CN113957049A - 一种人类γδT细胞培养方法 - Google Patents
一种人类γδT细胞培养方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113957049A CN113957049A CN202111313814.7A CN202111313814A CN113957049A CN 113957049 A CN113957049 A CN 113957049A CN 202111313814 A CN202111313814 A CN 202111313814A CN 113957049 A CN113957049 A CN 113957049A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- culture medium
- cells
- cell
- plasma
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/23—Interleukins [IL]
- C12N2501/2302—Interleukin-2 (IL-2)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2509/00—Methods for the dissociation of cells, e.g. specific use of enzymes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明属于医学生物工程领域，具体的说是一种人类γδT细胞培养方法，其培养方法包括以下步骤：S1：血液分离，将血液采集至肝素钠采血管，之后离心分离，使血液分为4层，其由血浆层、单个核细胞层、分离液层和红细胞层构成；S2：灭活自体血浆，用移液管采集上层的血浆，加热血浆，之后离心分离，然后用吸管将上清液采集至新的离心管，低温保存；S3：制备PBMC，用移液管将第二层单个核细胞收集至新的离心管，本发明通过上述方案，以此实现对人类γδT细胞进行体外扩增培养，解决了γδT细胞的扩增能力差，难以进行扩增的问题，从而促进γδT细胞疗法的应用。
Description
技术领域
本发明涉及医学生物工程领域，具体是一种人类γδT细胞培养方法。
背景技术
Lymactin-γδT抗体用于特异活化γδT细胞，是一种外源性非肽类抗原，配制后呈无色澄清液体，Lymactin-γδT抗体刺激活化Vγ9Vδ2T细胞，上调γδT细胞穿孔素、颗粒酶的表达，活化γδT细胞的细胞毒性功能。
γδT细胞是一种能杀伤癌细胞，肿瘤干细胞的免疫细胞，其被用于γδT细胞疗法，进行癌症治疗，但是γδT细胞的扩增能力差，难以进行扩增，从而影响γδT细胞疗法的应用；因此，针对上述问题提出一种人类γδT细胞培养方法。
发明内容
为了弥补现有技术的不足，解决背景技术中所提出的至少一个技术问题。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：本发明所述的一种人类γδT细胞培养方法，其培养方法包括以下步骤：
S1：血液分离，将血液采集至肝素钠采血管，之后离心分离，使血液分为4层，其由血浆层、单个核细胞层、分离液层和红细胞层构成；
S2：灭活自体血浆，用移液管采集上层的血浆，加热血浆，之后离心分离，然后用吸管将上清液采集至新的离心管，低温保存；
S3：制备PBMC，用移液管将第二层单个核细胞收集至新的离心管，加入DPBS35ml稀释细胞悬液，离心，移除上清液，重复上一步骤洗涤细胞3次，最后一次混匀后取100ul悬液细胞计数，余下悬液离心；
S4：γδT细胞诱导扩增，加入20ml含有10％自体灭活血浆的ALyS505N-1000培养基及1ml的Lymactin-γδT，使细胞密度≥1.5x106cells/ml，重新悬浮PBMC，加入T75cm2培养瓶，置于5％CO2、37℃培养，后续按照培养流程培养14天；
S5：细胞收集，扩大培养成功后取样检测细胞表型、真菌、细菌、支原体、内毒素指标，收集培养后的细胞，将细胞悬浮液从培养袋转入离心瓶，离心，弃去细胞上清液，用含有0.1％人类血清蛋白的生理盐水悬浮细胞，收集到一个离心瓶中，重复离心，清洗细胞3次，通过一次性细胞筛过滤，收集并注入含有1％人类血清蛋白的生理盐水中。
优选的，S1中在离心时，向两支装有15ml淋巴细胞分离液的离心管上，分别倒入20-30ml血液，然后室温下，800xg离心20分钟，慢升慢降。
优选的，S1中在离心时，若血液储存超过2小时，需要将离心时间增至30分钟。
优选的，S2中在离心前，55-57℃加热血浆30分钟，然后室温下，1200xg离心10分钟，最后将上清液4℃保存。
优选的，S3中在稀释细胞悬液后，以500xg离心10分钟，在细胞计数后，余下悬液500xg离心10min。
优选的，S4中培养流程为：
第0天，培养载体为培养瓶T75，培养基为505N-1000和Lymactin-γδT，血浆浓度为10％，添加20ml的培养基，培养基总量20ml，使细胞密度≥1.5x106cells/ml，置于5％CO2、37℃培养3天；
第3天，培养载体为培养瓶T75，培养基为505N-1000，添加20ml的培养基，培养基总量40ml；
第5天，培养载体为培养瓶T225，培养基为505N-1000，血浆浓度为10％，添加60ml的培养基，培养基总量100ml；
第7天，培养载体为培养瓶T225，培养基为505N-1000，血浆浓度为10％，添加200ml的培养基，培养基总量300ml；
第9天，将细胞悬浮液转移至两个培养袋内进行培养，培养载体为培养袋A-1000N，培养基为505N-1000，添加700ml的培养基，培养基总量500/Bag；
第11天，培养载体为培养袋A-1000N，培养基为505N-1000，添加1000ml的培养基，培养基总量1000/Bag；
第14天，培养载体为培养袋A-1000N，进行细胞收集。
优选的，S4中ALyS505N-1000培养基配制方法为ALyS505N-0中添加IL-2，使其培养基含IL-2终浓度为1000IU/ml，得到ALyS505N-1000。
优选的，S5中在离心时，以680xg离心10分钟。
优选的，培养基在添加前，需要将培养基复温至37℃，以此减少温度差异对细胞扩增的影响。
本发明的有益之处在于：
本发明通过上述方案，以此实现对人类γδT细胞进行体外扩增培养，解决了γδT细胞的扩增能力差，难以进行扩增的问题，从而促进γδT细胞疗法的应用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
图1为本发明中人类γδT细胞培养方法流程图；
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1，一种人类γδT细胞培养方法，其培养方法包括以下步骤：
S1：血液分离，将血液采集至肝素钠采血管，之后离心分离，使血液分为4层，其由血浆层、单个核细胞层、分离液层和红细胞层构成；
S2：灭活自体血浆，用移液管采集上层的血浆，加热血浆，之后离心分离，然后用吸管将上清液采集至新的离心管，低温保存；
S3：制备PBMC，用移液管将第二层单个核细胞收集至新的离心管，加入DPBS35ml稀释细胞悬液，离心，移除上清液，重复上一步骤洗涤细胞3次，最后一次混匀后取100ul悬液细胞计数，余下悬液离心；
S4：γδT细胞诱导扩增，加入20ml含有10％自体灭活血浆的ALyS505N-1000培养基及1ml的Lymactin-γδT，使细胞密度≥1.5x106cells/ml，重新悬浮PBMC，加入T75cm2培养瓶，置于5％CO2、37℃培养，后续按照培养流程培养14天；
S5：细胞收集，扩大培养成功后取样检测细胞表型、真菌、细菌、支原体、内毒素指标，收集培养后的细胞，将细胞悬浮液从培养袋转入离心瓶，离心，弃去细胞上清液，用含有0.1％人类血清蛋白的生理盐水悬浮细胞，收集到一个离心瓶中，重复离心，清洗细胞3次，通过一次性细胞筛过滤，收集并注入含有1％人类血清蛋白的生理盐水中；
通过上述方案，以此实现对人类γδT细胞进行体外扩增培养，从而促进γδT细胞疗法的应用，抗凝剂为肝素钠的采血管，其他抗凝剂对本方案有较大影响，悬浮培养瓶或非TC处理培养瓶。
培养流程表
作为本发明的一种具体实施方式，S1中在离心时，向两支装有15ml淋巴细胞分离液的离心管上，分别倒入20-30ml血液，然后室温下，800xg离心20分钟，慢升慢降；以此使血液进行分离，便于后续进行吸取培养，γδT细胞自行增殖时，根据需要进行选择特定的体外γδT细胞生长进剂。
作为本发明的一种具体实施方式，S1中在离心时，若血液储存超过2小时，需要将离心时间增至30分钟。
作为本发明的一种具体实施方式，S2中在离心前，55-57℃加热血浆30分钟，然后室温下，1200xg离心10分钟，最后将上清液4℃保存。
作为本发明的一种具体实施方式，S3中在稀释细胞悬液后，以500xg离心10分钟，在细胞计数后，余下悬液500xg离心10min。
作为本发明的一种具体实施方式，S4中培养流程为：
第0天，培养载体为培养瓶T75，培养基为505N-1000和Lymactin-γδT，血浆浓度为10％，添加20ml的培养基，培养基总量20ml，使细胞密度≥1.5x106cells/ml，置于5％CO2、37℃培养3天；
第3天，培养载体为培养瓶T75，培养基为505N-1000，添加20ml的培养基，培养基总量40ml；
第5天，培养载体为培养瓶T225，培养基为505N-1000，血浆浓度为10％，添加60ml的培养基，培养基总量100ml；
第7天，培养载体为培养瓶T225，培养基为505N-1000，血浆浓度为10％，添加200ml的培养基，培养基总量300ml；
第9天，将细胞悬浮液转移至两个培养袋内进行培养，培养载体为培养袋A-1000N，培养基为505N-1000，添加700ml的培养基，培养基总量500/Bag；
第11天，培养载体为培养袋A-1000N，培养基为505N-1000，添加1000ml的培养基，培养基总量1000/Bag；
第14天，培养载体为培养袋A-1000N，进行细胞收集；
通过上述培养流程，以此对人类γδT细胞进行体外扩增，促进γδT细胞疗法的应用，第0天为培养的初始天数，记为第0天。
作为本发明的一种具体实施方式，S4中ALyS505N-1000培养基配制方法为ALyS505N-0中添加IL-2，使其培养基含IL-2终浓度为1000IU/ml，得到ALyS505N-1000，以此制备出ALyS505N-1000，使人类γδT细胞在此基础上进行扩增。
作为本发明的一种具体实施方式，S5中在离心时，以680xg离心10分钟；以此从细胞悬浮液中分离出人类γδT细胞，便于后续进行细胞的过滤收集。
作为本发明的一种具体实施方式，培养基在添加前，需要将培养基复温至37℃；以此减少温度的差异对人类γδT细胞扩增的影响。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。
Claims (9)
1.一种人类γδT细胞培养方法，其特征在于：其培养方法包括以下步骤：
S1：血液分离，将血液采集至肝素钠采血管，之后离心分离，使血液分为4层，其由血浆层、单个核细胞层、分离液层和红细胞层构成；
S2：灭活自体血浆，用移液管采集上层的血浆，加热血浆，之后离心分离，然后用吸管将上清液采集至新的离心管，低温保存；
S3：制备PBMC，用移液管将第二层单个核细胞收集至新的离心管，加入DPBS35ml稀释细胞悬液，离心，移除上清液，重复上一步骤洗涤细胞3次，最后一次混匀后取100ul悬液细胞计数，余下悬液离心；
S4：γδT细胞诱导扩增，加入20ml含有10％自体灭活血浆的ALyS505N-1000培养基及1ml的Lymactin-γδT，使细胞密度≥1.5x106cells/ml，重新悬浮PBMC，加入T75cm2培养瓶，置于5％CO2、37℃培养，后续按照培养流程培养14天；
S5：细胞收集，扩大培养成功后取样检测细胞表型、真菌、细菌、支原体、内毒素指标，收集培养后的细胞，将细胞悬浮液从培养袋转入离心瓶，离心，弃去细胞上清液，用含有0.1％人类血清蛋白的生理盐水悬浮细胞，收集到一个离心瓶中，重复离心，清洗细胞3次，通过一次性细胞筛过滤，收集并注入含有1％人类血清蛋白的生理盐水中。
2.根据权利要求1所述的一种人类γδT细胞培养方法，其特征在于：S1中在离心时，向两支装有15ml淋巴细胞分离液的离心管上，分别倒入20-30ml血液，然后室温下，800xg离心20分钟，慢升慢降。
3.根据权利要求2所述的一种人类γδT细胞培养方法，其特征在于：S1中在离心时，若血液储存超过2小时，需要将离心时间增至30分钟。
4.根据权利要求3所述的一种人类γδT细胞培养方法，其特征在于：S2中在离心前，55-57℃加热血浆30分钟，然后室温下，1200xg离心10分钟，最后将上清液4℃保存。
5.根据权利要求4所述的一种人类γδT细胞培养方法，其特征在于：S3中在稀释细胞悬液后，以500xg离心10分钟，在细胞计数后，余下悬液500xg离心10min。
6.根据权利要求5所述的一种人类γδT细胞培养方法，其特征在于：S4中培养流程为：
第0天，培养载体为培养瓶T75，培养基为505N-1000和Lymactin-γδT，血浆浓度为10％，添加20ml的培养基，培养基总量20ml，使细胞密度≥1.5x106cells/ml，置于5％CO2、37℃培养3天；
第3天，培养载体为培养瓶T75，培养基为505N-1000，添加20ml的培养基，培养基总量40ml；
第5天，培养载体为培养瓶T225，培养基为505N-1000，血浆浓度为10％，添加60ml的培养基，培养基总量100ml；
第7天，培养载体为培养瓶T225，培养基为505N-1000，血浆浓度为10％，添加200ml的培养基，培养基总量300ml；
第9天，将细胞悬浮液转移至两个培养袋内进行培养，培养载体为培养袋A-1000N，培养基为505N-1000，添加700ml的培养基，培养基总量500/Bag；
第11天，培养载体为培养袋A-1000N，培养基为505N-1000，添加1000ml的培养基，培养基总量1000/Bag；
第14天，培养载体为培养袋A-1000N，进行细胞收集。
7.根据权利要求1所述的一种人类γδT细胞培养方法，其特征在于：S4中ALyS505N-1000培养基配制方法为ALyS505N-0中添加IL-2，使其培养基含IL-2终浓度为1000IU/ml，得到ALyS505N-1000。
8.根据权利要求1所述的一种人类γδT细胞培养方法，其特征在于：S5中在离心时，以680xg离心10分钟。
9.根据权利要求7所述的一种人类γδT细胞培养方法，其特征在于：培养基在添加前，需要将培养基复温至37℃。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111313814.7A CN113957049A (zh) | 2021-11-08 | 2021-11-08 | 一种人类γδT细胞培养方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111313814.7A CN113957049A (zh) | 2021-11-08 | 2021-11-08 | 一种人类γδT细胞培养方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113957049A true CN113957049A (zh) | 2022-01-21 |
Family
ID=79469737
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111313814.7A Pending CN113957049A (zh) | 2021-11-08 | 2021-11-08 | 一种人类γδT细胞培养方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113957049A (zh) |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008023786A1 (fr) * | 2006-08-25 | 2008-02-28 | Medical & Biological Laboratories Co., Ltd. | Procédé destiné à produire des lct virus-spécifiques |
| US20170240859A1 (en) * | 2014-10-14 | 2017-08-24 | St. Marianna University School Of Medicine | Method for producing gamma delta t cells, and pharmaceutical thereof |
| CN107177549A (zh) * | 2017-06-29 | 2017-09-19 | 青岛麦迪赛斯医疗技术有限公司 | 一种简单高效的扩增γδT细胞的方法 |
| CN108103019A (zh) * | 2017-12-18 | 2018-06-01 | 邹畅 | 一种肿瘤特异性γδT细胞的制备方法 |
| CN110272871A (zh) * | 2019-05-16 | 2019-09-24 | 安徽瑞达健康产业有限公司 | 一种刺激诱导单个核细胞扩增为γδT细胞的组合物及其应用 |
| CN111718901A (zh) * | 2020-06-19 | 2020-09-29 | 珠海贝索细胞科学技术有限公司 | 一种高活性t细胞体外培养试剂盒及培养方法 |
| CN112831470A (zh) * | 2021-03-25 | 2021-05-25 | 广东南芯医疗科技有限公司 | 一种γδT细胞的体外培养方法 |
-
2021
- 2021-11-08 CN CN202111313814.7A patent/CN113957049A/zh active Pending
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008023786A1 (fr) * | 2006-08-25 | 2008-02-28 | Medical & Biological Laboratories Co., Ltd. | Procédé destiné à produire des lct virus-spécifiques |
| US20170240859A1 (en) * | 2014-10-14 | 2017-08-24 | St. Marianna University School Of Medicine | Method for producing gamma delta t cells, and pharmaceutical thereof |
| CN107177549A (zh) * | 2017-06-29 | 2017-09-19 | 青岛麦迪赛斯医疗技术有限公司 | 一种简单高效的扩增γδT细胞的方法 |
| CN108103019A (zh) * | 2017-12-18 | 2018-06-01 | 邹畅 | 一种肿瘤特异性γδT细胞的制备方法 |
| CN110272871A (zh) * | 2019-05-16 | 2019-09-24 | 安徽瑞达健康产业有限公司 | 一种刺激诱导单个核细胞扩增为γδT细胞的组合物及其应用 |
| CN111718901A (zh) * | 2020-06-19 | 2020-09-29 | 珠海贝索细胞科学技术有限公司 | 一种高活性t细胞体外培养试剂盒及培养方法 |
| CN112831470A (zh) * | 2021-03-25 | 2021-05-25 | 广东南芯医疗科技有限公司 | 一种γδT细胞的体外培养方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 周雅莹 等: "流式细胞技术和CCK-8 法检测γδ T 细胞活性的比较", 现代肿瘤医学, vol. 26, no. 18, pages 2824 * |
| 珠海贝索细胞科学技术有限公司: "Lymactin-γδT抗体", pages 1 - 2, Retrieved from the Internet <URL:http://www.csbaso.com/DownLoad/69761.html> * |
| 郭吉楠 等: "比较不同磷酸抗原体外扩增前列腺癌患者外周血γδT细胞的效率", 现代肿瘤医学, vol. 25, no. 14, pages 2196 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109628397B (zh) | 一种nk细胞体外扩增培养的方法 | |
| CN108251365B (zh) | 免疫细胞培养基体系 | |
| CN111454903B (zh) | 免疫细胞体外培养、诱导、激活、冻存方法及其细胞库建立 | |
| CN114134114B (zh) | 从胎盘组织中扩增自然杀伤细胞的方法 | |
| CN105821483A (zh) | 一种人干性记忆t细胞库的构建方法 | |
| CN111394309A (zh) | 一种nk细胞体外扩增培养的方法 | |
| CN106754704B (zh) | 免疫细胞体外诱导扩增的方法 | |
| CN114075546A (zh) | 一种nk细胞扩增组合物及体外扩增培养方法 | |
| CN108841790B (zh) | 一种胎盘来源的单个核细胞诱导cik细胞的方法 | |
| CN106635769A (zh) | 细胞分离装置以及细胞分离方法 | |
| CN113061576A (zh) | 一种免疫细胞nk的冻存液及其活性研究方法 | |
| CN111548994B (zh) | 一种细胞培养基及其培养nk细胞的方法 | |
| CN110938595B (zh) | 一种高效体外培养脐血cik细胞的培养基及培养方法 | |
| CN110862962A (zh) | 一种没食子酸在体外培养扩增nk细胞的方法 | |
| CN113957049A (zh) | 一种人类γδT细胞培养方法 | |
| CN115340981A (zh) | 用于脐带血cd34阳性造血干细胞体外扩增的培养基 | |
| CN115537389A (zh) | 具有炎症调控功能的脐带间充质干细胞源外泌体的制法 | |
| CN115558638A (zh) | 胎盘间充质干细胞制备的外泌体及其用途 | |
| CN110747167B (zh) | 一种半合子bak细胞的制备方法及其应用 | |
| CN114807031A (zh) | 一种人外周血免疫细胞库和干细胞库的构建方法 | |
| CA2717038C (en) | Methods for inducing the differentiation of blood monocytes into functional dendritic cells | |
| CN111849897B (zh) | 一种细胞因子诱导杀伤细胞的体外活化方法 | |
| CN111778212B (zh) | 动员后造血干细胞血浆外泌体制备方法及其应用 | |
| CN114480279A (zh) | 一种高效的人类血液免疫细胞cd4t分离培养技术 | |
| CN113881633B (zh) | 一种脐带血造血干细胞体外干性扩增的培养基及方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |