CN115156263B - 利用氧化石墨烯强化铜绿假单胞菌修复污染土壤的方法 - Google Patents
利用氧化石墨烯强化铜绿假单胞菌修复污染土壤的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115156263B CN115156263B CN202210792786.XA CN202210792786A CN115156263B CN 115156263 B CN115156263 B CN 115156263B CN 202210792786 A CN202210792786 A CN 202210792786A CN 115156263 B CN115156263 B CN 115156263B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- soil
- pseudomonas aeruginosa
- pahs
- graphene oxide
- polycyclic aromatic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000002689 soil Substances 0.000 title claims abstract description 67
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 title claims abstract description 51
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 27
- 229910021389 graphene Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 125000005575 polycyclic aromatic hydrocarbon group Chemical group 0.000 claims abstract description 60
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 12
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 4
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 2
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 claims description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 14
- 230000008439 repair process Effects 0.000 abstract description 11
- 238000005067 remediation Methods 0.000 abstract description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 6
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 abstract description 5
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000003014 reinforcing effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 abstract description 3
- 230000032683 aging Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 7
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 2
- 238000003900 soil pollution Methods 0.000 description 2
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- -1 biochar Substances 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 125000003700 epoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 238000012165 high-throughput sequencing Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011147 inorganic material Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011368 organic material Substances 0.000 description 1
- 239000002957 persistent organic pollutant Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000001878 scanning electron micrograph Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000003911 water pollution Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09B—DISPOSAL OF SOLID WASTE NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- B09B3/00—Destroying solid waste or transforming solid waste into something useful or harmless
- B09B3/60—Biochemical treatment, e.g. by using enzymes
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09B—DISPOSAL OF SOLID WASTE NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- B09B5/00—Operations not covered by a single other subclass or by a single other group in this subclass
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/20—Air quality improvement or preservation, e.g. vehicle emission control or emission reduction by using catalytic converters
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
- Y02W10/00—Technologies for wastewater treatment
- Y02W10/10—Biological treatment of water, waste water, or sewage
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明属有机污染土壤修复技术领域，尤其涉及一种利用氧化石墨烯（GO）强化铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PAE）修复多环芳烃（PAHs）污染土壤的方法。将PAE活化培养后加入50~100 mg·L‑1的GO，混合培养2天后接种于待修复的PAHs污染土壤，从而实现对污染土壤PAHs的高效生物降解。本发明将GO作为生物强化修复材料，与单一采用PAE降解PAHs相比，对老化污染场地土壤PAHs的降解率可以提高2倍以上。本发明修复效果好，技术要求低，是一种操作简单、绿色环保、成本较低的有机污染土壤污修复技术。
Description
技术领域
本发明属有机污染土壤修复技术领域，尤其涉及一种利用氧化石墨烯（GO）强化铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PAE）修复多环芳烃（PAHs）污染土壤的方法。
背景技术
PAHs是一类典型的持久性有机污染物，可以直接或通过干湿沉降的方式进入土壤。根据2014年《全国土壤污染状况调查公报》，全国工业企业搬迁遗留的严重污染场地超过50万家，土壤PAHs污染已成为我国当前一个严峻的问题。微生物强化作为一种操作简单、绿色环保、成本较低的修复技术，近年来在PAHs污染土壤修复中展现了广阔的应用前景。例如，向污染土壤中添加人工分离的高效PAHs降解菌株，可以增强PAHs污染土壤的强化修复。
假单胞菌属是一类专性需氧的革兰氏染色阴性菌，研究发现，其对土壤PAHs具有显著的降解效果。铜绿假单胞菌（PAE）是假单胞菌属的代表菌种，在土壤中广泛存在，具有种类多样的酶系统、丰富的胞外分泌物以及广泛的底物利用能力，近年来，其在土壤PAHs生物修复方面展现出了很好的应用前景，市场上已有商品化的PAE菌株售卖。
PAHs污染场地土壤经历了长期老化过程，高环PAHs的占比高，生物利用度低，显著降低了微生物修复效率。研究发现，一些强化修复材料，如生物炭等无机材料、海藻酸盐和聚乙烯醇等有机材料，或通过吸附结合PAHs和微生物，或通过影响微生物代谢，可以显著提高PAHs的生物利用度，增强污染土壤的修复效率。强化材料的修复效果、制备费用以及环境影响已成为了强化微生物修复研究的热点。氧化石墨烯（GO）是一种新型碳质纳米材料，含有羧基、羰基、羟基和环氧基团等反应性官能团，具有优良的物理化学性能及高亲水性和高反应活性。研究表明，GO可以吸附水体中的污染物，同时提高微生物多样性，提高微生物对污染物的降解能力，在水体污染修复领域已获得了较好的应用前景。然而，GO在污染土壤修复中的研究却鲜有报道。因此，本发明利用GO加载PAE，将GO应用于PAHs污染土壤的生物强化修复技术，显著了提升PAE对老化土壤PAHs的生物降解率。
发明内容
本发明的目的在于提供了一种利用氧化石墨烯（GO）强化铜绿假单胞菌（PAE）修复多环芳烃（PAHs）污染土壤的方法，该方法多环芳烃去除率高，修复效果理想，解决了老场地化PAHs污染土壤生物修复效率低的难题。
为解决上述技术问题，本发明是这样实现的：
利用氧化石墨烯强化铜绿假单胞菌修复多环芳烃污染土壤的方法，系将铜绿假单胞菌活化后，加入氧化石墨烯水溶液，再经混合培养后接种于待修复多环芳烃污染土壤，以实现污染土壤多环芳烃的生物降解。氧化石墨烯（GO）与铜绿假单胞菌（PAE）均易购买获得。
进一步地，本发明所述铜绿假单胞菌为分离自有机污染场地土壤中的多环芳烃高效降解菌株。
进一步地，本发明所述铜绿假单胞菌活化步骤如下：将保存于-80℃的铜绿假单胞菌菌种保藏管缓慢解冻，吸取100μL菌液并接种于10mL液体LB培养基中进行活化培养24 h。
进一步地，本发明所述氧化石墨烯水溶液的体积浓度为10%。
进一步地，本发明所述混合培养时间为2天，期间观察铜绿假单胞菌菌株生长状况。
进一步地，本发明将混合培养后的活化氧化石墨烯-铜绿假单胞菌菌株，按体积浓度1%的比例，接种于待修复多环芳烃污染土壤，搅拌均匀，处理2周后，通过高效液相色谱测定土壤残留多环芳烃的含量。
进一步地，本发明所述LB培养基的制备方法如下：将5.0 g酵母粉、10.0g胰蛋白胨和5.0 g NaCl充分溶解于1 L去离子水中，用1 mol·L-1的NaOH溶液将pH调节至7.0后，在0.12 MPa、121℃下高温高压灭菌30min备用。
进一步地，本发明所述混合培养温度为32℃，光暗周期为14 h/10 h。
进一步地，本发明生物降解处理期间，保持土壤30~50%的最大田间持水量。
本发明与现有技术相比，具有以下优点：
1、与单一采用PAE修复PAHs污染土壤相比，本发明涉及的GO-PAE联合修复技术对PAHs的去除率可以提高2倍以上。
2、本发明方法采用微生物修复技术为主，外源强化技术为辅，其修复效果好，技术要求低，是一种操作简单、绿色环保、成本较低的修复技术。
3、本发明采用的GO材料，不仅对PAE菌株的生长具有促进作用，同时对污染土壤的土著微生物也有促进作用，适用于土壤污染的长期治理与修复。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步说明。本发明的保护范围不仅局限于下列内容的表述。
图1为本发明实施例提供的铜绿假单胞菌培养基中加入不同浓度的氧化石墨烯培养2天后的SEM图谱。
图2-1为本发明实施例提供的不同浓度的氧化石墨烯对铜绿假单胞菌生长（a）的影响。
图2-2为本发明实施例提供的不同浓度的氧化石墨烯对EPS中多糖和蛋白质含量（b）的影响。
图3 -1为本发明实施例提供的加入不同浓度氧化石墨烯后PAHs的降解率（a）。
图3 -2为本发明实施例提供的加入不同浓度氧化石墨烯后不同环数PAHs的残余浓度（b）。
具体实施方式
以下结合实例对本发明的具体实施方式做进一步说明，应当指出的是，此处所描述的具体实施方式只是为了说明和解释本发明，并不局限于本发明。
利用氧化石墨烯强化铜绿假单胞菌修复多环芳烃污染土壤的方法，其步骤是：
（1）将保存于-80℃的铜绿假单胞菌菌种保藏管缓慢解冻，吸取100μL菌液接种于10 mL液体LB培养基中，于恒温振荡器中培养8 h（避光，30℃，150 r·min-1）后，按1:10的比例（V/V）接入到100 mL的液体LB培养基中继续培养16 h。随后，将菌液于6000 r·min-1离心5 min，弃上清液，采用0.2 mol·L-1磷酸盐缓冲液清洗2次后重新悬浮。
（2）称取50 g PAHs污染土壤于直径约12 cm的玻璃培养皿中。在氧化石墨烯水溶液（100 mg·kg-1）中加入1%（V/V）步骤（1）所得铜绿假单胞菌溶液，随后接种于污染土壤，搅拌均匀。
（3）样品置于培养箱中培养，设置培养箱温度为36℃，光暗周期为14 h/10 h，期间采用称重法补加超纯水保证土壤原有的持水量。
（4）分别在3、14、21和28天时取样，土壤样品于6000 r·min-1离心10 min，取出5 g样品进行液相前处理。使用高效液相色谱进行PAHs含量分析，比较处理前后PAHs的浓度差异，并计算其降解率。
实施例l
利用氧化石墨烯（GO）强化铜绿假单胞菌（PAE）修复多环芳烃（PAHs）污染土壤的方法，包括如下步骤：
（1）供试污染土壤及污染特征
PAHs污染土壤取自辽宁某钢厂周边区域。取表层0 ~ 20 cm土壤，风干后去除植物残体和石块，研磨后过2 mm筛备用。经测定，所采集土壤的基本理化性质为：土壤pH为7.3，有机碳含量为4.62%，总氮含量为0.3%，总碳含量为1.7%，含水率18.7%。经液相色谱测得，16种PAHs总浓度为273.25 mg·kg-1，其中2环至6环PAHs占总浓度的比例分别为0.13%、14.08%、43.88%、27.75%和14.17%。
（2）PAE的活化与培养
将保存于-80℃的PAE菌种保藏管缓慢解冻，吸取100 μL菌液接种于10 mL液体LB培养基中，于恒温振荡器中培养8 h（避光，32 ℃，150 r·min-1）后，按1:10的比例（V/V）接入到100 mL的液体培养基中继续培养16 h。随后，将菌液于6000 r·min-1离心5 min，弃上清液，采用0.2 mol·L-1磷酸盐缓冲液清洗2次后重新悬浮。
（3）GO对PAE生长生理状况的影响
案例共设置4个不同浓度的氧化石墨烯处理：1）G0：5 mL LB培养基；2）G50：0.25mL GO + 4.75 mL LB培养基；3）G100：0.5 mL GO + 4.5 mL LB培养基；4）G200：1mL GO + 4mLLB培养基。上述4个处理均加入1%（V/V）已活化的PAE菌液，置于恒温培养箱中（温度为36℃，光暗周期为12 h/12 h）。培养48 h后，测定菌株生长及生理状况。指标包括形态表征、生长状况以及胞外聚合物（EPS，包括多糖以及蛋白质含量）。
利用SEM观察发现（图1），G100处理组中，附着在GO表面的PAE及其EPS密度显著多于G0和G200处理组。G100处理组OD600以及EPS中蛋白质、多糖的含量均显著高于G0和G200组（P＜0.05）（图2）。这些结果表明，在LB培养基中添加100 mg·L-1的GO可以显著促进PAE的生长。
（4）GO对PAE修复PAHs污染土壤的影响
在步骤（3）的基础上，称取50 g PAHs污染土壤于直径约12 cm的玻璃培养皿中。在不同浓度的GO溶液中加入1%（V/V）经活化培养48 h的PAE菌液，随后接种于污染土壤，搅拌均匀。案例共设置5个处理：1）对照（CK）：土壤 + 等体积的超纯水；2）G0：土壤 + PAE；3）G50: 土壤 + PAE + GO（50 mg·kg-1）；4）G100：土壤 + PAE + GO（100 mg·kg-1）；5）G200：土壤 + PAE + GO（200 mg·kg-1）。样品置于培养箱中（温度为32℃，光暗周期为14 h/10h），期间采用称重法补加超纯水保证土壤原有的持水量。每个处理重复3次，分别在7、14、21和28天时取样，测定土壤中PAHs的含量。
图3-1所示，适宜浓度氧化石墨烯的添加对铜绿假单胞菌降解土壤PAHs产生了显著影响：添加100 mg·L-1GO-PAE处理2周后，老化土壤中PAHs的降解率达32.11%，是未添加GO组的2.4倍。此外，G100对3/4/5/6环PAHs去除率分别是G0组的2.4、2.4、2.6和2.3倍（图3-2）。
（5）GO对土著微生物多样性的影响
在步骤（4）的基础上，实验结束后，采用高通量测序分析了不同处理中微生物的多样性，利用RDP classifier （Ribosomal Database Program）贝叶斯算法对OTU的代表性序列进行物种分类学分析，多样性指数包括ace、chao1、shannon和simpson。由表1可以看出，GO的添加使土著微生物群落和PAE丰度发生明显增加，表明GO不仅对PAE菌株的生长具有促进作用，同时对污染土壤的土著微生物也有促进作用。
表1 CK/G0/G100处理组细菌多样性指数评估
| 处理 | ace | chao1 | shannon | simpson |
| CK | 8850±249a | 6104±261a | 10.979±0.041a | 0.798±0.001a |
| G0 | 10172±415b | 9622±410b | 13.797±0.052b | 0.998±0b |
| G100 | 10113±132b | 9456±118b | 15.761±0.097c | 0.997±0.001b |
注: 不同字母代表各处理间差异显著（P＜0.05），下同。
由上述案例说明，与单一采用PAE降解PAHs相比，将PAE活化培养后加入50 ~ 100mg·L-1的GO，联合GO-PA修复14天后，对老化污染场地土壤PAHs的降解率可以提高2倍以上，实现了污染土壤PAHs的高效生物降解。本发明修复效果好，技术要求低，是一种操作简单、绿色环保、成本较低的修复技术。
可以理解地是，以上关于本发明的具体描述，仅用于说明本发明而并非受限于本发明实施例所描述的技术方案，本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或等同替换，以达到相同的技术效果；只要满足使用需要，都在本发明的保护范围之内。
Claims (1)
1.一种利用氧化石墨烯强化铜绿假单胞菌修复多环芳烃污染土壤的方法，其特征在于：将铜绿假单胞菌活化后，加入氧化石墨烯水溶液，再经混合培养后接种于待修复多环芳烃污染土壤，以实现污染土壤多环芳烃的生物降解；所述铜绿假单胞菌为分离自有机污染场地土壤中的多环芳烃高效降解菌株；所述铜绿假单胞菌活化步骤如下：将保存于-80℃的铜绿假单胞菌菌种保藏管缓慢解冻，吸取100μL菌液并接种于10mL液体LB培养基中进行活化培养24h；所述氧化石墨烯水溶液的体积浓度为10%；所述混合培养时间为2天，期间观察铜绿假单胞菌菌株生长状况；将混合培养后的活化氧化石墨烯-铜绿假单胞菌菌株，按体积浓度1%的比例，接种于待修复多环芳烃污染土壤，搅拌均匀，处理2周后，通过高效液相色谱测定土壤残留多环芳烃的含量；所述LB培养基的制备方法如下：将5.0g酵母粉、10.0g胰蛋白胨和5.0gNaCl充分溶解于1L去离子水中，用1mol·L-1的NaOH溶液将pH调节至7.0后，在0.12MPa、121℃下高温高压灭菌30 min备用；所述混合培养温度为32℃，光暗周期为14h/10h；生物降解处理期间，保持土壤30～50%的最大田间持水量。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210792786.XA CN115156263B (zh) | 2022-07-07 | 2022-07-07 | 利用氧化石墨烯强化铜绿假单胞菌修复污染土壤的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210792786.XA CN115156263B (zh) | 2022-07-07 | 2022-07-07 | 利用氧化石墨烯强化铜绿假单胞菌修复污染土壤的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115156263A CN115156263A (zh) | 2022-10-11 |
| CN115156263B true CN115156263B (zh) | 2023-10-27 |
Family
ID=83491213
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210792786.XA Active CN115156263B (zh) | 2022-07-07 | 2022-07-07 | 利用氧化石墨烯强化铜绿假单胞菌修复污染土壤的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115156263B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116062907A (zh) * | 2023-02-09 | 2023-05-05 | 中国科学院南京土壤研究所 | 一种水体中PAHs的微生物降解净化方法 |
Citations (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4871673A (en) * | 1985-12-20 | 1989-10-03 | Rehm Hans J | Process for the decontamination of soil by means of microorganisms |
| US5128262A (en) * | 1987-10-02 | 1992-07-07 | Wintershell Ag | Microbial decontamination of soils contaminated with hydrocarbons, in particular mineral oils by microbial oxidation |
| AU4738499A (en) * | 1994-12-16 | 1999-11-11 | Cytec Technology Corp. | Method for obtaining microorganisms which degrade organic compound(s) |
| CN105695443A (zh) * | 2016-03-09 | 2016-06-22 | 浙江工商大学 | Triton X-100强化生物炭固定化微生物材料及其制备方法和应用 |
| CN108114976A (zh) * | 2017-12-19 | 2018-06-05 | 轻工业环境保护研究所 | 一种修复污染土壤的方法 |
| CN108637005A (zh) * | 2018-05-14 | 2018-10-12 | 江苏金环环保设备有限公司 | 一种修复多环芳烃污染的复合材料、其制备方法及用途 |
| CN109365495A (zh) * | 2018-12-05 | 2019-02-22 | 辽宁石油化工大学 | 生物炭负载表面活性剂耦合微生物植物修复石油污染土壤的方法 |
| CN109402001A (zh) * | 2018-10-31 | 2019-03-01 | 广东轻工职业技术学院 | 一种添加柠檬酸钠促进铜绿假单胞菌降解芘的方法及其应用 |
| CN109536400A (zh) * | 2018-10-30 | 2019-03-29 | 山西大学 | 一种氧化石墨烯纳米复合材料固定的微生物复合制剂、制备方法及其在焦化废水中的应用 |
| CN109851058A (zh) * | 2019-01-14 | 2019-06-07 | 曲阜师范大学 | 一种猪场养殖废水的微生物石墨烯联合处理方法 |
| CN111849956A (zh) * | 2020-06-05 | 2020-10-30 | 中国科学院南京土壤研究所 | 纳米材料固定化微生物修复剂及其制备方法和应用 |
| CN112246228A (zh) * | 2020-10-31 | 2021-01-22 | 兰州资源环境职业技术学院 | 一种去除土壤中重金属污染的改性石墨烯材料制备方法 |
| CN112872002A (zh) * | 2021-02-02 | 2021-06-01 | 华中农业大学 | 硒联合铜绿假单胞菌在强化植物修复镉-壬基酚复合污染土壤中的应用 |
| CN113930365A (zh) * | 2021-11-09 | 2022-01-14 | 南京尚土生态环境有限公司 | 一株降解多环芳烃的铜绿假单胞菌及应用 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MX2016016117A (es) * | 2014-06-06 | 2018-01-15 | Boldwater Usa Lp | Proceso para descontaminacion de un material contaminado. |
| CA3031942A1 (en) * | 2019-01-30 | 2020-07-30 | Satinder Kaur Brar | In situ enzymatic degradation of hydrocarbon-polluted soils |
| CA3077231A1 (en) * | 2019-03-29 | 2020-09-29 | Metabolik Technologies Inc. | Biodegradation of toxic organic compounds in contaminated environments |
-
2022
- 2022-07-07 CN CN202210792786.XA patent/CN115156263B/zh active Active
Patent Citations (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4871673A (en) * | 1985-12-20 | 1989-10-03 | Rehm Hans J | Process for the decontamination of soil by means of microorganisms |
| US5128262A (en) * | 1987-10-02 | 1992-07-07 | Wintershell Ag | Microbial decontamination of soils contaminated with hydrocarbons, in particular mineral oils by microbial oxidation |
| AU4738499A (en) * | 1994-12-16 | 1999-11-11 | Cytec Technology Corp. | Method for obtaining microorganisms which degrade organic compound(s) |
| CN105695443A (zh) * | 2016-03-09 | 2016-06-22 | 浙江工商大学 | Triton X-100强化生物炭固定化微生物材料及其制备方法和应用 |
| CN108114976A (zh) * | 2017-12-19 | 2018-06-05 | 轻工业环境保护研究所 | 一种修复污染土壤的方法 |
| CN108637005A (zh) * | 2018-05-14 | 2018-10-12 | 江苏金环环保设备有限公司 | 一种修复多环芳烃污染的复合材料、其制备方法及用途 |
| CN109536400A (zh) * | 2018-10-30 | 2019-03-29 | 山西大学 | 一种氧化石墨烯纳米复合材料固定的微生物复合制剂、制备方法及其在焦化废水中的应用 |
| CN109402001A (zh) * | 2018-10-31 | 2019-03-01 | 广东轻工职业技术学院 | 一种添加柠檬酸钠促进铜绿假单胞菌降解芘的方法及其应用 |
| CN109365495A (zh) * | 2018-12-05 | 2019-02-22 | 辽宁石油化工大学 | 生物炭负载表面活性剂耦合微生物植物修复石油污染土壤的方法 |
| CN109851058A (zh) * | 2019-01-14 | 2019-06-07 | 曲阜师范大学 | 一种猪场养殖废水的微生物石墨烯联合处理方法 |
| CN111849956A (zh) * | 2020-06-05 | 2020-10-30 | 中国科学院南京土壤研究所 | 纳米材料固定化微生物修复剂及其制备方法和应用 |
| CN112246228A (zh) * | 2020-10-31 | 2021-01-22 | 兰州资源环境职业技术学院 | 一种去除土壤中重金属污染的改性石墨烯材料制备方法 |
| CN112872002A (zh) * | 2021-02-02 | 2021-06-01 | 华中农业大学 | 硒联合铜绿假单胞菌在强化植物修复镉-壬基酚复合污染土壤中的应用 |
| CN113930365A (zh) * | 2021-11-09 | 2022-01-14 | 南京尚土生态环境有限公司 | 一株降解多环芳烃的铜绿假单胞菌及应用 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Adsorption and desorption of phthalic acid esters on graphene oxide and reduced graphene oxide as affected by humic acid;Lun Lu;《Environmental Pollution》;第232卷;505-513 * |
| PAHs降解功能菌的识别与生物强化修复PAHs污染土壤研究进展;滕庭庭等;《应用技术学报》;第22卷(第1期);16-26 * |
| Research progress on removal of phthalates pollutants from environment;Ziqiao Zhu et al.;《Journal of Molecular Liquids》;第355卷;1-16 * |
| 毛婷玉.石墨烯对土壤中微生物降解多环芳烃的影响机制研究.《中国优秀硕士学位论文全文数据库基础科学辑》.2021,(第04期),第13-14、16-58页. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115156263A (zh) | 2022-10-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111748483B (zh) | 一株石油烃降解芽孢杆菌及其应用 | |
| CN108624582B (zh) | 用于土壤修复的微生物制剂 | |
| CN113930365B (zh) | 一株降解多环芳烃的铜绿假单胞菌及应用 | |
| CN112159771B (zh) | 聚丙烯高效降解菌株licme 200610 wgh-6及其生产的菌剂和应用 | |
| CN115156263B (zh) | 利用氧化石墨烯强化铜绿假单胞菌修复污染土壤的方法 | |
| CN117025490B (zh) | 一株用于土壤修复的菌株、菌剂及其应用 | |
| CN106906158B (zh) | 一株含油污泥降解功能菌及其应用 | |
| CN110564635B (zh) | 一株高效降解石油的雷氏普罗维登斯菌l1与应用 | |
| CN111849956B (zh) | 纳米材料固定化微生物修复剂及其制备方法和应用 | |
| CN111235068A (zh) | 一种红霉素降解菌rjj-61及其应用 | |
| CN108046555B (zh) | 一种用于修复底泥污染的高地芽孢杆菌的制备方法及应用 | |
| CN112011480B (zh) | 一株芳香烃降解菌及其应用 | |
| CN111304098B (zh) | 一种红霉素降解菌rjj-5及其应用 | |
| CN110241110B (zh) | 利用磁性纳米颗粒固定化邻苯二甲酸二丁酯降解菌的方法及应用 | |
| CN111808770B (zh) | 一株降解原油的空气芽孢杆菌及应用 | |
| CN112374685B (zh) | 一种压裂返排液生物修复方法 | |
| CN114990027B (zh) | 一株降解卤代酸的假单胞菌w52及其应用 | |
| CN111235041A (zh) | 一种红霉素降解菌rjj-62及其应用 | |
| CN117903990B (zh) | 一种贝莱斯芽胞杆菌及其应用 | |
| CN115247140B (zh) | 一种砷胁迫下降解石油烃的菌株及其应用 | |
| CN115181700B (zh) | 植物内菌生木糖氧化无色杆菌l451在降解有机污染物中的应用 | |
| CN115044500B (zh) | 一种高效降解草甘膦及其代谢产物的白色芽孢杆菌及其应用 | |
| CN117106608A (zh) | 一株诱变的解淀粉芽孢杆菌及其在降解石油烃中的应用 | |
| CN116515675A (zh) | 适用于石油及PAHs污染修复的高效功能微生物及其菌剂制备和应用 | |
| CN116121112A (zh) | 一株斯氏皮球菌及其在环境修复中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |