CN115201363B - 一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种检测1,8‑二氨基‑3,6‑萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，所述检测1,8‑二氨基‑3,6‑萘二磺酸含量的液相色谱分析方法包括以下步骤：将1,8‑二氨基‑3,6‑萘二磺酸标样配制成的标准工作溶液与1,8‑二氨基‑3,6‑萘二磺酸试样配制成的待测样品溶液，以甲醇和四丁基溴化铵‑乙酸铵水溶液为流动相进行HPLC检测，根据检测结果经过计算得到待测样品中1,8‑二氨基‑3,6‑萘二磺酸的含量。本发明的方法具有专属性好、灵敏度高，准确度、精密度高，回收率好等优点。
Description
技术领域
本发明属于分析化学领域，尤其涉及一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法。
背景技术
H酸(1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸)是萘系中最为重要的有机中间体，主要用于生产活性染料、直接染料、酸性染料和变色酸等产品，并广泛应用于印染、纺织、棉织品和化工等行业。现有技术中常用的H酸的合成工艺为：精萘二磺化制得的2,7-萘二磺酸，经混酸硝化生成1,8-二硝基-3,6-萘二磺酸，然后采用铁粉还原得到1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸，最后经水解制备H酸。
1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸作为制备H酸的中间体，其含量直接决定着H酸的收率及纯度，因此，在制备过程中需要不断监测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量以计算其转化率，从而控制反应进程，进而需要一种专属性强，快速检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的方法。而目前还没有针对1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸的检测方法，因此需要寻求一种精确度高、灵敏度高、操作简单、能够满足生产中快速检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的方法。
发明内容
针对现有技术中没有关于专一检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的方法，本发明提供了一种专属于检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，所述方法利用1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸在紫外末端的吸收，采用高效液相色谱直接进样，紫外检测器检测，不需要柱前衍生，达到快速检测的目的。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供了一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，所述检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法包括以下步骤：将1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标样配制成的标准工作溶液与1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸试样配制成的待测样品溶液，以甲醇和四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液为流动相进行HPLC检测，根据检测结果经过计算得到待测样品中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸的含量。
优选地，所述标准工作溶液的制备方法包括以下步骤：将1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标样与溶剂混合，震荡溶解并定容，得到标准工作溶液。
优选地，所述溶剂包括纯水。
上述纯水对1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸具有很好的溶解性，且对样品中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸测定无干扰，能提高检测的准确性与灵敏性。
优选地，所述标准工作溶液的浓度为1.0-3.0mg/mL，例如1.2mg/mL、1.4mg/mL、1.6mg/mL、1.8mg/mL、2.0mg/mL、2.2mg/mL、2.4mg/mL、2.6mg/mL、2.8mg/mL等，上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述待测样品溶液的制备方法包括以下步骤：将1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸试样用溶剂稀释，在超声下震荡溶解，得到所述待测样品溶液。
优选地，所述溶剂包括纯水。
上述纯水对1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸具有很好的溶解性，能提高检测结果的灵敏度。
所述待测样品溶液的浓度为1.0-3.0mg/mL，例如1.2mg/mL、1.4mg/mL、1.6mg/mL、1.8mg/mL、2.0mg/mL、2.2mg/mL、2.4mg/mL、2.6mg/mL、2.8mg/mL等，上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述超声的频率为35-40kHz。
优选地，所述超声的时间为3-8min。
其中，超声的频率可以是35kHz、35.5kHz、36kHz、36.5kHz、37kHz、37.5kHz、38kHz、38.5kHz、39kHz、39.5kHz或40kHz等，超声时间可以是3min、4min、5min、6min、7min或8min等，上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
上述特定参数的组合可以准确制备试样溶液，提高检测结果的准确性。
优选地，所述HPLC检测所用色谱柱为C18反相色谱柱。
优选地，所述C18反相色谱柱的规格为250×4.6mm，填料粒径为5μm；例如可以为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18等。
优选地，所述C18反相色谱柱的柱温为25-35℃。
优选地，所述HPLC检测中，检测波长为250-260nm。
优选地，所述HPLC检测中，柱流速为0.8-1.2mL/min。
优选地，所述HPLC检测中，进样量为2-10μL。
其中，柱温可以是26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃或34℃等，检测波长可以是251nm、252nm、253nm、254nm、255nm、256nm、257nm、258nm或259nm等，流速可以是0.8mL/min、0.85mL/min、0.9mL/min、0.95mL/min、1mL/min、1.05mL/min、1.1mL/min、1.15mL/min或1.2mL/min等，进样量可以是3μL、4μL、5μL、6μL、7μL、8μL或9μL等，上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述HPLC检测采用等度洗脱方式。
优选地，所述甲醇与四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液的体积比为30:70-40:60；例如可以为31:69、32:62、35:65、38:62、39:61等。
作为本发明的优选技术方案，甲醇与四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液的体积比在上述特定的范围内，能够将待测样品溶液中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸与其它干扰物质更好的分离，同时也能大幅缩短分析时间，提高了检测的精密度、准确度。
优选地，所述四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液中四丁基溴化铵的浓度为4-5g/L，例如可以为4.2g/L、4.4g/L、4.5g/L、4.6g/L、4.8g/L等，乙酸铵的浓度为1-1.5g/L，例如可以为1.1g/L、1.2g/L、1.3g/L、1.4g/L、1.5g/L等。
优选地，所述四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液的pH为5.0-7.0，例如pH＝5.0、pH＝5.5、pH＝6.0、pH＝6.5、pH＝7.0等。
优选地，所述四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液的配制方法包括：将乙酸铵和四丁基溴化铵在纯水中混合定容，过滤、超声后得到所述四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液。
优选地，所述过滤使用水相滤膜。
优选地，所述水相滤膜的孔径为0.4-0.5μm，例如可以为0.42μm、0.44μm、0.45μm、0.46μm、0.48μm等。
优选地，所述超声的频率为35-40kHz，时间为25-35min，例如超声频率可以是35.5kHz、36kHz、36.5kHz、37kHz、37.5kHz、38kHz、38.5kHz、39kHz、39.5kHz等，超声时间可以是26min、28min、30min、32min、34min等。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
第二方面，本发明提供了一种如第一方面所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法在制备1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸中的应用。
本发明提供的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法用于1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸制备过程中时，可更好的监测H酸制备过程中副产物的生成，满足H酸生产控制的需要。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明提供的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法具有分离效果好，精密度高的特点，1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的标准偏差范围达到0.20％以下，变异系数达到0.20％以下，准确性高，平均回收率达到99.9％，RSD为0.22％；灵敏度高，方法检出限达到0.2×10-4ml，方法定量限达到0.6×10-4g/ml。
附图说明
图1是实施例1中第一次标准工作溶液的HPLC图；
图2是实施例1中第一次待测样品溶液的HPLC图；
图3是实施例1中第二次待测样品溶液的HPLC图；
图4是实施例1中第二次标准工作溶液的HPLC图；
图5是实施例1中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标准曲线图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
以下实施例中，高效液相色谱仪为岛津LC-16
色谱柱1为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18柱，250×4.6mm，填料粒径为5μm；
色谱柱2为Agilent Eclipse XDB-C18柱，250×4.6mm，填料粒径为5μm；
色谱柱3为Agilent ZORBAX SB-C18柱，250×4.6mm，填料粒径为5μm；
1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标样购买自楚源高新科技集团股份有限公司；
1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸样品来自广东众和化塑股份公司。
其他材料和试剂，如无特殊说明通过正规渠道商购买获得的产品均可使用。
标准工作溶液的制备：称取0.05g(精确至0.0001g)1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标样置于100mL容量瓶中，加少量纯水，在38kHz的超声波中震荡5min使之溶解，冷却至25℃，用纯水稀释至刻度，摇匀，得到标准溶液。
待测样品溶液的制备：称取0.05g(精确至0.0001g)的1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸样品，置于一具塞玻璃瓶中置于100mL容量瓶中，加少量纯水，在38kHz的超声波中震荡5min使之溶解，冷却至25℃，用纯水稀释至刻度，摇匀备用。
实施例1
本实施例提供了一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其中液相条件为：
色谱柱：色谱柱1
流速：1.0mL/min；
检测波长：254nm；
进样体积：10μL；
柱温：30℃；
流动相：37％甲醇与63％四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液；
其中，流动相的配制如下：
甲醇：量取甲醇，用0.45μm有机滤膜滤过；
四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液：将1g乙酸铵与4.8g四丁基溴化铵在1000mL纯水中混合均匀，然后用0.45μm水相滤膜过滤，最后在38kHz的超声波中震荡30min。
在上述色谱操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标准工作溶液，直至相邻两针1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸峰面积相对变化小于10％后，注入待测样品溶液，标准工作溶液与待测样品溶液各进样两次，按照标准工作溶液，待测样品溶液，待测样品溶液，标准工作溶液的顺序进行进样测定，得到1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸液相色谱图。图1-图4分别为第一次标准工作溶液、第一次待测样品溶液、第二次待测样品溶液、第二次标准工作溶液的HPLC图。
实施例2
本实施例提供了一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其中液相条件为：
色谱柱：色谱柱1
流速：1.0mL/min；
检测波长：254nm；
进样体积：10μL；
柱温：30℃；
分析时间：13min；
流动相：30％甲醇与70％四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液；
其中，流动相的配制如下：
甲醇：量取甲醇，用0.45μm有机滤膜滤过；
四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液：将1.2g乙酸铵与4g四丁基溴化铵在1000mL纯水中混合均匀，然后用0.4μm水相滤膜过滤，最后在40kHz的超声波中震荡25min。
其余步骤皆同实施例1。
实施例3
本实施例提供了一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其中液相条件为：
色谱柱：色谱柱1
流速：1.0mL/min；
检测波长：254nm；
进样体积：10μL；
柱温：30℃；
流动相：40％甲醇与60％四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液；
其中，流动相的配制如下：
甲醇：量取甲醇，用0.45μm有机滤膜滤过；
四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液：将1.5g乙酸铵与5g四丁基溴化铵在1000mL纯水中混合均匀，然后用0.5μm水相滤膜过滤，最后在35kHz的超声波中震荡35min。
其余步骤皆同实施例1。
实施例4
本实施例提供了一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，操作与实施例1的区别仅在流动相为50％甲醇和50％四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液，其他条件均保持不变，其余步骤皆同实施例1。
实施例5
本实施例提供了一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，操作与实施例1的区别仅在流动相为20％甲醇和80％四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液，其他条件均保持不变，其余步骤皆同实施例1。
实施例6
本实施例提供了一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其中色谱柱使用色谱柱2，其余步骤皆同实施例1。
实施例7
本实施例提供了一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其中色谱柱使用色谱柱3，其余步骤皆同实施例1。
对比例1
本对比例提供了一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，操作与实施例1的区别仅在于流动相为37％甲醇与63％四丁基溴化铵-无水乙酸钠缓冲液(pH为4.5)，其余步骤皆同实施例1。
对比例2
本对比例提供了一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，操作与实施例1的区别仅在于流动相为37％乙腈与63％四丁基溴化铵-无水乙酸钠缓冲液(pH为4.5)，其余步骤皆同实施例1。
测试例1：
检测结果统计：
将实施例1-3中的检测结果计算后得到待测样品溶液中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸的含量，其中计算公式为：
式中：
w—1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸样品中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸的质量分数，以％表示；
Ai——待测样品溶液中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸峰面积的平均值；
ms——1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标样的质量，g；
ws——1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标样中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸的质量分数，以％表示；
As——标准工作溶液中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸峰面积的平均值；
mi——1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸样品的质量，g；
表1待测样品中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸的含量
上表数据显示本发明提供的检测方法在一定范围内调整流速、柱温、检测波长、进样量以及流动相的体积比时，对测定结果的影响程度符合要求，表明该方法耐用性良好。
测试例2
标准曲线绘制：
制备1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸浓度分别为0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL，并按照实施例1-3的色谱条件和步骤进样，测定峰面积，以标准溶液的浓度为横坐标，峰面积比为纵坐标，进行线性回归分析，计算回归线的相对系数，实施例1的线性相关图见图5。
测定结果见表2：
表2标准曲线测试数据
测试例3
精密度试验：
操作方法为：分别平行配制6份重复性样品，由一个分析员在尽可能相同的条件下分别使用实施例1-7及对比例1-2的色谱条件和步骤进行测试，计算所得6份供试品溶液释放度的相对标准差和变异系数。
其结果见表3：
表3 1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸定量分析精密度测定结果
| 组别 | 平均值(％) | 标准偏差(％) | 变异系数(％) |
| 实施例1 | 99.611 | 0.18 | 0.18 |
| 实施例2 | 99.526 | 0.20 | 0.20 |
| 实施例3 | 99.563 | 0.19 | 0.19 |
| 实施例4 | 99.498 | 0.29 | 0.29 |
| 实施例5 | 99.277 | 0.30 | 0.31 |
| 实施例6 | 99.494 | 0.58 | 0.61 |
| 实施例7 | 99.375 | 0.49 | 0.49 |
| 对比例1 | 99.131 | 1.88 | 1.89 |
| 对比例2 | 99.059 | 1.97 | 1.98 |
表3结果显示，由实施例1-3可知，本申请提供的检测方法检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的标准偏差范围为0.18-0.20％，变异系数为0.18-0.20％，显示了本发明提供的检测方法精密度高，由实施例4和5可知，流动相中甲醇和四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液的体积比过小或过大时，标准偏差范围为0.29％或0.30％，变异系数为0.29％或0.31％，所述方法的精密度有所下降；由实施例6和7可知，当色谱柱改变时，标准偏差范围为0.58％或0.49％，变异系数为0.61％或0.49％，精密度也较低，由对比例1和2可知，当流动相改变时，标准偏差范围为1.88％或1.97％，变异系数为1.89％或1.98％，精密度显著降低。
测试例4
准确度试验：
分别在已知1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的试样中加入不同水平的1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标准品，配成已知含量的样品，配制结果如下：
按照实施例1、4-7和对比例1-2中的色谱条件和步骤进样，测定峰面积并计算其回收率，结果见表4：
表4 1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸定量分析准确度测定结果
表4结果显示，实施例1中，本申请提供的检测方法中加入1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标准品的回收率RSD为0.22％，表明本发明提供的检测方法检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的准确度高，由实施例4和5可知，流动相中甲醇和四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液的体积比过小或过大时，加入1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标准品的回收率RSD为0.65％或0.58％，所述方法的准确度有所降低；由实施例6和7可知，当色谱柱改变时，加入1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标准品的回收率RSD为1.31％或2.02％，准确度也较低；由对比例1和2可知，当流动相改变时，加入1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标准品的回收率RSD为0.74％或1.54％，表明所述方法的准确度降低。
测试例5
方法检出限与定量限测定：
在空白试样中分别添加已知浓度的1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标准溶液，并按照实施例1中的色谱条件和步骤进行多次重复测定，以3倍信噪比和10倍信噪比分别确定其方法的检出限(LOD)和定量限(LOQ)，结果见表5：
表5 1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸定量分析方法检出限、定量限测定结果
表5结果显示，1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸试样中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸的方法检出限为0.2×10-4g/ml，方法定量限为0.6×10-4g/ml，说明本发明提供的检测方法具有高灵敏度。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
Claims (13)
1.一种检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法包括以下步骤：将1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标样配制成的标准工作溶液与1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸试样配制成的待测样品溶液，以甲醇和四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液为流动相进行HPLC检测，根据检测结果经过计算得到待测样品中1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸的含量；
所述HPLC检测所用色谱柱为C18反相色谱柱；
所述C18反相色谱柱的型号为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18；
所述C18反相色谱柱的规格为250×4.6mm，填料粒径为5µm；
所述C18反相色谱柱的柱温为25-35℃；
所述HPLC检测波长为250-260nm，柱流速为0.8-1.2mL/min；进样量为2-10μL；
所述HPLC检测采用等度洗脱方式；
所述甲醇与四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液的体积比为30:70-40:60；
所述四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液中四丁基溴化铵的浓度为5-6g/L，乙酸铵的浓度为1-1.5g/L；
所述四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液的pH为5.0-7.0。
2.根据权利要求1所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述标准工作溶液的制备方法包括以下步骤：将1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸标样与溶剂混合，震荡溶解并定容，得到标准工作溶液。
3.根据权利要求2所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述溶剂包括纯水。
4.根据权利要求2所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述标准工作溶液的浓度为1.0-3.0mg/mL。
5.根据权利要求1所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述待测样品溶液的制备方法包括以下步骤：将1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸试样用溶剂稀释，在超声下震荡溶解，得到所述待测样品溶液。
6.根据权利要求5所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述溶剂包括纯水。
7.根据权利要求5所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述待测样品溶液的浓度为1.0-3.0mg/mL。
8.根据权利要求5所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述超声的频率为35-40kHz。
9.根据权利要求5所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述超声的时间为3-8min。
10.根据权利要求1所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液的配制方法包括：将乙酸铵和四丁基溴化铵在纯水中混合定容，过滤、超声后得到所述四丁基溴化铵-乙酸铵水溶液。
11.根据权利要求10所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述过滤使用水相滤膜。
12.根据权利要求11所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述水相滤膜的孔径为0.4-0.5μm。
13.根据权利要求10所述的检测1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸含量的液相色谱分析方法，其特征在于，所述超声的频率为35-40kHz，时间为25-35min。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4178308A (en) * | 1977-07-16 | 1979-12-11 | Bayer Aktiengesellschaft | Process for the preparation of 1-amino-8-naphthol-3,6-disulphonic acid (H-acid) |
| CN1683328A (zh) * | 2005-02-24 | 2005-10-19 | 天津理工大学 | 脂肪醇催化制备1－氨基－8－萘酚－3,6－二磺酸单钠盐方法 |
| CN101993398A (zh) * | 2009-08-24 | 2011-03-30 | 中国中化股份有限公司 | 一种催化加氢制备1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸的方法 |
| CN105044238A (zh) * | 2015-07-20 | 2015-11-11 | 山东省鲁南煤化工工程技术研究院 | 一种 4,5 -二氨基-2,7-萘二磺酸的高效液相色谱分析方法 |
| WO2021239634A1 (en) * | 2020-05-26 | 2021-12-02 | Repi S.R.L. | Liquid formulation comprising an aldehyde scavenger |
-
2022
- 2022-07-06 CN CN202210798309.4A patent/CN115201363B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4178308A (en) * | 1977-07-16 | 1979-12-11 | Bayer Aktiengesellschaft | Process for the preparation of 1-amino-8-naphthol-3,6-disulphonic acid (H-acid) |
| CN1683328A (zh) * | 2005-02-24 | 2005-10-19 | 天津理工大学 | 脂肪醇催化制备1－氨基－8－萘酚－3,6－二磺酸单钠盐方法 |
| CN101993398A (zh) * | 2009-08-24 | 2011-03-30 | 中国中化股份有限公司 | 一种催化加氢制备1,8-二氨基-3,6-萘二磺酸的方法 |
| CN105044238A (zh) * | 2015-07-20 | 2015-11-11 | 山东省鲁南煤化工工程技术研究院 | 一种 4,5 -二氨基-2,7-萘二磺酸的高效液相色谱分析方法 |
| WO2021239634A1 (en) * | 2020-05-26 | 2021-12-02 | Repi S.R.L. | Liquid formulation comprising an aldehyde scavenger |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 1－萘胺－3，8－二磺酸的反相高效液相色谱分析;王学杰，金宁人;染料工业(第01期);全文 * |
| 梁屹,张治民,刘秀英.抗光晕染料5,6-二氨基-1,3-萘二磺酸铁络合物的合成研究.武汉大学学报(理学版).2002,(第04期),全文. * |
| 高效液相色谱外标法分析2-氨基-8-萘酚-6-磺酸中的有机杂质;季浩 等;《上海染料》;第40卷(第1期);摘要，第25页右栏至第26页 * |
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