CN114317658A - 一种沙棘籽粕蛋白肽组合物及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种沙棘籽粕蛋白肽组合物及其制备方法与应用,属于生物医药技术领域。本发明的沙棘籽粕蛋白肽组合物包括以下组分:沙棘籽粕蛋白肽,苦瓜肽,海参肽和玉米肽。本发明通过实验发现有上述4种多肽之间具有协同作用,能有效改善糖化血红蛋白水平,且安全性高、无毒副作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种沙棘籽粕蛋白肽组合物及其制备方法与应用,属于生物医药技术领域。
背景技术
沙棘(Hippophae rhamnoides L.)是一种雌雄异株的落叶性胡颓子科灌木植物,其自然资源丰富且药用价值高、药用历史悠久。近年来的研究证明,沙棘籽提取油脂后的籽粕蛋白含量丰富,是具有较好营养价值的优质植物蛋白资源,同时也是沙棘的活性物质之一。研究发现,沙棘籽粕蛋白来源的生物活性肽具有良好的抗氧化及降血糖作用。近年来生物活性肽成为了国内外研究的焦点,来源于动植物蛋白降解后产生的低聚肽,如苦瓜肽、海参肽、玉米肽、大豆肽、血红蛋白肽等具有多种生物活性,如降血糖、降血压、降血脂、肝保护、增强免疫、调节肠道菌群、抗氧化、抗菌和抗病毒等,深受广大消费者的喜爱。生物活性肽的制备方法主要包括生物发酵法、控制酶解法、定向合成法和直接从微生物及动植物中提取、分离纯化等多种方法。合成法包括液相法、天然化学连接法、固相多肽合成法,酶合成法、DNA重组技术等。但定向合成法技术尚不成熟,成本较高,实现工业化生产难度较大。发酵法主要是利用乳酸菌、曲霉菌等微生物发酵过程中产生的蛋白酶水解蛋白质产生活性肽。控制酶解法制备的生物活性肽不仅安全性高,且酶解过程易于控制、水解条件温和,是生产生物活性肽的常用方法。
糖化血红蛋白(glycated hemoglobin,GHb)是血液中红细胞内的血红蛋白发生不可逆糖基化的产物,由HbA1a、HbA1b及HbA1c等组成,其中HbA1c占约70%,且结构较为稳定,在红细胞120余天的生存期间,随时间延长而增加。血红蛋白糖基化后会使2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)反应性降低,降低血红蛋白对结合氧的释放,引起局部组织细胞缺氧,是引发神经损伤、视网膜病变、微血管病变、心血管疾病、致命性外周血管病变和糖尿病肾病等慢性并发症的病理生理基础之一。同时,局部组织缺氧还会导致丙酮酸氧化障碍以及乳酸生成增加,诱发酮症酸中毒等急性并发症。糖化血红蛋白作为糖尿病并发症的重要病理生理基础,是预防和控制糖尿病并发症的关键。研究证明,糖化血红蛋白水平每降低1%,肾病和视网膜病变等微血管并发症风险将降低37%,致命性外周血管疾病或截肢风险降低43%,糖尿病相关死亡风险降低21%,中风、心脏病风险分别降低12%与14%。
发明内容
本发明的目的在于提供一种沙棘籽粕蛋白肽组合物及其制备方法与应用,该组合物能有效改善糖化血红蛋白水平,安全性高、无毒副作用。
为实现上述目的,本发明采取的技术方案为:一种沙棘籽粕蛋白肽组合物,包括以下组分:沙棘籽粕蛋白肽,苦瓜肽,海参肽和玉米肽。
沙棘籽粕是沙棘籽经过亚临界低温萃取油脂后的固体物,沙棘籽粕中含有丰富的蛋白质、黄体酮和多种微量元素。苦瓜肽是从苦瓜中提取出来的一种生物活性物质,具有明显的降糖作用,是一种天然保健品。海参肽是海参的提取物,具有调节人体功能,修复受损细胞,增强人体免疫力,具有抗疲劳、抗衰老等一系列功能。玉米肽是从玉米中提取的蛋白质,经过定向酶切及特定小肽分离技术获得的小分子多肽物质,具有降血压、醒酒护肝等作用。本发明通过实验发现将沙棘籽粕蛋白肽,苦瓜肽,海参肽和玉米肽组成组合物,通过各种肽之间的协同作用,能有效改善糖化血红蛋白水平,且安全性高、无毒副作用。
