CN114480299A - 一种蜡样芽胞杆菌噬菌体及其应用 - Google Patents
一种蜡样芽胞杆菌噬菌体及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114480299A CN114480299A CN202011167577.3A CN202011167577A CN114480299A CN 114480299 A CN114480299 A CN 114480299A CN 202011167577 A CN202011167577 A CN 202011167577A CN 114480299 A CN114480299 A CN 114480299A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bacillus cereus
- bacteriophage
- phage
- dlc1
- bacillus
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 title claims abstract description 126
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 title claims abstract description 80
- -1 pplication Species 0.000 title description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 13
- 239000000022 bacteriostatic agent Substances 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 claims description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 5
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 2
- 241000894007 species Species 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 8
- 206010048723 Multiple-drug resistance Diseases 0.000 abstract description 7
- 230000001018 virulence Effects 0.000 abstract description 7
- 238000005336 cracking Methods 0.000 abstract description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract description 4
- 238000004321 preservation Methods 0.000 abstract description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 abstract description 2
- 101100278842 Caenorhabditis elegans dlc-1 gene Proteins 0.000 description 40
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 13
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 9
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 7
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 5
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 5
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 5
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 4
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000010865 sewage Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 3
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 3
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 3
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 3
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 3
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 2
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- 206010016952 Food poisoning Diseases 0.000 description 2
- 208000019331 Foodborne disease Diseases 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- LINOMUASTDIRTM-QGRHZQQGSA-N deoxynivalenol Chemical compound C([C@@]12[C@@]3(C[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1C=C(C([C@@H](O)[C@@]13CO)=O)C)C)O2 LINOMUASTDIRTM-QGRHZQQGSA-N 0.000 description 2
- 230000000741 diarrhetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 2
- LINOMUASTDIRTM-UHFFFAOYSA-N vomitoxin hydrate Natural products OCC12C(O)C(=O)C(C)=CC1OC1C(O)CC2(C)C11CO1 LINOMUASTDIRTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 206010060976 Bacillus infection Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 244000183278 Nephelium litchi Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 238000003917 TEM image Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 239000000956 alloy Substances 0.000 description 1
- 229910045601 alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000022338 anthrax infection Diseases 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000006353 environmental stress Effects 0.000 description 1
- 230000003090 exacerbative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 235000020200 pasteurised milk Nutrition 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001066 phage therapy Methods 0.000 description 1
- IYDGMDWEHDFVQI-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;trioxotungsten Chemical compound O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.OP(O)(O)=O IYDGMDWEHDFVQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 206010040872 skin infection Diseases 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000012070 whole genome sequencing analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002132 β-lactam antibiotic Substances 0.000 description 1
- 229940124586 β-lactam antibiotics Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
- A23L3/34—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
- A23L3/3454—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
- A23L3/3463—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
- A23L3/3571—Microorganisms; Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
- C12N2795/10211—Podoviridae
- C12N2795/10221—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
- C12N2795/10211—Podoviridae
- C12N2795/10231—Uses of virus other than therapeutic or vaccine, e.g. disinfectant
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
- C12N2795/10211—Podoviridae
- C12N2795/10232—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及芽胞杆菌技术领域，具体公开了一种噬菌体及其应用，本发明的噬菌体为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)，所述蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)已于2020年9月18日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC 61196‑B1。本发明的噬菌体对携带多重毒力基因和多重耐药性的蜡样芽胞杆菌具有特异性裂解效果，同时具有良好的热稳定性、pH稳定性、离子浓度和有机溶剂耐受性，本发明的噬菌体可作为单一抑菌制剂或组合其他病原菌噬菌体构成抑菌制剂用于抑制蜡样芽胞杆菌的生长。
Description
技术领域
本发明涉及芽胞杆菌技术领域，尤其是涉及一种蜡样芽胞杆菌噬菌体及其应用。
背景技术
