CN115236231B - 一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法 - Google Patents

一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法 Download PDF

Info

Publication number
CN115236231B
CN115236231B CN202210863030.XA CN202210863030A CN115236231B CN 115236231 B CN115236231 B CN 115236231B CN 202210863030 A CN202210863030 A CN 202210863030A CN 115236231 B CN115236231 B CN 115236231B
Authority
CN
China
Prior art keywords
fmoc
propionic acid
mobile phase
peg
sample
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210863030.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN115236231A (zh
Inventor
舒娟
唐灿
徐春梅
牟心
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chengdu Pukang Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Chengdu Pukang Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chengdu Pukang Biotechnology Co ltd filed Critical Chengdu Pukang Biotechnology Co ltd
Priority to CN202210863030.XA priority Critical patent/CN115236231B/zh
Publication of CN115236231A publication Critical patent/CN115236231A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN115236231B publication Critical patent/CN115236231B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/42—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the development mode, e.g. by displacement or by elution
    • B01D15/424—Elution mode
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
    • G01N2030/027—Liquid chromatography
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种Fmoc‑NH‑PEGn‑丙酸同系物的分离方法，属于医药原料检测技术领域。该方法包括：按以下条件对含Fmoc‑NH‑PEGn‑丙酸同系物的待测样品进行分离：色谱柱：Agilent ZORBAX SB‑C18；流动相：流动相A和B分别为高氯酸‑水溶液和甲醇‑水溶液；洗脱时间及流动相A的体积含量为：0～3min，38～42％；3～12min，38～42％至25～30％；12～30min，25～30％；30～40min，25～30％至0％；40～50min，0％。该方法能使待测样品中的Fmoc‑NH‑PEGn‑丙酸同系物得到有效分离，检测灵敏度好，有利于更好地控制同系物含量和纯度。

Description

一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法
技术领域
本发明涉及医药原料检测技术领域，具体而言，涉及一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法。
背景技术
就Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物(n＝1,2,…,12)而言，该品种常含有同系物杂质，干扰产品纯度和收率，同时对下游产品中的杂质谱产生影响。
目前有关上述物质的检测方法主要是依据《中国药典》2020版四部通则，没有对其同系物进行分离检测。
但该品种同系物之间极性十分相近，在色谱柱中吸附能力相当，分离难度较大。目前还没有能够使该品种同系物间有效分离，且灵敏度较高的分离方法。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法，以解决上述技术问题。
本申请可这样实现：
本申请提供一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法，包括以下步骤：
按以下高效液相色谱条件对含Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的待测样品进行分离：
色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18；
流动相：流动相A为高氯酸-水溶液，流动相B为甲醇-水溶液；其中，高氯酸-水溶液中高氯酸的体积百分数为0.05～0.15％，甲醇-水溶液中甲醇的体积百分数为88～92％；
洗脱程序为：洗脱时间及洗脱时间内流动相A的体积含量如下：0～3min，38～42％；3～12min，38～42％至25～30％；12～30min，25～30％；30～40min，25～30％至0％；40～50min，0％。
在可选的实施方式中，洗脱程序还包括：洗脱时间及洗脱时间内流动相A的体积含量如下：50～60min，0％至38～42％。
在可选的实施方式中，分离过程中，洗脱流速为0.8～1.2mL/min。
在可选的实施方式中，分离过程中，柱温为25～40℃。
在可选的实施方式中，分离过程中，检测波长为210～230nm。
在可选的实施方式中，分离过程中，进样量为5～20μL。
在可选的实施方式中，分离过程中，待测样品的进样浓度为0.5～4mg/mL。
在可选的实施方式中，待测样品经稀释剂稀释后至预设浓度后再进样。
在可选的实施方式中，稀释剂包括乙腈或甲醇。
在可选的实施方式中，待测样品中同时含有Fmoc-NH-PEG1-丙酸、Fmoc-NH-PEG2-丙酸、Fmoc-NH-PEG3-丙酸、Fmoc-NH-PEG4-丙酸、Fmoc-NH-PEG5-丙酸、Fmoc-NH-PEG6-丙酸、Fmoc-NH-PEG7-丙酸、Fmoc-NH-PEG8-丙酸、Fmoc-NH-PEG9-丙酸、Fmoc-NH-PEG10-丙酸、Fmoc-NH-PEG11-丙酸以及Fmoc-NH-PEG12-丙酸中的至少2种。
本申请的有益效果包括：
本申请提供的分离方法，通过使用特定的色谱柱、流动相和洗脱程序，能够使Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物(n＝1至12)间分离度达到1.0以上，实现各同系物的完全分离，具有良好的专属性，便于判断产品中含有同系物杂质类型。检测过程对应的色谱峰峰形对称，无明显拖尾。并且，该方法操作简便，耗时短，成本低，能够在较短时间内检测出样品中上述同系物杂质的情况，为产品生产工艺控制同系物杂质提供数据依据，有利于控制产品质量。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本申请实施例1中杂质混合溶液的色谱图；
图2为本申请对比例1中杂质混合溶液的色谱图；
图3为本申请对比例2中供试品溶液的色谱图；
图4为本申请对比例3中杂质混合溶液的色谱图；
图5为本申请对比例4中杂质混合溶液的色谱图；
图6为本申请对比例5中杂质混合溶液的色谱图；
图7为本申请对比例6中杂质混合溶液的色谱图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本申请提供的Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法进行具体说明。
本申请提出Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法，待测样品中含有Fmoc-NH-PEG1-丙酸、Fmoc-NH-PEG2-丙酸、Fmoc-NH-PEG3-丙酸、Fmoc-NH-PEG4-丙酸、Fmoc-NH-PEG5-丙酸、Fmoc-NH-PEG6-丙酸、Fmoc-NH-PEG7-丙酸、Fmoc-NH-PEG8-丙酸、Fmoc-NH-PEG9-丙酸、Fmoc-NH-PEG10-丙酸、Fmoc-NH-PEG11-丙酸以及Fmoc-NH-PEG12-丙酸中的至少2种。
也即，无论待测样品中含有2种、3种、4种或更多种上述Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物，本申请提供的方法均可对待测样品中含有的所有Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物进行有效分离。
具体的，本申请提供的分离方法包括以下步骤：
按以下高效液相色谱条件对含Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的待测样品进行分离：
色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18；
流动相：流动相A为高氯酸-水溶液，流动相B为甲醇-水溶液；其中，高氯酸-水溶液中高氯酸的体积百分数为0.05～0.15％，甲醇-水溶液中甲醇的体积百分数为88～92％；
洗脱程序为：洗脱时间及洗脱时间内流动相A的体积含量如下：0～3min，38～42％；3～12min，38～42％至25～30％；12～30min，25～30％；30～40min，25～30％至0％；40～50min，0％。
在一些优选的实施方式中，洗脱程序为：洗脱时间及洗脱时间内流动相A的体积含量如下：0～3min，40％；3～12min，40％至28％；12～30min，28％；30～40min，28％至0％；40～50min，0％。
相应地，洗脱时间及洗脱时间内流动相B的体积含量如下：0～3min，60％；3～12min，60％至72％；12～30min，72％；30～40min，72％至100％；40～50min，100％。
进一步地，上述洗脱程序还包括：洗脱时间及洗脱时间内流动相A的体积含量如下：50～60min，0％至38～42％。
通过在50～60min进行上述洗脱，可确保上一次进样所残留的物质被冲洗干净，避免对下次进样分离造成不利影响。
本申请分离过程中，洗脱流速例如可设置为0.8～1.2mL/min，如0.8mL/min、0.9mL/min、1mL/min、1.1mL/min或1.2mL/min等，也可以为0.8～1.2mL/min范围内的其它任意值。优选为1mL/min。
柱温例如可设置为25～40℃，如25℃、28℃、30℃、32℃、35℃、38℃或40℃等，也可以为25～40℃范围内的其它任意值。
检测波长例如可设置为210～230nm，如210nm、215nm、220nm、225nm或230nm等，也可以为210～230nm范围内的其它任意值。
进样量例如可以为5～20μL，如5μL、10μL、15μL或20μL等，也可以为5～20μL范围内的其它任意值。
相应地，待测样品的进样浓度可设置为0.5～4mg/mL，如0.5mg/mL、1mg/mL、1.5mg/mL、2mg/mL、2.5mg/mL、3mg/mL、3.5mg/mL或4mg/mL等，也可以为0.5～4mg/mL范围内的其它任意值。
作为参考地，上述进样浓度可由待测样品经稀释剂稀释而得。
其中，稀释剂可采用乙腈或甲醇，以获得良好的分离效果，避免出现峰拖尾等现象。
通过采用上述方法进行分离，Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物间分离度可达到1.0以上，具有良好的专属性，便于判断产品中含有同系物杂质类型。并且，该方法耗时短，成本低，能够在较短时间内检测出样品中同系物杂质的情况，为产品生产工艺控制同系物杂质提供数据依据，以便控制产品质量。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种含Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的待测样品进行分离。
待测样品为Fmoc-NH-PEG12-丙酸，其由本公司自行提供。进样前，用乙腈溶解并定量稀释制成每1mL中约含2.5mg的溶液，得到供试品溶液。
在此基础上，配制杂质混合溶液作为内标。
杂质混合溶液的配制方法如下：分别取Fmoc-NH-PEG1-丙酸、Fmoc-NH-PEG2-丙酸、Fmoc-NH-PEG3-丙酸、Fmoc-NH-PEG4-丙酸、Fmoc-NH-PEG5-丙酸、Fmoc-NH-PEG6-丙酸、Fmoc-NH-PEG7-丙酸、Fmoc-NH-PEG8-丙酸、Fmoc-NH-PEG9-丙酸、Fmoc-NH-PEG10-丙酸和Fmoc-NH-PEG11-丙酸适量作为杂质，用乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中各杂质分别约含2.5mg的混合贮备液；取Fmoc-NH-PEG12-丙酸25mg，置10mL量瓶中，加入1mL混合贮备液，用乙腈溶解并定容至刻度，摇匀，得杂质混合溶液。
色谱条件：采用Agilent ZORBAX SB-C18(250*4.6mm,5μm)作为色谱柱，以高氯酸体积百分数为0.1vt％的高氯酸-水溶液为流动相A，以己醇体积百分数为90vt％的甲醇-水为流动相B，进行梯度洗脱。柱温为30℃，检测波长为220nm，流速为1.0mL/min，进样量为10μL。
洗脱程序为：
0～3min，流动相A为40vt％，流动相B为60vt％；
3～12min，流动相A为40vt％至28vt％，流动相B为60vt％至72vt％；
12～30min，流动相A为28vt％，流动相B为72vt％；
30～40min，流动相A为28vt％至0vt％，流动相B为72vt％至100vt％；
40～50min，流动相A为0vt％，流动相B为100vt％；
51～60min，流动相A为0vt％至40vt％，流动相B为100vt％至60vt％。
检测：分别取乙腈(空白溶液)、杂质混合溶液、供试品溶液各10μL，分别注入色谱系统，记录色谱图，其中杂质混合溶液的色谱图如图1所示。各杂质含量和主峰纯度按面积归一化法计算，计算结果如表1所示，编号1至12分别代表Fmoc-NH-PEG1-丙酸、Fmoc-NH-PEG2-丙酸、Fmoc-NH-PEG3-丙酸、Fmoc-NH-PEG4-丙酸、Fmoc-NH-PEG5-丙酸、Fmoc-NH-PEG6-丙酸、Fmoc-NH-PEG7-丙酸、Fmoc-NH-PEG8-丙酸、Fmoc-NH-PEG9-丙酸、Fmoc-NH-PEG10-丙酸、Fmoc-NH-PEG11-丙酸和Fmoc-NH-PEG12-丙酸。
系统适用性要求：以杂质混合溶液考查系统适用性，各同系物杂质间分离度不得小于1.0(适应样品需求)。
表1计算结果
由图1和表1可以看出：该方法下同系物杂质间分离度均大于1.0，且峰型较好，说明本申请提供的方法能够将上述各同系物有效分离开。
对比例1
以实施例1的杂质混合溶液为例，本对比例将检测波长改变为200nm，其余检测条件不变。所得的色谱图如图2所示。
由图2可以看出，降低波长为200nm，基线噪音较大，掩盖部分杂质，该波长并不适宜本申请中各同系物的分离。
对比例2
以实施例1的杂质混合溶液为例，本对比例将流速改变为0.8mL/min，其余检测条件不变。所得的色谱图如图3所示。
由图3可以看出，减小流速后，主峰变宽，峰略拖尾，相邻杂质峰间分离度减小，该流速并不适宜本申请中各同系物的分离。
对比例3
以实施例1的杂质混合溶液为例，本对比例将洗脱程序改变成表2所示。杂质混合溶液配制方法如下：分别取杂质Fmoc-NH-PEG1-丙酸、Fmoc-NH-PEG2-丙酸、Fmoc-NH-PEG3-丙酸、Fmoc-NH-PEG4-丙酸、Fmoc-NH-PEG5-丙酸、Fmoc-NH-PEG6-丙酸、Fmoc-NH-PEG7-丙酸、Fmoc-NH-PEG8-丙酸、Fmoc-NH-PEG9-丙酸、Fmoc-NH-PEG10-丙酸和Fmoc-NH-PEG11-丙酸适量，用乙腈溶解并定量稀释制成每1mL中各杂质分别约含0.2mg的混合溶液。其余检测条件不变。所得的色谱图如图4所示。