作为本发明所述沙棘籽粕蛋白肽组合物的优选实施方式,所述组合物包括以下重量份的组分:沙棘籽粕蛋白肽350~800份,苦瓜肽100~400份,海参肽100~280份,玉米肽30~95份。
不同种类的多肽具有不同的功效,本发明通过大量的试验进行筛选,对组合物中各种多肽的含量进行限定,使组合物具有良好的糖化血红蛋白改善效果。
作为本发明所述沙棘籽粕蛋白肽组合物的优选实施方式,所述沙棘籽粕蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
(1)配制沙棘籽粕蛋白溶液并加入蛋白酶,调节酶解溶液的pH为10~12,于45~55℃进行酶解,酶解后离心取上清液,得蛋白酶解液;
(2)将沙棘籽粕蛋白酶解液依次经分子量为10kDa的滤膜超滤,得所述沙棘籽粕蛋白肽。
作为本发明所述沙棘籽粕蛋白肽的制备方法的优选实施方式,所述步骤(1)中的蛋白酶为胰蛋白酶。
本发明在沙棘籽粕蛋白制备时使用碱溶酸沉法,该方法也是提取植物蛋白最常规的方法之一,但由于该方法在提取蛋白的同时,也容易将木质素、部分黄酮类及多酚类等与蛋白质溶解性相近的化合物同时提取而带入蛋白之中,因此提取物多带有一定的颜色。为此,本发明基于前期工作,在利用碱溶酸沉方法提取蛋白质时添加一定的植酸酶不仅有助于提取沙棘籽粕蛋白,而且可以有效降低蛋白质中的植酸含量,并显著改善蛋白质的颜色。因此,建立了以下碱溶酸沉结合植酸酶的提取方法作为沙棘籽粕蛋白的最佳提取工艺。
作为本发明所述沙棘籽粕蛋白肽组合物的优选实施方式,所述苦瓜肽,海参肽和玉米肽的制备方法包括以下步骤:
(1)将苦瓜、海参和玉米分别粉碎,过筛,得苦瓜粉末、海参粉末和玉米粉末;
(2)苦瓜粉末、海参粉末和玉米粉末中分别加入正己烷,混合搅拌均匀,抽滤除去正己烷,将滤渣干燥,得脱脂的苦瓜粉末、脱脂海参粉末和脱脂玉米粉末;
(3)将脱脂的苦瓜粉末、脱脂海参粉末和脱脂玉米粉末分别与水混合搅拌均匀,调节pH为9~11后离心取上清液,在上清液中加入盐酸调节pH为4.0~4.5后离心取沉淀,重悬沉淀,冷冻干燥后,得苦瓜蛋白、海参蛋白和玉米蛋白;
(4)分别配制苦瓜蛋白溶液、海参蛋白溶液和玉米蛋白溶液,加入碱性蛋白酶酶解9~11h,酶解结束后调节溶液pH为7.0并加热煮沸溶液进行灭酶,将溶液离心取上清液,得蛋白酶解液;
(5)对步骤(4)中的蛋白酶解液进行超滤,将超滤液干燥后得苦瓜肽、海参肽和玉米肽的。
作为本发明所述沙棘籽粕蛋白肽组合物的优选实施方式,所述苦瓜肽,海参肽和玉米肽的制备方法的步骤(4)的酶解中,酶解溶液的pH为9~11,酶解温度为40~50℃。
本发明还提供上述沙棘籽粕蛋白肽组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)称取沙棘籽粕蛋白肽,苦瓜肽,海参肽和玉米肽加水混合,得混合液;
(2)将步骤(1)中的混合液搅拌溶解,得所述沙棘籽粕蛋白肽组合物。
本发明还提供上述沙棘籽粕蛋白肽组合物在制备用于改善糖化血红蛋白水平的药物或食品中的应用。
作为本发明所述应用的优选实施方式,所述药物或食品的使用量为每千克人体重使用50~100mg。
本发明还提供上述沙棘籽粕蛋白肽组合物在制备用于预防和治疗糖尿病的药物或食品中的应用。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:本发明提供了一种沙棘籽粕蛋白肽组合物及其制备方法与应用,该组合物通过沙棘籽粕蛋白肽,苦瓜肽,海参肽和玉米肽相互配合,协同降低糖化血红蛋白水平,安全性高、无毒副作用。
具体实施方式
为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点,下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
本实施例的一种沙棘籽粕蛋白肽组合物,包括以下重量份的组分:沙棘籽粕蛋白肽550份,苦瓜肽300份,海参肽200份,玉米肽65份。
本实施例的沙棘籽粕蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
(1)称取100g脱脂沙棘籽粕粉末,加入9倍重量份的水溶解,调节溶液pH为11,于37℃提取40min,重复提取3次,8000×g离心25min,收集上清液;
(2)调节步骤(1)的上清液pH为5.0,按照原料重量百分比0.2%的量加入植酸酶,酶解3h,8000×g离心并收集沉淀,将沉淀加水复溶,调节pH至7.0后冷冻干燥,得沙棘籽粕蛋白;
(3)用步骤(2)的沙棘籽粕蛋白配制溶液,调节溶液pH至11,加入0.2%的胰蛋白酶,于50℃进行酶解,酶解结束后将溶液离心,取上清液,得蛋白酶解液;
(4)将步骤(3)的沙棘籽粕蛋白酶解液经分子量为10kDa及3kDa的聚醚砜超滤膜超滤,得所述沙棘籽粕蛋白肽。
本实施例的苦瓜肽、海参肽和玉米肽的制备方法包括以下步骤:
(1)将苦瓜、海参和玉米分别以10000rpm进行粉碎,每粉碎2分钟,暂停1分钟,累计粉碎5分钟后,得到的粉末过40目筛后,筛下部分即分别为苦瓜粉末、海参粉末和玉米粉末;
(2)苦瓜粉末、海参粉末和玉米粉末中以重量比1:10分别加入正己烷,混合搅拌均匀,抽滤除去正己烷,将滤渣室温干燥,得脱脂的苦瓜粉末、脱脂海参粉末和脱脂玉米粉末;
(3)将脱脂的苦瓜粉末、脱脂海参粉末和脱脂玉米粉末分别与水以重量比1:20混合搅拌均匀,调节pH为10后在50℃磁力搅拌1.5h后于8000rpm离心15分钟,取上清液,在上清液中加入盐酸调节pH为4.2后于8000rpm离心15分钟,取沉淀,重悬沉淀,冷冻干燥后,得苦瓜蛋白、海参蛋白和玉米蛋白;
(4)分别配制10%的苦瓜蛋白溶液、10%的海参蛋白溶液和10%的玉米蛋白溶液,加入10000U/g碱性蛋白酶酶解10h,酶解结束后调节溶液pH为7.0并加热煮沸溶液进行灭酶,将溶液于8000rpm离心取上清液,得蛋白酶解液;
(5)对步骤(4)中的蛋白酶解液进行超滤,将超滤液进行喷雾干燥,得苦瓜肽、海参肽和玉米肽。
本实施例的沙棘籽粕蛋白肽组合物的制备方法:
(1)按上述重量比分别称取实施例1制备的沙棘籽粕蛋白肽、苦瓜肽、海参肽和玉米肽,加入超纯水,得混合液;
(2)将步骤(1)中的混合液在室温下利用磁力搅拌充分混匀溶解,得所述沙棘籽粕蛋白肽组合物。
实施例2
本实施例的一种沙棘籽粕蛋白肽组合物,包括以下重量份的组分:沙棘籽粕蛋白肽350份,苦瓜肽100份,海参肽100份,玉米30份。
本实施例的沙棘籽粕蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
(1)称取100g脱脂沙棘籽粕粉末,加入9倍重量份的水溶解,调节溶液pH为10,于37℃提取30min,重复提取3次,8000×g离心25min,收集上清液;
(2)调节步骤(1)的上清液pH为4.0,按照原料重量百分比0.1%的量加入植酸酶,酶解2h,8000×g离心并收集沉淀,将沉淀加水复溶,调节pH至7.0后冷冻干燥,得沙棘籽粕蛋白;
(3)用步骤(2)的沙棘籽粕蛋白配制溶液,调节溶液pH至10,加入0.1%的胰蛋白酶,于45℃进行酶解,酶解结束后将溶液离心,取上清液,得蛋白酶解液;
(4)将步骤(3)的沙棘籽粕蛋白酶解液经分子量为10kDa及3kDa的聚醚砜超滤膜超滤,得所述沙棘籽粕蛋白肽。
本实施例的苦瓜肽、海参肽和玉米肽的制备方法包括以下步骤:
(1)将苦瓜、海参和玉米分别以10000rpm进行粉碎,每粉碎2分钟,暂停1分钟,累计粉碎5分钟后,得到的粉末过40目筛后,筛下部分即分别为苦瓜粉末、海参粉末和玉米粉末;
(2)苦瓜粉末、海参粉末和玉米粉末中以重量比1:10分别加入正己烷,混合搅拌均匀,抽滤除去正己烷,将滤渣室温干燥,得脱脂的苦瓜粉末、脱脂海参粉末和脱脂玉米粉末;
(3)将脱脂的苦瓜粉末、脱脂海参粉末和脱脂玉米粉末分别与水以重量比1:20混合搅拌均匀,调节pH为9后在50℃磁力搅拌1.5h后于8000rpm离心15分钟,取上清液,在上清液中加入盐酸调节pH为4.0后于8000rpm离心15分钟,取沉淀,重悬沉淀,冷冻干燥后,得苦瓜蛋白、海参蛋白和玉米蛋白;
(4)分别配制10%的苦瓜蛋白溶液、10%的海参蛋白溶液和10%的玉米蛋白溶液,加入10000U/g碱性蛋白酶酶解9h,酶解结束后调节溶液pH为7.0并加热煮沸溶液进行灭酶,将溶液于8000rpm离心取上清液,得蛋白酶解液;
(5)对步骤(4)中的蛋白酶解液进行超滤,将超滤液进行喷雾干燥,得苦瓜肽、海参肽和玉米肽。
本实施例的沙棘籽粕蛋白肽组合物的制备方法与实施例1相同。
实施例3
本实施例的一种沙棘籽粕蛋白肽组合物,包括以下重量份的组分:沙棘籽粕蛋白肽800份,苦瓜肽400份,海参肽280份,玉米95份。
本实施例的沙棘籽粕蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
(1)称取100g脱脂沙棘籽粕粉末,加入9倍重量份的水溶解,调节溶液pH为12,于37℃提取50min,重复提取3次,8000×g离心25min,收集上清液;
(2)调节步骤(1)的上清液pH为6.0,按照原料重量百分比0.3%的量加入植酸酶,酶解4h,8000×g离心并收集沉淀,将沉淀加水复溶,调节pH至7.0后冷冻干燥,得沙棘籽粕蛋白;
(3)用步骤(2)的沙棘籽粕蛋白配制溶液,调节溶液pH至12,加入0.3%的胰蛋白酶,于55℃进行酶解,酶解结束后将溶液离心,取上清液,得蛋白酶解液;
(4)将步骤(3)的沙棘籽粕蛋白酶解液经分子量为10kDa及3kDa的聚醚砜超滤膜超滤,得所述沙棘籽粕蛋白肽。
本实施例的苦瓜肽、海参肽和玉米肽的制备方法包括以下步骤:
(1)将苦瓜、海参和玉米分别以10000rpm进行粉碎,每粉碎2分钟,暂停1分钟,累计粉碎5分钟后,得到的粉末过40目筛后,筛下部分即分别为苦瓜粉末、海参粉末和玉米粉末;
(2)苦瓜粉末、海参粉末和玉米粉末中以重量比1:10分别加入正己烷,混合搅拌均匀,抽滤除去正己烷,将滤渣室温干燥,得脱脂的苦瓜粉末、脱脂海参粉末和脱脂玉米粉末;
(3)将脱脂的苦瓜粉末、脱脂海参粉末和脱脂玉米粉末分别与水以重量比1:20混合搅拌均匀,调节pH为11后在50℃磁力搅拌1.5h后于8000rpm离心15分钟,取上清液,在上清液中加入盐酸调节pH为4.5后于8000rpm离心15分钟,取沉淀,重悬沉淀,冷冻干燥后,得苦瓜蛋白、海参蛋白和玉米蛋白;
(4)分别配制10%的苦瓜蛋白溶液、10%的海参蛋白溶液和10%的玉米蛋白溶液,加入10000U/g碱性蛋白酶酶解11h,酶解结束后调节溶液pH为7.0并加热煮沸溶液进行灭酶,将溶液于8000rpm离心取上清液,得蛋白酶解液;
(5)对步骤(4)中的蛋白酶解液进行超滤,将超滤液进行喷雾干燥,得苦瓜肽、海参肽和玉米肽。
本实施例的沙棘籽粕蛋白肽组合物的制备方法与实施例1相同。
对比例1
本对比例的一种蛋白肽组合物,包括以下重量份的组分:苦瓜肽300份,海参肽200份,玉米肽65份。
本对比例的蛋白肽组合物的制备方法与实施例1相同。
对比例2
本对比例的一种蛋白肽组合物,包括以下重量份的组分:沙棘籽粕蛋白肽550份,海参肽200份,玉米肽65份。
本对比例的蛋白肽组合物的制备方法与实施例1相同。
对比例3
本对比例的一种蛋白肽组合物,包括以下重量份的组分:沙棘籽粕蛋白肽550份,苦瓜肽300份,玉米肽65份。
本对比例的蛋白肽组合物的制备方法与实施例1相同。
对比例4
本对比例的一种沙棘籽粕蛋白肽组合物,包括以下重量份的组分:沙棘籽粕蛋白肽550份,苦瓜肽300份,海参肽200份。
本对比例的蛋白肽组合物的制备方法与实施例1相同。
效果例
1、沙棘籽粕蛋白肽组合物对链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病大鼠的糖化血红蛋白和空腹血糖的影响。
(1)实验方法:
a.实验动物为SPF级7周龄雄性SD大鼠、体重200~240g(购自广东省医学实验动物中心)。实验动物在清洁级层流架中饲养,环境温度为23±2℃,相对湿度为75±10%,照明时间为12小时/天(7:00~19:00)。实验动物在适应性喂养一周后,随机选取10只大鼠为空白对照组,剩余的大鼠用于造模。造模大鼠在造模前禁食不禁水12小时后腹腔注射链脲佐菌素60mg/kg。造模七天后鼠尾取血测量大鼠空腹血糖值,选取血糖值大于11.1mmol/L的大鼠作为实验动物。将造模成功的大鼠随机分为模型组、沙棘籽粕蛋白肽组合物组及对照组1~4,每组10只。
b.沙棘籽粕蛋白肽组合物组大鼠每日以实施例3制备的沙棘籽粕蛋白肽组合物灌胃,每次用量50mg/kg;对照组1~4大鼠每日分别以对比例1~4制备的组合物灌胃,每次用量50mg/kg;空白组和模型组均给予同体积的生理盐水。各个给药组连续灌胃14天,每天1次,第14天灌胃给药后,禁食不禁水12小时后测定大鼠的空腹血糖值,并按照糖化血红蛋白试剂盒(Biosystem公司)说明书的要求操作,测定其糖化血红蛋白水平。
(2)实验结果见表1和表2。
表1
表2
由表1和表2可知,组合物提取物(50mg/kg)可显著降低链脲佐菌素诱发的大鼠血糖值和糖化血红蛋白,而相同剂量下的对照品1-4的抑制作用均低于组合物,侧面说明了本发明提供的组合物在发挥抑制血糖升高和改善糖化血蛋白水平的作用时并不是某一个或某几个成分所起的作用,而是各组分相互协同共同作用的结果,也就是说,本发明提供的组合物各组分是一个不可分割的整体。
2、沙棘籽粕蛋白肽组合物对大鼠糖耐量的影响。
(1)实验方法:
a.实验动物采用雄性、体重200~240g的SPF级7周龄SD大鼠(购自广东省医学实验动物中心)。实验动物在清洁级层流架中饲养,环境温度为23±2℃,相对湿度为75±10%,照明时间为12小时/天(7:00~19:00)。实验动物在适应性饲养一周后随机分为模型组、沙棘籽粕蛋白肽组合物组及对照组1~4,每组10只。
b.于实验开始前禁食不禁水12小时,沙棘籽粕蛋白肽组合物组大鼠以实施例3制备的沙棘籽粕蛋白肽组合物灌胃,用量50mg/kg;对照组1~4大鼠分别以对比例1~4制备的组合物灌胃,用量50mg/kg;空白组和模型组均给予等体积蒸馏水。给药30分钟后,各组小鼠均经灌胃蔗糖水溶液(2.5g/kg.BW),并分别于蔗糖负荷前30分钟、蔗糖负荷后15、30、60、120分钟五个不同时间点剪尾取血,测定各组大鼠不同时间的血糖水平。
(2)实验结果见表3。
表3
3、沙棘籽粕蛋白肽组合物对大鼠小肠α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)和α-淀粉酶(α-amylase)活性的影响。
(1)实验方法:
a.实验动物采用雄性、体重200~240g的SPF级7周龄SD大鼠(购自广东省医学实验动物中心)。实验动物在清洁级层流架中饲养,环境温度为23±2℃,相对湿度为75±10%,照明时间为12小时/天(7:00~19:00)。实验动物在适应性饲养一周后随机分为模型组、沙棘籽粕蛋白肽组合物组及对照组1~4,每组10只。
b.于实验开始前禁食12小时,沙棘籽粕蛋白肽组合物组大鼠以实施例3制备的沙棘籽粕蛋白肽组合物灌胃,用量50mg/kg;对照组1~4大鼠分别以对比例1~4制备的组合物灌胃,用量50mg/kg;空白组和模型组均给予等体积蒸馏水。给药30分钟后,实验大鼠脱颈处死后开腹,取出小肠从上端起均分三等份,记为小肠-1、小肠-2和小肠-3,分别将肠内容物取出,置于特定容器中,并取下小肠内粘膜置于特定容器中。分别测定不同部位的小肠内粘膜及肠内容物中的α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的活性,同时测定其蛋白质含量,并计算和比较同等蛋白质量中的酶活性。
(2)实验结果见表4和表5。
表4
表5
最后应当说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制,尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (10)
1.一种沙棘籽粕蛋白肽组合物,其特征在于,包括以下组分:沙棘籽粕蛋白肽,苦瓜肽,海参肽和玉米肽。
2.如权利要求1所述组合物,其特征在于,包括以下重量份的组分:沙棘籽粕蛋白肽350~800份,苦瓜肽100~400份,海参肽100~280份和玉米肽30~95份。
3.如权利要求1~2任一项所述的沙棘籽粕蛋白肽组合物,其特征在于,所述沙棘籽粕蛋白肽的制备方法包括以下步骤:
(1)取沙棘籽粕蛋白溶液并加入蛋白酶,调节酶解溶液的pH为10~12,于45~55℃进行酶解,酶解后离心取上清液,得蛋白酶解液;
(2)将步骤(1)的沙棘籽粕蛋白酶解液经分子量为10kDa的滤膜超滤,得所述沙棘籽粕蛋白肽。
4.如权利要求3所述沙棘籽粕蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中的蛋白酶为胰蛋白酶。
5.如权利要求1~2任一项所述的沙棘籽粕蛋白肽组合物,其特征在于,所述苦瓜肽,海参肽和玉米肽的制备方法包括以下步骤:
(1)将苦瓜、海参和玉米分别粉碎,过筛,得苦瓜粉末、海参粉末和玉米粉末;
(2)苦瓜粉末、海参粉末和玉米粉末中分别加入正己烷,混合搅拌均匀,抽滤除去正己烷,将滤渣干燥,得脱脂的苦瓜粉末、脱脂海参粉末和脱脂玉米粉末;
(3)将脱脂的苦瓜粉末、脱脂海参粉末和脱脂玉米粉末分别与水混合搅拌均匀,调节pH为9~11后离心取上清液,在上清液中加入盐酸调节pH为4.0~4.5后离心取沉淀,重悬沉淀,冷冻干燥后,得苦瓜蛋白、海参蛋白和玉米蛋白;
(4)分别配制苦瓜蛋白溶液、海参蛋白溶液和玉米蛋白溶液,加入碱性蛋白酶酶解9~11h,酶解结束后调节溶液pH为7.0并加热煮沸溶液进行灭酶,将溶液离心取上清液,得蛋白酶解液;
(5)对步骤(4)中的蛋白酶解液进行超滤,将超滤液干燥后得苦瓜肽、海参肽和玉米肽的。
6.如权利要求5所述的沙棘籽粕蛋白肽组合物,其特征在于,所述步骤(4)的酶解中,酶解溶液的pH为9~11,酶解温度为40~50℃。
7.如权利要求1~2任一项所述的沙棘籽粕蛋白肽组合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)称取沙棘籽粕蛋白肽,苦瓜肽,海参肽和玉米肽加水混合,得混合液;
(2)将步骤(1)中的混合液搅拌溶解,得所述沙棘籽粕蛋白肽组合物。
8.如权利要求1~2中任意一项所述的沙棘籽粕蛋白肽组合物在制备用于改善糖化血红蛋白水平的药物或食品中的应用。
9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,所述药物或食品的使用量为每千克人体重使用50~100mg。
10.如权利要求1~2中任意一项所述的沙棘籽粕蛋白肽组合物在制备用于预防和治疗糖尿病的药物或食品中的应用。
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