CN114573661B - 一种小分子肽及在促进生物大分子透皮吸收中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种小分子肽及在促进生物大分子透皮吸收中的用途,公开了一种新的小分子生物活性肽,可显著促进生物大分子的透皮吸收,美容过程中不需要仪器,只需将微量的本发明加入在含有生物活性大分子的化妆品配方中,即可显著促进生物大分子的透皮吸收,从而显示出生物大分子的良好美容作用。具有高效、简便、易于普及推广的优点,为具有美容作用的生物活性大分子的普及应用提供了一种简便可靠的技术方法。
Description
技术领域
本发明公开一种小分子肽,为一种新的小分子生物活性肽,同时还公开了该小分子活性肽在促进生物大分子透皮吸收中的用途;属于美容护肤生物制品技术领域。
背景技术:
现已证明,有很多生物大分子具有良好的美容作用。比如成纤维细胞生长因子(FGF)可显著去除皱纹,并具有嫩化皮肤的作用;表皮生长因子(EGF)可使皮肤细嫩光滑,并具有一定的去除皱纹的作用;血管内皮生长抑制因子(VEGIF)具有良好的消除皮肤红血丝的作用,等等。
但是,这些生物活性因子由于分子量非常大,如FGF的分子量高达30000D,故在单纯涂抹时吸收率非常低,所以单纯涂抹时其美容效果非常差,以至在实际应用时常常需要采取面部皮内注射的方法给药。
但是面部皮内注射给药操作比较复杂,法律规定只允许在具有医疗美容许可证的医院内才可以进行,在普通美容院内进行注射美容操作是违法的,这就使得占美容机构99%的美容院不能使用生物大分子美容。同样,由于面部皮内注射操作的专业性和复杂性,消费者更不能自己在家中进行面部皮内注射。从而极大地限制了这些生物活性大分子在美容领域的推广和应用。
为此,许多人在生物大分子非注射给药方面做了大量的研究,但是大多数效果不理想。其中研究最多效果最好的是导入仪器的研究,现在市场上已经有多种原理的促进透皮吸收的导入仪器,其导入效果有的比较好,有的比较差。但是,无论其导入效果如何,其共同的缺陷是这些导入仪器由于体积庞大,价格昂贵,操作复杂,且有一定的危险性,所以消费者不能带回家自己给自己使用,而只能在美容院里使用。但是绝大多数消费者是不去美容院消费的,从而无法普及,所以导入仪是不能从根本上解决生物活性大分子的透皮吸收问题的。
发明内容
本发明公开一种小分子肽及在促进生物大分子透皮吸收中的用途,解决了生物大分子透皮吸收的问题。
本发明公开的一种小分子生物活性肽,是由9个氨基酸通过缩合反应人工合成的一种寡肽,将其命名为九肽-ii。其氨基酸序列为:色氨酸-i苯丙氨酸-i蛋氨酸-i色氨酸-i甘氨酸-i苏氨酸-i丝氨酸-i甘氨酸-i脯氨酸(Trp-iPhe-iMet-iTrp-iGly-iThr-iSer-iGly-iPro);多肽序列为:WFMWGTSGP;其分子结构式为:
实验证明,本发明公开的小分子生物活性肽,经促FGF透皮吸收试验,证明其具有良好的促进生物大分子透皮吸收的作用,从而为生物大分子在美容中的应用提供了一种高效、简便、成本低廉、可广泛推广应用的技术方法。
本发明所述的一种小分子生物活性肽在制备促进生物大分子透皮吸收化妆品中的用途,包括:面霜、化妆水、面膜、护肤蜜、眼霜、乳液、精华液、冻干粉、口红等化妆品制品。
本发明的积极效果在于:
公开了一种新的小分子生物活性肽,可显著促进生物大分子的透皮吸收,美容过程中不需要仪器,只需将微量的本发明加入在含有生物活性大分子的化妆品配方中,即可显著促进生物大分子的透皮吸收,从而显示出生物大分子的良好美容作用。具有高效、简便、易于普及推广的优点,为具有美容作用的生物活性大分子的普及应用提供了一种简便可靠的技术方法。
附图说明
图1为本发明对照组的组织切片荧光显微镜照片;
图2为本发明实验组的组织切片荧光显微镜照片。
具体实施方式
通过以下实施例进一步举例描述本发明,并不以任何方式限制本发明,在不背离本发明的技术解决方案的前提下,对本发明所作的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本发明的权利要求范围之内。
实施例1
本发明公布了一种小分子生物活性肽,是由9个氨基酸组成的小肽,简称九肽-ii。其分子中氨基酸序列为:色氨酸-i苯丙氨酸-i蛋氨酸-i色氨酸-i甘氨酸-i苏氨酸-i丝氨酸-i甘氨酸-i脯氨酸(Trp-iPhe-iMet-iTrp-iGly-iThr-iSer-iGly-iPro);多肽序列为:WFMWGTSGP;其分子结构式为:
实验例1
1实验目的
本发明小分子生物活性肽在促进生物大分子透皮吸收中的作用;
2材料
本发明(九肽-ii):以7种氨基酸(色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丝氨酸脯氨酸)为原料,委托吉林省媚蒂斯生物科技有限公司采用固态缩合反应法人工合成,纯度97.6%;
成纤维细胞生长因子(FGF):长春赛恩生物技术有限公司产品,批号20210528;
荧光色素:中国生物技术有限公司,批号20210706;
荧光显微镜:上海永科仪器公司;
组织切片机:湖北孝感阔海医疗科技有限公司;
荧光测定仪:南京贝登电子商务有限公司;
比格犬:购于吉林大学白求恩医学院实验动物室;
其他材料、器具:略
3.方法
本发明促FGF透皮吸收试验,采用荧光标记组织切片测定法。
3.1荧光标记FGF的制备
用0-i4℃的pH8.0的PBS,将FGF配置成35mg/ml的溶液,放入冰浴中备用;
按每毫克FGF加入荧光素0.01mg计算,称取所需荧光素量,用3%重碳酸钠水溶液配制成0.035mg/ml的溶液;
将FGF溶液与荧光素溶液等量混合,置0-i4℃冰箱中结合18-i24小时;
用透析和柱层析法去除未结合的FGF和荧光素,即得荧光素标记FGF。
3.2动物准备、分组与皮肤涂抹
取比格犬一只,麻醉,背部皮肤脱毛,纯化水洗净。在脊椎两侧对称处,分别标记出4个直径5cm的区域,分别为对照组1、对照组2、对照组3和实验组;
对照组1:只涂抹荧光素溶液,涂抹后用手指按摩5分钟;
对照组2:只涂抹荧光素标记FGF溶液,涂抹后用手指按摩5分钟;
对照组3:涂抹含有0.01%本发明的荧光素溶液,涂抹后用手指按摩5分钟;
实验组:涂抹含有0.01%本发明的荧光素标记FGF溶液,涂抹后用手指按摩5分钟。
3.3皮肤组织切片及荧光检测
分别手术切取上述4处皮肤的中央部位,蜡封,用组织切片机垂直切成组织切片;置荧光显微镜下观察有无荧光并照相;用荧光测定仪测定荧光强度,并计算出吸收率。
4结果
4.1本发明促FGF透皮吸收试验
表1.本发明促FGF透皮吸收率
对照组1 | 对照组2 | 对照组3 | 实验组 | |
透皮吸收率(%) | 17.6 | 2.3 | 16.1 | 62.7 |
1、对照组1是只涂抹了荧光素溶液的组,其有17.6%的吸收率,说明单纯的荧光素涂抹皮肤,也是可以吸收一部分的,因为荧光素是小分子物质;
2、对照组2是只涂抹了荧光素标记FGF的组,其吸收率仅为2.3%,说明FGF单纯涂抹其吸收率是非常低的;
3、对照组3是涂抹了荧光素和本发明溶液的组,其吸收率与对照组1接近,说明本发明并不能促进荧光素的吸收,因为荧光素不是生物活性分子,其不带有电荷;
4、实验组是涂抹了本发明和荧光素标记FGF的组,其吸收率高达62.7%,显著高于对照组2,说明本发明具有显著促进FGF吸收的作用。
4.2组织切片荧光显微镜检查结果
4.2.1对照组组织切片荧光显微镜照片:视野黑暗,荧光微弱,说明其吸收率非常低(见图1);
4.2.2实验组组织切片荧光显微镜照片:视野有明亮荧光,说明吸收率很高(见图2)。
5结论通过本实验证明,单纯涂抹FGF时,其吸收率非常低,仅为2.3%,验证了众多研究关于FGF单纯涂抹时难以吸收的结论。而加入本发明后,FGF的吸收率高达62.7%,显著高于未加本发明时的吸收率2.3%,说明本发明具有显著促进FGF吸收的作用。而FGF的分子量高达30000D,说明本发明可促进生物大分子的透皮吸收。
Claims (3)
1.一种小分子生物活性肽,是由9个氨基酸通过缩合反应人工合成的一种寡肽,氨基酸序列为:色氨酸-苯丙氨酸-蛋氨酸-色氨酸-甘氨酸-苏氨酸-丝氨酸-甘氨酸-脯氨酸,其分子结构式为:
2.根据权利要求1所述的小分子生物活性肽在促进化妆品中FGF透皮吸收中的用途。
3.如权利要求2所述的用途,其中化妆品包括:面霜、化妆水、面膜、护肤蜜、眼霜、乳液、精华液、冻干粉、口红制品。
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