蜡样芽胞杆菌是一种产芽胞的革兰氏阳性条件致病菌，广泛分布于环境中。作为最重要的食源性致病菌之一，蜡样芽胞杆菌已被发现存在于各类食品中，如米、面等主食，以及奶与奶制品、蔬菜、水产品和速冻食品等。蜡样芽胞杆菌产生的芽胞是高度耐热的休眠体，能够耐受普通的食品加工温度，因此加剧了蜡样芽胞杆菌的传播和污染风险。在世界各地，每年都有大量因蜡样芽胞杆菌污染导致的食品中毒事件的爆发。蜡样芽胞杆菌也是我国常见食源性致病菌，在我国致病菌导致的食物中毒事件排名中位列第三，危害严重。食源性蜡样芽胞杆菌的常见感染症状为腹泻和呕吐，主要由能够产生腹泻型毒素和呕吐型毒素的蜡样芽胞杆菌所导致。腹泻型毒素包括溶血性肠毒素(HBL)、非溶血性肠毒素(NHE)、肠毒素FM(EntFM)和细胞毒素K(CytK)，会引起腹泻、腹痛或其他类型的皮肤感染。而致呕型蜡样芽胞杆菌分泌的呕吐毒素在具有高毒力的同时也具有高度的耐热性和耐酸性，使其难以在食品加工过程中失活，从而引起急性呕吐等症状。此外，部分蜡样芽胞杆菌还可能携带炭疽毒素，造成类似炭疽芽胞杆菌感染等更为严重的潜在风险。目前应对蜡样芽胞杆菌污染的有效方法还是抗生素治疗，但由于蜡样芽胞杆菌基因组已可编码β内酰胺酶，能够天然耐受大多数β内酰胺类抗生素。此外，由于抗生素的滥用，能够抵抗多种抗生素的多重耐药菌已经出现，使得抗生素治疗在应对耐药性蜡样芽胞杆菌感染时无法取得满意的治疗效果，甚至完全失效。因此，寻求其他更为合理的治疗方法变得迫在眉睫。
相比于抗生素疗法，噬菌体对细菌的杀灭效果具有高度特异性，减小了治疗过程对其他微生物的影响，有利于维持机体微生态环境的平衡。同时噬菌体能够与宿主细菌共同进化，有助于应对细菌产生的抗性问题。此外，通过组合不同类型和宿主范围的噬菌体，可以配制噬菌体组合剂(或噬菌体鸡尾酒)，扩大噬菌体的应用范围，或将噬菌体与抗生素联用，提高治疗效果。由于多重耐药性蜡样芽胞杆菌的出现和快速发展，作为抗生素的替代疗法之一，噬菌体治疗越来越受到广泛关注。目前能够特异性裂解多重耐药性蜡样芽胞杆菌的噬菌体仍较为有限。同时，蜡样芽胞杆菌丰富的遗传多样性也使得单独一种或几种特异性噬菌体无法满足杀灭蜡样芽胞杆菌的需求。
因此，亟需一种特异性强、稳定性高的蜡样芽胞杆菌噬菌体及包含该蜡样芽胞杆菌噬菌体的抑菌制剂和噬菌体组合物。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种蜡样芽胞杆菌噬菌体及其应用，本发明的噬菌体对携带多重毒力基因和多重耐药性的蜡样芽胞杆菌具有特异性裂解效果，同时具有良好的热稳定性、pH稳定性、离子浓度和有机溶剂耐受性，可作为单一抑菌制剂或噬菌体组合剂成分用于抑制食品与临床中蜡样芽胞杆菌的生长。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
本发明的第一目的提供了一种噬菌体，将噬菌体命名为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1，所述蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)DLc1已于2020年9月18日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址：中国广州市先烈中路100号广东省微生物研究所，保藏编号为GDMCC 61196-B1。
本发明人从广东省广州市荔湾区黄沙水产市场采集的污水水样中经过大量研究及试验分离得到蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1，本发明的噬菌体属于短尾噬菌体科烈性噬菌体，不携带毒力因子和抗生素耐药基因，具有较佳的生物安全性；本发明的噬菌体在不同温度、pH、盐离子浓度和有机溶剂中都具有较高的稳定性，有利于实际应用中的加工处理；本发明的噬菌体能够有效裂解携带多种毒力因子和耐药性的蜡样芽胞杆菌分离菌株，且具有较窄的宿主范围，能够特异性裂解分子型别为ST4的蜡样芽胞杆菌。
经过基因组相似性比对，发现本发明的噬菌体与现有的噬菌体的相似性比较低(<50％)，扩大了针对蜡样芽胞杆菌的噬菌体库的范围。
本发明的第二目的提供了上述噬菌体在裂解蜡样芽胞杆菌中的应用。
本发明的第三目的提供了上述噬菌体在制备抑菌制剂中的应用。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述抑菌制剂为蜡样芽胞杆菌抑菌制剂。
本发明的第四目的提供了一种抑菌制剂，所述抑菌制剂包括上述的蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)，所述蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC 61196-B1，本发明的抑菌制剂还可以包括蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)与其他病原菌噬菌体的组合，例如其他病原菌噬菌体可以为大肠杆菌噬菌体或铜绿假单胞菌噬菌体等。
本发明的第五目的提供了一种噬菌体组合物，包括上述蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)。
本发明的第六目的提供了上述噬菌体组合物在裂解蜡样芽胞杆菌中的应用。
本发明的第七目的提供了上述噬菌体组合物在制备抑菌制剂中的应用。
在本发明的技术方案中，本发明人首次分离得到蜡样芽胞杆菌噬菌体 (Bacilluscereus bacteriophage)DLc1，通过电镜观察，发现本发明的蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1的头部长度约为64.2nm，头部宽度约为33.1nm，尾部长度约为37.6nm，尾部宽度约为3.8nm；蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)DLc1在温度范围为4～55℃、pH范围为5～11、盐离子浓度50～1000mM以及≤75％乙醇溶液和氯仿中都能保持稳定的效价，因此，蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacilluscereus bacteriophage)DLc1具有较高的稳定性，并且蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacilluscereus bacteriophage)DLc1能够有效裂解携带多重毒力因子和多重耐药性的ST4型蜡样芽胞杆菌，特异性佳。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明首次分离得到蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1，该噬菌体对携带多重毒力基因和多重耐药性的蜡样芽胞杆菌具有特异性裂解效果，同时具有良好的热稳定性、pH稳定性、离子浓度和有机溶剂耐受性，可作为单一抑菌制剂或噬菌体组合剂成分用于抑制食品与临床中蜡样芽胞杆菌的生长。
附图说明
图1为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1的透射电镜形态示意图；
图2为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1的双层平板噬菌斑形态示意图；
图3为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1的生长曲线示意图；
图4为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1的温度稳定性实验示意图；
图5为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1的pH稳定性实验示意图；
图6为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1的盐溶液稳定性实验示意图；
图7为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1的乙醇溶液稳定性实验示意图；
图8为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1的氯仿稳定性实验示意图；
图9为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1对不同蜡样芽胞杆菌菌株的裂解效果示意图。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
实施例1、噬菌体的保藏信息
本发明提供了一种噬菌体，将噬菌体命名为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacilluscereus bacteriophage)DLc1，蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1已于2020年9月18日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址：中国广州市先烈中路100号广东省微生物研究所，保藏编号为GDMCC NO: 61196-B1。
实施例2、噬菌体的分离、富集与纯化
本发明的噬菌体的分离与纯化，包括以下步骤：
1.菌悬液的制备：以携带多重毒力基因和多重耐药性的蜡样芽胞杆菌 1582-3B作为敏感指示菌株，蜡样芽胞杆菌1582-3B为巴氏奶分离株，于-40℃甘油管中冻存，经平板划线活化后，制成菌悬液。
2.噬菌体的分离：采集广东省广州市荔湾区黄沙水产市场采集的污水水样，将污水水样先经过8,000×g离心10min去除泥沙等大颗粒物后，经过0.45μm 孔径滤膜过滤去除水样中的大部分环境细菌；随后加入硫酸镁至终浓度为50 mM，静置10min后用0.22μm滤膜过滤，同时吸附环境中的噬菌体；滤膜剪碎后浸入50mL洗脱液中(1％牛肉膏、3％吐温80)并超声5min。最后将该洗脱液用0.22μm滤头过滤去除杂质，4℃保存。
3.噬菌体的富集：将上述噬菌体洗脱液与对数期蜡样芽胞杆菌1582-3B以体积比10:1混合后加入含有2mM氯化钙的TSB肉汤培养基中(细菌接种量为 1％)，37℃震荡共培养过夜。将共培养物10,000×g离心1min后，过滤得到未纯化的蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1的噬菌体悬液。
4.噬菌体的纯化：用1μL接种环将该噬菌体悬液划线至含1mM氯化钙的 TSB平板，稍晾干后，将含有100μL对数期蜡样芽胞杆菌1582-3B的软琼脂TSB 培养基(0.4％琼脂，4mL)缓慢倾注至平板表面，待琼脂凝固后于37℃倒置培养过夜；将过夜培养后出现的单一噬菌斑挑出，重新划线至新配制的含1mM氯化钙的TSB平板，同上所述覆盖含对数期菌的软琼脂，再次培养过夜；该纯化过程至少重复三次。
将纯化后的单一噬菌斑挑出，用1mL TSB培养基重悬后，与100μL对数期蜡样芽胞杆菌1582-3B混合加入4mL TSB软琼脂中，倒入TSB固体培养基上，凝固后于37℃倒置培养过夜，观察噬菌斑形态，纯化后的噬菌体在双层琼脂平板上形成的噬菌斑形态均一，如图2所示。
实施例3、高效价噬菌体储存液的制备
将实施例2已纯化至形态均一的单一噬菌斑挑出，重悬至3mL含1mM氯化钙的TSB肉汤培养基中，再接种1％蜡样芽胞杆菌1582-3B活化菌株，37℃下震荡培养3h，经10,000×g离心1min后过滤获得上清液；另取新配制的3mL 含1mM氯化钙的TSB肉汤培养基，接种1％蜡样芽胞杆菌1582-3B活化菌株后 37℃震荡培养1h，随后加入100μL如上分离得到的上清液，继续于37℃震荡共培养6h，10,000g离心1min后过滤获得初步扩增后的上清液；取新配制的50mL含1mM氯化钙的TSB肉汤培养基，接种1％蜡样芽胞杆菌1582-3B活化菌株后37℃震荡培养1h，随后加入1mL上述初步扩增后的上清液，继续于 37℃震荡共培养6h，最后于4℃下10,000×g离心20min后过滤获得再次扩增后的上清液。
在上述扩增后的上清液中加入终浓度为10％的聚乙二醇(分子量为8,000) 和终浓度为1M的氯化钠，于冰上静置4h后，4℃下10,000×g离心30min。弃去上清液后，将沉淀物用去离子水重悬，过滤，得到效价约为2.5×1012PFU/mL 的蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacilluscereus bacteriophage)DLc1储存液。
实施例4、噬菌体生物学特性研究
1.噬菌体的形态观察
将取实施例3制备的蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1储存液滴于铜网上，自然沉降后用3％磷钨酸染色3min后吸取多余染色液，待干燥后用透射电子显微镜观察噬菌体形态。根据图1的透明电镜形态观察，该噬菌体粒子的平均尺寸由显微镜下至少20个单独噬菌体粒子的测量值统计得到；噬菌体DLc1的头部长度约为64.2nm，头部宽度约为33.1nm，尾部长度约为37.6nm，尾部宽度约为3.8nm，并且该噬菌体属于短尾噬菌体科。
2.噬菌体的基因组相似性比对
采用Ion torrent S5 platform对蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)DLc1进行全基因组测序，随后利用SPAdes v.3.6.2拼接软件对优化序列进行拼接，通过NCBI BLASTn确定噬菌体与已报道噬菌体的相似性均较低(<50％)，为一种新型噬菌体。比对结果如表1所示，核苷酸相似性由Query Cover与Per.Ident的乘积得到。
表1本发明噬菌体与NCBI数据库中现有噬菌体的相似性比对
3.噬菌体生长曲线的测定
将活化后的蜡样芽胞杆菌1582-3B接种至对数期(OD600约为3.0，对应约2 ×108CFU/mL菌液)，取少量对数期菌液，13,000×g离心1min收集菌体，用等量含1mM氯化钙的TSB肉汤培养基重悬后稀释10倍至约2×107CFU/mL；测试前先将噬菌体和上述菌液在37℃下预热5min，随后将噬菌体以感染复数为0.1的量(2×106PFU/mL)添加至菌液中，并开始计时；于37℃下吸附5min 后，将该吸附体系稀释1000倍至50mM含1mM氯化钙的TSB培养基中，37℃下震荡培养，每间隔5min取样，过滤测定体系中的游离噬菌体；同时取另一份样品，加入1％氯仿后，测定细胞内的噬菌体个数。
噬菌体DLc1的生长曲线如图3所示，可知在37℃、含1mM氯化钙的TSB 培养基和感染复数为0.1的条件下，蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1在蜡样芽胞杆菌1582-3B中的潜伏期约为31min，隐蔽期约为21min，平均裂解量约为20个。
试验例一、噬菌体对环境压力的耐受性测定
1.温度对噬菌体的影响：将蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)DLc1用TSB培养基稀释至1×108PFU/mL，分别于4、25、37、45、55、65和75℃下孵育1h，用双层琼脂法定量测定孵育后噬菌体的效价。结果发现蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1在温度为4℃至55℃下均较为稳定，效价保持不变，在65℃下效价明显降低，75℃下完全失活(参考图4)。
2.pH值对噬菌体的影响：用1M盐酸和1M氢氧化钠将去离子水分别调至 pH值为1、3、5、7、9、11和13，将蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1分别加入上述不同pH的去离子水中，至1×108PFU/mL。于温度为25℃避光孵育1h后，用双层琼脂法定量测定孵育后噬菌体的效价。结果发现蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)DLc1在pH值范围为5至11之间均较为稳定，效价保持不变，在pH值为3时效价下降，在pH 值为1或13时完全失活(参考图5)。
3.盐离子浓度对噬菌体的影响：将蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)DLc1加入不同浓度的氯化钠溶液中，至1×108PFU/mL。与4℃孵育1h，用双层琼脂法定量测定孵育后噬菌体的效价。结果表明蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)DLc1在50～1000mM氯化钠浓度下均较为稳定(参考图6)。
4.乙醇浓度对噬菌体的影响：将蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)DLc1加入不同浓度的乙醇溶液中，至1×108PFU/mL。于温度为 4℃孵育1h，用双层琼脂法定量测定孵育后噬菌体的效价。结果表明蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacilluscereus bacteriophage)DLc1在≤75％的乙醇浓度下均较为稳定，在90％乙醇溶液中效价降低(参考图7)。
5.氯仿对噬菌体的影响：在含有1×108PFU/mL蜡样芽胞杆菌噬菌体 (Bacilluscereus bacteriophage)DLc1的去离子水中加入等体积氯仿，涡旋混匀后于4℃静置孵育过夜，用双层琼脂法定量测定孵育后去离子水中噬菌体的效价。结果表明噬菌体DLc1对氯仿不敏感，经过氯仿处理后效价不变(参考图8)。
试验例二、噬菌体对蜡样芽胞杆菌裂解活性的测定
分别取100μL对数期蜡样芽胞杆菌加入4mL软琼脂TSB培养基中，混匀后倾入TSB固体培养基上。待琼脂凝固后，将蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)DLc1稀释至108、107、106、105、104和103PFU/mL，各取5μL加至平板上，晾干后于37℃倒置培养过夜，观察噬菌斑形成；上述蜡样芽胞杆菌为包括1582-3B在内的三株携带多重毒力基因和多重耐药性的菌株。
表2三株蜡样芽胞杆菌携带毒力基因和耐药情况
参见表2及图9所示，结果表明，该蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)DLc1能够有效裂解三株携带多重毒力基因和多重耐药性的蜡样芽胞杆菌，同时根据分子分型，这三株菌都属于ST4型，说明蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)DLc1的裂解效果具有高度特异性。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (8)
1.一种噬菌体，其特征在于，所述噬菌体为蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereusbacteriophage)，所述蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)已于2020年9月18日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC 61196-B1。
2.如权利要求1所述的噬菌体在裂解蜡样芽胞杆菌中的应用。
3.如权利要求1所述的噬菌体在制备抑菌制剂中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抑菌制剂为蜡样芽胞杆菌抑菌制剂。
5.一种抑菌制剂，其特征在于，所述抑菌制剂包括如权利要求1所述的蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)。
6.一种噬菌体组合物，其特征在于，所述噬菌体组合物包括如权利要求1所述的蜡样芽胞杆菌噬菌体(Bacillus cereus bacteriophage)。
7.如权利要求6所述的噬菌体组合物在裂解蜡样芽胞杆菌中的应用。
8.如权利要求6所述的噬菌体组合物在制备抑菌制剂中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011167577.3A CN114480299B (zh) | 2020-10-27 | 2020-10-27 | 一种蜡样芽胞杆菌噬菌体及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011167577.3A CN114480299B (zh) | 2020-10-27 | 2020-10-27 | 一种蜡样芽胞杆菌噬菌体及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114480299A true CN114480299A (zh) | 2022-05-13 |
| CN114480299B CN114480299B (zh) | 2023-08-29 |
Family
ID=81490388
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011167577.3A Active CN114480299B (zh) | 2020-10-27 | 2020-10-27 | 一种蜡样芽胞杆菌噬菌体及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114480299B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115927214A (zh) * | 2022-12-21 | 2023-04-07 | 暨南大学 | 基于双元系统高效改变噬菌体制剂宿主范围的方法及其应用 |
| CN116656623A (zh) * | 2023-04-20 | 2023-08-29 | 暨南大学 | 两株具有特征分子靶标的蜡样芽胞杆菌广谱肌尾噬菌体dc1、dc2及其应用 |
| CN117004578A (zh) * | 2023-09-27 | 2023-11-07 | 深圳国家感染性疾病临床医学研究中心 | 一种高通量分离及纯化多宿主噬菌体的方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012145630A2 (en) * | 2011-04-21 | 2012-10-26 | The Rockefeller University | Streptococcus bacteriophage lysins for detection and treatment of gram positive bacteria |
| CN108531461A (zh) * | 2018-01-04 | 2018-09-14 | 海南师范大学 | 一株蜡样芽孢杆菌噬菌体及其应用 |
| CN108531469A (zh) * | 2018-04-08 | 2018-09-14 | 海南师范大学 | 一种蜡样芽孢杆菌噬菌体裂解酶及其制备方法和应用 |
| CN109706125A (zh) * | 2018-09-21 | 2019-05-03 | 赵远超 | 蜡样芽孢杆菌噬菌体组合物及其应用 |
| CN110205306A (zh) * | 2019-06-10 | 2019-09-06 | 武汉轻工大学 | 蜡样芽胞杆菌噬菌体、噬菌体组合物及抑菌制剂 |
| KR20200081594A (ko) * | 2018-12-27 | 2020-07-08 | 주식회사 옵티팜 | 신규한 바실러스 세레우스 균 특이 박테리오파지 bc13 및 이를 포함하는 항균 조성물 |
-
2020
- 2020-10-27 CN CN202011167577.3A patent/CN114480299B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012145630A2 (en) * | 2011-04-21 | 2012-10-26 | The Rockefeller University | Streptococcus bacteriophage lysins for detection and treatment of gram positive bacteria |
| CN108531461A (zh) * | 2018-01-04 | 2018-09-14 | 海南师范大学 | 一株蜡样芽孢杆菌噬菌体及其应用 |
| CN108531469A (zh) * | 2018-04-08 | 2018-09-14 | 海南师范大学 | 一种蜡样芽孢杆菌噬菌体裂解酶及其制备方法和应用 |
| CN109706125A (zh) * | 2018-09-21 | 2019-05-03 | 赵远超 | 蜡样芽孢杆菌噬菌体组合物及其应用 |
| KR20200081594A (ko) * | 2018-12-27 | 2020-07-08 | 주식회사 옵티팜 | 신규한 바실러스 세레우스 균 특이 박테리오파지 bc13 및 이를 포함하는 항균 조성물 |
| CN110205306A (zh) * | 2019-06-10 | 2019-09-06 | 武汉轻工大学 | 蜡样芽胞杆菌噬菌体、噬菌体组合物及抑菌制剂 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| FEOKTISTOVA N A 等: "Molecular-genetic characteristics of bacteriophage Bacillus cereus FBC-28 ugsha", 《RESEARCH JOURNAL OF PHARMACEUTICAL, BIOLOGICAL AND CHEMICAL SCIENCES》, vol. 9, no. 4, pages 345 - 354 * |
| JI X 等: "Isolation and characterization of glacier VMY22, a novel lytic cold-active bacteriophage of Bacillus cereus", 《VIROLOGICA SINICA》, vol. 30, pages 52 - 58, XP035450042, DOI: 10.1007/s12250-014-3529-4 * |
| OH H 等: "Isolation and characterization of Bacillus cereus bacteriophages from foods and soil", 《FOOD AND ENVIRONMENTAL VIROLOGY》, vol. 9, pages 260 - 269 * |
| 王琰 等: "蜡状芽孢杆菌群中规律成簇间隔短回文重复序列的生物信息学分析", 《中国生物工程杂志》, vol. 31, no. 7, pages 72 - 78 * |
| 郭廷仕 等: "蜡状芽孢杆菌噬菌体分型研究", 《 中华预防医学杂志》, vol. 25, no. 5, pages 316 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115927214A (zh) * | 2022-12-21 | 2023-04-07 | 暨南大学 | 基于双元系统高效改变噬菌体制剂宿主范围的方法及其应用 |
| CN115927214B (zh) * | 2022-12-21 | 2024-03-22 | 暨南大学 | 基于双元系统高效改变噬菌体制剂宿主范围的方法及其应用 |
| CN116656623A (zh) * | 2023-04-20 | 2023-08-29 | 暨南大学 | 两株具有特征分子靶标的蜡样芽胞杆菌广谱肌尾噬菌体dc1、dc2及其应用 |
| CN116656623B (zh) * | 2023-04-20 | 2024-03-22 | 暨南大学 | 两株具有特征分子靶标的蜡样芽孢杆菌广谱肌尾噬菌体dc1、dc2及其应用 |
| CN117004578A (zh) * | 2023-09-27 | 2023-11-07 | 深圳国家感染性疾病临床医学研究中心 | 一种高通量分离及纯化多宿主噬菌体的方法 |
| CN117004578B (zh) * | 2023-09-27 | 2024-03-08 | 深圳国家感染性疾病临床医学研究中心 | 一种高通量分离及纯化多宿主噬菌体的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114480299B (zh) | 2023-08-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN114480299B (zh) | 一种蜡样芽胞杆菌噬菌体及其应用 | |
| WO2005024005A1 (en) | Novel salmonella bacteriophage and uses thereof | |
| WO2022111287A1 (zh) | 降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇的菌株及应用 | |
| US10227570B2 (en) | Lactobacillus brevis bacteriophage Lac-BRP-1 and use thereof for inhibiting Lactobacillus brevis proliferation | |
| CN110205306B (zh) | 蜡样芽胞杆菌噬菌体、噬菌体组合物及抑菌制剂 | |
| CN111778216A (zh) | 一种地毯草黄单胞菌噬菌体及其组合物、试剂盒和应用 | |
| CN108699533B (zh) | 副溶血弧菌噬菌体Vib-PAP-1及其用于抑制副溶血弧菌增殖的用途 | |
| CN115612675A (zh) | 一株沙门氏菌噬菌体nct1及其应用 | |
| CN111778178B (zh) | 海洋灰平链霉菌hn60在抗细菌方面的应用 | |
| CN111139225B (zh) | 沙门氏菌噬菌体lpst144以及其裂解酶的抗菌应用 | |
| RU2412243C1 (ru) | Штамм бактериофага salmonella typhimurium s-394, обладающий литической активностью | |
| CN109517804B (zh) | 一种具有跨种裂解特性的拟态弧菌噬菌体oy-1、制备方法及其应用 | |
| CN114958779B (zh) | 一株能够裂解产气荚膜梭菌的噬菌体lpcpa6及应用 | |
| CN107164280B (zh) | 一株呕吐毒素降解菌及其应用 | |
| Han et al. | Isolation and Characterization of a Virulent Bacteriophage φPA-HF17 of Pseudomonas aeruginosa | |
| CN112522214B (zh) | 一株高裂解性铜绿假单胞菌噬菌体rdp-pa-20001及其应用 | |
| CN116790516B (zh) | 一种裂解溶藻细菌的噬菌体及其应用 | |
| CN114921419B (zh) | 一种鸭疫里氏杆菌噬菌体 | |
| CN109735506B (zh) | 李斯特菌噬菌体组合物及其应用 | |
| CN113637645B (zh) | 噬菌体VB_VpP_BT-1011、筛选方法和应用 | |
| CN114836330B (zh) | 一种蜡样芽孢杆菌的抑制物制备方法及应用 | |
| CN116656623B (zh) | 两株具有特征分子靶标的蜡样芽孢杆菌广谱肌尾噬菌体dc1、dc2及其应用 | |
| CN112391355B (zh) | 哈维氏弧菌高效裂解性噬菌体vB_VhaS-yong3及其应用 | |
| CN115418355B (zh) | 一种迟缓葡萄球菌噬菌体及其分离方法与应用 | |
| CN114231462B (zh) | 一种抑制耐药型食源性致病菌的活性菌株及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |