CN114752510A - 一种异常威克汉姆酵母及其在米酒中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种异常威克汉姆酵母及其在米酒中的应用,一种异常威克汉姆酵母FBKL2.00K8,Wickerhamomyces anomalus FBKL2.00K8,其于2020年6月30日保藏于武汉市中国典型培养物保藏中心,保藏号为:CCTCC NO:M2020249;其用于制作风味米酒的方法,包括如下操作步骤:备料;糖化;酵母种子液培养;发酵;后发酵;过滤、澄清:发酵结束,过滤掉酒糟,得到米酒成品。所得米酒风味更佳、香气成分变多,还因其高级醇含量低,饮后也不易醉,不易头疼。
Description
技术领域:
本发明涉及一种异常威克汉姆酵母及其在米酒中的应用。
背景技术:
近年来,随着人们健康保健意识的加强,人们对食品的营养保健作用也越来越重视。适度饮酒能促进体内血液循环,增进食欲,缓解压力,但是有的人又接受不了高度的白酒,所以有更多的消费者倾向于选择营养丰富且酒精度低的发酵酒。
米酒,又叫酒酿,甜酒,旧时叫“醴”。用糯米酿制,是我国传统的发酵酒。通常用蒸熟的糯米拌上糖化发酵剂发酵而成的。传统方法酿造的米酒工艺简单,口味鲜醇甜美,具有浓郁的米酒风格,在古时是很多人日常引用的饮品。但在当今社会,各行各业都在飞速发展,米酒虽然有发酵酒市场,但由于其风味陈旧老派、口感单一、色泽黯淡,消费人群日益萎缩,缺乏市场竞争力。
日本清酒是借鉴中国黄酒的酿造法而发展起来的日本国酒。主要工艺特点是要求大米外皮剥去愈彻底愈好,糙米出白率为70%,目的是除去米粒表面的有害杂菌与影响酒风味的米糠,因为米糠含有较多的脂肪、蛋白质、纤维等。制好的清酒入口清爽,口味清淡,酒液呈淡黄色过无色,清亮透明,受到广大消费者的欢迎。
异常威克汉姆酵母是Wickerhamomyces属的微生物,为化能异养型;嗜温;趋酸;兼性厌氧。是产酯、生香酵母,具体用途为酿造曲酒。
从自然发酵酒醅中分离得到异常微克汉姆酵母菌株,通过形态学、生理生化试验和分子生物学鉴定,确定其拥有强的产苯乙醇、异戊醇、乙酸乙酯等的能力,它们能带来清甜的玫瑰花香、粉香、蜂蜜样香气,类似苹果样的果香,并带有可和威士忌样的香韵。应用异常微克汉姆酵母不仅能提高出酒率,而且会给成品酒带来好的口味。
发明内容:
本申请提供了一种异常威克汉姆酵母FBKL2.00K8,Wickerhamomyces anomalusFBKL2.00K8,其于2020年6月30日保藏于武汉市中国典型培养物保藏中心,保藏号为:CCTCCNO:M2020249。
其中异常威克汉姆酵母FBKL2.00K8,Wickerhamomyces anomalus,FBKL2.00K8;异常威克汉姆酵母FBKL2.00K8分离自贵州茅台镇酱香型白酒生产企业生产用大曲,其分离培养方法及菌落特征如下:
(1)对异常威克汉姆酵母FBKL2.00K8的分离
从贵州茅台镇酱香型白酒生产企业生产用大曲中,取粉碎的大曲样品10g,加入装有90ml无菌生理盐水和玻璃珠的三角瓶中,25-30℃摇床振荡30min,混匀,在超净工作台中吸取1mL菌悬液注入装有9mL无菌生理盐水的试管中,进行梯度稀释,取10-1,10-2,10-3,10-4,10-5和10-6梯度分别进行倾注和涂布平板,25-30℃倒置培养48h后计数,并选择具有典型酵母菌落形态的单菌落,接种划线到麦芽汁琼脂培养基上,重复3~4次,直至获得纯种菌种,然后将各菌株分别编号,最后斜面划线低温保藏;
(2)培养
a鉴定培养基:
麦芽汁琼脂培养基,麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,琼脂15/L,pH5.8-6.2,115℃灭菌20min;
b保藏培养基:
麦芽汁琼脂培养基,麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,琼脂15g/L,pH5.8-6.2,115℃灭菌20min;
(3)菌种的保种和传代:
a菌种保藏培养基:
麦芽汁琼脂培养基:麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,琼脂15g/L,pH5.8-6.2,115℃灭菌20min;
b保存方法
甘油菌种保存法:将酵母接种于麦芽汁琼脂斜面培养基上,置恒温箱25-30℃培养2d后,接种至麦芽汁液体培养基培养,菌液培养48h后用25%甘油超低温保藏,保藏温度-80℃,两年需定期移植,检查酵母活力及是否染菌;
(4)菌种的生态特征:
该菌形成的菌落在麦芽汁培养基上,25-30℃培养48h,菌落直径5~8mm,菌落圆形,颜色乳白色,不透明,菌落边缘规整,菌落易挑起。显微镜镜检细胞为圆形,细胞长2.93~3.32μm;
(5)菌种的培养特性
培养温度25℃~30℃;
培养pH 4.5~6.8,最佳范围为5.2~5.8。
一种利用异常威克汉姆酵母FBKL2.00K8制作风味米酒的方法,包括如下操作步骤:
(1)备料:选取颗粒饱满的糯米淘洗干净后,备用;
(2)糖化:糯米浸泡8-12h后先蒸煮20-30min,倒出后适量加水,复蒸20-30min后出锅,摊凉至26-31℃,加入适量甜酒曲,装入发酵罐中控制环境温度26-31℃糖化发酵40-60h,备用;
(3)酵母种子液培养:将异常微克汉姆酵母接种到麦芽汁液体培养基中,保温温度26-31℃,150r/min,培养48h,备用;
(4)发酵:在糖化结束后,加入适量纯净水或矿泉水,同时按照原料质量0.5%的接种量接种酵母种子液,搅拌均匀后,在24-31℃下发酵,发酵3天;
(5)后发酵:在15℃环境下继续发酵7-10d;
(6)过滤、澄清:发酵结束,过滤掉酒糟,得到米酒成品。
本发明与现有技术相比,具有明显的有益效果,从以上技术方案可知:本发明主要原料是精白之后的糯米、异常微克汉姆酵母、纯净水。糯米经糖化和发酵两个过程。而异常微克汉姆酵母中含有的大量的乙酸乙酯、苯乙醇等风味物质在发酵时能给发酵液提供特有的花果香,能提升酒的品质。且它的高级醇含量较低,不会损害酒体的口味。本发明最大的优点是所得米酒风味更佳、香气成分变多。还因其高级醇含量低,饮后也不易醉,不易头疼,是青年人聚会的优选的酒精饮品。而且可以由工厂来进行批量生产。
附图说明
图1为本发明异常微克汉姆酵母FBKL2.00K8的菌落形态图;
图2为本发明酿酒酵母FBKL2.0217荧光倒置显微镜检测图;
图3为本发明酿酒酵母FBKL2.0217菌落平板图。
具体实施方式
实施例1
异常威克汉姆酵母FBKL2.00K8分离培养方法及菌落特征如下:
(1)对异常威克汉姆酵母FBKL2.00K8的分离
从贵州茅台镇酱香型白酒生产企业生产用大曲中,取粉碎的大曲样品10g,加入装有90ml无菌生理盐水和玻璃珠的三角瓶中,28℃摇床振荡30min,混匀,在超净工作台中吸取1mL菌悬液注入装有9mL无菌生理盐水的试管中,进行梯度稀释,取10-1,10-2,10-3,10-4,10-5和10-6梯度分别进行倾注和涂布平板,28℃倒置培养48h后计数,并选择具有典型酵母菌落形态的单菌落,接种划线到麦芽汁琼脂培养基上,重复3~4次,直至获得纯种菌种,然后将各菌株分别编号,最后斜面划线低温保藏;
(2)培养
a鉴定培养基:
麦芽汁琼脂培养基,麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,琼脂15/L,pH5.8-6.2,115℃灭菌20min;
b保藏培养基:
麦芽汁琼脂培养基,麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,琼脂15g/L,pH5.8-6.2,115℃灭菌20min;
(3)菌种的保种和传代:
a菌种保藏培养基:
麦芽汁琼脂培养基:麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,琼脂15g/L,pH5.8-6.2,115℃灭菌20min;
b保存方法
甘油菌种保存法:将酵母接种于麦芽汁琼脂斜面培养基上,置恒温箱28℃培养2d后,接种至麦芽汁液体培养基培养,菌液培养48h后用25%甘油超低温保藏,保藏温度-80℃,两年需定期移植,检查酵母活力及是否染菌;
(4)菌种的生态特征:
该菌形成的菌落在麦芽汁培养基上,28℃培养48h,菌落直径5~8mm,菌落圆形,颜色乳白色,不透明,菌落边缘规整,菌落易挑起。显微镜镜检细胞为圆形,细胞长2.93~3.32μm;
(5)菌种的培养特性
培养温度25℃~30℃,最适温度28℃~30℃;
培养pH 4.5~6.8,最佳范围为5.2~5.8。
一种利用异常威克汉姆酵母FBKL2.00K8制作风味米酒的方法,包括如下操作步骤:
(1)备料:选取颗粒饱满,无霉变的糯米1430g,放入精米机精白至60%,淘洗干净后,备用;
(2)糖化:糯米浸泡8-12h后先蒸煮20min,倒出后加水400ml,复蒸20min后出锅;摊凉至30℃,加入东柳植物甜酒曲5g,装入发酵罐中控制环境温度28℃糖化发酵48h,备用;
(3)酵母种子液培养:酵母接种到麦芽汁液体培养基中,28℃,150r/min,培养48h,备用;
(4)发酵:在糖化结束后,加入2.5L的纯净水,同时按照原料质量0.5%的接种量接种酵母种子液,搅拌均匀后,在24℃下发酵,发酵3天;
(5)后发酵:在15℃环境下继续发酵10天;
(6)过滤、澄清:发酵结束,过滤掉酒糟,得到米酒成品。
(7)指标测定与感官评定:酒液澄清,呈透明色,清爽鲜甜,乙酸乙酯含量为206.5mg/L,葡萄糖含量为57.73g/L,理化性质符合GBT/GZSX017--2020《贵州米酒》发酵型理化要求。
实施例2:
一种异常微克汉姆酵母在米酒中的应用的制备方法,具体包括以下步骤:
(1)备料:选取颗粒饱满,无霉变的糯米1430g,放入精米机精白至70%,淘洗干净后,备用;
(2)糖化:糯米浸泡8-12h后先蒸煮20min,倒出后加水400ml,复蒸20min后出锅;摊凉至30℃,加入东柳植物甜酒曲5g,装入发酵罐中控制环境温度28℃糖化发酵48h,备用;
(3)酵母种子液培养:酵母接种到麦芽汁液体培养基中,28℃,150r/min,培养48h,备用;
(4)发酵:在糖化结束后,加入3.0L的纯净水,同时按照原料质量0.5%的接种量接种酵母种子液,搅拌均匀后,在28℃下发酵,发酵3天;
(5)后发酵:在15度低温环境下继续发酵8天;
(6)过滤、澄清:发酵结束,过滤掉酒糟,得到米酒成品。
(7)指标测定与感官评定:酒液澄清,呈透明色,清爽鲜甜,乙酸乙酯含量为187.9mg/L,葡萄糖含量为43.6g/L,理化性质符合GBT/GZSX017--2020《贵州米酒》发酵型理化要求。
实施例3:
一种异常微克汉姆酵母在米酒中的应用的制备方法,具体包括以下步骤:
(1)备料:选取颗粒饱满,无霉变的糯米1430g,放入精米机精白至60%,淘洗干净后,备用;
(2)糖化:糯米浸泡8-12h后先蒸煮20min,倒出后加水400ml,复蒸20min后出锅;摊凉至30℃,加入东柳植物甜酒曲5g,装入发酵罐中控制环境温度28℃糖化发酵48h,备用;
(3)酵母种子液培养:酵母接种到麦芽汁液体培养基中,28℃,150r/min,培养48h,备用;
(4)发酵:在糖化结束后,加入2.5L的纯净水,同时按照原料质量0.5%的接种量接种酵母种子液,搅拌均匀后,在26℃下发酵,发酵3天;
(5)后发酵:在15度低温环境下继续发酵9天;
(6)过滤、澄清:发酵结束,过滤掉酒糟,得到米酒成品。
(7)指标测定与感官评定:酒液澄清,呈透明色,清爽鲜甜,乙酸乙酯含量为202.15mg/L,葡萄糖含量为51.71g/L,理化性质符合GBT/GZSX017--2020《贵州米酒》发酵型理化要求。
Claims (3)
1.一种异常威克汉姆酵母,其特征在于,分类命名为Wickerhamomyces anomalus,菌株号为FBKL2.00K8,已经于2020年6月30日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:M2020249。
2.如权利要求1所述的异常威克汉姆酵母在酿酒的用途。
3.一种利用异常威克汉姆酵母制作风味米酒的方法,其特征在于,包括如下操作步骤:
(1)备料:选取颗粒饱满的糯米淘洗干净后,备用;
(2)糖化:糯米浸泡8-12h后先蒸煮20-30min,倒出后适量加水,复蒸20-30min后出锅,摊凉至26-31℃,加入适量甜酒曲,装入发酵罐中控制环境温度26-31℃糖化发酵40-60h,备用;
(3)酵母种子液培养:将异常微克汉姆酵母接种到麦芽汁液体培养基中,保温温度26-31℃,150r/min,培养48h,备用;
(4)发酵:在糖化结束后,加入适量纯净水或矿泉水,同时按照原料质量0.5%的接种量接种酵母种子液,搅拌均匀后,在24-31℃下发酵,发酵3天;
(5)后发酵:在15℃环境下继续发酵7-10天;
(6)过滤、澄清:发酵结束,过滤掉酒糟,得到米酒成品。
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