表2洗脱程序
时间(min) 流动相A(vt％) 流动相B(vt％)
0 45 55
40 45 55
50 10 90
60 10 90
61 45 55
70 45 55
由图4可以看出：杂质个数与配制的溶液不一致，说明有部分杂质并未得到有效分离，也即该洗脱程序并不适宜本申请中各同系物的分离。
对比例4
以实施例1的杂质混合溶液为例，本对比例将杂质混合溶液中，各同系物间的浓度均配制成0.001mg/mL。
色谱条件：采用Agilent ZORBAX SB-C18(250*4.6mm,5μm)作为色谱柱，以0.1vt％三氟乙酸为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。
柱温为35℃，检测波长为220nm，流速为1.0mL/min，进样量为10μL。
洗脱程序：
0min时，流动相A为75vt％，流动相B为25vt％；
35～45min，流动相A为10vt％，流动相B为90vt％；
46～50min，流动相A为75vt％，流动相B为25vt％。
所得的色谱图如图5所示。
由图5可以看出，该方法基线不平，且各杂质间未完全分离，说明上述条件并不适宜本申请中各同系物的分离。
对比例5
以实施例1的杂质混合溶液为例，本对比例将杂质混合溶液中，各同系物间的浓度均配制成0.01mg/mL。
色谱条件：采用Agilent ZORBAX SB-C18(250*4.6mm,5μm)作为色谱柱，以0.1vt％三氟乙酸为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。
柱温为35℃，检测波长为220nm，流速为1.0mL/min，进样量为10μL。
洗脱程序为：
0min时，流动相A为25vt％，流动相B为75vt％；
15min时，流动相A为30vt％，流动相B为70vt％；
30min，流动相A为20vt％，流动相B为80vt％；
40～45min，流动相A为10vt％，流动相B为90vt％；
46～50min，流动相A为25vt％，流动相B为75vt％。
所得的色谱图如图6所示。
由图6可以看出，该方法基线不平，且各杂质间未完全分离，说明上述条件并不适宜本申请中各同系物的分离。
对比例6
以实施例1的杂质混合溶液为例，本对比例将杂质混合溶液中，各同系物间的浓度均配制成0.01mg/mL。
色谱条件：采用中谱红(250*4.6mm,5μm)作为色谱柱，以0.1vt％高氯酸为流动相A，以甲醇-水(体积比为95:5)为流动相B，进行梯度洗脱。
柱温为30℃，检测波长为220nm，流速为1.0mL/min，进样量为10μL。
洗脱程序为：
0～40min，流动相A为45vt％，流动相B为55vt％；
50～60min，流动相A为10vt％，流动相B为90vt％；
61～70min，流动相A为45vt％，流动相B为55vt％。
所得的色谱图如图7所示。
由图7可以看出，该方法下基线相对较平，各杂质间有分离趋势但仍未完全分离，说明上述条件也不适宜本申请中各同系物的分离。
综上，本申请提供的分离方法，能够使Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物间分离度可达到1.0以上，具有良好的专属性，便于判断产品中含有同系物杂质类型。并且，该方法耗时短，成本低，能够在较短时间内检测出样品中同系物杂质的情况，为产品生产工艺控制同系物杂质提供数据依据，以便控制产品质量。
以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：
按以下高效液相色谱条件对含Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的待测样品进行分离：
色谱条件：采用Agilent ZORBAX SB-C18作为色谱柱；色谱柱规格为250×4.6mm,5μm，以高氯酸体积百分数为0.1%的高氯酸-水溶液为流动相A，以甲醇体积百分数为90%的甲醇-水为流动相B，进行梯度洗脱；
柱温为30℃，检测波长为220nm，流速为1.0mL/min，进样量为10μL；
洗脱程序为：
0~3min，流动相A为40%，流动相B为60%；
3~12min，流动相A为40%至28%，流动相B为60%至72%；
12~30min，流动相A为28%，流动相B为72%；
30~40min，流动相A为28%至0%，流动相B为72%至100%；
40~50min，流动相A为0%，流动相B为100%；
51~60min，流动相A为0%至40%，流动相B为100%至60%；
待测样品的进样浓度为0.5~4mg/mL；
待测样品中同时含有Fmoc-NH-PEG1-丙酸、Fmoc-NH-PEG2-丙酸、Fmoc-NH-PEG3-丙酸、Fmoc-NH-PEG4-丙酸、Fmoc-NH-PEG5-丙酸、Fmoc-NH-PEG6-丙酸、Fmoc-NH-PEG7-丙酸、Fmoc-NH-PEG8-丙酸、Fmoc-NH-PEG9-丙酸、Fmoc-NH-PEG10-丙酸、Fmoc-NH-PEG11-丙酸以及Fmoc-NH-PEG12-丙酸中的至少2种。
2.根据权利要求1所述分离方法，其特征在于，待测样品经稀释剂稀释后至预设浓度后再进样。
3.根据权利要求2所述分离方法，其特征在于，所述稀释剂包括乙腈或甲醇。
CN202210863030.XA 2022-07-21 2022-07-21 一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法 Active CN115236231B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210863030.XA CN115236231B (zh) 2022-07-21 2022-07-21 一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210863030.XA CN115236231B (zh) 2022-07-21 2022-07-21 一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN115236231A CN115236231A (zh) 2022-10-25
CN115236231B true CN115236231B (zh) 2024-01-05

Family

ID=83675207

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210863030.XA Active CN115236231B (zh) 2022-07-21 2022-07-21 一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN115236231B (zh)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180016177A (ko) * 2016-08-05 2018-02-14 연세대학교 산학협력단 펩타이드-탄소나노튜브 복합체 및 이를 이용한 줄기세포 또는 전구세포로부터 신경세포로의 분화방법

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2954555A1 (en) * 2014-07-11 2016-01-14 The University Of Akron Composition and methods for tethering bioactive peptides to metal oxide surfaces

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180016177A (ko) * 2016-08-05 2018-02-14 연세대학교 산학협력단 펩타이드-탄소나노튜브 복합체 및 이를 이용한 줄기세포 또는 전구세포로부터 신경세포로의 분화방법

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Calmodulin EF-hand peptides as Ca21-switchable recognition tags;Akihiko Oku et al.;《Peptide Science》;第108卷;6页右栏至第7页左栏 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN115236231A (zh) 2022-10-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113390983B (zh) 一种同时测定富马酸伏诺拉生中3种杂质的检测方法
CN115236231B (zh) 一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法
CN110514759B (zh) 一种坎地沙坦酯中叠氮化合物的检测方法
CN117092251A (zh) 一种半胱氨酸原料中牛磺酸、磺基丙氨酸的检测方法及其应用
CN114965754B (zh) 对乙酰氨基酚片中有关物质及抑菌剂的检测方法
CN110865130B (zh) 一种盐酸奥洛他定及其有关物质的检测方法
CN116699013A (zh) 一种分离检测磷酸奥司他韦口崩片中相关杂质的方法
CN113759048A (zh) 一种十八烷二酸单叔丁酯检验方法
CN114280176B (zh) 一种hplc检测恶拉戈利中有关物质的方法
CN107782821B (zh) 一种神经肌肉阻滞剂的分析方法
CN114487164A (zh) 保护氨基酸与其n端脱掉保护基的杂质的分离检测方法
CN111812240B (zh) 一种缩宫素及三种杂质的分离方法和应用
CN111505154B (zh) 一种枸橼酸莫沙必利及其制剂中五种关键杂质的检测方法
CN113820417A (zh) 一种分离测定吡罗昔康及其杂质的方法
CN111044641B (zh) 羟基脲及其制剂的检测方法和应用
CN114295747B (zh) 一种帕拉米韦起始物料及杂质的分析方法
CN112213411B (zh) 一种双醋瑞因中基因毒性杂质的检测方法
CN115541755B (zh) 一种硝呋太尔片的质量控制方法
CN111896642B (zh) 一种缩宫素及三种脱酰胺杂质的分离方法和应用
CN110208434A (zh) 一种左奥硝唑有关物质的检测方法
CN110274966A (zh) 高效液相色谱法测定托伐普坦原料药中有关物质的方法
CN114371226B (zh) 一种分析检测精制左旋氨基物及其有关物质的方法
CN110850012B (zh) 一种1-(2,3-二氯苯基)哌嗪盐酸盐及其有关物质的检测方法
CN115326956B (zh) 一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方法
CN111579653B (zh) 氟康唑有关物质检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant