CN115074201A - 一种大鲵肝肽酒及其制备方法 - Google Patents

一种大鲵肝肽酒及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于食品加工领域，具体为一种大鲵肝肽酒及其制备方法，由大鲵肝肽粉与基酒以1‑1.5：100的质量比混合得到大鲵肝肽酒，大鲵肝肽酒的制备方法，包括将离体的大鲵肝脏摘除苦胆，用食盐水浸泡，再用活化后的酵母水发酵，打碎并与水混合，再加入胰蛋白酶和风味蛋白酶双酶解，离心得滤液；滤液脱色脱臭；过滤，干燥得大鲵肝肽粉；向12‑55度的基酒中按大鲵肝肽粉与基酒以1‑1.5:100的质量比加入大鲵肝肽粉，大鲵肝肽酒提高了肝脏中乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的活性，促进乙醇和乙醛的分解，提高了肝中的SOD，GSH‑Px酶活性、抑制谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性，减少了肝组组织中MAD含量，饮酒时起到解酒和护肝作用。

Description

一种大鲵肝肽酒及其制备方法
技术领域
本发明涉及食品加工领域，具体涉及一种大鲵肝肽酒及其制备方法。
背景技术
酒在生活中成为不可缺少的饮品，酒中乙醇进入机体后，10％乙醇由肾脏和肺排出，90％在肝脏内进行代谢和分解，在肝脏中由乙醇脱氢酶氧化为乙醛，乙醛经乙醛脱氢酶氧化为乙酸进入三羧酸循环，最终代谢为二氧化碳和水。饮酒过量会产生酒精中毒，长期嗜酒会形成酒精依赖症，长期饮酒诱发肝硬化以及肝癌，还会引起肥胖、高血脂症、动脉硬化等。
大鲵(Andrias davidianus Blanchard)属大型两栖纲、有尾目、隐鳃鲵科，有“活化石”之称，在地球上生活史有3.5亿元，具有极强抗逆境能力、耐饥能力和繁殖力，农业部规定养殖大鲵可作为食物资源进行合理开发。公开号为CN223553033的中国专利公开了一种保肝大鲵肝肽酒配方及其生产工艺，其通过大鲵肝脏内的金属硫蛋白的结合金属能力和高诱导特性，与人体里内的铅等重金属物质形成化合物从而排出人体，达到保肝养肝的目的，但大鲵肝中含有23.5-25.6％蛋白质，15.5-18.3％糖，脂类30％，钙5.2mg/kg，铁2.6mg/kg，硒60ug/100mg，现有技术中仅公开了利用大鲵肝脏的金属硫蛋白保肝方式，未使大鲵肝脏充分发挥其作用，因此，需要提出一种不同护肝作用的肝肽酒，充分利用大鲵肝脏的功能。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供了一种大鲵肝肽酒及其制备方法。
一种大鲵肝肽酒，由大鲵肝肽粉与基酒以1-1.5：100的质量比混合得到。
优选的，所述基酒的酒精度数为12-55。
一种大鲵肝肽酒的制备方法，包括以下步骤：
S1、将离体的新鲜的大鲵肝脏摘除苦胆，用食盐水浸泡，再用活化后的酵母水发酵，清洗后打碎；
S2、将打碎的大鲵肝脏与水的按1:1-2的质量比加入水，再依次加入胰蛋白酶和风味蛋白酶进行双酶解，酶解后离心得到滤液；
S3、对滤液脱色脱臭；
S4、过滤，真空冷冻干燥成大鲵肝肽粉；
S5、向12-55度的基酒中按大鲵肝肽粉与基酒以1-1.5:100的质量比加入大鲵肝肽粉，全部溶解在基酒中。
优选的，S1中，大鲵为健康3龄以上的大鲵。
优选的，S1中，用质量分数为0.5-1％的食盐水浸泡30-50min，再按酵母：肝脏：水为1-1.5:100：300-500的质量比分别称取酵母、肝脏和水，将称取的酵母和水混合后得到酵母水并进行活化，将称取的肝脏置于活化后的酵母水中发酵1-2h。
优选的，活化时，在酵母水中按蔗糖：酵母水为3-5:100的质量比加入蔗糖，在35-40℃下活化酵母。
优选的，S2中，用质量分数为0.5-1.0％的胰蛋白酶酶解4-5h，再用质量分数为0.5-1.0％的风味蛋白酶酶解4-5h。
优选的，S3中，按活性炭与滤液1-1.5:100的质量比向滤液中加入活性炭，在50-55℃，0.08-0.06Pa真空下脱色脱臭1h。
优选的，S4中过滤时，先用30-50nm陶瓷膜过滤，再用3000Da有机膜过滤，最后用100Da纳滤。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
1、本发明将分子量3000Da以下的肝肽溶解于55度以下酒中，在饮酒的同时用能够提高肝脏中乙醇脱氢酶，乙醛脱氢酶的活性，促进乙醇和乙醛的分解，提高了肝中的SOD，GSH-Px酶活性，提高了抑制谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性，减少了肝组织中MAD含量，起到解酒和护肝作用，加快了酒精代谢速率，减少代谢产物对肝组织的损害作用。
2、用胰蛋白酶和风味蛋白酶进行双酶解，提高小于3000Da肽的产率10-20％，易溶于酒，口感好，用30-50nm陶瓷膜过滤掉活性炭及大分子，用有机膜分离3000Da以下的肽，用100Da纳滤游离氨基酸和盐。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
所用胰蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶的生产厂家均为南宁庞博生物工程有限公司。
实施例1：
一种大鲵肝肽酒的制备方法，包括以下步骤：
S1、取人工养殖的健康3龄以上的大鲵的肝，摘除苦胆，用质量分数为1％的食盐水浸泡30min，再按酵母：肝脏：水为1:100：300的质量比分别称取酵母、肝脏和水，将称取的酵母和水混合后得到酵母水，并按蔗糖：酵母水为3:100的质量比加入蔗糖，在35℃下进行活化，将称取的肝脏置于活化后的酵母水中发酵1h；
S2、按大鲵肝脏与水的质量比1:2加入水，用质量分数为0.5％的胰蛋白酶酶解4h，再用质量分数为0.5％的风味蛋白酶酶解4h，酶解后离心得到滤液；
S3、按活性炭与滤液1:100的质量比向滤液中活性炭，在50℃，0.08Pa真空下脱色脱臭1h；
S4、先用30nm陶瓷膜过滤，再用3000Da有机膜和100Da膜纳滤，冷冻干燥得到肝肽粉；
S5、向53度的基酒中按肝肽粉与基酒的质量比1:100的比例加入肝肽粉，混合。
实施例2
一种大鲵肝肽酒的制备方法，包括以下步骤：
S1、取人工养殖的健康3龄以上的大鲵的肝，摘除苦胆，用质量分数为0.5％的食盐水浸泡50min，再按酵母：肝脏：水为1.5:100：400的质量比分别称取酵母、肝脏和水，将称取的酵母和水混合后得到酵母水，并按蔗糖：酵母水为5:100的质量比加入蔗糖，在35℃下进行活化，将称取的肝脏置于活化后的酵母水中发酵2h；
S2、按大鲵肝脏与水的质量比1:2加入水，用质量分数为1.0％的胰蛋白酶酶解4h，再用质量分数为1.0％的风味蛋白酶酶解5h，酶解后离心得到滤液；
S3、按活性炭与滤液1.5:100的质量比向滤液中加入活性炭，在55℃，0.06Pa真空下脱色脱臭1h；
S4、先用50nm陶瓷膜过滤，再用3000Da有机膜和100Da膜纳滤，冷冻干燥得到肝肽粉；
S5、向55度的基酒中按肝肽粉与基酒的质量比1.5:100的比例加入肝肽粉，混合。
实施例3
一种大鲵肝肽酒的制备方法，包括以下步骤：
S1、取人工养殖的健康3龄以上的大鲵的肝，摘除苦胆，用质量分数为0.5％的食盐水浸泡50min，再按酵母：肝脏：水为1.5:100：500的质量比分别称取酵母、肝脏和水，将称取的酵母和水混合后得到酵母水，并按蔗糖：酵母水为5:100的质量比加入蔗糖，在40℃下进行活化，将称取的肝脏置于活化后的酵母水中发酵1h；
S2、按大鲵肝脏与水的质量比1:2加入水，加入质量分数为0.8％的胰蛋白酶酶解5h，再加入质量分数为0.8％的风味蛋白酶酶解4h，酶解后离心得到滤液；
S3、按活性炭与滤液1.5:100的质量比向滤液中加入活性炭，在55℃，0.06Pa真空下脱色脱臭1h；
S4、先用50nm陶瓷膜过滤，再用3000Da有机膜和100Da膜纳滤，冷冻干燥得到肝肽粉；
S5、向12度的基酒中按肝肽粉与基酒的质量比1.5:100的比例加入肝肽粉，混合。
对比例1
一种大鲵肝肽酒的制备方法，包括以下步骤：
S1、取人工养殖的健康3龄以上的大鲵的肝，摘除苦胆，用质量分数为1％的食盐水浸泡30min，再按酵母：肝脏：水为1:100：300的质量比分别称取酵母、肝脏和水，将称取的酵母和水混合后得到酵母水，并按蔗糖：酵母水为3:100的质量比加入蔗糖，在35℃下进行活化，将称取的肝脏置于活化后的酵母水中发酵1h；
S2、按大鲵肝脏与水的质量比1:2加入水，用质量分数为0.5％的胰蛋白酶酶解4h，，酶解后离心得到滤液；
S3、按活性炭与滤液1:100的质量比向滤液中活性炭，在50℃，0.08Pa真空下脱色脱臭1h；
S4、先用30nm陶瓷膜过滤，再用3000Da有机膜和100Da膜纳滤，冷冻干燥得到肝肽粉；
S5、向53度的基酒中按肝肽粉与基酒的质量比1:100的比例加入肝肽粉，混合。
对比例2
一种大鲵肝肽酒的制备方法，包括以下步骤：
S1、取人工养殖的健康3龄以上的大鲵的肝，摘除苦胆，用质量分数为1％的食盐水浸泡30min，再按酵母：肝脏：水为1:100：300的质量比分别称取酵母、肝脏和水，将称取的酵母和水混合后得到酵母水，并按蔗糖：酵母水为3:100的质量比加入蔗糖，在35℃下进行活化，将称取的肝脏置于活化后的酵母水中发酵1h；
S2、按大鲵肝脏与水的质量比1:2加入水，用质量分数为0.5％的风味蛋白酶酶解4h，酶解后离心得到滤液；
S3、按活性炭与滤液1:100的质量比向滤液中活性炭，在50℃，0.08Pa真空下脱色脱臭1h；
S4、先用30nm陶瓷膜过滤，再用3000Da有机膜和100Da膜纳滤，冷冻干燥得到肝肽粉；
S5、向53度的基酒中按肝肽粉与基酒的质量比1:100的比例加入肝肽粉，混合。
对比例3
一种大鲵肝肽酒的制备方法，包括以下步骤：
S1、取人工养殖的健康3龄以上的大鲵的肝，摘除苦胆，用质量分数为1％的食盐水浸泡30min，再按酵母：肝脏：水为1:100：300的质量比分别称取酵母、肝脏和水，将称取的酵母和水混合后得到酵母水，并按蔗糖：酵母水为3:100的质量比加入蔗糖，在35℃下进行活化，将称取的肝脏置于活化后的酵母水中发酵1h；
S2、按大鲵肝脏与水的质量比1:2加入水，用质量分数为0.5％的胃蛋白酶酶解4h，再用质量分数为0.5％的风味蛋白酶酶解4h，酶解后离心得到滤液；
S3、按活性炭与滤液1:100的质量比向滤液中活性炭，在50℃，0.08Pa真空下脱色脱臭1h；
S4、先用30nm陶瓷膜过滤，再用3000Da有机膜和100Da膜纳滤，冷冻干燥得到肝肽粉；
S5、向53度的基酒中按肝肽粉与基酒的质量比1:100的比例加入肝肽粉，混合。
表1 实施例1与对比例1-3的肽产率
Figure BDA0003705158460000071
如表1所示，利用本发明的双酶解，得到的小于3000Da的肽产率达到5.74％，明显高于风味蛋白酶和胰蛋白酶单独酶解时的肽产率，也高于胃蛋白酶酶解时的肽产率。
为验证本发明提供的大鲵肝肽酒的护肝作用，做如下试验：
昆明雄性小鼠30只，经7d适应期后，按照随机数字表法，随机分成3组，即空白对照组、酒精组、肽酒组，每组10只。每日给酒精组小鼠灌服53°白酒(12mL/kg)，肽酒组灌服53°1％大鲵肝肽酒(12mL/kg)，每天1次，连续10d，空白对照组不做处理。末次灌胃后禁食不禁水12h，摘取眼球取血(4℃、3000r/min、离心15min，取上层血清做保存于-80℃冰箱中)；解剖小鼠，取肝脏，在4℃的生理盐水中反复冲洗，滤纸吸干水分，称取肝脏重量。
按试剂盒的说明书测定小鼠血清的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活力和血乙醇浓度，测定结果如表2。
准确称取0.500g肝组织，按mg/μL＝1:9比例加入9倍体积的预冷生理盐水，冰浴条件下匀浆制成10％肝组织匀浆，3000r/min、4℃离心20min取上清液，按照试剂盒的说明书测定小鼠肝脏的氧化应激相关指标(SOD、GSH-PX活力、MDA)和乙醇代谢酶学相关指标(ADH、ALDH活力)，测定结果如表3。
表2 不同处理组中小鼠血清ALT、AST及血乙醇浓度的测定结果
指标 空白对照组 酒精组 肽酒组
谷丙转氨酶(ALT)/U/L 9.68±0.30 20.10±0.71* 15.98±0.33*<sup>#</sup>
谷草转氨酶(AST)/U/L 11.77±0.20 24.25±0.22* 18.60±0.21*<sup>#</sup>
血乙醇浓度(mg/mL) / 5.83±0.25 4.96±0.18<sup>#</sup>
注：与空白对照组相比，*为P<0.05；与白酒组相比，#为P<0.05。
表3 不同处理组中小鼠肝脏氧化应激代谢酶活性及肝脏代谢酶活性的测定结果
指标 空白对照组 酒精组 肽酒组
SOD(U/mg) 17.51±0.13 12.12±0.09* 14.04±0.15*<sup>#</sup>
GSH-PX(U/mg) 235.07±6.87 169.30±2.89* 194.86±6.55*<sup>#</sup>
MDA(nmol/mg) 1.21±0.06 2.13±0.07* 1.76±0.02*<sup>#</sup>
ADH(U/mg) 8.66±0.08 3.83±0.45* 6.38±0.26*<sup>#</sup>
ALDH(U/mg) 9.09±0.23 6.78±0.55* 8.62±0.28<sup>#</sup>
注：与空白对照组相比，*为P<0.05；与白酒组相比，#为P<0.05。
如表2和表3所示，饮用大鲵肝肽酒后肝脏中乙醇脱氢酶活性从3.83U/mg提高到6.38U/mg，乙醛脱氢酶活性从6.78U/mg提高到8.62U/mg，促进了乙醇和乙醛的分解，起到解酒和护肝作用。饮用大鲵肝肽酒与相同度数和量的白酒比较，肝中SOD活性由12.12U/mg提高到14.21U/mg，GSH-PX酶活性由3.25U/mg提高到4.12U/mg，减少肝组组织中MAD含量30-35％。饮用大鲵肝肽酒与相同度数和量的白酒比较，肝脏中谷丙转氨酶由20.1U/L降低到15.98U/L，谷草转氨酶24.25U/L降低到18.6U/L，大鲵肝肽酒起到了护肝作用。
需要说明的是，本发明权利要求书中涉及数值范围时，应理解为每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，为了防止赘述，本发明描述了优选的实施例。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (9)

1.一种大鲵肝肽酒，其特征在于，由大鲵肝肽粉与基酒以1-1.5：100的质量比混合得到。
2.根据权利要求1所述的一种大鲵肝肽酒，其特征在于，所述基酒的酒精度数为12-55度。
3.一种权利要求1所述的大鲵肝肽酒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将离体的新鲜的大鲵肝脏摘除苦胆，用食盐水浸泡，再用活化后的酵母水发酵，清洗后打碎；
S2、将打碎的大鲵肝脏与水的按1:1-2的质量比加入水，再依次加入胰蛋白酶和风味蛋白酶进行双酶解，酶解后离心得到滤液；
S3、对滤液脱色脱臭；
S4、过滤，真空冷冻干燥成大鲵肝肽粉；
S5、向12-55度的基酒中按大鲵肝肽粉与基酒以1-1.5:100的质量比加入大鲵肝肽粉，全部溶解在基酒中。
4.根据权利要求3所述的一种大鲵肝肽酒的制备方法，其特征在于，S1中，大鲵为健康3龄以上的大鲵。
5.根据权利要求3所述的一种大鲵肝肽酒的制备方法，其特征在于，S1中，用质量分数为0.5-1％的食盐水浸泡30-50min，再按酵母：肝脏：水为1-1.5:100：300-500的质量比分别称取酵母、肝脏和水，将称取的酵母和水混合后得到酵母水并进行活化，将称取的肝脏置于活化后的酵母水中发酵1-2h。
6.根据权利要求5所述的一种大鲵肝肽酒的制备方法，其特征在于，活化时，在酵母水中按蔗糖：酵母水为3-5:100的质量比加入蔗糖，在35-40℃下活化酵母。
7.根据权利要求3所述的一种大鲵肝肽酒的制备方法，其特征在于，S2中，用质量分数为0.5-1.0％的胰蛋白酶酶解4-5h，再用质量分数为0.5-1.0％的风味蛋白酶酶解4-5h。
8.根据权利要求3所述的一种大鲵肝肽酒的制备方法，其特征在于，S3中，按活性炭与滤液1-1.5:100的质量比向滤液中加入活性炭，在50-55℃，0.08-0.06Pa真空下脱色脱臭1h。
9.根据权利要求3所述的一种大鲵肝肽酒的制备方法，其特征在于，S4中过滤时，先用30-50nm陶瓷膜过滤，再用3000Da有机膜过滤，最后用100Da有机膜纳滤。
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