CN112798719A - 一种枸橼酸西地那非中有关物质n-甲基哌嗪的检测方法 - Google Patents

一种枸橼酸西地那非中有关物质n-甲基哌嗪的检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种枸橼酸西地那非中有关物质N‑甲基哌嗪的检测方法，所述的检测方法为衍生‑高效液相色谱法。所述的衍生方法为加入适量苯甲酰氯衍生试剂，经衍生化反应后，再用稀释剂稀释至所需浓度，得衍生待测溶液；所述高效液相色谱法采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱、以缓冲盐溶液和乙腈为流动相对衍生反应待测液进行分离检测的衍生‑高效液相色谱法。所述衍生‑高效液相色谱法有效解决了N‑甲基哌嗪杂质在GC检测法中拖尾严重、灵敏度低且响应不成线性的问题。所述衍生‑高效液相色谱法实用性强，检测过程简单、快捷、灵敏度好。

Description

一种枸橼酸西地那非中有关物质N-甲基哌嗪的检测方法
技术领域
本发明属于药物分析化学领域，涉及枸橼酸西地那非有关物质N-甲基哌嗪的检测方法，具体涉及采用衍生-高效液相色谱法分离测定枸橼酸西地那非有关物质N-甲基哌嗪含量的检测方法。
背景技术
N-甲基哌嗪是合成枸橼酸西地那非的重要物料，枸橼酸西地那非可能会发生降解反应产生N-甲基哌嗪，因此枸橼酸西地那非中可能含有有关物质N-甲基哌嗪，需要对其进行研究控制。目前报道的检测N-甲基哌嗪含量的方法主要有高氯酸滴定法、气相色谱法、质谱法。
高氯酸滴定法仅适用于高浓度N-甲基哌嗪含量的测定，且枸橼酸西地那非也会与高氯酸发生反应，因此限度0.1％水平的N-甲基哌嗪的含量无法用高氯酸滴定法准确测定。
文献报道可以用气相色谱法检测N-甲基哌嗪的含量，但在进行用气相色谱法检测枸橼酸西地那非有关物质N-甲基哌嗪含量的方法开发时发现，不同色谱柱条件下，拖尾较严重，可能因为N-甲基哌嗪为弱碱性化合物且含有N-H键所致，从而导致1ug/ml、10ug/ml、100ug/ml的N-甲基哌嗪的响应不成线性，进而导致灵敏度较低，所用供试品枸橼酸西地那非浓度较高等问题。
质谱法仪器设备较昂贵，检测费用较高，不适宜工厂QC检测。
发明内容
本发明提供了一种衍生-高效液相色谱法进行枸橼酸西地那非中有关物质N-甲基哌嗪含量的检测方法；该检测方法的检测灵敏度高、线性好、所需供试品浓度较小、分析时间短等，有效解决了现有技术中存在的灵敏度低、低浓度时响应不成线性导致检测结果不准确的问题。可以对N-甲基哌嗪进行有效控制，保证了枸橼酸西地那非的质量。
在本发明的实施方案中，本发明提供了一种枸橼酸西地那非中有关物质N-甲基哌嗪含量的检测方法，所述的检测方法采用柱前衍生-高效液相色谱法：
柱前衍生采用衍生试剂与枸橼酸西地那非中有关物质N-甲基哌嗪反应形成带共轭基团的衍生产物；
在本发明的实施方案中，本发明所述的检测方法，其中，衍生试剂为苯甲酰氯、4-氟苯甲酰氯或4-甲基苯磺酰氯，优选苯甲酰氯。
在本发明的实施方案中，本发明所述的检测方法，其中，衍生试剂与N-甲基哌嗪的衍生反应如下式：
Figure BDA0002869955440000021
在本发明的实施方案中，本发明所述的检测方法，其中，所述高效液相色谱法采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱、以缓冲盐水溶液为流动相A和乙腈为流动相B。
在本发明的实施方案中，本发明所述的检测方法，其中，所述缓冲盐水溶液选自以体积比计0.1％磷酸水溶液，三乙胺调pH至7.0；或20mM磷酸二氢钾水溶液，120g/L氢氧化钾溶液调pH至6.5，优选地，为20mM磷酸二氢钾水溶液，120g/L氢氧化钾溶液调pH至6.5。
在本发明的实施方案中，本发明所述的检测方法，其中，所述高效液相色谱方法的色谱柱选自十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱，优选ZORBAX XDB-C18、InertSustain C18、ZORBAX SB-C18、或ZORBAX Eclipse Plus C18；
在本发明的实施方案中，本发明所述的检测方法，其中，采用梯度进行洗脱的，所述流动相A与流动相B体积比列为如下梯度：
时间(min) 0 14 16 23 25 30
流动相A(％) 80-90 80-90 30-40 30-40 80-90 80-90
流动相B(％) 20-10 20-10 70-60 70-60 20-10 20-10
优选如下梯度：
时间(min) 0 14 16 23 25 30
缓冲盐水溶液(％) 85 85 35 35 85 85
乙腈(％) 15 15 65 65 15 15
在本发明的实施方案中，本发明所述的检测方法，其中，详细步骤如下：
(1)配制缓冲盐水溶液：20mM磷酸二氢钾溶液，用120g/L氢氧化钾溶液调pH至6.5；
(2)配制流动相A：取缓冲盐水溶液作为流动相A；
(3)配制流动相B：取乙腈
(4)配制0.5μl/ml的苯甲酰氯溶液：取适量苯甲酰氯溶解于乙腈中；
(5)配制0.5μl/ml三乙胺溶液：取适量三乙胺溶解于乙腈中；
(6)配制稀释剂：取流动相A与流动相B，以体积比为流动相A：流动相B＝90：10混匀而得；
(7)配制N-甲基哌嗪对照品衍生溶液：取适量N-甲基哌嗪溶解于乙腈中，配成50μg/ml的N-甲基哌嗪贮备液；再取1ml 50μg/ml的N-甲基哌嗪贮备液于50ml量瓶中，加入1ml0.5μl/ml苯甲酰氯溶液，摇匀，反应1分钟，加入1ml 0.5μl/ml三乙胺溶液，摇匀，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得；
(8)配制枸橼酸西地那非供试品衍生溶液：称取50mg枸橼酸西地那非供试品于50ml量瓶中，加入1ml乙腈，加入1ml 0.5μl/ml苯甲酰氯溶液，摇匀，反应1分钟，加入1ml0.5μl/ml三乙胺溶液，摇匀，用稀释剂稀释至刻度，摇匀即得；
(9)测定：取N-甲基哌嗪对照品衍生溶液、枸橼酸西地那非供试品衍生溶液采用高效液相色谱方法进行分离检测；
(10)高效液相色谱方法：
色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18
检测波长：230nm；
柱温：35℃；
梯度洗脱：
时间(min) 0 14 16 23 25 30
缓冲盐水溶液(％) 85 85 35 35 85 85
乙腈(％) 15 15 65 65 15 15
；
其中，所述的步骤(1)至(8)的顺序可以根据需要进行调整，例如，步骤(2)、(1)、(3)至(8)。
附图说明
图1表示的是实施例1枸橼酸西地那非有关物质检测的专属性实验的空白溶剂图谱；
图2表示的是实施例1枸橼酸西地那非有关物质检测的专属性实验的混合溶液图谱；
图3表示的是实施例2枸橼酸西地那非有关物质检测的定量限实验的定量限溶液图谱。
具体实施方式
通过以下实例对本发明做进一步说明，但应该理解，以下实例不限于本发明的范围。
以下各实施例使用的试剂可从市场上购得。
检测方法参照高效液相法(中国药典2020年版四部通则0512)测定。
实施例1枸橼酸西地那非有关物质检测的专属性实验
仪器设备样品：
色谱仪名称：效液相色谱仪
色谱仪型号：赛默飞Ultimate 30000
检测器：紫外检测器，检测波长为230nm；
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(ZORBAX Eclipse Plus C18，4.6×250mm，5μm适用)
柱温：35℃；
流动相：20mM磷酸二氢钾水溶液(120g/L氢氧化钾溶液调pH至6.5)为流动相A，以乙腈为流动相B；
流动相流速：1.0ml/min
按下表进行梯度洗脱，洗脱条件：
时间(min) 0 14 16 23 25 30
缓冲盐水溶液(％) 85 85 35 35 85 85
乙腈(％) 15 15 65 65 15 15
实验操作：
流动相A：称取5.44g磷酸二氢钾于2L水中，摇匀，用120g/L氢氧化钾溶液调pH至6.50，摇匀，过滤、超声即得。
流动相B：取1L乙腈于流动相瓶中，超声即得。
稀释剂：流动相A：流动相B＝10：90
苯甲酰氯贮备液：精密量取2.5ml苯甲酰氯于20ml量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，得125ul/ml的苯甲酰氯贮备液1。精密移取0.4ml125ul/ml的苯甲酰氯贮备液1于100ml容量瓶中，用乙腈定容并摇匀，作苯甲酰氯贮备液。
三乙胺贮备液：精密量取2.5ml三乙胺于20ml量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，得125ul/ml的三乙胺贮备液1。精密移取0.4ml 125ul/ml的三乙胺备液1于100ml容量瓶中，用乙腈定容并摇匀，作三乙胺贮备液。
空白溶液：于25ml量瓶中，精密加入1ml乙腈，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，即得。
N-甲基哌嗪定位溶液：
精密称取N-甲基哌嗪51.0mg，置100ml量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，作N-甲基哌嗪贮备液1。
精密量取2ml N-甲基哌嗪贮备液1置20ml量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，作N-甲基哌嗪贮备液2。
精密量取1ml N-甲基哌嗪贮备液2于25ml量瓶中，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，即得N-甲基哌嗪定位溶液。
对照品溶液：
精密称取N-甲基哌嗪51.9mg，于100ml量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，作N-甲基哌嗪贮备液1。
精密量取1ml贮备液1置20ml量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，作贮备液2。
精密量取0.5ml贮备液2于25ml量瓶中，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，即得对照品溶液。
供试品溶液：精密称取枸橼酸西地那非供试品12.4mg，置25ml量瓶中，精密加入1ml乙腈，摇匀，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液1，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液1，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，即得。
