CN114007434A - 营养组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明的课题在于，提供如下技术：预防感染成为包含人在内的动物的感染症的原因的病原性病毒等。一种营养组合物，其含有乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物、且含有人乳寡糖。优选前述人乳寡糖包含选自由2’‑岩藻糖基乳糖、3‑岩藻糖基乳糖、3’‑唾液酸乳糖、6’‑唾液酸乳糖组成的组中的一种或二种以上。本营养组合物可以作为预防感染用组合物、特别是预防病毒感染用组合物使用。

Description

营养组合物
技术领域
本发明涉及含有乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物、且含有人乳寡糖的营养组合物。
背景技术
自然界中，人、动物中存在有引起感染症的各种微生物。这些微生物被分为细菌、支原体、立克次氏体、衣原体、真菌、原虫、病毒。病毒的遗传物质为脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)，但细菌、其他微生物具有能量代谢系统，通过异养营养而增殖，而病毒只能通过寄生于宿主细胞而增殖(例如非专利文献1)。
流感病毒感染症在冬季流行，但婴幼儿、老人、或基础疾病患有恶性肿瘤、心脏病、脑血管疾病等的患者为流感感染的高风险人群，导致危及生命的严重感染也多。
在微生物所导致的感染症中，特别是针对细菌感染症，开发出了有效的抗生素并进行了有效的治疗，但抗生素对于病毒感染症没有有效地作用。与抗生素的化学疗法的急速进展相比，作为病毒感染症的治疗药的抗病毒剂现在还几乎没有开发。
迄今为止开发出的抗病毒剂中，有：靶向病毒核酸复制的核酸类似物的阿昔洛韦、齐多夫定、利巴韦林、神经氨酸苷酶抑制剂的扎那米韦(4-胍基神经氨酸)、蛋白酶抑制剂的茚地那韦等。作为这些药品的抗病毒剂的药效强，但是给予的副作用在临床上是很大的问题。
出于这种情况，一直在继续探索寻找安全且副作用少、能历经长时间地摄取的体现抗病毒作用的有效成分。
因而，作为乳蛋白的乳铁蛋白(以下，也记作LF)中，报道了有抗菌性、抗病毒活性、自肠道的铁吸收调节作用、细胞增殖作用、免疫调节作用等各种生物功能(非专利文献2)，还提出了已经作为流感病毒感染防御剂的用途(专利文献1)。另外，关于乳铁蛋白分解物(源自乳铁蛋白的肽)，报道了示出对流感病毒、RS病毒的抗病毒活性(专利文献2)。
另外，关于作为人的初乳中所含的多种寡糖的通称的人乳寡糖(以下，也记作HMO)，也报道了能预防病毒感染(专利文献3)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本专利第3061376号
专利文献2：日本特开2005-272438号公报
专利文献3：日本特表2017-515455号公报
非专利文献
非专利文献1：医科病毒学、修订第2版、大里外誉郎编、南江堂发行、2000年、p.15-24
非专利文献2：B.Lonnerdal et.al.,Ann.Rev.Nutr.,Vol.15,1995,pp.93-110
发明内容
发明要解决的问题
本发明的课题在于，提供如下技术：预防对成为包括人在内的动物的感染症的原因的病原性病毒等的感染。
用于解决问题的方案
本发明人等为了解决上述课题而进行了深入研究，结果发现：含有乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物、且含有人乳寡糖的营养组合物有预防感染效果，至此完成了本发明。
即，本发明为一种营养组合物，其含有乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物、且含有人乳寡糖。
本发明中，优选人乳寡糖相对于乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物的质量比为1/100以上且100以下。
本发明中，优选乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物相对于营养组合物整体的含量为0.001～10.0质量％。
本发明中，优选人乳寡糖相对于营养组合物整体的含量为0.001～10.0质量％。
本发明中的人乳寡糖优选包含选自由2’-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖、3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖组成的组中的一种或二种以上。
本发明的营养组合物优选可以用于预防感染用途，更优选可以用于预防消化器官感染用途。
本发明的营养组合物优选制成配方奶粉或配方液态奶的方式。
本发明的营养组合物优选被给予婴幼儿或老年人。
发明的效果
根据本发明，提供适合于预防感染用途的营养组合物。上述营养组合物可以以添加物等方式包含于饮食品、药品。另外，通过利用本发明的营养组合物本身作为饮食品，从而期待特别是有助于婴幼儿、老年人的健康维持。
附图说明
图1为示出添加了乳铁蛋白和/或2’-岩藻糖基乳糖的细胞中的对轮状病毒的感染抑制率的图。
图2为示出添加了乳铁蛋白和/或3-岩藻糖基乳糖的细胞中的对轮状病毒的感染抑制率的图。
图3为示出添加了乳铁蛋白和/或3-岩藻糖基乳糖的细胞中的对轮状病毒的感染抑制率的图。
图4为示出添加了乳铁蛋白和/或3’-唾液酸乳糖的细胞中的对轮状病毒的感染抑制率的图。
图5为示出添加了乳铁蛋白和/或6’-唾液酸乳糖的细胞中的对轮状病毒的感染抑制率的图。
图6为示出添加了乳铁蛋白和/或6’-唾液酸乳糖的细胞中的对轮状病毒的感染抑制率的图。
图7为示出添加了乳铁蛋白和/或人乳寡糖(混合物)的细胞中的对轮状病毒的感染抑制率的图。
具体实施方式
接着，对本发明详细地进行说明。但是，本发明不限定于以下的实施方式，在本发明的范围内可以自由变更。
本发明的营养组合物含有乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物、且含有人乳寡糖。
乳铁蛋白是哺乳动物、例如绵羊、山羊、猪、小鼠、水牛、骆驼(camel)、牦牛、马、驴、美洲驼(lama)、牛或人的乳、眼泪、唾液、血液等中所含的铁结合性的糖蛋白。
本发明中的乳铁蛋白可以源自任意哺乳动物，没有特别限定，从含量、获得容易性的方面出发，例如优选源自牛、人等的乳的乳铁蛋白。作为前述乳，可以为初乳、过渡乳、成熟乳、晚乳中的任一者。
另外，本发明中的乳铁蛋白可以是由作为前述乳的处理物的脱脂乳、乳清等通过常规方法(例如离子色谱法等)分离出的乳铁蛋白、通过基因操作由微生物、动物细胞、转基因动物等产生出的重组乳铁蛋白、合成乳铁蛋白、或它们的混合物。另外，乳铁蛋白可以经非糖基化或糖基化。作为这种乳铁蛋白，可以使用以工业规模制造的市售的乳铁蛋白(例如森永乳业株式会社制等)。
本发明中的乳铁蛋白中的金属含量没有特别限定，可以使用：选自由利用盐酸、柠檬酸等将乳铁蛋白脱铁而成的脱辅基型乳铁蛋白；使该脱辅基型乳铁蛋白以铁、铜、锌、锰等金属螯合而得到的饱和度100％以上的状态的金属饱和型乳铁蛋白；和金属以低于100％的各种饱和度结合的状态的金属部分饱和型乳铁蛋白组成的组中的任1种或2种以上的混合物。
此处，以下示出本技术中使用的乳铁蛋白的调制(乳铁蛋白自乳等原料的分离、纯化)方法的一例，但不限定于此。
使源自牛的乳原料通过阳离子交换柱，将该通过液回收，使该通过液适宜重复地在柱中通液。使去离子水在该柱中通液，使食盐水通液，得到吸附于该阳离子交换柱的碱性蛋白质的洗脱液。在该洗脱液中，以硫酸铵沉淀法，将其回收并适宜清洗。使回收后的沉淀物溶解于去离子水，将该溶解液用超滤膜过滤。进而，进行脱盐处理、冻干，从而得到粉末状的乳铁蛋白。
更详细地，首先，在柱中填充离子交换体，使盐酸通液，进行水洗，使离子交换体平衡化。然后，使冷却至4℃的pH6.9的脱脂乳在柱中通液，将透过液回收，再次同样地在柱中通液。接着，使去离子水在柱中通液，使食盐水通液，得到吸附于离子交换体的碱性蛋白质的洗脱液。在该洗脱液中添加饱和度80％的硫酸铵，使蛋白质沉淀，进行离心分离，将沉淀物回收。将回收后的沉淀物用饱和度80％的硫酸铵溶液清洗，添加去离子水以进行溶解，对于得到的溶液，用超滤膜组件脱盐、冻干，得到粉末状牛乳铁蛋白。如此得到了纯度为95质量％以上的牛乳铁蛋白。
乳铁蛋白中，根据种、属、个体等的差异，当然存在有1个或多个位置处的1个或多个碱基的置换、缺失、插入、附加、或逆位等基因变异，具有这种变异的基因编码的蛋白质的氨基酸中，也有时产生变异。本发明中的本技术中能使用的乳铁蛋白中，只要不有损本发明的效果就还含有包含这种变异者。
另外，本发明中的乳铁蛋白中，只要不有损本发明的效果就可以还包含进行了热处理、酸处理、或碱处理的乳铁蛋白处理物。
本发明中的乳铁蛋白水解物是指，对前述乳铁蛋白进行了水解处理而成者。
作为水解处理，例如可以举出日本特开2012-235768号公报中记载的方法。
具体而言，在对乳铁蛋白溶液进行酶反应处理之前，利用盐酸、柠檬酸、乙酸等酸，将pH调整为2～4、优选调整为2.5～3.5、特别优选调整为pH3。
在调整了pH的乳铁蛋白溶液中，以期望的量添加含有凝乳酶的酶组合物后，保持酶反应的温度为35～55℃、优选40～50℃、更优选42～48℃，边搅拌边使乳铁蛋白水解6小时～24小时、优选12～18小时。
接着，例如将反应溶液升温至80℃并维持10分钟，使酶加热失活。进而，优选添加氢氧化钠溶液等碱溶液，调整pH为5～7、例如为6。
需要说明的是，pH调整后的反应溶液(乳铁蛋白水解物)可以直接为溶液，优选进行冻干等而粉末化。另外，乳铁蛋白水解物也可以使用通过色谱法、或超滤等截流而成者。
本发明的营养组合物中，乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物相对于营养组合物整体的含量优选0.001～5.0质量％、更优选0.005～1.0质量％、进一步优选0.01～0.5质量％、特别优选0.01～0.2质量％。
其通常可以为作为营养组合物流通时的含量的范围。
本发明中的人乳寡糖只要为人的乳中通常包含的寡糖就没有特别限定，优选可以举出2’-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖、乳糖二岩藻四糖、2’,3-二岩藻糖基乳糖、乳糖-N-三糖II、乳糖-N-四糖、乳糖-N-新四糖、乳糖-N-岩藻五糖I、乳糖-N-新岩藻五糖、乳糖-N-岩藻五糖II、乳糖-N-岩藻五糖III、乳糖-N-岩藻五糖V、乳糖-N-新岩藻五糖V、乳糖-N-二岩藻六糖I、乳糖-N-二岩藻六糖II、6’-半乳糖基乳糖、3’-半乳糖基乳糖、乳糖-N-六糖和乳糖-N-新六糖等中性人乳寡糖、3’-唾液酸乳糖、6’-唾液酸乳糖、3-岩藻糖基-3’-唾液酸乳糖、二唾液酸-乳糖-N-四糖等酸性人乳寡糖。它们之中，优选2’-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖、3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖，特别优选2’-岩藻糖基乳糖。
需要说明的是，本发明中的人乳寡糖只要不有损本发明的效果即可，可以经纯化，也可以为混合物。另外，可以包含前述人乳寡糖的一种或二种以上。
本发明的营养组合物中，人乳寡糖相对于营养组合物整体的含量优选0.001～10.0质量％、更优选0.005～5.0质量％、进一步优选0.005～2.0质量％、特别优选0.01～2.0质量％。
另外，本发明的组合物中，人乳寡糖相对于乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物的质量比优选1/100以上且100以下、更优选1/10以上且100以下、进一步优选1/5以上且50以下。
其通常可以为作为营养组合物流通时的含量的范围。
作为摄取(给予)本发明的营养组合物时的含量，可以设为上述范围，也可以适宜进行稀释等。例如，摄取(给予)时的乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物相对于组合物整体的含量可以设为0.0001～10.0质量％。另外，经口摄取(给予)时的人乳寡糖相对于组合物整体的含量可以设为0.0001～10.0质量％。经口摄取(给予)时的人乳寡糖相对于乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物的质量比可以设为1/100以上且100以下。
本发明的营养组合物可以还包含益生菌。
作为本发明中的益生菌，可以主要使用作为人消化道内的常在乳酸菌的乳杆菌属细菌、链球菌属细菌、双歧杆菌属细菌。特别最多使用的是乳杆菌属乳酸菌。其中，鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillus rhamnosus GG)株(日本特开昭61-280433号公报)、干酪乳杆菌代田(Lactobacillus casei shirota)株(由Yakult公司市售)、约氏乳杆菌La1(Lactobacillus johnsonii La1)株(日本特开平6-315373号公报)、植物乳杆菌299(Lactobacillus plantarum 299)株(DSM6595)(日本特表平6-501624号公报)、植物乳杆菌299v(L.plantarum 299v)株(DSM9843)(日本特表平11-502703号公报)、唾液乳杆菌UCC 1(Lactobacillus salivarius UCC 1)株(NCIMB 40830)、唾液乳杆菌UCC 118(L.salivarius UCC 118)株(NCIMB 40829)(WO98/35014)等菌株可以用作适于益生菌制品的菌株。
作为乳杆菌属细菌，没有特别限制，可以举出：干酪乳杆菌(Lacticaseibacilluscasei)、副干酪乳杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)、鼠李糖乳杆菌(Lacticaseibacillus rhamnosus)、植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)、短促生乳杆菌(Levilactobacillus brevis)、唾液乳杆菌(Ligilactobacillus salivarius)、发酵乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)、罗氏柠檬乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)。
进一步本发明中，优选使用双歧杆菌属细菌作为益生菌。
作为双歧杆菌属细菌，没有特别限制，可以举出：短双歧杆菌(Bifidobacteriumbreve)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis、被再分类为长双歧杆菌婴儿亚种)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、两岐双岐杆菌(Bifidobacterium bifidum)、青春双岐杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、链状双歧杆菌(Bifidobacteriumcatenulatum)、假小链双歧杆菌(Bifidobacterium pseudocatenulatum)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、乳酸双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)和假长双岐杆菌(Bifidobacterium pseudolongum)。它们之中，优选选自由短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌和长双歧杆菌组成的组中的一种或二种以上。
本发明中，作为益生菌、更优选双歧杆菌属细菌，可以为活菌，也可以为死菌。包含活菌的情况下，每1mL营养组合物，含有优选1.0×106cfu以上、更优选1.0×107cfu以上、进一步优选2.0×107cfu以上的活菌。需要说明的是，含有活菌的情况下，也可以包含死菌。
需要说明的是，cfu是指菌落形成单元(Colony forming unit)。本说明书中，例如，可以设为包含还原脱脂乳粉10质量％的固体培养基中以38℃进行培养时的值。
本发明中，作为营养组合物中含有的双歧杆菌属细菌，优选选自由短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌和长双歧杆菌组成的组中的一种或二种以上。
作为短双歧杆菌，更具体而言，可以举出短双歧杆菌M-16V。短双歧杆菌M-16V于2018年1月26日、在国家技术评估学会，专利微生物保藏中心(NPMD)(〒292-0818日本国千叶县木更津市上总镰足2-5-8 122号室)以保藏编号NITE BP-02622进行了基于布达佩斯条约的国际保藏。可以使用作为市售品能获得的、例如森永乳业株式会社制的“短双歧杆菌M-16V”。
另外，作为短双歧杆菌，更具体而言，还可以举出短双歧杆菌MCC1274。短双歧杆菌MCC1274于2009年8月25日、在独立行政法人产业技术综合研究所专利生物保藏中心(现·国家高级工业科学技术学院，国际专利生物保藏中心(IPOD，NITE)(〒292-0818千叶县木更津市上总镰足2-5-8 120号室)以保藏编号FERM BP-11175进行了基于布达佩斯条约的国际保藏。
作为婴儿双歧杆菌，更具体而言，还可以举出婴儿双歧杆菌M63。婴儿双歧杆菌M63于2018年1月26日、在NPMD以保藏编号NITE BP-02623进行了基于布达佩斯条约的国际保藏。
作为长双歧杆菌，更具体而言，可以使用长双歧杆菌NITE BP-02621、(别名：BB536或长双歧杆菌长亚种(Bifidobacterium longum subsp.Longum)ATCC BAA-999)。长双歧杆菌BB536在NPMD、于2018年1月26日以NITE BP-02621的保藏编号进行了基于布达佩斯条约的国际保藏。作为与其相同的细菌的长双歧杆菌长亚种(Bifidobacterium longumsubsp.longum)ATCC BAA-999(编号：ATCC BAA-999)可以自American Type CultureCollection(ATCC：美国、20110、弗吉尼亚州、马纳萨斯大学大道10801(10801UniversityBoulevard，Manassas，VA20110，United States of America))作为ATCC BAA-999获得(例如参照日本特开2012-223134号公报等)。
需要说明的是，以上述示例的菌株名所特定的菌株中不限定于以该菌株名保藏、注册在规定的机关的菌株其本身(以下为了方便说明，也称为“保藏菌株”)，还包括与其实质上等同的菌株(也称为“派生菌株”或“衍生株”)。对于各菌株，“与上述保藏菌株实质上同等的菌株”是指如下菌株：属于与上述保藏菌株相同的种，得到肠道菌群改善效果，进一步其16SrRNA基因的碱基序列相对于上述保藏菌株的16SrRNA基因的碱基序列、具有优选99.86％以上、更优选99.93％以上、进一步优选100％的同一性，且优选具有与上述保藏菌株相同的菌学性质。对于各菌株，与上述保藏菌株实质上同等的菌株例如也可以是将该保藏菌株作为亲本菌株的派生菌株。作为派生菌株，可以举出：由保藏菌株育种的菌株、自保藏菌株自然生长的菌株。作为育种方法，可以举出基于基因工程学方法的修饰、基于突变处理的修饰。作为突变处理，可以举出X射线的照射、紫外线的照射、以及利用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍、甲磺酸乙酯和甲磺酸甲酯等诱变剂的处理。作为自保藏菌株自然生长的菌株，可以举出使用保藏菌株时自然生长的菌株。作为这种菌株，可以举出通过保藏菌株的培养(例如传代培养)而自然生长的突变株。派生菌株可以通过一种修饰来构建，也可以通过二种或其以上的修饰来构建。
作为本发明的营养组合物中能含有的双歧杆菌属细菌的菌体，可以使用市售品，也可以使用适宜制造而取得者。
另外，本发明的营养组合物中能含有的双歧杆菌属细菌的菌体可以通过对前述双歧杆菌属细菌进行培养而容易取得。培养方法只要双歧杆菌属细菌可以增殖就没有特别限制。作为培养方法，例如可以直接使用双歧杆菌属细菌的培养中通常使用的方法，或适宜修正而使用。培养温度例如可以为25～50℃，优选35～42℃。培养优选可以在厌氧条件下实施，例如可以边使二氧化碳气体等厌氧气体通气边实施。另外，培养也可以在液体静置培养等微好氧条件下实施。培养例如可以实施直至双歧杆菌属细菌增殖至期望程度。
培养中使用的培养基只要双歧杆菌属细菌可以增殖就没有特别限制。作为培养基，例如可以直接使用双歧杆菌属细菌的培养中通常使用的培养基、或适宜修正而使用。即，作为碳源，可以根据同化性而使用例如半乳糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、纤维二糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、淀粉、淀粉水解物、赤糖糊等糖类。作为氮源，例如可以使用氨、硫酸铵、氯化铵、硝酸铵等铵盐类、硝酸盐类。另外，作为无机盐类，例如可以使用氯化钠、氯化钾、磷酸钾、硫酸镁、氯化钙、硝酸钙、氯化锰、硫酸亚铁等。另外，也可以使用蛋白胨、大豆粉、脱脂大豆粕、肉提取物、酵母提取物等有机成分。另外，作为双歧杆菌属细菌的培养中通常使用的培养基，具体而言，可以举出：梭菌强化培养基(Reinforced Clostridialmedium)、MRS培养基(de Man,Rogosa,and Sharpe medium)、mMRS培养基(modified MRSmedium)、TOSP培养基(TOS propionate medium)、TOSP Mup培养基(TOS propionatemupirocin medium)。
作为本发明的营养组合物中能含有的双歧杆菌属细菌，可以没有特别限制地使用其菌体或含有其的级分。即，作为双歧杆菌属细菌，例如可以直接使用通过培养而得到的培养物，也可以将培养物稀释或浓缩而使用，还可以使用从培养物回收的菌体。另外，只要不有损肠道菌群改善效果即可，就可以在培养后进行加热、冻干等各种追加操作。追加操作优选菌体的生存性高者。即，作为本发明的营养组合物中能含有的双歧杆菌属细菌，具体而言，可以举出双歧杆菌属细菌的培养物、或从前述培养物回收的菌体、它们的处理物，作为前述处理物，可以举出稀释物、浓缩物、或干燥物等。需要说明的是，菌体通常优选以含有活菌体的形态使用。菌体例如可以由活菌体构成，也可以为活菌体与死菌体的混合物。
本发明的营养组合物可以还包含益生元。
“益生元”可以是指，在肠道内能使有益的细菌选择性地增殖的难消化性的食品成分。作为有益的细菌，可以举出双歧杆菌属细菌。即，作为益生元，特别优选使双歧杆菌属细菌选择性地增殖的成分。作为益生元，可以使用一种成分，也可以将二种或其以上的成分组合而使用。
益生元只要可以得到期望的效果即可，具体地可以通过与益生菌的组合使用而没有特别限制。作为益生元，可以举出低聚糖、食物纤维、葡萄糖酸。作为低聚糖，可以举出低聚半乳糖、低聚果糖、低聚木糖、低聚异麦芽糖、棉子糖、乳果糖、乳蔗糖、大豆低聚糖、咖啡低聚糖。
本发明的营养组合物可以对感染性的疾病、病态的对象者作为预防感染用营养组合物、免疫赋活用营养组合物使用。特别是可以作为预防病毒感染用营养组合物使用。
本发明中的预防病毒感染用通常是指，用于发挥抵抗力低的婴幼儿、老年人容易感染的病毒感染的预防或感染防御效果的用途。作为能发挥上述感染防御效果的病毒，可以举出轮状病毒和轮状病毒所属的呼肠孤病毒科的所有病毒、流感病毒、诺如病毒、巨细胞病毒、RS病毒、脊髓灰质炎病毒以及HIV。
本说明书中预防感染是指，在流行期间或预测到流行的期间，通过在感染病毒前摄取本发明的营养组合物，从而可以防止病毒感染的作用、或感染的情况下，可以使症状停留为轻度的作用。
本发明的营养组合物更优选可以用于预防病毒的消化器官感染。作为消化器官能感染的病毒，具体可以举出轮状病毒和诺如病毒。作为本发明的营养组合物的预防感染的作用机制，认为是通过抑制这些病毒与细胞的粘接、具体地抑制与消化器官的细胞的粘接、更具体地抑制与肠道上皮细胞的粘接。另外，抑制病毒感染后的生物体内的病毒的基因复制也认为是预防感染(包含轻症化)的作用机制。
该营养组合物以其有效的量添加，作为防御能力发育不成熟的婴幼儿的育儿用营养组合物、或面向对感染的防御能力降低的老年人的食品或营养组合物，可以形成预防感染用营养组合物。
本发明的另一方式为乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物以及人乳寡糖在制造预防感染用营养组合物中的应用。
本发明的另一方式为含有乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物以及人乳寡糖的营养组合物在预防感染中的应用。
本发明的另一侧面为一种用于预防感染的、含有乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物以及人乳寡糖的营养组合物。
本发明的另一方式为一种预防感染法，其包括如下步骤：将乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物以及人乳寡糖给予至动物。此处，动物没有特别限定，通常为人。
本发明的营养组合物的摄取(给予)时期没有特别限定，可以根据给予对象的状态而适宜选择。
本发明的营养组合物的摄取(给予)量可以根据摄取(给予)对象的年龄、性别、状态、其他条件等而适宜选择。
本发明的营养组合物优选形成饮食品的方式。
作为饮食品，只要不有损本发明的效果就对形态、性状没有特别限制，可以利用通常饮食品中使用的原料根据通常的方法而制造。
需要说明的是，饮食品中添加的添加物的方式也包含于本发明的组合物中。作为上述方式，例如可以举出挤奶后的人乳、配方乳中添加的添加物，设想添加后的乳被新生儿、婴儿摄取。
饮食品通常经经口摄取，但不限定于此，例如可以经鼻摄取、可以由胃瘘、肠瘘摄取。例如，对于新生儿、婴儿，设想由经鼻胃营养管等摄取作为后述的本发明的组合物的婴幼儿用配方乳、添加了本发明的组合物的人乳。
作为饮食品，液态、糊剂状、凝胶状固体、粉末等的形态均可，例如可以举出片剂糖果；流食(经管摄取用营养食品)；面包、通心粉、意大利面、面类、蛋糕混合料、油炸粉、面包粉等小麦粉制品；方便面、杯面、蒸煮/熟食食品、熟食罐头、微波炉用食品、速溶汤/日式炖菜、速溶大酱汤/汤物、罐装浓汤、冻干食物、其它速食品等速食品类；农作物罐头、水果罐头、果酱(jam)/橘子酱(marmalade)类、酱菜、煮豆类、农产品干物类、谷物(谷物加工品)等农产加工品；水产罐头、鱼肉火腿/香肠、水产糜类制品、水产鱼贝类、佃煮类等水产加工品；畜产罐头/糊类、畜肉火腿/香肠等畜产加工品；加工乳、乳饮料、酸奶类、乳酸菌饮料类、乳酪、奶油冰淇淋类、奶油、其它乳制品等乳/乳制品；黄油、人造奶油类、植物油等油脂类；酱油、大酱、沙司(sauce)类、西红柿加工调味剂、味醂类、食醋类等基础调味剂；烹调混合料、咖喱的原料类、酱汁类、沙拉(dressing)类、面汤类、香辛料类、其它复合调味剂等复合调味剂/食品类；原材料冷冻食品、半熟食冷冻食品、经烹调的冷冻食品等冷冻食品；焦糖、糖果、口香糖、巧克力、曲奇(cookie)、饼干(biscuits)、蛋糕(cake)、馅饼(pie)、小吃(snack)、薄脆饼(cracker)、日本点心、米点心、豆点心、西式甜点、果冻、其他点心等点心类；碳酸饮料、天然果汁、果汁饮料、带有果汁的清凉饮料、果肉饮料、带有果粒的果实饮料、蔬菜系饮料、豆奶、豆奶饮料、咖啡饮料、茶饮料、粉末饮料、浓缩饮料、运动饮料、营养饮料、酒精饮料、其他嗜好饮料等嗜好饮料类、婴儿食品、米饭伴侣、茶泡饭海带等其他市售食品等；补充剂、配方乳(包含乳粉、液态乳等)等营养组合物；育儿用补充剂、育儿用配方乳(包含乳粉、液态乳等)等育儿用营养组合物；经肠营养食品；功能性食品(特定保健用食品、营养功能食品)等。
它们之中，优选可以举出育儿用营养组合物。
在日本国育儿用营养组合物是指，以0～12个月的婴儿为对象的婴儿用营养组合物(也称为婴儿用配方乳)、以6～9个月及其以后的婴儿和幼儿(直至6岁)为对象的断奶后的奶粉(也称为幼儿用配方乳)、以出生时的体重低于2500g的新生儿(低出生体重儿)为对象的低出生体重儿用营养组合物(也称为低出生体重儿用配方乳)、具有牛奶过敏、乳糖不耐症等病态的幼儿的治疗中使用的各种治疗用牛奶等。进而，可以将该营养组合物用于保健功能食品、患者用食品。
在日本国外，通常育儿用营养组合物是指，以0～6个月的婴儿为对象的营养组合物(也称为婴儿用配方乳)、以6～12个月的婴儿和1～3岁的幼儿为对象的营养组合物(也称为断奶后的配方食品)、以3～6岁的幼儿为对象的营养组合物(也称为成长型奶粉)、面向出生时体重低于2500g的低出生体重儿的营养组合物(也称为低出生体重儿用配方乳)、具有牛奶过敏、乳糖不耐症等病态的幼儿的治疗中使用的各种治疗用牛奶等。进而，可以将该营养组合物用于保健功能食品、患者用食品。
另外，作为本发明的营养组合物，还可以举出面向妊娠期/哺乳期的母亲的妈妈用牛奶(均衡性良好地配合有妊娠/哺乳期所需的营养的配方乳)、学童期及以后的配方乳、面向成人的配方乳、面向老年人的流食等营养调整食品、营养辅助食品、低磷奶粉等患者用食品(特殊用途食品)。
另外，作为饮食品的一方式，也可以制成饲料。作为饲料，可以举出宠物食品、家畜饲料、养鱼饲料等。
作为饲料的形态，没有特别限制，例如可以含有玉米、小麦、大麦、黑麦、芦粟(milo)等谷类；大豆油渣、菜籽油渣、棕榈油渣、亚麻籽油渣等植物性油渣类；麦麸、麦糠、米糠、脱脂米糠等糠类；玉米蛋白粗粉、玉米浆粗粉等制造糟粕类；鱼粉、脱脂奶粉、乳清、黄色油脂、牛脂等动物性饲料类；圆酵母、啤酒酵母等酵母类；磷酸三钙、碳酸钙等矿物质饲料；油脂类；单体氨基酸；糖类等。
将本发明的营养组合物形成饮食品的方式的情况下，可以用于保健功能食品、特殊用途食品。保健功能食品制度不仅针对通常的食品，而且针对片剂、胶囊等形状的食品为对象，根据内外的动向、与以往特定保健用食品制度的一致性而建立，分为特定保健用食品、功能性标示食品、营养功能食品3种类。特殊用途食品是为了用于病人、婴幼儿、老年人等无法吃通常餐食的人的特殊用途的食品，有：患者用食品(许可基准型、个别评价型)、孕妇/哺乳妇用乳粉、婴儿用配方乳、吞咽困难者用食品。
本发明的组合物为饮食品(包含饲料)的方式的情况下，可以作为标示了预防感染用途的饮食品提供/销售。
上述“标示”行为中包括用于向需求者通知上述用途的全部行为，只要是能唤起/类推前述用途的表现，无论标示的目的、标示的内容、标示的对象物/介质等如何都属于本发明的“标示”行为。
另外，“标示”优选的是通过需求者能直接识别上述用途的表现来进行。具体而言，可列举出：为了转让、交付、用于转让或交付而展示在饮食品的商品或商品的包装上记载了前述用途的物品，在进口行为、涉及商品的广告、价格表或说明书类上将上述用途记载并展示、或进行发布，或在将这些作为内容的信息中记载上述用途并利用电磁(网络等)方法来提供的行为等。
另一方面，作为标示内容，优选为根据行政等许可的标示(例如基于行政规定的各种制度而获得许可，在基于这样的许可的状态下进行的标示等)。另外，优选将这样的标示内容附于包装、容器、目录、小册子、POP(购买点广告，Point of purchase advertising)等销售现场的宣传材料、其它资料等上。
另外，“标示”还可列举出作为健康食品、功能性食品、经肠营养食品、特殊用途食品、保健功能食品、特定保健用食品、营养功能食品、功能性标示食品、药物用准药物等的标示。其中特别是被消费者厅许可的标示、例如可列举出涉及特定保健用食品、营养功能食品、或功能性标示食品的制度、或与这些类似的制度认可的标示等。具体而言，可以列举出作为特定保健用食品的标示、作为带有条件的特定保健用食品的标示、对身体的构造、功能产生影响内容的标示、疾病风险降低标示、基于科学根据的功能性的标示等等，更具体而言，涉及健康增进法中规定的特殊用途标示的许可等的日本内阁府令(日本平成二十一年八月三十一年内阁府令第五十七号)中规定的作为特定保健用食品的标示(特别是保健的用途的标示)和与其类似的标示是典型例。
作为上述标示，例如可以举出标示为“用于预防感染”、“病毒感染对策”、“用于婴幼儿健康”等。
本发明的组合物也可以制成药品的方式，该情况下，其给予路径可以为经口或非经口，均可，优选经口。另外，作为非经口摄取(给予)，可以举出直肠给予等。
作为药品的形态，可以根据给予方法而适宜制剂化为期望的剂型。例如，经口给予的情况下，可以制剂化为散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂等固体制剂；溶液剂、糖浆剂、悬浮剂、乳剂等液体制剂等。另外，非经口给予的情况下，可以制剂化为栓剂、软膏剂、注射剂等。
制剂化时，可以使用通常制剂化中使用的赋形剂、pH调节剂、着色剂、矫味剂等成分。另外，也可以组合使用其他药效成分、公知的或对将来会发现的双歧杆菌属细菌的益生元等。
此外，制剂化可以根据剂型通过公知的方法适宜实施。制剂化时，可以适宜配合制剂载体而制剂化。
作为赋形剂，例如可以举出乳糖、白糖、葡萄糖、甘露糖醇、山梨糖醇等糖衍生物；玉米淀粉、马铃薯淀粉、α-淀粉、糊精、羧甲基淀粉等淀粉衍生物；结晶纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙等纤维素衍生物；阿拉伯胶；葡聚糖；普鲁兰多糖；轻质无水硅酸、合成硅酸铝、偏硅酸铝酸镁等硅酸盐衍生物；磷酸钙等磷酸盐衍生物；碳酸钙等碳酸盐衍生物；硫酸钙等硫酸盐衍生物等。
作为结合剂，除了上述赋形剂之外可列举出例如：明胶；聚乙烯基吡咯烷酮；聚乙二醇等。
作为崩解剂，除了上述赋形剂之外可列举出例如：交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯基吡咯烷酮等经化学修饰的淀粉或纤维素衍生物等。
作为润滑剂，可列举出例如：滑石；硬脂酸；硬脂酸钙、硬脂酸镁等硬脂酸金属盐；胶体二氧化硅；硅酸铝镁盐(Veegum)、鲸蜡等蜡类；硼酸；二元醇；富马酸、己二酸等羧酸类；苯甲酸钠等羧酸钠盐；硫酸钠等硫酸盐类；亮氨酸；月桂基硫酸钠、月桂基硫酸镁等月桂基硫酸盐；硅酸酐、硅酸水合物等硅酸类；淀粉衍生物等。
作为稳定剂，可列举出例如：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯等对羟基苯甲酸酯类；氯丁醇、苄醇、苯基乙醇等醇类；苯扎氯铵；乙酸酐；山梨酸等。
作为矫味矫臭剂，例如可列举出：甜味剂、酸味剂、香料等。
需要说明的是，作为经口给予用的液体制剂的情况下使用的载体，可以举出水等溶剂等。
实施例
以下，利用实施例对本发明进一步具体地进行说明，但本发明不限定于这些实施例。
[实施例1]由乳铁蛋白、人乳寡糖或它们的组合发挥的、对猴/轮状病毒的抗病毒作用的研究
为了评价基于乳铁蛋白、人乳寡糖、或它们的组合的、对轮状病毒的抗病毒作用，进行了以下的实验。
对于在Minimum essential medium(极限必需培养基)(Sigma-Aldrich公司,以下，培养基)中维持的非洲猴肾脏来源的MA104细胞(Sigma-Aldrich公司)，接种猴/轮状病毒SA11株(株式会社日本Bio Research Center)。猴/轮状病毒SA11株例如可以由AmericanType Culture Collection(ATCC)作为ATCC VR-1565获得。在培养基中，预先分别以以下的浓度、单独添加或组合添加乳铁蛋白(LF)和以下所示的人乳寡糖(n＝3)。
LF(森永乳业株式会社制)：0、0.1、或1.0mg/mL
2’-岩藻糖基乳糖(2’-FL、Funakoshi)：0、0.1，0.5、或2.5mg/mL
3-岩藻糖基乳糖(3-FL、Funakoshi)：0、0.1、或0.5mg/mL
3’-唾液酸乳糖(3’-SL、Funakoshi)：0、0.1、或0.5mg/mL
6’-唾液酸乳糖(6’-SL、Funakoshi)：0、0.1、或0.5mg/mL
人乳寡糖(混合物)(HMO mix：2’-FL(2.5mg/mL)、3-FL(0.5mg/mL)、3’-SL(0.25mg/mL)和6’-SL(0.5mg/mL)的混合物)
需要说明的是，1.0mg/mL换算为质量百分率时为0.1质量％。
感染的程度的评价根据细胞感染病毒而产生的“噬斑”的计数来进行。具体而言，将均未添加乳铁蛋白和人乳寡糖时的噬斑发生数与添加时的噬斑发生数比较，从而算出的噬斑抑制率(％)作为感染抑制率(％)，评价乳铁蛋白和人乳寡糖的抗病毒效果。
将结果示于图1～7。
如图1所示，对于感染抑制率，单独使用0.1mg/mL的LF时为8.7％，单独使用0.1mg/mL的2’-FL时为1.2％，而组合使用0.1mg/mL的LF与0.1mg/mL的2’-FL时为15％。
如图2所示，对于感染抑制率，单独使用0.1mg/mL的LF时为8.7％，单独使用0.1mg/mL的3-FL时为6.6％，而组合使用0.1mg/mL的LF与0.1mg/mL的3-FL时为20％。
如图3所示，对于感染抑制率，单独使用0.1mg/mL的LF时为8.7％，单独使用0.5mg/mL的3-FL时为21％，组合使用0.1mg/mL的LF与0.5mg/mL的3-FL时为32％。
如图4所示，单独使用0.1mg/mL的LF时为8.7％，单独使用0.5mg/mL的3’-SL时为33％，而组合使用0.1mg/mL的LF与0.5mg/mL的3’-SL时为41％。
如图5所示，对于感染抑制率，单独使用0.1mg/mL的LF时为8.7％，单独使用0.1mg/mL的6’-SL时为4.5％，而组合使用0.1mg/mL的LF与0.1mg/mL的6’-SL时为14％。
如图6所示，对于感染抑制率，单独使用0.1mg/mL的LF时为8.7％，单独使用0.5mg/mL的6’-SL时为23％，而组合使用0.1mg/mL的LF与0.5mg/mL的6’-SL时为30％。
如图7所示，对于感染抑制率，单独使用0.1mg/mL的LF时为8.7％，单独使用HMOmix时为37％，而组合使用0.1mg/mL的LF与HMO mix时为46％。另外，单独使用1.0mg/mL的LF时为39％，而组合使用1.0mg/mL的LF与HMO mix时为60％。
根据以上，组合并添加乳铁蛋白与人乳寡糖时，与单独添加乳铁蛋白或人乳寡糖的情况相比，体现高的噬斑抑制率(感染抑制率)。由此确认了，通过组合乳铁蛋白与人乳寡糖，从而对轮状病毒可以发挥协同或相加的抗病毒作用。
[制造例1]
将在水中同时溶解有乳铁蛋白(森永乳业株式会社制)和人乳寡糖者供于冻干，得到乳铁蛋白/人乳寡糖混合物的冻干粉末。将粉末与乳清蛋白质浓缩物(Whey proteinconcentrate；WPC,森永乳业株式会社制)均匀混合，得到组合物。使该组合物20g溶解于200g的水，得到用于预防感染病毒的营养组合物。
将如上述得到的营养组合物给予至对象者，从而可以预防对象者感染病毒。
[制造例2]
将在水中同时溶解有乳铁蛋白(森永乳业株式会社制)和人乳寡糖者供于冻干，得到乳铁蛋白/人乳寡糖混合物的冻干粉末。将粉末与乳蛋白浓缩物的干燥粉末(MPC480、Fonterra公司制、蛋白质含量80质量％、酪蛋白蛋白质：乳清蛋白质＝约8：2)均匀混合，得到组合物。使该组合物20g溶解于200g的水，得到用于预防感染病毒的营养组合物。
将如上述得到的营养组合物给予至对象者，从而可以预防对象者感染病毒。
[制造例3]
将在水中同时溶解有乳铁蛋白(森永乳业株式会社制)和人乳寡糖者供于冻干，得到乳铁蛋白/人乳寡糖混合物的冻干粉末。接着，在搅拌造粒机中投入结晶纤维素并混合。之后，加入纯化水进行造粒，使造粒物干燥，得到含有乳铁蛋白和人乳寡糖、且含有赋形剂而成的经造粒的营养组合物。
将如上述得到的营养组合物给予至对象者，从而可以预防对象者感染病毒。
[制造例4]
下述示出添加了乳铁蛋白和人乳寡糖的发酵乳的制造法。
首先，将乳原料、乳铁蛋白(森永乳业株式会社制)、人乳寡糖和根据需要的水、其他成分等混合，优选进行均质化处理，进行加热杀菌处理。均质化处理和加热杀菌处理可以通过常规方法而进行。在经加热杀菌的杀菌配方乳液中添加(接种)乳酸菌促酵剂，保持为规定的发酵温度，使其发酵，得到发酵物。通过发酵形成凝乳。
作为乳酸菌促酵剂，例如可以使用保加利亚乳杆菌(Lactobacillusbulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)等酸奶制造中通常使用的乳酸菌。pH达到目标值后，将所形成的凝乳通过搅拌破碎，冷却至10℃以下，得到发酵乳。冷却至10℃以下，从而使乳酸菌的活性降低，可以抑制酸的生成。
进一步以以下的方法得到浓缩发酵乳。浓缩工序可以适宜使用公知的浓缩方法而进行。例如可以利用离心分离法或膜分离法。离心分离法中，被浓缩物(添加了乳铁蛋白和人乳寡糖的发酵物)中的乳清被去除，得到固体成分浓度得到提高的带乳铁蛋白和人乳寡糖的浓缩发酵乳。
可以制造如上述得到的本技术的包含乳铁蛋白和人乳寡糖的发酵乳。
将如上述得到的发酵乳给予至对象者，从而可以预防对象者感染病毒。
[制造例5]
下述示出添加了乳铁蛋白和人乳寡糖的营养组合物的制造法。
使脱盐牛奶乳清蛋白质粉末(Future Inc.制)10kg、牛奶酪蛋白粉末(Fonterra公司制)6kg、乳糖(Future Inc.制)48kg、矿物混合物(富田制药株式会社制)920g、维生素混合物(田边制药株式会社制)32g、乳铁蛋白(森永乳业株式会社制)17-690g和人乳寡糖68-1698g溶解于温水300kg，进一步以90℃加热溶解10分钟，添加调制脂肪(太阳油脂株式会社制)28kg而均质化。之后，进行杀菌、浓缩的工序，喷雾干燥，调制乳铁蛋白/人乳寡糖配合营养组合物约95kg。使得到的营养组合物溶解于水，制成为标准配方乳浓度的总固体成分浓度14％(w/V)的配方乳液时，配方乳液中的乳铁蛋白浓度和人乳寡糖浓度分别成为0.025～1mg/mL和0.1～5mg/mL。将如上述得到的营养组合物给予至婴幼儿，从而可以预防该婴幼儿感染病毒。
[制造例6]
使乳铁蛋白(森永乳业株式会社制)溶解于纯化水使其成为5质量％，用盐酸溶液调整pH为3，调制乳铁蛋白溶液。将调制好的乳铁蛋白溶液加热至45℃，然后添加相对于乳铁蛋白的质量为3％的Calf Rennet(RENCO公司制、含有凝乳酶92质量％、胃蛋白酶8质量％)，边搅拌边反应24小时，进行水解。
水解结束后，将反应液加热至80℃，保温10分钟，使酶失活。
将反应液冰冷后，添加氢氧化钠溶液，调整反应液的pH为6，之后将反应液冻干，制造乳铁蛋白水解物粉末。
将在水中同时溶解有得到的乳铁蛋白水解物粉末和人乳寡糖者供于冻干，得到乳铁蛋白水解物/人乳寡糖混合物的冻干粉末。将粉末与乳清蛋白质浓缩物(Whey proteinconcentrate；WPC,森永乳业株式会社制)均匀混合，得到组合物。使该组合物20g溶解于200g的水，得到用于预防感染病毒的营养组合物。
将如上述得到的营养组合物给予至对象者，从而可以预防对象者感染病毒。
[制造例7]
进行与前述制造例6的乳铁蛋白水解物粉末的制造方法同样的方法，制造乳铁蛋白水解物粉末。
使脱盐牛奶乳清蛋白质粉末(Future Inc.制)10kg、牛奶酪蛋白粉末(Fonterra公司制)6kg、乳糖(Future Inc.制)48kg、矿物混合物(富田制药株式会社制)920g、维生素混合物(田边制药株式会社制)32g、得到的乳铁蛋白水解物17-690g和人乳寡糖68-1698g溶解于温水300kg，进一步以90℃加热溶解10分钟，添加调制脂肪(太阳油脂株式会社制)28kg而均质化。之后，进行杀菌、浓缩的工序，喷雾干燥，调制乳铁蛋白水解物/人乳寡糖配合营养组合物约95kg。使得到的营养组合物溶解于水，制成为标准配方乳浓度的总固体成分浓度14％(w/V)的配方乳液时，配方乳液中的乳铁蛋白水解物浓度和人乳寡糖浓度分别成为0.025～1mg/mL和0.1～5mg/mL。
将如上述得到的营养组合物给予至婴幼儿，从而可以预防该婴幼儿感染病毒。
PCT/RO/134表
Figure QDA0003385775420000011
Figure QDA0003385775420000021
Figure QDA0003385775420000031
Figure QDA0003385775420000041

Claims (10)

1.一种营养组合物，其含有乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物、且含有人乳寡糖。
2.根据权利要求1所述的营养组合物，其中，人乳寡糖相对于乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物的质量比为1/100以上且100以下。
3.根据权利要求1或2所述的营养组合物，其中，乳铁蛋白和/或乳铁蛋白水解物相对于组合物整体的含量为0.001～5.0质量％。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的营养组合物，其中，人乳寡糖相对于组合物整体的含量为0.001～10.0质量％。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的营养组合物，其中，人乳寡糖包含选自由2’-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖、3’-唾液酸乳糖、6’-唾液酸乳糖组成的组中的一种或二种以上。
6.根据权利要求1～5中任一项所述的营养组合物，其用于预防感染用途。
7.根据权利要求6所述的营养组合物，其用于预防消化器官感染用途。
8.根据权利要求1～7中任一项所述的营养组合物，其为配方奶粉。
9.根据权利要求1～7中任一项所述的营养组合物，其为配方液态奶。
10.根据权利要求1～9中任一项所述的营养组合物，其被给予婴幼儿或老年人。
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