CN115876903A - 一种测定克洛己新干混悬剂中有关物质的方法 - Google Patents
一种测定克洛己新干混悬剂中有关物质的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115876903A CN115876903A CN202111146942.7A CN202111146942A CN115876903A CN 115876903 A CN115876903 A CN 115876903A CN 202111146942 A CN202111146942 A CN 202111146942A CN 115876903 A CN115876903 A CN 115876903A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dihydrogen phosphate
- solution
- sodium dihydrogen
- phosphoric acid
- mobile phase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000000725 suspension Substances 0.000 title claims abstract description 24
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 127
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 102
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 69
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 claims abstract description 69
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 69
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 55
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Substances CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 51
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 35
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 31
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 140
- QYIYFLOTGYLRGG-GPCCPHFNSA-N cefaclor Chemical compound C1([C@H](C(=O)N[C@@H]2C(N3C(=C(Cl)CS[C@@H]32)C(O)=O)=O)N)=CC=CC=C1 QYIYFLOTGYLRGG-GPCCPHFNSA-N 0.000 claims description 75
- 229960005361 cefaclor Drugs 0.000 claims description 75
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 26
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 24
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 21
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 19
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 16
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 16
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 13
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 13
- 229960003870 bromhexine Drugs 0.000 claims description 11
- OJGDCBLYJGHCIH-UHFFFAOYSA-N bromhexine Chemical compound C1CCCCC1N(C)CC1=CC(Br)=CC(Br)=C1N OJGDCBLYJGHCIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 239000003643 water by type Substances 0.000 claims description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 abstract 1
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 abstract 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 abstract 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 abstract 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 24
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 16
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 7
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 2
- 229960002335 bromhexine hydrochloride Drugs 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- YRSGDLIATOURQO-UHFFFAOYSA-N ethyl 4-acetyl-5-oxohexanoate Chemical compound CCOC(=O)CCC(C(C)=O)C(C)=O YRSGDLIATOURQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 229940031703 low substituted hydroxypropyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000012489 system suitability test solution Substances 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本专利公开了一种高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，它包括如下步骤：高效液相色谱仪，以超纯硅胶基质的十八烷基硅烷为填充剂的色谱柱；溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5）；流动相A为0.78%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH3.5±0.2）、流动相B：0.78%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH3.5±0.2）‑乙腈（55:45），按梯度方式洗脱；检测器为紫外检测器；检测波长218nm~222nm；流速为0.8ml/min~1.2ml/min。精密量取空白溶液、系统适用性溶液、对照溶液、供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按主成分自身对照法计算供试品溶液中有关物质的含量。本发明应用高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的含量，专属性好、灵敏度高、耐用性强，能够更好地控制克洛己新干混悬剂的质量。
Description
技术领域
本发明涉及分析技术领域，具体涉及一种测定克洛己新干混悬剂中有关物质的方法。
背景技术
克洛己新干混悬剂为江苏正大清江制药有限公司依照中国国家药品标准生产的处方制剂，主要用于治疗敏感菌引起的呼吸道感染伴有粘稠痰液不易咳出的患者。
克洛己新干混悬剂的制备方法为：将头孢克洛（250mg）与盐酸溴己新（8.77mg）分别过100目筛，其它辅料分别过80目筛。将盐酸溴己新与头孢克洛采用等量递加的方式混合均匀后，依次加入羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、十二烷基硫酸钠、乳糖、蔗糖等辅料，混合均匀；加95%酒精制软材，20目筛制粒，45℃真空干燥。18目筛整粒，混合均匀，装袋即得。
研究并改善杂质水平，对于头孢菌素类药品的质量控制来说至关重要。
发明内容
本发明的目的是建立一种测定克洛己新干混悬剂中有关物质的方法，可以更好的控制克洛己新干混悬剂的质量。
本发明的技术方案是采用高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的含量，它包括以下步骤：
空白溶剂制备：0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5）。
系统适用性溶液制备：取头孢克洛对照品与头孢克洛δ-3异构体杂质对照品各适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中约含头孢克洛新0.05mg和头孢克洛δ-3异构体为0.1mg的混合溶液，作为系统适用性溶液。
供试品溶液制备：取本品内容物适量（约相当于头孢克洛50mg），精密称定，置10ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤。
对照溶液制备：精密量取上述样品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀。
色谱柱：Waters Atlantis T3柱 4.6×250mm，5μm
色谱条件：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.5磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.5）-乙腈（55:45），初始流动相比例为流动相A-流动相B=99:1；
按下列梯度进行洗脱。
在上述色谱条件下，精密量取空白溶液、系统适用性溶液、对照溶液、供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，出峰顺序依次为头孢克洛δ-3异构体、头孢克洛；二者分离度应不低于1.5。供试品溶液的色谱图中如有系统适用性试验溶液中头孢克洛δ-3异构体相应的色谱峰；其峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2.0倍（2.0%），其他单杂峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2.0倍（2.0%），所有杂质峰面积和不得大于对照溶液主峰面积的3.0倍（3.0%）。
附图说明
图1为专属性考察色谱图。
具体实施方式
以下通过实施例形式再对本发明的内容做进一步的详细说明，但不应就此理解为本发明上述主题范围内仅限于以下实施例。在不脱离本发明上述技术前提下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的相应替换或变更的修改，均包括在本发明内。
1.实施例1 色谱柱的选择
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
色谱柱：费罗门Gemini C18柱（4.6×250mm，5μm）
色谱条件：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH4.0磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH4.0）-乙腈（55:45），
按下列梯度进行线性洗脱；
溶液制备：
对照品混合溶液：分别精密称取头孢克洛、杂质8、9、10、11（头孢克洛δ-3异构体）、12、13、14、15、16、降解杂质1；溴己新、杂质1、2、3、4、5、6、7各适量（约10mg），置100ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，混匀。
样品测定：
精密量取溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
结论：
头孢克洛杂质8、9保留时间在4.5min以内；溴己新杂质10与头孢克洛杂质15分不开；溴己新杂质7、6；杂质1与溴己新主成分间分离度较差；70min后基线较差；需继续优化洗脱方式。
2.实施例2 色谱柱的选择
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse plus C18柱（4.6×250mm，5μm）
色谱条件：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH4.0磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH4.0）-乙腈（55:45），按
下列梯度进行线性洗脱；
溶液制备：
同实施例1。
样品测定：
精密量取溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
结论：
头孢克洛杂质8、9间分离度不好，且保留时间在4.5min以内；头孢克洛杂质10、15间分离度不好；溴己新杂质7、6间分离度不好；头孢克洛与其附近杂质分离较差；需继续优化洗脱方式。
3.实施例3 色谱柱的选择
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
色谱柱：岛津Inertsustain C18柱（4.6×250mm，5μm）
色谱条件：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.6磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.6）-乙腈（55:45），
按下列梯度进行线性洗脱；
溶液制备：
同实施例1。
样品测定：
精密量取溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
结论：
头孢克洛杂质8、9间分离度不好，且保留时间在4.5min以内；头孢克洛杂质10、15分离较好；溴己新杂质7、6间分离度不好；头孢克洛杂质13与溴己新杂质3间分离度不好；需要继续优化。
4.实施例4 色谱柱的选择
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
色谱柱：沃特世Atlantis T3（4.6×250mm，5μm）
色谱条件：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.5磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.5）-乙腈（55:45），
按下列梯度进行线性洗脱；
溶液制备：
同实施例1。
样品测定：
精密量取溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
结论：
头孢克洛杂质8、9分离度较好，保留时间在6min左右；溴己新及其各杂质峰均能与头孢克洛各成分分离开，不干扰测定； 头孢克洛杂质10、15分离度较好；此方法可用来进行克洛己新干混悬剂有关物质检测。
5.实施例5 专属性考察
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
色谱柱：沃特世Atlantis T3（4.6×250mm，5μm）
色谱条件：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.5磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.5）-乙腈（55:45），
按下列梯度进行线性洗脱；
溶液制备：
取克洛己新干混悬剂内容物适量，分别置于酸（1mol/L盐酸溶液）、碱（0.1mol/L氢氧化钠溶液）、热（80℃水浴）、光（5000LUX的光照10天）和氧化（1%H2O2）的条件下，使本品加速降解，以此考察该方法的专属性。
空白溶剂：0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5）。
空白辅料：取空白辅料适量（约相当于头孢克洛50mg），精密称定，置10ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤。
对照品混合溶液：分别精密称取头孢克洛、杂质8、9、10、11（头孢克洛δ-3异构体）、12、13、14、15、16、20（降解杂质1）；溴己新、杂质1、2、3、4、5、6、7各适量（约10mg），置100ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，混匀。
系统适用性溶液的制备：取头孢克洛对照品与头孢克洛δ-3异构体杂质对照品各适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中约含头孢克洛新0.05mg和头孢克洛δ-3异构体为0.1mg的混合溶液，作为系统适用性溶液。
供试品溶液的制备：取本品内容物适量（约相当于头孢克洛50mg），精密称定，置10ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤；
对照溶液的制备：精密量取1.0ml，置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
样品测定：
精密量取上述溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果：
专属性试验结果（对照品混合溶液）
物料平衡测定结果
结论：
空白溶剂未见杂质峰；空白辅料中有杂质峰，但不影响本品有关物质测定；溴己新及杂质1、2、3、4、5、6、7；头孢克洛及杂质8、9、10、11、12、13、14、15、16、20分离良好；样品溶液未检出杂质1~7、未检出杂质20；各种破坏试验样品溶液各峰分离度良好，该方法专属性好，将破坏后本品的含量与杂质含量相加，与未破坏时结果基本接近，符合物料平衡要求，可以证明本品所建立色谱条件与系统适用性良好，能有效监控产品的质量。
6.实施例6 精密度考察
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
同实施例5。
溶液制备：
对照品溶液：取头孢克洛及杂质8、杂质9、杂质10、杂质11、杂质12、杂质13、杂质14、杂质15、杂质16对照品各适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释至每1ml中约含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液：精密称取本品内容物适量（约相当于头孢克洛50mg），置10ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。平行制备6份。
对照溶液：精密量取上述各供试品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
不同日期、不同分析人员取本品内容物适量（约相当于头孢克洛50mg），置10ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。平行制备6份。
对照溶液：精密量取上述各供试品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
样品测定：
精密量取上述溶液各20µl，注入液相色谱仪，记录色谱图，对照品溶液连续进样6针，考察仪器精密度；样品溶液和对照溶液考察重复性。
结果：
仪器精密度试验结果（保留时间）
仪器精密度试验结果（峰面积）
重复性试验结果
中间精密度试验结果
结论：
该方法精密度好。
7.实施例7 线性关系考察
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
同实施例5。
溶液制备：
对照品溶液：取头孢克洛及杂质8、杂质9、杂质10、杂质11、杂质12、杂质13、杂质14、杂质15、杂质16对照品各适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释至每1ml中约含头孢克洛0.1mg、其他杂质0.2mg的溶液；分别精密量取15ml、10ml、5ml、2.5ml，置20ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，配制一系列线性溶液。
样品测定：
精密量取上述对照品溶液20µl，注入液相色谱仪，记录色谱图，以线性溶液浓度（µg/ml）为X轴，峰面积（A）为Y轴，作线性回归方程。
结论：
头孢克洛在5.91~47.26μg/ml范围内，线性良好，Y=0.396X+3.672，r=0.999；
杂质8在27.75~222.00μg/ml范围内，线性良好，Y=0.308X+1.138，r=0.999；
杂质9在30.99~247.95μg/ml范围内，线性良好，Y=0.028X+0.027，r=0.999；
杂质10在29.94~239.54μg/ml范围内，线性良好，Y=0.376X+0.265，r=0.999；
杂质11在28.71~229.70μg/ml范围内，线性良好，Y=0.527X+0.561，r=0.999；
杂质12在24.48~195.80μg/ml范围内，线性良好，Y=0.361X+0.241，r=0.999；
杂质13在32.59~260.74μg/ml范围内，线性良好，Y=0.627X+0.481，r=0.999；
杂质14在29.80~238.38μg/ml范围内，线性良好，Y=0.369X+0.692，r=0.999；
杂质15在25.18~201.40μg/ml范围内，线性良好，Y=0.124X+0.044，r=0.999和Y=0.167X+0.142，r=0.999；
杂质16在26.34~210.72μg/ml范围内，线性良好，Y=0.474X+ 0.275，r=0.999。
8.实施例8 检测限与定量限考察
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
同实施例5。
溶液制备：
取头孢克洛及杂质8、杂质9、杂质10、杂质11、杂质12、杂质13、杂质14、杂质15、杂质16对照品各适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释至每1ml中约含头孢克洛0.1mg、其他杂质0.2mg的溶液；分别精密量取适量，加溶剂逐级稀释，配制一系列溶液。
样品测定：
精密量取上述逐级稀释溶液各20µl，注入液相色谱仪，记录色谱图，后进样，按S/N=3作为检测限、S/N=3作为定量限。
结果：
检测限试验结果
定量限试验结果
结论：
该方法灵敏度高。
9.实施例9 溶液稳定性考察
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
同实施例5。
溶液制备：
对照品溶液：取头孢克洛及杂质8、杂质9、杂质10、杂质11、杂质12、杂质13、杂质14、杂质15、杂质16对照品各适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释至每1ml中约含头孢克洛0.05mg、其他杂质0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
样品测定：
溶液制备后于室温放置0h、10h、20h、35h、45h、55h，精密量取溶液各20µl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果：
溶液稳定性结果
结论：
对照品溶液制备后4℃下放置55h，主成分稳定性良好；杂质8、杂质9、杂质10、杂质11、杂质12、杂质14峰面积RSD小于2%，稳定性良好；杂质13、15、16峰面积RSD大于2%，稳定性较差，需制备后立即进样。
10.实施例10 准确度考察
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
同实施例5。
溶液制备：
杂质混合溶液：取头孢克洛杂质8、杂质9、杂质10、杂质11、杂质12、杂质13、杂质14、杂质15、杂质16对照品适量（各约10mg），精密称定，置50ml量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为总杂质储备溶液。
对照品储备溶液：取头孢克洛对照品约50mg，精密称定，置10ml量瓶中加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为头孢克洛对照储备液。
对照品溶液：精密量取头孢克洛杂质总储备液2.5ml，置5ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
80%回收率试验溶液：精密量取杂质混合溶液2.0ml，置5ml量瓶中；取本品内容物适量（约相当于头孢克洛25mg），精密称定，同置该量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。同法配制3份。
100%回收率试验溶液：精密量取杂质混合溶液2.5ml，置5ml量瓶中；取本品内容物适量（约相当于头孢克洛25mg），精密称定，同置该量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。同法配制3份。
120%回收率试验溶液：精密量取杂质混合溶液3.0ml，置5ml量瓶中；取本品内容物适量（约相当于头孢克洛25mg），精密称定，同置该量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。同法配制3份。
样品测定：
精密量取上述溶液各20µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果：
杂质8准确度试验结果
杂质9准确度试验结果
杂质10准确度试验结果
杂质11准确度试验结果
杂质12准确度试验结果
杂质13准确度试验结果
杂质14准确度试验结果
杂质15准确度试验结果
杂质16准确度试验结果
结论：
准确度好。
11.实施例11 耐用性考察
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
同实施例5、流速为1.2ml/min和0.8ml/min、柱温为30℃和20℃、初始流动相比例为98：2和99.5：0.5、检测波长为218nm和222nm、更换仪器、更换色谱柱、流动相A的pH为3.3和3.7、流动相A的浓度为0.84%和0.72%。
溶液制备：
对照品溶液：取头孢克洛及杂质8、杂质9、杂质10、杂质11、杂质12、杂质13、杂质14、杂质15、杂质16对照品各适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释至每1ml中约含头孢克洛0.05mg、其他杂质0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液：精密称取本品内容物适量（约相当于头孢克洛50mg），置10ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
对照溶液：精密量取上述各供试品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，作为对照溶液。
样品测定：
分别在上述不同色谱条件下，取溶剂空白、上述系统适用性试验溶液、供试品溶液、对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果：
耐用性试验结果（对照品溶液）
耐用性试验结果（供试品溶液）
结论：
样品溶液中杂质检出个数及杂质量较为恒定，该检测方法耐用性好。
12.实施例12 样品测定
仪器与试剂：
仪器：戴安U3000高效液相色谱仪 紫外检测器
试剂：水、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、乙腈
色谱条件：
同实施例5。
溶液制备：
对照品溶液：取头孢克洛及杂质8、杂质9、杂质10、杂质11、杂质12、杂质13、杂质14、杂质15、杂质16对照品各适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释至每1ml中约含头孢克洛0.05mg、其他杂质0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液：精密称取本品内容物适量（约相当于头孢克洛50mg），置10ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
对照溶液：精密量取上述各供试品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，作为对照溶液。
样品测定：
分别在上述溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
结论：
有关物质检测结果
如上所述，可较好的实现本发明。
Claims (11)
1.高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，其特征在于它包括如下步骤：
溶剂的制备：0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5）；
对照品混合溶液的制备：分别精密称取头孢克洛、杂质8、9、10、11、12、13、14、15、16；溴己新、杂质1、2、3、4、5、6、7各适量（约10mg），置100ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，混匀；
系统适用性溶液的制备：取头孢克洛对照品与头孢克洛δ-3异构体杂质对照品各适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中约含头孢克洛新0.05mg和头孢克洛δ-3异构体为0.1mg的混合溶液，作为系统适用性溶液；
供试品溶液的制备：取本品内容物适量（约相当于头孢克洛50mg），精密称定，置10ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤；
对照溶液的制备：精密量取1.0ml，置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；
色谱柱：Waters Atlantis T3柱 4.6×250mm，5μm
色谱条件：柱温为20℃~30℃，检测器为紫外检测器，检测波长为218nm~222nm，流速为0.8ml/min~1.2ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH=3.3~3.7磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH=3.3~3.7）-乙腈（55:45），初始流动相比例为流动相A-流动相B=98~99.5:2~0.5；
按下列梯度进行洗脱
在上述色谱条件下，精密量取空白溶液、系统适用性溶液、对照溶液、供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，出峰顺序依次为头孢克洛δ-3异构体、头孢克洛；二者分离度应不低于1.5。
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，其特征在于：柱温为20℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.5磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.5）-乙腈（55:45），
按下列梯度进行洗脱；
3.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，其特征在于：柱温为30℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.5磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.5）-乙腈（55:45），
按下列梯度进行洗脱；
4.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，其特征在于：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为218nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.5磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.5）-乙腈（55:45），
按下列梯度进行洗脱；
5.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，其特征在于：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为222nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.5磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.5）-乙腈（55:45），
按下列梯度进行洗脱
6.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，其特征在于：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为0.8ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.5磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.5）-乙腈（55:45），
按下列梯度进行洗脱
7.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，其特征在于：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.2ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.5磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.5）-乙腈（55:45），
按下列梯度进行洗脱
8.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，其特征在于：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.3磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.3）-乙腈（55:45），
按下列梯度进行洗脱
9.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，其特征在于：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.7磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.7）-乙腈（55:45），初始流动相比例为流动相A-流动相B=99:1；
按下列梯度进行洗脱
10.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，其特征在于：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.5磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.5）-乙腈（55:45），初始流动相比例为流动相A-流动相B=98:2；
按下列梯度进行洗脱
11.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定克洛己新干混悬剂中有关物质的检测方法，其特征在于：柱温为25℃，检测器为紫外检测器，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，溶剂为0.27%磷酸二氢钠溶液（磷酸调pH2.5），流动相A为0.78% pH3.5磷酸二氢钠溶液，流动相B为0.78%磷酸二氢钠（磷酸调pH3.5）-乙腈（55:45），初始流动相比例为流动相A-流动相B=99.5:0.5；
按下列梯度进行洗脱
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111146942.7A CN115876903A (zh) | 2021-09-29 | 2021-09-29 | 一种测定克洛己新干混悬剂中有关物质的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111146942.7A CN115876903A (zh) | 2021-09-29 | 2021-09-29 | 一种测定克洛己新干混悬剂中有关物质的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115876903A true CN115876903A (zh) | 2023-03-31 |
Family
ID=85755861
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111146942.7A Pending CN115876903A (zh) | 2021-09-29 | 2021-09-29 | 一种测定克洛己新干混悬剂中有关物质的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115876903A (zh) |
-
2021
- 2021-09-29 CN CN202111146942.7A patent/CN115876903A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN115453012B (zh) | 一种同时测定氢溴酸伏硫西汀中多个位置异构体的反相hplc方法 | |
| CN115060832B (zh) | 奥卡西平口服混悬液中奥卡西平及防腐剂含量检测方法 | |
| CN112611820A (zh) | 奥扎格雷钠残留溶剂的测定方法 | |
| CN108982695A (zh) | 衍生化hplc法测定药物或其中间体中叠氮化合物的方法 | |
| CN109900830B (zh) | 采用hplc分离测定塞来昔布中磺酰胺类杂质的方法及应用 | |
| CN113588837B (zh) | 一种盐酸莫西沙星有关物质的检测方法 | |
| CN112630365B (zh) | 一种高效液相色谱测定二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱含量的方法 | |
| CN117705987A (zh) | 一种乌帕替尼中间体中相关物质的检测方法 | |
| CN111122736B (zh) | 一种用于检测布瓦西坦中间体中对映异构体的方法 | |
| CN114689737B (zh) | 一种s-邻氯苯甘氨酸甲酯酒石酸盐有关物质的分析方法 | |
| CN115876903A (zh) | 一种测定克洛己新干混悬剂中有关物质的方法 | |
| CN113484450B (zh) | 药物对映异构体检测用衍生化处理方法及测定方法、应用 | |
| CN112213418B (zh) | 索非布韦中有关物质的检测方法 | |
| CN110501436B (zh) | 替硝唑药物组合物中有关物质的检测方法 | |
| CN114414715A (zh) | 头孢他啶残留溶剂中苯的检测方法和应用 | |
| CN115248260A (zh) | 一种苯磺顺阿曲库铵原料药中有关物质的hplc分析检测方法 | |
| CN114660183A (zh) | 一种分离测定l-丙氨酸异丙酯盐酸盐对映异构体的高效液相色谱分析方法 | |
| CN114414716B (zh) | 头孢他啶中三乙胺与n，n-二乙基苯胺的检测方法和应用 | |
| CN113092656B (zh) | 一种注射用维库溴铵药物中有关物质的检测方法 | |
| CN113933413B (zh) | 更昔洛韦中杂质k的检测方法、及杂质的分离方法 | |
| CN117214369B (zh) | 一种检测磷酸奥司他韦干混悬剂有关物质的液相色谱方法 | |
| CN112394112B (zh) | 一种检测硫酸羟氯喹中羟氯喹氮氧化物杂质含量的方法 | |
| CN110658263A (zh) | 一种雷美替胺对映异构体检测方法及其质量控制标准 | |
| CN114200050B (zh) | 一种对溴苯甲醚中的有关物质含量的hplc检测方法 | |
| CN116008450B (zh) | 一种普瑞巴林中基因毒性杂质的检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20230331 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |