CN114736813A - 内圈毛韧革菌的分离培养方法及应用 - Google Patents

Abstract

内圈毛韧革菌的分离培养方法及应用，取金耳子实体原种瓶中的上层料或者栽培种袋的上层料，接种至特制培养基，培养皿中会产生明显拮抗线的毛韧革菌的外圈与内圈；将内圈毛韧革菌挑取后，再接种至特制培养基中纯化培养，直至满皿；所述特制培养基的成分为：每升水中含金耳子实体水提物3%、酵母浸出物0.2%、麦芽浸出物0.6%、大米粉8%、琼脂糖20%；将内圈毛韧革菌液体发酵，发酵至菌丝球浓密后即可用作金耳子实体栽培种，将所述金耳子实体栽培种接种至金耳栽培袋，栽培得到金耳子实体。本发明的金耳子实体栽培种生长速度快，大小一致性强，饱满圆润，红润成肉色，纹路均匀，不中空，栽培种接种后，金耳长势良好且健壮。

Description

内圈毛韧革菌的分离培养方法及应用

技术领域

本发明涉及一种特殊形态毛韧革菌的有效分离和培养方法，以及这种毛韧革菌的应用。

背景技术

毛韧革菌是一种非常特殊的真菌，它腐生能力很强，是很多人工栽培食用菌过程中的杂菌，可以独立生长完成生活史，然而其与金耳菌一旦建立寄生关系后，在寄生阶段中，毛韧革菌便失去了完成生活史的能力，具体机理目前还不清楚。截止至今，关于毛韧革菌的研究文献比较少。

内圈毛韧革菌是一种特殊形态的毛韧革菌，该形态毛韧革菌在特定的培养基中会产生，具体表现为接种块附近稀疏的、匍匐在培养基上，无气生菌丝，长势弱，成灰白色的毛韧革菌，通常会形成直径0.5-2cm直径的内圈，如图1、图2所示，该将形态毛韧革菌命名为内圈毛韧革菌。在内圈毛韧革菌外圈的菌丝很浓密，气生菌丝旺盛，洁白，将该形态菌丝命名为外圈菌丝。内圈毛韧革菌最早在金耳工厂化栽培的菌种分离过程中偶尔发现，由于其明显的拮抗线，研究人员以为是污染或者毛韧革菌发生变异，但经过ITS分子鉴定后，均显示是毛韧革菌。内圈毛韧革菌和外圈菌丝与图3所示的常规的毛韧革菌在常规ITS分子分类上没有区别，均为毛韧革菌，但两者在形态上差别很大，功能差异也较大。

本发明研究人员通过大量试验，筛选能稳定有效地分离内圈毛韧革菌的培养基，进而通过内圈毛韧革菌、外圈毛韧革菌、常规毛韧革菌在金耳子实体栽培中应用实验表明，外圈毛韧革菌应用的金耳子实体菌种有明显的革菌包裹显现，偶有子实体开裂现象，而内圈毛韧革菌应用的金耳子实体菌种生长速度快，大小一致性强，饱满圆润，红润成肉色，纹路均匀，不中空，栽培种接种后，金耳长势良好且健壮。

发明内容

本发明的目的是稳定有效地分离内圈毛韧革菌，并将其应用到金耳子实体栽培生产中，取代常规毛韧革菌，以提高金耳子实体栽培种的质量。

本发明采取的技术方案如下：

内圈毛韧革菌的分离培养方法，方法如下：

（1）取金耳子实体原种瓶中的上层料或者栽培种袋的上层料，接种至特制培养基，培养皿中会产生明显拮抗线的毛韧革菌的外圈与内圈；将内圈毛韧革菌挑取后，再接种至特制培养基中纯化培养，直至满皿；所述特制培养基的成分为：每升水中含金耳子实体水提物3%、酵母浸出物0.2%、麦芽浸出物0.6%、大米粉8%、琼脂糖20%；

（2）将培养好的内圈毛韧革菌液体发酵，发酵培养基的成分为：每升水中含金耳子实体水提物3%、酵母浸出物0.2%、麦芽浸出物0.6%、大米粉8%；将内圈毛韧革菌种子液无菌接种至液体发酵罐中，20-22℃培养5-8天，发酵至菌丝球浓密后即可。

将本发明方法分离培养得到的内圈毛韧革菌用作金耳子实体栽培种，将所述金耳子实体栽培种接种至金耳栽培袋，栽培得到金耳子实体。

本发明以一种特殊形态毛韧革菌的发现作为研究基点，筛选稳定培养该形态革菌的培养基，将内圈革菌液体发酵后，取代金耳子实体栽培种生产中所需的常规毛韧革菌，培养的金耳子实体栽培种生长速度快，大小一致性强，饱满圆润，红润成肉色，纹路均匀，不中空，金耳子实体栽培种接种至栽培袋后，金耳长势良好，且健壮。

本发明的内圈毛韧革菌种源从金耳子实体原种瓶中的上层料或者栽培种袋的上层料中获取，获取容易。

附图说明

图1和图2均为内圈毛韧革菌的形态图；

图3为常规的毛韧革菌的形态图。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整的描述。

内圈毛韧革菌的分离培养方法，方法如下：

（1）内圈毛韧革菌种源从金耳子实体原种瓶中的上层料或者栽培种袋的上层料中获得，并将以上部位培养料无菌接种于特制培养基，培养皿中会产生明显拮抗线的毛韧革菌的外圈与内圈。所述特制培养基的成分为：每升水中含金耳子实体水提物3%、酵母浸出物0.2%、麦芽浸出物0.6%、大米粉8%、琼脂糖20%。第一次培养过程中，培养基上会同时产生内圈和外圈毛韧革菌，因此需要对内圈毛韧革菌再做一次纯化培养，方法是将内圈毛韧革菌挑取后，再接种至特制培养基中纯化培养，直至满皿；

（2）将培养好的内圈毛韧革菌液体发酵，发酵培养基的成分为：每升水中含金耳子实体水提物3%、酵母浸出物0.2%、麦芽浸出物0.6%、大米粉8%，即去琼脂糖的特制培养基。将内圈毛韧革菌种子液无菌接种至液体发酵罐中，20-22℃培养5-8天，发酵至菌丝球浓密后即可应用于金耳子实体栽培种的制作。

将本发明方法分离培养得到的内圈毛韧革菌用作金耳子实体栽培种，将所述金耳子实体栽培种接种至金耳栽培袋，栽培得到金耳子实体。

目前最稳定的工厂化金耳子实体菌种制作采用嫁接法，先将毛韧革菌液体菌种接入固体培养基中，20-22℃培养5-7天后，在栽培种袋的正中央嫁接菌种，培养40-60天即可应用于生产。将本发明的内圈毛韧革菌菌种用于替代现有技术的常规毛韧革菌的液体菌种后，金耳子实体栽培种30-35天即可用于生产，且大小一致性强，饱满圆润，红润成肉色，纹路均匀，不中空，金耳子实体栽培种，接种至栽培袋后，金耳长势良好，且健壮。

Claims (2)

1.内圈毛韧革菌的分离培养方法，其特征在于，方法如下：

（1）取金耳子实体原种瓶中的上层料或者栽培种袋的上层料，接种至特制培养基，培养皿中会产生明显拮抗线的毛韧革菌的外圈与内圈；将内圈毛韧革菌挑取后，再接种至特制培养基中纯化培养，直至满皿；所述特制培养基的成分为：每升水中含金耳子实体水提物3%、酵母浸出物0.2%、麦芽浸出物0.6%、大米粉8%、琼脂糖20%；

（2）将培养好的内圈毛韧革菌液体发酵，发酵培养基的成分为：每升水中含金耳子实体水提物3%、酵母浸出物0.2%、麦芽浸出物0.6%、大米粉8%；将内圈毛韧革菌种子液无菌接种至液体发酵罐中，20-22℃培养5-8天，发酵至菌丝球浓密后即可。

2.权利要求1的方法分离培养得到的内圈毛韧革菌用作金耳子实体栽培种，将所述金耳子实体栽培种接种至金耳栽培袋，栽培得到金耳子实体。

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