CN115054530A - 一种具有保湿抗衰老功效的护肤组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提出了一种具有保湿抗衰老功效的护肤组合物及其制备方法,属于化妆品技术领域,包括以下原料:多糖酶解发酵产物、多肽酶解产物、复合透皮吸收促进剂、烟酰胺、透明质酸钠、去离子水。本发明具有保湿抗衰老功效的护肤组合物在透皮吸收促进剂的作用下,活性物质可快速深入皮肤表皮,为肌肤提供即时的补水效果同时带来持久保湿的效果,同时,活性肽、活性糖可以提高皮肤抗氧化、抗衰老活性,从而修复肌肤屏障,减少水分流失,恢复皮肤弹性,保持皮肤营养,促进皮肤活力,制备方法简单,制得的产品效果好,深受消费者喜爱。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域,具体涉及一种具有保湿抗衰老功效的护肤组合物及其制备方法。
背景技术
皮肤衰老是一个漫长而复杂的演变过程,研究表明光照是皮肤衰老的重要原因之一,其机制大概为:第一,阳光中的紫外线可通过诱导抗原刺激反应的抑制途径而降低免疫应答,如诱导表皮中的角质形成细胞、黑素细胞、郎格罕斯细胞,真皮中的成纤维细胞、内皮细胞等产生如IL-1、IL-6、EGF、TNF等各种细胞因子,它们通过抑制角质形成细胞的增殖降低表皮对外界刺激的反应性。第二,阳光中的紫外线可激活细胞表面相关受体,启动UV辐射相关信号传导,激活特定转录因子,诱导产生多种细胞因子,调节靶基因的表达(主要是MMPs 和胶原蛋白),表现为促进真皮基质中基质金属蛋白酶MMPs的合成。如MMPs活性增高,可引起胶原网的破坏、异常弹性纤维物质的堆积最终引起皮肤光老化的组织病理学改变,导致光老化的发生。第三,阳光中的紫外线可产生高度反应的活性氧(ROS)即自由基与各种细胞内结构相互作用而造成细胞和组织的损伤,表现为炎性因子分泌增加,诱导DNA损伤及细胞调亡等多条途径造成皮肤损害。
在宣称抗衰老的化妆品中,往往加入具有抗衰老功效的组分,主要有植物提取成分,如中国专利CN102085168B涉及到了枸杞提取物、茉莉花提取物、莲子心提取物、何首乌提取物、川芎提取物、连翘提取物、谷精草提取物的抗衰老成分;中国专利CN102670436B、CN103202784B、CN102961280B、CN103356446B 的专利,分别涉及到了含管花肉苁蓉提取物、木棉花提取物、雪菊提取物、黑茶提取物的抗衰老成分;也有采用多肽或蛋白质类做为抗衰老功效物质,如中国专利CN102462640B和CN101721343B的专利,涉及到了海洋鱼皮胶原蛋白或胶原肽为抗衰老成分;中国专利CN1212112C和CN101711729B的专利,涉及到了表皮生长因子(EGF)做为抗衰老成分。但是,目前鱼胶原蛋白和甲壳素在食品和保健领域的研究较多,在化妆品的应用较少,主要是鱼胶原蛋白和甲壳素都是天然的高分子物质,若分子量太大,只能铺展在皮肤的角质层上,很难透皮吸收,仅仅起到保湿的功效,自然也就发挥不了被皮肤吸收、增加皮肤营养的功效。
中国专利CN108785186A公开了一种多肽美肤青春精华液,所述多肽美肤青春精华液具有如下成分和配比:水70g、EDTA二钠0.02g、甘油5g、丙二醇3g、汉生胶0.08g、尿囊素0.2g、透明质酸1g、尼泊金甲脂0.1g、D-泛醇0.5g、燕麦B-葡聚糖0.2g、HPS0.1g、香0.02g、MTI0.1g、积雪草提取物1g、蛇毒肽0.1g、六胜肽-80.1g、十肽-120.1g、寡肽-3(Lumixyil)0.1g、米胜肽0.1g、马齿苋提取物1g。上述专利笼统的采用多种活性成分,单纯的依靠各种活性成分已知的功效叠加制备得到相应的功效护肤品。然而,活性成分容易失效,且大量组分的叠加在一定程度上会影响活性成分的功效。
中国专利CN108078876A公开了一种水凝胶制剂,其包含如下重量百分比的各组分:2-30重量%的以蛇毒多肽为核心成分的皮肤调理剂,5-25重量%的保湿剂,4-6重量%的成膜剂,0.01-10重量%的抗氧化剂,0.005-2重量%的螯合剂,0.01-2重量%的清凉剂,0.01-1重量%的pH调节剂,0.001-0.5重量%的矫味剂,余量为去离子水,其中所述蛇毒多肽通过交联嵌在所述水凝胶支架结构中。该专利虽然能够有效解决蛇毒多肽易受氧化剂、还原剂、蛋白水解酶类等的分解破坏的问题。但是,该方法仍然制备繁琐,应用范围受到凝胶的限制。
对于干性皮肤而言,维生素E、多酚类、辅酶Q10等成分是常用的抗氧化剂,但是由于皮肤干燥本身也是加速皮肤衰老的诱发因素之一,并且因为干性皮肤角质层薄,不利于护肤品中有效成分的吸收,因此有必要在提供抗衰功效的同时对皮肤进行保湿防护。
发明内容
本发明的目的在于提出一种具有保湿抗衰老功效的护肤组合物及其制备方法,在透皮吸收促进剂的作用下,活性物质可快速深入皮肤表皮,为肌肤提供即时的补水效果同时带来持久保湿的效果,同时,活性肽、活性糖可以提高皮肤抗氧化、抗衰老活性,从而修复肌肤屏障,减少水分流失,恢复皮肤弹性,保持皮肤营养,促进皮肤活力,制备方法简单,制得的产品效果好,深受消费者喜爱。
本发明的技术方案是这样实现的:
本发明提供一种具有保湿抗衰老功效的护肤组合物,包括以下原料:多糖酶解发酵产物、多肽酶解产物、复合透皮吸收促进剂、烟酰胺、透明质酸钠、去离子水;
所述复合透皮吸收促进剂为中药复合透皮吸收促进剂和新型透皮吸收促进剂的复配混合物,所述新型透皮吸收促进剂的结构式如式Ⅰ所示:
所述多糖酶解发酵产物为葛仙米和马尾藻的多糖酶解发酵产物;
所述多肽酶解产物为葛仙米和螺旋藻的多肽酶解产物。
作为本发明的进一步改进,由以下原料按重量份制备而成:多糖酶解发酵产物5-12份、多肽酶解产物3-7份、复合透皮吸收促进剂0.5-1份、烟酰胺0.2-1 份、透明质酸钠0.5-1.2份、去离子水20-50份。
优选地,所述透明质酸钠为小分子透明质酸钠,分子量范围为20-80万道尔顿。
作为本发明的进一步改进,所述多糖酶解发酵产物由以下方法制备而成:
S1.将葛仙米干粉、马尾藻干粉分别加水浸泡,球磨,加入纤维素酶和淀粉酶,加热至35-38℃反应3-5h,然后加热至沸腾提取2-4h,冷却至室温,过滤,葛仙米滤渣留用,滤液加入无水乙醇,静置,过滤,干燥,分别得到葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物,混合均匀,得到藻多糖酶解产物;
S2.将步骤S1制得的藻多糖酶解产物加入水中,加入植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液,发酵培养,过滤,浓缩,冷冻干燥,得到多糖酶解发酵产物。
作为本发明的进一步改进,所述葛仙米干粉和水的质量比为3-5:10,所述马尾藻干粉和水的质量比为3-5:10;所述球磨时间为0.5-1h,所述纤维素酶和淀粉酶的质量比为3-5:1;加入量为体系总质量的3-5wt%;所述葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物的质量比为5-10:3-7;所述藻多糖酶解产物和水的质量比为4-6:10;所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液的含菌量为 107-109cfu/mL;所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液的接种量分别为 2-4%和1-3wt%;所述发酵培养条件为35-38℃,微缺氧条件下,培养48-72h;所述微缺氧条件为氧气含量为5-10%,二氧化碳含量为5-8%,余量为氮气,其中%为体积百分比。
优选地,所述多糖酶解发酵产物由以下方法具体制备而成:
S1.将葛仙米干粉、马尾藻干粉分别加水浸泡,所述葛仙米干粉和水的质量比为3-5:10,所述马尾藻干粉和水的质量比为3-5:10,球磨0.5-1h,加入纤维素酶和淀粉酶,所述纤维素酶和淀粉酶的质量比为3-5:1,加入量为体系总质量的3-5wt%,加热至35-38℃反应3-5h,然后加热至沸腾提取2-4h,冷却至室温,过滤,葛仙米滤渣留用,滤液加入无水乙醇,静置,过滤,干燥,分别得到葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物,将葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物的按照质量比为5-10:3-7混合均匀,得到藻多糖酶解产物;
S2.将步骤S1制得的藻多糖酶解产物加入水中,所述藻多糖酶解产物和水的质量比为4-6:10,加入植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液(含菌量为 107-109cfu/mL),所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液的接种量分别为 2-4%和1-3wt%,发酵培养,发酵培养条件为35-38℃,微缺氧条件下,培养48-72h,过滤,浓缩,冷冻干燥,得到多糖酶解发酵产物;
所述微缺氧条件为氧气含量为5-10%,二氧化碳含量为5-8%,余量为氮气,其中%为体积百分比。
作为本发明的进一步改进,所述多肽酶解产物由以下方法制备而成:
T1.将上述步骤S1得到的葛仙米滤渣和螺旋藻干粉混合均匀,加水浸泡,球磨,得到浆料,依次加入水、稀碱溶液、稀酸溶液、醇溶液中提取,过滤,滤渣进入下一种溶液中提取,滤液有机膜浓缩,冷冻干燥,得到蛋白复合粉;
T2.将步骤T1制得的蛋白复合粉加入水中,加入木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶,酶解,灭酶,过滤,冷冻干燥,得到多肽酶解产物。
作为本发明的进一步改进,所述葛仙米滤渣和螺旋藻干粉的质量比为 5-10:3;所述球磨时间为1-2h,所述稀碱溶液为浓度为3-5wt%的NaOH溶液或 KOH溶液;所述稀酸溶液为浓度为2-4wt%的HCl溶液或硫酸溶液;所述醇溶液为浓度为5-10wt%的乙醇溶液;所述有机膜孔径为5000-10000D;所述蛋白复合粉和水的质量比为3-7:10;所述木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的质量比为3-5:7,添加量为体系总质量的2-5wt%;所述酶解条件为35-45℃,时间为3-5h。
优选地,所述多肽酶解产物由以下方法具体制备而成:
T1.将上述步骤S1得到的葛仙米滤渣和螺旋藻干粉混合均匀,所述葛仙米滤渣和螺旋藻干粉的质量比为5-10:3,加10倍质量的水浸泡,球磨1-2h,得到浆料,依次加入3-5倍质量的水、3-5倍质量的3-5wt%的NaOH溶液或KOH溶液、3-5倍质量的2-4wt%的HCl溶液或硫酸溶液、3-5倍质量的5-10wt%的乙醇溶液中提取,每次提取中,将浆料加入溶剂中,搅拌提取1-3h,然后过滤,滤渣进入下一种溶液中提取,每一次的滤液用孔径为5000-10000D的有机膜浓缩,冷冻干燥,得到蛋白复合粉;
T2.将步骤T1制得的蛋白复合粉加入水中,所述蛋白复合粉和水的质量比为3-7:10,加入木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶,所述木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的质量比为3-5:7,添加量为体系总质量的2-5wt%,酶解,酶解条件为35-45℃,时间为3-5h,于1000-1500W超声灭酶30min,过滤,冷冻干燥,得到多肽酶解产物。
作为本发明的进一步改进,所述新型透皮吸收促进剂的制备方法如下:将己内酰胺溶于有机溶剂中,加入碱,加热至70-80℃,反应0.5-1h,加入三(2- 氯乙基)胺,保温反应3-4h,冷却至室温,过滤,重结晶,洗涤,干燥,得到新型透皮吸收促进剂。
优选地,所述有机溶剂选自二甲亚砜、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳中的至少一种;所述碱选自碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠中的至少一种。
优选地,所述新型透皮吸收促进剂的制备方法具体如下:将3-3.1mol己内酰胺溶于二甲亚砜中,加入0.5-1mol氢氧化钾,加热至70-80℃,反应0.5-1h,加入1mol三(2-氯乙基)胺,保温反应3-4h,冷却至室温,过滤,甲苯-丙酮重结晶,去离子水洗涤,干燥,得到新型透皮吸收促进剂。
作为本发明的进一步改进,所述中药复合透皮吸收促进剂为杜香萜烯和薄荷油按照质量比为3-5:2的复配混合物;所述中药复合透皮吸收促进剂和新型透皮吸收促进剂的质量比为3-7:1。
本发明进一步保护一种上述具有保湿抗衰老功效的护肤组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)将复合透皮吸收促进剂中各组分混合均匀;
将多糖酶解发酵产物、多肽酶解产物溶于去离子水中,加入烟酰胺、透明质酸钠,搅拌混合均匀,加入步骤(1)得到的复合透皮吸收促进剂,混匀,得到具有保湿抗衰老功效的护肤组合物。
本发明进一步保护一种保湿抗衰老精华液,由以下原料按照重量份制备而成:权利要求1-8任一项所述具有保湿抗衰老功效的护肤组合物20-30份、芍药提取物2-4份、1,3-丁二醇2-4份、甘油3-5份、苯氧乙醇0.01-0.1份、柠檬酸0.5-1份、抗坏血酸钠1-3份、卡波姆1.5-2份、去离子水80-120份。
本发明具有如下有益效果:N-烷基氮杂环烷-2-酮类化合物是一种高效、低毒的透皮吸收促进剂,本发明制得的新型透皮吸收促进剂的结构与普通N-烷基氮杂环烷-2-酮相比,采用氮原子为中心点,三条烷基链将2个己内酰胺环连接,相比普通的N-烷基氮杂环烷-2-酮,进一步提高了透皮吸收的效率,降低了其毒副作用,具有高效、安全无毒的特点,没有任何光刺激作用,也未见过敏反应或光敏性接触反应。其成本低,需要量更小,效果更好,制备方法简单温和,反应时间短,收率高,可生物降解。其作用主要是对皮肤的角质层产生影响,从而促进活性物质的穿透皮肤的能力,具体地,其影响了皮肤角质层中扁平角化细胞的有序叠集结构,作用于角质层中的类脂质,使之完全流化,从而可以让活性物质透皮吸收更容易、更快速。
同时,本发明复合透皮吸收促进剂中还包括中药复合透皮吸收促进剂,具体为杜香萜烯和薄荷油的复配混合物,其中,杜香萜烯主要通过改变角蛋白构型而起到促透作用,薄荷油通过直接抽提角质层脂质,改变角质层脂质分子结构,降低皮肤屏障作用,两者协同作用下,通过扰乱角质层脂质中的神经酞胺A 链、B链及游离脂肪酸分子的有序度参数,破坏角质层脂质的有序排列,并且通过增大活性物质的扩散系数,促进活性物质的渗透,且中药复合透皮吸收促进剂与制得的新型透皮吸收促进剂的协同作用下,能明显提高皮肤对本发明制得的短链多糖和多肽类活性物质的吸收,从而起到很好的保湿调节、抗氧化调节和抗衰老调节的作用。
葛仙米是一种蓝藻,俗称“水木耳”,与木耳、发菜同属,富含多糖类物质和蛋白类物质,人工培植的葛仙米干品中,蛋白质含量可以达到37%以上,其蛋白包括酸溶蛋白、碱溶蛋白、醇溶蛋白以及水溶蛋白,多糖含量也高于30%。本发明将经过球磨后的葛仙米均浆和马尾藻均浆经过纤维素酶、淀粉酶酶解后,将藻的细胞内多糖和胞外多醣均提取出来,通过水提醇沉的方法沉淀得到多糖物质,进一步通过植物乳杆菌和产朊假丝酵母进行混合菌发酵,将多糖发酵生成大量的微量元素、短链多糖、寡糖、单糖等复合糖类物质,从而制得多糖酶解发酵产物,该产物具有较好的生物活性,包括抗氧化、抗衰老活性,其富含的糖类物质,使其作用于皮肤上仍能通过氢键作用富集水分,起到很好的皮肤保湿的效果;
进一步,将葛仙米过滤后的滤渣与螺旋藻干粉混合,螺旋藻是一种富含蛋白质的藻类,将其球磨均浆后,经过稀碱溶液、稀酸溶液、醇溶液提取,从而分别得到酸溶蛋白、碱溶蛋白、醇溶蛋白以及水溶蛋白,混合得到的总蛋白经过复合蛋白酶(木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶)酶解,得到活性多肽、短肽类蛋白酶解产物,该多肽酶解产物具有较好的抗氧化、抗衰老、去皱、嫩肤的效果,用于护肤品中能很好的恢复皮肤弹性,保持皮肤营养,促进皮肤活力。
透明质酸钠是玻尿酸,主要的功效是保湿,属于目前保湿性最强的一种保湿因子,其次透明质酸钠,可以修复皮肤损伤,促进表皮细胞的增殖和分化,清除氧自由基,延缓皮肤衰老,还有除皱的作用;烟酰胺又被称为维生素B3,作用有美白淡斑,提亮肤色,抗衰老,补水保湿,修复屏障等。烟酰胺能够抑制黑色素的角质细胞脱落,减少肌肤暗沉,提亮肤色,达到美白效果。还能够加速细胞新陈代谢,同时有助于胶原蛋白、角蛋白的合成,达到抗衰老的目的,烟酰胺能够保持皮肤的湿度,修复肌肤屏障,减少水分流失,对于油皮还有控油,收缩毛孔的功效。芍药提取物表现出很强的总抗氧化能力和1,1-二苯基-2- 三硝基苯肼自由基清除能力,并且对羟自由基引起的牛血清白蛋白氧化损伤具有保护作用,可以改变肌肤粗糙和面部的黄褐斑问题;对于调节女人的内分泌和月经不调有很好的效果,可以治疗粉刺,并延缓机体组织的衰老。
本发明具有保湿抗衰老功效的护肤组合物在透皮吸收促进剂的作用下,活性物质可快速深入皮肤表皮,为肌肤提供即时的补水效果同时带来持久保湿的效果,同时,活性肽、活性糖可以提高皮肤抗氧化、抗衰老活性,从而修复肌肤屏障,减少水分流失,恢复皮肤弹性,保持皮肤营养,促进皮肤活力,制备方法简单,制得的产品效果好,深受消费者喜爱。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明测试例1中各组吸湿率对比图;
图2为本发明测试例1中各组保湿率对比图。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
葛仙米干粉购于湖南炎帝生物工程有限公司,含水量小于2%;马尾藻干粉购于济南富吉化工有限公司,含水量小于1%;螺旋藻干粉为钝顶螺旋藻粉,购于河南林博生物科技有限公司,含水量小于1%。芍药提取物购于广东格烯生物科技股份有限公司,芍药苷含量4.5-5.5mg/mL。
纤维素酶为纤维素酶H型,10000U/g,购于夏盛(北京)生物科技开发有限公司;淀粉酶为ɑ-淀粉酶H型,3000U/g,购于夏盛(北京)生物科技开发有限公司;木瓜蛋白酶,100000U/g,购于夏盛(北京)生物科技开发有限公司;菠萝蛋白酶,100000U/g,购于夏盛(北京)生物科技开发有限公司。
植物乳杆菌,为植物乳杆菌JYLP-326,购于山东中科嘉亿生物工程有限公司;产朊假丝酵母,购于北纳创联生物技术有限公司。
菌种种子液的制备方法:将菌种接种到高氏培养基中,在温度为37℃,氧浓度为10%,二氧化碳浓度为7%,余量为氮气,此处%为体积百分比。湿度为75%,培养时间为18h,培养成菌种种子液。
透明质酸钠为小分子透明质酸钠,分子量范围为20-80万道尔顿,购于西安绿腾生物科技有限公司。
制备例1多糖酶解发酵产物和多肽酶解产物的制备
多糖酶解发酵产物由以下方法具体制备而成:
S1.将葛仙米干粉、马尾藻干粉分别加水浸泡,所述葛仙米干粉和水的质量比为3:10,所述马尾藻干粉和水的质量比为3:10,球磨0.5h,加入纤维素酶和淀粉酶,所述纤维素酶和淀粉酶的质量比为3:1,加入量为体系总质量的3wt%,加热至35℃反应3h,然后加热至沸腾提取2h,冷却至室温,过滤,葛仙米滤渣留用,滤液加入无水乙醇,静置,过滤,干燥,分别得到葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物,将葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物的按照质量比为5:3混合均匀,得到藻多糖酶解产物;
S2.将步骤S1制得的藻多糖酶解产物加入水中,所述藻多糖酶解产物和水的质量比为4:10,加入植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液(含菌量为 107cfu/mL),所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液的接种量分别为2%和1wt%,发酵培养,发酵培养条件为35℃,微缺氧条件下,培养48h,过滤,浓缩,冷冻干燥,得到多糖酶解发酵产物;
所述微缺氧条件为氧气含量为5%,二氧化碳含量为5%,余量为氮气,其中%为体积百分比。
多肽酶解产物由以下方法具体制备而成:
T1.将上述步骤S1得到的葛仙米滤渣和螺旋藻干粉混合均匀,所述葛仙米滤渣和螺旋藻干粉的质量比为5:3,加10倍质量的水浸泡,球磨1h,得到浆料,依次加入3倍质量的水、3倍质量的3wt%的NaOH溶液、3倍质量的2wt%的HCl 溶液、3倍质量的5wt%的乙醇溶液中提取,每次提取中,将浆料加入溶剂中,搅拌提取1h,然后过滤,滤渣进入下一种溶液中提取,每一次的滤液用孔径为 5000D的有机膜浓缩,冷冻干燥,得到蛋白复合粉;
T2.将步骤T1制得的蛋白复合粉加入水中,所述蛋白复合粉和水的质量比为3:10,加入木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶,所述木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的质量比为3:7,添加量为体系总质量的2wt%,酶解,酶解条件为35℃,时间为3h,于1000W超声灭酶30min,过滤,冷冻干燥,得到多肽酶解产物。
制备例2多糖酶解发酵产物和多肽酶解产物的制备
多糖酶解发酵产物由以下方法具体制备而成:
S1.将葛仙米干粉、马尾藻干粉分别加水浸泡,所述葛仙米干粉和水的质量比为5:10,所述马尾藻干粉和水的质量比为5:10,球磨1h,加入纤维素酶和淀粉酶,所述纤维素酶和淀粉酶的质量比为5:1,加入量为体系总质量的5wt%,加热至38℃反应5h,然后加热至沸腾提取4h,冷却至室温,过滤,葛仙米滤渣留用,滤液加入无水乙醇,静置,过滤,干燥,分别得到葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物,将葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物的按照质量比为10:7混合均匀,得到藻多糖酶解产物;
S2.将步骤S1制得的藻多糖酶解产物加入水中,所述藻多糖酶解产物和水的质量比为6:10,加入植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液(含菌量为 109cfu/mL),所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液的接种量分别为4%和3wt%,发酵培养,发酵培养条件为38℃,微缺氧条件下,培养72h,过滤,浓缩,冷冻干燥,得到多糖酶解发酵产物;
所述微缺氧条件为氧气含量为10%,二氧化碳含量为8%,余量为氮气,其中%为体积百分比。
多肽酶解产物由以下方法具体制备而成:
T1.将上述步骤S1得到的葛仙米滤渣和螺旋藻干粉混合均匀,所述葛仙米滤渣和螺旋藻干粉的质量比为10:3,加10倍质量的水浸泡,球磨2h,得到浆料,依次加入5倍质量的水、5倍质量的5wt%的KOH溶液、5倍质量的4wt%的硫酸溶液、5倍质量的10wt%的乙醇溶液中提取,每次提取中,将浆料加入溶剂中,搅拌提取3h,然后过滤,滤渣进入下一种溶液中提取,每一次的滤液用孔径为10000D的有机膜浓缩,冷冻干燥,得到蛋白复合粉;
T2.将步骤T1制得的蛋白复合粉加入水中,所述蛋白复合粉和水的质量比为7:10,加入木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶,所述木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的质量比为5:7,添加量为体系总质量的5wt%,酶解,酶解条件为45℃,时间为5h,于1500W超声灭酶30min,过滤,冷冻干燥,得到多肽酶解产物。
制备例3多糖酶解发酵产物和多肽酶解产物的制备
多糖酶解发酵产物由以下方法具体制备而成:
S1.将葛仙米干粉、马尾藻干粉分别加水浸泡,所述葛仙米干粉和水的质量比为4:10,所述马尾藻干粉和水的质量比为4:10,球磨1h,加入纤维素酶和淀粉酶,所述纤维素酶和淀粉酶的质量比为4:1,加入量为体系总质量的4wt%,加热至37℃反应4h,然后加热至沸腾提取3h,冷却至室温,过滤,葛仙米滤渣留用,滤液加入无水乙醇,静置,过滤,干燥,分别得到葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物,将葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物的按照质量比为7:5混合均匀,得到藻多糖酶解产物;
S2.将步骤S1制得的藻多糖酶解产物加入水中,所述藻多糖酶解产物和水的质量比为5:10,加入植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液(含菌量为 108cfu/mL),所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液的接种量分别为3%和2wt%,发酵培养,发酵培养条件为37℃,微缺氧条件下,培养56h,过滤,浓缩,冷冻干燥,得到多糖酶解发酵产物;
所述微缺氧条件为氧气含量为7%,二氧化碳含量为7%,余量为氮气,其中%为体积百分比。
多肽酶解产物由以下方法具体制备而成:
T1.将上述步骤S1得到的葛仙米滤渣和螺旋藻干粉混合均匀,所述葛仙米滤渣和螺旋藻干粉的质量比为7:3,加10倍质量的水浸泡,球磨1.5h,得到浆料,依次加入4倍质量的水、4倍质量的4wt%的KOH溶液、4倍质量的3wt%的 HCl溶液、4倍质量的7wt%的乙醇溶液中提取,每次提取中,将浆料加入溶剂中,搅拌提取2h,然后过滤,滤渣进入下一种溶液中提取,每一次的滤液用孔径为7000D的有机膜浓缩,冷冻干燥,得到蛋白复合粉;
T2.将步骤T1制得的蛋白复合粉加入水中,所述蛋白复合粉和水的质量比为5:10,加入木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶,所述木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的质量比为4:7,添加量为体系总质量的3.5wt%,酶解,酶解条件为40℃,时间为4h,于1300W超声灭酶30min,过滤,冷冻干燥,得到多肽酶解产物。
对比制备例1
与制备例3相比,多糖酶解发酵产物的制备中未添加马尾藻干粉,其他条件均不改变。
多糖酶解发酵产物由以下方法具体制备而成:
S1.将葛仙米干粉加水浸泡,所述葛仙米干粉和水的质量比为4:10,球磨 1h,加入纤维素酶和淀粉酶,所述纤维素酶和淀粉酶的质量比为4:1,加入量为体系总质量的4wt%,加热至37℃反应4h,然后加热至沸腾提取3h,冷却至室温,过滤,葛仙米滤渣留用,滤液加入无水乙醇,静置,过滤,干燥,得到葛仙米多糖酶解产物,为藻多糖酶解产物;
S2.将步骤S1制得的藻多糖酶解产物加入水中,所述藻多糖酶解产物和水的质量比为5:10,加入植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液(含菌量为 108cfu/mL),所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液的接种量分别为3%和2wt%,发酵培养,发酵培养条件为37℃,微缺氧条件下,培养56h,过滤,浓缩,冷冻干燥,得到多糖酶解发酵产物;
所述微缺氧条件为氧气含量为7%,二氧化碳含量为7%,余量为氮气,其中%为体积百分比。
对比制备例2
与制备例3相比,多糖酶解发酵产物的制备中未添加植物乳杆菌发酵,其他条件均不改变。
多糖酶解发酵产物由以下方法具体制备而成:
S1.将葛仙米干粉、马尾藻干粉分别加水浸泡,所述葛仙米干粉和水的质量比为4:10,所述马尾藻干粉和水的质量比为4:10,球磨1h,加入纤维素酶和淀粉酶,所述纤维素酶和淀粉酶的质量比为4:1,加入量为体系总质量的4wt%,加热至37℃反应4h,然后加热至沸腾提取3h,冷却至室温,过滤,葛仙米滤渣留用,滤液加入无水乙醇,静置,过滤,干燥,分别得到葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物,将葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物的按照质量比为7:5混合均匀,得到藻多糖酶解产物;
S2.将步骤S1制得的藻多糖酶解产物加入水中,所述藻多糖酶解产物和水的质量比为5:10,加入产朊假丝酵母的菌种种子液(含菌量为108cfu/mL),所述产朊假丝酵母的菌种种子液的接种量分别为5wt%,发酵培养,发酵培养条件为37℃,微缺氧条件下,培养56h,过滤,浓缩,冷冻干燥,得到多糖酶解发酵产物;
所述微缺氧条件为氧气含量为7%,二氧化碳含量为7%,余量为氮气,其中%为体积百分比。
对比制备例3
与制备例3相比,多糖酶解发酵产物的制备中未添加产朊假丝酵母发酵,其他条件均不改变。
多糖酶解发酵产物由以下方法具体制备而成:
S1.将葛仙米干粉、马尾藻干粉分别加水浸泡,所述葛仙米干粉和水的质量比为4:10,所述马尾藻干粉和水的质量比为4:10,球磨1h,加入纤维素酶和淀粉酶,所述纤维素酶和淀粉酶的质量比为4:1,加入量为体系总质量的4wt%,加热至37℃反应4h,然后加热至沸腾提取3h,冷却至室温,过滤,葛仙米滤渣留用,滤液加入无水乙醇,静置,过滤,干燥,分别得到葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物,将葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物的按照质量比为7:5混合均匀,得到藻多糖酶解产物;
S2.将步骤S1制得的藻多糖酶解产物加入水中,所述藻多糖酶解产物和水的质量比为5:10,加入植物乳杆菌的菌种种子液(含菌量为108cfu/mL),所述植物乳杆菌的菌种种子液的接种量分别为5wt%,发酵培养,发酵培养条件为 37℃,微缺氧条件下,培养56h,过滤,浓缩,冷冻干燥,得到多糖酶解发酵产物;
所述微缺氧条件为氧气含量为7%,二氧化碳含量为7%,余量为氮气,其中%为体积百分比。
对比制备例4
与制备例3相比,多糖酶解发酵产物的制备中未进行发酵步骤,其他条件均不改变。
由以下方法具体制备而成:
将葛仙米干粉、马尾藻干粉分别加水浸泡,所述葛仙米干粉和水的质量比为4:10,所述马尾藻干粉和水的质量比为4:10,球磨1h,加入纤维素酶和淀粉酶,所述纤维素酶和淀粉酶的质量比为4:1,加入量为体系总质量的4wt%,加热至37℃反应4h,然后加热至沸腾提取3h,冷却至室温,过滤,葛仙米滤渣留用,滤液加入无水乙醇,静置,过滤,干燥,分别得到葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物,将葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物的按照质量比为7:5混合均匀,得到藻多糖酶解产物,即得产物;
对比制备例5
与制备例3相比,多糖酶解发酵产物的制备中未进行酶解步骤,其他条件均不改变。
多糖酶解发酵产物由以下方法具体制备而成:
S1.将葛仙米干粉、马尾藻干粉分别加水浸泡,所述葛仙米干粉和水的质量比为4:10,所述马尾藻干粉和水的质量比为4:10,球磨1h,加热至37℃反应 4h,然后加热至沸腾提取3h,冷却至室温,过滤,葛仙米滤渣留用,滤液加入无水乙醇,静置,过滤,干燥,分别得到葛仙米多糖产物和马尾藻多糖产物,将葛仙米多糖产物和马尾藻多糖产物的按照质量比为7:5混合均匀,得到藻多糖产物;
S2.将步骤S1制得的藻多糖产物加入水中,所述藻多糖产物和水的质量比为5:10,加入植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液(含菌量为108cfu/mL),所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液的接种量分别为3%和2wt%,发酵培养,发酵培养条件为37℃,微缺氧条件下,培养56h,过滤,浓缩,冷冻干燥,得到多糖发酵产物;
所述微缺氧条件为氧气含量为7%,二氧化碳含量为7%,余量为氮气,其中%为体积百分比。
测试例1体外保湿性能测定
1、吸湿性测定
分别准确称取0.5g干燥后的制备例1-3和对比例1-5制得的多糖酶解发酵产物、聚乙二醇2000、透明质酸于洁净干燥的载玻片上,记录重量M0,然后放入温度25℃、相对湿度55%的恒温恒湿培养箱中,每隔6h记录一次重量Mt。计算吸湿率(%)。
吸湿率(%)=(Mt-M0)/0.5×100%
结果见图1。
2、保湿性测试
分别准确称取0.5g干燥后的制备例1-3和对比例1-5制得的多糖酶解发酵产物、聚乙二醇2000、透明质酸溶于50g去离子水中,搅拌混合均匀,记录重量M0,然后放入温度25℃、相对湿度55%的恒温恒湿培养箱中,每隔5h记录一次重量Mn。计算保湿率(%)。
保湿率(%)=Mn/M0×100%
结果见图2。
由图1、2可知,本发明制备例1-3制得的多糖酶解发酵产物具有良好的吸湿、保湿效果。
对比制备例6
与制备例3相比,多肽酶解产物的制备中未添加螺旋藻干粉,其他条件均不改变。
多肽酶解产物由以下方法具体制备而成:
T1.将上述步骤S1得到的葛仙米滤渣加10倍质量的水浸泡,球磨1.5h,得到浆料,依次加入4倍质量的水、4倍质量的4wt%的KOH溶液、4倍质量的3wt%的HCl溶液、4倍质量的7wt%的乙醇溶液中提取,每次提取中,将浆料加入溶剂中,搅拌提取2h,然后过滤,滤渣进入下一种溶液中提取,每一次的滤液用孔径为7000D的有机膜浓缩,冷冻干燥,得到蛋白复合粉;
T2.将步骤T1制得的蛋白复合粉加入水中,所述蛋白复合粉和水的质量比为5:10,加入木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶,所述木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的质量比为4:7,添加量为体系总质量的3.5wt%,酶解,酶解条件为40℃,时间为4h,于1300W超声灭酶30min,过滤,冷冻干燥,得到多肽酶解产物。
对比制备例7
与制备例3相比,多肽酶解产物的制备中未进行酶解步骤,其他条件均不改变。
由以下方法具体制备而成:
将上述步骤S1得到的葛仙米滤渣和螺旋藻干粉混合均匀,所述葛仙米滤渣和螺旋藻干粉的质量比为7:3,加10倍质量的水浸泡,球磨1.5h,得到浆料,依次加入4倍质量的水、4倍质量的4wt%的KOH溶液、4倍质量的3wt%的HCl 溶液、4倍质量的7wt%的乙醇溶液中提取,每次提取中,将浆料加入溶剂中,搅拌提取2h,然后过滤,滤渣进入下一种溶液中提取,每一次的滤液用孔径为 7000D的有机膜浓缩,冷冻干燥,得到蛋白复合粉。
制备例4新型透皮吸收促进剂的制备
合成路线如下:
具体如下:将3mol己内酰胺溶于200mL二甲亚砜中,加入0.5mol氢氧化钾,加热至70℃,反应0.5h,加入1mol三(2-氯乙基)胺,保温反应3h,冷却至室温,过滤,甲苯-丙酮重结晶,去离子水洗涤,干燥,得到新型透皮吸收促进剂,ESMS计算值:C24H43N4O3(M+H)+435.33,实测值:435.3,收率为90%。
新型透皮吸收促进剂的核磁结果:1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.25-3.32(m, 12H),2.65(t,6H),2.19(t,6H),1.55-1.58(m,12H),1.29(m,6H)。
制备例5新型透皮吸收促进剂的制备
具体如下:将3.1mol己内酰胺溶于200mL二甲亚砜中,加入1mol氢氧化钾,加热至80℃,反应1h,加入1mol三(2-氯乙基)胺,保温反应4h,冷却至室温,过滤,甲苯-丙酮重结晶,去离子水洗涤,干燥,得到新型透皮吸收促进剂,收率为93%。
制备例6新型透皮吸收促进剂的制备
具体如下:将3.05mol己内酰胺溶于200mL二甲亚砜中,加入0.7mol氢氧化钾,加热至75℃,反应1h,加入1mol三(2-氯乙基)胺,保温反应3.5h,冷却至室温,过滤,甲苯-丙酮重结晶,去离子水洗涤,干燥,得到新型透皮吸收促进剂,收率为92%。
实施例1
本实施例提供一种具有保湿抗衰老功效的护肤组合物。
原料组成(重量份):制备例1制得的多糖酶解发酵产物5份、制备例1制得的多肽酶解产物3份、复合透皮吸收促进剂0.5份、烟酰胺0.2份、透明质酸钠0.5份、去离子水20份。
复合透皮吸收促进剂由中药复合透皮吸收促进剂和制备例4制得的新型透皮吸收促进剂按照质量比为3:1混合制备而成;中药复合透皮吸收促进剂为杜香萜烯和薄荷油按照质量比为3:2的复配混合物。
制备方法包括以下步骤:
(1)将杜香萜烯、薄荷油和新型透皮吸收促进剂混合均匀;
(2)将多糖酶解发酵产物、多肽酶解产物溶于去离子水中,加入烟酰胺、透明质酸钠,搅拌混合均匀,加入步骤(1)得到的复合透皮吸收促进剂,混匀,得到具有保湿抗衰老功效的护肤组合物。
实施例2
本实施例提供一种具有保湿抗衰老功效的护肤组合物。
原料组成(重量份):制备例2制得的多糖酶解发酵产物12份、制备例2 制得的多肽酶解产物7份、复合透皮吸收促进剂1份、烟酰胺1份、透明质酸钠1.2份、去离子水50份。
复合透皮吸收促进剂由中药复合透皮吸收促进剂和制备例5制得的新型透皮吸收促进剂按照质量比为7:1混合制备而成;中药复合透皮吸收促进剂为杜香萜烯和薄荷油按照质量比为5:2的复配混合物。
制备方法包括以下步骤:
(1)将杜香萜烯、薄荷油和新型透皮吸收促进剂混合均匀;
(2)将多糖酶解发酵产物、多肽酶解产物溶于去离子水中,加入烟酰胺、透明质酸钠,搅拌混合均匀,加入步骤(1)得到的复合透皮吸收促进剂,混匀,得到具有保湿抗衰老功效的护肤组合物。
实施例3
本实施例提供一种具有保湿抗衰老功效的护肤组合物。
原料组成(重量份):制备例3制得的多糖酶解发酵产物10份、制备例3 制得的多肽酶解产物5份、复合透皮吸收促进剂0.7份、烟酰胺0.5份、透明质酸钠1份、去离子水35份。
复合透皮吸收促进剂由中药复合透皮吸收促进剂和制备例6制得的新型透皮吸收促进剂按照质量比为5:1混合制备而成;中药复合透皮吸收促进剂为杜香萜烯和薄荷油按照质量比为4:2的复配混合物。
制备方法包括以下步骤:
(1)将杜香萜烯、薄荷油和新型透皮吸收促进剂混合均匀;
(2)将多糖酶解发酵产物、多肽酶解产物溶于去离子水中,加入烟酰胺、透明质酸钠,搅拌混合均匀,加入步骤(1)得到的复合透皮吸收促进剂,混匀,得到具有保湿抗衰老功效的护肤组合物。
对比例1
与实施例3相比,多糖酶解发酵产物由对比制备例1制得,其他条件均不改变。
对比例2
与实施例3相比,多糖酶解发酵产物由对比制备例2制得,其他条件均不改变。
对比例3
与实施例3相比,多糖酶解发酵产物由对比制备例3制得,其他条件均不改变。
对比例4
与实施例3相比,多糖酶解发酵产物由对比制备例4制得,其他条件均不改变。
对比例5
与实施例3相比,多糖酶解发酵产物由对比制备例5制得,其他条件均不改变。
对比例6
与实施例3相比,多肽酶解产物由对比制备例6制得,其他条件均不改变。
对比例7
与实施例3相比,多肽酶解产物由对比制备例7制得,其他条件均不改变。
对比例8
与实施例3相比,未添加多糖酶解发酵产物,其他条件均不改变。
原料组成(重量份):制备例3制得的多肽酶解产物15份、复合透皮吸收促进剂0.7份、烟酰胺0.5份、透明质酸钠1份、去离子水35份。
对比例9
与实施例3相比,未添加多肽酶解产物,其他条件均不改变。
原料组成(重量份):制备例3制得的多糖酶解发酵产物15份、复合透皮吸收促进剂0.7份、烟酰胺0.5份、透明质酸钠1份、去离子水35份。
测试例2
将本发明实施例1-3和对比例1-9制得的具有保湿抗衰老功效的护肤组合物进行抗氧化活性测定,结果见表2。
将实施例1-3和对比例1-9制得的具有保湿抗衰老功效的护肤组合物用去离子水稀释100倍,配制成受试溶液;
取15支具塞试管,分别加入0.1ml的10mM的FeSO4和0.1mL的10mM的EDTA 溶液,然后加入0.2ml的20mM的a-脱氧核糖溶液DR,然后分别加入0.2mL实施例1-3和对比例1-9制得的具有保湿抗衰老功效的护肤组合物的受试溶液,并用PBS补充至1.8ml,最后加入0.2ml的10mM的过氧化氢溶液,37度水浴1h,以苯甲酸(1mg/ml)和抗坏血酸(1mg/ml)为对照组,并设置一种空白对照组;水浴加热结束后,加入1ml 10wt%的三氯乙酸溶液终止反应,在加入1ml 1wt%的硫代巴比妥酸溶液,混匀后沸水浴中加热10min,冷却后离心,取上清液,于532nm处测定吸光度。各组试样的配制见表1。
表1
羟基自由基的清除率%=(A对照-A样品)/A对照*100%
表2
由上表可知,本发明实施例1-3制得的具有保湿抗衰老功效的护肤组合物具有良好的羟自由基清除能力,具有良好的抗氧化能力和抗衰老能力。
实施例4
本实施例提供一种保湿抗衰老精华液,由以下原料按照重量份制备而成:实施例1制得的具有保湿抗衰老功效的护肤组合物20份、芍药提取物2份、1,3- 丁二醇2份、甘油3份、苯氧乙醇0.01份、柠檬酸0.5份、抗坏血酸钠1份、卡波姆1.5份、去离子水80份。
实施例5
本实施例提供一种保湿抗衰老精华液,由以下原料按照重量份制备而成:实施例2制得的具有保湿抗衰老功效的护肤组合物30份、芍药提取物4份、1,3- 丁二醇4份、甘油5份、苯氧乙醇0.1份、柠檬酸1份、抗坏血酸钠3份、卡波姆2份、去离子水120份。
实施例6
本实施例提供一种保湿抗衰老精华液,由以下原料按照重量份制备而成:实施例3制得的具有保湿抗衰老功效的护肤组合物25份、芍药提取物3份、1,3- 丁二醇3份、甘油4份、苯氧乙醇0.05份、柠檬酸0.7份、抗坏血酸钠2份、卡波姆1.7份、去离子水100份。
对比例10
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物由对比例1制得,其他条件均不改变。
对比例11
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物由对比例2制得,其他条件均不改变。
对比例12
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物由对比例3制得,其他条件均不改变。
对比例13
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物由对比例4制得,其他条件均不改变。
对比例14
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物由对比例5制得,其他条件均不改变。
对比例15
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物由对比例6制得,其他条件均不改变。
对比例16
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物由对比例7制得的,其他条件均不改变。
对比例17
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物由对比例8制得,其他条件均不改变。
对比例18
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物由对比例9制得,其他条件均不改变。
对比例19
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物中的中药复合透皮吸收促进剂为单一的杜香萜烯,其他条件均不改变。
对比例20
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物中的中药复合透皮吸收促进剂为单一的薄荷油,其他条件均不改变。
对比例21
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物中的复合透皮吸收促进剂由单一的新型透皮吸收促进剂替代,其他条件均不改变。
对比例22
与实施例3相比,具有保湿抗衰老功效的护肤组合物中的复合透皮吸收促进剂由中药复合透皮吸收促进剂替代,其他条件均不改变。
测试例3皮肤保湿性试验
按照自愿原则选取90名年龄在20-50岁的女性志愿者,随机分为18组,每组5人,分别为实施例4-6、对比例10-22组和对照组,试验期间不涂抹任何与试验无关的药物或者化妆品,受试者两侧脸部使用样品,样品组使用实施例 4-6和对比例10-22制得的保湿抗衰老精华液,对照组使用不含有具有保湿抗衰老功效的护肤组合物的精华液(由以下原料按照重量份制备而成:1,3-丁二醇2 份、甘油3份、苯氧乙醇0.01份、柠檬酸0.5份、抗坏血酸钠1份、卡波姆1.5 份、去离子水80份)。早晚各一次,共15天,测试前,受试者用洁净水清洗测试部位,擦干后暴露测试部位,在22±2℃,相对湿度为45±5%环境下静坐20min,使用CM825皮肤水分测试探头测试试验部位的角质层含水量,取5次平均值,在试验开始前进行角质层含水量,在第15天使用样品后1h,测试测试受试者的角质层含水量,计算皮肤含水量变化率(%)。
皮肤含水量变化率(%)=(使用后含水量-使用前含水量)/使用前含水量×100%
结果见表3。
表3
组别 | 皮肤含水量变化率(%) |
实施例4 | 27 |
实施例5 | 29 |
实施例6 | 30 |
对比例10 | 21 |
对比例11 | 24 |
对比例12 | 23 |
对比例13 | 20 |
对比例14 | 22 |
对比例15 | 21 |
对比例16 | 23 |
对比例17 | 18 |
对比例18 | 19 |
对比例19 | 16 |
对比例20 | 15 |
对比例21 | 21 |
对比例22 | 18 |
对照组 | 2.2 |
由上表可知,本发明实施例4-6制得的保湿抗衰老精华液具有良好的皮肤保湿效果。
测试例4皮肤弹性试验
使用皮肤弹性测试仪MPA580和ReviscometerRV600探头对90名年龄在 20-45岁的志愿者,随机分为18组,每组5人,分别为实施例4-6、对比例10-22 组和对照组,受试部位面部进行试验,检测皮肤弹性和粗糙度参数,试验期间不涂抹任何与试验无关的药物或者化妆品,受试者两侧脸部使用样品,样品组使用实施例4-6和对比例10-22制得的保湿抗衰老精华液,对照组使用不含有具有保湿抗衰老功效的护肤组合物的精华液(由以下原料按照重量份制备而成: 1,3-丁二醇2份、甘油3份、苯氧乙醇0.01份、柠檬酸0.5份、抗坏血酸钠1份、卡波姆1.5份、去离子水80份)。早晚各一次,共2周。在试验开始前进行皮肤弹性和粗糙度,在第14天使用样品后1h,测试测试受试者的皮肤弹性和粗糙度,计算皮肤弹性和粗糙度变化率(%)。
皮肤弹性变化率(%)=(使用后皮肤弹性-使用前皮肤弹性)/使用前皮肤弹性×100%
粗糙度变化率(%)=(使用前粗糙度-使用后粗糙度)/使用前粗糙度×100%
结果见表4。
表4
由上表可知,本发明实施例4-6制得的保湿抗衰老精华液具有良好的光滑皮肤,提高皮肤弹性的效果。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
2.根据权利要求1所述具有保湿抗衰老功效的护肤组合物,其特征在于,由以下原料按重量份制备而成:多糖酶解发酵产物5-12份、多肽酶解产物3-7份、复合透皮吸收促进剂0.5-1份、烟酰胺0.2-1份、透明质酸钠0.5-1.2份、去离子水20-50份。
3.根据权利要求1所述具有保湿抗衰老功效的护肤组合物,其特征在于,所述多糖酶解发酵产物由以下方法制备而成:
S1.将葛仙米干粉、马尾藻干粉分别加水浸泡,球磨,加入纤维素酶和淀粉酶,加热至35-38℃反应3-5h,然后加热至沸腾提取2-4h,冷却至室温,过滤,葛仙米滤渣留用,滤液加入无水乙醇,静置,过滤,干燥,分别得到葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物,混合均匀,得到藻多糖酶解产物;
S2.将步骤S1制得的藻多糖酶解产物加入水中,加入植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液,发酵培养,过滤,浓缩,冷冻干燥,得到多糖酶解发酵产物。
4.根据权利要求3所述具有保湿抗衰老功效的护肤组合物,其特征在于,所述葛仙米干粉和水的质量比为3-5:10,所述马尾藻干粉和水的质量比为3-5:10;所述球磨时间为0.5-1h,所述纤维素酶和淀粉酶的质量比为3-5:1;加入量为体系总质量的3-5wt%;所述葛仙米多糖酶解产物和马尾藻多糖酶解产物的质量比为5-10:3-7;所述藻多糖酶解产物和水的质量比为4-6:10;所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液的含菌量为107-109cfu/mL;所述植物乳杆菌和产朊假丝酵母的菌种种子液的接种量分别为2-4%和1-3wt%;所述发酵培养条件为35-38℃,微缺氧条件下,培养48-72h;所述微缺氧条件为氧气含量为5-10%,二氧化碳含量为5-8%,余量为氮气,其中%为体积百分比。
5.根据权利要求1所述具有保湿抗衰老功效的护肤组合物,其特征在于,所述多肽酶解产物由以下方法制备而成:
T1.将权利要求3中步骤S1得到的葛仙米滤渣和螺旋藻干粉混合均匀,加水浸泡,球磨,得到浆料,依次加入水、稀碱溶液、稀酸溶液、醇溶液中提取,过滤,滤渣进入下一种溶液中提取,滤液有机膜浓缩,冷冻干燥,得到蛋白复合粉;
T2.将步骤T1制得的蛋白复合粉加入水中,加入木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶,酶解,灭酶,过滤,冷冻干燥,得到多肽酶解产物。
6.根据权利要求5所述具有保湿抗衰老功效的护肤组合物,其特征在于,所述葛仙米滤渣和螺旋藻干粉的质量比为5-10:3;所述球磨时间为1-2h,所述稀碱溶液为浓度为3-5wt%的NaOH溶液或KOH溶液;所述稀酸溶液为浓度为2-4wt%的HCl溶液或硫酸溶液;所述醇溶液为浓度为5-10wt%的乙醇溶液;所述有机膜孔径为5000-10000D;所述蛋白复合粉和水的质量比为3-7:10;所述木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的质量比为3-5:7,添加量为体系总质量的2-5wt%;所述酶解条件为35-45℃,时间为3-5h。
7.根据权利要求1所述具有保湿抗衰老功效的护肤组合物,其特征在于,所述新型透皮吸收促进剂的制备方法如下:将己内酰胺溶于有机溶剂中,加入碱,加热至70-80℃,反应0.5-1h,加入三(2-氯乙基)胺,保温反应3-4h,冷却至室温,过滤,重结晶,洗涤,干燥,得到新型透皮吸收促进剂。
8.根据权利要求7所述具有保湿抗衰老功效的护肤组合物,其特征在于,所述中药复合透皮吸收促进剂为杜香萜烯和薄荷油按照质量比为3-5:2的复配混合物;所述中药复合透皮吸收促进剂和新型透皮吸收促进剂的质量比为3-7:1。
9.一种如权利要求1-8任一项所述具有保湿抗衰老功效的护肤组合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将复合透皮吸收促进剂中各组分混合均匀;
(2)将多糖酶解发酵产物、多肽酶解产物溶于去离子水中,加入烟酰胺、透明质酸钠,搅拌混合均匀,加入步骤(1)得到的复合透皮吸收促进剂,混匀,得到具有保湿抗衰老功效的护肤组合物。
10.一种保湿抗衰老精华液,其特征在于,由以下原料按照重量份制备而成:权利要求1-8任一项所述具有保湿抗衰老功效的护肤组合物20-30份、芍药提取物2-4份、1,3-丁二醇2-4份、甘油3-5份、苯氧乙醇0.01-0.1份、柠檬酸0.5-1份、抗坏血酸钠1-3份、卡波姆1.5-2份、去离子水80-120份。
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