，产率52％)。
MS m/z(ESI):636.0[M+H]+,638.0[M+H+2]+。
第三步：乙基6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-((S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯的制备
将乙基6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-((S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯(360mg，0.57mmol，1.0eq)溶于40mL无水THF，氮气置换保护下。冷却到0℃，滴加LiAlH4的四氢呋喃溶液(0.6mL,1.14mmol,2.0eq.，D＝2M)。滴加完毕，缓慢升到室温搅拌3小时。反应结束，将反应液用乙酸乙酯(100mL)稀释，冷却到0℃，滴加2mL水，加入4mL 15％氢氧化钠水溶液，然后再加入6mL水，升到室温搅拌30分钟，加入适量无水硫酸钠，搅拌15分钟，过滤除去固体，滤液浓缩，粗品柱层析纯化(10％MeOH in CH2Cl2)，得到黄色固体产物乙基6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-((S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯(150mg，产率44％)。
MS m/z(ESI):594.1[M+H]+,596.1[M+H+2]+。
第四步：(S)-(6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(6-氨基-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
将乙基6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-((S)-6-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯(150mg，0.25mmol，1.0eq)溶于MeOH(5mL)，加入盐酸的二氧六环溶液(1.0mL,4M)，于室温反应1小时。将反应液浓缩至干，用5mL甲醇溶解后，用7M NH3的甲醇溶液调节pH至碱性，浓缩反应液，先用正相柱纯化(10％MeOH in CH2Cl2)，然后用反相柱纯化(30％MeCN in H2O(0.1％NH3.H2O))，得灰色固体目标化合物(S)-(6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(6-氨基-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇(52mg，产率42％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.93(s,1H),7.62(s,1H),6.31(s,1H),5.72(s,1H),5.41(s,1H),4.45(s,2H),3.98(s,1H),3.84(s,2H),2.76(dd,J＝47.2,16.9Hz,4H),2.37(s,3H),1.60(dd,J＝165.2,116.4Hz,7H).
MS m/z(ESI):490.1[M+H]+,492.1[M+H+2]+。
实施例172
(S)-(6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-(6-氨基-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噁唑
-5,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例172的制备方法参考实施例171实验方案。
MS m/z(ESI):474.1[M+H]+,476.1[M+2+H]+.
实施例173
(R)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-亚甲基-8-氮杂螺[4.5]
癸烷-1-胺的制备
实施例173的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):418.1[M+H]+,420.1[M+2+H]+.
实施例174
(S,E)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-亚乙基-8-氮杂螺[4.5]
癸烷-1-胺的制备
实施例174的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):432.1[M+H]+,434.1[M+2+H]+.
实施例175
(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-(丙烷-2-亚基)-8-氮杂螺[4.5]癸烷-1-胺的制备
实施例175的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):446.1[M+H]+,448.1[M+2+H]+.
实施例176
(R)-8-(6-氨基-5-((2-氨基嘧啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-亚甲基-8-氮杂螺[4.5]癸烷
-1-胺的制备
实施例176的制备方法参考实施例91实验方案。
MS m/z(ESI):385.1[M+H]+.
实施例177
(S,E)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-2-亚乙基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-1-胺的制备
实施例177的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):446.1[M+H]+,448.1[M+2+H]+.
实施例178
(R)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-甲基吡嗪-2-基)-2-亚甲基-8-氮杂螺[4.5]癸烷-1-胺的制备
实施例178的制备方法参考实施例96实验方案。
MS m/z(ESI):432.1[M+H]+,434.1[M+2+H]+.
实施例179
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
第一步：(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-6-氯吡嗪-2-胺(200mg,0.694mmol)，(R)-N-((S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(350mg,0.833mmol，[α]20 D＝1.773)和碳酸钾(479mg,3.47mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(7mL)中100℃搅拌8小时。待反应液冷却后，加入40mL水，用乙酸乙酯萃取(40mL×2)；乙酸乙酯层用饱和氯化钠水溶液(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥后柱层析[洗脱剂:二氯甲烷～二氯甲烷/甲醇从0％到3％]纯化得到橘黄色固体产物(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(200mg,产率52％)。
MS m/z(ESI):558.2[M+H]+。
第二步：(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
往(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(188mg，0.337mmol)的甲醇(5mL)溶液里加盐酸二氧六环溶液(20mL,80mmol)，室温搅拌1小时。将反应液浓缩至干，用5mL甲醇溶解后，氨水调节pH至碱性，浓缩后柱层析[洗脱剂:二氯甲烷～二氯甲烷/甲醇从0％到7.5％]纯化得到白色固体产物(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺(130mg,产率85％)。
MS m/z(ESI):454.2[M+H]+。
第三步：(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
在-10℃下往(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺(100mg,0.22mmol)的乙腈(10mL)溶液里加N-氟代双苯磺酰胺(69mg,0.22mmol)，加完慢慢升至室温，搅拌7小时。旋干反应液，薄层层析(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到土黄色固体产物(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺(28mg,产率27％)。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.62(d,J＝4Hz,1H),7.42–7.33(m,1H),7.26–7.15(m,3H),6.00(d,J＝4Hz,1H),4.67–4.54(m,2H),4.30(d,J＝16Hz,2H),3.97(s,1H),3.16(d,J＝16Hz,1H),2.82(d,J＝16Hz,1H),1.95–1.78(m,2H),1.65–1.53(m,1H),1.48–1.38(m,1H).
MS m/z(ESI):472.1[M+H]+，474.1[M+2+H]+。
[α]20 D＝-36.893。
实施例180
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺
第一步：3-溴-2-(氯甲基)吡啶的制备
将(3-溴吡啶-2-基)甲醇(7.5g,40mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，反应液均匀混合后，在冰浴条件下滴加SOCl2(9.5g,80mmol)，搅拌1小时。反应液减压浓缩，所得粗品用快速硅胶柱层析分离纯化得到无色液体目标化合物3-溴-2-(氯甲基)吡啶(5g，产率：61％)。
MS m/z(ESI):205.9[M+H]+.
第二步：1-(叔-丁基)4-甲基4-((3-溴吡啶-2-基)甲基)哌啶-1,4-二羧酸酯的制备
将1-(叔-丁基)4-甲基哌啶-1,4-二羧酸酯(7.7g，31.7mmol)、LDA(18.3mL，36.6mmol)加入THF(20mL)中，反应液在-60℃条件下反应1小时，3-溴-2-(氯甲基)吡啶(5g,24.4mmol)加入反应液中，温度不变条件下继续反应2小时，减压浓缩，所得粗品用快速硅胶柱层析分离纯化得到淡黄色固体目标化合物1-(叔-丁基)4-甲基4-((3-溴吡啶-2-基)甲基)哌啶-1,4-二羧酸酯(9g，产率：89％)。
MS m/z(ESI):413.0[M+H]+.
第三步：叔-丁基5-羰基-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸酯的制备
向1-(叔-丁基)4-甲基4-((3-溴吡啶-2-基)甲基)哌啶-1,4-二羧酸酯(9g，21.84mmol)中加入THF(100mL)，反应液温度降至-78℃后，缓慢将正丁基锂溶液(1.6N，17mL)滴入反应液中，在-78℃下继续反应1小时，加入氯化铵水溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得粗品用快速硅胶柱层析分离纯化得到淡黄色固体目标化合物叔-丁基5-羰基-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸酯(3g，产率：45％)。
MS m/z(ESI):303.1[M+H]+.
第四步：叔-丁基(R,Z)-5-((叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)亚氨基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸酯的制备
将叔-丁基5-羰基-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸酯(3g,9.93mmol),(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.6g,29.8mmol)加入钛酸乙酯(50mL)中，反应液搅拌均匀，在110℃条件下反应13小时，反应温度降至常温，缓慢滴加水(100mL),有固体产生，再加入乙酸乙酯(200mL)，过滤，有机相减压浓缩，所得目标化合物叔-丁基(R,Z)-5-((叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)亚氨基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸酯(3g,产率：75％)，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):406.1[M+H]+.
第五步：叔-丁基(S)-5-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-5,7-二氢螺[戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸酯的制备
将叔-丁基(R,Z)-5-((叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)亚氨基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸酯(3g,7.41mmol)加入THF(40mL)中，在温度降至0℃条件下，向反应液中缓慢滴加BH3(7.5mL,2N in THF)，滴加完毕后，保持温度，反应2小时。向反应液滴加甲醇(10mL)。减压浓缩，所得粗品用快速硅胶柱层析分离纯化得到淡黄色固体目标化合物叔-丁基(S)-5-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-5,7-二氢螺[戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸酯(2.5g，产率83％)。
MS m/z(ESI):408.1[M+H]+.
第六步：(S)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺的制备
将叔-丁基(S)-5-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸酯(2.5g,6.14mmol)、盐酸二氧六环(10mL,4N)加入CH2Cl2(40mL)中，反应液在室温下，搅拌3小时，减压浓缩，所得目标化合物(S)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(1.5g)，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):204.1[M+H]+.
第七步：(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺的制备
将(S)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(1.5g,7.39mmol)、3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-6-溴吡嗪-2-胺(3.7g,11.09mmol)、碳酸铯(7.2g,22.17mmol)加入DMF(50mL)中，在90℃条件下，反应13小时。反应液减压浓缩，所得粗品用快速硅胶柱层析分离纯化得到淡黄色固体目标化合物(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(1g，产率29％)。
MS m/z(ESI):455.1[M+H]+,457.1[M+H+2]+.
第八步：(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺的制备
将(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(600mg,1.32mmol)、NFSI(830mg,2.64mmol)加入THF(10mL)中。反应液在室温反应3小时，减压浓缩，所得粗品用快速硅胶柱层析分离纯化得到白色固体目标化合物(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(90mg，产率14％)。
MS m/z(ESI):473.0[M+H]+,475.1[M+H+2]+。
1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.33(d,J＝4.8Hz,1H),7.82(d,J＝7.2Hz,1H),7.62(d,J＝5.6Hz,1H),7.28-7.25(m,1H),6.01(d,J＝5.6Hz,1H),4.35-4.31(m,2H),4.03(s,1H),3.36-3.31(m,2H),3.25-3.21(m,1H),2.92(d,J＝16.8Hz,1H),1.98-1.84(m,2H),1.64-1.60(m,1H),1.42-1.39(m,1H).
实施例181
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
第一步：(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
将(R)-N-((S)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(260mg，0.83mmol，1.0eq)，3-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-6-氯吡嗪-2-胺(227mg,0.79mmol,0.95eq)和碳酸钾(574mg,4.15mmol,5.0eq)溶于DMF(2mL)中。氮气保护下，加热到105℃，搅拌反应10小时。反应结束，浓缩除去DMF，粗品柱层析(8％MeOH inCH2Cl2)，得到黄色固体产物(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(340mg，产率76％)。
MS m/z(ESI):565.1[M+H]+,567.1[M+H+2]+。
第二步：((S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
将(R)-N-((S)-1'-(6-氨基-5-((3-氯-2-环丙基吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(340mg，0.60mmol，1.0eq)溶于MeOH(5mL)，加入HCl的二氧六环溶液(1.0mL,4M)，于室温反应1小时。将反应液浓缩至干，用5mL甲醇溶解后，用7M NH3的甲醇溶液调节pH至碱性，浓缩反应液，先用正相柱纯化(10％MeOH in CH2Cl2)，然后用反相柱纯化(40％MeCN in H2O(0.1％NH3.H2O)，得到灰色固体目标化合物((S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺(220mg，产率80％)。
MS m/z(ESI):461.1[M+H]+,463.1[M+H+2]+。
第三步：(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺的制备
将((S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺(220mg，0.48mmol，1.0eq)溶于无水DMF(2mL)和无水MeCN(10mL)中，氮气置换三次，氮气保护下分批加入试剂N-氟-N-(苯磺酰)苯磺酰胺(159mg,0.5mmol,1.05eq.)。加料完毕，室温搅拌3小时，反应液滴加到搅拌的MeOH(50mL)中，后加入1mL水。将反应液浓缩，得到粗品，用制备HPLC纯化得到灰色固体产物(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺(40mg，产率17％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.96(s,1H),7.67(d,J＝5.3Hz,1H),6.28(s,2H),6.17(s,2H),5.86(d,J＝5.4Hz,1H),4.10(s,2H),3.98(s,1H),2.81(dd,J＝52.7,15.2Hz,4H),1.88(s,2H),1.75–1.52(m,4H).
19F NMR(376MHz,DMSO)δ-88.17(s).
MS m/z(ESI):479.0[M+H]+,481.0[M+H+2]+。
实施例182
(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺
[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
第一步：(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
在25℃下，往(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺(35mg,0.085mmol)的四氢呋喃(18mL)溶液里加N-氟代双苯磺酰胺(40mg,0.128mmol)，加完搅拌1小时。TLC显示没反应完，补加N-氟代双苯磺酰胺(27mg,0.085mmol)，加完继续搅拌1小时。TLC显示没反应完，再补加N-氟代双苯磺酰胺(27mg,0.085mmol)，搅拌1小时。TLC显示有杂质出现，反应液用盐酸(40mL,0.5N)萃灭，用乙酸乙酯(20mL*2)洗涤，水相用碳酸钠调节至pH约为8，乙酸乙酯(30mL*2)萃取，旋干有机相，制备色谱(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到浅黄色固体(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-1-胺(28mg,产率：27％)。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.61(d,J＝8Hz,1H),5.99(d,J＝8Hz,1H),5.36(s,1H),4.31–4.13(m,2H),3.45(s,1H),3.30–3.15(m,2H),2.43–2.24(m,2H),1.89–1.48(m,5H),0.84–0.65(m,2H),0.57–0.36(m,2H).
MS m/z(ESI):462.1[M+H]+，474.1[M+2+H]+。
实施例183
(S)-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((2-氨基嘧啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
第一步：2-乙基己基3-((2-((2,4-二甲氧苄基)氨基)嘧啶-4-基)硫代)丙酸酯的制备
将2-乙基己基3-((2-氯嘧啶-4-基)硫代)丙酸酯(2.0g，6.06mmol，1.0eq)，(2,4-二甲氧苯基)甲胺(1.02g，6.06mmol，1.0eq)溶于20mL乙腈，加入碳酸钾(1.0g，7.24mmol，1.2eq)，加热至100℃反应18小时。待反应液冷却后，将反应液用20mL乙酸乙酯稀释，用硅藻土过滤除去不溶物，滤液旋干后柱层析(10～25％乙酸乙酯/石油醚)，得无色油状物2-乙基己基3-((2-((2,4-二甲氧苄基)氨基)嘧啶-4-基)硫代)丙酸酯(1.5g，产率54％)。
MS m/z(ESI):462.1[M+H]+。
第二步：2-((2,4-二甲氧苄基)氨基)嘧啶-4-硫醇酸钾的制备
将2-乙基己基3-((2-((2,4-二甲氧苄基)氨基)嘧啶-4-基)硫代)丙酸酯(1.0g，2.17mmol，1.0eq)溶于30mL乙醇中，加入叔丁醇钾(272mg，2.39mmol，1.1eq)，40℃搅拌1小时。将反应液浓缩至干，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):278.1[M+H]+。
第三步：3-((S)-1-(((S)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((2-((2,4-二甲氧苯基)氨基)嘧啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯的制备
将2-((2,4-二甲氧苄基)氨基)嘧啶-4-硫醇酸钾(260mg，0.82mmol，1.0eq)、乙基6-溴-3-((S)-1-(((R)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-5-甲基吡嗪-2-羧酸酯(450mg，0.82mmol，1.0eq)溶于5mL DMF中，置于微波反应管中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(73mg，0.08mmol，0.1eq)、Xantphos(100mg，0.16mmol，0.2eq)以及DIPEA(320mg，2.5mmol，3.0eq)，氮气鼓泡3分钟。将反应液微波加热至90℃反应1小时；待反应液冷却至室温后，用20mL乙酸乙酯稀释，用硅藻土过滤后，滤液旋干柱层析(10～80％乙酸乙酯/石油醚)，得黄色固体产物3-((S)-1-(((S)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((2-((2,4-二甲氧苯基)氨基)嘧啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(270mg，产率44％)。
MS m/z(ESI):746.1[M+H]+。
第四步：(S)-N-((S)-1'-(5-((2-((2,4-二甲氧苯基)氨基)嘧啶-4-基)硫代)-3-(羟甲基)-6-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
将3-((S)-1-(((S)-叔-丁基亚硫酰基<亚磺酰>)氨基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((2-((2,4-二甲氧苯基)氨基)嘧啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-羧酸乙酯(270mg，0.36mmol，1.0eq)溶于20mL THF中，冰浴下滴加四氢铝锂的THF溶液(0.34mL，0.8mmol，2.2eq)。氮气保护下0℃搅拌1小时。向反应液中加入Na2SO4.10H2O淬灭反应，搅拌10分钟，用20mL乙酸乙酯稀释，用硅藻土过滤后，滤液旋干柱层析柱层析(1～10％MeOH inCH2Cl2)，得黄色固体(S)-N-((S)-1'-(5-((2-((2,4-二甲氧苯基)氨基)嘧啶-4-基)硫代)-3-(羟甲基)-6-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(160mg，产率64％)。
MS m/z(ESI):704.1[M+H]+。
第五步：(S)-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((2-氨基嘧啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
将(S)-N-((S)-1'-(5-((2-((2,4-二甲氧苯基)氨基)嘧啶-4-基)硫代)-3-(羟甲基)-6-甲基吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(100mg，0.15mmol，1.0eq)溶于5mL三氟乙酸中，60℃搅拌6小时。将反应液浓缩至干，用5mL甲醇溶解后，用7M的NH3的甲醇溶液调节pH至碱性，将此反应液旋干后柱层析(5～10％MeOHin CH2Cl2)，得白色固体目标产物(S)-(3-(1-氨基-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-基)-6-((2-氨基嘧啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇(3mg，产率5％)。
MS m/z(ESI):450.1[M+H]+。
实施例184
(S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-3-氟吡嗪-2-基)-2-甲基-8-氮杂螺
[4.5]癸-2-烯-1-胺的制备
实施例184的制备方法参考实施例179实验方案。
MS m/z(ESI):436.1[M+H]+,438.1[M+2+H]+.
实施例185
(S)-(3-(1-氨基-2-环丙基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-基)-6-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)-5-甲基吡嗪-2-基)甲醇的制备
实施例184的制备方法参考实施例183实验方案。
MS m/z(ESI):473.1[M+H]+,475.1[M+2+H]+.
实施例186
(S)-1'-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺的制备
实施例186的制备方法参考实施例179实验方案。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.66–7.54(m,2H),7.42–7.33(m,1H),7.29–7.16(m,3H),5.93(d,J＝5.5Hz,1H),4.37–4.19(m,2H),3.98(s,1H),3.29–3.20(m,2H),3.15(d,J＝16Hz,1H),2.83(d,J＝16Hz,1H),1.91–1.68(m,2H),1.65–1.53(m,1H),1.50–1.39(m,1H).
MS m/z(ESI):454.1[M+H]+,456.1[M+2+H]+.
生物学测试评价
以下结合测试例进一步描述解释本发明，但这些实施例并非意味着限制本发明的范围。
测试例1、本发明化合物对SHP-2激酶活性抑制作用的测定
实验目的：
本测试的目的是测量化合物对SHP-2全长蛋白变构活性的抑制能力。
实验仪器：离心机(5810R)购自Eppendorf公司，移液器购自Eppendorf或Rainin公司，酶标仪购自美国BioTek公司，型号为SynergyH1全功能酶标仪。
实验方法：使用Homogeneous Full Length SHP-2Assay Kit(BPS Bioscience，#79330)进行体外SHP-2活性检测。首先在96孔低吸附微孔板(NUNC，#267342)中加入18μL的Master Mix，即在终浓度为1×的反应缓冲液中包含0.5μM的SHP-2activating Peptide和5mM的DTT，离心后再加入每孔5μL的待测化合物/DMSO(终DMSO含量为1％，V/V，将待测化合物在DMSO中溶解成1mM，进行三倍系列稀释，10个浓度，反应体系终浓度范围从1μM至0.05nM)，将SHP-2在1×的反应缓冲液中稀释至终浓度为0.06nM后，加入反应微孔板中，每孔2μL，在反应板上设置全活性对照(化合物只加DMSO)和全抑制对照(不加SHP-2)离心后在室温下孵育该反应混合物60分钟。
孵育结束后，加入每孔25μL的Substrate solution，包含终浓度为10μM的Substrate和5mM的DTT，离心后室温继续孵育30分钟。反应结束后，在Synergy H1全功能酶标仪(Biotek)酶标仪上设置激发波长340nm，发射波长455nM，增益值75进行读数。
实验数据处理方法：
根据全活性对照和全抑制对照作为Max和Min的数值，通过反应板上阳性对照孔(DMSO对照孔)和阴性对照孔(不添加激酶)计算使用化合物处理的孔的百分比抑制比率数据{％抑制率＝100-[(测试化合物-Min平均值)/(Max平均值-Min平均值)]×100}。使用GraphPad prism拟合百分比抑制率和十点浓度数据至4参数非线性逻辑公式计算出测试化合物的IC50值。
实验结论：
通过以上方案得出本发明所示的实施例化合物在SHP-2激酶活性试验中显示出如下表1的生物活性，
表1：化合物对SHP-2激酶活性抑制相对IC50值
以上数据显示，本发明所示的实施例化合物在SHP-2激酶活性抑制方面具有良好的活性。
测试例2、本发明化合物对KYSE520细胞增殖抑制活性的测定
该测试例的目的是为了测定本发明中的化合物对肿瘤细胞增殖活性的抑制作用。化合物对肿瘤细胞增殖抑制活性通过CellTiter-Glo的方法进行测定，并得出化合物抑制细胞增殖活性的半数抑制浓度IC50。在96孔细胞培养板(Corning，#3610)中每孔接种2000个细胞，90μL的细胞悬液，将培养板于培养箱培养过夜(37℃，5％CO2)。次日向培养板细胞中加入梯度稀释的待测化合物溶液(终DMSO含量为0.1％，V/V，反应体系终浓度范围从100μM至45nM)，每孔10μL。同时在反应板上设置全活性对照(化合物只加DMSO)和全抑制对照(不加细胞)，将培养板在培养箱孵育3天(37℃，5％CO2)。
孵育结束后在细胞培养板中每孔加入50μL CellTiter-Glo试剂，室温静置10分钟。于Synergy H1全功能酶标仪(Biotek)酶标仪上读取化学发光信号值。根据全活性对照和全抑制对照作为Max和Min的数值，计算使用化合物处理的孔的百分比抑制比率数据{％抑制率＝100-[(测试化合物-Min平均值)/(Max平均值-Min平均值)]×100}。使用GraphPadprism拟合百分比抑制率和8点浓度数据至4参数非线性逻辑公式计算出测试化合物的IC50值。
通过以上方案得出：本发明所示的化合物在KYSE520细胞增殖抑制活性试验中显示出约0.1nM至200nM(IC50)的生物活性。
在一些实施方案中，本发明的化合物对于KYSE520细胞增殖抑制活性的IC50小于约200nM、优选化合物小于约100nM、进一步优选小于约10nM、更优选小于约1nM，本发明所列示的化合物中最优选小于1nM。
测试例3、本发明化合物对NCI-H358细胞增殖抑制活性的测定
实验目的：该测试例的目的是为了测定本发明中的化合物对肿瘤细胞增殖活性的抑制作用。
实验仪器：离心机(5810R)购自Eppendorf公司，二氧化碳培养箱购自Thermo公司，生物安全柜购自上海博讯公司，移液器购自Eppendorf或Rainin公司，酶标仪购自美国BioTek公司，型号为SynergyH1全功能酶标仪。
实验方法：在96孔细胞培养板(Corning，#3610)中每孔接种3000个细胞，90μL的细胞悬液，将培养板于培养箱培养过夜(37℃，5％CO2)。次日向培养板细胞中加入梯度稀释的待测化合物溶液(终DMSO含量为0.2％，V/V，反应体系终浓度范围从10μM至4.5nM)，每孔10μL。同时在反应板上设置全活性对照(化合物只加DMSO)和全抑制对照(不加细胞)，将培养板在培养箱孵育3天(37℃，5％CO2)。
孵育结束后在细胞培养板中每孔加入50μL CellTiter-Glo试剂，室温静置10分钟。于Synergy H1全功能酶标仪(Biotek)酶标仪上读取化学发光信号值。根据全活性对照和全抑制对照作为Max和Min的数值，计算使用化合物处理的孔的百分比抑制比率数据{％抑制率＝100-[(测试化合物-Min平均值)/(Max平均值-Min平均值)]×100}。使用GraphPadprism拟合百分比抑制率和8点浓度数据至4参数非线性逻辑公式计算出测试化合物的IC50值。
实验数据处理方法：
通过于板上溶媒对照孔计算使用实施例化合物处理的孔的百分比抑制数据{％抑制率＝100-(测试化合物值/溶媒对照值)×100}。使用GraphPad prism拟合不同浓度和相应百分比抑制率数据至4参数非线性逻辑公式计算出IC50值。
实验结论：
通过以上方案得出本发明所示的实施例化合物对NCI-H358细胞的增殖抑制的活性试验中显示出如下表2的生物活性。
表2：化合物对NCI-H358细胞增殖抑制活性的IC50值
以上数据显示，本发明所示的实施例化合物在NCI-H358细胞增殖抑制活性方面具有良好的活性。
测试例4、小鼠药代动力学测定
4.1.研究目的：
以Balb/c小鼠为受试动物，研究化合物实施例144、实施例171、实施例179、实施例180和实施例181，口服给药在小鼠体内(血浆)的药代动力学行为。
4.2.试验方案
4.2.1试验药品：
本发明实施例144、实施例171、实施例179、实施例180和实施例181，自制；
4.2.2试验动物：
Balb/c小鼠，雄性，购自上海杰思捷实验动物有限公司，动物生产许可证号(SCXK(沪)2013-0006N0.311620400001794)。
4.2.3药物配制：
称取5g羟乙基纤维素(HEC，CMC-Na，粘度：800-1200Cps)，溶于1000mL纯净水，加入10g Tween80。混合均匀成澄清溶液。
称取1.2mg实施例144，实施例171，实施例179，实施例180和实施例181，分别加入4-mL玻璃瓶，加入2.4mL该溶液，超声10分钟，得到无色澄清溶液，浓度为0.5mg/mL。
4.2.4给药：
Balb/c小鼠，雄性；禁食一夜后分别口服给药，剂量为5mg/kg，给药体积10mL/kg。
4.2.5样品采集：
于给药前和给药后0.25h、0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、24h采血，血液置于EDTA-2K试管中，4℃6000rpm离心6min分离血浆，于负80℃保存；给药后4h进食。
4.2.6测定结果：
应用LCMS/MS方法得到最后测定结果见表3
表3：化合物的小鼠药代动力学参数
以上数据显示：5mg/kg剂量下，本发明实施例化合物显示出良好的代谢活性。
测试例5、大鼠药代动力学测定
5.1.研究目的：
以SD大鼠为受试动物，研究实施例144、实施例171、实施例180、实施例179、实施例181和实施例186，口服给药在大鼠体内(血浆)的药代动力学行为。
5.2.试验方案
5.2.1试验药品：
本发明实施例144、实施例171、实施例179、实施例180、实施例181和实施例186，自制。
5.2.2试验动物：
SD大鼠每组3只，雄性。上海杰思捷实验动物有限公司，动物生产许可证号(SCXK(沪)2013-0006N0.311620400001794)。
5.2.3药物配制：
称取5g羟乙基纤维素(HEC，CMC-Na，粘度：800-1200Cps)，溶于1000mL纯净水，加入10g Tween80。混合均匀成澄清溶液。
称取3.9mg实施例144，实施例171，实施例179，实施例180，实施例181和实施例186，分别溶于该溶液中，摇匀，超声15分钟，得到无色澄清溶液，浓度为0.5mg/mL。
5.2.4给药：
SD大鼠每组3只，雄性，禁食一夜后分别口服给药，剂量为5mg/kg，给药体积10mL/kg。
5.2.5样品采集：
于给药前和给药后0.5h,1.0h,2.0h,4.0h,6.0h,8.0h,24.0h颈静脉采血0.2mL，置于EDTA-2K试管中，4℃6000rpm离心6min分离血浆，于-80℃保存；给药后4h进食。
5.3实验结果：应用LCMS/MS方法得到最后测定结果，见表4
表4：本发明化合物的大鼠药代动力学参数
实验结论：表中数据显示，在口服给药剂量为5mg/kg时，本发明的实施例化合物在大鼠血浆中都达到相对较高的暴露量；另外，实施例186在大鼠药代动力学实验中观察到肛周污染，说明实施例186有胃肠道毒性。
测试例6、MiaPaca 2移植瘤模型上对肿瘤的抑制实验
6.1实验目的：
以BALB/c裸小鼠为受试动物，采用人胰腺癌细胞MiaPaca 2异种移植瘤(CDX)模型进行体内药效实验，评价受试化合物抗肿瘤作用。
6.2实验仪器与试剂：
6.2.1仪器：
超净工作台(BSC-1300II A2，上海博讯实业有限公司医疗设备厂)
CO2培养箱(Thermo-311，Thermo)
离心机(Centrifuge 5720R，Eppendorf)
全自动细胞计数仪(Countess II，Life Technologies)
移液器(10-20μL，Eppendorf)
显微镜(Ts 2，尼康)
游标卡尺(CD-6”AX，日本三丰)
细胞培养瓶(T25/T75/T225，Corning)
恒温水槽(HWS12，上海一恒科学)
6.2.2试剂：
DMEM(11995-065，Gibco)
胎牛血清(FBS)(10091-148，Gibco)
0.25％胰蛋白酶(25200-056，Gibco)
青链霉素双抗(P/S)(SV30010，GE)
磷酸盐缓冲液(PBS)(10010-023，Gibco)
Matrigel(356234，Corning)
Gln(25030-081，Gibco)
6.3实验操作：
从细胞库中取出MiaPaca 2细胞，复苏后加入DMEM培养基(含10％FBS、1％Glu、1％P/S)置于CO2培养箱中培养(培养箱温度为37℃，CO2浓度为5％)。待细胞铺满培养瓶底部80-90％后传代，传代后细胞继续置于CO2培养箱中培养。重复该过程直到细胞数满足体内药效接种需求量，开始收集对数生长期的细胞，用全自动细胞计数仪计数，根据计数结果用PBS和Matrigel(体积比为1：1)重悬细胞，制成细胞悬液(密度8×107/ml)，置于冰盒中待用。
使用动物为BALB/c裸小鼠，雌性，6-8周龄，体重约为18-22克。将小鼠保持在一个无特殊病原体的环境中，且在单个通风笼中，每笼5只小鼠。所有的笼子、垫料和水在使用前进行消毒，所有动物可以自由获取标准认证的商业实验室饮食。实验开始前用一次性大小鼠通用耳标标记裸鼠，接种前用75％医用酒精消毒接种部位皮肤，每只小鼠在右后背皮下接种0.1ml(含8*106个细胞)MiaPaca2肿瘤细胞。当平均肿瘤体积达到100-200mm3时开始分组给药。受试化合物每日经口灌胃给药，给药剂量、给药频次及实验结束时各组药效情况见表5。每周两次用游标卡尺测量肿瘤体积(mm3)，计算公式为：V＝0.5*D*d*d，其中D和d分别是肿瘤的长径和短径。抗肿瘤药效是通过化合物处理过的动物的平均肿瘤增加体积除以未处理过动物的平均肿瘤增加体积来确定。抑瘤率计算公式为：TGI(％)＝1-[(Vt-V0)给药组/(Vt-V0)溶剂对照组]*100％。实验结束后将所有动物安乐死。
6.4实验结果：
表5：化合物的移植瘤小鼠药效参数
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注：括号中的数据表示，该实施例对应Vehicle QD x 3w组(即对照组)在相应时间(即分别为0天和21天)的肿瘤体积
实验结论：以上数据显示，口服连续给药21天后，本发明实施例化合物在3-10mg/kg QD给药条件下都能显著抑制MiaPaca 2裸小鼠移植瘤生长。
测试例7、荷瘤小鼠药代动力学测定
7.1.研究目的:
以MiaPaca 2荷瘤小鼠为受试动物，研究化合物实施例化合物179在6mg/kg剂量下口服给药在小鼠体内(血浆，肿瘤组织和肠道)的药代动力学行为。
7.2.试验方案
7.2.1试验药品：
本发明实施例化合物179，自制。
7.2.2试验动物：
MiaPaca 2荷瘤小鼠24只，雌性。每个时间点3只(0h、1h、2h、4h、6h、8h、16h、24h)。上海西普尔-必凯实验动物有限公司，动物生产许可证号(SCXK(沪)2018-0006。
7.2.3药物配制：
称取5g羟甲基纤维素，溶于1000mL纯净水，加入10g Tween80。混合均匀成澄清溶液。
称取4.57mg实施例化合物179，22.6mg溶于该溶液中，摇匀，超声15分钟，得到均匀混悬液，浓度为0.6mg/mL。
7.2.4给药：
MiaPaca 2荷瘤小鼠禁食后分别按体重p.o.(0h点动物不给药)，剂量为6mg/kg，给药体积10mL/kg。
7.2.5样品采集：
小鼠给药前和给药后，CO2处死，心脏采血0.5ml，置于EDTA-2K试管中，4℃6000rpm离心6min分离血浆，于-80℃保存；肿瘤组织称重后，置于2mL离心管中，于-80℃保存。十二指肠、回肠、结肠组织取适量长度用剪刀剪开，去除内容物并用PBS清洗2遍，用吸水纸吸干水分后称重，置于2mL离心管中，于-80℃保存。
7.3实验结果：应用LCMS/MS方法得到最后测定结果，见表6：
表6：本发明化合物的小鼠药代动力学参数
实验结论：如表中数据所显示，6mg/kg剂量下，本发明实施例化合物在小鼠肿瘤里的暴露量达到很高的水平，在肿瘤里的暴露量明显高于血液里。而从Tmax和MRT可以看出来，化合物在肿瘤里的浓度是一个逐渐增加的过程，而且T1/2更长，说明化合物会逐渐蓄积在肿瘤里，并一直在肿瘤里保持较高的浓度，从而保证更好的抑瘤效果。
测试例8、hERG钾离子通道抑制活性测试
8.1细胞准备
8.1.1CHO-hERG细胞培养于175cm2培养瓶中，待细胞密度生长到60～80％，移走培养液，用7mL PBS洗一遍，然后加入3mL Detachin消化。
8.1.2待消化完全后加入7mL培养液中和，然后离心，吸走上清液，再加入5mL培养液重悬，以确保细胞密度为2～5×106/mL。
8.2溶液配制
表7：细胞内液和外液的组成成分
8.3电生理记录过程
单细胞高阻抗封接和全细胞模式形成过程全部由Qpatch仪器自动完成，在获得全细胞记录模式后，细胞钳制在-80毫伏，在给予一个5秒的+40毫伏去极化刺激前，先给予一个50毫秒的-50毫伏前置电压，然后复极化到-50毫伏维持5秒，再回到-80毫伏。每15秒施加此电压刺激，记录2分钟后给予细胞外液记录5分钟，然后开始给药过程，化合物浓度从最低测试浓度开始，每个测试浓度给予2.5分钟，连续给完所有浓度后，给予阳性对照化合物3MCisapride。每个浓度至少测试3个细胞(n≥3)。
8.4化合物准备
8.4.1将20mM的化合物母液用细胞外液进行稀释，取5μL 20mM的化合物母液加入2495μL细胞外液，500倍稀释至40μM，然后在含0.2％DMSO的细胞外液中依次进行3倍连续稀释得到需要测试的最终浓度。
8.4.2最高测试浓度为40μM，依次分别为40，13.33，4.44，1.48，0.49，0.16μM共6个浓度。
8.4.3最终测试浓度中的DMSO含量不超过0.2％，此浓度的DMSO对hERG钾通道没有影响。
8.5数据分析
实验数据由XLFit软件进行分析。
8.6质量控制
环境：湿度20～50％，温度22～25℃
试剂：所用实验试剂购买于Sigma公司，纯度>98％
报告中的实验数据必须满足以下标准：
全细胞封接阻抗>100MΩ
尾电流幅度>400pA
药理学参数：
多浓度Cisapride对hERG通道的抑制效应设为阳性对照。
8.7实验结果
实施例化合物在多浓度对hERG电流的抑制结果：
表8：实施例在多浓度对hERG电流的抑制结果
实施例编号 hERG(uM)
实施例96 5.24
实施例143 6.17
实施例144 2.34
实施例171 18.78
实施例179 4.51
实施例181 21.91
实验结论：药物对于心脏hERG钾离子通道的抑制是药物导致QT延长综合症的主要原因。从实验结果可以看出，本发明实施例化合物对于心脏hERG钾离子通道没有明显抑制作用，可以避免高剂量时的心脏毒副作用。
测试例9、小鼠药代动力学测定
9.1.研究目的：
以Balb/c Mouse为受试动物，研究化合物实施例179和实施例186，单次静脉注射给药在Mouse体内(血浆)的药代动力学行为。
9.2.试验方案
9.2.1试验药品：
本发明实施例179和实施例186，自制；
9.2.2试验动物：
Balb/c小鼠，雄性，购自上海杰思捷实验动物有限公司，动物生产许可证号(SCXK(沪)2013-0006N0.311620400001794)。
9.2.3药物配制：
含10％Solutol HS15水溶液：取Solutol HS15 10g，加入注射用纯化水，搅拌使溶解后，用注射用纯化水稀释至100mL，摇匀，即得；
含20％HP-β-CD水溶液：取HP-β-CD 20g，加入注射用纯化水，搅拌使溶解后，用注射用纯化水稀释至100mL，摇匀，即得；
混合0.5ml的DMSO，8.5mL的20％HP-β-CD水溶液和1mL的10％Solutol HS15水溶液，摇匀，得澄清溶液。
称取0.234mg实施例179和实施例186，加入1.17mL的该溶液，超声使溶解，得澄清溶液，用0.22μm的水系滤器过滤，取滤液为iv给药制剂。浓度为0.2mg/mL。
9.2.4给药：
Balb/c Mouse，雄性；禁食一夜后分别静脉注射给药，剂量为1mg/kg，给药体积5mL/kg。
9.2.5样品采集：
于给药前和给药后0min,5min，15min,0.5h,1.0h,2.0h,4.0h,8.0h,24.0h采血，血液置于EDTA-2K试管中，4℃6000rpm离心6min分离血浆，于负80℃保存；给药后4h进食。
9.3实验结果：应用LCMS/MS方法得到最后测定结果见表9
表9：化合物的小鼠药代动力学参数
实验结论：1mg/kg剂量下，本发明实施例化合物在小鼠体内显示出良好的代谢特征。
测试例10、大鼠药代动力学测定
10.1.研究目的：
以SD大鼠为受试动物，研究实施例179和实施例186，单次静脉注射给药在大鼠体内(血浆)的药代动力学行为。
10.2.试验方案
10.2.1试验药品：
本发明实施例179和实施例186，自制。
10.2.2试验动物：
SD大鼠每组3只，雄性。上海杰思捷实验动物有限公司，动物生产许可证号(SCXK(沪)2013-0006N0.311620400001794)。
10.2.3药物配制：
含10％Solutol HS15水溶液：取Solutol HS15 10g，加入注射用纯化水，搅拌使溶解后，用注射用纯化水稀释至100mL，摇匀，即得；
含20％HP-β-CD水溶液：取HP-β-CD 20g，加入注射用纯化水，搅拌使溶解后，用注射用纯化水稀释至100mL，摇匀，即得；
混合0.5mL的DMSO，8.5mL的20％HP-β-CD水溶液和1mL的10％Solutol HS15水溶液，摇匀，得澄清溶液。
称取0.78mg实施例179和实施例186，加入3.9mL的该溶液，超声使溶解，得澄清溶液，用0.22μm的水系滤器过滤，取滤液为iv给药制剂。浓度为0.2mg/mL。
10.2.4给药：
SD大鼠每组3只，雄性，禁食一夜后分别静脉注射给药，剂量为1mg/kg，给药体积5mL/kg。
10.2.5样品采集：
于给药前和给药后0min,5min,15min,0.5h,1.0h,2.0h,4.0h,8.0h,24.0h颈静脉采血0.2mL，置于EDTA-2K试管中，4℃ 6000rpm离心6min分离血浆，于-80℃保存；给药后4h进食。
10.3实验结果：应用LCMS/MS方法得到最后测定结果，见表10
表10：本发明化合物的大鼠药代动力学参数
实验结论：1mg/kg剂量下，本发明实施例化合物在大鼠体内显示出良好的代谢特征。
测试例11、小鼠耐受性测定
11.1.研究目的：
以Balb/c小鼠为受试动物，研究化合物实施例179和实施例186，口服给药在雌雄小鼠中的耐受性。
11.2.试验方案
11.2.1试验药品：
本发明实施例179和实施例186，自制；
11.2.2试验动物：
Balb/c小鼠，雄性9只，雌性9只，购自上海杰思捷实验动物有限公司，动物生产许可证号(SCXK(沪)2013-0006N0.311620400001794)。
11.2.3药物配制：
称取5g羟乙基纤维素(HEC，CMC-Na，粘度：800-1200Cps)，溶于1000mL纯净水，加入10g Tween80。混合均匀成澄清溶液。
称取41.0mg实施例179和25.9mg实施例186，分别加入100-mL玻璃瓶，加入41.0mL和25.9mL该溶液，超声10分钟，得到无色澄清溶液，浓度为1mg/mL。
11.2.4给药：
Balb/c小鼠，雄性3只，雌性3只；禁食一夜后分别口服给药，剂量为10mg/kg，给药体积10mL/kg。
11.2.5数据收集：
于给药前和给药后每天称量小鼠体重，观察异常反应；给药后4h进食。
11.2.6测定结果：
应用天平称量得到最后结果见表11。
表11：小鼠体重变化对比
实验结论：以上数据显示，10mg/kg剂量下，本发明实施例化合物显示出良好的小鼠耐受性，而实施例186表现出稀便，便血，体重明显下降等特征，耐受性较差。
总之，本发明提供了一系列具有新颖结构的高活性，高选择性SHP2激酶抑制剂；在大鼠和小鼠上都显示出很好的药代动力学性质，在Miapaca2荷瘤小鼠模型上也体现出了良好的药效；有很大的潜力被开发成针对肿瘤类疾病的单药或联合用药类药物。

Claims (11)

1.一种如通式(XII)所示的化合物或其药学上可接受盐：
其中：
环C选自
R1选自氟或羟甲基；
R5选自氨基或甲基；
R10选自氢；
R12选自氯；
R13选自氨基；
z为0。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受盐，其特征在于，所述化合物进一步如通式(XII-B)所示：
其中：
E选自S；
R14选自氢；
R1、R5和R12～R13如权利要求1所述。
3.根据权利要求1～2中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，具体化合物如下所示：
4.一种制备权利要求1所述的化合物或其药学上可接受盐的方法，其特征在于，包含以下步骤：
通式(XII-a)发生取代反应，得到通式(XII)所示化合物或其药学上可接受盐；
任选地，还包括以下步骤：
通式(XII-b)脱保护，得到通式(XII-a)所示化合物或其药学上可接受盐；
任选地，还包括以下步骤：
通式(XII-c)与通式(XII-d)反应，得到通式(XII-b)所示化合物或其药学上可接受盐；
其中：
环C、R1、R5、R10、R12、R13和z如权利要求1所述；Pg为氨基保护基，选自叔丁基亚磺酰基、苄氧羰基、叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、苄基、对甲氧基苄基、烯丙氧羰基、三苯甲基或邻苯二甲酰基；
X选自卤素。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，
Pg为叔丁基亚磺酰基；
X选自氟、氯、溴或碘。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，
X选自氯。
7.一种药物组合物，其包括治疗有效剂量的权利要求1～3中任一项所示的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述的载体为稀释剂或赋形剂。
9.根据权利要求1～3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或权利要求7所述的药物组合物在制备SHP-2抑制剂药物中的应用。
10.根据权利要求1～3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或权利要求7所述的药物组合物在制备治疗努南氏症候群、豹皮症候群、白血病、神经母细胞瘤、黑色素瘤、食管癌、头颈部肿瘤、乳腺癌、肺癌或结肠癌疾病或病症的用途。
11.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，所述的疾病或病症选自非小细胞肺癌、食管癌或头颈部肿瘤。
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