CN115181695B - 一种植物乳杆菌5b4m2及其应用 - Google Patents

一种植物乳杆菌5b4m2及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种植物乳杆菌5b4m2及其应用。本发明从5岁小孩粪便微生物样本中分离筛选获得一株植物乳杆菌5b4m2，该菌株于2022年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M 2022885。该植物乳杆菌5b4m2对皮肤油脂的分泌具有显著的抑制作用，可促进β‑EP的生成，镇静舒缓肌肤；而且该5b4m2菌株可促进骨细胞的生长，可用于骨骼再生，同时对抗生素氯霉素、四环素、氨苄西林、新霉素、庆大霉素、萘啶酸均具有耐药性，可配合抗生素用药；而且该5b4m2菌株对胰脂肪酶具有抑制作用，可用于制备降脂制剂，为油脂皮肤治疗、皮肤的修复、促进骨骼再生、降脂提供了新的选择。

Description

一种植物乳杆菌5b4m2及其应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种植物乳杆菌5b4m2及其应用。
背景技术
痤疮患者普遍出油较多，皮脂腺分泌旺盛，人皮脂腺细胞大量分泌脂质是发生痤疮的前提条件。痤疮是毛囊皮脂腺单位的一种慢性炎症性皮肤病，也叫毛囊周围炎，常见于人的面部、头皮或前胸后背等皮脂腺分泌旺盛的地方，对人的生理和心理均有不同程度影响。
针对皮肤油脂分泌的抑制，现有技术公开了从泡菜、蔬菜发酵产品等发酵食品中分离的植物乳杆菌CJLP55，该菌株的组合物具有抑制皮脂、减少皮肤中的油脂或有害细菌，并具有保湿作用；可用于预防或改善皮肤病，如痤疮和皮炎。而且菌株作为纯培养体，个体的特异性比较强，受环境的影响较大，不断挖掘、探索新的、防治效果更好的治疗皮肤炎症的微生物十分必要并且重要，从而丰富皮肤炎症治疗菌菌库，为皮肤炎症的治疗提供新资源。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有技术中油脂导致的痤疮治疗的不足，提供一种植物乳杆菌5b4m2及其应用。该5b4m2菌株分离自5岁小孩粪便微生物样本，对皮肤油脂的分泌具有显著的抑制作用，对多种抗生素具有耐药性；且具有镇静舒缓肌肤的作用；而且该5b4m2菌株可促进骨细胞的生长，可用于骨骼再生；同时，该5b4m2菌株对胰脂肪酶具有抑制作用，可用于制备降脂制剂。
本发明的目的在于提供一种植物乳杆菌5b4m2。
本发明的目的还在于提供所述植物乳杆菌5b4m2在制备抑制皮肤油脂分泌和/或镇静舒缓肌肤的制剂中的应用。
本发明的目的还在于提供所述植物乳杆菌5b4m2在制备降脂制剂方面的应用。
本发明的目的还在于提供所述植物乳杆菌5b4m2在制备促进骨骼再生的药物方面的应用。
本发明的目的还在于提供一种含有植物乳杆菌5b4m2的药物。
本发明的目的还在于提供一种含有植物乳杆菌5b4m2的日化品。
本发明的上述目的通过以下技术手段实现：
一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)5b4m2，于2022年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M 2022885，保藏地址为中国，武汉，武汉大学。
该5b4m2菌株采集自湖北武汉地区5岁小孩粪便微生物样本，经分离纯化筛选获得。该菌株的16S rRNA的核苷酸序列长度为1041bp，序列在NCBI中进行核酸序列比对分析，该菌株与植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)同源性为98.01％，鉴定其为植物乳杆菌，命名为Lactobacillus plantarum 5b4m2。
所述植物乳杆菌5b4m2在制备抑制皮肤油脂分泌和/或镇静舒缓肌肤的制剂方面的应用也在本发明的保护范围之内。
本发明实验结果表明，植物乳杆菌5b4m2对皮肤油脂分泌的抑制率可达51.61％，同时对抗生素氯霉素(Cm)、四环素(TCs)、氨苄西林(Amp)、新霉素(Neo)、庆大霉素(Gen)和萘啶酸(NA)均有耐药性，抑菌圈直径均小于12mm；其中对氯霉素(Cm)、新霉素(Neo)、庆大霉素(Gen)和萘啶酸(NA)的耐药性更显著，抑菌圈直径均为0；该5b4m2菌株能够刺激HaCat细胞产生β-EP，达到镇静舒缓肌肤的作用。
所述植物乳杆菌5b4m2在制备抑制皮肤油脂分泌和/或镇静舒缓肌肤的药物中的应用也在本发明的保护范围之内；优选地，是利用植物乳杆菌5b4m2的发酵上清液；所述药物中植物乳杆菌5b4m2可以作为药物主要成分，也可作为辅料添加。
所述植物乳杆菌5b4m2在制备修护油脂皮肤和/或镇静舒缓肌肤的日化品中的应用也在本发明的保护范围之内。
优选地，所述应用中的制剂、药物或日化品还包括抗生素，所述抗生素为氯霉素(Cm)、四环素(TCs)、氨苄西林(Amp)、新霉素(Neo)、庆大霉素(Gen)或萘啶酸(NA)。
进一步优选地，所述抗生素为氯霉素(Cm)、新霉素(Neo)、庆大霉素(Gen)或萘啶酸(NA)。
优选地，所述应用中是利用植物乳杆菌5b4m2的发酵产物；所述发酵产物为发酵上清液和/或发酵溶胞物。
进一步优选地，是利用植物乳杆菌5b4m2的发酵上清液。
一种抑制皮肤油脂分泌和/或镇静舒缓肌肤的制剂，含有植物乳杆菌5b4m2的菌体和/或发酵产物。
优选地，所述发酵产物为发酵上清液和/或发酵溶胞物。
进一步优选地，所述发酵产物为发酵上清液。
所述发酵上清液是植物乳杆菌5b4m2经发酵后，过滤除菌后得到。
作为发酵上清液的一个具体实施例，所述发酵上清液是将植物乳杆菌5b4m2的菌悬液在37℃，按照3％～5％的接种量接种至发酵培养基中，维持pH恒定6.5在发酵罐进行发酵，转速200r/min，培养19～21h后结束发酵；发酵结束后，将发酵液经过滤除菌处理，得到的滤液即为植物乳杆菌5b4m2发酵上清液。
一种组合物，所述组合物由所述植物乳杆菌5b4m2和抗生素组成；所述抗生素为氯霉素(Cm)、四环素(TCs)、氨苄西林(Amp)、新霉素(Neo)、庆大霉素(Gen)或萘啶酸(NA)。
进一步优选地，所述抗生素为氯霉素(Cm)、新霉素(Neo)、庆大霉素(Gen)或萘啶酸(NA)。
优选地，所述组合物由所述植物乳杆菌5b4m2的发酵上清液和抗生素组成。
一种药物，含有所述植物乳杆菌5b4m2的菌体和/或发酵产物。
一种日化品，含有所述植物乳杆菌5b4m2的发酵产物。
优选地，所述日化品为化妆品或护肤品。
优选地，所述发酵产物为发酵上清液和/或发酵溶胞物。
进一步优选地，所述发酵产物为发酵溶胞物。
所述植物乳杆菌5b4m2在制备促进骨骼再生的药物方面的应用也在本发明的保护范围之内。
所述植物乳杆菌5b4m2在制备降脂制剂方面的应用也在本发明的保护范围之内。
优选地，所述应用中是利用植物乳杆菌5b4m2的发酵产物；所述发酵产物为发酵上清液和/或发酵溶胞物。
进一步优选地，是利用植物乳杆菌5b4m2的发酵上清液。
相比现有技术，本发明具有以下有益效果：
本发明从5岁小孩粪便微生物样本中分离筛选获得一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)5b4m2，于2022年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M 2022885。该植物乳杆菌5b4m2发酵上清液浓度为25％以下对细胞无毒性，该植物乳杆菌5b4m2的发酵上清液对皮肤油脂的分泌具有显著的抑制作用，可促进β-EP的生成，镇静舒缓肌肤，对抗生素氯霉素、四环素、氨苄西林、新霉素、庆大霉素、NA均具有耐药性，可配合抗生素用药；同时，该植物乳杆菌5b4m2可促进骨细胞的生长，可用于促进骨骼再生；而且该5b4m2菌株对胰脂肪酶具有抑制作用，可用于制备降脂制剂。本发明植物乳杆菌5b4m2作为抑制皮肤油脂分泌的制剂、骨骼再生治疗药物、降脂制剂具有良好开发应用前景，为油脂皮肤治疗、皮肤的修复、促进骨骼再生、降脂提供了新的选择。
附图说明
图1为本发明植物乳杆菌5b4m2发酵液镜检图。
图2为本发明SZ95细胞染色后镜检结果，A为阴性对照组，B为模型组，C为植物乳杆菌5b4m2发酵上清液实验组。
图3为本发明实施例5中SZ95细胞油脂相对分泌率。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
以下实施例中所述培养基配方如下：
MRS固体培养基：大豆蛋白胨30g/L、牛肉膏10g/L、葡萄糖20g/L、乙酸钠2g/L、柠檬酸氢二铵2g/L、K2PO4·3H2O 2.6g/L、MgSO4·7H2O 0.2g/L、MnSO4 0.05g/L、吐温80 0.5mL/L、琼脂20g/L、半胱氨酸氨酸盐0.5g/L。
MRS液体培养基：大豆蛋白胨30g/L、牛肉膏10g/L、葡萄糖20g/L、乙酸钠2g/L、柠檬酸氢二铵2g/L、K2PO4·3H2O 2.6g/L、MgSO4·7H2O 0.2g/L、MnSO4 0.05g/L、吐温80 0.5mL/L、L-半胱氨酸氨酸盐0.5g/L。
发酵培养基如下制备：5g豆粕、5g玉米、5g麸皮、2g葡萄糖、0.5g MgSO4 7H2O、0.5g酵母浸粉，采用去离子水定容至1L。
实施例1菌株的分离纯化
收集得到湖北武汉地区5岁小孩粪便微生物样本，经过无菌无氧水梯度稀释后，将不同梯度的稀释液涂布于MRS固体培养基(pH＝6.8，添加溴甲酚绿作为指示剂)，37℃培养48小时至长出菌落。挑取周边变黄、菌落形态为杆状的典型单菌落，采用平板划线法在MRS固体培养基进一步纯化，得到纯菌落。
实施例2植物乳杆菌5b4m2的鉴定
1.纯菌落的筛选
对实施例1得到的纯菌落进行抗生素耐药性测试，利用双层平板法分别测试纯菌落对氯霉素(Cm)、呋喃唑酮(Fz)、红霉素(Ery)、四环素(TCs)、氨苄西林(Amp)、新霉素(Neo)、庆大霉素(Gen)、萘啶酸(NA)和利福平(Rif)9种抗生素的耐药性。
双层平板下层为1.5％的营养琼脂培养基，上层用0.5％的软琼脂培养基，上层培养基与各纯菌落制备的母液以100：1混匀。待平板固化和表面干燥后，放入商品化抗生素药敏片(氯霉素Cm，呋喃唑酮Fz，红霉素Ery，四环素TCs，氨苄西林Amp，新霉素Neo，庆大霉素Gen，萘啶酸NA和利福平Rif)过夜培养，根据抑菌圈大小，观察各纯菌落对抗生素的抗性。根据NCCLS标准进行判读：抑菌圈直径≤12mm为抗生素耐药，直径越小，耐药性越好；抑菌圈直径≥18mm为抗生素敏感。
经过测试发现，耐药性最好的一株菌并命名为5b4m2，5b4m2对9种抗生素抑菌效果如表1所示，
表1
表1结果显示，5b4m2对氯霉素(Cm)、四环素(TCs)、氨苄西林(Amp)、新霉素(Neo)、庆大霉素(Gen)和萘啶酸(NA)均有耐药性；其中对氯霉素(Cm)、新霉素(Neo)、庆大霉素(Gen)和萘啶酸NA的耐药性更显著。
2.菌株5b4m2的鉴定
采用通用引物27F(AGAGTTTGATCCTGGCTCAG)和1492R(TACGGCTACCTTGTTACGACTT)对菌株5b4m2进行16s rDNA测序，测序得到的序列如SEQ ID NO:1所示，序列在NCBI中进行核酸序列比对分析，本发明分离纯化得到的菌株5b4m2的16S rDNA序列与Lactobacillusplantarum同源性为98.01％，进化距离最近，鉴定为一株植物乳杆菌，命名为植物乳杆菌5b4m2(Lactobacillus plantarum5b4m2)，已于2022年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M 2022885，保藏地址是中国，武汉，武汉大学。
实施例3植物乳杆菌5b4m2发酵上清液制备
菌种活化：将保存于-80℃冰箱的实施例2得到的植物乳杆菌5b4m2的甘油冻存管取出，置于室温融化，在无菌环境下使用接种环挑取菌种，划线接种于MRS固体斜面，37℃培养48小时，观察平板上菌落形态确认为植物乳杆菌5b4m2且无污染后，挑取平板上的单菌落接种至MRS液体培养基中，37℃摇瓶，厌氧培养24小时。
菌株发酵：将活化后的菌液在37℃按照3％～5％的接种量接种至发酵培养基中，维持pH恒定6.5在发酵罐进行发酵(转速200r/min)，发酵培养19～21h，发酵期间，利用光学显微镜观察菌株发酵液形态，5b4m2发酵液镜检图如图1所示，确定为植物乳杆菌且无污染。发酵完成后，得到发酵液，将发酵液经过过滤除菌处理，得到的滤液即为植物乳杆菌5b4m2发酵上清液。
实施例4植物乳杆菌5b4m2发酵上清液细胞毒性测试
以3×104细胞/孔的密度将SZ95细胞(人皮脂腺细胞)接种到96孔板中，
实验组：每孔分别加入100μL不同浓度(1wt％、2.5wt％、5wt％、10wt％、25wt％、50wt％)实施例3制备的植物乳杆菌5b4m2的发酵上清液；
对照组：每孔中加入100μL DMEM(无血清)培养基；
37℃、5％CO2条件下培养24小时后吸除上清，加入100μL含有终浓度5mg/mL MTT溶液的DMEM(无血清)培养基，37℃温育4小时，除去MTT溶液，加入100μL二甲基亚砜(DMSO)避光低速震荡10分钟，然后使用酶标仪于490nm处测定培养液吸光值，并按照以下公式计算细胞相对存活率。每组实验设置3个平行，结果以均值±标准差表示。
An为实验组吸光值，A0为对照组吸光值。
根据国际标准《ISO 10993-5:2009》描述的毒性评价标准，细胞存活率高于70％时可定义为无细胞毒性。
不同浓度植物乳杆菌5b4m2发酵上清液处理的SZ95细胞相对存活率如表2所示。
表2
表2的结果显示，添加浓度为50％的植物乳杆菌5b4m2发酵上清液会对SZ95细胞产生明显毒性，而植物乳杆菌5b4m2发酵上清液浓度为25％以下时，对SZ95细胞无细胞毒性。
实施例5植物乳杆菌5b4m2发酵上清液抑油测试
油红O又名苏丹红5B，为脂溶性染料，在脂肪内能高度溶解，可特异性地使组织内甘油三酯等中性脂肪着色，用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着。利用油红O的这一特性，可对培养后的SZ95细胞(人皮脂腺细胞)进行染色观察，分析细胞油脂含量和形态。
1.实验方法
油酸培养基配置：
制备浓度1M的油酸水溶液(OA，分子量282.46)；5.0g牛血清白蛋白(BSA)用水定容至50ml，制备质量百分数为10％的BSA溶液；将16μL 1M的OA水溶液与2ml质量百分数10％的BSA溶液混合，37℃摇床6～8h，得OA浓度为80mM的混合液，将1ml混合液与40ml DMEM培养基混合，过滤，即得油酸培养基，储存于4℃。
油红O染色工作液配置：
1g油红O溶于200ml异丙醇中，搅拌混匀溶解，即得油红O储存液，可4℃避光保存。将油红O储存液与超纯水以体积比3:2混合，静置10min，滤纸过滤，即得油红O染色工作液。
细胞处理：
以3×104细胞/孔的密度将SZ95细胞(人皮脂腺细胞)接种到96孔板中，37℃，5％CO2条件下培养24小时后，PBS洗一次，吸除上清，然后按照以下分组加样：
阴性对照组(control)：添加DMEM(无血清)培养基；
模型组(OA)：添加现配置的油酸培养基；
实验组：添加现配置的油酸培养基后分别添加实施例3制备的5wt％植物乳杆菌5b4m2发酵上清液、5wt％动物双歧杆菌5b5L3发酵上清液(保藏编号为CCTCC M 2021389，该菌株公开于CN112940996A的专利文件中)，加样后继续培养SZ95细胞24h。
染色处理：
将各组培养24h后的SZ95细胞用PBS洗1次，然后利用4％甲醛固定细胞5min(甲醛没过细胞即可，弃液，PBS洗1次；然后利用60％的异丙醇处理细胞5min(没过细胞即可)，弃液；将各组以120μL/每孔的添加量加入油红O染色工作液，避光染色处理1小时；染色结束后，用真空泵吸去油红O染色工作液，然后每孔加入200μL 60wt％异丙醇溶液处理3min，弃去异丙醇，最后利用显微镜观察，细胞染色红色越多，表明油脂越多)；每孔加入200μL，100％异丙醇，避光，摇床孵育5min，使与油脂结合的油红O充分洗涤下来；然后将洗涤下来的油红O洗涤液转移150μL到96孔板中，利用酶标仪在OD500nm处测量吸光值。并按照以下公式计算油脂相对分泌率：
油脂相对分泌率(％)＝OD实验组/OD模型组*100
每组实验设置3个平行。使用GraphPad 8.0.2进行统计学分析，结果以均值±标准差表示。P-value<0.05被认为有统计学上的显著差异。
2.实验结果
(1)SZ95细胞染色后镜检结果如图2所示，其中，A为阴性对照组，B为模型组，C为植物乳杆菌5b4m2发酵上清液实验组。
图2显示，模型组红色区域显著高于阴性对照组，说明造模成功；模型组的红色区域显著高于实验组，说明，添加植物乳杆菌5b4m2发酵上清液后油脂的分泌得到了显著的抑制，说明植物乳杆菌5b4m2发酵上清液具有抑制油脂分泌的作用。
(2)SZ95细胞油脂相对分泌率如表3和图3所示，油脂分泌抑制率＝1-油脂相对分泌率。
表3
根据表3和图3结果，5％添加量的植物乳杆菌5b4m2发酵上清液的油脂相对分泌率为48.39％，油脂分泌抑制率为51.61％，抑油效果明显优于同等浓度下的动物双歧杆菌5b5L3发酵上清液。
实施例6植物乳杆菌5b4m2发酵上清液β-EP含量测试
以5×103个细胞/孔的密度将HaCat细胞接种到96孔板中，37℃，5％CO2条件下培养24小时后，吸走上清。
实验组：每孔中分别加入100μL含有5wt％实施例3制备的植物乳杆菌5b4m2上清液的DMEM(无血清)培养基；
对照组：每孔中加入100μL DMEM(无血清)培养基；
各组添加培养基后在37℃、5％CO2条件下培养48小时，收集培养基上清液，使用ELISA试剂盒检测β-EP的含量。每组实验设置3个平行取平均值，使用GraphPad 8.0.2进行统计学分析，结果以均值±标准差表示。
β-EP的含量测试结果如表4所示，
表4
注：“*”表示与对照组比较，P<0.05。
表4结果显示，实验组与对照组所产生的β-EP相比较，实验组的β-EP含量显著增加，表明植物乳杆菌5b4m2上清液可刺激HaCat细胞产生β-EP，效果显著，β-EP(β-内啡肽)可镇静肌肤舒缓敏感，可将含有植物乳杆菌5b4m2上清液的制剂作用于皮肤，调节皮肤细胞功能，达到镇静舒缓肌肤的功效，还可以在皮肤免疫反应、色素调节等方面发挥重要作用。
实施例7抑油人体试验
将实施例3制备的植物乳杆菌5b4m2发酵上清液以5wt％加入到精华液基液(湖北嫦娥药业有限公司)中，制备成护肤产品。
选择年龄18～35岁的受试者20人，所选择的受试者均为面部皮肤出现不同程度油脂分泌过盛问题的人群，共分为2组，每组样品受试者10人，一组受试者使用添加有植物乳杆菌5b4m2发酵上清液的精华液制备的护肤产品，另一组受试者使用未添加其他任何成分的精华液。每位受试者每天早晚洁面后，将护肤产品/精华液均匀涂抹于面部，连续使用一个月，在试验期间受试者不使用其他护肤品及药物，并保持正常的作息及饮食。采用皮脂量测试仪分别测定使用两周及4周后志愿者面部平均皮脂减少率(％)，平均皮脂减少率的测试结果如表5所示，
表5
表5结果显示，使用添加有植物乳杆菌5b4m2发酵上清液的精华液制备的护肤产品后，志愿者面部平均皮脂减少率在两周达到39.1％，四周达到57.5％，显著高于未添加植物乳杆菌5b4m2发酵上清液的精华液，说明植物乳杆菌5b4m2发酵上清液能够显著抑制皮肤油脂的分泌。
实施例8胰脂肪酶抑制功能检测
利用罗丹明显色平板法进行胰脂肪酶抑制的功能检测，将实施例2得到的植物乳杆菌5b4m2 37℃厌氧培养24h后，菌液7000rpm离心5min取上清液，将50U/mL，45μL(10mg/mL)的猪胰酶与45μL上清液的混合液孵育25min。取准备好的罗丹明显色平板打孔，将孵育好的90μL混合液加入到5mm孔中，在37℃下孵育24h。利用紫外灯观察，以产橘黄色光圈的光圈直径小于15mm作为有抑制效果的评价标准。经检测发现，光圈直径为13mm，说明植物乳杆菌5b4m2对猪胰酶具有抑制作用，可抑制甘油三酯的生成，达到降脂的作用。
实施例9促进骨细胞(C3H10T1/2)生长的检测
骨细胞C3H10T1/2的培养：采用含有10％胎牛血清、100U/mL青霉素和100mg/L链霉素的DMEM培养基培养骨细胞C3H10T1/2，置于37℃、5％CO2条件下过夜培养。骨细胞C3H10T1/2接种于96孔板，每孔5×103，个细胞，添加实施例3制备的植物乳杆菌5b4m2上清液100μl刺激骨细胞1h，刺激结束后，每孔加入20μL 5mg/mL MTT溶液，4h后弃培养基，每孔加入DMSO 100μL，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测值，并以此计算细胞的生长率。CK细胞组是不经任何刺激的骨细胞，空白MRS是不经任何刺激MRS培养基培养的骨细胞。
骨细胞生长率结果如表6所示，
表6
表6显示，植物乳杆菌5b4m2刺激下的骨细胞生长率达132.38％，显著高于CK细胞组和空白MRS组，说明植物乳杆菌5b4m2可促进骨细胞C3H10T1/2生长，可有效促进正常的骨骼生长，可作为治疗骨骼发育缓慢、疏松的制剂。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 广东粤港澳大湾区国家纳米科技创新研究院
<120> 一种植物乳杆菌5b4m2及其应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1041
<212> DNA
<213> Lactobacillus plantarum 5b4m2(Lactobacillus plantarum)
<400> 1
catctctgtc ccttaggcgg ctggttccta aaaggttacc ccaccgactt tgggtgttac 60
aaactctcat ggtgtgacgg gcggtgtgta caaggcccgg gaacgtattc accgcggcat 120
gctgatccgc gattactagc gattccgact tcatgtaggc gagttgcagc ctacaatccg 180
aactgagaat ggctttaaga gattagctta ctctcgcgag ttcgcaactc gttgtaccat 240
ccattgtagc acgtgtgtag cccaggtcat aaggggcatg atgatttgac gtcatcccca 300
ccttcctccg gtttgtcacc ggcagtctca ccagagtgcc caacttaatg ctggcaactg 360
ataataaggg ttgcgctcgt tgcgggactt aacccaacat ctcacgacac gagctgacga 420
caaccatgca ccacctgtat ccatgtcccc gaagggaacg tctaatctct tagatttgca 480
tagtatgtca agacctggta aggttcttcg cgtagcttcg aattaaacca catgctccac 540
cgcttgtgcg ggcccccgtc aattcctttg agtttcagcc ttgcggccgt actccccagg 600
cggaatgctt aatgcgttag ctgcagcact gaagggcgga aaccctccaa cacttagcat 660
tcatcgttta cggtatggac taccagggta tctaatcctg tttgctaccc atactttcga 720
gcctcagcgt cagttacaga ccagacagcc gccttcgcca ctggtgttct tccatatatc 780
tacgcatttc accgctacac atggagttcc actgtcctct tctgcactca agtttcccag 840
tttccgatgc acttcttcgg ttgagccgaa ggctttcaca tcagacttaa aaaaccgcct 900
gcgctcgctt tacgcccata aatccggaca cgcttgcccc tacgtttacc gcgctgctgg 960
acgtaatagc cggggtttct ggtaataccg ccatacctga cagtactctc agattgtctt 1020
ctttacaaca aattttcagc c 1041

Claims (14)

1.一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)5b4m2，其特征在于，于2022年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M 2022885，保藏地址为中国，武汉，武汉大学。
2.权利要求1所述植物乳杆菌5b4m2在制备抑制皮肤油脂分泌和/或镇静舒缓肌肤的制剂方面的应用。
3.权利要求2所述应用，其特征在于，所述应用中的制剂还包括抗生素，所述抗生素为氯霉素、四环素、氨苄西林、新霉素、庆大霉素或萘啶酸。
4.权利要求1所述植物乳杆菌5b4m2在制备抑制皮肤油脂分泌和/或镇静舒缓肌肤的药物中的应用。
5.权利要求4所述应用，其特征在于，所述应用中的药物还包括抗生素，所述抗生素为氯霉素、四环素、氨苄西林、新霉素、庆大霉素或萘啶酸。
6.权利要求1所述植物乳杆菌5b4m2在制备修护油脂皮肤和/或镇静舒缓肌肤的日化品中的应用。
7.权利要求6所述应用，其特征在于，所述应用中的日化品还包括抗生素，所述抗生素为氯霉素、四环素、氨苄西林、新霉素、庆大霉素或萘啶酸。
8.权利要求1所述植物乳杆菌5b4m2在制备促进骨骼再生的药物方面的应用。
9.权利要求8所述应用，其特征在于，所述应用中的药物还包括抗生素，所述抗生素为氯霉素、四环素、氨苄西林、新霉素、庆大霉素或萘啶酸。
10.权利要求1所述植物乳杆菌5b4m2在制备降脂的制剂方面的应用。
11.权利要求10所述应用，其特征在于，所述应用中的制剂还包括抗生素，所述抗生素为氯霉素、四环素、氨苄西林、新霉素、庆大霉素或萘啶酸。
12.一种抑制皮肤油脂分泌和/或镇静舒缓肌肤的制剂，其特征在于，含有权利要求1所述植物乳杆菌5b4m2的菌体和/或发酵产物，所述发酵产物为发酵上清液，所述发酵上清液是植物乳杆菌5b4m2经发酵后，过滤除菌后得到。
13.一种药物，其特征在于，含有权利要求1所述植物乳杆菌5b4m2的菌体和/或发酵产物，所述发酵产物为发酵上清液，所述发酵上清液是植物乳杆菌5b4m2经发酵后，过滤除菌后得到。
14.一种日化品，其特征在于，含有权利要求1所述植物乳杆菌5b4m2的发酵产物，所述发酵产物为发酵上清液，所述发酵上清液是植物乳杆菌5b4m2经发酵后，过滤除菌后得到。
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