CN114935616A - 一种化妆品禁用物质的检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及化妆品检测技术领域，尤其涉及一种化妆品禁用物质的检测方法。采用如下技术方案：通过优化检测过程的参数，将多种禁用物质的混合液进行逐级稀释并利用气相色谱‑串联质谱进行检测，以此各种禁用物质的标准曲线回归方程，再将待测试的样品制备成待测样液进行气相色谱‑串联质谱检测，实现多种禁用物质的同时检测。本发明的优点在于：采用创新的气相色谱‑串联质谱联用技术对化妆品中多种禁用物质进行检测，同时根据不同化妆品类型对提取方法进行创新，并针对所检测的多种禁用物质设置一定的升温程序和相关技术参数，实现高通量、多成分同时检测，有效提高检测效率，降低检测成本，缩短检测周期。

Description

一种化妆品禁用物质的检测方法
技术领域
本发明涉及化妆品检测技术领域，尤其涉及一种化妆品禁用物质的检测方法。
背景技术
日用香料是化妆品的重要组成部分，是化妆品中使用次数最多，使用范围最广的添加剂。费品科学委员会清单中包含2750种香料，但目前在化妆品中使用的香料超过3000种[1]，随着香料的广泛应用，其带来的安全问题成为重要的关注点。我国《化妆品卫生规范》中规定的75种禁用香料与欧盟化妆品法规中规定的相同。这些香料除了会引起人体过敏外，有些本身存在毒性，使用不当可致中毒，或使人体产生病理变化。如：香豆素类化合物中的呋喃香豆素具有光毒性，在长波紫外光照射下可能导致头晕、视力迷糊等症状；黄樟素可诱发肝脏肿瘤，引起生长抑制、组织细胞变性等；葵子麝香有神经毒性；硝基苯对皮肤有光毒性；二甲苯麝香可能存在致癌、致突变或生殖毒性的危险等。而有些香料本身可能不存在毒性，但对于特殊人群则会产生不良影响，如麝香因其活血散结、兴奋子宫的作用，成为孕妇禁忌。
然而，目前与这些规定的禁用日用香料相对应的标准检测方法却是严重滞后，现行有效的5个标准方法中检测成分最多的也只有5 种。检验方法缺失较为严重，远远不能满足化妆品配方研发、产品进出口、国内销售和公众消费的安全把关需要，给监管部门的监管工作带来执法难题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种化妆品禁用物质的检测方法，具体在于提供一种可同时对多种化妆品禁用物质进行准确检测的方法。
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：一种化妆品禁用香料的检测方法，包括如下步骤：
S01、样品处理；根据化妆品样品的种类精确取一定量的待检测化妆品样品，然后加入饱和氯化钠溶液和乙腈-乙酸乙酯提取液进行涡旋振荡，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测。测定条件如下：
a）色谱柱采用Anlient DB-17MS（30m×0.25mm×0.25 μm）。
b）载气为氦气，流速为1.0ml/min。
c）采用程序升温，升温步骤为，60℃保持1min，然后以8℃/min程序升温至175℃，再以1℃/min升温至180℃，再以15℃/min升温至270℃，保持5min。
d）传输线温度为280℃。
e）进样口温度为250℃。
f）进样方式为分流进样，分流比为20：1。
g）进样量为1μL。
h）电离方式为电子轰击电离。
i）电离能量为70eV。
j）扫描方式为多重反应监测模式（MRM）。
S02、绘制标准曲线；将各种禁用物质的标准储备液混合制成混合标准溶液，然后用空白基质滤液将混合标准溶液逐级稀释得到不同浓度的混合标准工作液，并按浓度由低到高上质谱仪进行检测，测定条件与步骤S01中的测定条件一致，分别对多种禁用物质以峰面积为横坐标，浓度为纵坐标作图，并求得各禁用物质的标准曲线回归方程。
S03、将步骤S01检测到的各物质的峰面积对应代入到步骤S02中得到的各物质的标准曲线回归方程中，从而得出各物质的浓度，并以此计算该物质在化妆品样品中的含量。
具体的，上述步骤S01中，对不同种类的化妆品样品进行处理时，具体分为：
a）香水：准确称取样品0.2g（精确到0.0001g）于10ml具塞比色管中，加入0.5mL饱和氯化溶液，用乙腈-乙酸乙酯提取液稀释到10ml，涡旋振荡混匀1min，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测。
b）液体类、油状、乳液类、膏霜类化妆品：准确称取样品1.0g（精确到0.0001g）于50ml离心管中，加入0.5mL饱和氯化溶液，准确加入10mL乙腈-乙酸乙酯提取液，涡旋振荡混匀5min，4000r/min离心10min，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测。
c）粉类、固状化妆品：准确称取约1.0g（精确到0.0001g）于50mL离心管中，加入0.5mL饱和氯化溶液，准确加入10mL乙腈-乙酸乙酯提取液，涡旋混匀1min，超声提取20min，4000r/min离心10min，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测。
具体的，上述步骤S02中各种禁用物质的标准储备液的制备方法为：准确称取一种禁用物质的标准品置于10ml容量瓶中，用乙酸乙酯或乙腈溶解并定容至刻度，摇匀后得到该物质的标准储备液，并以同样的方法制得其他禁用物质的标准储备液。
具体的，上述步骤S02中混合标准溶液的制备方法为：分别取一定量的各种禁用物质的标准储备液于10ml容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度后制得。
具体的，上述步骤S02中用空白基质溶液将混合标准溶液逐级稀释得到不同浓度的混合标准工作液的浓度范围为0.2mg/kg~10mg/kg。
步骤S01中使用质谱仪进行多重反应监测模式进行扫描时，每种物质至少选取两个特征离子对。
本发明的优点在于：采用创新的气相色谱-串联质谱联用技术对化妆品中多种禁用物质进行检测，同时根据不同化妆品类型对提取方法进行创新，并针对所检测的多种禁用物质设置一定的升温程序和相关技术参数，实现高通量、多成分同时检测，有效提高检测效率，降低检测成本，缩短检测周期。
具体实施方式
实施例1，本实施例以化妆品中38种禁用香料的检测为例，根据这38种禁用香料的一级质谱扫描谱图、子离子扫描图和MRM色谱图，确定各禁用香料的监测离子对（MRM）的质谱参数，用于对化妆品中禁用物质进行检测，具体包括如下步骤：
S01、样品处理；根据化妆品样品的种类精确取一定量的待检测化妆品样品，然后加入饱和氯化钠溶液和乙腈-乙酸乙酯提取液进行涡旋振荡，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测。测定条件如下：
a）色谱柱采用Anlient DB-17MS（30m×0.25mm×0.25 μm）。
b）载气为氦气，流速为1.0ml/min。
c）采用程序升温，升温步骤为，60℃保持1min，然后以8℃/min程序升温至175℃，再以1℃/min升温至180℃，再以15℃/min升温至270℃，保持5min。
d）传输线温度为280℃。
e）进样口温度为250℃。
f）进样方式为分流进样，分流比为20：1。
g）进样量为1μL。
h）电离方式为电子轰击电离。
i）电离能量为70eV。
j）扫描方式为多重反应监测模式（MRM）。
S02、绘制标准曲线；将各种禁用物质的标准储备液混合制成混合标准溶液，然后用空白基质滤液将混合标准溶液逐级稀释得到不同浓度的混合标准工作液，并按浓度由低到高上质谱仪进行检测，测定条件与步骤S01中的测定条件一致，分别对多种禁用物质以峰面积为横坐标，浓度为纵坐标作图，并求得各禁用物质的标准曲线回归方程。
S03、将步骤S01检测到的各物质的峰面积对应代入到步骤S02中得到的各物质的标准曲线回归方程中，从而得出各物质的浓度，并以此计算处该物质在化妆品样品中的含量。
其中，上述38种禁用香料的MRM质谱参数如下表所示：
Figure 346029DEST_PATH_IMAGE001
Figure 69134DEST_PATH_IMAGE002
具体的，上述步骤S01中，对不同种类的化妆品样品进行处理时，具体分为：
a）香水：准确称取样品0.2g（精确到0.0001g）于10ml具塞比色管中，加入0.5mL饱和氯化溶液，用乙腈-乙酸乙酯提取液稀释到10ml，涡旋振荡混匀1min，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测。
b）液体类、油状、乳液类、膏霜类化妆品：准确称取样品1.0g（精确到0.0001g）于50ml离心管中，加入0.5mL饱和氯化溶液，准确加入10mL乙腈-乙酸乙酯提取液，涡旋振荡混匀5min，4000r/min离心10min，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测。
c）粉类、固状化妆品：准确称取约1.0g（精确到0.0001g）于50mL离心管中，加入0.5mL饱和氯化溶液，准确加入10mL乙腈-乙酸乙酯提取液，涡旋混匀1min，超声提取20min，4000r/min离心10min，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测。
具体的，上述步骤S02中各种禁用物质的标准储备液的制备方法为：准确称取一种禁用物质的标准品置于10ml容量瓶中，用乙酸乙酯或乙腈溶解并定容至刻度，摇匀后得到该物质的标准储备液，并以同样的方法制得其他禁用物质的标准储备液。
具体的，上述步骤S02中混合标准溶液的制备方法为：分别取一定量的各种禁用物质的标准储备液于10ml容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度后制得。
具体的，上述步骤S02中用空白基质溶液将混合标准溶液逐级稀释得到不同浓度的混合标准工作液的浓度范围为0.2mg/kg~10mg/kg。
步骤S01中使用质谱仪进行多重反应监测模式进行扫描时，每种物质至少选取两个特征离子对，对于特征离子质量数比较小，同时相对基丰比较低的物质，则多选择一对离子对为定性离子，防止基质干扰造成影响，确保定性的准确。
当然，以上仅为本发明较佳实施方式，并非以此限定本发明的使用范围，故，凡是在本发明原理上做等效改变均应包含在本发明的保护范围内。

Claims (6)

1.一种化妆品禁用物质的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
S01、样品处理；根据化妆品样品的种类精确取一定量的待检测化妆品样品，然后加入饱和氯化钠溶液和乙腈-乙酸乙酯提取液进行涡旋振荡，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测；测定条件如下：
a）色谱柱采用Anlient DB-17MS（30m×0.25mm×0.25 μm）
b）载气为氦气，流速为1.0ml/min/
c）采用程序升温，升温步骤为，60℃保持1min，然后以8℃/min程序升温至175℃，再以1℃/min升温至180℃，再以15℃/min升温至270℃，保持5min
d）传输线温度为280℃
e）进样口温度为250℃
f）进样方式为分流进样，分流比为20：1
g）进样量为1μL
h）电离方式为电子轰击电离
i）电离能量为70eV
j）扫描方式为多重反应监测模式（MRM）
S02、绘制标准曲线；将各种禁用物质的标准储备液混合制成混合标准溶液，然后用空白基质滤液将混合标准溶液逐级稀释得到不同浓度的混合标准工作液，并按浓度由低到高上质谱仪进行检测，测定条件与步骤S01中的测定条件一致，分别对多种禁用物质以峰面积为横坐标，浓度为纵坐标作图，并求得各禁用物质的标准曲线回归方程；
S03、将步骤S01检测到的各物质的峰面积对应代入到步骤S02中得到的各物质的标准曲线回归方程中，从而得出各物质的浓度，并以此计算处该物质在化妆品样品中的含量。
2.根据权利要求1所述的一种化妆品禁用物质的检测方法，其特征在于：所述步骤S01中，对不同种类的化妆品样品进行处理时，具体分为：
a）香水：准确称取样品0.2g（精确到0.0001g）于10ml具塞比色管中，加入0.5mL饱和氯化溶液，用乙腈-乙酸乙酯提取液稀释到10ml，涡旋振荡混匀1min，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测；
b）液体类、油状、乳液类、膏霜类化妆品：准确称取样品1.0g（精确到0.0001g）于50ml离心管中，加入0.5mL饱和氯化溶液，准确加入10mL乙腈-乙酸乙酯提取液，涡旋振荡混匀5min，4000r/min离心10min，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测；
c）粉类、固状化妆品：准确称取约1.0g（精确到0.0001g）于50mL离心管中，加入0.5mL饱和氯化溶液，准确加入10mL乙腈-乙酸乙酯提取液，涡旋混匀1min，超声提取20min，4000r/min离心10min，取上清液过0.45μm滤膜后上质谱仪检测。
3.根据权利要求1所述的一种化妆品禁用物质的检测方法，其特征在于：所述步骤S02中各种禁用物质的标准储备液的制备方法为：准确称取一种禁用物质的标准品置于10ml容量瓶中，用乙酸乙酯或乙腈溶解并定容至刻度，摇匀后得到该物质的标准储备液，并以同样的方法制得其他禁用物质的标准储备液。
4.根据权利要求1所述的一种化妆品禁用物质的检测方法，其特征在于：所述步骤S02中混合标准溶液的制备方法为：分别取一定量的各种禁用物质的标准储备液于10ml容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度后制得。
5.根据权利要求1所述的一种化妆品禁用物质的检测方法，其特征在于：所述步骤S02中用空白基质溶液将混合标准溶液逐级稀释得到不同浓度的混合标准工作液的浓度范围为0.2mg/kg~10mg/kg。
6.根据权利要求1所述的一种化妆品禁用物质的检测方法，其特征在于：所述步骤S01中使用质谱仪进行多重反应监测模式进行扫描时，每种物质至少选取两个特征离子对。
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