混合溶液：精密称取枸橼酸西地那非供试品12.2mg，置25ml量瓶中，精密加入1ml贮备液2，摇匀，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液1，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液1，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，即得。
取空白溶液进样至无干扰后，精密量取对照品溶液连续进样5次，各杂质峰的峰面积RSD不得过2.0％，再精密量取N-甲基哌嗪定位溶液、供试品溶液、混合溶液各进样一次检测，记录色谱图。色谱图见附图1和图2，结果见表1和表2。
实验结果：空白溶液不干扰N-甲基哌嗪杂质衍生物峰的检测；对照溶液续进样5针，N-甲基哌嗪杂质衍生物峰的保留时间RSD最大值为0.004％，峰面积RSD最大值为0.051％。混合溶液中N-甲基哌嗪衍生物峰附近无相邻杂质；供试品溶液中其他峰不干扰N-甲基哌嗪杂质衍生物峰的检测，即分离度大于1.5。
表1专属性结果表
Figure BDA0002869955440000051
表2系统适用性结果表
Figure BDA0002869955440000052
Figure BDA0002869955440000061
实施例2枸橼酸西地那非有关物质检测的定量限、检测限实验
仪器设备样品：
检测器：同实施例1；
色谱柱：同实施例1
柱温：同实施例1；
流动相：同实施例1；
流动相流速：同实施例1；
洗脱条件：同实施例1；
实验操作：
流动相A：同实施例1；
流动相B：同实施例1；
稀释剂：同实施例1；
苯甲酰氯贮备液：同实施例1；
三乙胺贮备液：同实施例1；
空白溶液：同实施例1
定量限溶液：精密称取N-甲基哌嗪52.5mg，置100ml量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，作N-甲基哌嗪贮备液1。精密量取1ml N-甲基哌嗪贮备液1置20ml量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，作N-甲基哌嗪贮备液2。
精密量取N-甲基哌嗪贮备液2 0.4ml置100ml量瓶中，用乙腈定容，摇匀，作定量限储备溶液。
精密量取2ml定量限储备溶液于10ml量瓶中，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，作其定量限溶液。
检测限溶液：精密量取3ml定量限溶液于10ml量瓶中，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，作其检测限溶液。
取空白溶液进样至无干扰后，精密量取定量限溶液连续进样6针、检测限溶液连续进样5针，记录色谱图。色谱图见附图3，结果见表3。
实验结果：N-甲基哌嗪定量限浓度0.02μg/ml，相当于样品浓度的0.00016％，相当于限度浓度的4％，峰面积RSD为0.72％，S/N约20。。
表3N-甲基哌嗪检测限和定量限检测结果表
Figure BDA0002869955440000071
实施例3枸橼酸西地那非有关物质检测的线性与范围实验
仪器设备样品：
检测器：同实施例1；
色谱柱：同实施例1
柱温：同实施例1；
流动相：同实施例1；
流动相流速：同实施例1；
洗脱条件：同实施例1；
实验操作：
流动相A：同实施例1；
流动相B：同实施例1；
稀释剂：同实施例1；
苯甲酰氯贮备液：同实施例1；
三乙胺贮备液：同实施例1；
空白溶液：同实施例1
线性母液：精密称取N-甲基哌嗪54.3mg，同置于100ml量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，作N-甲基哌嗪和哌嗪的混合贮备液1。
精密量取1ml混合贮备液1置20ml量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，作线性母液。
按下表配制各线性溶液：
编号 --- 1 2 3 4 5
母液加入量ml --- 0.4 0.8 0.5 2 2
量瓶ml --- 50 50 25 25 10
相对浓度％ LOQ 40％ 80％ 100％ 400％ 1000％
精密量取线母液于相应的量瓶中，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，即得各线性溶液。
取空白溶液进样至无干扰后，精密量取各线性溶液各进样1针，记录色谱图。结果见表4。
实验结果：N-甲基哌嗪浓度范围在定量限至限度1000％之间，线性方程y＝39.832x
-0.3347，线性相关系数1。
表4N-甲基哌嗪线性测定结果表
线性回归方程 y＝39.832x-0.3347
相关系数r 1
实施例4枸橼酸西地那非有关物质检测的准确度实验
仪器设备样品：
检测器：同实施例1；
色谱柱：同实施例1
柱温：同实施例1；
流动相：同实施例1；
流动相流速：同实施例1；
洗脱条件：同实施例1；
实验操作：同实施例1
流动相A：同实施例1；
流动相B：同实施例1；
稀释剂：同实施例1；
苯甲酰氯贮备液：同实施例1；
三乙胺贮备液：同实施例1；
空白溶液：同实施例1
对照溶液：同实施例1
回收用对照品母液：精密称取N-甲基哌嗪52.3mg，于100ml量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，作N-甲基哌嗪贮备液1。精密量取0.5ml混合贮备液1置20ml量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，作回收用对照品母液。
本底溶液：取枸橼酸西地那非供试品约12.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入1ml乙腈，摇匀，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，即得。平行配制2份。供试品称量分别为13.8mg、13.6mg。
50％回收溶液1：取枸橼酸西地那非供试品约12.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入1ml乙腈与0.5ml回收用对照品母液，摇匀，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，即得。平行配制3份。供试品称量分别为12.2mg、12.8mg、12.4mg。
100％回收溶液1：取枸橼酸西地那非供试品约12.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入0.5ml乙腈和1ml回收用对照品母液，摇匀，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，即得。平行配制3份。供试品称量分别为12.9mg、12.6mg、12.8mg。
150％回收溶液1：取枸橼酸西地那非供试品约12.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入1.5ml回收用对照品母液，摇匀，精密加入1ml苯甲酰氯贮备液，摇匀，反应1min，再精密加入1ml三乙胺贮备液，摇匀，用稀释剂定容并摇匀，即得。平行配制3份。供试品称量分别为12.4mg、13.0mg、12.6mg。
取空白溶液进样至无干扰后，精密量取对照品溶液1连续进样5次，各杂质峰的峰面积RSD不得过2.0％，再精密量取对照品溶液2连续进样2次，对照品溶液共计7份F值的RSD应不得过2.0％，再精密量取本底溶液及各回收率溶液进样1针，记录色谱图。
实验结果：各已知杂质按50％、100％、150％进行回收率考察：各已知杂质的回收率均在98.12％～105.35％之间，9份样品的RSD最大值为1.5％。

Claims (8)

1.一种枸橼酸西地那非中有关物质N-甲基哌嗪的检测方法，其特征在于该检测方法采用柱前衍生-高效液相色谱法；包括如下步骤：
柱前衍生法：柱前衍生采用衍生试剂与枸橼酸西地那非中有关物质N-甲基哌嗪反应形成带共轭基团的衍生产物；
高效液相色谱法：采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱、以缓冲盐水溶液为流动相A和乙腈为流动相B进行分离检测。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述衍生试剂选自苯甲酰氯、4-氟苯甲酰氯、和4-甲基苯磺酰氯中的一种。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其中，所述衍生试剂苯甲酰氯。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述缓冲盐水溶液为以体积比计0.1%磷酸水溶液，三乙胺调pH至7.0；或20mM磷酸二氢钾水溶液，120g/L氢氧化钾溶液调pH至6.5。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其中，所述缓冲盐水溶液为20mM磷酸二氢钾水溶液，120g/L氢氧化钾溶液调pH至6.5。
6.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述色谱柱为ZORBAX XDB-C18、InertSustain C18、ZORBAX SB-C18、或ZORBAX Eclipse Plus C18。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的检测方法，其中，采用梯度进行洗脱的，所述流动相A与流动相B体积比列为如下梯度：
时间（min） 0 14 16 23 25 30 流动相A（%） 80-90 80-90 30-40 30-40 80-90 80-90 流动相B（%） 20-10 20-10 70-60 70-60 20-10 20-10
优选如下梯度：
Figure 758611DEST_PATH_IMAGE001
。
8.根据权利要求7所述的检测方法，包括如下步骤：
（1）配制缓冲盐水溶液：20mM磷酸二氢钾溶液，用120g/L氢氧化钾溶液调pH至6.5；
（2）配制流动相A：取缓冲盐水溶液作为流动相A；
（3）配制流动相B：取乙腈
（4）配制0.5µl/ml的苯甲酰氯溶液：取适量苯甲酰氯溶解于乙腈中；
（5）配制0.5µl/ml三乙胺溶液：取适量三乙胺溶解于乙腈中；
（6）配制稀释剂：取流动相A与流动相B，以体积比为流动相A：流动相B=90：10混匀而得；
（7）配制N-甲基哌嗪对照品衍生溶液：取适量N-甲基哌嗪溶解于乙腈中，配成50µg/ml的N-甲基哌嗪贮备液；再取1ml 50µg/ml的N-甲基哌嗪贮备液于50ml量瓶中，加入1ml 0.5µl/ml苯甲酰氯溶液，摇匀，反应1分钟，加入1ml 0.5µl/ml三乙胺溶液，摇匀，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得；
（8）配制枸橼酸西地那非供试品衍生溶液：称取50mg 枸橼酸西地那非供试品于50ml量瓶中，加入1ml乙腈，加入1ml 0.5µl/ml苯甲酰氯溶液，摇匀，反应1分钟，加入1ml 0.5µl/ml三乙胺溶液，摇匀，用稀释剂稀释至刻度，摇匀即得；
（9）测定：取N-甲基哌嗪对照品衍生溶液、枸橼酸西地那非供试品衍生溶液采用高效液相色谱方法进行分离检测；
（10）高效液相色谱方法：
色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18
检测波长：230nm；
柱温：35℃；
梯度洗脱：
Figure 842236DEST_PATH_IMAGE002
。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114019062A (zh) * 2022-01-05 2022-02-08 河北欣港药业有限公司 一种利福平中有关物质的检测方法
CN114047279A (zh) * 2021-09-10 2022-02-15 山东省药学科学院 一种高效液相色谱-质谱联用测定药物中间体及原料药中n-甲基哌嗪残留量的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102993205A (zh) * 2012-12-27 2013-03-27 华润赛科药业有限责任公司 一种高收率制备高纯度西地那非游离碱的纯化方法
CN105334275A (zh) * 2015-12-05 2016-02-17 常州亚邦制药有限公司 一种枸橼酸西地那非有关物质的检测方法
CN109867677A (zh) * 2017-12-04 2019-06-11 广州白云山医药集团股份有限公司白云山化学制药厂 一种回收制备西地那非的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102993205A (zh) * 2012-12-27 2013-03-27 华润赛科药业有限责任公司 一种高收率制备高纯度西地那非游离碱的纯化方法
CN105334275A (zh) * 2015-12-05 2016-02-17 常州亚邦制药有限公司 一种枸橼酸西地那非有关物质的检测方法
CN109867677A (zh) * 2017-12-04 2019-06-11 广州白云山医药集团股份有限公司白云山化学制药厂 一种回收制备西地那非的方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JOHN C. REEPMEYER 等: "Structure elucidation of a novel analogue of sildenafil detected as an adulterant in an herbal dietary supplement", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》 *
JOHN C. REEPMEYER 等: "Use of liquid chromatography–mass spectrometry and a chemical cleavage reaction for the structure elucidation of a new sildenafil analogue detected as an adulterant in an herbal dietary supplement", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》 *
张明光等: "西地那非有关物质的合成", 《中国医药工业杂志》 *
李欣 等: "对甲基苯磺酰氯柱前衍生法测定水中哌嗪", 《分析试验室》 *
李淑恒 等: "枸橼酸西地那非原料药新的未知杂质的发现与合成", 《山东化工》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114047279A (zh) * 2021-09-10 2022-02-15 山东省药学科学院 一种高效液相色谱-质谱联用测定药物中间体及原料药中n-甲基哌嗪残留量的方法
CN114047279B (zh) * 2021-09-10 2023-10-20 山东省药学科学院 一种高效液相色谱-质谱联用测定药物中间体及原料药中n-甲基哌嗪残留量的方法
CN114019062A (zh) * 2022-01-05 2022-02-08 河北欣港药业有限公司 一种利福平中有关物质的检测方法

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