CN111426775B - 一种电子烟液中维生素e和维生素e醋酸酯的同时测定方法 - Google Patents
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Abstract
一种电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,其特征在于:准确称取一定量的电子烟液,采用去离子水混匀电子烟液,然后使用含内标物质的有机溶液进行萃取,萃取完成静止分层后,取1mL上清液到2mL色谱瓶中,通过气相色谱‑质谱联用/选择离子监测模式(GC‑MS/SIM)同时定量检测烟液中的维生素E和维生素E醋酸酯的含量。本方法的优点是:所需较少的样品量和试剂用量,操作简单快捷,短时高效,分析灵敏度高,加标回收率高,精密度好,适用于大批量样品的分析,可实现电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定。
Description
技术领域
本发明涉及电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的定量分析方法,属于烟草化学的领域。
背景技术
电子烟是一种将电子烟液经雾化器雾化向呼吸系统传送烟碱和/或其他物质的产品。电子烟液是电子烟的重要组成部分,它含有烟碱/烟草提取物、丙二醇或丙三醇溶剂以及少量的香精香料等添加剂,这些组成配制出不同的口味或功能的样品以迎合消费者的需求及爱好。近些年,电子烟作为一种新型烟草制品在国内外的销售量剧增,各国烟草行业也纷纷把电子烟作为重要发展方向之一,对电子烟液组成含量的分析测定对研究“吸烟与健康”问题具有重要意义。
维生素E,又名生育酚,是一类脂溶性维生素,是最主要的抗氧化剂之一,多溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中,不溶于去离子水,对热、酸稳定,对碱不稳定。它具有调节人体荷尔蒙分泌,抗氧化保护机体细胞免受自由基的毒害,延缓衰老,预防器质性衰退疾病、增进免疫系统和神经系统的功能,促进细胞生长和分裂等多种功效,是人类一种必不可少的维生素。
维生素 E乙酸酯是维生素E的一种衍生物,它的稳定性和生理活性由于维生素E,通常作为维生素E替代品而广泛用于医药、食品和化妆品等方面。维生素E醋酸酯是人类生命活动中不可缺少的维生素,具有显著的抗氧化、消除体内游离基、预防癌症发生、提高机体免疫力等功能。
鉴于维生素E和维生素 E乙酸酯对人体的功效,一些功能性电子烟液中通常添加维生素E和维生素 E乙酸酯来满足消费者的需求。2019年美国疾控中心(CDC)报道功能性型电子烟液产品中维生素E醋酸酯以雾化形式吸入,可能是引起电子烟消费者“白肺病”的主要原因,其添加剂量并没有确切的限值,这些情况都将对电子烟液产品带来安全隐患。
国内外关于维生素E分析方法的报道很多,主要集中在食品、保健品、化妆品等行业的检测中。维生素E的定性定量分析方法主要包括有:高效液相色谱法(李翔,化妆品中维生素E含量测定方法的比较研究[ J] .色谱, 2004, 22 ( 1) :96 -96)、分光光度法(吴生齐, 紫外分光光度法测定维生素E胶丸中维生素E的含量[ J] .宁夏医学杂志, 2004, 26( 11) :737 -737)、荧光测定法(刘悍,天然维生素E的提取工艺与检测技术[ J] .化工时刊, 2008, 22 ( 11) : 53 -55)、毛细管气相色谱法(陈开波,烟草中α-生育酚的毛细管气相色谱测定.烟草科技,2005, (8):21-23])、气相色谱-质谱联用法(沈伟健,气相色谱⁃质谱法测定植物油中8种维生素E及其在芝麻油真伪鉴别方面的应用. 色谱,2020, 38(5):595-599)等。由于GC-MSD仪器较为普遍,方法使用的可操作性强,质谱的选择离子监测模式减低了基质干扰,提高了灵敏度,对样品没有假阳性的判定,因此是测定电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的首选方法。
目前未见电子烟液中维生素E醋酸酯的分析方法研究报道。因此,建立电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的测定方法十分必要。本发明建立一种同时分析电子烟液中维生素E醋酸酯的GC-MSD分析方法,为把握电子烟液中维生素E醋酸酯的含量去离子水平提供检测手段。
发明内容
本发明的目的正是基于上述现有技术状况而提供了一种快速简便、同时测定电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的气相色谱-质谱联用分析方法。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的:一种电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,具体包括以下步骤:
(1)样品制备:准确称取电子烟液0.5g~1.0 g于三角瓶中,加入2mL~5mL去离子水混合均匀,然后加入含内标物质的萃取溶液振荡萃取10 min~30 min,然后静置10 min,取1mL上清液到2mL色谱瓶中,采用气相色谱-质谱联用/选择离子监测模式(GC-MS/SIM)检测萃取液中维生素E和维生素E醋酸酯,采用内标法定量分析。
气相色谱-质谱联用仪条件:
气相色谱仪(GC):色谱柱:DB-1MS毛细管柱,长10 m,内径0.1mm,膜厚0.1μm;载气:氦气,载气流速:1.2 mL/min;进样口温度:280℃;进样量2µl,分流进样,分流比10:1;
程序升温:初温120℃,以50℃/min速率升至290℃,保持5min,总运行时间8.4min;
质谱检测器(MSD):溶剂延迟:1min;电离电压:70ev;离子源温度:230℃;传输线温度:280℃;扫描模式:全扫描与选择离子监测同时进行,全扫描监测模式,扫描范围:35 amu~500 amu;选择离子监测模式(SIM),维生素E的选择离子为165、57,维生素E醋酸酯的选择离子为165、472,正十七烷的选择离子为57、71。
本发明所述方法中维生素E和维生素E醋酸酯的内标物质为正十七烷。
本发明所述方法的萃取溶液可使用正己烷或甲基叔丁基醚,萃取剂的用量为2mL~5 mL。
本发明所述方法中振荡方式为超声振荡、机械振荡或涡旋振荡,其中振荡时间为10 min~30 min;超声振荡功率为40—70KHz,优选40KHZ。机械振荡转速为150—200 r/min,优选170r/min。涡旋频率为1000—3000 r/min,优选2000 r/min。
本发明相比现有技术具有以下技术优势:
1、本发明首次提供了一种电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯含量的气相色谱-质谱联用-选择离子监测的测定方法,实现了电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯含量的快速测定。
2、采用内标法进行定量,相对于外标法,消除了操作条件对分析结果的影响,提高了测定结果的准确性。本发明中选定的内标物是正十七烷烃,它在萃取溶液中的浓度为5μg/mL。
3、维生素E和维生素E醋酸酯属于弱极性的化合物,并且沸点较高,适宜选择弱极性或非极性的色谱柱进行分析。本发明选择了非极性的色谱柱DB-1MS来进行分析目标物具有良好的分离效果。由于待测目标物维生素E和维生素E醋酸酯分子量较大,沸点较高,为缩短待测物在色谱柱中的保留时间,本发明选择了长10 m,内径0.1mm,膜厚0.1μm的色谱柱,在实现较好分离度的前提下,短柱薄液膜色谱柱能够使待测目标物的保留时间较短,降低了柱流失,同时0.1小口径色谱柱进行质谱分析,满足进样量的同时,采用常规的载气流速就能够获得较好的质谱真空度。
4、本发明使用的萃取溶剂为正己烷或甲基叔丁基醚。电子烟液中主要的成分为溶于去离子水的丙二醇和丙三醇,因此,本发明中采用去离子水稀释电子烟液,再使用有机溶剂提取,能将易溶于水的丙二醇和丙三醇保留在水中,脂溶性的维生素E和维生素E醋酸酯提取于正己烷或甲基叔丁醚中,有效去除了高含量的丙二醇和丙三醇对目标物的干扰。而且由于正己烷或甲基叔丁基醚密度小于水,可以在萃取完成后直接取上层有机相溶液进行分析,无需再加入无水硫酸钠进行干燥,节省了分析步骤、分析时间和分析成本。
5、本发明样品前处理过程简单,仅需用去离子水将少量的试样稀释,然后使用萃取溶液进行萃取,萃取完成静置10min,取有机相层溶液进样分析。维生素E和维生素E醋酸酯的灵敏度高,检出限低,分别是 0.03μg/mL、0.04μg/mL,维生素E和维生素E醋酸酯的日内精密度分别是1.0%、1.6%,日间精密度分别是1.5%、1.8%,回收率分别在93.6%~97.1%、92.1%~96.0%之间,该方法精密度较好,回收率较高,测定结果稳定,前处理简单,适用于大批量样品的快速定量检测。
附图说明
图1:维生素E和维生素E醋酸酯的标准工作溶液质谱图。
具体实施方式
本发明通过以下具体实例作进一步描述,但并不限制本发明。以下对应用本发明对电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的气相色谱质谱检测器选择离子监测模式分析做进一步的实例说明:
含量测定实例:
(1)样品前处理:
准确称取电子烟液0.2g于三角瓶中,加入2 mL去离子水混合均匀,再加入5 mL含内标物质正十七烷(浓度为5μg/mL)的甲基叔丁基醚萃取溶液超声振荡10min,然后静置10min后取上层清液于色谱瓶中,进GC-MSD分析。采用气相色谱-质谱联用/选择离子监测模式(GC-MS/SIM)检测烟液中的维生素E和维生素E醋酸酯,采用内标法定量分析。
(2)气相色谱-质谱联用仪条件:
气相色谱仪(GC):色谱柱:DB-1MS毛细管柱,长10 m,内径0.1mm,膜厚0.1μm;载气:氦气,载气流速:1.2 mL/min;进样口温度:280℃;进样量1µl,分流进样,分流比10:1;
程序升温:初温120℃,以50℃/min速率升至290℃,保持5min,总运行时间8.4min;
检测器:质谱检测器;溶剂延迟:1min;电离电压:70ev;离子源温度:230℃;传输线温度:280℃;扫描模式:全扫描与选择离子监测同时进行,全扫描监测模式,扫描范围:35amu~500 amu;选择离子监测模式(SIM),维生素E的选择离子为165、430,维生素E醋酸酯的选择离子为165、472,内标物正十七烷的选择离子为57、71。
(3)工作曲线与检测限的测定:
分别配制含有维生素E和维生素E醋酸酯的系列标准溶液,其中的内标物正十七烷的浓度为5μg/mL,并用各个目标化合物定量离子色谱峰的面积与内标化合物定量离子色谱峰的面积比值与化合物浓度与内标浓度比值进行线性回归分析,得到线性回归方程及其相关参数。在线性浓度范围内,2种目标物的工作曲线线性良好,适合定量分析。维生素E和维生素E醋酸酯的检出限分别是 0.03μg/mL、0.04μg/mL(见表1),完全能满足电子烟液维生素E和维生素E醋酸酯的检测要求。
表1 维生素E和维生素E醋酸酯标样的线性回归方程及检出限
化合物 | 浓度范围(μg/mL) | 线性回归方程 | R<sup>2</sup> | 检出限(μg/mL) | 定量限(μg/mL) |
维生素E | 0.2-10 | y=0.847x-0.045 | 0.9996 | 0.03 | 0.09 |
维生素E醋酸酯 | 0.2-10 | y=0.912x-0.0192 | 0.9993 | 0.04 | 0.13 |
(4)回收率与精密度:
选取一种电子烟液样品,并在样品中添加维生素E和维生素E醋酸酯进行方法日内及日间精密度实验(由于大部分电子烟液中没有维生素E和维生素E醋酸酯,所以添加维生素E和维生素E醋酸酯进行方法精密度实验)。在同一天中,对所选样品一天内进行5平行实验以考察方法日内精密度(见表2 ),对所选样品连续五天进行实验以考察方法日间精密度(见表3 )。结果表明,维生素E和维生素E醋酸酯的日内精密度分别是1.0%、1.6%,日间精密度分别是1.5%、1.8%,回收率分别在93.6%~97.1%、92.1%~96.0%之间,表明该方法精密度较好,回收率较高,测定结果稳定,适合定量分析。
表2 样品测定结果日内精密度(n=5) (单位:μg /g)
日内精密度 | 维生素E | 维生素E醋酸酯 |
第1次 | 99.1 | 98.5 |
第2次 | 97.3 | 96.8 |
第3次 | 96.9 | 96.1 |
第4次 | 97.4 | 94.3 |
第5次 | 96.8 | 95.9 |
平均值 | 97.5 | 96.3 |
RSD(%) | 1.0 | 1.6 |
表3 样品测定结果日间精密度(n=5) (单位:μg /g)
日间精密度 | 维生素E | 维生素E醋酸酯 |
第1天 | 97.5 | 96.3 |
第2天 | 96.2 | 95.1 |
第3天 | 97.6 | 95.1 |
第4天 | 98.3 | 98.0 |
第5天 | 94.6 | 93.3 |
平均值 | 96.8 | 95.6 |
RSD(%) | 1.5 | 1.8 |
表4 方法加标回收率
化合物 | 低浓度(%) | 中浓度(%) | 高浓度(%) |
维生素E | 93.6 | 94.5 | 97.1 |
维生素E醋酸酯 | 92.1 | 96.6 | 96.0 |
实施示例
采用具体实施方式中进一步说明的方法对样品进行检测,检测的条件和具体实施方式中相同。对30个国产商品电子烟液进行维生素E和维生素E醋酸酯的测定,没有检出维生素E和维生素E醋酸酯,对50个国外商品电子烟液进行维生素E和维生素E醋酸酯的测定,有1个烟液样品检出维生素E和维生素E醋酸酯,含量分别是34.2μg /g、41.9μg /g,1个样品检出维生素E醋酸酯,含量是20.1μg /g。
Claims (10)
1.一种电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,其特征在于:具体包括以下步骤:
(1)样品制备:准确称取电子烟液0.5g~1.0 g于三角瓶中,加入2mL~5 mL去离子水混合均匀,再加入含内标物质正十七烷的萃取溶液后振荡萃取10 min~30 min,然后静置10min,取1mL上清液到2mL色谱瓶中,采用气相色谱-质谱联用/选择离子监测模式检测萃取液中维生素E和维生素E醋酸酯的含量,所述萃取溶液为正己烷或甲基叔丁基醚;
(2)样品分析
气相色谱仪:色谱柱:DB-1MS毛细管柱, 长10 m,内径0.1 mm,膜厚0.1 μm;载气:氦气,载气流速:1.2 mL/min;进样口温度:280℃;进样量1µl,分流进样,分流比10:1;程序升温:初温120℃,以50℃/min速率升至290℃,保持5min,总运行时间8.4 min;
质谱检测器:溶剂延迟:1min;电离电压:70ev;离子源温度:230℃;传输线温度:280℃;扫描模式:全扫描与选择离子监测同时进行,全扫描监测模式,扫描范围:35 amu~500amu;选择离子监测模式,维生素E的选择离子为165、430,维生素E醋酸酯的选择离子为165、472,正十七烷的选择离子为57、71。
2.根据权利要求1所述的电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,其特征在于:所述萃取溶液的用量为2 mL~5 mL。
3.根据权利要求1所述的电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,其特征在于:所述内标物质在萃取溶液中的浓度为5μg/mL。
4.根据权利要求1所述的电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,其特征在于:所述振荡为超声振荡、机械振荡或涡旋振荡,振荡时间为10 min~30 min。
5.根据权利要求1或4所述的电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,其特征在于:所述振荡为超声振荡,超声振荡功率为40—70KHZ。
6.根据权利要求1或4所述的电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,其特征在于:所述振荡为机械振荡,振荡转速为150—200 r/min。
7.根据权利要求1或4所述的电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,其特征在于:所述振荡为涡旋振荡,涡旋频率为1000—3000 r/min。
8.根据权利要求5所述的电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,其特征在于:所述超声振荡功率为40KHZ。
9.根据权利要求6所述的电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,其特征在于:所述振荡转速为170r/min。
10.根据权利要求7所述的电子烟液中维生素E和维生素E醋酸酯的同时测定方法,其特征在于:所述涡旋频率为2000 r/min。
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