CN115060832A - 奥卡西平口服混悬液中奥卡西平及防腐剂含量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述方法包括采用高效液相色谱法（HPLC）对奥卡西平、抗氧化剂、防腐剂含量进行定量分析；所述的方法采用十八烷基硅烷键合硅胶（ODS）为填料的色谱柱，通过使用流动相A和流动相B梯度洗脱的方式，实现对于奥卡西平口服混悬液及相关制剂产品，尤其是奥卡西平口服混悬液中奥卡西平、抗氧化剂及各防腐剂定量的检测；本发明的方法分离度良好，原料药、抗氧化剂、多种防腐剂互不干扰，方法具有优异的准确度、精密度和耐用性。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物制剂中原料药和多种防腐剂含量的检测方法，尤其涉及奥卡西平口服混悬液中奥卡西平及多种防腐剂含量的检测分析方法。
背景技术
癫痫（epilepsy）即俗称的“羊角风”或“羊癫风”，是大脑神经元突发性异常放电，导致短暂的大脑功能障碍的一种慢性疾病。据中国最新流行病学资料显示，国内癫痫的总体患病率为7.0‰，年发病率为28.8/10万，1年内有发作的活动性癫痫患病率为4.6‰。据此估计中国约有900万左右的癫痫患者，其中500～600万是活动性癫痫患者，同时每年新增加癫痫患者约40万，在中国癫痫已经成为神经科仅次于头痛的第二大常见病。
奥卡西平（Oxcarbazepine）是一种抗惊厥药物，主要用于因治疗癫痫发作的造成的抽搐，其化学名称为10,11-二氢-10-氧代-5H-二苯并[b,f]氮杂-5-甲酰胺，结构式如下：
奥卡西平口服混悬液由NOVARTIST公司在2001年研发并上市，商品名TRILEPTAL，主要针对儿童和吞咽片剂困难的患者。本品适用于治疗原发性全面性强直-阵挛发作和部分性发作，伴有或不伴有继发性全面性发作。由于奥卡西平口服混悬液为多剂量使用，所以为保证产品在使用中的质量，其中加入了多种辅料，如抗氧剂抗坏血酸及防腐剂羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸等。而目前现有技术中，药典收录的混悬剂含量检测方法无法满足这几个辅料之间或与原料药之间的分离度，故而无法对其准确定量测定。USP API含量有关物质的方法等度运行时间60min ,但API及各防腐剂均在20min内出峰，但已知杂质有些比较晚，50min出峰，检测流程耗时较长。因此，如何建立一种能够简单、快速、高效且分离度好、灵敏度高、耐用性好、重现性高的分析方法，进而实现对多剂量奥卡西平口服混悬液的质量进行全面检测和控制，是目前需要解决的技术问题。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中奥卡西平口服混悬液含量HPLC测试分离度低的技术问题，提供一种准确定量奥卡西平口服混悬液（300mg/5ml）中原料药（奥卡西平）及抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸的相对含量的方法。
具体的，本发明提供了一种检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述方法包括采用高效液相色谱法（HPLC）对奥卡西平、抗氧化剂、防腐剂含量进行定量分析，其中所述高效液相色谱法检测条件包括：
- 色谱柱固定相的填料：十八烷基硅烷键合硅胶（ODS）；
流动相为流动相A和流动相B的组合，其中：
- 流动相A：缓冲液-甲醇-乙腈的混合溶液；优选的所述缓冲液为pH值为5.95~6.05的磷酸盐缓冲液，且所述缓冲液浓度为40~120mmol/L；优选的所述缓冲液-甲醇-乙腈的体积比（v/v/v）为（25-35）/（8-14）/（6-10），优选的所述缓冲液-甲醇-乙腈的体积比（v/v/v）为（27-33）/（10-112）/（7-9），最优选的所述缓冲液-甲醇-乙腈的体积比（v/v/v）为31/11/8；
- 流动相B：流动相A与乙腈的混合溶液，所述流动相A-乙腈的体积比（v/v）为（40-60）/（40-60）；优选的所述流动相A-乙腈的体积比（v/v）为50/50。
- 洗脱方式采用梯度洗脱，其中流动相梯度为：
| 时间（min） | 流动相A (%) | 流动相B(%) |
| 0 | 100 | 0 |
| 15 | 100 | 0 |
| 18 | 0 | 100 |
| 24 | 0 | 100 |
| 25 | 100 | 0 |
| 35 | 100 | 0 |
- 流动相流速：1.0~2.0 ml/min；
- 色谱柱柱温：40℃~80℃；
- 样品室温度：2℃~8℃；
- 检测波长：220~400 nm；和
- 进样量：5 μl~20 μl。
进一步的，本发明所述防腐剂为：羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸；本发明所述的抗氧化剂为抗坏血酸。
进一步的，本发明所述色谱柱为Waters XBridge C18，规格为 4.6mm×250mm，5µm。
进一步的，本发明所述高效液相色谱法采用的高效液相色谱仪选自以下的一种：安捷伦1260Ⅱ、Waters e2695、戴安Ulitimate 3000、岛津LC-2050C/2060C或其他任何同类型的色谱仪。
进一步的，本发明所述缓冲液浓度为30~100mmol/L，优选的所述缓冲液浓度为40-80 mmol/L，最优选的为所述缓冲液浓度为50-70 mmol/L。
进一步的，本发明所述缓冲液pH为5.95~6.05，优选地所述缓冲液pH为6.0。
进一步的，本发明所述流动相流速为1.2~1.8 ml/min，优选地所述流动相流速为1.5ml/min。
进一步的，本发明所述色谱柱柱温为45℃-60℃，优选地所述色谱柱柱温为50℃。
进一步的，本发明采用自动进样方式进行进样，自动进样器样品盘温为2℃-8℃，优选地所述自动进样器温度为5℃。
进一步的，本发明所述检测波长为220nm-400nm，优选的奥卡西平所述检测波长：310nm；抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸所述检测波长：254nm。
进一步的，本发明所述进样量为6 μl~18 μl，优选的所述进样量为8-12μl，最优选的所述进样量为10μl。
本发明的有益效果：
可以实现对于奥卡西平口服混悬液及相关制剂产品，尤其是奥卡西平口服混悬液中奥卡西平及各防腐剂定量的检测；本发明的方法分离度良好，原料药、抗氧化剂、多种防腐剂互不干扰，方法具有优异的准确度、精密度和耐用性。
本发明的方法可以定量检测到奥卡西平及各防腐剂，且奥卡西平与各防腐剂之间分离度均大于1.5，这确保了本发明的检测方法可以将各防腐剂之间和防腐剂与奥卡西平显著分开。而且，本发明的方法在各种高温、酸、碱、氧化和光照条件下，主峰及各已知防腐剂均不被干扰，表明方法专属性良好。
附图说明
图1：采用美国药典奥卡西平口服混悬液的检测方法测定对照品溶液的色谱图。
图2：采用美国药典奥卡西平的检测方法测定对照品未知杂质残留色谱图。
图3：采用本发明的方法检测空白溶液得到的典型色谱图。
图4：采用本发明的方法检测奥卡西平空白辅料溶液得到的典型色谱图。
图5：采用本发明的方法检测抗坏血酸空白辅料溶液得到的典型色谱图。
图6：采用本发明的方法检测羟苯甲酯空白辅料溶液得到的典型色谱图。
图7：采用本发明的方法检测羟苯丙酯空白辅料溶液得到的典型色谱图。
图8：采用本发明的方法检测山梨酸空白辅料溶液得到的典型色谱图。
图9：采用本发明的方法检测1%加标杂质的样品溶液得到的典型色谱图。
图10：采用本发明的方法检测对照品溶液得到的典型色谱图。
图11：采用本发明的方法检测待测溶液得到的典型色谱图。
图12：采用本发明的方法检测奥卡西平的线性关系图。
图13：采用本发明的方法检测抗坏血酸的线性关系图。
图14：采用本发明的方法检测羟苯甲酯的线性关系图。
图15：采用本发明的方法检测羟苯丙酯的线性关系图。
图16：采用本发明的方法检测山梨酸的线性关系图。
具体实施方式
本发明提供了一种对奥卡西平口服混悬液进行质量控制的方法，其包括采用高效液相色谱法对所述奥卡西平口服混悬液中奥卡西平及抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸的含量进行测定的步骤。
目前现有技术中，药典收录的奥卡西平混悬剂含量检测方法无法满足这几个防腐剂之间或与原料药之间的分离度，故而无法对其完全定量测定。故本发明提供了一种能定量检测奥卡西平混悬液中奥卡西平及多种防腐剂的高效液相色谱法，对奥卡西平混悬剂在长期稳定性的质量控制中至关重要。
1.测试方法准备：
50mmol/L 磷酸二氢钾缓冲液：称取6.8g磷酸二氢钾，加入1000ml水溶解，再加2ml三乙胺，用磷酸调节pH值至6.00±0.05混匀，过滤。
稀释剂：将乙腈与水按体积比（V/V）为1/1000混合均匀，即得。
抗坏血酸对照品贮备液（0.92mg/ml）：取抗坏血酸对照品约23mg，精密称定，于25ml容量瓶中，加入20ml稀释剂超声至完全溶解，冷却至室温，稀释剂定容，摇匀，即得。（平行配置双份）
羟苯甲酯对照品贮备液（0.11mg/ml）：取羟苯甲酯对照品约11mg，精密称定，于100ml容量瓶中，加入80ml乙腈超声至完全溶解，冷却至室温，乙腈定容，摇匀，即得。（平行配置双份）
羟苯丙酯对照品贮备液（0.028mg/ml）：取羟苯丙酯对照品约7mg，精密称定，于250ml容量瓶中，加入200ml稀释剂超声至完全溶解，冷却至室温，稀释剂定容，摇匀，即得。（平行配置双份）
