RU2412243C1 - Штамм бактериофага salmonella typhimurium s-394, обладающий литической активностью - Google Patents
Штамм бактериофага salmonella typhimurium s-394, обладающий литической активностью Download PDFInfo
- Publication number
- RU2412243C1 RU2412243C1 RU2009123017/10A RU2009123017A RU2412243C1 RU 2412243 C1 RU2412243 C1 RU 2412243C1 RU 2009123017/10 A RU2009123017/10 A RU 2009123017/10A RU 2009123017 A RU2009123017 A RU 2009123017A RU 2412243 C1 RU2412243 C1 RU 2412243C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bacteriophage
- salmonella
- strain
- salmonella typhimurium
- escherichia coli
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарной медицине, а именно к штаммам для создания профилактических и лечебных биологических препаратов против сальмонеллеза и других бактериальных инфекций. Штамм бактериофага Salmonella typhimurium S-394 депонирован в коллекции микроорганизмов Федерального государственного учреждения науки «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора (ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора) под номером Ph-1240. Штамм обладает поливалентной литической активностью по отношению к бактериям родов Escherichia coli, штаммам Salmonella ТА 1537 и Salmonella ТА 100 и штаммам Shigella sonnei 32 и Shigella flexneri Аd. При этом высокий урожай бактериофага S-394 можно получать на условно патогенном штамме Escherichia coli AB-259, что безопасно при масштабных культивированиях для создания препаратов для ветеринарии против Escherichia coli, Salmonella и Shigella, а также для уничтожения и предотвращения больничных инфекций. Изобретение обеспечивает более широкий спектр литической активности в отношении грамотрицательных патогенных микроорганизмов Escherichia coli, Salmonella и Shigella, обусловленный действием содержащегося в нем бактериолитического фермента. 4 табл.
Description
Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарной медицине, а именно к штаммам для создания профилактических и лечебных биологических препаратов против сальмонеллеза и других бактериальных инфекций, а также может быть использовано для борьбы с носительством возбудителей сальмонеллезных инфекций у животных, что является необходимым условием при производстве экологически чистых продуктов питания человека.
Патогенные микроорганизмы - основная причина многих заболеваний человека. До сих пор в борьбе с этими бактериями используют антибиотики, но высокая устойчивость микроорганизмов к ряду антибиотиков не дает ощутимых результатов.
Бактериофаги привлекают внимание ученых как новые антимикробные агенты, способные строго специфично воздействовать на определенные группы бактерий, снижая их численность на несколько порядков. Фаги строго специфичны к составу пептидогликанов клеточной стенки данной бактерии. На этой специфичности и базируется их возможное применение как терапевтических агентов для контроля широкого круга патогенов, таких как Escherichia coli, Salmonella, Shigella.
Известен штамм бактериофага Bacteriophagum salmonellae СФ-17, выделенного из сточных вод в г. С.-Петербурге и полученного селекцией его популяций выдержкой в течение 10-15 пассажей в присутствии 0,1 мг/мл метацида, 2,5 мг/мл ампициллина и 1 мг/мл хинозола (патент РФ №2080384, МПК C12N 7/00, опубл. 27.05.1997). Фаг Bacteriophagum salmonellae депонирован в Коллекции ГосНИИ особо чистых биопрепаратов под номером СФ-17. Спектр литической активности: бактериофаг лизировал 208 штаммов сальмонелл серологических групп А, В, С, D, Е, из которых 3 штамма принадлежали к группе А, 26 штаммов - к группе В, 10 штаммов - к группе С2, 21 штамм - к группе С1, 143 штамма - к группе D1, 5 штаммов - к группе E1. Диапазон специфичности: лизирует сальмонеллы различных серологических групп, не лизирует дизентерийные палочки (шигеллы Зонне, Флекснера), свежевыделенные и музейные штаммы кишечной палочки и других представителей нормальной микрофлоры. Не теряет активности в присутствии 1 мг/мл метацида, 2,5 мг/мл ампициллина, 1 мг/мл хинозола.
Однако штамм бактериофага Bacteriophagum salmonellae СФ-17 обладает недостаточно широким спектром литической активности, в частности не лизирует бактерии родов Escherichia coli и Shigella.
Известен штамм бактериофага Bacteriophagum salmonella IBP-1, обладающий лизирующей активностью по отношению к S.enteritidis (патент РФ №2342429, МПК C12N 7/00, опубл. 27.12.2008 г.). Штамм бактериофага Bacteriophagum salmonellae IBP-1 выделен из сточных вод гусеводческого хозяйства и депонирован в коллекции бактериофагов кафедры эпидемиологии ГОУ ВПО Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И.И.Мечникова (СПбГМА им. И.И.Мечникова) под №0048. Фаг обладает способностью лизировать 47% культур штамма S.enteritidis. Диапазон специфичности: лизирует S.enteritidis, не лизирует дизентерийные палочки (шигеллы Зонне, Флекснера), свежевыделенные и музейные штаммы кишечной палочки, синегнойной палочки и штаммы других представителей нормальной микрофлоры.
Однако штамм бактериофага Bacteriophagum salmonella IBP-1 также обладает недостаточно широким спектром литической активности, в частности не лизирует бактерии родов Escherichia coli и Shigella.
Наиболее близким аналогом (прототипом) является штамм бактериофага EPS7, обладающий литической поливалентной активностью по отношении к бактериям Salmonella typhimurium и Е. coli, выделенный южно-корейскими исследователями (Federation of European Microbiological Societies (FEMS) Microbiol. Lett. 289 (2008), 202-209). Существенной отличительной особенностью заявляемого бактериофага S-394 по сравнению с прототипом является более широкий спектр литической активности в отношении патогенных микроорганизмов.
Техническим результатом заявляемого изобретения является получение бактериофага Salmonella typhimurium S-394 с более широким спектром литической активности в отношении грамотрицательных патогенных микроорганизмов - Escherichia coli, Salmonella и Shigella, обусловленной действием содержащегося в нем бактериолитического фермента.
Указанный технический результат достигается получением штамма бактериофага Salmonella typhimurium S-394, который содержит бактериолитический фермент и обладает литической активностью по отношению к бактериям вида Escherichia coli, штаммам Salmonella typhimurium ТА 1537 и Salmonella typhimurium ТА 100 и штаммам Shigella sonnei 32 и Shigella flexneri Ad.
Заявляемый бактериофаг Salmonella typhimurium (авторское название S-394) выделен стандартным методом - путем высева образцов стоков в суспензию бактериальной культуры Salmonella typhimurium в L-бульоне (1% триптона, 0,5% дрожжевого гидролизата, 1% NaCl) с последующим выделением фага из единичных пятен лизиса на агаризованной поверхности (0,6% агар в L-бульоне).
Штамм был идентифицирован по морфологическим признакам (электронная микроскопия) и рестрикционному анализу ДНК. Показано, что данный бактериофаг относится к роду Caudovirales сем. Siphoviridae Т5-подобный фаг. Вирион бактериофага обладает бинальным типом симметрии, состоит из икосаэдрической головки и длинного хвостового отростка, диаметр головки составляет 75-80 нм, длина хвостовой части - 200-220 нм. Геном бактериофага представлен двуцепочечной ДНК с молекулярным весом около 112000. Плотность фага в CsCl - 1,5 г/см3.
Штамм бактериофага Salmonella typhimurium S-394 депонирован в коллекции микроорганизмов Федерального государственного учреждения науки «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора (ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора) под номером Ph-1240.
Исследование заявляемого бактериофага на инфекционность (литическую активность) осуществлялась по методике Миллера [Miller R.V. (1998) Methods for enumeration and characterization of bacteriophages from environmental samples, in Techniques in microbial ecology. pp.218-235]. Чувствительные штаммы определяли благодаря способности бактериофага образовывать негативные пятна лизиса на газонах из этих штаммов. В процессе работы отобрали и проанализировали 19 штаммов бактерий родов Escherichia, Salmonella, Shigella. Показано, что бактериофаг Salmonella typhimurium S-394 лизирует все 9 взятых штаммов Escherichia coli, 4 штамма Shigella подгруппы В и Д и 3 из 6 штаммов Salmonella typhimurium.
При посеве на газоне из чувствительной культуры в течение 18-20 часов культивирования при 37°С бактериофаг формирует негативные прозрачные округлые пятна лизиса, диаметр которых составляет от 1 до 3 мм.
Заявляемый бактериофаг S-394 сохраняет инфекционность при рН от 6,6 до 7,6, оптимальная температура для развития фага (инфекции) от 35 до 38°С. Для определения оптимальных условий культивирования бактериофага с получением максимального выхода фаговых частиц использовали среды с интервалом рН от 5.0 до 9.0, температуру инкубирования изменяли от 26 до 40°С.
В работе мы использовали ампициллин-устойчивые бактериальные культуры, поэтому были проведены эксперименты по сравнению литической активности бактериофага S-394 при развитии инфекции на антибиотик-устойчивых и чувствительных бактериальных культурах. Показано, что динамика развития бактериофага S-394 на Salmonella typhimurium TA1537 и Salmonella typhimurium ТА100 (25 мкг/мл ампициллина) незначительно отличается в обоих случаях (см. таблицу 1). Это подтверждает возможность применения фага S-394 для лизиса ампициллин-устойчивых бактериальных культур. Оптическая плотность (О.П.) суспензии бактерии определяется при длине волны 560 нм, титр бактериофага
| Таблица 1 | ||||||
| Динамика развития бактериофага S-394 на антибиотикоустойчивых и чувствительных бактериях | ||||||
| Бактерии-субстрат | 0 мин | 60 мин | 120 мин | |||
| О.П. | бое/мл | О.П. | бое/мл | О.П. | бое/мл | |
| E.coli АВ-259, контроль | 0,94 | 0 | 1,50 | 0 | 2,46 | 0 |
| E.coli АВ-259, образец 1 | 0,94 | 1.2×108 | 0,71 | 4.2×108 | 0,45 | 2.8×1010 |
| Salmonella typhimurium TA1537, контроль | 0,88 | 0 | 1,66 | 0 | 3,22 | 0 |
| Salmonella typhimurium ТА1537, образец 2 | 0,88 | 0.9×108 | 0,58 | 3.1×108 | 0,32 | 4.4×1010 |
| Salmonella typhimurium ТА100, контроль | 0,92 | 0 | 1,53 | 0 | 2,8 | 0 |
| Salmonella typhimurium ТА100, образец 3 | 0,92 | 1.1×108 | 0,61 | 4.7×108 | 0,29 | 3.2×1010 |
Контроль - 50 мл суспензии бактерий E.coli, Salmonella typhimurium TA1537, Salmonella typhimurium TA100; образец 1 - 50 мл суспензии бактерий E.coli +0,5 мл фаголизата S-394; образец 2 - 50 мл суспензии бактерий Salmonella typhimurium ТА1537+0,5 мл фаголизата S-394; образец 3 - 50 мл суспензии бактерий Salmonella typhimurium TA100+0,5 мл фаголизата S-394. Фаголизат с титром 1.2×1010 бое/мл.
При обработке фаговых частиц 0.5% и 1% растворами SDS инфекционность фага не изменяется, при прогреве 50°С 3 мин титр инфекционного фага не изменяется, при прогреве 70°С 3 мин титр инфекционного фага уменьшается в 10 раз, что видно из таблицы 2.
| Таблица 2 | ||
| Данные по исследованию инфекционной активности бактериофага S-394 | ||
| Образец | Проба №1 | Проба №2 |
| Контроль | 7,0×109 бое/мл | 4,0х107 бое/мл |
| 0,5% SDS | 7,0×109 бое/мл | 1,0х107 бое/мл |
| 1,0% SDS | 5,0×109 бое/мл | 1,0×107 бое/мл |
| 50°С, 3 мин | 4,0×109 бое/мл | 3,5×107 бое/мл |
| 70°С, 3 мин | 3,5×108 бое/мл | 6,0×106 бое/мл |
Бактериофаг S-394 размножали путем инфицирования бактерий Salmonella typhimurium или Escherichia coli AB-259, находящихся в логарифмической фазе роста в L-бульоне, с множественностью 0,1-1 фаговая частица на клетку, с дальнейшим инкубированием при 37°С, 180 об/мин, 16-20 часов. В обоих случаях урожай фага составляет 7,0 - 9,0×1010 бое/мл. Заявляемый бактериофаг S-394 характеризуется высокой урожайностью и скоростью роста.
Необходимо отметить, что высокий урожай бактериофага S-394 можно получать на условно патогенном штамме Escherichia coli AB-259, что безопасно при масштабных культивированиях для создания препаратов на основе этого бактериофага для ветеринарии против Escherichia coli, Salmonella, Shigella, а также для уничтожения и предотвращения больничных инфекций.
Хранение: фосфатный буфер рН 6.8 с 30% глицерина - температура хранения минус 64°С; лиофильное высушивание в сахарозо-желатиновой среде - температура хранения минус 20°С.
Расконсервация: инфицирование бактерий Salmonella typhimurium и Escherichia coli AB-259 в L-бульоне с высокой множественностью (8-20 фаговых частиц/клетка).
Применение: новый антимикробный агент, способный специфично воздействовать на определенные группы бактерий, для профилактики и лечения широкого круга заболеваний, вызываемых Escherichia coli, Salmonella, Shigella.
Пример. Исследование спектра антибактериальной литической активности бактериофага S-394
Штамм бактериофага S-394 обладает высокой литической активностью в отношении многих патогенных микроорганизмов. Лизис культуры интактным фагом определяли по наличию негативных пятен (бляшек) на газоне соответствующей бактериальной культуры. Бактериофаг хорошо инфицирует и бактерии, растущие в бульоне. Причем титр фаговых частиц в лизате достаточно высок - до 1010 фаговых частиц на миллилитр.
В таблице 3 приведены данные по исследованию активности бактериофагов, в том числе заявляемого S-394. Из таблицы 3 видно, что заявляемый бактериофаг S-394 инфицирует и разрушает бактерии нескольких родов Escherichia coli, Salmonella, Shigella, что не специфично для других фагов.
Заявляемый бактериофаг S-394 инфицирует и разрушает бактерии, находящиеся на разных стадиях роста. При инфицировании бактерий, находящихся в логарифмической стадии роста, наблюдается более быстрый и глубокий лизис бактерий (падение титра бактерий на два порядка за 30 мин), а при инфицировании бактерий, находящихся в стационарной фазе роста, титр бактерий уменьшается в 10 раз за 30 мин. В таблице 4 представлены данные по исследованию лизирующей активности заявляемого штамма бактериофага S-394 в отношении бактерий, находящихся в разных фазах роста.
Контроль - 15 мл суспензии бактерий E.coli + 1 мл буфера; образец 1 - 15 мл суспензии бактерий Е. coli + 1 мл фаголизата S-394; образец 2 - 15 мл суспензии бактерий E.coli + 1 мл фаголизата S-394; контроль - 15 мл суспензии бактерий Salmonella typhimurium + 1 мл буфера; образец 3 - 15 мл суспензии бактерий Salmonella typhimurium + 1 мл фаголизата S-394; образец 4 - 15 мл суспензии бактерий Salmonella typhimurium + 1 мл фаголизата S-394. Фаголизат с титром 1.2×1010 бое/мл.
Таким образом, приведенные выше экспериментальные данные (таблицы 1-4) подтверждают наличие у заявляемого бактериофага Salmonella typhimur S-394 более широкого спектра литической активности в отношении живых патогенных грамотрицательных бактерий, среди которых Escherichia coli, Salmonella, Shigella.
Лизис бактериальной культуры возможен и в логарифмической, и в стационарной фазах роста в отличие от известных аналогов и прототипа.
| Таблица 4 | ||||
| Данные по исследованию лизирующей активности заявляемого штамма | ||||
| Бактерии-субстрат | Оптическая плотность суспензии бактерии при длине волны 560 нм | |||
| 0 | 30 мин | 60 мин | 120 мин | |
| E.coli АВ-259, контроль | 0.91 | 1.55 | 2.08 | 2.94 |
| E.coli АВ-259, образец 1 | 0.91 | 0.41 | 0.35 | 0.28 |
| E.coli АВ-259, образец 2 | 4.96 | 3.44 | 2.36 | 1.27 |
| Salmonella typhimurium ТА100, контроль | 1.08 | 1.88 | 2.56 | 3.33 |
| Salmonella typhimurium ТА100, образец 3 | 1.08 | 0.94 | 0.33 | 0.21 |
| Salmonella typhimurium ТА100, образец 4 | 3,64 | 2,16 | 2,06 | 0,85 |
Claims (1)
- Штамм бактериофага Salmonella typhimurium S-394, обладающий литической активностью по отношению к бактериям вида Escherichia coli, штаммам Salmonella typhimurium ТА 1537 и Salmonella typhimurium ТА 100 и штаммам Shigella sonnei 32 и Shigella flexneri Ad., обусловленной действием содержащегося в нем бактериолитического фермента, и депонированный в коллекции микроорганизмов Федерального государственного учреждения науки «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора под номером Ph-1240.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009123017/10A RU2412243C1 (ru) | 2009-06-16 | 2009-06-16 | Штамм бактериофага salmonella typhimurium s-394, обладающий литической активностью |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009123017/10A RU2412243C1 (ru) | 2009-06-16 | 2009-06-16 | Штамм бактериофага salmonella typhimurium s-394, обладающий литической активностью |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2009123017A RU2009123017A (ru) | 2010-12-27 |
| RU2412243C1 true RU2412243C1 (ru) | 2011-02-20 |
Family
ID=44055253
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009123017/10A RU2412243C1 (ru) | 2009-06-16 | 2009-06-16 | Штамм бактериофага salmonella typhimurium s-394, обладающий литической активностью |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2412243C1 (ru) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2547584C2 (ru) * | 2012-12-05 | 2015-04-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Гидролаза пептидогликана, экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий гидролазу пептидогликана, бактерия-продуцент и способ микробиологического синтеза гидролазы пептидогликана |
| RU2573934C2 (ru) * | 2011-08-25 | 2016-01-27 | Протеон Фармасьютикалз С.А. | Способ получения штамма бактериофага, специфических штаммов бактериофагов и их применение |
| WO2019211635A1 (en) * | 2018-05-02 | 2019-11-07 | Jsc "Biochimpharm" | Antimicrobial composition and the use of thereof |
| WO2019211634A1 (en) * | 2018-05-02 | 2019-11-07 | Jsc "Biochimpharm" | Antimicrobial composition against gastrointestinal infections and the use of thereof |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112175928B (zh) * | 2020-10-13 | 2022-09-13 | 华中农业大学 | 一种源于沙门氏菌噬菌体基因编码的蛋白在作为革兰氏阴性菌裂解酶中的应用 |
-
2009
- 2009-06-16 RU RU2009123017/10A patent/RU2412243C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| JUNWOO HONG et. al. Identification of host receptor and receptor-binding module of a newly sequenced T5-like phage EPS7. FEMS Microbiology Letters, 2008, v.289, p.202-209. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2573934C2 (ru) * | 2011-08-25 | 2016-01-27 | Протеон Фармасьютикалз С.А. | Способ получения штамма бактериофага, специфических штаммов бактериофагов и их применение |
| RU2547584C2 (ru) * | 2012-12-05 | 2015-04-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Гидролаза пептидогликана, экспрессионная плазмида, содержащая фрагмент днк, кодирующий гидролазу пептидогликана, бактерия-продуцент и способ микробиологического синтеза гидролазы пептидогликана |
| WO2019211635A1 (en) * | 2018-05-02 | 2019-11-07 | Jsc "Biochimpharm" | Antimicrobial composition and the use of thereof |
| WO2019211634A1 (en) * | 2018-05-02 | 2019-11-07 | Jsc "Biochimpharm" | Antimicrobial composition against gastrointestinal infections and the use of thereof |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2009123017A (ru) | 2010-12-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7674467B2 (en) | Salmonella bacteriophage and uses thereof | |
| Sasikala et al. | Characterization of potential lytic bacteriophage against Vibrio alginolyticus and its therapeutic implications on biofilm dispersal | |
| Easwaran et al. | Characterization of bacteriophage pAh-1 and its protective effects on experimental infection of Aeromonas hydrophila in Zebrafish (Danio rerio) | |
| US10265356B2 (en) | Enteroinvasive E. coli bacteriophage Esc-COP-4 and use thereof for inhibiting proliferation of enteroinvasive E. coli | |
| Yang et al. | Therapeutic effect of the YH6 phage in a murine hemorrhagic pneumonia model | |
| RU2412243C1 (ru) | Штамм бактериофага salmonella typhimurium s-394, обладающий литической активностью | |
| Zhou et al. | Broad host range phage vB-LmoM-SH3-3 reduces the risk of Listeria contamination in two types of ready-to-eat food | |
| US8821855B2 (en) | Methods for isolating phage and for controlling microorganism populations with the phage | |
| Ribeiro et al. | Bacteriophage isolated from sewage eliminates and prevents the establishment of Escherichia coli biofilm | |
| Oh et al. | Isolation and characterization of Bacillus cereus bacteriophages from foods and soil | |
| Rahimi-Midani et al. | Potential use of newly isolated bacteriophage as a biocontrol against Acidovorax citrulli | |
| Li et al. | Characterization and whole-genome sequencing of broad-host-range Salmonella-specific bacteriophages for bio-control | |
| CN114480299A (zh) | 一种蜡样芽胞杆菌噬菌体及其应用 | |
| Karamoddini et al. | Antibacterial Efficacy of Lytic Bacteriophages against Antibiotic‐Resistant Klebsiella Species | |
| US8440446B2 (en) | Bacteriophage strains for the treatment of bacterial infections, especially drug resistant strains of the genus Enterococcus | |
| Majdani et al. | Isolation and characterization of lytic bacteriophages against Pseudomonas aeruginosa isolates from human infections in the north-west of Iran | |
| Maharjan et al. | Isolation and characterization of lytic bacteriophage against multi-drug resistant Pseudomonas aeruginosa | |
| Ahiwale et al. | Liquid based formulations of bacteriophages for the management of waterborne bacterial pathogens in water microcosms | |
| Askora et al. | A lytic bacteriophage as a biocontrol for some enteropathogenic and enterohemorrhagic Escherichia coli strains of zoonotic risk in Egypt | |
| Flegel et al. | Evidence for phage-induced virulence in the shrimp pathogen Vibrio harveyi | |
| Leta et al. | Assessment of therapeutic potential of bacteriophages to control Escherichia coli infection in Swiss mice model | |
| Saleh | Bacteriophage as bio-preserving to enhance shelf life of fruit and vegetables. | |
| El-Wafai et al. | Controlling of multidrug resistant Aeromonas hydrophila infected Nile tilapia (Oreochromis niloticus) using Ah01 and Ah02 virulent bacteriophages isolates | |
| Sheng et al. | Isolation and rapid genetic characterization of a novel T4-like bacteriophage | |
| Hussein et al. | Application of salmonella phage cocktail to control salmonella typhimurium in vitro |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner |