CN114469855A - 一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术 - Google Patents
一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114469855A CN114469855A CN202210053057.2A CN202210053057A CN114469855A CN 114469855 A CN114469855 A CN 114469855A CN 202210053057 A CN202210053057 A CN 202210053057A CN 114469855 A CN114469855 A CN 114469855A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mesenchymal stem
- umbilical cord
- cord mesenchymal
- stem cells
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 83
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 title claims abstract description 70
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 title claims abstract description 56
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 52
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 32
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 21
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims abstract description 16
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 11
- 229920002385 Sodium hyaluronate Polymers 0.000 claims abstract description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 229940010747 sodium hyaluronate Drugs 0.000 claims abstract description 9
- YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N sodium;(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2-[(2s,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2- Chemical compound [Na+].CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims abstract description 8
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 claims abstract description 6
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 230000003321 amplification Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 23
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 18
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 claims description 16
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims description 14
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims description 14
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims description 14
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 13
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 13
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 13
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 11
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 10
- 239000002699 waste material Substances 0.000 claims description 10
- 238000007664 blowing Methods 0.000 claims description 9
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 9
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 claims description 8
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 claims description 8
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 8
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 claims description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 7
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 101500025419 Homo sapiens Epidermal growth factor Proteins 0.000 claims description 6
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 6
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 claims description 6
- 229940116978 human epidermal growth factor Drugs 0.000 claims description 6
- 239000003055 low molecular weight heparin Substances 0.000 claims description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- GVUGOAYIVIDWIO-UFWWTJHBSA-N nepidermin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(C)C)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 GVUGOAYIVIDWIO-UFWWTJHBSA-N 0.000 claims description 6
- 108700005467 recombinant KCB-1 Proteins 0.000 claims description 6
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 claims description 5
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 3
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 claims description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 3
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 3
- 230000003352 fibrogenic effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims description 3
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 3
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims description 3
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 claims description 3
- 238000005086 pumping Methods 0.000 claims description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 3
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 claims description 3
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 claims description 2
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 claims description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 abstract description 5
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 abstract description 4
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 abstract description 4
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 abstract description 4
- 206010051246 Photodermatosis Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000008845 photoaging Effects 0.000 abstract description 3
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 abstract description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 abstract description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 abstract description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 abstract description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 26
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 206010008570 Chloasma Diseases 0.000 description 3
- 208000003351 Melanosis Diseases 0.000 description 3
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 3
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 238000005282 brightening Methods 0.000 description 2
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000003716 rejuvenation Effects 0.000 description 2
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 2
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 235000009161 Espostoa lanata Nutrition 0.000 description 1
- 240000001624 Espostoa lanata Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 208000012641 Pigmentation disease Diseases 0.000 description 1
- 206010050637 Skin tightness Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000002293 adipogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002458 cell surface marker Substances 0.000 description 1
- 230000002648 chondrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 210000005257 cortical tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 210000004177 elastic tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000005562 fading Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 1
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000002188 osteogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000010902 straw Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 229960001322 trypsin Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000037331 wrinkle reduction Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/18—Antioxidants, e.g. antiradicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0656—Adult fibroblasts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/32—Amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/11—Epidermal growth factor [EGF]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/115—Basic fibroblast growth factor (bFGF, FGF-2)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/90—Polysaccharides
- C12N2501/91—Heparin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
- C12N2506/13—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from connective tissue cells, from mesenchymal cells
- C12N2506/1346—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from connective tissue cells, from mesenchymal cells from mesenchymal stem cells
- C12N2506/1369—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from connective tissue cells, from mesenchymal cells from mesenchymal stem cells from blood-borne mesenchymal stem cells, e.g. MSC from umbilical blood
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术，通过体外培养脐带间充质干细胞定向诱导分化为成纤维细胞，在移植皮肤组织时加入透明质酸钠以固定细胞定植防止游走，同时加入脐带间充质干细胞外泌体进行多肽蛋白信号的传递，活化自体血CGF血清做为脐带间充质干细胞营养刺激增殖扩增液，所述的配方组合保证脐带间充质干细胞移植到皮肤组织里有充足的蛋白营养，帮助间充质干细胞在皮肤组织内定植、增殖、更新诱导分化为功能型细胞增加皮肤组织中胶原蛋白含量，改善面部皮肤组织年青化进程，抵抗岁月衰老，应用本发明可以达到面部皮肤年轻化的目的，对面部皮肤组织皱纹淡化，肌肤紧致、光老化修复、亮肤美白。
Description
技术领域
本发明涉及一种干细胞诱导分化为成纤维细胞的组合应用技术，特别涉及一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术，属于生物干细胞细胞分离培养技术领域。
背景技术
脐带间充质干细胞，是一类其有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的原始细胞群体，是可以分化成各种组织器官的祖细胞，成骨、成软骨、成脂，它具有自我更新、分化潜能、低免疫原性和良好的组织融合性等特点，被医学界称为“多能干细胞”，在全球干细胞总市场中，脐带干细胞培养，应用，占据着90％的份额，整体来看，干细胞技术的应用前景广阔，脐带间充质干细胞作为干细胞最重要的一员。脐带是生产后废弃物，无医学伦理的限制，脐带可以存储，破碎后分离脐带干细胞培养。
脐带间充质干细胞培养及存储都是比较成熟的技术，现在有的常规培养技术，把培养好的脐带间充质直接用于临床，在大部分临床慢性病中应用效果良好，但在面部皮肤组织抗衰老年轻化中应用脐带间充质干细胞时，不能达到抗衰老的结果。现在有细胞培养应用技术还不能满足临床上要求。而且对面部皱纹，纹理，色素沉着，黄褐斑，皮肤紧致等面部明显衰老的特征，基本无效。应用本发明可以达到面部皮肤年轻化的目的，对面部皮肤组织皱纹淡化，肌肤紧致、光老化修复、亮肤美白，色素黄褐斑的淡化都有明显的作用和效果，为美容整形爱美人士提供新技术产品。
间充质干细胞对面部皮肤组织无效的主要原因有三项：1.是面部皮下组织微循环血管发达，血运丰富，大部分间充质干细胞进入皮下组织后随着血运循环进行游走，大部分干细胞没有充足的时间定植归巢在皮肤组织里。
间充质干细胞到达皮肤组织里需要诱导分化为成纤维细胞，成纤维细胞才能发挥其细胞功能性，才能分泌生产各种纤维束，如Ⅰ型胶原Ⅲ型胶原蛋白和弹力纤维，透明质酸等抗皮肤衰老蛋白物质，这些抗皮肤衰老蛋白物质才能使皮肤组织年轻化，抵抗衰老，现有的间充质干细胞移植到皮肤组织里后，大部分细胞没有被诱导分化为成纤维细胞，因为间充质干细胞有多项分化的潜能，到达皮质组织里后能够分化多种功能性细胞，没有专一性，所以没有明显效果和作用。
间充质干细胞进入皮质组织后，没有很好营养供给也会影响间充质干细胞的归巢性，增殖能力和诱导分化能力，外泌体蛋白信号分泌不足，导致脐带间充质干细胞自我更新增殖分化能力减弱，细胞衰老。
发明内容
本发明的目的在于提供一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术，包括以下内容：
S1：P1代脐带间充质干细胞2×106接种于T85细胞培养瓶中，加入定向诱导分化为成纤维细胞完全培养基20mlDMEM-F12培养液，进行成纤维细胞诱导，每天显微镜下观察，第三天细胞密度大于80％时，用0.25％胰蛋白酶消化传代，一瓶细胞分三瓶细胞传P2代；
S2：P2代脐带间充质干细胞2×106接种于T85细胞培养瓶中，加入定向诱导分化为成纤维细胞完全培养基20mlDMEM-F12培养液(含9％FBS，1000u/ml庆大霉素，100u/ml链霉素、重组人碱性成纤维细胞生长因子300u/ml、低分子肝素5u/ml、人表皮生长因子10u/ml0.5mg/ml脯氨酸)进行成纤维细胞诱导,置于37℃，5％的CO2培养箱培养，每天显微镜下观察，第三天细胞密度大于80％时，用0.25％胰蛋白酶消化传代，3瓶细胞分9瓶细胞传P3代。
S3：P3代脐带间充质干细胞，置于37℃，5％的CO2培养箱培养，培养三天后用定向诱导分化为成纤维细胞完全培养基培养细胞至80％一90％融合时，用0.25％胰蛋白酶消化1瓶脐带间充质干细胞，上流式细胞仪检测细胞表面标志物，诱导细胞向成纤维细胞分化，免疫组织化学检测I型胶原的表达，脐带间充质干细胞诱导成纤维细胞完成。用0.25％胰蛋白酶消化P3代脐带间充质干细胞诱导成纤维细胞9瓶。收获脐带间充质干细胞诱导的成纤维细胞4×107数量，置入50ml离心管中用0.9％生理盐水进行吹打清洗，配平上离心机3000转10分钟，弃上清，细胞沉淀于瓶底用生理盐水悬浮，清洗两遍。
取出离心管去上清，在用3ml浓缩的脐带间充质干细胞外泌体液重新悬浮间充质诱导分化的成纤维细胞4×107吹散，过200目细胞筛，备用。
S4：收集P1-P3阶段的脐带间充质干细胞培养过程的换下来的废液，加入5％医用活性炭进行吸附酚红和内毒素，轻轻摇晃5分钟，室温下放置2个小时，置于50ml注射器中，注射器出药口装上0.22um一次性针头过滤器，过滤出活性炭，把过滤出来的液体分别装到15ml离心管中，把装完干细胞废液的离心管放入到超速离心机中，用电子天平配平后，5万转离心2小时，去上清至瓶内1ml处，把瓶底沉淀吹散在1ml溶液中，此时液体为间充质干细胞外泌体，收集3只15ml离心管间充质干细胞外泌体共计3ml溶液，用于悬浮脐带间充质干细胞；
S5：CGF采集管抽取移植者静脉外周血4管，收集全血30ml，四个CGF采集管离心15分钟，3500r/min，弃上清至分离胶上2ml处，用巴氏滴管吹打分离胶上剩下的上清液，吹打分离胶表面白膜层，将分离胶表面上黏附的白膜层完全吹散在血清当中，使其清澈的血清变的浑浊，再将4瓶浑浊的血浆收集到一个15ml离心管中，在将装有富血小板、白细胞、单个核细胞的血浆的15ml离心管，上离心机3700/min，15分钟，取出15ml离心管弃上清至到3ml处，保留3ml浓缩的自体血清，用吸管把15ml离心管瓶底沉淀物吹散在3ml血清中，并进行活化处理，活化后CGF血清做为脐带间充质干细胞营养刺激增殖扩增液，保证脐带间充质干细胞移植到皮肤组织里有充足的蛋白营养；
S6：将自体血CGF加入到间充质干细胞诱导的成纤维细胞瓶中，与成纤维细胞、间充质干细胞外泌体、三者用滴管轻轻吹打混匀，在将混合好的的细胞液抽到20ml注射中，注射器出药口装上两通连接器，再将装有2.5ml透明质酸钠注射器连接到两通上，将2.5ml透明质酸钠推注到20ml注射器中，拔掉两通上的2.5ml注射器，两通上装上新的20ml注射器，将混合在一起的成纤维细胞液在两个20ml注射里来回推动数下，让溶液完全混匀，拔掉一个空的20ml注射器，用小白帽封口。
通过以上操作，制备出8.5ml(4×107)成纤维面部皮肤脐带间充质干细胞诱导分化的成纤维细胞组合混合注射液。
作为本发明的一种优选技术方案，所述DMEM-F12培养液含9％FBS，1000u/ml庆大霉素，100u/ml链霉素、重组人碱性成纤维细胞生长因子300u/ml、低分子肝素5u/ml、人表皮生长因子10u/ml0.5mg/ml脯氨酸。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1.本发明一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术，通过体外培养脐带间充质干细胞定向诱导分化为成纤维细胞，在移植皮肤组织时加入透明质酸钠以固定细胞定植防止游走，同时加入脐带间充质干细胞外泌体进行多肽蛋白信号的传递，活化自体血CGF血清做为脐带间充质干细胞营养刺激增殖扩增液，保证脐带间充质干细胞移植到皮肤组织里有充足的蛋白营养，帮助间充质干细胞在皮肤组织内定植、增殖、更新诱导分化为功能型细胞增加皮肤组织中胶原蛋白含量，改善面部皮肤组织年青化进程，抵抗岁月衰老，应用本发明可以达到面部皮肤年轻化的目的，对面部皮肤组织皱纹淡化，肌肤紧致、光老化修复、亮肤美白，色素黄褐斑的淡化都有明显的作用和效果，为美容整形爱美人士提供新技术产品。
附图说明
图1为本发明P2代脐带间充质干细胞显微放大图；
图2为本发明P3代脐带间充质干细胞显微放大图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1-2，本发明提供了一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术的技术方案：
实验材料：
器材：15ml锥形离心管、CGF采集管、透明质酸钠、T75培养瓶、T85培养瓶、DMEM-F12培养液(FBS)胎牛血清、链霉素、庆大霉素、重组人碱性成纤维细胞生长因子、低分子肝素、人表皮生长因、脯氨酸、胰蛋白酶、0.9％生理盐水、吸管、两通、无菌干燥注射器、无菌棉球、橡皮止血带、水平式离心机、超速离心机、生物显微镜、CO2培养箱、多针头多点注射仪、VISA面部皮肤检测仪、流式血细胞分析仪。
1.取新鲜健康脐带，用0.9％生理盐水冲洗干净后，用剪刀镊子剔去血管和表皮，剥出里面的华氏胶组织，将所得组织充分剪碎至1mm大小，用巴氏滴灌吸取1ml华氏胶组织播种于T75培养瓶内，前后左右间距5mm，置于37℃，5％的CO2培养箱培养，第二天加入5ML完全培养基DMEM-F12培养液(含9％FBS，100u/ml链霉素，1000u/ml庆大霉素)。脐带组织培养7天后，可见有部分细胞从组织块周围爬出，形态呈细小的梭形，14天后，细胞开始迅速增殖，形成大小不等的细胞集落，待细胞长满后，用0.25％胰蛋白酶消化传代。
2.P1代脐带间充质干细胞2×106接种于T85细胞培养瓶中，加入定向诱导分化为成纤维细胞完全培养基20mlDMEM-F12培养液，进行成纤维细胞诱导，每天显微镜下观察，第三天细胞密度大于80％时，用0.25％胰蛋白酶消化传代，一瓶细胞分三瓶细胞传P2代；
3.P2代脐带间充质干细胞2×106接种于T85细胞培养瓶中，加入定向诱导分化为成纤维细胞完全培养基20mlDMEM-F12培养液(含9％FBS，1000u/ml庆大霉素，100u/ml链霉素、重组人碱性成纤维细胞生长因子300u/ml、低分子肝素5u/ml、人表皮生长因子10u/ml0.5mg/ml脯氨酸)进行成纤维细胞诱导,置于37℃，5％的CO2培养箱培养，每天显微镜下观察，第三天细胞密度大于80％时，用0.25％胰蛋白酶消化传代，3瓶细胞分9瓶细胞传P3代。
4.P3代脐带间充质干细胞，置于37℃，5％的CO2培养箱培养，培养三天后用定向诱导分化为成纤维细胞完全培养基培养细胞至80％一90％融合时，用0.25％胰蛋白酶消化1瓶脐带间充质干细胞，上流式细胞仪检测细胞表面标志物，诱导细胞向成纤维细胞分化，免疫组织化学检测I型胶原的表达，脐带间充质干细胞诱导成纤维细胞完成。用0.25％胰蛋白酶消化P3代脐带间充质干细胞诱导成纤维细胞9瓶。收获脐带间充质干细胞诱导的成纤维细胞4×107数量，置入50ml离心管中用0.9％生理盐水进行吹打清洗，配平上离心机3000转10分钟，弃上清，细胞沉淀于瓶底用生理盐水悬浮，清洗两遍。
取出离心管去上清，在用3ml浓缩的脐带间充质干细胞外泌体液重新悬浮间充质诱导分化的成纤维细胞4×107吹散，过200目细胞筛，备用。
5.收集P1-P3阶段的脐带间充质干细胞培养过程的换下来的废液，加入5％医用活性炭进行吸附酚红和内毒素，轻轻摇晃5分钟，室温下放置2个小时，置于50ml注射器中，注射器出药口装上0.22um一次性针头过滤器，过滤出活性炭，把过滤出来的液体分别装到15ml离心管中，把装完干细胞废液的离心管放入到超速离心机中，用电子天平配平后，5万转离心2小时，去上清至瓶内1ml处，把瓶底沉淀吹散在1ml溶液中，此时液体为间充质干细胞外泌体，收集3只15ml离心管间充质干细胞外泌体共计3ml溶液，用于悬浮脐带间充质干细胞；
6.CGF采集管抽取移植者静脉外周血4管，收集全血30ml，四个CGF采集管离心15分钟，3500r/min，弃上清至分离胶上2ml处，用巴氏滴管吹打分离胶上剩下的上清液，吹打分离胶表面白膜层，将分离胶表面上黏附的白膜层完全吹散在血清当中，使其清澈的血清变的浑浊，再将4瓶浑浊的血浆收集到一个15ml离心管中，在将装有富血小板、白细胞、单个核细胞的血浆的15ml离心管，上离心机3700/min，15分钟，取出15ml离心管弃上清至到3ml处，保留3ml浓缩的自体血清，用吸管把15ml离心管瓶底沉淀物吹散在3ml血清中，并进行活化处理，活化后CGF血清做为脐带间充质干细胞营养刺激增殖扩增液，保证脐带间充质干细胞移植到皮肤组织里有充足的蛋白营养；
7.将自体血CGF加入到间充质干细胞诱导的成纤维细胞瓶中，与成纤维细胞、间充质干细胞外泌体、三者用滴管轻轻吹打混匀，在将混合好的的细胞液抽到20ml注射中，注射器出药口装上两通连接器，再将装有2.5ml透明质酸钠注射器连接到两通上，将2.5ml透明质酸钠推注到20ml注射器中，拔掉两通上的2.5ml注射器，两通上装上新的20ml注射器，将混合在一起的成纤维细胞液在两个20ml注射里来回推动数下，让溶液完全混匀，拔掉一个空的20ml注射器，用小白帽封口。
通过以上操作，制备出8.5ml(4×107)成纤维面部皮肤脐带间充质干细胞诱导分化的成纤维细胞组合混合注射液。
使用多针头多点注射仪进行面部真皮层平铺注射；一个月后用美国VISA面部皮肤检测仪，做面部皮肤注射前后对比，观察有效性。
在本发明的描述中，需要理解的是，指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。
在本发明中，除非另有明确的规定和限定，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或成一体；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通或两个元件的相互作用关系，除非另有明确的限定，对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (2)
1.一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术，其特征在于，包括以下内容：
S1：P1代脐带间充质干细胞2×106接种于T85细胞培养瓶中，加入定向诱导分化为成纤维细胞完全培养基20ml DMEM-F12培养液，进行成纤维细胞诱导，每天显微镜下观察，第三天细胞密度大于80％时，用0.25％胰蛋白酶消化传代，一瓶细胞分三瓶细胞传P2代；
S2：P2代脐带间充质干细胞2×106接种于T85细胞培养瓶中，加入定向诱导分化为成纤维细胞完全培养基20mlDMEM-F12培养液(含9％FBS，1000u/ml庆大霉素，100u/ml链霉素、重组人碱性成纤维细胞生长因子300u/ml、低分子肝素5u/ml、人表皮生长因子10u/ml 0.5mg/ml脯氨酸)进行成纤维细胞诱导,置于37℃，5％的CO2培养箱培养，每天显微镜下观察，第三天细胞密度大于80％时，用0.25％胰蛋白酶消化传代，3瓶细胞分9瓶细胞传P3代。
S3：P3代脐带间充质干细胞，置于37℃，5％的CO2培养箱培养，培养三天后用定向诱导分化为成纤维细胞完全培养基培养细胞至80％一90％融合时，用0.25％胰蛋白酶消化1瓶脐带间充质干细胞，上流式细胞仪检测细胞表面标志物，诱导细胞向成纤维细胞分化，免疫组织化学检测I型胶原的表达，脐带间充质干细胞诱导成纤维细胞完成，用0.25％胰蛋白酶消化P3代脐带间充质干细胞诱导成纤维细胞9瓶，收获脐带间充质干细胞诱导的成纤维细胞4×107数量，置入50ml离心管中用0.9％生理盐水进行吹打清洗，配平上离心机3000转10分钟，弃上清，细胞沉淀于瓶底用生理盐水悬浮，清洗两遍。
取出离心管去上清，在用3ml浓缩的脐带间充质干细胞外泌体液重新悬浮间充质诱导分化的成纤维细胞4×107吹散，过200目细胞筛，备用。
S4：收集P1-P3阶段的脐带间充质干细胞培养过程的换下来的废液，加入5％医用活性炭进行吸附酚红和内毒素，轻轻摇晃5分钟，室温下放置2个小时，置于50ml注射器中，注射器出药口装上0.22um一次性针头过滤器，过滤出活性炭，把过滤出来的液体分别装到15ml离心管中，把装完干细胞废液的离心管放入到超速离心机中，用电子天平配平后，5万转离心2小时，去上清至瓶内1ml处，把瓶底沉淀吹散在1ml溶液中，此时液体为间充质干细胞外泌体，收集3只15ml离心管间充质干细胞外泌体共计3ml溶液，用于悬浮脐带间充质干细胞；
S5：CGF采集管抽取移植者静脉外周血4管，收集全血30ml，四个CGF采集管离心15分钟，3500r/min，弃上清至分离胶上2ml处，用巴氏滴管吹打分离胶上剩下的上清液，吹打分离胶表面白膜层，将分离胶表面上黏附的白膜层完全吹散在血清当中，使其清澈的血清变的浑浊，再将4瓶浑浊的血浆收集到一个15ml离心管中，在将装有富血小板、白细胞、单个核细胞的血浆的15ml离心管，上离心机3700/min，15分钟，取出15ml离心管弃上清至到3ml处，保留3ml浓缩的自体血清，用吸管把15ml离心管瓶底沉淀物吹散在3ml血清中，并进行活化处理，活化后CGF血清做为脐带间充质干细胞营养刺激增殖扩增液，保证脐带间充质干细胞移植到皮肤组织里有充足的蛋白营养；
S6：将自体血CGF加入到间充质干细胞诱导的成纤维细胞瓶中，与成纤维细胞、间充质干细胞外泌体、三者用滴管轻轻吹打混匀，在将混合好的的细胞液抽到20ml注射中，注射器出药口装上两通连接器，再将装有2.5ml透明质酸钠注射器连接到两通上，将2.5ml透明质酸钠推注到20ml注射器中，拔掉两通上的2.5ml注射器，两通上装上新的20ml注射器，将混合在一起的成纤维细胞液在两个20ml注射里来回推动数下，让溶液完全混匀，拔掉一个空的20ml注射器，用小白帽封口。
通过以上操作，制备出8.5ml(4×107)成纤维面部皮肤脐带间充质干细胞诱导分化的成纤维细胞组合混合注射液。
2.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术，其特征在于：所述DMEM-F12培养液含9％FBS，1000u/ml庆大霉素，100u/ml链霉素、重组人碱性成纤维细胞生长因子300u/ml、低分子肝素5u/ml、人表皮生长因子10u/ml 0.5mg/ml脯氨酸。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210053057.2A CN114469855A (zh) | 2022-01-18 | 2022-01-18 | 一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210053057.2A CN114469855A (zh) | 2022-01-18 | 2022-01-18 | 一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114469855A true CN114469855A (zh) | 2022-05-13 |
Family
ID=81511203
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210053057.2A Pending CN114469855A (zh) | 2022-01-18 | 2022-01-18 | 一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114469855A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115105494A (zh) * | 2022-07-27 | 2022-09-27 | 西安臻融生物科技有限公司 | 一种有美白功效的外泌体包裹的光甘草定及其制备方法和应用 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107349220A (zh) * | 2017-07-26 | 2017-11-17 | 深圳市泰华细胞工程有限公司 | 一种包含成纤维细胞外泌体的制剂及其用途 |
| CN107854418A (zh) * | 2017-11-10 | 2018-03-30 | 南京九圣生物科技股份有限公司 | 一种人脐带间充质干细胞外泌体外用乳霜及其制备方法 |
| CN109172859A (zh) * | 2018-09-06 | 2019-01-11 | 上海长海医院 | 人干细胞来源外泌体复合外源性透明质酸在制备皮肤创面缺损修复药物或材料中的应用 |
| CN110551683A (zh) * | 2019-08-27 | 2019-12-10 | 西安艾尔菲生物科技有限公司 | 人成纤维细胞无血清培养基和制备方法及人成纤维细胞无血清调节培养液的获取方法 |
| CN111040984A (zh) * | 2018-10-15 | 2020-04-21 | 美奇创新生物科技(北京)有限公司 | 脐带间充质干细胞诱导分化形成皮肤成纤维细胞的方法 |
| WO2020130800A1 (en) * | 2018-12-21 | 2020-06-25 | Cytonex Sdn. Bhd. | Stem cell conditioned media |
| CN112587720A (zh) * | 2021-01-06 | 2021-04-02 | 浙江卫未生物医药科技有限公司 | 一种cgf和脐带间充质干细胞外泌体混合物、制备及应用 |
-
2022
- 2022-01-18 CN CN202210053057.2A patent/CN114469855A/zh active Pending
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107349220A (zh) * | 2017-07-26 | 2017-11-17 | 深圳市泰华细胞工程有限公司 | 一种包含成纤维细胞外泌体的制剂及其用途 |
| CN107854418A (zh) * | 2017-11-10 | 2018-03-30 | 南京九圣生物科技股份有限公司 | 一种人脐带间充质干细胞外泌体外用乳霜及其制备方法 |
| CN109172859A (zh) * | 2018-09-06 | 2019-01-11 | 上海长海医院 | 人干细胞来源外泌体复合外源性透明质酸在制备皮肤创面缺损修复药物或材料中的应用 |
| CN111040984A (zh) * | 2018-10-15 | 2020-04-21 | 美奇创新生物科技(北京)有限公司 | 脐带间充质干细胞诱导分化形成皮肤成纤维细胞的方法 |
| WO2020130800A1 (en) * | 2018-12-21 | 2020-06-25 | Cytonex Sdn. Bhd. | Stem cell conditioned media |
| CN110551683A (zh) * | 2019-08-27 | 2019-12-10 | 西安艾尔菲生物科技有限公司 | 人成纤维细胞无血清培养基和制备方法及人成纤维细胞无血清调节培养液的获取方法 |
| CN112587720A (zh) * | 2021-01-06 | 2021-04-02 | 浙江卫未生物医药科技有限公司 | 一种cgf和脐带间充质干细胞外泌体混合物、制备及应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 杨一 等: "人脐带间充质干细胞体外诱导分化为成纤维细胞", 《中国组织工程研究》 * |
| 詹小舒等: "犬脐带间充质干细胞来源外泌体修复皮肤创伤", 《中国组织工程研究》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115105494A (zh) * | 2022-07-27 | 2022-09-27 | 西安臻融生物科技有限公司 | 一种有美白功效的外泌体包裹的光甘草定及其制备方法和应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20190175787A1 (en) | Reparative Cell Isolation and Delivery | |
| US20130034524A1 (en) | Non-Enzymatic Method for Harvesting Adipose-Derived Stromal Cells and Adipose-Derived Stem Cells from Fat and Lipo-Aspirate | |
| KR20100065338A (ko) | 인간 또는 동물 배아에서 중간엽 줄기세포를 추출 및 그 분비물을 추출하는 방법 | |
| CN108004207B (zh) | 从脂肪中获取大量脂肪间充质干细胞的方法 | |
| CN107224614A (zh) | 一种富含细胞因子的脂肪源性基质细胞复合移植材料的制备及其临床应用 | |
| US10329533B2 (en) | Regenerative cell and adipose-derived stem cell processing system and method | |
| CN104622771A (zh) | 一种含自体脂肪干细胞的生物美容面膜的制备方法及其产品 | |
| CN110129265A (zh) | 一种脐带间充质干细胞外泌体、制备方法及在化妆品中的应用 | |
| US11766459B2 (en) | System and methods for preparation of adipose-derived stem cells | |
| CN106367389A (zh) | 一种人脐带间充质干细胞因子的制备方法及应用 | |
| CN107858329B (zh) | 从脂肪中分离脂肪间充质干细胞的方法和使用的试液 | |
| CN108865986B (zh) | 用于修复关节软骨损伤/缺损的间充质干细胞制剂及其制备方法和应用 | |
| CN110038165B (zh) | 一种富集高活性脂肪颗粒细胞和脂肪干细胞的脂肪移植物及其制备方法和应用 | |
| CN110129392A (zh) | 一种脐带间充质干细胞因子的制备方法和用于制备干细胞精华液的用途 | |
| EP3772256A1 (en) | System and methods for preparation of adipose-derived stem cells | |
| CN110507597A (zh) | 一种组合物及其制备方法、应用 | |
| CN111826343A (zh) | 一种增强诱导软骨分化的细胞培养液、方法及应用 | |
| CN110693911A (zh) | 经血源性子宫内膜干细胞制剂及其制备方法和应用 | |
| CN114469855A (zh) | 一种人脐带间充质干细胞诱导分化为成纤维细胞组合应用技术 | |
| CN207452106U (zh) | 用于人体抽脂之双通道脂肪源性原代干细胞采集分离系统 | |
| CN114832015A (zh) | 一种基于prp与干细胞外泌体的面部修复注射剂及其制备方法 | |
| CN107898812A (zh) | 一种基于脐带干细胞及活性成分的软骨损伤混合修复液 | |
| CN112190695A (zh) | 一种用于美容抗衰的干细胞制剂及其制备方法和应用 | |
| CN111172106B (zh) | 一种从人胎盘或脐带中提取间充质干细胞及提取其分泌物的方法 | |
| Gennai et al. | SEFFI (Superficial Enhanced Fluid Fat Injection) for aesthetic and clinical regenerative treatments |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220513 |