山梨酸对照品贮备液 （0.047mg/ml）：取山梨酸对照品约11.7mg，精密称定，于250ml容量瓶中，加入200ml乙腈超声至完全溶解，冷却至室温，乙腈定容，摇匀，即得。（平行配置双份）
对照品溶液（奥卡西平：0.28mg/ml、抗坏血酸：0.0460mg/ml、羟苯甲酯：0.0055mg/ml、羟苯丙酯：0.0014mg/ml、山梨酸：0.0023mg/ml）：取奥卡西平对照品约14mg，精密称定，于50ml容量瓶中，加入6ml乙腈，精密移取2.5 ml抗坏血酸对照品贮备液、2.5 ml羟苯甲酯对照品贮备液、2.5 ml羟苯丙酯对照品贮备液、2.5 ml山梨酸对照品贮备液于上述50 mL容量瓶中，加入30ml稀释剂超声至完全溶解，冷却至室温，稀释剂定容，摇匀, 轻轻混匀避免空气进入。
复核对照品溶液（奥卡西平：0.28mg/ml、抗坏血酸：0.0460mg/ml、羟苯甲酯：0.0055mg/ml、羟苯丙酯：0.0014mg/ml、山梨酸：0.0023mg/ml）：取奥卡西平对照品约14mg，精密称定，于50ml容量瓶中，加入6ml乙腈，精密移取2.5 ml抗坏血酸对照品贮备液、2.5 ml羟苯甲酯对照品贮备液、2.5 ml羟苯丙酯对照品贮备液、2.5 ml山梨酸对照品贮备液于上述50 mL容量瓶中，加入30ml稀释剂超声至完全溶解，冷却至室温，稀释剂定容，摇匀, 轻轻混匀避免空气进入。
供试品溶液：称样前用力振摇样品瓶，确保样品均匀，无结块现象。取1.25g混悬液样品, 精密称定,于已经去皮的250ml容量瓶中，加35ml稀释剂使其溶解，后再加入55ml的乙腈轻轻混匀，超声15min后再振摇30min，冷却至室温，稀释剂定容，摇匀，取一部分液体经0.45μm尼龙滤膜过滤，弃去前2ml后，取续滤液作为供试品溶液，（瓶子上中下三个位置平行配置双份）
测试：分别取空白溶液（稀释剂）、对照品溶液及各供试品溶液，进样分析，记录色谱图。进样的过程如下：（1）空白溶液（进样次数≥1针）、（2）对照品溶液（进样次数为5针）、（3）复核对照品溶液（进样次数2针）、（4）供试品溶液（进样次数≥1针；供试品溶液进 6针需进一针随行对照品溶液）、和（5）随行对照品溶液（进样次数≥1针）。
色谱条件：
- 色谱系统：带有PDA或UV检测器的高效液相色谱仪；
- 色谱柱：Waters XBridge C18，规格为 4.6mm×250mm，5µm；
- 流动相A：50mmol/L磷酸二氢钾缓冲液-甲醇-乙腈=31/11/8（V/V/V）的混合溶液；
- 流动相B：流动相A-乙腈=50/50（V/V）的混合溶液；
- 流动相梯度：
| 时间（min） | 流动相A (%) | 流动相B(%) |
| 0 | 100 | 0 |
| 15 | 100 | 0 |
| 18 | 0 | 100 |
| 24 | 0 | 100 |
| 25 | 100 | 0 |
| 35 | 100 | 0 |
-流动相流速：1.5 ml/min
-色谱柱柱温：50℃；
-自动进样器温度：5℃；
-检测波长：奥卡西平为310nm；抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸为254nm；
-进样量：10μl。
系统适用性要求：除溶剂峰外空白溶液（稀释剂）应无干扰；对照品溶液中奥卡西平峰拖尾因子不大于2.0；；对照品溶液中奥卡西平峰理论板数不小于2000；重复进样5针对照品溶液中奥卡西平、羟苯甲酯和羟苯丙酯峰面积的RSD均应不大于2.0%，抗坏血酸和山梨酸峰面积的RSD均应不大于5.0%；复核对照品溶液奥卡西平回收率在98.0-102.0%之间，抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸回收率均在95.0-105.0%之间。
计算公式：
式中：
ASPL: 供试品溶液中奥卡西平、抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸峰的峰面积；ASTD: 5针对照品溶液中卡西平、抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸峰的平均峰面积；Vol：供试品体积； CSTD：对照品溶液中奥卡西平、抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸峰的浓度；Sample Wt：供试品的称重；Density: 产品的相对密度（约1.084g/ml）；LC：标示量。
实施例
下面的实施例仅用于进一步说明本发明但并不将本发明的范围限制于这些实施例。
实施例1 - 通过美国药典方法中方法定量检测奥卡西平口服混悬液中的奥卡西平及抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸
美国药典奥卡西平口服混悬液的检测方法：
-HPLC方法，十八烷基硅烷键合硅胶（YMC Pack Pro C18，3.0*250mm，3μm）；
-流动相A：pH4.4醋酸盐溶液：乙腈：四氢呋喃：叔丁基甲醚=83:13:3:0.9（v/v/v/v）
-流动相B：pH4.4醋酸盐溶液：乙腈：四氢呋喃：叔丁基甲醚=29:67:3:0.9（v/v/v/v）
-流动相梯度：
| 时间（min） | 流动相A (%) | 流动相B(%) |
| 0 | 93 | 7 |
| 2 | 90 | 10 |
| 10 | 90 | 10 |
| 25 | 10 | 90 |
| 26 | 93 | 7 |
| 35 | 93 | 7 |
-流速：0.6ml/min；柱温：50℃；检测波长：254nm；进样量：5μl；运行时间：35min。
美国药典奥卡西平原料药的检测方法：
-HPLC方法，十八烷基硅胶色谱柱（Waters XBridge C18， 4.6mm×250mm，5µm）；
-流动相：pH6.0磷酸盐溶液：甲醇：乙腈=31:11:8（v/v/v）等度洗脱；
-流速：1.5ml/min；柱温：50℃；检测波长：310nm；进样量：10μl；运行时间为30min。
检测结果如下表1所示。
表1
| 方法 | 试验结果与结论 |
| 美国药典奥卡西平口服混悬液检测方法 | 图1示出了采用美国药典奥卡西平口服混悬液的检测方法测定对照品溶液的典型色谱图。从图1可以看出，此检测方法中奥卡西平与羟苯甲酯分离度较低（分离度小于1.5），无法满足基线分离。 |
| 美国药典奥卡西平专著检测方法 | 图2示出了采用美国药典奥卡西平专著方法检测的典型色谱图。从图2可以看出，此检测方法选择运行时间30min会有潜在杂质被洗脱出。 |
基于上述实验可知，现已知的药典检测方法暂无法满足奥卡西平口服混悬液含量的定量测定，故需要进一步优化方法来满足奥卡西平口服混悬液中奥卡西平和各防腐剂的定量检测。
实施例2 – 三批自研奥卡西平口服混悬液样品稳定性含量检测
本实验以采用十八烷基硅胶色谱柱，磷酸盐缓冲液与乙腈与甲醇一定比例混合的HPLC方法定量测定奥卡西平口服混悬液中奥卡西平及抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸。
测试方法、条件和试剂如下：
- HPLC方法，十八烷基硅胶色谱柱（Waters XBridge C18， 4.6mm×250mm，5µm）；
- 流动相A：pH6.0磷酸盐溶液：甲醇：乙腈=31:11:8（v/v/v）；
- 流动相B：流动相A：乙腈=50:50（v/v）；
- 流动相梯度：
| 时间（min） | 流动相A (%) | 流动相B(%) |
| 0 | 100 | 0 |
| 15 | 100 | 0 |
| 18 | 0 | 100 |
| 24 | 0 | 100 |
| 25 | 100 | 0 |
| 35 | 100 | 0 |
-流动相流速：1.5 ml/min
-色谱柱柱温：50℃；
-自动进样器温度：5℃；
-检测波长：奥卡西平为310nm；抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸为254nm ；
-进样量：10μl。
-待检测样品，奥卡西平口服混悬液加速条件6个月样品，共三个批次（批号：GMP20004、GMP20005和GMP20006），分别对直立和倒置两种样品放置状态进行含量测定。
供试品溶液：称样前用力振摇样品瓶，确保样品均匀，无结块现象。取1.25g混悬液样品, 精密称定,于已经去皮的250ml容量瓶中，加35ml稀释剂使其溶解，后再加入55ml的乙腈轻轻混匀，超声15min后再振摇30min，冷却至室温，稀释剂定容，摇匀，取一部分液体经0.45μm尼龙滤膜过滤，弃去前2ml后，取续滤液作为供试品溶液，（瓶子上中下三个位置平行配置双份）
分别取空白溶液（稀释剂）、对照品溶液及各供试品溶液，进样分析，记录色谱图。进样的过程如下：（1）空白溶液（进样次数≥1针）、（2）对照品溶液（进样次数为5针）、（3）复核对照品溶液（进样次数2针）、（4）供试品溶液（进样次数≥1针；供试品溶液进 6针需进一针随行对照品溶液）、和（5）随行对照品溶液（进样次数≥1针）。
随后，按外标法（外标一点法，参见2020版中国药典通则0512）以峰面积计算供试品溶液中奥卡西平及抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸的含量。
图11示出了采用本发明的方法检测待测溶液（奥卡西平口服混悬液）的奥卡西平及抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸的色谱图。
三批待检测溶液中含量检测结果见表2。
表2 奥卡西平口服混悬液中奥卡西平及抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸含量
从图11可以看出，本发明很好的解决了奥卡西平、抗坏血酸及各防腐剂分离度问题；从表2结果可知，该方法能够准确用于奥卡西平口服混悬液中的奥卡西平及抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸的检测。
实施例3-系统适用性试验
本实验的一个目的是测定本发明采用的高效液相色谱法对于奥卡西平口服混悬液中的奥卡西平及抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸定量检测方法系统适用性。
测试方法、条件和试剂如下：
-色谱系统：Agilent 1260Ⅱ或Waters e2695或同类型仪器
-色谱柱：十八烷基硅胶色谱柱（Waters XBridge C18， 4.6mm×250mm，5µm）；
-流动相A：pH6.0磷酸盐溶液：甲醇：乙腈=31:11:8（v/v/v）；
-流动相B：流动相A：乙腈=50:50（v/v）；
-流动相梯度：
| 时间（min） | 流动相A (%) | 流动相B(%) |
| 0 | 100 | 0 |
| 15 | 100 | 0 |
| 18 | 0 | 100 |
| 24 | 0 | 100 |
| 25 | 100 | 0 |
| 35 | 100 | 0 |
-流动相流速：1.5 ml/min
-色谱柱柱温：50℃；
-自动进样器温度：5℃；
-检测波长：奥卡西平为310nm；抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸为254nm；
-进样量：10μl。
分别取空白溶液、对照品溶液和复核对照品溶液进样分析，记录色谱图。
系统适用性要求：除溶剂峰外空白溶液（稀释剂）应无干扰；对照品溶液中奥卡西平峰拖尾因子不大于2.0；；对照品溶液中奥卡西平峰理论板数不小于2000；重复进样5针对照品溶液中奥卡西平、羟苯甲酯和羟苯丙酯峰面积的RSD均应不大于2.0%，抗坏血酸和山梨酸峰面积的RSD均应不大于5.0%；复核对照品溶液奥卡西平回收率在98.0-102.0%之间，抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸回收率均在95.0-105.0%之间。
表3系统适用性结果
结果显示：空白溶液无干扰，系统适用性溶液中奥卡西平峰拖尾因子不大于1.0，远小于2.0，理论板数是12454，远大于2000；重复进样5针对照品溶液中奥卡西平、羟苯甲酯和羟苯丙酯峰面积的RSD分别为0.2%、0.2%和1.2%，远小于2.0%，抗坏血酸和山梨酸峰面积的RSD分别为0.5%和0.2%，均远小于5.0%；复核对照品溶液奥卡西平回收率为100.3%，在98.0-102.0%之间，抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸回收率分别为100.3%、100.5%、99.8%和100.1%，均在95.0-105.0%之间。
实施例4 -专属性试验
本实验目的是为了考察在其他成分(如空白稀释剂、辅料、杂质等）可能存在下，采用的HPLC方法能正确测定出被测物的能力。
本实验的色谱条件同实施例3。
取空白溶液、奥卡西平空白辅料溶液、抗坏血酸空白辅料溶液、羟苯甲酯空白辅料溶液、羟苯丙酯空白辅料溶液、山梨酸空白辅料溶液、1%杂质加标样品溶液（3μg/ml）、对照品溶液，按上述色谱条件进样分析，记录色谱图。图3示出了采用本发明的方法检测空白溶液得到的典型色谱图, 图4-图8示出了采用本发明的方法检测空白辅料溶液得到的典型色谱图，图9示出了采用本发明的方法检测1%杂质加标样品溶液（3μg/ml）得到的典型色谱图,图10示出了采用本发明的方法检测对照品溶液得到的典型色谱图。综上所示，空白溶剂、空白辅料溶液及各杂质均不干扰奥卡西平及各防腐剂测定，且奥卡西平与各防腐剂分离度均满足要求（分离度大于等于1.5），结果表明专属性良好。
实施例5：线性和范围
本实验目的是为了考察采用HPLC方法在设计的范围内，被测物峰面积与浓度呈比例关系的能力，以及通过外标法计算含量的准确性。
色谱条件同实施例3。
配置5个浓度水平的标准溶液，分别为目标样品浓度的10%、50%、80%、100%和120%（目标浓度：奥卡西平：280μg/ml，抗坏血酸：46μg/ml，羟苯甲酯：5.5μg/ml，羟苯丙酯：1.4μg/ml），山梨酸线性从20%、50%、80%、100%和120%（目标浓度：山梨酸：2.35μg/ml）。
取上述溶液分别进样一针并记录色谱图，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，作线性回收方程，要求相关系数r2应不小于0.990。结果如下表：
表4线性考察结果-1
表5线性考察结果-2
结果显示：奥卡西平在28.0μg/ml～336.5μg/ml浓度范围内，线性关系良好；抗坏血酸在4.86μg/ml～58.3μg/ml浓度范围内，线性关系良好；羟苯甲酯在0.55μg/ml～6.64μg/ml浓度范围内，线性关系良好；羟苯丙酯在0.145μg/ml～1.74μg/ml浓度范围内，线性关系良好；山梨酸在0.46μg/ml～2.76μg/ml浓度范围内，线性关系良好。
实施例6：准确度试验
本实验目的是为了采用HPLC方法在含有辅料的样品溶液中添加不同已知浓度的抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸及奥卡西平，以考察添加的被测物能否完全提取，并考察测定结果与真实值接近程度，一般用回收率表示。
色谱条件同实施例3。
在规定的线性范围内，向奥卡西平空白辅料中分别添加80%、100%和120%三个浓度的奥卡西平对照品，每种浓度平行配置三份，每个样品进一针。
在规定的线性范围内，向空白辅料（无抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯）中分别添加10%、100%和120%三个浓度的抗坏血酸对照品及60%、100%和120%三个浓度的羟苯甲酯和羟苯丙酯对照品，每种浓度平行配置三份，每个样品进一针。
在规定的线性范围内，向空白辅料（无山梨酸）中分别添加60%、100%和120%三个浓度的山梨酸对照品，每种浓度平行配置三份，每个样品进一针。
分别取上述各溶液进样分析并记录色谱图，按外标法计算各杂质回收率，结果如下表：
表6奥卡西平及防腐剂准确度结果
结果表明：奥卡西平及抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸在各浓度水平下各样品回收率及RSD均符合要求，说明本法的准确度良好。
实施例7：精密度试验
本实验目的是为了测试采用的高效液相色谱法，在一定条件下进行多次取样测定所得结果之间的接近程度。
色谱条件同实施例3。
供试品溶液：称样前用力振摇样品瓶，确保样品均匀，无结块现象。取1.25g混悬液样品, 精密称定,于已经去皮的250ml容量瓶中，加35ml稀释剂使其溶解，后再加入55ml的乙腈轻轻混匀，超声15min后再振摇30min，冷却至室温，稀释剂定容，摇匀，取一部分液体经0.45μm尼龙滤膜过滤，弃去前2ml后，取续滤液作为供试品溶液，平行配制6份进样分析。
分别取上述各溶液进样分析并记录色谱图，按外标法计算回收率，结果如下表：
表7 奥卡西平口服混悬液重复性结果
结果表明：6份样品溶液中检测奥卡西平含量的RSD均小于2.0%，抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯及山梨酸的含量的RSD均小于5.0%，说明重复性良好。
中间精密度试验
由另一名分析人员独立建立系统，取与重复性样品同一批号的样品，同法配制6份加标样品溶液，使用不同的仪器于不同天进行测定，结果见下表。、
表8 奥卡西平口服混悬液中间精密度结果
结果表明：与重复性共12份样品溶液中检测奥卡西平含量的RSD均小于2.0%，抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯及山梨酸的含量的RSD均小于5.0%，说明本法精密度良好。
实施例8：供试品及对照品样品溶液稳定性试验
本实验目的是为考察待测溶液及对照品溶液配制完成后，在室温及2-8度条件的稳定性，以支持在测试过程中数据的准确可靠性。
色谱条件同实施例3。
取奥卡西平口服混悬液对照品溶液及供试品溶液置于室温及2-8度条件下分别于零天、1天、2天或3天进行测样，考察溶液稳定性，结果如下表。
表9 奥卡西平口服混悬液稳定性结果（对照品溶液）
表10 奥卡西平口服混悬液稳定性结果（供试品品溶液）
表11 奥卡西平口服混悬液稳定性结果（山梨酸）
结果表明：奥卡西平对照品溶液和供试品溶液在2-8度及室温条件下放置2天回收率均在98.0%-102.0%之间，说明在2-8度及室温条件下2天内稳定性良好；羟苯甲酯及羟苯丙酯对照品溶液和供试品溶液在2-8度及室温条件下放置2天回收率均在95.0%-105.0%之间，说明在2-8度及室温条件下2天内稳定性良好；山梨酸对照品溶液和供试品溶液在2-8度及室温条件下放置3天回收率均在95.0%-105.0%之间，说明在2-8度及室温条件下3天内稳定性良好.
抗坏血酸供试品溶液在2-8度及室温条件下放置2天回收率均在90.0%-110.0%之间，说明在2-8度及室温条件下2天内稳定性良好；抗坏血酸对照品溶液在2-8度条件下放置2天回收率均在90.0%-110.0%之间，说明在2-8度条件下2天内稳定性良好；抗坏血酸对照品溶液在室温条件下放置2天回收率不在90.0%-110.0%之间，说明在室温条件下1天内稳定性良好。
实施例9：耐用性试验
本实验的目的是通过考察色谱条件的流速、进样体积、色谱柱温度和检测波长等条件变动，找到最优的色谱参数及确定目标参数微小变动后对结果不受影响的承受程度。具体考察项目如下表所示。
表12.耐用性考察项目
| 考察项目 | 规定参数 | 微小变动范围 |
| 流速 | 1.5ml/min | ±0.1 ml/min |
| 检测波长 | 310nm/254nm | ±2nm |
| 进样体积 | 10 | ±2μl |
| 柱温 | 50℃ | ±2℃ |
表13耐用性考察结果
结果表明：进样体积、色谱柱温度、检测波长及流速发生微小变动时，奥卡西平含量均符合98.0%-102.0%之间，抗坏血酸、羟苯甲酯、羟苯丙酯及山梨酸的含量也均符合95.0%-105.0%之间，说明本法耐用性良好。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (11)
1.一种检测奥卡西平口服混悬液中原料药及其辅料含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述方法包括采用高效液相色谱法（HPLC）对奥卡西平、抗氧化剂、防腐剂含量进行定量分析，其中所述高效液相色谱法检测条件包括：
- 色谱柱固定相的填料：十八烷基硅烷键合硅胶（ODS）；
流动相为流动相A和流动相B的组合，其中：
- 流动相A：缓冲液-甲醇-乙腈的混合溶液；所述缓冲液为pH值为5.95~6.05的磷酸盐缓冲液，且所述缓冲液浓度为40~120mmol/L；所述缓冲液-甲醇-乙腈的体积比（v/v/v）为（25-35）/（8-14）/（6-10）；
- 流动相B：流动相A与乙腈的混合溶液，所述流动相A-乙腈的体积比（v/v）为（40-60）/（40-60）；
- 洗脱方式采用梯度洗脱，其中流动相梯度为：
- 流动相流速：1.0~2.0 ml/min；
- 色谱柱柱温：40℃~80℃；
- 样品室温度：2℃~8℃；
- 检测波长：220~400 nm；和
- 进样量：5 μl~20 μl。
2.根据权利要求1所述的检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述防腐剂为：羟苯甲酯、羟苯丙酯和山梨酸；所述的抗氧化剂为抗坏血酸。
3.根据权利要求1所述的检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述色谱柱为Waters XBridge C18，规格为 4.6mm×250mm，5µm。
4.根据权利要求1所述的检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述高效液相色谱法采用的高效液相色谱仪选自以下任意一种：安捷伦1260Ⅱ、Waters e2695、戴安Ulitimate 3000、岛津LC-2050C/2060C。
5.根据权利要求1所述的检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述缓冲液浓度为30~100mmol/L。
6.根据权利要求1所述的检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述缓冲液pH为5.95~6.05。
7.根据权利要求1所述的检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述流动相流速为1.2~1.8 ml/min。
8.根据权利要求1所述的检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述色谱柱柱温为45℃-60℃。
9.根据权利要求1所述的检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于采用自动进样方式进行进样，自动进样器样品盘温为2℃-8℃。
10.根据权利要求1所述的检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述检测波长为220nm-400nm。
11.根据权利要求1所述的检测奥卡西平口服混悬液中其含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于所述进样量为6 μl~18 μl。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116148399A (zh) * | 2023-04-19 | 2023-05-23 | 北京四环制药有限公司 | 一种分离并检测奥卡西平起始物料及其有关物质的高效液相色谱法 |
| CN116626209A (zh) * | 2023-07-26 | 2023-08-22 | 北京四环制药有限公司 | 一种高灵敏度的奥卡西平起始物料含量检测方法及其应用 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20060122394A1 (en) * | 2004-08-13 | 2006-06-08 | Blum Charles A | Substituted biaryl piperazinyl-pyridine analogues |
| US20080127972A1 (en) * | 2004-11-23 | 2008-06-05 | Vectura Limited | Dry Powder Inhaler Formulations Comprising Surface-Modified Particles With Anti-Adherent Additives |
| US20080206883A1 (en) * | 2007-02-26 | 2008-08-28 | Cody Laboratories, Inc. | Hplc method for separation and detection of hydromorphone and related opioid pharmacophores |
| CN103076409A (zh) * | 2012-12-31 | 2013-05-01 | 北京元延医药科技有限公司 | 奥拉西坦及其杂质的分析检测方法 |
| US20150140046A1 (en) * | 2012-04-13 | 2015-05-21 | Lubrizol Advanced Materials, Inc. | Compounds which inhibit neuronal exocytosis |
| CN105987961A (zh) * | 2015-02-04 | 2016-10-05 | 四川大学华西医院 | 一种母乳中左乙拉西坦的检测方法 |
| WO2019046997A1 (zh) * | 2017-09-05 | 2019-03-14 | 江苏嘉逸医药有限公司 | 一种高效液相色谱法测定安立生坦含量的方法 |
| CN113588837A (zh) * | 2021-08-10 | 2021-11-02 | 山东鲁抗医药股份有限公司 | 一种盐酸莫西沙星有关物质的检测方法 |
-
2022
- 2022-08-18 CN CN202210989994.9A patent/CN115060832B/zh active Active
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20060122394A1 (en) * | 2004-08-13 | 2006-06-08 | Blum Charles A | Substituted biaryl piperazinyl-pyridine analogues |
| US20080127972A1 (en) * | 2004-11-23 | 2008-06-05 | Vectura Limited | Dry Powder Inhaler Formulations Comprising Surface-Modified Particles With Anti-Adherent Additives |
| US20080206883A1 (en) * | 2007-02-26 | 2008-08-28 | Cody Laboratories, Inc. | Hplc method for separation and detection of hydromorphone and related opioid pharmacophores |
| US20150140046A1 (en) * | 2012-04-13 | 2015-05-21 | Lubrizol Advanced Materials, Inc. | Compounds which inhibit neuronal exocytosis |
| CN103076409A (zh) * | 2012-12-31 | 2013-05-01 | 北京元延医药科技有限公司 | 奥拉西坦及其杂质的分析检测方法 |
| CN105987961A (zh) * | 2015-02-04 | 2016-10-05 | 四川大学华西医院 | 一种母乳中左乙拉西坦的检测方法 |
| WO2019046997A1 (zh) * | 2017-09-05 | 2019-03-14 | 江苏嘉逸医药有限公司 | 一种高效液相色谱法测定安立生坦含量的方法 |
| CN113588837A (zh) * | 2021-08-10 | 2021-11-02 | 山东鲁抗医药股份有限公司 | 一种盐酸莫西沙星有关物质的检测方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| ABDELRAHMAN MAHA M等: "Analysis of Carbamazepine, Oxcarbazepine, Their Impurities, and Non-Labeled Interfering Substances by Stability-indicating UPLC/MS/MS Method: Studying the Method’s Greenness Profile", 《CHROMATOGRAPHIA》 * |
| CHAI YI-FENG等: "药物分析（Ⅰ）", 《分析试验室》 * |
| 张璐等: "注射剂和滴眼剂中抑菌剂和抗氧剂的添加及检测", 《药学与临床研究》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116148399A (zh) * | 2023-04-19 | 2023-05-23 | 北京四环制药有限公司 | 一种分离并检测奥卡西平起始物料及其有关物质的高效液相色谱法 |
| CN116626209A (zh) * | 2023-07-26 | 2023-08-22 | 北京四环制药有限公司 | 一种高灵敏度的奥卡西平起始物料含量检测方法及其应用 |
| CN116626209B (zh) * | 2023-07-26 | 2023-10-31 | 北京四环制药有限公司 | 一种高灵敏度的奥卡西平起始物料含量检测方法及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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